WB01-VC测定方法(精)
Vc检测方法
维生素C又叫抗坏血酸(Ascorbicid)，广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜中含量较多。
是一种水溶性小分子生物活性物质，也是人体需要量最大的一种维生素。
维生素C具有还原性(其结构式如图1)，可以与许多氧化剂发生氧化还原反应，因此可以利用其还原性测定维生素C的含量。
目前食品中测定维生素C含量的方法主要有碘量法，是利用维生素C的氧化还原性为基础的一种氧化还原方法。
冈其酸度不易把握，碘需要标定且易挥发，而Vc不易稳定保存，使测定结果易出现偏差，且这种方法不适合微量分析；国标GB/T6195-1986是采用2,6一二氯靛酚滴定法。
利用样品溶液由蓝色转变为粉红色来辨别其滴定终点的到达。
但是多数水果、蔬菜样品其提取液都具有一定的色泽而导致滴定终点不明显，使测定准确度降低。
另外还有荧光光谱分析法J、紫外一可见分光度法、色谱法、电化学法等，这些方法都存在着一定的局限性，如操作过程复杂，所用试剂不稳定，速度慢、背景¨干扰大。
近年来，建立的测定Vc的其他方法还有催化动力学和光度法相结合的方法，及VC传感器测定方法，固定pH滴定法等。
该论文将对蔬菜、水果常用的维生素C含量的检测方法进行综述、比较。
图1 维生素C的结构式1原子吸收分光光度法利用原子吸收分光光度法问接测定维生素C的含量，是利用维生素C可以与一些金属离子发生氧化还原反应，通过测定反应掉的金属离子的量，进而间接计算出维生素c的含量。
1.1以银离子作为氧化剂的间接原子吸收分光光度法以银离子作为氧化剂的间接原子吸收分光光度法，是利用维生素C分子中的有二烯醇基具强还原性，可被硝酸银氧化为去氢维生素C，同时产生黑色银沉淀(反应式如图2)。
图2维生素C与银离子反应的反应式沉淀经离心分离后，将分离得到的沉淀用硝酸溶解后，再利用原子吸收分光光度计测定银离子的含量，从而接测得维生素C含量，具体测定方法如下：配制一系列浓度的维生素C标准溶液，依次吸取一定量的维生素C标准溶液置于10mL离心管中，分别加入2mL(1mg/mL) Ag+标准溶液，然后加水使总体积为4mL，摇匀，在室温下避光放置35min离心分离弃去上清液，用2mL超纯水洗涤沉淀3次，然后用l:1的浓硝酸3mL溶解沉淀，移入50mL的容量瓶中，加水稀释至刻度。
vc片中维生素c的测定
VC片中维生素C的测定1. 引言维生素C，也称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素。
它在人体内具有许多重要的功能，包括抗氧化、参与胶原蛋白合成和免疫调节等。
准确测定VC片中维生素C的含量对于保证产品质量和满足消费者需求至关重要。
本文将介绍一种常用的方法——碘滴定法来测定VC片中维生素C的含量。
该方法基于VC与碘溶液反应生成碘化物的化学反应，通过测定反应前后溶液中未反应的碘量来计算VC含量。
2. 实验步骤2.1 材料准备•VC片样品•碘标准溶液•淀粉指示剂•硫酸•蒸馏水•称量瓶、容量瓶、烧杯等实验器具2.2 碘滴定法测定步骤步骤1：制备标准曲线1.准备一系列不同浓度的VC标准溶液。
2.取一定体积的VC标准溶液，加入烧杯中。
3.加入适量的碘标准溶液，使反应完全。
4.加入淀粉指示剂，继续滴定至溶液呈现蓝黑色。
5.记录滴定所需的碘标准溶液体积。
步骤2：测定样品1.取一定质量的VC片样品，加入称量瓶中。
2.加入适量蒸馏水，使VC片完全溶解。
3.加入硫酸，使样品酸化。
4.将样品转移至容量瓶中，并用蒸馏水稀释到刻度线处。
5.取一定体积的稀释后的样品溶液，加入烧杯中。
6.加入适量的碘标准溶液，使反应完全。
7.加入淀粉指示剂，继续滴定至溶液呈现蓝黑色。
8.记录滴定所需的碘标准溶液体积。
3. 数据处理与结果分析3.1 标准曲线绘制根据步骤2中制备的标准曲线数据（VC标准溶液浓度与滴定所需的碘标准溶液体积），绘制标准曲线图。
横坐标为VC标准溶液浓度，纵坐标为滴定所需的碘标准溶液体积。
3.2 样品测定结果计算根据步骤2中测定样品时记录的滴定所需的碘标准溶液体积，结合标准曲线，计算出样品中维生素C的含量。
3.3 结果分析将样品测定结果与产品规格要求进行比较，评估样品是否符合要求。
如果样品中维生素C的含量低于规定范围，则可能需要调整生产工艺或增加添加量。
4. 实验注意事项1.实验过程中应注意安全操作，避免接触皮肤和吸入有害气体。
WB01牛奶中营养物质的快速检测-微课脚本(精)
的？在开始学习今天的内容前，让我们先来做一个小测验。
3.交互-1 我国国家标准规定生乳的蛋白质含量不得低于（）g/100gA 2.0B 2.3C 2.8 C 3.0参考答案：C 4.交互-2 牛奶能补钙这句话是有科学道理的参考答案：正确5.动画【小精灵】原来你并不清楚牛奶中营养物质的基础知识！快跟我一起去问问老师吧！如果问题一和问题二都答对了，点击确定按钮，可以直接跳到12,如果问题一和问题二有一个答错了或者都答错了，则出现小精灵和老师的对话。
