抑制人结肠癌细胞株HT29中Vav1基因表达对裸鼠移植瘤生长影响的相关

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白藜芦醇抑制结肠癌细胞系HT-29体外增殖作用的研究

王金英，秦蜜蜜，韩影影，张燕，曹璋
（１．滨州医学院病理学教研室，山东滨州２５６６０３；２．东营市人民医院药剂科，山东东营２５７０９１）
摘要：目的
通过观察白藜芦醇对结肠癌细胞系ＨＴ一２９增殖的影响并检测程序性细胞死亡４蛋白表达水平，
ｓｉｓｏｎｈｕｍａｎｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓＨＴ一２９．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｌｉｎｅＨＴ一２９ｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙ
（Ｐ＜０．０５），细胞周期被阻滞，增殖抑制。白藜芦醇处理后ＨＴ一２９细胞程序性细胞死亡４蛋白表达水平上调，与对照组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。结论白藜芦醇能够显著抑制ＨＴ一２９细胞株的增殖，细胞周期阻滞于ｓ期，诱导肿瘤细胞凋亡，其肿瘤抑制作用可能与程序性细胞死亡４蛋白表达上调有关。
不同浓度的白
藜芦醇对ＨＴ一２９细胞的增殖有抑制作用，并且呈现出一定的剂量依赖性（Ｐ＜０．０１），白藜芦醇改变细胞周期分
布，细胞周期阻滞在ｓ期，同时诱导ＨＴ一２９细胞凋亡，试验组与空白对照组相比，Ｓ期细胞比例及凋亡率明显增高
Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｄｕｃｉｎｇａｐｏｐｔｏ —

苦豆碱抑制结肠癌细胞HT29增殖诱导细胞周期阻滞的作用及机制研究

苦豆碱抑制结肠癌细胞HT29增殖诱导细胞周期阻滞的作用及机制研究结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是人类高发恶性肿瘤,其发病率一直呈上升趋势,在全球恶性肿瘤发病率中已上升至第三位。

在我国,结肠癌的发病率仅次于胃癌与食道癌,且有逐年增长趋势。

因此对结肠癌的病因病机及治疗方法的深入研究尤显重要。

目前结肠癌的治疗主要是以手术为主的综合治疗,手术的切除率可达到60%-70%,结直肠癌根治术后,50%患者复发或转移而死亡,55-80%的复发病例发生在术后2年内,大宗病例报道的术后5年生存率仍然徘徊在50%-60%左右,扩大手术范围则无法提高患者的生存率。

化疗可以降低术后复发,提高临床疗效,降低转移发生率,尽可能挽救患者生命及延长生命时间。

虽然外科治疗已取得很大进步,但是手术后的复发和转移是结肠癌患者死亡的主要因素,很多抗结肠癌的药物也带来很多的副作用。

中药在治疗肿瘤方面,由于其副作用小,病人耐受性好等特点发挥着越来越大的作用。

中药治疗结肠癌主要体现在以下几个方面：(1)中药联合手术治疗减少肿瘤复发转移、提高生存质量、增加患者免疫功能：手术切除原发病灶后,中药辅助辨证治疗,口服及灌肠应用于结直肠癌手术前后,可抑制肿瘤生长,提高机体免疫力,改善症状,抗转移及加强手术的成功率。

(2)中药联合化疗减轻其不良反应：化疗是大肠癌治疗的主要手段之一,但90%肿瘤患者初次化疗都会出现恶心、呕吐、疲乏等症状。

中药可减轻化疗对结肠癌和直肠癌患者造成的肠道损伤,从而间接地辅助了癌症治疗,还可减少化疗后所致的白细胞减少的发生率,降低白细胞下降的程度,可显著改善化疗导致的恶心症状,还可以提高生存质量,改善临床症状,减轻化疗的毒副反应,提高机体对化疗的耐受性,起到增效减毒的作用,提高患者的无瘤生存率。

(3)中药灌肠联合化疗延长生存期：中药灌肠是直接通过直肠,药效不受消化系等诸多因素的影响,可直接作用于创面而起到抑瘤、杀瘤、止痛等作用,且操作方便,无创伤、无不良反应,有利于患者康复,故大肠癌经肛门直肠给药治疗越来越被临床所重视。

对人结肠癌细胞株HT_29转染shRNA重组质粒后Survivin基因变化的研究

2012年5月第50卷第15期·论著·大肠癌是消化道常见的恶性肿瘤，其发生发展受很多因素的影响，其中细胞凋亡的抑制和过度增殖是主要的因素之一[1]。

1998年RNA干扰（RNA interference，RNAi）由Fire A 首次报道至今，RNAi技术以其高效、特异等优势，取得了显著的基因沉默效果，成为了研究基因功能的新手段。

Survivin 是迄今发现最强的凋亡抑制蛋白家族中唯一一个同时具有抑制凋亡和调节有丝分裂双重作用的基因[2]。

众多研究已表明，Survivin基因在结肠癌组织和细胞株中表达水平较高[3]。

本实验通过构建Survivin基因的shRNA（short hairpin RNA）重组质粒，使用阳离子脂质体法转染结肠癌细胞株HT-29，观察其对结肠癌细胞株HT-29中Survivin基因表达的影响，同时为后续实验中筛选更稳定的细胞株以及双基因的构建提供依据。

1材料与方法1.1材料人结肠癌细胞HT-29细胞购于上海中科院细胞所；Mc-Coy's5a培养液、胎牛血清、脂质体Lipofectamine2000购于Invitrogen公司；pshRNA-GFP vector购于System Biosciences；限制性内切酶BamHI和EcoR I，定量PCR检测试剂盒，感受态细胞等购于Takara公司；质粒提取试剂盒购于Qiagen公司；Survivin一抗购于Ebioscience公司。

