AKTAPrimer层析系统在天然产物分离中实验
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PrimeView——软件系统-数据采集
运行曲线图谱（Curve）： 记录系统采集到的全部数据， 系统开始运行后，自动开始记 录，结束后，自动保存。
运行日志（Logbook）： 记录系统收到的所有指令
AKTA Primer
AKTA Primer
PrimeView——数据采集
选择浏览曲线及 设定曲线颜色
谢谢观赏
组分收集器 控制面板 系统泵
AKTA Primer
AKTA Prime 主机
AKTA Primer
AKTA Prime 流程图
AKTA Prime 流程图
面板操作按钮及简要操作命令
面板操作按钮
面板操作按钮
按OK进入子菜单； 按ESC退到上级菜单； 按上下箭头，可选择菜单命令、调整参数等。
基本知识
AKTA--分离和纯化各类生物分子
•天然蛋白质 •重组和融合蛋白质 •肽类 •寡核苷酸 •质粒 •病毒 •抗生素 •生物碱, TCM •。。。。。。等等
AKTA Primer
AKTA Primer 系统组成
AKTA Prime + PrimeView
AKTA Primer
AKTA Prime 主机
操作命令简介 子菜单
以Manual Run为例：
单位 ml、min 浓度 %B 梯度 （长度ml/目标浓度%B） 流速 ml/min 收集单位 ml、min、drop 收集数量 （每管） 限压 （保护层析柱） MPa 缓冲阀位 1-8 样品阀位 waste、load、inject 开始
AKTA Primer
实验注意事项
设置限压0.3MPa。 排尽注Βιβλιοθήκη Baidu器内的空气，从上样阀注入样品环，
注射器放在原位不拔出。
实验思考题
蛋白质分离纯化的方法有哪些？请列举2种以 上，并阐述其原理。
利用凝胶层析法分离混合样品时，怎样才能得 到较好的分离效果？
现有含谷氨酸(Glu)、甘氨酸（Gly）、赖氨酸 (Lys)、精氨酸(Arg)和组氨酸(His)的混合溶液， 请设计一个实验对其进行分离，写出实验基本 步骤并预测实验结果。
基本知识
现代柱层析技术的原理
Principles of Operation for Chromatography Techniques
Gel Filtration
Ion Exchange
Hydrophobic Interaction Affinity
Reversed Phase
基本知识
层析介质
硅胶 氧化铝 聚酰胺 大孔树脂 分子筛凝胶 离子交换凝胶 亲和层析介质 反相层析介质
面板操作按钮
分布收集器前进一管
停止程序或方法运行
梯度运行过程中，按此键，系统将保 持当前浓度运行，而流速和分步收集 继续，再按一下，继续梯度运行 按此键，系统暂停运行，包括泵和收 集，再按一下，继续
操作命令简介 主菜单
预编好的方法模板 运行保存的方法
手动运行 编辑方法 将方法拷入电脑或拷回 设定系统参数 检查系统状态
设定X，Y轴的 坐标范围
实验的基本内容
实验题目——蛋白质脱盐
实验目的 1.了解层系技术的理念，基本操作和应用 2.掌握分子筛层析的原理，了解其用途； 3.熟悉AKTA Prime 的操作。 实验原理
实验材料
层析介质 葡聚糖凝胶——G25
分离对象 脱除含1M硫酸铵的小牛血清中的盐
实验试剂 0.15M的氯化钠溶液
运行曲线图谱（Curve）： 记录系统采集到的全部数据， 系统开始运行后，自动开始记 录，结束后，自动保存。
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基本知识
AKTA--分离和纯化各类生物分子
•天然蛋白质 •重组和融合蛋白质 •肽类 •寡核苷酸 •质粒 •病毒 •抗生素 •生物碱, TCM •。。。。。。等等
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以Manual Run为例：
单位 ml、min 浓度 %B 梯度 （长度ml/目标浓度%B） 流速 ml/min 收集单位 ml、min、drop 收集数量 （每管） 限压 （保护层析柱） MPa 缓冲阀位 1-8 样品阀位 waste、load、inject 开始
AKTA Primer
实验注意事项
设置限压0.3MPa。 排尽注Βιβλιοθήκη Baidu器内的空气，从上样阀注入样品环，
注射器放在原位不拔出。
实验思考题
蛋白质分离纯化的方法有哪些？请列举2种以 上，并阐述其原理。
利用凝胶层析法分离混合样品时，怎样才能得 到较好的分离效果？
现有含谷氨酸(Glu)、甘氨酸（Gly）、赖氨酸 (Lys)、精氨酸(Arg)和组氨酸(His)的混合溶液， 请设计一个实验对其进行分离，写出实验基本 步骤并预测实验结果。
基本知识
现代柱层析技术的原理
Principles of Operation for Chromatography Techniques
Gel Filtration
Ion Exchange
Hydrophobic Interaction Affinity
Reversed Phase
基本知识
层析介质
硅胶 氧化铝 聚酰胺 大孔树脂 分子筛凝胶 离子交换凝胶 亲和层析介质 反相层析介质
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分布收集器前进一管
停止程序或方法运行
梯度运行过程中，按此键，系统将保 持当前浓度运行，而流速和分步收集 继续，再按一下，继续梯度运行 按此键，系统暂停运行，包括泵和收 集，再按一下，继续
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预编好的方法模板 运行保存的方法
手动运行 编辑方法 将方法拷入电脑或拷回 设定系统参数 检查系统状态
设定X，Y轴的 坐标范围
实验的基本内容
实验题目——蛋白质脱盐
实验目的 1.了解层系技术的理念，基本操作和应用 2.掌握分子筛层析的原理，了解其用途； 3.熟悉AKTA Prime 的操作。 实验原理
实验材料
层析介质 葡聚糖凝胶——G25
分离对象 脱除含1M硫酸铵的小牛血清中的盐
实验试剂 0.15M的氯化钠溶液