6.动画【小精灵】老师，人们选择喝牛奶，除了它口感味道好，还有其他原因么？2345品中的蛋白质含量的原理是什么么？（停顿2s）让我们听听老师是怎么说？11.动画【老师】本次我们用于鉴定蛋白质的分析方法是双缩脲法。
双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色。
当底物中含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。
这种紫色络合物颜色的深标记颜色浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。
该方法适合蛋白质的快速检测。
12.动画【小精灵】明白了牛奶的检测原理，让我们一起去实验室，动手实践一下吧！613.交互【交互界面设计】操作台上出现装有牛奶样品的烧杯、离心管、蛋白质显色液、滴管、1.出现文字“首先吸取1ml牛奶样品，加3滴到比色管中“滴管上方出现箭头，学生点击后，滴管从烧杯中吸取牛奶加3滴到比色管中。
提示”滴3滴样品“2.出现文字“向比色管中加入4ml蛋白质显色液，盖上盖子摇匀“显色液瓶上方出现箭头，学生点击后，滴管从显色液瓶中吸取4ml加入到比色管中。
”提示“4ml蛋白质显色液”3.出现文字“盖上盖子摇匀，显色3分钟。
”出动画比色管盖上盖子，摇晃。
提示“显色3分钟”4.出现文字“在3-5分钟内将比色管衬在白纸上与标准比色卡进行比对”比色卡上方出现箭头，学生点击后，将比色管与标准比色卡进行对比。
提示“在3-5分钟内进行比对”1. 2.4.14.动画【小精灵】实验测定结果显示含量大约是5% ，表明这瓶牛奶的蛋白质含量是达到标准的，可以放心饮用！15.实拍- 本次实验检测的分别是某品牌牛奶和某789。
VC含量的测定
碘量法含量测定生物化学直接碘量法测定维生素C的含量维生素C含量的测定（直接碘量法）一、目的1、掌握直接碘量法测定维生素C的原理和方法。
2、了解间接碘量法的原理。
二、原理维生素C又称抗坏血酸Vc，分子式C6H8O6。
Vc具有还原性，可被I2定量氧化，因而可用I2标准溶液直接测定。
其滴定反应式：C6H8O6＋I2= C6H6O6＋2HI用直接碘量法可测定药片，注射液，饮料，蔬菜，水果等的V含量。
I2微溶于水而易溶于KI溶液，但在稀的KI溶液中溶解得很慢，所以配制I2溶液时不能过早加水稀释，应先将I2和KI混合，用少量水充分研磨，溶解完全后再加水稀释。
I与KI间存在如下平衡：I2＋I－ =I3－游离I2容易挥发损失，这是影响碘溶液稳定性的原因之一。
因此溶液中应维持适当过量的I －离子，以减少I2的挥发。
空气能氧化I－离子，引起I2浓度增加：4 I－＋O2＋4H＋ =2I2＋2H2O此氧化作用缓慢，但能为光，热，及酸的作用而加速，因此I2溶液应处于棕色瓶中置冷暗处保存。
I2能缓慢腐蚀橡胶和其他有机物，所以I应避免与这类物质接触。
I2 溶液的标定用Na2S2O3标定。
而Na2S2O3一般含有少量杂质，在PH=9-10间稳定，所以在Na2S2O3溶液中加入少量的Na2CO3，Na2S2O3见光易分解可用棕色瓶储于暗处，经8-14天，用K2C2O7做基准物间接碘量法标定Na2S2O3溶液的浓度。
其过程为：K2C2O7与KI先反应析出I2：析出的I2再用标准的Na2S2O3溶液滴定：从而求得Na2S2O3的浓度。
这个标定Na2S2O3的方法为间接碘量法。
测量维生素c方法
测量维生素c方法
测量维生素C的常见方法有：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：基于维生素C与某些荧光物质反应的原理，利用HPLC分离、检测和定量维生素C。
2. 紫外-可见分光光度法（UV-Vis）：利用维生素C在特定波长下的吸收特性，通过测量样品在特定波长处的光吸收强度，来确定维生素C的浓度。
3. 高效薄层色谱法（HPTLC）：使用薄层色谱技术分离样品中的维生素C，并通过比较样品斑点的强度和标准品斑点的强度，来定量维生素C。
4. 比色法：基于维生素C与某些试剂（例如二苯基胺、二巯基二氨等）在酸性条件下发生反应产生有色化合物的原理，通过测量产生的有色化合物的吸光度来测量维生素C的含量。
5. 滴定法：使用氧化还原滴定的方法，将含有维生素C的样品与氧化剂（例如碘酸钾溶液）反应，通过滴加还原剂（例如二硫代硫酸钠溶液）使氧化剂完全消耗，通过反应所需的还原剂的体积来确定维生素C的浓度。
以上方法都可以测量维生素C的含量，具体选择取决于实验设计、设备条件和分析要求等因素。
Vc含量测定
资料范本本资料为word版本，可以直接编辑和打印，感谢您的下载Vc含量测定地点：__________________时间：__________________说明：本资料适用于约定双方经过谈判，协商而共同承认，共同遵守的责任与义务，仅供参考，文档可直接下载或修改，不需要的部分可直接删除，使用时请详细阅读内容方法一、 2.6－二氯酚靛酚滴定法二、原理Vc又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还原染料 2.6－二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。