1.2方法1.2.1构建Survivin基因的shRNA重组质粒根据Sur-vivin（NM_001168）基因信息，使用在线Small interfering RNA （siRNA）序列设计软件，设计2条针对其CDS区的siRNA 序列，分别为siRNA1（5'-ACTGGACAGAGAAAGAGCC-3'）；siRNA2（5'-GGACCACCGCATCTCTACA-3）。

肿瘤干细胞在人结肠癌细胞株HT29耐奥沙利铂中的作用探讨

ＷＡＮＧＨｕａｉｚｈｉｉＺＨＡ０Ｇｕｏｑｉａｎ￣ＳＨＩＸｉａｎｚｈｏｕｌＷＡＮＧＨａｉ１ＺＨＡＮＧＪｉａｎ｜ＬＩＨｕａｉｚｈｏｕ２
１．ＤａｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｅｎｅｒａｌＳｕｅ珂，ＡｒｍｅｄＰｏｌｉｃｅＣｏｒｐｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨｅ＇ｎａｎ，ＨｅｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００５２，
（１２Ｉｚｍｏｌ／Ｌ）的作用下，ＨＴ２９／Ｌ — ＯＨＰ的增殖能力显著高于ＨＴ２９（Ｐ＜０．０１），但是同未经Ｌ — ＯＨＰ作用的ＨＴ２９
相比差异无统计学意义（Ｐ＞０。０５）。ＨＴ２９和ＨＴ２９几一ＯＨＰ对Ｌ一０ＨＰ的ＩＣ５０分别为１２．１ｌ￣ｍｏｌ／Ｌ和１３８．４ｐ，ｍｏ１］
药的机制之一。【关键词】结肠癌；耐药；奥沙利铂；肿瘤干细胞
【中图分类号］Ｒ７３５．３５
【文献标识码】Ａ
【文章编号】１６７３ — ７２１０（２０１３）０７（ｂ）一０００７ — ０４
２０１３年７月第１０人结肠癌细胞株ＨＴ２９耐奥沙利铂中的作用探讨
王怀志１赵国强石献洲汪海张建李怀洲。 ▲

Vpr抑制人大肠癌细胞株HT-29增殖及调节存活素表达的研究

ＡｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｏｉｖｓｉａｅｔｅｅｆｃｆＶｐｎｐｏｉｒｔｏｆＨＴ一９ａｄｅｐｅｓｏｆＳｒｉｉｅｅｓｒｃ：ｊｃｉｖｎｅｔｇｔｈｆｅｔｏｒｏｒｌｅａｉｎｏｆ２ｎｘｒｓｉｎｏｕｖｖｎｇｎ．
ｓｙｅｅｙａ．２ｏｔｒａｍｅｔＦｏｃｔｍｅｒ（ＣＭ）ｗａｍｐｏｅｏｄｔｃｈｅｌｙｌｉｔｉｕｉｎａｄａｏｔ — ａｖｒｄｙ７ｈｐｓｅｔｎ，ｌｗｙｏｔｙＦｔｓｅｌｙｄｔｅｅｔｔｅｃｌｃｃｅｄｓｒｂｔｏｎｐｐｏｓｓＴｈｘｒｓｉｎｏｒｐｏｅｎｗａｅｅｔｄｂｓｅｎｂｏ；ｅｒＲＮＡｎｒｔｉｘｒｓｉｎｌｖｌｏｕｖｖｎｉ．ｅｅｐｅｓｏｆＶｐｒｔｉｓｄｔｃｅｙｗｅｔｒｌｔＴｈｎａｄｐｏｅｎｅｐｅｓｏｅｅｓｆＳｒｉｉ
ＭｅｈｏｓＨＴ一９ｅｌｅｅｔｅｔｄｗｉｈｔｄ２ｃｌｓｗｒｒａｅｔＡｄ— ｐｒｏｒＡｄｏｒｆｖａＶｖｆｉｅｄｙｓ，ＴｈｅｃｌｐｏｉｅａｉｎｗａｅｓｒｄｂＴＴｓｅｌｒｌｆｒｔｏｓｍａｕｅｙＭａ－
中图分类号：７５３Ｒ３．文献标识码：Ａ
ＩｉｉｉｎｏｈｅｐｒｉｅａｉｆＨＴ－ｎｄｔｘｅｓｏｏｕｒｉｉｎＨＴ－ｅｌｙＶｐｒＺＨＡＮＧａｎｃａｏ。Ａｎｈｂｔｏｆｔｏｌｆｒｔｏｎｏ２９ａｈｅｅｐｒｓｉｎｆｓｖｖｎｉ２９ｃｌｓｂＨ —ｈＭ

结肠癌细胞株HT-29中针对Survivin基因的RNAi实验

ＨＥＩＬＯＮＧＪＡＮＧＩＭＥＤＩＮＥＣＩＡＮＤＨＡＲＭＡＣＪｎ．０２Ｖｏ．５Ｎｏ３ＰＹｕ２１．１３．
・５・３
结肠癌细胞株ＨＴ一２９中针对Ｓｒｉｎ基因的ＲｕｖｉｖＮＡｉ验实
张爽张，楠董慧慧袁禧先，，
升趋势，００年全世界新发病例９２０５万例，中约５其Ｏ万例死亡［。ｕｖｖｎ又名生存素，目前发现最强的凋亡抑制蛋白１Ｓｒｉ］ｉ是家族的新成员，肿瘤的发生发展过程中具有重要作用。近在
几年来，为肿瘤基因治疗的靶点备受瞩目。本实验通过构作
对质粒测序的结果进行分析，实插入的ｓＲＮ片段的碱证ｈＡ基序列与所设计序列完全一致。１２２细胞培养与脂质体转染：选生长状况良好的ＨＴ．．挑一２９细胞，１ｅ培养皿生长密度达到７％时，用胰酶在０ｒａ５使
功的沉默了Ｓｒｉｉｕｖｖｎ基因。
中图分类号：８；３．５文献标识码：文章编号：０８１４２１）３０５ — ０Ｑ７６Ｒ７５３Ｂ１０一Ｏ０（０２０ — ０３２
大肠癌位于消化道恶性肿瘤第３，发病率呈逐年上位其
（．木斯大学附属第一医院消化内科，龙江佳木斯１４０；２佳木斯市中心医院消化科，１佳黑５０３；黑龙江佳木斯１４０）５０２

