球孢白僵菌Bb11菌株生物学特性研究
球孢白僵菌(Beauveria bassiana)培养特征多样性与寄主及地理来源的相关性分析
!" 材料与方法
!# !" 菌株及培养基 实验供试球孢白僵菌菌株共 !! 株, 其寄主种 类 及地理来源见表 " 。菌 株 培 养 所 用 B53F 及 察 氏 培 养基按常规配制。 !# $" 菌落特征描述 不同菌株的宏观培养特征包括在察氏培养基上 培养 " 个月后的 菌 落 颜 色、 基 质 颜 色、 菌 落 形 态, 在 B53F 培 养 基 上 的 菌 落 生 长 速 率, 在 B5F 液 体 培 养 基 ( 不含琼脂的 B53F ) 中生长 $! 小时后的 G> 值及 液体基质颜色。参 照 色 谱 得 到 不 同 颜 色 的 色 级, 再 将不同颜色由浅到 深 顺 序 排 列, 按多态顺序编码法 ( H)0*)*0 =9’<C;<(<* D?()(D<*) ) 将最浅的颜色 (雪白 色) 定为 " , 以后每增加一级增加 " , 这样得到不同颜 色的编码 ( 徐克学,"##E ) 。菌 落 产 孢 情 况 共 分 为 A 级, 将很少产孢的绒状菌丝型编码为 " , 富集产孢型
% 采集地 &*/K)(G?CD /)CKC-; 安徽宣城 O9(-D?*-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽宣城 O9(-D?*-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽霍邱 >9/QC9 ,3-?9C ,7?C-( 贵州宽阔水 T9(-U9/;?9C ,&9CV?/9 ,7?C-( 贵州宽阔水 T9(-U9/;?9C ,&9CV?/9 ,7?C-( 美国 WB3 前南斯拉夫 X/)=*) F9K/;’(YC( 安徽牯牛降 &9-C9ZC(-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽牯牛降 &9-C9ZC(-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽牯牛降 &9-C9ZC(-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽牯牛降 &9-C9ZC(-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽岳西 F9*\C ,3-?9C ,7?C-( 安徽岳西 F9*\C ,3-?9C ,7?C-( 安徽岳西 F9*\C ,3-?9C ,7?C-( 陕西咸阳 OC(-:(-K ,B?((-\C ,7?C-( 安徽潜山 ]C(-;?(- ,3-?9C ,7?C-( 安徽潜山 ]C(-;?(- ,3-?9C ,7?C-( 安徽潜山 ]C(-;?(- ,3-?9C ,7?C-( 安徽宣城 O9(-D?*-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽宣城 O9(-D?*-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽宣城 O9(-D?*-K ,3-?9C ,7?C-( 安徽宣城 O9(-D?*-K ,3-?9C ,7?C-(
球孢白僵菌不同分离株生物学特性及对茶丽纹象甲成虫的杀虫活性研究
10 1 ・ 的孢 子 溶 液 处 理 茶 丽 纹 象 甲成 虫 后 ,菌 株 x1b o5表 现 出 最 强 的杀 虫 活 性 ,第 7d校 正 死 亡 . × 0个 mL . 3O B 率 为 1 0 ,LTo 为 3 4 ,L 9为 5 4 ,僵 虫 率 达 9 . 5 。 0 s仅 . 6d T 。 . 5d 3 7 关 键 词 :球 孢 白僵 菌 ; 丽 纹 象 甲 ; 离 株 ;生 物 学 ; 虫 活 性 茶 分 杀
d a o y o .a r ln a u ,we e iv s ia e .Th e u t h we h tt e eg tio a e o l es p r t d i t e d b d fM u oi e t s r n e tg t d e r s l s o d t a h i h l t sc u d b e e a e n o s s
王 定 锋 ,曾 明森 ,王 庆 森 ,等 . 球 孢 白 僵菌 不 同 分 离 株 生 物 学 特 性 及 对 茶 丽 纹 象 甲成 虫 的杀 虫 活 性 研 究 [ ] 福 建 农 业 学 报 , 2 1 J 02,2 7
一株球孢白僵菌的形态及分子生物学鉴定
球孢 白僵 菌是 国内外 广泛用于害虫生 物防治 的杀虫真菌 之一 , 被 认 为是最 具开 发潜 力 的一种 昆虫 病原真 菌 , 能 侵染 1 5 个目1 4 9个科 的 7 0 0多种昆虫和 1 O多种蝉螨 。 【 l 】 球孢 白僵 菌 ( B e a u v e r i a b a s s i a n a )在 分 类 上 属 于 半 知 菌 亚 门
c o l l e c t e d f r o m Ma o mi n g i n Gu a n g d o n g P r o v i n c e . I n t h i s s t u d y, t he c o l o n y mo r p h o l o g y
关键 词 : 白僵 茵 分离 鉴 定
中图分类号 :¥ 8 8 4 - 3
文献标志码 :A
文章编号 :1 0 0 6 . 8 9 4 5 ( 2 0 1 5 ) 0 8 . 0 0 1 9 . 0 3
Mo r pho l o g i c a l a nd M o l e c u l a r I de nt i ic f a t i o n o f a Be a uv e r i a b a s s i a na S t r a i n
,
s p o r e s t r u c t u r e ,s p o r e s h a p e a n d
.
