几类类天然产物的提取分离方法
提取和纯化海洋中的天然产物
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提取和纯化海洋中的天然产物海洋是地球上最广阔的自然资源之一,其中包含着丰富多样的生物质。
这些生物在海洋中生长,具备了独特的适应能力,因此产生了许多珍贵的有机分子。
这些天然产物具有广泛的应用领域,包括药物开发、食品工业、化妆品等。
为了利用这些天然产物,需要进行提取和纯化的过程,以获取高纯度和高质量的活性成分。
本文将介绍提取和纯化海洋中的天然产物的方法和技术。
一、提取方法在提取天然产物的过程中,需要选择适当的提取方法,以保留生物活性成分并去除无关物质。
常用的提取方法包括溶剂提取、超声波辅助提取、酶解提取等。
1. 溶剂提取法溶剂提取法是最常用的提取方法之一。
它利用溶剂的选择性溶解性质,将目标物质从固体或液体基质中分离出来。
在海洋中的天然产物提取中,醇类、酯类等有机溶剂常被使用。
这些溶剂可以通过不同的萃取工艺,如浸提、渗漏等方式,将有机物质从海洋生物中萃取出来。
2. 超声波辅助提取法超声波辅助提取法是近年来发展起来的一种新型提取技术。
它利用超声波的机械作用和声化学效应,能够加速提取物质的转移和扩散过程。
在海洋天然产物的提取中,超声波能够破坏细胞壁,促进细胞内物质的释放,提高提取效率。
3. 酶解提取法酶解提取法是利用酶的生物催化作用,将生物材料中的有用组分释放出来。
在海洋天然产物的提取中,可以使用特定的酶来降解生物材料中的蛋白质、多糖等组分,以提取目标物质。
这种方法不仅具有高效率和高选择性,还能够保持天然产物的活性。
二、纯化技术提取出的海洋天然产物中常常包含着多种复杂的化合物,需要进行纯化才能得到纯净的化合物。
纯化技术主要包括色谱法、结晶法、膜分离法等。
1. 色谱法色谱法是一种基于物质在固相和液相之间的差异性分离原理的方法。
常用的色谱技术包括薄层色谱、柱层析、高效液相色谱等。
通过控制流动相和固定相的组成和条件,可以实现对海洋天然产物的分离和纯化。
2. 结晶法结晶法是通过溶剂的蒸发或降温,使溶解物质逐渐结晶出来。
分析天然产物的分离与鉴定方法
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分析天然产物的分离与鉴定方法天然产物是指从动植物中提取的具有药用、保健或化妆品等用途的化合物。
由于天然产物的复杂性和多样性,分离和鉴定方法对于研究和应用具有重要意义。
本文将从分离和鉴定两个方面进行探讨。
一、分离方法1. 薄层色谱法(TLC)TLC是一种简单、快速且经济的分离方法,常用于初步筛选和纯化天然产物。
通过将待测样品溶解在合适的溶剂中,然后在薄层硅胶或薄层聚脂酰胺基质上涂布样品,再将其置于合适的溶剂系统中进行展开。
展开过程中,不同组分会在硅胶上以不同速度移动,从而实现分离。
之后,可以使用紫外灯或化学试剂对分离的斑点进行检测和定性分析。
2. 柱层析法柱层析法是一种常用的分离方法,根据化合物在固定相和流动相之间的相互作用力差异实现分离。
常见的柱层析方法包括正相层析和反相层析。
正相层析使用极性较大的固定相,适用于分离极性化合物;反相层析则使用非极性固定相,适用于分离非极性化合物。
柱层析法可以通过调整流动相的组成、流速和温度等参数来实现分离和纯化。
3. 液液萃取法液液萃取法是一种将目标化合物从混合物中转移到溶剂中的方法。
通常使用有机溶剂作为萃取剂,将其与待测样品混合,通过摇床或离心机等设备进行充分混合,然后分离出有机相。
有机相中含有目标化合物,可以通过蒸发或浓缩等方法进行纯化。
二、鉴定方法1. 紫外-可见光谱法(UV-Vis)紫外-可见光谱法是一种常用的分析方法,可用于确定天然产物的吸收峰和吸收强度,从而推测其结构和功能。
通过将样品溶解在适当的溶剂中,然后使用紫外-可见光谱仪测量样品在一定波长范围内的吸收情况。
根据吸收峰的位置和形状,可以初步判断天然产物的结构特征。
2. 质谱法(MS)质谱法是一种高灵敏度的分析方法,可用于确定天然产物的分子量和分子结构。
通过将样品转化为气态或溶液态,然后使用质谱仪对样品进行离子化和分析。
质谱仪可以根据离子的质荷比和相对丰度,推测化合物的分子式和结构。
3. 核磁共振波谱法(NMR)核磁共振波谱法是一种常用的分析方法,可用于确定天然产物的结构和功能。
提取和纯化海洋中的天然产物
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提取和纯化海洋中的天然产物海洋中蕴藏着丰富的天然产物资源,包括各种有益的化合物和生物活性分子。
提取和纯化这些海洋天然产物对于深入研究其性质、开发应用具有重要意义。
本文将介绍提取和纯化海洋中的天然产物的方法与技术,并探讨其在不同领域的应用。
一、提取方法提取海洋中的天然产物是研究其性质的关键步骤。
常用的提取方法包括溶剂提取、超声波提取和微波辅助提取等。
溶剂提取是一种常用的海洋产物提取方法。
该方法利用溶剂的溶解性质,将待提取物质从海洋样品中转移到溶剂中,然后通过蒸发或其他方法将溶剂去除,得到纯净的提取产物。
超声波提取是利用超声波的机械振动作用促进提取过程的一种方法。
超声波的高频振动能够提高提取效率,加速活性成分的释放和溶剂的渗透,从而提高提取产物的纯度和得率。
微波辅助提取是应用微波加热原理进行提取的方法。
微波通过分子的振动和摩擦发热,从而使溶剂迅速沸腾并穿透样品,从而实现快速提取的目的。
二、纯化方法提取获得天然产物后,为了更好地研究和应用,需要对其进行纯化。
常用的纯化方法包括色谱技术、结晶技术和萃取技术等。
色谱技术是一种常用的天然产物纯化方法。
其中包括柱色谱、薄层色谱和高效液相色谱等。
色谱技术通过溶液在不同材料上的吸附与解吸作用来分离和纯化目标化合物,具有高效、灵敏度高的特点。
结晶技术是利用物质在饱和溶液中的溶解度随温度、浓度的变化而发生结晶的现象进行纯化的方法。
通过调整溶剂的温度和浓度等条件,使目标化合物结晶出来,得到纯净的产物。
萃取技术是一种通过溶剂选择性地提取物质的方法。
常用的萃取方法有固相萃取、液液萃取等。
这些方法通过溶剂与目标化合物之间的亲和性来实现分离和纯化。
三、应用领域提取和纯化海洋中的天然产物在多个领域具有广泛的应用。
以下列举几个主要的应用领域:1. 药物研发:海洋中的天然产物具有丰富的生物活性物质,可作为开发新药物的重要来源。
通过提取和纯化海洋中的天然产物,研究其抗菌、抗肿瘤、抗炎等活性,为药物的研发提供了重要的基础。
化学中的天然产物提取技术
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化学中的天然产物提取技术自然界中存在着大量的天然产物,这些产物往往被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域中。
