罗汉果离体快繁及其细胞组织学观察

罗汉果离体快繁及其细胞组织学观察
罗汉果[Siraitia grosvenorii(Swingle) C.Jeffery]是我国南方特有的药用果树植物。

本试验以罗汉果为材料进行离体培养快繁研究,并对茎尖、茎段、叶片和胚轴等外植体的启动生长、试管苗增殖和芽苗生根阶段的器官发生进行细胞组织学观察。

主要研究结果如下：1.罗汉果茎尖培养。

以青皮果、冬瓜汉、珍果一号等品种的茎尖为外植体,探索罗汉果不同品种离体培养育苗方法。

研究结果表明：茎尖培养基以MS+0.5mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1IAA的固体培养基为佳；青皮果,冬瓜汉品种的诱导比珍果一号效果要好；无菌株系的建立随着接种时段的延后,成活率呈线性递减的变化,越早接种成活率越高。

2.罗汉果茎尖脱毒培养及其细胞组织学观察。

以罗汉果茎尖为材料,探讨了Ad对罗汉果芽诱导的影响,BA对茎尖培养芽诱导的影响,不同糖浓度对芽诱导的影响,并采用茎尖培养结合热处理的方法进行
脱毒处理；同时,对罗汉果茎尖离体培养过程进行了细胞组织学观察。

结果表明,罗汉果茎尖脱毒培养以MS+1mg·L-1 6-BA+1 mg·L-1IAA,添加3%蔗糖固体培养基为佳；茎尖脱毒培养主要有顶芽生长、腋芽萌发和不定芽发生3种途径。

顶芽生长是植株再生的主要方式。

3.罗汉果茎段培养。

以罗汉果青皮果嫩梢的节为外植体,比较节发育程度对芽诱导的影响。

结果表明,嫩梢第3—14节以内,组织分化程度越高,出芽率越高,污染率也越高；7—10节愈伤化程度最高。

4.罗汉果胚轴培养及其细胞组织学观察。

以罗汉果胚轴为外植体,探讨了不同培养基对胚轴不定芽再生的影响,进行了再生不定芽和体胚发生的解剖学观察。

结果表明,胚轴在改良MS附加4 mg·L-1 6-BA、1 mg·L-1IAA的固体培养基中,不定芽分化平均高达7.6个／外植体。

解剖结构表明,不定芽和体细胞胚起源于胚轴形成的愈伤组织表层。

5.罗汉果叶片培养及其细胞组织学观察。

以罗汉果叶片为外植体,探讨了不同基本培养基,不同接种方式、不同植物生长调节剂对不定芽分化的影响,以及不定芽形成的细胞组织学观察。

结果表明,基本培养基以改良MS较为适合,在附加1 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1NAA+0.5 mg·L-12,4-D的固体培养基中,平均每愈块再生芽高达5.6个。

叶片正面接触培养基培养方式芽分化率达到90.3%。

硝酸银对不定芽分化具明显效果,分化率达到86.7%。

不定芽起源于叶片紧密愈伤组织表层。

6.试管苗增殖及其细胞组织学观察。

以罗汉果试管苗为材料,比较了不同放置方式对芽诱导的影响、6-BA对增殖培养的影响,同时对罗汉果茎节增殖培养进行了细胞组织学观察。

结果表明,节培养方式芽分化率高于节间培养方式；茎段培养基以MS+0.6 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1IBA+0.2 mg·L-1IAA,附加3%蔗糖固体培养基为佳,腋芽萌发是试管苗增殖的主要方式。

愈伤组织不能正常产生不定芽。

7.试管苗生根及其细胞组织学观察。

以罗汉果试管苗为试材,进行了不同生根方式的比较试验,并对其生根过程进行了形态解剖学观察。

结果表明：罗汉果试管苗茎段基部不定根起源于韧皮部与束中形成层交叉的部位。

节部不定根主要起源于髓射线与束间形成层交叉的部位,属于内起源。

节部不定根靠近叶隙,也与叶迹有关,根原基形成早。

节部比节间生根早、根
多,根分布结构好。