肿瘤干细胞在人结肠癌细胞株HT29耐奥沙利铂中的作用探讨

肿瘤干细胞在人结肠癌细胞株HT29耐奥沙利铂中的作用探讨目的探讨肿瘤干细胞（cancer stem cell，CSC）在人结肠癌细胞株HT29对奥沙利铂（L-OHP）产生获得性耐药中的作用。

方法采用浓度递增法诱导产生人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HT29/L-OHP。

采用As2O3逆转HT29/L-OHP的耐药性。

采用MTT法检测As2O3逆转前后HT29/L-OHP的增殖能力和对L-OHP 的敏感性。

采用实时荧光定量PCR检测As2O3逆转前后HT29/L-OHP中Sox-2、miR-200c和let-7的表达。

结果①在L-OHP（12 μmol/L）的作用下，HT29/L-OHP 的增殖能力显著高于HT29（P 0.05）。

HT29和HT29/L-OHP对L-OHP的IC50分别为12.1 μmol/L和138.4 μmol/L，耐药指数为11.44。

②0.20 mg/L 的As2O3预处理后，降低了HT29/L-OHP对L-OHP的耐药性，逆转倍数为3.76，相对逆转效率为80.4%。

③相对于HT29，HT29/L-OHP中Sox-2的表达显著增加[（0.072±0.038）比（0.019±0.010）]（P 0.05），但是在第3～7天，HT29/L-OHP 细胞增殖速度显著高于HT29细胞（P 0.05）（图1），HT29/L-OHP细胞的倍增时间接近于无L-OHP作用的HT29细胞（26.3 h）。

MTT结果显示，HT29/L-OHP 细胞的IC50为138.4 μmol/L，HT29细胞的IC50为12.1 μmol/L，RI为11.44。

2.2 As2O3细胞毒性实验结果结果表明，0.25 mg/L的As2O3对HT29细胞无毒性反应，但是当浓度超过0.25 mg/L时，As2O3呈现出剂量依赖性的毒性效应（表2），可以认为0.20 mg/L 的As2O3为无细胞毒性剂量。

新型微管蛋白抑制剂TH320抗人结肠癌HT-29细胞增殖作用及其机制研究

新型微管蛋白抑制剂TH320抗人结肠癌HT-29细胞增殖作用及其机制研究新型微管蛋白抑制剂TH320抗人结肠癌HT-29细胞增殖作用及其机制研究摘要：结肠癌是一种常见的恶性肿瘤，严重威胁人类健康。

本研究旨在探索新型微管蛋白抑制剂TH320对人结肠癌HT-29细胞增殖的作用，并研究其作用机制。

实验利用MTT法测定细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot检测关键蛋白的表达水平。

结果表明，TH320能够明显抑制HT-29细胞的增殖，诱导细胞凋亡。

此外，研究发现TH320通过下调凋亡抑制蛋白Bcl-2和c-Myc的表达水平，上调凋亡促进蛋白Bax和caspase-3的表达水平，从而调控细胞凋亡通路。

细胞周期分析结果显示，TH320还能抑制HT-29细胞的细胞周期进程。

综上所述，TH320通过抑制HT-29细胞的增殖并诱导细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。

本研究对于探索新型微管蛋白抑制剂的抗癌机制具有重要意义。

关键词：结肠癌；TH320；HT-29细胞；细胞增殖；细胞凋亡；作用机制引言：结肠癌是一种较为常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率逐年上升，且常常在隐匿期内表现出轻微的症状，导致癌症早期诊断和治疗的困难。