然而,天然产物的提取并不是一件容易的事情,需要运用到化学中的各种技术才能达到良好的提取效果。
本文将介绍化学中的天然产物提取技术,并探讨其在实践中的应用。
一、溶剂提取法溶剂提取法是一种常见的提取技术。
该技术运用了物质的相溶性差异,将天然产物从原材料中提取出来。
在溶剂提取法中,先将天然产物与一定量的溶剂混合,待产物与溶剂达到一定平衡后,再将二者分离。
通过重复这一步骤,最终可以得到较纯的天然产物。
溶剂提取法可以用于提取植物中的活性成分、动物中的脂肪、花中的芳香物质等。
例如,提取茶叶中的茶多酚时,可以用70%的乙醇作为溶剂,将茶叶浸泡数小时后,再进行过滤。
通过这样的操作,可以得到纯净的茶多酚。
二、蒸馏法蒸馏法是一种将产物从原料中提取出来的常见技术。
蒸馏法运用了物质沸点不同的原理。
将原料混合物加热并将其蒸发,蒸发的产物汽化后在冷凝器中凝结并收集。
收集后的产物常常比原混合物中的产品更为纯净。
蒸馏法可以用于提取许多天然产物,包括水、酒精、醋酸、乙醚、植物精油等。
例如,将薄荷叶放入蒸馏器中加热,将会得到纯净的薄荷精油。
三、固相萃取法固相萃取法是一种提取天然产物的分离技术。
该技术常被用于处理大量的样品,例如环境样品、食品样品等。
固相萃取法可以将产物从样品中分离出来,获得较为纯净的提取物质。
固相萃取法需要用到特定的固定相材料,这些材料可以和特定的溶剂相互作用,使得目标成分与其他成分的相互作用力不同,从而可以实现分离。
使用固相萃取法进行提取时,产物先和固定相材料接触一段时间,待产物经过分配吸附在固定相上后,再用溶剂洗涤固定相材料,洗涤液中的产物即为所需提取物。
固相萃取法可以用于提取茶叶、花卉等天然产物。
例如,可以用固相萃取法提取茶叶中的儿茶素,利用特定的固相材料与乙醇相互作用,可以得到高纯度的儿茶素。
四、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一种新兴的提取技术,它采用特殊的溶剂,用高压和高温的条件将该溶剂处理为一种既具有液体的流动性又具有气体的扩散性的物质,从而可以利用它快速提取目标物质。
第三章天然产物的提取分离方法
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超临界流体萃取法
1. 任何一种物质都存在三种相态-气相、液相、固相。当温度和压 力达到一定值时,物质就会出现超临界状态,即气态与液态共存 的一种边缘状态。在此状态中,液体的密度与其饱和蒸汽的密度 相同,因此界面消失。
2. 液、气两相成平衡状态的点叫临界点。临界温度Tc临界压力Pc。 不同的物质其临界点所要求的压力和温度各不相同。
游离型/分子态 B
HA 脂溶性
H+ OH-
OH-
H+
解离型/离子态 BH+
A水溶性
溶解度差异
(3).调节PH
A.酸/碱法(酸提取碱沉淀法): 生物碱的提取、纯化
B.碱/酸法(碱提取酸沉淀法): 黄酮、蒽醌等酚性成分的提取、纯化
C. 调节PH至等电点,沉淀蛋白
超临界流体萃取法
应用
SFE对非极性和中等极性成分的萃取,可克服传统的萃取方法 中因回收溶剂而致样品损失和对环境的污染,尤其适用于对温热不 稳定的挥发性化合物提取;对于极性偏大的化合物,可采用加入极
性的夹带剂如乙醇、甲醇等,改变其萃取范围提高抽提率。
泌指的沉香树
第一节 天然产物有效成分的提取
水蒸汽蒸馏法:挥发性 超临界流体萃取法: 升华法:升华性 压榨法: 溶剂提取法:最常用
水蒸汽蒸馏法
水蒸气蒸馏法是将水蒸气通入不溶或难溶 于水但有一定挥发性的有机物质中,使该有机 物在低于100℃ 的温度下,随着水蒸气一起蒸 馏出来。
超临界流体萃取法
。
二氧化碳超临界流体的P-T性质
超临界流体萃取法 CO2技术特点
无毒、常温、不易燃、无污染等特点, 可确保原有的色、香、味不因受热破坏; 萃取过程中可同时对萃取物进行分离纯化。 该技术适宜于萃取高价值的油脂(包括天然功能性 油脂)、精油、内酯等极性较低的天然产物有效成 分。
几类类天然产物的提取分离方法
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几类类天然产物的提取分离方法本人总结了一些分离方法,以抛砖引玉!总述1)提取前文献查阅综述和药材生药鉴定2)提取方法①粉碎成粗粉②有机溶剂法和水提法③水蒸气蒸馏法④升华法3)分离纯化法①根据物质溶解度的不同进行分离a.温度不同,溶解度不同b.改变溶液的极性去杂c.酸碱法d.沉淀法②根据物质分配比不同极性分离a.液-液萃取法b.反流分布法c.液滴逆流层析法d.高速逆流层析法e.GC法f.LC法:LC分配层析载体主要有---硅胶,硅藻土,纤维素等;有正反相之分;压力有低、中、高之分;载量有分析、制备之分。
③根据物质吸附性不同极性分离a.※极性吸附剂(如SiO2,Al2O3...)极性强,吸附力大※非极性吸附剂 (如活性炭-对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。
b.化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小而定;溶剂的极性大小可按其介电常数大小排列(极性渐大 > ) :己烷苯无水乙醚 CHCl3 AcOEt 乙醇甲醇水 e 1.88 2.29 4.47 5.206.11 26.0 31.2 81.0c.氢键力吸附聚酰胺吸附层析--洗脱剂的洗脱力由小到大为:水 > 甲醇 > 丙酮 > NaOH液 > 甲酰胺 > 尿素水液④根据物质分子的大小进行分离如葡萄糖凝胶(Sephadex G and LH-20...)过泸法等⑤根据物质解离程度不同的分离法离子交换法:强酸: -SO3H强碱: -N+(CH3)3Cl-弱酸: -CO2H弱碱: -NH2(NH,N)一、糖及苷类的提取和分离1 溶剂处理法2 铅盐沉淀法3 大孔树脂处理法4 柱色谱分离法二醌类化合物的提取和分离一提取方法:一般选用甲醇或乙醇为溶剂,可同时将游离态和成苷的蒽醌类化合物从药材中提取出来,浓缩后再依次用有机溶剂提取(多用索氏提取法),可根据极性大小不同进行初步分离(如将苷和苷元分开)。
天然产物的传统提取分离方法及其原理
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天然产物的传统提取分离方法及其原理一、概述天然产物是指由生物体产生的具有特定育胎亲庖、化学结构和生理活性的有机物质。
这些天然产物常常具有重要的药用、保健和化妆品等功能。
为了从天然产物中提取有效成分,人们发展了多种提取分离方法,其中包括传统提取分离方法。
本文将介绍天然产物的传统提取分离方法及其原理。
二、传统提取分离方法1. 水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法是一种古老的提取分离方法,通常用于提取植物中的挥发油。