在酸性溶液中， 2.6－二氯酚靛酚钠离子呈红色，被还原后变为无色。
三、实验器材锥形瓶、微量滴定管、研钵、容量瓶、吸量管等。
四、实验试剂2% 草酸溶液：取2g草酸溶于100ml蒸馏水中。
1% 草酸溶液：取1g草酸溶于100ml蒸馏水中。
标准抗坏血酸溶液（ 0.1mg/ml ）：精确称取10mg抗坏血酸，以1%草酸溶解并定容到100ml。
储存到棕色玻璃瓶中，最好临用前配制。
0.001N 2.6－二氯酚靛酚钠溶液：将50mg2.6－二氯酚靛酚钠溶解于约200ml含有52mg NaHCO3的热蒸馏水中，冷却后定容到250ml，储存在棕色瓶中，保存在低温下。
2.6－二氯酚靛酚钠不稳定，必须在一周内用完。
用前必须标定到1ml2.6－二氯酚靛酚钠相当于0.088mg抗坏血酸。
五、操作1、植物样品Vc提取液的制备：用电子天平准确地称取辣椒 0.5 g ，样品必须预先用温水洗去泥土，并在空气中风干，加25ml 2%草酸溶液匀浆，并将匀浆液转入50ml离心管中；用少量2%草酸溶液冲洗匀浆杯，一起转入离心管中进行离心（ 5min,4500rp ），将上清液移入 50ml 容量瓶，用少量2%草酸冲洗沉淀并离心保留上清，如此反复抽提 3 次，最后用 2% 草酸定容到50ml。
2、测定：每次量取 5ml提取液放入小锥形瓶内进行滴定。
用微量滴定管以 2.6－二氯酚靛酚钠溶液滴定到提取液呈现淡粉红色，并在 15～30 秒内不褪色，滴定过程必须迅速，不要超过 2 分钟。
WB01 酶联免疫法快速检测牛乳中的三聚氰胺操作说明概要
酶联免疫法快速检测牛乳中的三聚氰胺操作说明1样品前处理①取1mL成品纯牛奶样本，加1mL去离子水，涡动1min混匀；②取出40μL样本溶液，用960μL样本稀释液稀释，涡动1min混匀；③取50μL用于分析。
2检测步骤①将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20℃-25℃）平衡30min以上，洗涤工作液在使用前也需回至室温。
②取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入自封袋，保存于2℃-8℃，切勿冷冻。
③加标准品/样本：加标准品或样本50μL/孔到对应的微孔中（每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置），再加入酶标物50μL/孔，再加入抗试剂50μL/孔，轻轻振荡均匀，用盖板膜盖板后置室温25℃避光环境中反应30min。
④洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，加入洗涤液250μL/孔，充分洗涤4次，每次间隔10s，用吸水纸拍干。
⑤显色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温25℃避光环境反应15～20min。
⑥测定：加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值。
3 结果判读①定性分析用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出浓度范围（ppb）。
②定量分析百分吸光率的计算：百分吸光度值（%）=×100%其中B为标准溶液或供试样品的平均吸光度值；B0为零标准溶液平均吸光度值；三聚氰胺标准溶液浓度为0 ng/mL、1 ng/mL、3 ng/mL、9 ng/mL、27 ng/mL、81 ng/mL。
标准曲线的绘制与计算：以标准品百分吸光率为纵坐标，以三聚氰胺标准品浓度（ng/mL （ppb））的对数为横坐标，绘制标准曲线图。
将样本的百分吸光率带入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释系数即为样本中三聚氰胺实际残留量。
4注意事项试剂盒保存2℃-8℃，不要冷冻，将不用的微孔板放进自封袋重新密封。
Vc测定方法
Vc测定方法（二选一预实验）2，6-二氯酚靛酚滴定法原理：维生素C又称抗坏血酸（ascorbic acid）。
在1928年，从牛的肾上腺皮质中提取出的结晶物质，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效，因此称为抗坏血酸。
还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。
在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，被还原后变为无色。
因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。