s i z e o f Bb a l s r t a i n we r e o b s e r v e d nd a me a s u r e d, a nd i t wa s i n i t i a l l y i d e n t i i f e d a s Be a u v e r i a b a s s i a n a At he t s a me t i me.i t s 2 6 S r 【 , NA nd a r DNA I T S we r e s e q u e n c e d nd a t h e n c o mp a r e d wi h t ho t s e o f Be a u v e r i a b a s s i a n a i n NCBI d a t a b a s e . Th e r e .
球孢白僵菌不同菌株生物学特性及对小菜蛾的毒力研究
球孢白僵菌不同菌株生物学特性及对小菜蛾的毒力研究孙鹏飞;陈斌;李正跃;和淑琪【期刊名称】《云南农业大学学报》【年(卷),期】2007(022)005【摘要】室内测定了从鳞翅目小菜蛾、斜纹夜蛾和块茎蛾罹病虫体上分离纯化的球孢白僵菌菌株DBM001,XWYE001和PTM001的菌落生长速率、产孢量、孢子萌发速度,及对小菜蛾幼虫的致病力,并用时间-剂量-死亡率模型进行了分析.结果表明,各菌株在菌落生长速率上无显著差异,但各菌株的孢子萌发速率有显著差异.供试DBM001,PTM001 XWYE001三菌株对小菜蛾二龄幼虫的毒力测定结果表明:供试3菌株对于小菜蛾均具有一定的毒力,剂量效应参数分别为0.424,0.304,0.297.在108孢子/mL,107孢子/mL,106孢子/mL,105孢子/mL,104孢子/mL的孢子悬浮液下,3菌株孢子液处理后小菜蛾的累积死亡率分别为94.0%~48.0%,76.0%~28.0%和62.0%~28.0%.3菌株处理后第3 d时的LC50分别为6.5×107孢子/mL;4.07×107孢子/mL和2.88×107孢子/mL.在106孢子/mL下,3菌株对小菜蛾幼虫的致死亡中时LT50依次为3.0,4.1,3.5 d.由此表明,斜纹夜蛾和马铃薯块茎蛾菌株的对小菜蛾幼虫的致死时间效应较长,均在3 d以上,即球孢白僵菌不同菌株对小菜蛾种群增长的抑制作用时效差异较大,尤其是斜纹夜蛾和马铃薯块茎蛾分离株对小菜蛾的毒力发挥较慢.【总页数】5页(P635-638,644)【作者】孙鹏飞;陈斌;李正跃;和淑琪【作者单位】云南农业大学植物保护学院,云南,昆明,650201;云南农业大学植物保护学院,云南,昆明,650201;云南农业大学植物保护学院,云南,昆明,650201;云南农业大学植物保护学院,云南,昆明,650201【正文语种】中文【中图分类】Q935【相关文献】1.小菜蛾高毒力球孢白僵菌菌株抗旱性研究 [J], 滕忠才;张立红;刘廷辉;董建臻;李瑞军;李保国2.二点委夜蛾幼虫高毒力球孢白僵菌菌株筛选与生物学特性初步研究 [J], 张海剑;石洁;郭宁;王振营3.二点委夜蛾幼虫高毒力球孢白僵菌菌株筛选与生物学特性初步研究 [J], 张海剑;石洁;郭宁;王振营4.不同酯酶型球孢白僵菌株系及相同酯酶型株系经寄主转移后毒力变化的研究 [J], 丁德贵;李增智;樊美珍;杜永部5.球孢白僵菌不同菌株生物学特性的研究 [J], 孙继美;汤坚;丁贵银因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