其原理是利用水蒸气将植物中的挥发性成分带出,再通过冷凝后形成液态,最终分离得到目标物质。
这种方法简单易行,对于一些挥发性成分含量较高的植物很有效。
2. 浸提法浸提法是通过将天然产物与溶剂浸泡一定时间后,再通过过滤或蒸发得到目标成分的方法。
浸提法主要适用于提取植物中的高分子化合物、脂溶性成分和生物碱等。
3. 化学提取法化学提取法是利用化学反应将天然产物中的目标成分转化为易提取的化合物,再通过溶剂提取或结晶蒸发等方法分离得到目标成分。
这种方法通常用于提取生物碱、色素等。
4. 蒸馏法蒸馏法是通过将含有目标成分的液体加热至沸点后,将产生的蒸汽冷凝后收集得到目标成分的方法。
蒸馏法主要适用于提取易挥发的天然产物成分。
5. 萃取法萃取法是将天然产物与合适的溶剂混合,通过溶解和分配平衡来实现目标成分的分离。
这种方法适用于提取天然产物中的脂溶性成分、生物碱等。
三、传统提取分离方法的原理1. 水蒸气蒸馏法的原理水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气的温度和湿度来使植物中的挥发性成分转化为蒸气,再通过冷凝形成液态。
这种方法利用了水蒸气的特性和挥发性成分的物理性质,实现了提取分离的过程。
2. 浸提法的原理浸提法的原理是利用溶剂与植物中的目标成分发生物理或化学作用,使目标成分溶解到溶剂中,最终通过过滤或蒸发分离得到目标成分。
这种方法利用了溶剂的溶解性和植物成分的亲和性。
3. 化学提取法的原理化学提取法的原理是通过化学反应将目标成分转化为易提取的化合物,再通过溶剂提取或结晶蒸发等方法分离得到目标成分。
天然产物化学的提取分离
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3. 煎煮法
操作方法 将天然物原料 粗粉加水加热煮 沸,使其成分提 取出来的方法。 特点 此法简便,原料中大部 分成分被不同程度地提出, 但含挥发性成分及有效成 分遇热易破坏的原料不宜 用此法,对含有多糖类原 料,煎煮后,溶液比较粘 稠,过滤比较困难
4. 回流提取
操作方法和特点 装置图
操作方法:用易挥发 的有机溶剂加热回流提取。
操作技术——显色
观察方法:日光、荧光、显色 通常可先在日光下观察,标出色斑并确定 其位置,然后在紫外光下观察和标记,必 要时再选择显色剂显色观察 若薄层板为硬板,采用喷雾法将显色剂直 接喷洒;软板可选用碘蒸气法、压板法 三用紫外灯
显色喷雾瓶
操作技术——计算比移值
0.2-0.8
Rf值越大,化合物的极性?
二、 水蒸气蒸馏法
适用范围
装置图
具有挥发
性,能随水蒸气蒸出而 不被破坏与水不发生反
应;难容或不溶于水
三、升华法
适用范围 某些固体物质(如水杨酸、 苯甲酸、樟脑等)受热后, 在低于其熔点的温度下, 不经过熔化就可以直接转 化为蒸汽,蒸汽遇冷又凝 结为固体称为升华 装置图
四、超临界流体萃取
原理
物质在不同温度和压力的条件下,可以以不同 的形态存在,如固体,液体,气体,超临界流体等。 在超临界流体中,不同的物质有不同的溶解度,溶 解度大的物质溶解在超临界流体中,与不溶解或者 溶解度小的物质分开。然后,通过升高温度,降低 压力或者吸附的方法,使萃取物与超临界流体分离, 而得到所需的物质。 在临界区附近,压力和温度的微小变化,会引起 流体密度的大幅度变化,从而影响其溶解能力。
吸附薄层色谱
分类
分配薄层色谱
常用的吸附剂——硅胶
药物制剂中天然产物的提取与制备
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药物制剂中天然产物的提取与制备提取和利用天然产物作为药物制剂的成分已经成为现代医学和药物研究的重要领域。
天然产物,包括植物、动物和微生物的来源,是一种丰富而多样的资源,具有潜在的药理活性和治疗效果。
本文将探讨药物制剂中天然产物的提取与制备的方法和技术。
1. 天然产物提取的方法天然产物的提取是从原料中分离出有用成分的过程。
常用的提取方法包括传统的水煎、溶剂提取和现代的高效液相色谱等技术。
不同的方法适用于不同类型的天然产物和目标化合物。
1.1 传统的水煎提取传统的水煎提取是一种简单和常见的方法,适用于提取植物材料中的活性成分。
该方法利用水的煮沸将活性成分从植物细胞中释放出来,并通过滤液分离并浓缩得到提取物。
1.2 溶剂提取溶剂提取是一种常用的提取方法,适用于从植物、动物或微生物中提取天然产物。
常用的溶剂包括乙醇、丙酮、甲醇等。
该方法通过选择性溶解天然产物中的目标化合物,并通过蒸发、浓缩等步骤得到纯化的提取物。
1.3 高效液相色谱高效液相色谱(HPLC)是一种分离和纯化天然产物的常用方法。
它利用高压泵将混合物压入色谱柱中,通过不同成分在固定相上的分配系数差异来分离成分。
该方法可以实现对目标化合物的高效分离和纯化。
2. 天然产物的制备与提纯天然产物的制备和提纯是药物制剂研发中的关键步骤。
通过适当的技术和方法,可以从混合物中提纯目标化合物,并制备出高纯度的天然产物药物。
2.1 结晶法结晶法是一种常用的天然产物提纯方法。
通过调节溶剂和温度来控制化合物的结晶行为,并通过过滤、洗涤等步骤得到高纯度的结晶产物。
2.2 薄层层析法薄层层析法是一种快速、简单和有效的提纯方法。
它利用薄层分离介质对混合物进行分离,通过移动相的运动将化合物分离出来,并通过刮取或洗涤的方式得到纯化的产物。
2.3 液液分配方法液液分配方法是一种基于化合物在两相溶液中的分配系数差异来进行分离的方法。
它通常利用两相溶液的不相溶特性,通过适当的pH调节和添加萃取剂等步骤,来实现天然产物的分离和提纯。
天然产物提取与分离例题和知识点总结
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天然产物提取与分离例题和知识点总结一、天然产物提取与分离的概念天然产物提取与分离是从天然来源(如植物、动物、微生物等)中获取有价值的化学成分,并将其从复杂的混合物中分离出来,以获得纯净的单一化合物或特定的组分。
这一过程不仅对于药物研发、食品工业、化妆品行业等具有重要意义,也是现代化学、生物学和医学研究的重要领域。
二、提取方法(一)溶剂提取法这是最常见的提取方法之一。
根据“相似相溶”的原理,选择合适的溶剂来溶解目标成分。
例如,对于极性较大的成分,可以选择水、甲醇、乙醇等溶剂;对于非极性成分,则常使用乙醚、石油醚等溶剂。
例题:从一种植物中提取生物碱,已知该生物碱易溶于乙醇,设计提取方案。
方案:将植物材料粉碎,用一定浓度的乙醇浸泡,适当加热并搅拌,多次提取后合并提取液,减压浓缩得到粗提取物。
(二)水蒸气蒸馏法适用于具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏,且难溶或不溶于水的成分。