虽然目前结肠癌的治疗手段不断进步，包括手术、放疗、化疗等，但治疗效果仍然不尽如人意。

因此，迫切需要开发新的抗癌药物以及深入研究其作用机制。

微管蛋白是细胞骨架的重要组成部分，与细胞的形态保持、运输物质以及细胞分裂等过程密切相关。

细胞增殖过程中，微管蛋白的正常结构和功能对于细胞的生长和分裂至关重要。

因此，微管蛋白抑制剂成为了研究的热点之一。

TH320是一种新型的微管蛋白抑制剂，已被证明在多种癌症细胞中具有抗肿瘤活性。

然而，其对于结肠癌细胞的抗增殖和诱导凋亡作用及其作用机制尚不清楚。

因此，本研究将重点研究TH320抗人结肠癌HT-29细胞增殖作用及其可能的作用机制。

材料与方法：1. 细胞培养：使用人结肠癌HT-29细胞株作为研究对象，采用DMEM培养基培养细胞。

抑制人结肠癌HT-29细胞增殖乳酸菌有效成分的筛选

The cell wall of lactic acid bacteria X12, M5 and K14 induced apoptosis of HT-29 cells, and regulated the distribution of cancer cell cycle. Finally, the
关键词：乳酸菌；人结肠癌细胞系HT-29细胞；细胞壁；细胞质；细胞凋亡
中图分类号：Q939.9
文章编号：0254-5071（20员9）09-0028-04
doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2019.09.006
引文格式：王淑梅，张兰威，张莉丽，等. 抑制人结肠癌HT-29细胞增殖乳酸菌有效成分的筛选[J]. 中国酿造，2019，38（9）：28-31.
益生菌是生活在机体内并且有益于宿主健康的一类
活的微生物，通常指具有高选择性的乳酸菌，其通过菌体
细胞各组分发挥功能作用，如细胞壁、细胞质、菌体肽聚糖
和菌体脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid，DNA）等， [1-2]
其中最常见的是乳酸杆菌（
）和双歧杆菌（
）。目前，关于乳酸菌提高人体免疫功能[3]、抗肿
乳酸菌X11、X12、M5、K14的细胞壁和乳酸菌M5、K14的细胞质对HT-29细胞增殖能力有显著抑制作用（＜0.05）；HT-29细胞经乳酸菌
细胞壁或细胞质（蛋白质含量为80 滋g/mL）处理48 h后，脱氧核糖核酸（DNA）出现了明显的弥散拖尾形态；乳酸菌X12、M5和K14细胞
壁诱导HT-29细胞凋亡，并调控癌细胞周期分布。通过筛选最终获得乳酸菌X12、M5和K14的细胞壁成分具有抗结肠癌作用。
瘤及抑菌作用[4-5]的研究已有相关报道。随着对乳酸菌研究

沙利度胺调控PD-L1抑制HT-29结肠癌细胞的作用及机制研究

药学与临床研究Pharmaceutical and Clinical Research 沙利度胺调控PD-L1抑制HT-29结肠癌细胞的作用及机制研究周宋汇",沈培亮2,汪瑞辰1江苏省肿瘤医院，江苏省肿瘤防治研究所,南京医科大学附属肿瘤医院，南京210009；"伊尔瑞生物科技（江苏）有限公司，南京211500摘要目的：探讨沙利度胺对HT-29结肠癌细胞的抑制作用及其机制。

方法：CCK-8检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞增殖的作用；流式细胞术检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞凋亡的作用和对HT-29结肠癌细胞PD-L1表达的作用；Western Blot检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞c-Myc、STAT3、HIF-1蛋白表达的影响。

结果：沙利度胺各浓度（40、80、160、320"mol-L-1）明显抑制HT-29结肠癌细胞的增殖；沙利度胺各浓度（20、40、80"mol-L-1）明显促进HT-29结肠癌细胞的凋亡，明显减少HT-29结肠癌细胞表面PD-L1的表达，明显减少HT-29结肠癌细胞c-Myc、STAT3、HIF-1蛋白的表达。

结论：沙利度胺对HT-29结肠癌细胞具有抑制作用,其机制可能与减少PD-L1表达及抑制癌细胞上游c-Myc、STAT3、HIF-1信号分子表达有关。

关键词沙利度胺；PD-L1；结肠癌细胞；免疫检查点中图分类号R965.1文献标志码A文章编号1673-7806（2020）03-161-04我国结肠癌的患者逐年增多，且呈现年轻化的态势；结肠癌具有发病隐秘、致死率极高的特点［1，2］,亟待寻求特效的治疗药物。

随着肿瘤免疫疗法研究的深入，从这一角度入手研发有效药物有望成为潜在治疗肿瘤的手段叫目前免疫检查点程序性死亡受体_1（programmed death receptor-1,PD-1）/程序性死亡配体-"（programmed death ligand-1,PD-L1&信号通路是研究的热点［4,5］O肿瘤细胞表面表达的PD-L1与体内淋巴细胞表面的PD-1受体相结合之后，能够诱导后者发生免疫功能的丧失甚至凋亡,进而出现免疫逃逸问。

siRNA靶向干扰PICK1对人结肠癌HT--29细胞增殖及侵袭的影响的开题报告

siRNA靶向干扰PICK1对人结肠癌HT--29细胞增殖及侵袭的影响的开题报告1. 研究背景结肠癌是一种常见的恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居恶性肿瘤前列。

目前，化疗和放疗是结肠癌治疗的主要手段，但由于药物耐受性和副作用等问题，治疗效果不理想。

因此，开发新的治疗方式和靶向治疗靶点成为研究热点。

PICK1（protein interacting with C kinase 1）是一种蛋白质，与多种信号传导通路和蛋白质相互作用。

近期研究表明，PICK1在多种肿瘤中表达水平上调，并与肿瘤的增殖、侵袭、转移等过程密切相关。

因此，靶向干扰PICK1可能是一种新型治疗结肠癌的策略。

siRNA（small interfering RNA）是一种常见的RNA干扰技术，可通过特异性的介导RNA降解从而靶向干扰目标基因的表达。

因此，本研究旨在利用siRNA技术干扰PICK1基因的表达，探究其对人结肠癌HT-29细胞增殖及侵袭的影响，为结肠癌的治疗和预防提供新的研究思路。

2. 研究目的本研究的主要目的是通过siRNA靶向干扰PICK1基因的表达，研究其对人结肠癌HT-29细胞增殖和侵袭的影响，并探究PICK1在结肠癌中的作用机制，为结肠癌的治疗和预防提供新的思路和方向。

3. 研究方法3.1 细胞培养和分组选取人结肠癌HT-29细胞作为研究对象，采用无血清培养基进行细胞培养。

将细胞分为对照组、阴性对照组和干扰组。

3.2 siRNA干扰采用RNAi技术干扰PICK1基因的表达。

选择适当浓度的siRNA，通过细胞转染的方式将siRNA引入HT-29细胞中，使其靶向干扰PICK1基因的表达。

3.3 细胞增殖实验采用MTT法和细胞计数法检测不同处理组HT-29细胞的增殖情况。

通过比较各组细胞的OD值和细胞数，分析PICK1基因干扰对HT-29细胞增殖的影响。

3.4 细胞侵袭实验采用Transwell实验检测细胞侵袭能力。

将细胞悬液加入上室，下室加入含有诱导剂的培养基，经过一定时间，将上室的细胞刷除，将下室的细胞进行固定、染色和计数，以此评估细胞侵袭能力的变化。

Twist基因表达增强结肠癌细胞HT-29侵袭转移能力的体内研究的开题报告

Twist基因表达增强结肠癌细胞HT-29侵袭转移能力的体内研究的开题报告一、研究背景和意义：结肠癌是全球最常见的消化系统恶性肿瘤之一，其高度浸润和转移能力是导致结肠癌治疗失败和死亡的主要原因之一。