当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。
如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。
1、试剂：2%草酸（20g/l草酸）：20.0g草酸，蒸馏水溶解，定容1000ml。
的100ml沸水中，2，6-二氯酚靛酚试剂：取100mg2，6-二氯酚靛酚溶解到有26mg NaHCO3摇溶，过滤，定容至1000ml棕色玻璃瓶（4℃约可保存一星期）。
标准抗坏血酸溶液（0.1mg/ml）：取10.0mg（0.0100g）抗坏血酸，用20%草酸溶液溶解，定容到100ml棕色容量瓶中（先用现配）。
标定：准确吸取标准抗坏血酸溶液10.0 ml（含1mg抗坏血酸）置100 ml锥形瓶中，以2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持15s钟即为终点，由所用染料的体积计算出1ml 染料相当于多少mg抗坏血酸。
重复3次，取平均值。
2、仪器：碱式滴定管（20ml）一只，容量瓶（1000ml2个、100ml棕色2个、100ml透明2个）、三角瓶、组织捣碎机、电子天平（1/w）、滤纸、纱布、铁架台、漏斗3、操作：提取：蔬菜洗净，滤纸吸干水分，称取10g，加入2%草酸100ml，在组织捣碎机中打成浆状，提10min。
四层纱布过滤至100ml三角瓶中。
取35ml左右于50ml离心管离心,4℃,1w rpm,20min，收集上清液，取10.0ml滴定。
10ml 2%草酸空白对照。
滴定：准确吸取滤液两份，每份10.0ml分别放入两个100ml锥形瓶内，用已经标定的2，6-二氯酚靛酚滴定至出现微红色，15s内不退色，记下用量。
抗坏血酸(维生素C)的测定方法
抗坏血酸（维生素 C ）的测定方法（ 1）在测定维生素C 的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素 C 含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法 1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后， 与邻苯二胺（OPDA 反应生 成具有荧光的喹喔啉 （ quinoxaline ）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正 比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与 OPDA 反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为 0.022 g/ml 。
2．适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3．仪器 3．1．实验室常用设备。
3. 2.荧光分光光度计或具有 350nm 及430nm 波长的荧光计。
3． 3．打碎机。
4. 试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
（ 1）偏磷酸－乙酸液：称取 15g 偏磷酸，加入 40ml 冰乙酸及 250ml 水，搅拌，放置过夜使 之逐渐溶解，加水至 500ml 。
4C 冰箱可保存 7〜10天。
（2）0.15 mol/L 硫酸：取 10ml 硫酸，小心加入水中，再加水稀释至 1200ml 。
（ 3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以 0.15mol/L 硫酸液为稀释液，其余同 4.1. 配制。
（4） 50% 乙酸钠溶液：称取 500g 乙酸钠（CH3COONS3H2O ，加水至1000ml 。
（5） 硼酸-乙酸钠溶液：称取 3g 硼酸，溶于100ml 乙酸钠溶液（4.4 ）中。
临用前配制。
（6） 邻苯二胺溶液：称取 20mg 邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml 。
（7） 0 . 04%百里酚蓝指示剂溶液：称取 0.1g 百里酚蓝，加 0.02mol/L 氢氧化钠溶液，在玻 璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为 10.75ml ，磨溶后用水稀释至 250ml 。
WB01氨基酸测定实训指导(精)
实训指导（十六）电位滴定法测定食品中氨基酸总量一、目的与要求学习电位滴定法测定食品中氨基酸总量的基本原理和操作方法。
二、原理利用氨基酸两性电解质作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，用氢氧化钠标准溶液滴定，以酸度计控制测定终点。
三、仪器与试剂1．仪器酸度计；磁力搅拌器；10mL微量滴定管。
2．试剂及材料（1）36%甲醛：应不含有聚合物。