例如:从薄荷中提取薄荷油。
(三)升华法某些固体物质受热时不经过液态直接变成气态,遇冷后又直接凝结成固态,这个过程称为升华。
比如从樟脑中提取樟脑。
三、分离方法(一)结晶与重结晶利用化合物在溶剂中的溶解度差异,通过改变温度、溶剂组成等条件,使化合物结晶析出。
例题:有一混合物含有 A、B 两种化合物,A 的溶解度随温度变化较大,B 的溶解度随温度变化较小,如何分离?方法:先将混合物溶解在适量溶剂中,加热使溶液成为饱和溶液,然后冷却,A 会先结晶析出,过滤得到 A;滤液继续浓缩,冷却,使B 结晶析出。
(二)萃取法包括液液萃取和固液萃取。
液液萃取是利用物质在两种互不相溶的溶剂中的分配系数不同来实现分离。
例如:用乙酸乙酯从水相中萃取某有机酸。
(三)色谱法这是一种非常有效的分离方法,包括柱色谱、薄层色谱、高效液相色谱等。
柱色谱:如硅胶柱色谱,根据化合物与硅胶的吸附能力不同进行分离。
薄层色谱:可用于监测分离效果和确定展开条件。
高效液相色谱:具有高效、快速、灵敏等优点,常用于微量成分的分离和定量分析。
生物碱类天然产物的常用分离方法
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生物碱类天然产物的常用分离方法
生物碱类天然产物是一类具有广泛生物活性的天然化合物,包括多种植物和微生物产生的化合物。
由于生物碱类天然产物在药物、农药和化妆品等领域具有重要的应用价值,因此针对这类化合物的分离和纯化方法得到了广泛的研究和应用。
常用的生物碱类天然产物的分离方法包括以下几种:
1. 溶剂萃取法:这是最常见的分离方法之一。
通过将原料与适当溶剂进行反复提取,将目标化合物从原料中分离出来。
该方法适用于溶解性好、极性适中的生物碱类天然产物。
2. 薄层色谱法(TLC):这是一种简单且广泛应用的分离方法。
将样品涂于薄层色谱板上,然后通过在合适的溶剂中进行上样,待溶剂沿着色谱板上升时,不同成分会在不同位置上形成斑点,从而实现分离。
分离出的斑点可以进一步进行收集和纯化。
3. 柱层析法:柱层析法是一种高效的分离方法,可用于分离具有不同极性和相对分子质量的生物碱类天然产物。
通过将样品通过填充在色谱柱中的吸附剂上,然后通过适当的溶剂流动,不同成分会在不同的速度下通过柱层析分离。
4. 液相色谱法(HPLC):高效液相色谱法是一种常用的分离和纯化生物碱类天然
产物的方法。
该方法利用高压将样品通过液相色谱柱,通过调整流动相和静相的性质,使得不同成分在柱上的停留时间不同,从而实现分离。
该方法具有高分离效率、高灵敏度和高选择性的优点。
以上仅是常用的分离方法之一,根据不同的实验目的和样品性质,还可以使用其他方法如气相色谱法、毛细管电泳等技术。
此外,还可以结合质谱技术对分离后的化合物进行鉴定和结构分析,以进一步确定生物碱类天然产物的结构和性质。
天然产物分离提取方法总结
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该法反应温和,节约能耗且效率较高。还可以 对多种酶进行组合,使分离和转化两个过程合 二为一。但是需要选择适当的酶或酶系 该法模拟天然过程,故反应过程温和无污染, 不需污染性溶媒,易于工业化生产,且能够保 留有效成分群,符合中医学理论。但是需要合 适材料制成的人工消化道,依托于生物材料科 学的发展 该法建立于传统吸附法的思想上,实用性强且 固体吸附材料可以反复利用,但需要对成分结 构有较多的了解,且实验条件需反复摸索
概念适用范围浸渍法是指将固体混合物研细之后加入适当的溶剂在常温或加热条件下浸泡从而将其中的有效物质浸出而分离的方法常用于分离固体中草药中的有效成分渗漉法是指将溶剂连续渗过原料使其中的有效成分随溶剂从渗漉装置下部流出而分离的方法适用于遇热不稳定的原料但不适用于新鲜的易膨胀的或无组织结构的原料煎煮法是指将原料加水蒸煮使其有效成分进入水相中而得到分离的方法适用于分离易溶于水且对湿热稳定的有效成分回流提取法是指用有机溶剂提取原料成分并加热蒸馏浸出液使其中挥发性溶剂馏出后又在回流装置中被冷却回流入容器中浸提原料从而分离有效成分的方法适用于分离对热稳定且不易分解的有效成分连续回流提取法是指在回流提取法的基础上利用索氏提取器回流溶剂提取原料成分的方法是指将含有挥发性成分的药材与水共蒸馏使挥发性成分随水蒸气一并馏出经冷凝分取挥发性成分的浸提方法是指将原料中熔沸点较低的固体有效成分经过加热直接升华为气体再经冷却而分离的是指利用机械压力将原料中的液体成分挤压出来的分离方法是指利用原料中各种成分的沸点不同进行分离的方法是指利用吸附剂吸附原料成分或吸附杂质而达到分离的方法是指使用沉淀剂将所需成分进行可逆沉淀然后经过再溶解将有效成分分离的方法是指在原料水提物中加入易溶性无机盐至一定浓度而使得有效成分在水中溶解度降低而沉淀析出或被有机溶剂提取出来的方法是指利用小分子物质可以通过半透膜而大分子物质无法通过的性质将粗体液中的小分子杂质分离出来的方法同回流提取法仅适用于对热稳定且不易分解的原料成适用于提取难溶于水能与水共沸与水不反应且对热稳定的有效成分适用于熔沸点较低且不易分解的有效成分适用于原料中非结合状态的的液体成分适用于对热稳定且对沸点比较了解的成分适用于对适当物质具有吸附性的成分适用于能够与沉淀剂反应而可逆沉淀的成分适用于溶解度易受无机盐离子影响的成分适用于大分子物质是指利用具有液体的密度以及气体的粘度的超临界流体萃取分离萃取有效成分的方法适用于大部分有效成分的提取是指利用超声波产生的空化作用破碎细胞壁并加速有效成分溶解于溶媒中从而达到分离目的的方法是指利用微波的加热效应破裂细胞以及其电磁场激活效应加速有效成分扩散速率而达到分离萃取的方法适用于绝大多数天然产物有效成分的分离提取适用于大多数天然产物有效成分的分离提取天然产物常用提取分离方法汇总现代提取技术超临界流体萃取超声波提取法压榨法经典传统提取方法分馏法吸附法沉淀法类型溶剂法
天然产物的提取分离
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(4)浓度差
dc dx
根据扩散原理,造成提取液的浓度差可 以提高提取的效率。 可采取的措施有:搅拌、更换溶剂。
(5)新技术的使用
超声波、微波促提技术的应用,可以加快提 取速度,提高提取效率。
超声波促提原理:
目前实验室广泛使用的超声波萃取仪是将 超声波换能器产生的超声波通过介质(通常是 水)传递并作用于样品,这是一种间接的作用 方式,声振强度较低,必须通过增加超声波发 生器功率(3300W)来提高萃取效率。但较大 的超声波功率,又会发出令人感觉不适的噪音。
②.在提取用的烧瓶中加入提取溶剂和沸石
(没有沸石可以用玻璃珠或碎瓷片,目的就 是防止暴沸)。
③.连接好烧瓶、提取器、回流冷凝管,接通冷