球孢白僵菌产孢培养条件优化研究
球孢白僵菌产孢培养条件优化研究
球孢白僵菌(Metarhizium anisopliae)是一种广泛应用于生物
防治的真菌。
其产孢量是影响其防治效果的关键因素之一。
因此,本文旨在探讨球孢白僵菌产孢培养条件的优化方法。
首先,我们选择了不同的培养基进行试验,包括马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)、玉米粉琼脂培养基(CMA)、纤维素
琼脂培养基(CMC)和菜花粉琼脂培养基(CPA)。
结果表明,CPA培养基是球孢白僵菌最适宜的产孢培养基,其产孢
量最高。
其次,我们研究了不同的温度和pH值对球孢白僵菌产孢的影响。
结果表明,温度在25℃至28℃之间,pH值在6.0至7.0
之间时,球孢白僵菌的产孢量最高。
最后,我们研究了不同的培养时间对球孢白僵菌产孢的影响。
结果表明,球孢白僵菌的产孢量在培养时间为7天时达到峰值。
综上所述,球孢白僵菌的最佳产孢条件为使用菜花粉琼脂培养基,在温度为25℃至28℃、pH值为6.0至7.0、培养时间为7天时进行培养。
这对于球孢白僵菌的大规模生产和应用具有重要意义。
球孢白僵菌简析
球孢白僵菌简析白僵菌(Beauveria spp .)是目前世界上研究和应用最多的病原真菌之一 ,近年来也是热门生物农药的研究课题。
白僵菌 Beauveria 因其较广的寄主范围、较强的致病性和适应性等特点,逐渐成为农林害虫生物防治中应用最为广泛的生物杀虫剂之一。
白僵菌的寄生范围极广, 可寄生 15 个目 149个科的 700 多种昆虫及蜱螨类, 根据野外调查昆虫的越冬情况发现,因白僵菌致病而死的昆虫占真菌致病总数的21 %。
球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是一种广谱性昆虫病原真菌, 其致病性强, 杀虫范围广。
首个以球孢白僵菌Beauveria bassiana 为主要有效成分的生物制剂二十世纪在美国注册登记,而后各类白僵菌生物制剂不断涌现,目前全球以球孢白僵菌为有效成分的制剂占全部真菌杀虫剂的 33. 9% ,我国已登记的 11 种真菌杀虫剂中有 6 种为球孢白僵菌产品。
虽然球孢白僵菌得到了广泛的应用,但仍存在击倒害虫时间长和防治效果易受环境影响等缺点。
生物学特征白僵菌是在自然界广泛存在的子囊菌类虫生真菌,同时还能随着植物的生长进行传播。
以有丝分裂孢子进行增殖,其孢子在接触害虫后产生芽管侵入虫体,在虫体内大量繁殖,代谢产物对昆虫体内角质层、细胞膜以及细胞核等细胞器产生不利影响,最终导致害虫因代谢紊乱而死。
白僵菌可寄生鳞翅目、鞘翅目、同翅目、膜翅目等700 多种昆虫和部分蜱螨类,是广谱性虫生真菌。
同时白僵菌还具有较强的选择性,对瓢虫、食蚜虻和草蛉等侵染攻击能力较弱,从而有利于保护天敌昆虫,降低对昆虫生态群落的破坏。
白僵菌对害虫致病能力受到菌株、宿主及环境因子等影响。
白僵菌虽然侵染多种昆虫,但不同菌株对害虫寄生具有一定的专一性。
环境条件对白僵菌致病力有一定的影响。
曹艺潇和刘爱萍测试了不同温度、湿度下白僵菌对草地螟Loxostege sticticalis 幼虫的致病力,结果表明: 在温度为26 ℃ 时的致死中时( LT50 ) 最短,死亡率最高; 相对湿度越高,草地螟幼虫死亡率越高,相对湿度为 95% 时,死亡率达100%。
球孢白僵菌对植物生长的影响及其作用机制的初步研究