（2）0.050mol/L 氢氧化钠标准溶液。
（3）酱油。
四、操作流程样品处理一总算含量滴定|」氨基酸态氮含量滴工空白滴定」I结果分析五、操作要点1．样品处理吸取酱油5.0mL，加水稀释并定容至100mL。
2．样品测定（1）吸取20.0mL试样，置于200mL烧杯中，加60mL蒸馏水，开动磁力搅拌器，待搅拌稳定后把酸度计的复合电极小心放入烧杯的合适位置，用氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2,记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数，按总酸计算公式，可计算总酸含量。
（2）准确加入10.00mL甲醛溶液，混匀，再用氢氧化钠标准滴定溶液继续滴定至pH9.2, 记录消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数，供计算氨基酸态氮含量用。
（3）同时量取80mL水，先用0.05mol/L氢氧化钠溶液调节至pH为8.2 （记录用去氢氧化钠标准溶液的体积，此为测总酸的试剂空白试验），再加入10.00mL甲醛溶液，用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至9.2，第二次所用氢氧化钠标准溶液体积为测定氨基酸态氮的试剂空白对照。
六、结果分析1．数据记录于表16-1。
X =（匕—? ° 义 0.014 X 100—X 20 100式中 X 一样品中氨基酸态氮的含量，g/100mL ；匕——测定样品在加入甲醛后滴定至终点（pH9.2）所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL ；匕——空白试验加入甲醛后滴定至终点所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL ；c ——氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L ；0.014 ——与1.00mL 氢氧化钠标准滴定溶液［c （NaOH ）=1.000mol/L ］相当的氮的质量，g ；按式（16-1）计算每百毫升样品中氨基酸态氮含量，结果保留两位有效数字。
荧光分析测定维生素c
取 3. 0 mL 维生素 C 标准溶液, 按实验方法进 行操作,分别在 290 ～ 330 nm、360 ～ 460 nm 内扫描 得到激发光谱和发射光谱如图 1、图 2所示。 从图 1、图 2中可看出 ,当激发波长为 308 nm , 发射波长 为 408 nm 时体 系的荧光强度最大,试剂空白的荧光 值比较低且稳定, 故本实验选择激发波长 为 308 nm ,发射波长为 408 nm 。
精品课件
激发光谱
发射光谱
1— C u2 + +BA +缓冲溶液 +CTMAB; 2— Cu2 ++BA +维生素 C +缓冲溶液 +CTMAB
精品课件
1— C u2 + +BA +缓冲溶液 +CTMAB; 2— Cu2 ++BA +维生素 C +缓冲溶液 +CTMAB
2. 2 试剂加入顺序
按照实验方法操作, 在各试剂加入量相同的情况下, 试 验了试剂的不同加入顺序对荧光强度的影 响。试验结果表 明, 当所加试剂顺序依次为 CuSO4 溶液、苯甲酸溶液、维 生素 C 标准溶液、NaOH -邻 苯二甲酸氢钾缓冲溶液时 ,体 系的荧光强度最大，因此选用此加入顺序为最佳试剂加入顺 序。
（2）水浴加热
在 35℃恒温水浴中加热 30 m in， 将溶液流 水 冷却至室温 。
（3）荧光分析
将待测样品放置于样品架上，设定激发波长为 308 nm ，发射波长为 408 nm ，测量荧光强度 F ，以 不含维生素 C 的试剂空白为 F0 ，计算 F测 =F - F0 。
精品课件
2 结果与讨论
维生素C含量测定的检验方法(精)
批准:姓名:签名:日期:作者:王金芳/QC高级主管批准人:王晓羽/QC经理崔彦娜/QA经理最终批准人:任青/北京工厂运营总监于浩/QA总监文件适用部门：（在适用的部门后的方格内打“√”）生产部工程部QC√QA √物流部其它替换文件：新版。
1 依据及参考文件中华人民共和国药典二部2010版中维生素C含量测定的试验方法。
2 目的指导嘉康利（中国）日用品有限公司工厂内保健品成品（维生素C咀嚼片、铁锌硒多种维生素矿物质片、多种维生素矿物质片、多种维生素矿物质咀嚼片（儿童型））和原料L-抗坏血酸颗粒中维生素C含量的测定。
3 范围本标准规定了维生素C含量的测定方法。
本标准适用于保健品成品（维生素C咀嚼片、铁锌硒多种维生素矿物质片、多种维生素矿物质片、多种维生素矿物质咀嚼片（儿童型））和原料L-抗坏血酸颗粒中维生素C含量的测定。
4 职责QC检验员严格按照此操作规程对相应产品或物料进行检验；QC主管负责新文件的培训并监督此操作规程的执行；QC经理、QA经理负责对文件的审核；QA总监、工厂运营总监负责对文件的批准；QA负责此操作规程的审核、存档、发放。