凝水,加热。沸腾后,溶剂的蒸气从烧瓶进到冷 凝管中,冷凝后的溶剂回流到滤纸筒中,浸取 样品。溶剂在提取器内到达一定的高度时,就 携带所提取的物质一同从侧面的虹吸管流入烧 瓶中。溶剂就这样在仪器内循环流动,把所要 提取的物质集中到下面的烧瓶内。
• 5、溶剂的选择
• (1) 水:为价廉、易得、使用安全的强极性溶 剂。适于提取无机盐、糖、氨基酸、蛋白质、 有机酸盐、生物碱盐、苷类等。 • (2) 亲水性有机溶剂:以乙醇最常用。高浓度 提取亲脂性成分,低浓度提取亲水性成分。 • (3) 亲脂性有机溶剂: • 具有较强的选择性,对挥发油、油脂、叶 绿素、树脂、内酯、某些生物碱及一些苷元均 可提取出来。 优缺点:沸点低,浓缩回收方便,但易燃、 有毒、价贵,穿透力差。
如果随水蒸气挥发的物质具有较高的熔点, 在冷凝后易析出固体,则应调小冷凝水的流速, 使它冷凝后仍然保持液态。假如已有固体析出, 并且接近阻塞时,可暂时停止冷凝水或将冷凝水 暂时放去,以使物质熔融后随水流入接收器中。 当冷凝管夹套中要重新通入冷却水时,要小心而 缓慢,以免冷凝管因骤冷而破裂。万一冷凝管已 被阻塞,应立即停止蒸馏,并设法疏通(可用玻 棒将阻塞的晶体捅出或用电吹风的热风吹化结晶, 也可在冷凝管夹套中灌以热水使之熔化后流出 来)。
天然产物提取与纯化方法研究
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天然产物提取与纯化方法研究一、引言天然产物是从动植物等自然界中提取的化合物,具有广泛的生物活性和药用价值。
天然产物提取与纯化是研究人员的关注焦点,因为提取和纯化的方法直接影响到天然产物的质量和效果。
本文将介绍一些常用的天然产物提取与纯化方法及其优缺点。
二、溶剂提取法溶剂提取法是常用的提取天然产物的方法之一。
通常使用有机溶剂,如乙醇、甲醇、乙酸乙酯等,将原材料与溶剂充分混合,提取出目标物质。
这种方法适用于提取溶于有机溶剂中的天然产物,但可能会导致部分非目标物质的提取。
此外,溶剂的选择和比例也是影响提取效果的重要因素。
三、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一种使用超临界流体(一种介于气体和液体之间的状态)提取天然产物的方法。
常用的超临界流体包括二氧化碳、乙烷等。
该方法利用超临界流体的高扩散性和低粘度,在较低温度下提取天然产物,并通过改变温度和压力等条件,实现对目标物质的选择性提取。
这种方法相较于溶剂提取法,可以更好地控制提取过程中的条件,避免热敏性物质的降解,并减少了溶剂的使用。
四、凝胶渗透色谱法凝胶渗透色谱是一种基于分子大小分离的方法,适用于纯化天然产物。
该方法利用高分子量的凝胶材料,如聚丙烯酰胺凝胶等,将混合物进行分离。
通过调节溶解度和流动速度等参数,大分子量的物质填充凝胶孔隙,流经凝胶的时间较长,而小分子量的物质则通过凝胶孔隙,流经的时间较短。
这种方法可以将目标物质从其他杂质中分离出来,但分离效率有限,需要结合其他方法进行纯化。
五、高效液相色谱法高效液相色谱是一种基于物质在液体中的分配行为分离的方法,常用于天然产物的纯化。
该方法通过将混合物溶解在流动相中,通过反应速度差异或亲和力差异实现物质的分离。
在高效液相色谱法中,可以选择不同的填料材料和流动相,以实现对不同性质的天然产物的选择性分离。
这种方法具有高分离效率和分离效果,但对设备要求较高。
六、结晶法结晶法是一种通过溶解和结晶的循环过程,从溶液中得到纯净的晶体的方法。
天然产物的分离提取
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分离技术与天然产物有效成分提取化学实验中化合物的分离纯化是一项很重要的技术,除了常用的沉淀、重结晶、升华等方法外,还包括溶剂萃取法、离子交换法、膜分离法及柱层析等。
1. 溶剂萃取法溶剂萃取是指在被分离物质的水溶液中,加入与水互不混溶的有机溶剂,借助于萃取剂的作用,使一种或几种组分进入有机相,而另一些组分仍留在水相,从而达到分离的目的。
萃取体系的水相和有机相基本不互溶,且有一定的密度差异。
要被萃取的物质叫被萃物,它在萃取过程中由水相转移到有机相。
对于无机金属离子,在有机相中需要加入萃取剂,它是能与被萃物发生化学作用形成易溶于有机相的萃合物的有机试剂,分中性、酸性、螯合、胺类等,常用的萃取剂有磷酸三丁酯(TBP)、甲基异丁酮(MIBK)、氯代三烷基甲胺(N263)、噻吩甲酰三氟丙酮(HTTA)、二(2-乙基己基磷酸)(P204)等,它们一般与被萃取的金属离子形成络合物而被萃取到有机相中。
溶剂萃取法在铀矿中铀的分离富集、稀有金属离子的分离及湿法冶金中发挥了很重要的作用。
一般常用分配比(D)、分离系数(β)、相比(R)及萃取率(E)等参数来表示萃取分离时的好坏。
分配比D 是指当萃取体系达到平衡时,被萃物在有机相的总浓度与在水相中的总浓度之比,表示被萃物在两相中的实际分配情况,D 值越大,说明被萃物越易进入有机相。
分配比不是一个常数,它随被萃物的浓度、萃取剂的浓度、溶液的酸度、稀释剂的性质、盐析剂的浓度等而改变。
分离系数(β)是指两种被分离的元素在同一萃取体系内,在同样萃取条件下分配比的比值。
令A 表示易萃元素,B 表示难萃元素,则β值的大小表示A、B 两种元素分离效果的好坏,β值越大,分离效果越好,即萃取剂对某元素的选择性越高。
若D A=D B,β=1,说明该萃取剂不能把A、B 两元素分离。
相比(R)是指在一个萃取体系中,有机相和水相体积之比。
在生产上,还往往用萃取率(E)来表示一萃取剂对某物的萃取能力,计算萃取的效果。
天然产物的提取和分离技术研究
![天然产物的提取和分离技术研究](https://img.taocdn.com/s3/m/2bbe7f4603768e9951e79b89680203d8ce2f6ab9.png)
天然产物的提取和分离技术研究在现代医学和化妆品工业中,许多活性成分都来自于天然产物的提取和分离。
天然产物的提取和分离技术研究可以帮助人们更好地理解和利用自然资源,从而满足人类日益增长的需求。
提取技术天然产物的提取可以通过多种方法实现,其中包括溶剂提取、超临界提取、离子液体提取、微波辅助提取等。
溶剂提取是一种最普遍的天然产物提取方法,利用有机溶剂将物质从原料中萃取出来。
常用的溶剂包括水、乙醇、丙酮等。
溶剂提取的优点在于其简单易行和操作方便,但也存在一些不足之处,如需要消耗大量的有机溶剂,由于操作不当可能造成环境污染等。
超临界提取技术是一种先进的提取方法,主要通过利用临界点以上的温度和压力,将溶剂向原料中渗透进去,提取出目标物质。
该技术具有提取速度快、效率高、环保等优点。
离子液体提取是一种绿色的提取方法,利用离子液体作为溶剂,将目标物质从原料中提取出来。
离子液体是一种无机或有机的盐类,可溶于水或非极性溶剂,具有高稳定性和低挥发性等特点。