从分子水平上探究结肠癌侵袭和转移的机制，对于结肠癌的早期诊断和治疗具有重要的价值。

Twist是一种转录因子，能够调控细胞极性、增殖、分化以及干细胞的增殖能力。

在多种肿瘤类型中，Twist表达水平升高与肿瘤的浸润和转移能力增加密切相关。

已有研究证实，在结肠癌组织中，Twist的表达水平也较高，但其作用机制尚未完全解明。

因此，本研究计划从Twist基因与结肠癌细胞侵袭和转移的关系入手，进一步揭示Twist在结肠癌中的作用机制和生物学意义。

二、研究目的和方法：本研究旨在探究Twist基因在结肠癌细胞HT-29中的表达水平与侵袭转移能力的相关性，并进一步考察Twist基因表达增强对HT-29细胞侵袭转移能力的影响。

具体研究方法如下：1. 检测Twist基因在结肠癌组织和细胞系中的表达水平，确认HT-29细胞中Twist表达水平相对较高。

2. 分别采用质粒转染和转染抑制RNA的方式，增强和抑制HT-29细胞中Twist基因的表达水平，通过Western blot和qPCR检测Twist表达水平的变化。

3. 利用Transwell实验和划痕实验等方法，研究Twist表达增强对HT-29细胞侵袭转移能力的影响。

4. 结合生物信息学分析，探索Twist基因调控的下游通路和作用机制。

三、研究预期结果和意义：预计通过以上研究方法，本研究可初步确定Twist基因与结肠癌细胞HT-29侵袭转移能力的相关性。

进一步实验结果可能发现Twist基因表达增强可明显增强HT-29细胞侵袭转移能力。

生物信息学分析有望揭示Twist基因调控的下游通路和作用机制，这些结果有望对结肠癌早期诊断和治疗提供新的思路和理论依据。

PDT诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡和坏死的实验研究的开题报告

PDT诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡和坏死的实验研究的开题报告研究背景和意义：结肠癌作为恶性肿瘤的一种，已经成为了导致世界范围内人类死亡的主因之一。