5 规程5.1.1 仪器和设备铁架台、磁力搅拌器、玻璃棒、滴管、移液管（10ml、1ml）、吸耳球、茶滴管、称量舟、100ml容量瓶、具塞三角瓶、药匙、研钵、分析天平（分度值0.0001g）、烧杯(500ml、250mL、150ml、50ml。
5.1.2 试剂准备5.1.2.1 淀粉指示液：取可溶性淀粉0.5g加水5ml搅匀后缓缓倾入100ml沸水中随加随搅拌，继续煮沸2分钟放冷，倾取上层清夜即得。
5.1.2.2 0.05mol/L碘滴定液5.1.2.3 白陶土5.1.3 维生素C咀嚼片中VC含量的测定取维生素C咀嚼片20片，研细，精密称取适量（约1.3g粉末），置于250ml具塞三角瓶中，加纯化水150ml，超声使溶解，摇匀，加淀粉指示液1ml，用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。
WB01 蜂蜜中氯霉素残留的快速检测操作说明概要
蜂蜜中氯霉素残留的快速检测操作说明1样品前处理无结晶的蜂蜜样品，直接将其搅拌均匀，有结晶的样品，在密闭状态下，于50～80℃水浴，待结晶全部融化后搅匀。
称取4g待检蜂蜜，加入2mL纯净水，完全振荡溶解后加入8mL乙酸乙酯，振荡5min，静置分层。
转移5mL上层乙酸乙酯于干净离心管中，若上层乙酸乙酯不足5mL，则可先3000r/min 离心5min后取上层乙酸乙酯，然后50℃下氮气吹干乙酸乙酯。
加入600μL样品稀释液于离心管中，涡旋振荡，直至完全溶解管壁残留，待检。
2检测步骤使用前将试纸条、微孔试剂和待检样本恢复至室温（20℃～25℃）。
将所需微孔试剂置于空微孔板架中。
用移液器移取200μL待检样本于微孔试剂中，缓慢抽吸至检测样品与微孔试剂充分混匀，大约5～6次，使用计时器，开始计时。
室温（20℃～25℃）孵育2min，从试剂桶中取出所需数量的试纸条并插入微孔试剂中，使印有LOGO手柄端向上，另一端向下并充分浸入溶液中，开始计时。
再次室温（20℃～25℃）反应5min，取出试纸条并在2min内进行结果判读，其他时间判读结果无效。
3 结果判读阴性：T线比C线显色深或一样深，表示样品中待检测物质浓度低于检测限，或不含待检测物质。
阳性：T线比C线浅或T线无显色，则表示样品中待检测物质浓度高于检测限。
无效：C线不显色，无论T线是否显色，该检测均判为无效。
4注意事项打开微孔试剂时，请轻轻揭开密封膜，切勿用力迅速揭开，以免有粉末飞出；微孔试剂打开后请在一个小时内使用完，否则失效，影响检测效果；在产品未使用完之前，切勿将桶中干燥剂丢弃；检测时避免阳光直射和风扇直吹；所检测牛奶样品必须为均匀液体，不能有结块、发酸和沉淀等现象；本检测方式为筛选方法，如遇阳性样本，请按照规定的标准进行取样，用确证法进行确证。
抗坏血酸（Vc）的测定方法（比色法）
抗坏血酸的测定（比色法）一、试剂1．1%草酸。
2．2%草酸。
3．30%硫酸锌4．15%亚铁氰化钾5．染料溶液称取100mg 2,6-二氯靛酚和82mg碳酸氢钠溶于约60mL热水中，过滤定容至100mL容量瓶中，倒入棕色试剂瓶存放于冰箱内。
使用时稀释4倍，此溶液每mL约相当于0.1mg的维生素C。
6．抗坏血酸标准溶液（0.05mg/mL）精确称取100mg分析纯抗坏血酸，溶于1%草酸，定容至100mL，再从中吸取5mL，用1%草酸再稀释至100mL（标准溶液在使用前临时配制）。
7．二甲苯分析纯（本法使用过的二甲苯可用20%NaOH中和后，蒸馏回收）。
二、实验步骤1．标准曲线取具塞大试管6个，分别吸取抗坏血酸标准溶液0mL、1 mL、2 mL、2.5 mL、3 mL、4 mL，用1%草酸补充至4 mL。
各管中抗坏血酸含量相应为0mg、0.05 mg、0.10 mg、0.125 mg、0.15 mg、0.20 mg。
各管中加入染料溶液2mL，随即加入二甲苯5mL，迅速摇动约0.5min，静置后二甲苯与水层分离，将上层二甲苯萃取液轻轻倒入1cm比色杯，在500nm 波长下求测吸光度值。
以二甲苯作空白调零，求测标准系列抗坏血酸mg数与相应的吸光度值的回归方程。
2．样品提取取新鲜蔬菜洗净，擦干，在玻板上用不锈钢刀切碎混匀。
称取2g样品放至研钵中，加入3mL 2%草酸研磨至匀浆，然后将匀浆倒至100mL容量瓶中，残渣用1%草酸冲洗，洗液一并倒至容量瓶中，加入1mL 30%硫酸锌，摇动容量瓶，再加入1mL 15%亚铁氰化钾，以除去脂溶性色素，再用1%草酸定容至刻度，摇匀后过滤到干净的小烧杯中。
3．测定取上述提取液4mL（若抗坏血酸含量高，可适当减少取量，不足4mL的可用1%草酸补足至4mL）至具塞大试管中，一次加入染料2mL，二甲苯5mL，按照标准曲线的方法测定吸光度。
三、结果计算根据测定液的吸光度值，按回归方程计算出抗坏血酸的mg数，然后按下式计算样品中的抗坏血酸的含量，以每百克鲜样含抗坏血酸mg数（mg/100g）表示。
维生素 C检验操作规程
1 感官要求取10g被测样品，置于洁净的白瓷盘中，用肉眼在自然光线下观察其色泽、组织形态、杂质，品尝其滋味，嗅其气味。