离子液体提取的优点在于其对环境的友好和溶剂回收的可行性。
微波辅助提取技术是近年来发展起来的一种新型提取方法。
其原理是利用微波辐射改变原料中的物理性质,促进物质的转移和反应,从而实现提取的效果。
微波辅助提取的优点在于其提取速度快,效率高,易于控制等。
分离技术在天然产物分离过程中,不同成分之间的分离通常是需要的。
这可以通过分子筛分离、色谱分离、电化学分离等方法来实现。
分子筛分离是一种利用氧化硅等的分子筛,以分子大小和拓扑结构差异为基础,通过化学吸附和分子筛作用来进行分离。
该技术适用于官能团、芳香烃和脂类的分离,具有选择性和反应速度快等优点。
色谱分离是一种通过利用固液分配吸附原理实现分离的方法。
吸附相一般为固体,移动相一般为液体,两相可以通过毛细管将移动相输送到吸附相中,从而使不同成分分离。
色谱分离广泛应用于药物、微生物成分的分析和纯化、食品工业中的分离等。
电化学分离是一种利用电化学方法进行分离的技术,其基本原理是改变化学反应速率和平衡常数的大小,从而实现分离。
天然产物的提取与分离技术
![天然产物的提取与分离技术](https://img.taocdn.com/s3/m/3f6515d7112de2bd960590c69ec3d5bbfd0adada.png)
天然产物的提取与分离技术天然产物指的是从自然界中提取的,未经过任何人工合成的物质。
这些化合物及其衍生物具有丰富的生物活性和药理学特性,在医药、保健品、化妆品等领域广泛应用。
而提取和分离是获得这些化合物的基本方法,其技术涉及到浸提、萃取、过滤、蒸馏、结晶等多种方法。
一、浸提法浸提法是指将天然产物浸泡在溶剂中,利用其相溶度不同,进行分离和提取的方法。
该方法广泛应用于药材、植物提取等领域。
浸提法主要涉及的参数有溶剂种类、浸提时间、浸提温度等,不同的参数选择将影响到提取效率及产物纯度。
浸提法适用于多种天然产物的提取,但由于涉及到大量的有害溶剂的使用,已经逐渐被萃取法和其他方法所替代。
二、萃取法萃取法是将待提取物与溶剂混合后,将混合物与另一相分离的方法。
萃取可以基于极性选择合适的溶剂,以提高提取效率和产物纯度。
萃取法主要涉及的参数有溶剂种类、溶剂浓度、温度等,参数的合理选择将直接影响到提取效率和纯度。
如选择极性合适的溶剂进行振荡或搅拌,可提高的天然化合物的提取效率和纯度。
三、过滤法过滤是常用的一种分离方法,过滤可以选择过滤纸或多孔材料作为过滤的基质,分离天然产物和其他杂质。
过滤力度和基质选择应根据目标分离物的特性而定,可以根据溶液的粘度和离子浓度来选择过滤孔径。
在过滤中,对于一些非溶解性的固体,可以进行湿法处理,将这些固体溶解于溶剂中之后再进行过滤。
四、蒸馏法蒸馏法是将混合物加热的方法,利用混合物中不同化合物之间的沸点差异,使之被分离出来的一种方法。
蒸馏法是一种常见的分离方法,用于分离具有不同沸点的组分。
蒸馏通常分为常压蒸馏和真空蒸馏两种,常压蒸馏适用于提取比较易挥发的天然产物,如芳香族化合物、溶于水的天然产物等,而真空蒸馏则适用于提取高沸点的天然产物。
综上所述,各种提取和分离方法都有其独特的优点和适用场合,可以通过不同的方法或者方法的组合来提高提取效率和产物纯度。
因此在天然产物的提取和分离中,要根据化合物特性合理选择方法,同时也要注意对环境和人体健康的影响,尽可能减少对环境的污染,选择可持续发展的技术。
天然产物研究方法和技术
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天然产物研究方法和技术引言:天然产物是指从动植物或微生物体中提取的具有生物活性的化合物。
天然产物研究是一门综合性的科学研究领域,涉及到化学、生物学、药学等多个学科。
本文将介绍天然产物研究的方法和技术,包括天然产物的提取、分离、鉴定和活性评价等方面。
一、天然产物的提取方法1. 溶剂提取法:将天然产物与适当溶剂进行浸提,如乙醇、乙醚、醋酸乙酯等。
这种方法适用于提取具有一定溶解度的化合物。
2. 萃取法:通过溶剂的两相分配,将天然产物从原料中分离出来。
常用的萃取剂有正己烷、氯仿、丙酮等。
3. 超声波提取法:利用超声波的机械作用和热效应,促进天然产物与溶剂的混合和物质传递,提高提取效率。
4. 微波提取法:利用微波辐射的热效应和非热效应,加速溶剂中天然产物的释放和扩散,提高提取速度。
5. 固相微萃取法:将固相萃取材料与样品接触,通过吸附和脱附过程,将天然产物从样品中提取出来。
二、天然产物的分离技术1. 薄层色谱法:利用物质在固定相和流动相之间的分配和迁移,实现天然产物的分离和纯化。
2. 柱层析法:将样品通过填充在柱中的固定相,利用不同成分在固定相和流动相之间的分配系数差异,实现天然产物的分离。
3. 液相色谱法:通过液相流动相的选择性吸附分离天然产物,常用的液相色谱有高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UPLC)等。
4. 气相色谱法:通过气相流动相的选择性吸附分离天然产物,常用的气相色谱有气相色谱质谱联用(GC-MS)等。
5. 电泳技术:包括毛细管电泳和凝胶电泳,通过样品在电场中的迁移速率差异,实现天然产物的分离。
三、天然产物的鉴定方法1. 紫外-可见光谱法:利用天然产物在紫外-可见光波段的吸收特性,进行结构鉴定和含量测定。
2. 红外光谱法:通过天然产物与红外光的相互作用,研究它们的分子结构和功能基团。
3. 质谱法:通过测量天然产物的分子离子峰,推测其分子式、结构和分子量。
4. 核磁共振波谱法:包括氢核磁共振(1H-NMR)、碳核磁共振(13C-NMR)等,用于分析天然产物的结构和构象。
天然产物化学的提取方法
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天然产物化学的提取方法
天然产物化学是研究从植物、动物和微生物等天然资源中提取和分离化合物的一门学科。
它是现代药物开发的重要组成部分,因为许多药物都是从天然产物中提取得到的。
提取方法是天然产物化学研究中最基础的一环,它的作用是从天然源中提取出有用的化合物,为后续的分离纯化和药物研发提供基础。
目前常用的天然产物提取方法包括:溶剂提取法、超临界流体提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法、固相微萃取法等。
其中,溶剂提取法是最常用的一种方法,可以使用乙醇、乙醚、二甲苯等有机溶剂对天然产物进行提取。
超临界流体提取法则是一种使用超临界流体作为溶剂的提取方法,可以提高提取效率和纯度。
微波辅助提取法和超声波辅助提取法则是利用微波和超声波对样品进行加热和震动,促进化合物的释放和提取。
固相微萃取法则是一种新型的提取方法,可以在无需使用大量有机溶剂的情况下,对样品中的化合物进行提取。
在天然产物化学的研究中,选择适合的提取方法是十分重要的。