据统计，结肠癌每年在全球范围内造成超过170万的死亡，而仅有50%的结肠癌患者能够得到适时的治疗。

因此，寻找结肠癌的有效治疗方法至关重要。

PDT光动力疗法是一种新型的治疗肿瘤的方法，它通过光感染剂的作用，结合光源，产生高效的、局部的细胞破坏反应，达到杀灭癌细胞的目的。

而凋亡和坏死是PDT诱导的肿瘤细胞死亡方式之一。

近年来，越来越多的研究工作表明，PDT可通过诱导细胞凋亡和坏死，从而有效地抑制肿瘤生长和转移。

因此，本研究旨在探讨PDT光动力疗法对人结肠癌HT-29细胞凋亡和坏死的影响，为结肠癌的治疗提供新的治疗思路。

研究方法：1.培养HT-29细胞：选用人结肠癌HT-29细胞，进行细胞培养和繁殖，获得相对一致的细胞种群。

2.构建实验组和对照组：将HT-29细胞分成实验组和对照组，分别给予空白对照处理和PDT光动力疗法处理。

3.光敏剂处理：将PDT光敏剂注射至实验组中，进行光敏预处理。

4.光照处理：使用PDT的红光波长，对实验组进行光照处理。

5.细胞检测：使用细胞增殖试剂盒检测HT-29细胞的增殖情况，并分析细胞凋亡和坏死情况。

预期结果：1. PDT光动力疗法对HT-29细胞的增殖具有抑制作用。

2. PDT光动力疗法可以诱导HT-29细胞的凋亡和坏死，而且凋亡和坏死的比例随着光敏剂处理时间的增加而增加。

3. PDT光动力疗法对HT-29细胞的影响存在剂量效应关系，光敏剂浓度和光源照射强度越大，对细胞的影响越大。

总结：本研究成功地给出了一种新型的治疗结肠癌的方法——PDT光动力疗法，其可以通过光照PDT诱导肿瘤细胞凋亡和坏死，达到杀灭癌细胞的目的。

而且，PDT诱导肿瘤细胞凋亡和坏死具有剂量效应关系。

因此，我们可以在未来的临床治疗中，选用适当的光源和光敏剂，对结肠癌患者进行PDT光动力疗法，来有效地杀灭癌细胞，提高结肠癌患者的生存率。

脱氧紫色杆菌素抑制结肠癌TH29细胞增殖及诱导凋亡作用与机制

脱氧紫色杆菌素抑制结肠癌TH29细胞增殖及诱导凋亡作用与机制张海燕;孙勇;夏惠;王锋;王少康;邢新会;孙桂菊;彭景【摘要】目的探讨脱氧紫色杆菌素(Deoxyviolacein)对人结肠癌HT29细胞增殖抑制和诱导凋亡及其可能机制.方法用不同浓度的脱氧紫色杆菌素处理HT29细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,检测脱氧紫色杆菌素对HT29细胞的抑制率;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Western Blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase9表达的变化.结果脱氧紫色杆菌素对HT29细胞有明显的增殖抑制作用;可提高G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例;细胞凋亡率升高,Bax和Caspase9蛋白表达升高,Bcl-2蛋白的表达降低.结论脱氧紫色杆菌素抑制结肠癌HT29细胞增殖并诱导凋亡,其凋亡机制可能作用于线粒体介导的内源性通路.%Objective To evaluate the effect of deoxyviolacein on the apoptosis in HT29 cells and its possible mechanisms of anticancer effects.Methods In vitro,human colon cancer HT29 cells were treated by deoxyviolacein in a series of concertrations.The absorbance value was detected by means of MTT assay and growth inhibition rate was calculate.Cell cycle and apoptosis was assessed by flow cytometry.The expression of Bax,Bcl-2 and Caspase9 were analyzed by Western blotting.Results Deoxyviolacein could inhibit the growth of human colon cancer HT29 cells.The cells at period G0/G1 and the apoptosis rates were significantly increased,and the cells at period S were significantly decreased.The expression of Bax,Caspase9 were upregulated and Bcl-2 was downregulated by deoxyviolacein at 48 hours.Conclusions Deoxyviolacein could inhibit the growth and induceapoptpsis of human colon cancer HT29 cells.The mechanism may be associated with up-regulation of Bax and Caspase9 and down-regulation of Bcl-2 expression.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2017(027)005【总页数】5页(P89-93)【关键词】脱氧紫色杆菌素;HT29细胞;凋亡【作者】张海燕;孙勇;夏惠;王锋;王少康;邢新会;孙桂菊;彭景【作者单位】扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州 225000;东南大学公共卫生学院营养与食品卫生系, 教育部环境医学工程重点实验室,南京 210009;清华大学化学工程系,工业生物催化教育部重点实验室, 北京 100084;中国肉类食品综合研究中心,北京 100068;东南大学公共卫生学院营养与食品卫生系, 教育部环境医学工程重点实验室,南京 210009;东南大学公共卫生学院营养与食品卫生系, 教育部环境医学工程重点实验室,南京 210009;东南大学公共卫生学院营养与食品卫生系, 教育部环境医学工程重点实验室,南京 210009;清华大学化学工程系,工业生物催化教育部重点实验室, 北京 100084;东南大学公共卫生学院营养与食品卫生系, 教育部环境医学工程重点实验室,南京 210009;扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州 225000【正文语种】中文【中图分类】R-33结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，近年来发病率和死亡率总体呈上升趋势[1]，位列全球女性和男性常见恶性肿瘤的第二位和第三位[2]。

苦参碱逆转人结肠癌细胞株（HT-29）奥沙利铂耐药性的作用及机制研究

苦参碱逆转人结肠癌细胞株（HT-29）奥沙利铂耐药性的作用及机制研究张冬梅;张雅明【摘要】Objective To study of matrine on the reversal of multi-drug resistance in HT-29/OXA cells and explore its underlying mechanisms. Methods Oxaliplatin resistant HT-29/OXA cells were established by gradually increasing the concentration of medicines. The reverse efficacy of Matrine on HT-29/OXA cells was determined by CCK-8 assay. The apoptosis and cell cycle were detected by flow cytometry. The expression levels of lung resistance protein (LRP) and P-glycoprotein (P-gp) mRNA and proteins was determined by quantitative real time PCR (qRT-PCR) and Western blot, respectively. Results Matrine can increase the sensibility of HT-29/OXA to oxaliplatin and reverse the part resisitance. Matrine (0.5μg/mL) and matrine (3.0 μg/mL) alone had no effect on the cell cycle and apoptosis in HT-29/OXA cells. The oxaliplatinin combination with matrine significantly inhibited cell proliferation and induced apoptosis. Oxaliplatin (0.5 μg/mL) and matrine (3.0 μg/mL) alone had no ef fect on the expression level of LRP and P-gp mRNA and protein in HT-29/OXA cells. The expression of LRP and P-gp mRNA and protein was lower with drug combination. Conclusion Matrine could partially reverse the multi-drug resistance of HT-29/OXA cells to oxaliplatin, which may be related to the lower expression levels of LRP and P-gp.%目的：研究苦参碱对结肠癌耐药细胞HT-29/奥沙利铂(Oxaliplatin, OXA)耐药性的逆转作用并探讨其可能的作用机制。