2一般规定本标准所用试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和 GB/T 6682—2008中规定的三级水。
试验方法中所需标准滴定溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 603之规定制备。
3 鉴别试验3 鉴别3.1 试剂和材料3.1.1 活性炭。
3.1.2 吡咯。
3.1.3 硝酸银溶液：17.5 g/L。
3.1.4 三氯乙酸溶液：50 g/L。
3.2 鉴别试验3.2.1 硝酸银反应试验3.2.1.1 方法原理维生素 C分子中有二烯醇基，具强还原性，可被硝酸银氧化为去氢抗坏血酸，同时产生黑色银沉淀。
3.2.1.2 分析步骤称取约0.1 g实验室样品，精确至 0.01 g，溶于 5 mL水中，加 0.5 mL 硝酸银溶液，即生成银的黑色沉淀。
3.2.2 糖类性质反应试验3.2.2.1 方法原理维生素 C具有糖类性质的反应，可在三氯乙酸或盐酸存在下水解、脱羧、生成戊糖，再失水，转变为糖醛，加入吡咯，加热至 50℃即发生蓝色。
3.2.2.2 分析步骤称取约0.015 g实验室样品，溶于 15 mL三氯乙酸溶液中，加 200 mg活性炭，猛烈振摇 1min，反复过滤至澄清，在5 mL滤液中加 1 mL吡咯，振摇使溶解后，加热至50℃即发生蓝色。
3.2.2.3 红外光吸收谱鉴别采用溴化钾压片法，按照 GB/T 6040进行试验，实验室样品的红外光谱应与对照的图谱一致（对GB 14754—2010照图谱见附录B）。
4 维生素C的测定4.1 方法提要维生素 C具有较强的还原性，可被碘定量氧化。
以淀粉为指示剂，用碘标准滴定液滴定样品水溶液，根据碘标准滴定液的用量，计算以 C6H8O6计的维生素 C含量。
4.2 试剂和材料4.2.1 硫酸溶液： 57→1000。
维生素C检测作业指导书(碘滴定法)
维生素C检测作业指导书1.目的检测果汁饮料中Vc 的含量。
2.适用范围适用于原果汁、终糖浆及成品饮料中维生素C的检测。
3.职责3.1品控员负责检验。
3.2 QA主任负责监督本文件的有效执行。
4.定义无5.程序5.1 仪器与试剂5.1.1 仪器5.1.1.1加热磁力揽拌器（含转子）5.1.1.2烧杯：1000ml、500ml、100ml、50ml5.1.1.3三角瓶：100ml5.1.1.4天平：分析天平（精确到0.1mg）、电子天平（精确到0.01g）5.1.1.5容量瓶：100ml、500ml、 1000ml5.1.1.6试剂瓶：1000ml、125ml 棕色试剂瓶；1000ml、500ml 白色试剂瓶5.1.1.7 10ml 酸式滴定管、5/10mlA 级移液管、1000 ml 量筒、电炉。
5.1.2 试剂：碘（AR）、碘化钾（AR）、氯化钠（AR）、马铃薯淀粉（AR）、磷酸晶体（AR）、冰乙酸溶液（AR）、抗坏血酸（AR）5.2 试剂配置5.2.1 淀粉指示剂的配置：5.2.1.1量取500 ml 的蒸馏水于1000 ml 的烧杯内，用电炉加热，用电子天平称取200 ± 2 g 氯化钠，加入到已经煮沸的蒸馏水中。
放置冷却后移入1000 ml 的试剂瓶（塑料塞）内。
5.2.1.2取550 ml 饱和的氯化钠溶液煮沸。
用电子天平称取8 .00± 0.01 g 马铃薯淀粉于50ml 的烧杯内，用25ml 的蒸馏水稀释成糊状。
缓缓加入煮沸的氯化钠溶液中，并煮沸2min。
待冷却后转入试剂瓶中,保质期为30 天。
5.2.2 混合酸溶液：用电子天平称取30.00 ± 0.03 g 偏磷酸于500ml 的烧杯内加150ml 蒸馏水稀释，同时加入80ml 冰醋酸，充分溶解后移入1000 ml 的容量瓶内用蒸馏水定溶。
定溶后移入1000 ml 白色试剂瓶内放于4℃的冰箱内冷藏保存，保质期为10 天.5.2.3 碘溶液的配制:用分析天平称取3.000 ± 0.003 g 碘于500ml 的烧杯内，同时加入10 .00± 0.01 g KI, 蒸馏水300ml，用玻璃棒搅拌至充分溶解，移入1000ml 的容量瓶内，用蒸馏水定溶后转入1000ml 的棕色试剂瓶内，放于4℃的冰箱内冷藏保存，保质期为30 天，但必须每三天标定一次。
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实验21 2，6一二氯酚靛酚滴定法测定维生素C
一、目的
1．学习并掌握定量测定维生素C 的原理和方法。
2．掌握微量滴定法的基本操作技术。
二、原理
维生素C 是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid ）。
它对物质代谢的调节具有重要的作用。
近年来，发现它有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有对化学致癌物的阻断作用。
维生素C 是具有L 系糖构型的不饱和多羟基物，属于水溶性维生素。