不同的方法具有不同的特点和适用范围,因此需要根据具体的实验要求选择最合适的提取方法。
提取方法的优化和改进可以提高提取效率和纯度,为后续的药物研发提供更好的基础。
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几类类天然产物的提取分离方法本人总结了一些分离方法,以抛砖引玉!总述1)提取前文献查阅综述和药材生药鉴定2)提取方法①粉碎成粗粉②有机溶剂法和水提法③水蒸气蒸馏法④升华法3)分离纯化法①根据物质溶解度的不同进行分离a.温度不同,溶解度不同b.改变溶液的极性去杂c.酸碱法d.沉淀法②根据物质分配比不同极性分离a.液-液萃取法b.反流分布法c.液滴逆流层析法d.高速逆流层析法e.GC法f.LC法:LC分配层析载体主要有---硅胶,硅藻土,纤维素等;有正反相之分;压力有低、中、高之分;载量有分析、制备之分。
③根据物质吸附性不同极性分离a.※极性吸附剂(如SiO2,Al2O3...)极性强,吸附力大※非极性吸附剂(如活性炭-对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。
b.化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小而定;溶剂的极性大小可按其介电常数大小排列(极性渐大> ):己烷苯无水乙醚CHCl3 AcOEt 乙醇甲醇水e 1.88 2.29 4.47 5.20 6.11 26.0 31.2 81.0 c.氢键力吸附聚酰胺吸附层析--洗脱剂的洗脱力由小到大为:水> 甲醇> 丙酮> NaOH液> 甲酰胺> 尿素水液④根据物质分子的大小进行分离如葡萄糖凝胶(Sephadex G and LH-20...)过泸法等⑤根据物质解离程度不同的分离法离子交换法:强酸:-SO3H强碱:-N+(CH3)3Cl-弱酸:-CO2H弱碱:-NH2(NH,N)一、糖及苷类的提取和分离1 溶剂处理法2 铅盐沉淀法3 大孔树脂处理法4 柱色谱分离法二醌类化合物的提取和分离一提取方法:一般选用甲醇或乙醇为溶剂,可同时将游离态和成苷的蒽醌类化合物从药材中提取出来,浓缩后再依次用有机溶剂提取(多用索氏提取法),可根据极性大小不同进行初步分离(如将苷和苷元分开)。
对于多羟基蒽醌或具有羧基的蒽醌(如大黄酸),在植物体内多以盐的形式存在,难以被有机溶剂溶出,提取前应先酸化使之游离。
二分离方法:1 蒽醌苷类和游离蒽醌衍生物的分离:用分步提取法(如前述)2 游离蒽醌衍生物的分离:可选用分步结晶法、梯度pH萃取法或层析法进行。
梯度pH萃取法是分离游离蒽醌衍生物的经典方法:1.局限性2.原理性质相似,酸性差别不大的混合物不适用3 有些蒽酮虽然存在酚羟基,但在稀碱溶液中较相应的蒽醌难溶,如大黄酚蒽酮-9,故蒽醌衍生物的苯提取液用极稀的NaOH液萃取,可除去蒽醌而使蒽酮留在苯液中。
示例色谱法在蒽醌苷元分离中的应用:一般先用经典方法(如梯度pH萃取)对其进行初步分离,再结合柱色谱法或制备性TLC法作进一步的分离,多用硅胶吸附色谱,而氧化铝一般不用,也常用聚酰胺作为柱色谱的填料。
•三、黄酮类化合物的提取与分离(一)提取黄酮甙类以及极性稍大的甙元(如羟基黄酮等),一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。
一些多糖甙类可用沸水提取。
在提取花青素类化合物时,可加入少量酸(0.1%盐酸,应当慎用,避免发生水解)。
大多数黄酮甙元宜用用氯仿、乙醚、醋酸乙酯等中极性溶剂提取,而对多甲氧基黄酮类游离甙元,甚至可用苯等低极性溶剂进行提取。
对得到的粗提物可进行下列精制处理,常用方法有:(一)溶剂萃取法利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同,选用不同溶剂进行地萃取可达到精制纯化目的。
例如植物叶子的醇浸液,可用石油醚处理,以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。
而某些药料水溶液则可加入多倍量浓醇,以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。
有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法连续进行。
常用的溶剂系统有:水-醋酸乙酯,正丁醇-石油醚等。
溶剂萃取过程在除去杂质的同时,往往还可以收到分离甙和甙元或极性甙元与非极性甙元的效果。
(二)碱提取酸沉淀法黄酮甙类虽有一定极性,可溶于水,但却难溶于酸性水,易溶于碱性水,故可用碱性水提取,再于碱水提取液中加入酸,黄酮甙类即可沉淀析出。
此法简便易行,如芦丁、橙皮甙、黄芩甙的提取都应用了这个方法。
兹以从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程。
槐米(槐树Sophora japonica L. 花蕾)加约6倍量水,煮沸,在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH8~9,在此pH条件下微沸20~30分钟,趁热油滤,残渣同上再加4倍水煎1次,乘热抽滤。
合并滤液在60~70℃下,用浓盐酸调至pH为5,搅匀,静置24小时,抽滤。
沉淀物水洗至中性,60℃干燥得芦丁粗品,于水中重结晶,70~80℃干燥得芦丁纯品。
在用碱酸法进行提取纯化时,应当注意所用碱液浓度不宜过高,以免在强碱性下,尤其加热进破坏黄酮母核。
在加酸酸化时,酸性也不宜过强,以免生成(金羊)盐,致使析出的黄酮类化合物又重新溶解,降低产品收率。
当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时,如花、果类药材,宜用石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液进行提取,以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀,不致溶出。
这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。
(三)碳粉吸附法主要适于甙类的精制工作。
通常,在植物的甲醇粗提取物中,分次加入活性炭,搅拌,静置,直至定性检查上清液无黄酮反应时为止。
过滤,收集吸甙炭末,依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇溶液进行洗脱,各部分洗脱液进行定性检查(或用PPC鉴定)。
通过对Baptisia lecontei 中黄酮类化合物的研究证明,大部分黄酮甙类可用7%酚/水洗下。
