检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型荧光定量PCR方法的建立

检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型荧光定量PCR方法的建立
陶薇;傅婷;何卓晶;洪艳;胡如西;贾岚
【期刊名称】《医学研究杂志》
【年(卷),期】2016(45)2
【摘要】目的建立一种高敏感度的检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)DNA的实时荧光定量PCR方法,为针对HSV-2潜伏感染的治疗性疫苗和抗病毒药物疗效提供一个评价方法.方法依据HSV-2糖蛋白D(gD)基因序列,使用序列比对软件,选取其保守区序列设计引物及TaqMan探针并进行筛选;以gD基因重组质粒pcDNA3-HSV-2 gD作为标准模板,对该检测方法的反应条件进行优化,提高其检测特异性、敏感度和重现性.结果该检测方法特异性好,检测的最低拷贝数可达到2个拷贝,线性范围为2×100～2×108拷贝/反应,是普通PCR敏感度的103倍.该检测方法组间和组内变异系数均低于5％,说明该检测方法具有良好稳定性.结论本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法用于检测痕量HSV-2 DNA具有特异、敏感、定量和重现性好的优点.
【总页数】4页(P51-54)
【作者】陶薇;傅婷;何卓晶;洪艳;胡如西;贾岚
【作者单位】310013 杭州,浙江省医学科学院;310013 杭州,浙江省医学科学院;310013 杭州,浙江省医学科学院;310013 杭州,浙江省医学科学院;310013 杭州,浙江省医学科学院;310013 杭州,浙江省医学科学院
【正文语种】中文
【中图分类】R373
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