它分布很广，植物的绿色部分及许多水果（如橘子、苹果、草莓、山楂等）、蔬菜（黄瓜、洋白菜、西红柿等）中的含量更为丰富。
维生素C （抗坏血酸）具有很强的还原性，能将染料2，6一二氯酚靛酚还原成无色，而抗坏血酸本身被氧化成脱氢抗坏血酸。
还原型抗坏血酸 氧化型染料 脱氢抗坏血酸 还原型染料
（粉红色） （无色）
氧化型2，6一二氯酚靛酚在酸性溶液中呈粉红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色，当用此染料滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸未全部氧化前，则滴下染料立即被还原成无色，一旦溶淀中的抗坏血酸全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液显示粉红色，此时为滴定终点，即表示溶液中的抗坏血酸刚刚被氧化完全，从滴定时2，6一二氯酚靛酚标准液的消耗量，可以计算出被检物质中抗坏血酸的含量。
三、材料、试剂与器具
（一）新鲜的蔬菜、水果
（二）试剂
1、标准抗坏血酸溶液：准确称取50毫克纯抗坏血酸，溶于1%的草酸溶液中，并稀释
至500毫升，贮棕色瓶，冷藏保存，最好临用时配制。
2、2%草酸溶液：草酸2克，溶于100毫升蒸馏水中。
3、1%草酸溶液：1克草酸溶于100毫升的蒸馏水中。
4、0.01% 2,6 一二氯酚靛溶液：溶50毫克2,6一二氯酚靛于300毫升含有104克 NaHCO 3的热水中，冷却后加水稀释至500毫升，滤去不溶物，贮于棕色瓶内。
（4℃约可保存1周）每次临用时以标准抗坏血酸溶液标定。
（三）器具
1、锥形瓶（50~100毫升）
O Cl Cl ‖ ∣∣ ‖ O ‖
Cl
2、移液管（1毫升，10毫升）
3、容量瓶（100毫升）
4、微量滴定管（3毫升或5毫升）
四、操作步骤
（一）提取
水洗净新鲜的蔬菜（水果），用吸水纸吸干表面水分，然后称取5克剪碎加2%的草酸5毫升，置研钵中研成浆，倒入100毫升的容量瓶内，用2%草酸洗涤数次，最后定容至刻度，充分混匀后过滤，弃去最初几毫升滤液，如滤液色深可用白陶土脱色。
（二）滴定
1、标定2，6一二氯酚靛酚溶液的浓度：
量取标准维生素C 溶液1ml,加9ml 1%草酸加入50ml 锥形瓶中，同时量取10ml 草酸加入另一个50ml 锥形瓶中作空白对照，用已标定的2，6一二氯酚靛酚滴定至粉红色出现，15秒不退色。
记录所用的毫升数，计算每毫升2，6一二氯酚靛酚所能氧给维生素C 的毫克数（K ）。
2、样品的测定：
取50ml 锥形瓶2个，分别加入滤液10ml ，用已标定的2，6一二氯酚靛酚溶液滴定至终点，以微红色能保持15秒不退色为止，整个滴定过程宜迅速，不宜超过2min ，空白滴定方法同前，记录两次滴定所得的结果，求平均值V 10。
（三）结果计算
根据实验数据计算出每100g 样品的维生素C 含量：
维生素C （mg/100g 样品）=123()V V K V
W V -⨯⨯⨯×100
式中： V 1为滴定样品液所用去染料体积（ml ）;
V 2为滴定空白所用去染料体积（ml ）;
V 3为样品测定时所用滤液体积（10ml ）;
为样品提取液的总体积；
K 为1毫升染料能氧化维生素C 的量（mg ）;
W 为称取样品重量(g )。
五、注意事项
1．滴定时速度要尽可能快，因样品内一般都含有一些能特将2，6一二氯酚靛酚还原的其它物质，尽管它们还原比染料的能力一般较维生素C 弱。
2．滴定所用染料要在1~4ml 之间，否则须增减样品量或将提取液适当稀释。
3.抗坏血酸易溶于水，也极易被氯化，故提取抗坏血酸时，须抑制组织中氧化酶活性。
2%草酸可抑制该酶，1%草酸则不能，三氯醋酸、偏磷酸、盐酸有同样功效。
Fe 2+能还原二氯酚靛酚，如用醋酸（8%即可）则Fe 2+不会很快与染料起作用。
4.样品提取液应避免日光直射，否则会加速抗坏血酸的氧化。
5.在生物组织内和组织提取物内，抗坏血酸还能以脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的形式存在。
它们同样地具有维生素C 的生理作用，但不能将2，6一二氯酚靛酚还原脱色。
6.在生物组织提取物中，常有色素类物质存在，给滴定终点的观察造成困难。
应加入适量白陶土AI （OH ）3乳液进行脱色过滤后再滴定。
（4℃约可保存1周）每次临用时以标准抗坏血酸溶液标定。
六、实验报告
七、保留每次测定的有效数据，计算样品维生素C 的含量并讨论分析结果的准确性，科学
性。
七、思考题
1、要测得准确的维生素C值，实验过程中应注意哪些操作步骤，为什么？
2、在测定过程中，样品的草酸提取液为什幺不能暴露在光下？
3、试简述维生素C的生理意义。
富含维生素c的水果有鲜枣、猕猴桃、山楂、柚子、草莓、柑橘等，而平时常吃的苹果、梨、桃、杏、香蕉、葡萄等水果的维生素c含量甚低。
富含胡萝卜素的水果芒果是含胡萝卜素最多的水果。
柑橘、黄杏、菠萝等黄色水果中也含有少量胡萝卜素。