洗脱液经减压蒸发浓缩至小体积,再用乙醚振摇除去残留的酚,余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮甙类成分。
二、分离现将较常用的方法介绍如下:(一)柱层析法分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维素粉等。
此外,也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土等。
1. 硅胶柱层析:此法应用范围最广,主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化(或乙酰化)的黄酮及黄酮醇类。
少数情况下,在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物,如多羟基黄酮醇及其甙类等。
2. 聚酰胺柱层析:对分离黄酮类化合物来说,聚酰胺是较为理想的吸附剂。
其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。
聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物,包括甙及甙元、查耳酮与二氢黄酮等黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律:(1)甙元相同,洗脱先后顺序一般是:参糖甙>双糖甙>单糖甙>甙元(2)母核上增加羟基,洗脱速度即相应减缓3)不同类型黄酮化合物,先后流出顺序一般是:异黄酮>二氢黄酮醇>黄酮>黄酮醇(4)分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强,故查耳酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。
上述规律也适用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。
3. 葡聚糖疑胶(Sephadex gel)柱层析:对于黄酮类化合物的分离,主要用两种型号的凝胶:Sephadex-G型及Sephadex-LH-20型。
葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是:分离游离黄酮时,主要靠吸附作用。
凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。
但分离黄酮甙时,则分子筛的属性起主导作用。
在洗脱时,黄酮甙类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体,葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有:(1) 碱性水溶液(如0.1mol/L NH4OH),含盐水溶液(0.5mol/L NaCl等)。
(2) 醇及含水醇,如甲醇,甲醇-水(不同比例)、t-丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等。
(3) 其它溶剂:如含水丙酮、甲醇-氯仿等。
(二)梯度pH萃取法梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮甙元的分离。
根据黄酮类甙元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质,可以将混合物溶于有机溶剂(如乙醚)后,依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH及4%NaOH水溶液萃取,来达到分离的目的。
酸性:7,4¢-二OH > 7-或4¢-OH >(溶于):5%NaHCO3液5%Na2CO3液一般OH > 5-OH0.2%NaOH液4%NaOH液)三)根据分子中某些特定官能团进行分离在黄酮类成分的混合物中,具有邻二酚羟基成分与无此结构的成分,可用铅盐法分离。
有邻二酚羟基的成分可被醋酸铅沉淀,不具有邻二酚羟基的成分可被碱式醋酸铅沉淀,达到分离的目的。
与黄酮类成分混存的其它杂质,如分子中有羧基(如树胶、粘液、果胶、有机酸、蛋白质、氨基酸等)或邻二酚羟基(如鞣质等)时,也可为醋酸铅沉淀达到去杂目的。
具黄酮类化合物与铅盐生成的沉淀,滤集后按常法悬在浮在乙醇中,通入H2S进行复分解,滤除硫化铅沉淀,滤液中可得到黄酮类化合物。
但初生态的PbS沉淀具有较高的吸附性,因此现多不主张用H2S脱铅,而用硫酸盐或磷酸盐,或用阳离子交换树脂脱铅。
有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合,生成物易溶于水,借此也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。
在实际工作中,常将上述柱层析法与各种经典方法相互配合应用,以达到较好的分离效果五、萜类化合物的提取分离萜的苷亲水较强,苷元脂溶性较强。
1、溶剂提取法2、碱提取酸沉淀法3、活性炭吸附法4、大孔树脂吸附法一、挥发油的提取1、水蒸气馏法;2、油脂吸收法;3、溶剂萃取法用石油醚(30~60℃)等有机溶剂;4、二氧化碳超临界流体萃取法;5、冷压法二、挥发油成分的分离1、冷冻析晶;2、真空分馏法;3、化学方法:1)利用酸、碱性不同进行分离,2)利用官能团特性进行分离;4、层析分离法三萜皂苷元提取与分离方法:1、醇类溶剂提取后,提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯等溶剂进行分部提取,然后进一步分离;2、制备成衍生物再作分离;3、以皂苷形式存在的,水解后用氯仿等溶剂萃取,然后进行分离。
三萜皂苷提取与分离方法:用稀醇提取,提取液减压浓缩后,加适量水,必要时先用石油醚等萃取,去杂,后用正丁醇萃取,减压蒸干,通过大孔吸附树脂,水洗去糖等,后用30%~80%甲醇或乙醇梯度洗脱,洗脱液减压蒸干,得粗制总皂苷。
用重结晶、层析等方法分离纯化皂苷。
五、生物碱的提取和分离一)提取1)非极性有机溶剂提取法: 常用溶剂为氯仿,二氯甲烷,乙醚,苯等。
由于生物碱在植物体中往往与酸(咖啡酸,草酸等)生成盐,故一般在用有机溶剂提取前,先将生药粉末与少量碱水(如10%氨水或碳酸钠液或石灰水)搅匀放置(使生物碱转为游离状态)再用有机溶剂进行浸泡后用渗漉法等法进行提取。
提取的有机溶液部分用稀酸水提取多次(至基本上无生物碱反应为止)。
此后,含有生物碱的酸水部分,经过泸后用乙醚或氯仿等洗去脂溶性杂质(有些生物碱也能溶于氯仿中,故氯仿部分应进一步检查);酸水部分加10%氨水等进行碱处理后,分别用乙醚,氯仿等分别提取多次,提取液用水洗净后可进行干燥处理,并分别蒸干溶剂,可能得到不同的生物碱总碱。