槲皮素对人结肠癌细胞HT29的增殖抑制及诱导凋亡的体外实验研究

槲皮素对人结肠癌细胞HT29的增殖抑制及诱导凋亡的体外实验研究田波;傅颖珺;田亮【期刊名称】《南昌大学学报（医学版）》【年(卷),期】2012(052)004【摘要】目的研究槲皮素( quercetin,Que)对人结肠癌细胞株HT29的增殖抑制作用及凋亡诱导效应,并通过Fas、Caspase-3蛋白的表达变化对其分子作用机制进行探讨.方法常规培养结肠癌HT29细胞,分别用40、80、120 μmol·L-1Que(Que1、Que2、Que3组)、4.02 mmol·L-1苦参碱(Mat组,为阳性对照)作用于细胞,以未加药组为对照组.采用MTT法检测细胞的增殖抑制率,透射电镜观察细胞的超微结构,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,Western Blot法检测细胞Fas和Caspase-3蛋白的表达.结果 Que能显著增加细胞增殖的抑制率(P＜0.01),并呈剂量依赖关系;且Que2、Que3组的抑制率随着培养时间的延长而升高,呈时间依赖关系.电镜下Que 各组均呈现不同程度的凋亡特征形态变化:核固缩、染色质边集、并见核碎裂,凋亡小体出现.Que能明显增加细胞的凋亡率(P＜0.01)、能显著增加Fas和Caspase-3的表达(P＜0.01),并均呈剂量依赖关系.结论 Que对HT29细胞具有增殖抑制作用,并能诱导其凋亡,其作用机制可能与激活死亡受体Fas介导的Fas-Caspase-3凋亡信号通路有关.%Objective To investigate the effects of quercetin (Que) on cell proliferation and apoptosis in human colon carcinoma cell line HT29, and to explore the molecular mechanism through examining the changes in Fas and Caspase-3 protein expression. Methods HT29 cells were treated with Que at concentrations of 40 μmol o L-1 (Quelgroup) ,80 μmol o L-1 (Que2 group) and 120 fimol o L-1 (Que3 group). Positive control group was challenged with matrine (4. 02 mmol o L-l). Control cells received the vehicle only. Cell growth,apoptosis,ultrastructure and expression of Fas and caspase-3 protein were measured by MTT.flow cytometry, transmission electron microscope and Western Blot,respectively. Results Que treatment significantly inhibited cell growth in a dose-ependent manner (P<0. 01),and the inhibition rates increased in a time-dependent manner in Que2 and Que3 groups. Examination with the electron microscope showed nuclear condensation, chromatin margination. nuclear fragmentation and apoptotic body formation in cells treated with Que. Furthermore,Que treatment significantly increased cell apoptosis and protein expression of Fas and Caspase-3 in a dose-dependent manner(P<0. 01). Conclu-sion Que can inhibit proliferation and induce apoptosis in HT29 cells through an apoptotic pathway involving Fas-mediated activation of Caspase-3.【总页数】6页(P16-21)【作者】田波;傅颖珺;田亮【作者单位】江西省人民医院药剂科;南昌大学医学院药学系,南昌330006;南昌大学研究生院医学部,南昌330006【正文语种】中文【中图分类】R735.3+5【相关文献】1.槲皮素对人结肠癌细胞体外增殖、凋亡及细胞周期的影响 [J], 侯波;裴锐铮;韩雪梅2.β-榄香烯诱导人结肠癌细胞DLD-1的增殖抑制和凋亡研究 [J], 汪国玉;张蕾;耿亚迪;冯晓俊;陈昭琳;赵晓晓;姜玲;魏伟3.Caspase-3在survivin反义寡核苷酸诱导人结肠癌细胞 HT29凋亡时的表达 [J], 靳秋月;陈立军;呼文亮4.槲皮素对人结肠癌细胞HT29的增殖抑制及诱导凋亡的体外实验研究 [J], 田波;傅颖珺;田亮5.6-姜烯酚诱导人结肠癌细胞HT29凋亡及与VEGFR2表达变化的关系 [J], 王宇锋;孙游;李海;杨春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

葛根素抑制结肠癌HT-29细胞生长及部分机制

葛根素抑制结肠癌HT-29细胞生长及部分机制方海明;梅俏;金娟;许建明【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2008(48)45【摘要】分别采用MTT法、TUNEL法及免疫细胞化学方法,观察葛根素对HT-29细胞增殖的量效和时效关系、增殖与细胞凋亡的影响及细胞核因子-κB(NF-κB)065蛋白表达的影响.发现随着葛根素作用时间和剂量的增加,药物对HT-29细胞的抑制率逐渐增高.TUNEL法和免疫细胞化学染色显示,不同剂量组葛根素可使HT-29细胞凋亡明显增加,PCNA表达显著降低,同时细胞内NF-κB p65蛋白表达显著降低(P＜0.05).认为葛根素具有抗HT-29细胞增殖作用,可能与阻断NF-κB p65蛋白通路,抑制氧化损伤有关.【总页数】3页(P66-68)【作者】方海明;梅俏;金娟;许建明【作者单位】安徽医科大学第一附属医院,安徽合肥,230032;安徽医科大学;安徽医科大学第一附属医院,安徽合肥,230032;安徽医科大学第一附属医院,安徽合肥,230032;安徽医科大学第一附属医院,安徽合肥,230032【正文语种】中文【中图分类】R735.3【相关文献】1.γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用 [J], 徐伟丽;张兰威;杨鑫;单毓娟;Pushparajah Thavarajah;宋微;戴绍春2.二烯丙基二硫对人结肠癌HT-29细胞的生长抑制和细胞周期阻滞作用 [J], 池圣亮;韩子华3.辽东楤木叶总皂苷对结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用及机制研究 [J], 尹丽颖;李凤金;边晓燕;牛雯颖;敖鹏;肖洪彬4.黄芪多糖抑制结肠癌HT-29细胞生长作用研究 [J], 宋鑫; 张俊; 魏立强; 郭文渊; 王仕祺; 陈承魁5.肌醇对结肠癌HT-29细胞体外生长的抑制作用 [J], 赵倩倩;宋扬;刘桂园;陈沉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

奥沙利铂抗人结肠癌细胞株HT29增殖及其机制的研究

奥沙利铂抗人结肠癌细胞株HT29增殖及其机制的研究向征;张才全;汤为学【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2007(29)7【摘要】目的观察抗肿瘤药物奥沙利铂对人结肠癌细胞株HT29体外增殖的影响,初步探讨其作用机制。

方法采用人结肠癌细胞株HT29作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的奥沙利铂对细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察细胞形态和超微结构的改变;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡的情况;免疫细胞化学法检测细胞周期蛋白及凋亡相关基因蛋白的表达。

结果奥沙利铂对HT29细胞的增殖有抑制作用而且呈剂量和时间依赖性。

奥沙利铂作用72h后,电镜可见凋亡细胞及凋亡小体;流式细胞仪检测发现细胞阻滞于G2/M期,G0/G1、S期细胞减少及出现凋亡峰;免疫细胞化学显示Bax和Fas表达增强,CyclinB1、Bcl-2、PCNA表达减弱。

结论奥沙利铂对HT29结肠癌细胞的增殖有抑制作用,其作用机制与细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡有关。

【总页数】4页(P606-609)【关键词】奥沙利铂;结肠癌;增殖;细胞周期;凋亡【作者】向征;张才全;汤为学【作者单位】重庆医科大学附属第一医院普通外科重庆市普通外科学重点实验室;重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R73-36;R735.35【相关文献】1.Curcumin联合放射对人结肠癌细胞株HT29的增殖抑制作用研究 [J], 毛海姣;张小红;廖遇平;杨振;蒋艳君2.鸦胆子素D对结肠癌HT29细胞株增殖的抑制及诱导其凋亡的机制 [J], 郑艳艳;陈晶晶;王兆洪3.肿瘤干细胞在人结肠癌细胞株HT29耐奥沙利铂中的作用探讨 [J], 王怀志;赵国强;石献洲;汪海;张建;李怀洲4.乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响 [J], 赵景明; 李惠; 李国峰5.奥沙利铂抗人肝癌细胞株QGY增殖及其机制的研究 [J], 何松;左国庆;张燕;汤为学因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

姜黄素对人结肠癌细胞HT-29中β-catenin、血管内皮生长因子的影响

姜黄素对人结肠癌细胞HT-29中β-catenin、血管内皮生长因子的影响贾佳;赵逵;张银萍;陈涛;卢光新【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2014(000)014【摘要】目的：研究姜黄素对体外培养人结肠癌HT-29细胞增殖及对细胞株中β-catenin、血管内皮生长因子（ VEGF）表达的影响。

方法采用不同浓度的姜黄素作用于HT-29细胞，MTT法检测细胞增殖情况；Western印迹检测药物处理后β-catenin及 VEGF蛋白的表达。

结果姜黄素对HT-29细胞的增殖具有抑制作用，且呈剂量-时间依赖性（ P＜0.05），测得IC50为19.27μmol/L；在蛋白水平，姜黄素处理后，β-catenin、VEGF的蛋白表达水平降低。

结论姜黄素能够抑制HT-29细胞的增殖，并下调结肠癌细胞HT-29中β-catenin、VEGF的表达。

【总页数】3页(P3940-3942)【作者】贾佳;赵逵;张银萍;陈涛;卢光新【作者单位】湖北医药学院附属人民医院，湖北十堰 563003;遵义医学院;遵义医学院;湖北医药学院附属人民医院，湖北十堰563003;湖北医药学院附属人民医院，湖北十堰 563003【正文语种】中文【中图分类】R735.3+4【相关文献】1.马钱子碱对人结肠癌细胞HT-29增殖与凋亡的影响及相关机制 [J], 王雪;金朗;王炳强2.姜黄素对结肠癌细胞 HT－29中 NDRG2基因表达的影响 [J], 李照伟;柳长明;何其勇;赵东慧;姜吉洵3.胃泌素对人结肠癌细胞Colo320WT中β-catenin/Tcf-4通路的影响 [J], 曹俊;邹晓平;诸葛宇征;于成功;于红刚4.姜黄素与氟尿嘧啶抗人结肠癌细胞株HT-29增殖的协调作用研究 [J], 杜伯雨;姜丽平;夏泉;卢永科;陈新志;仲来福5.阿司匹林对人结肠癌细胞株SW480、HT29中VEGF、β-catenin表达的影响[J], 周元昆;赵逵;金海;刘玉娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

VAV1基因突变触发小鼠T细胞肿瘤

V A V1基因突变触发小鼠T细胞肿瘤生命是增长与变化的精妙编排，其制衡机制可以微调复杂的内在和外在交织的彼此作用。

白细胞(WBC)是有机体抵抗疾病和入侵的免疫防御所不成或缺的;不幸的是，这些机制可能会出错，导致功能失调的细胞数量不受控制地增加，从而导致肿瘤形成。

现在，筑波大学的研究人员已经说明了称为V A V1的特定基因的突变如安在实验小鼠中促进涉及一种白细胞(T 细胞)的肿瘤。

白细胞或白细胞是人体免疫功能的基础。

它们包罗产生抗体的B淋巴细胞，以及具有多种与免疫相关功能的胸腺淋巴细胞或T细胞，因此被称为是因为它们在胸腺中发育。

T细胞肿瘤包罗一种成熟的亚型，称为外周T细胞淋巴瘤。

研究表白，参与T细胞受体信号传导的V A V1基因在几种外周T细胞淋巴瘤变体中发生了改变。

因此，研究小组试图阐明V A V1突变体在体内T细胞恶性转化中的作用。

肿瘤按捺基因p53被称为基因组守护者，因为它可以防止基因组突变。

研究人员在正常(“野生型”)小鼠和缺乏p53的小鼠中复制了在人T细胞肿瘤中发现的V A V1突变。

主要作者福田幸太(Kota Fukumoto)描述了他们的发现：“在一年的不雅察中，没有发现具有V A V1突变的野生型小鼠中出现肿瘤;而缺乏p53的小鼠中出现了未成熟的肿瘤。

值得注意的是，既缺乏p53又具有V A V1突变的小鼠出现了。

与人类外周T细胞淋巴瘤相似的成熟肿瘤，其预后比仅缺乏p53的小鼠差。

”研究小组还将肿瘤细胞移植到缺乏功能性胸腺的小鼠体内。

结果表白，肿瘤的发生可能是由于细胞本身的机制所致。

“我们注意到具有V A V1突变的T细胞肿瘤表示出Myc途径富集，以及体细胞拷贝数改变(SCNA)，包罗在Myc基因座，”资深作者Shigeru Chiba教授解释说。

值得注意的是，Myc是一个调节基因和原癌基因家族，而SCNAs会导致DNA拷贝差异，这两个都是肿瘤形成的独特标记。

千叶教授补充说：“有趣的是，对Myc途径的药物按捺增加了带有V A V1突变肿瘤的小鼠的整体存活率。