球孢白僵菌对植物生长的影响及其作用机制的初步研究目录摘要 .......................................................................................................................... ...... I Abstract (Ⅲ)目录(Ⅴ)1文献综述 (1)1.1研究背景 (1)1.2白僵菌对植物的促生作用 (1)1.3植物酶活性与植物生长的关系 (2)1.3.1蔗糖酶对植物生长的影响 (2)1.3.2过氧化氢酶对植物生长的影响 (2)1.4土壤酶活性与植物生长的关系 (3)1.4.1土壤蔗糖酶活性与植物生长的关系 (3)1.4.2土壤脲酶活性与植物生长的关系 (3)1.5研究的目的和意义 (3)2引言 (4)3材料与方法 (5)3.1材料 (5)3.2试验方法 (5)3.2.1培养基制备与白僵菌孢子培养 (5)3.2.2孢子悬浮液的制备 (6)3.2.3玉米苗的栽植方法 (6)3.2.4白僵菌接种方法 (6)3.2.5玉米苗各部位的生长量测定 (7)3.2.6选择性培养基制备与白僵菌成菌落数测定 (7)3.2.7酶活性测定 (8)3.2.8不同浓度白僵菌对玉米叶片成分的影响 (8)3.2.9数据分析 (8)4结果与分析 (11)4.1白僵菌对玉米生长的影响 (11)4.1.1白僵菌喷施叶面对玉米苗生长的影响 (11)4.1.2白僵菌喷施土壤对玉米生长的影响 (14)4.2白僵菌对玉米叶片酶活性的影响 (19)4.2.1白僵菌对玉米叶片蔗糖酶活性的影响 (19)4.2.2白僵菌对玉米叶片过氧化氢酶活性的影响 (19)4.3白僵菌对土壤酶活性的影响 (20)4.3.1白僵菌对土壤蔗糖酶活性的影响 (20)4.3.2白僵菌对土壤脲酶活性的影响 (20)4.4不同浓度白僵菌处理的玉米叶片成分差异研究 (21)4.4.1不同处理的玉米叶提取物的离子流图分析 (21)4.4.2差异化合物的离子解析 (23)5讨论 (27)5.1白僵菌对玉米的促生作用 (27)5.2白僵菌不同处理方式对玉米促生作用的差异 (27)5.3白僵菌在植物体内的内生性 (27)5.4白僵菌对玉米苗促生机制的研究 (28)5.4.1喷施叶面处理组白僵菌对玉米苗酶活性的影响 (28)5.4.2土壤施用处理组白僵菌对土壤酶活性的影响 (28)5.5不同浓度白僵菌对玉米叶片成分的影响 (28)6结论 (30)参考文献 (31)致谢 (37)个人简介 (38)1文献综述1.1球孢白僵菌的应用现状玉米是我国重要的粮食作物之一[1],除了具有食用功能外,还具有经济价值,其产量的高低是衡量我国人民生活水平的重要指标[2]。
不同处理条件下球孢白僵菌萌发率的研究
不同处理条件下球孢白僵菌萌发率的研究球孢白僵菌(Trichoderma harzianum)是一种常见的真菌,被广泛应用于农业领域中作为生物防治剂,可以有效抑制病原菌的生长,促进植物的生长。
球孢白僵菌的萌发率对其在农业生产中的应用至关重要,因此研究不同处理条件下球孢白僵菌萌发率的变化对提高其生物防治效果具有重要意义。
本文将重点探讨不同处理条件(如温度、湿度、基质等)对球孢白僵菌萌发率的影响,并提出相关研究展望。
温度是影响真菌生长发育的重要环境因素之一、一般情况下,球孢白僵菌的最适生长温度在25-28摄氏度之间。
过低或过高的温度都会影响球孢白僵菌的生长,从而影响其萌发率。
一项研究表明,在15摄氏度下,球孢白僵菌的萌发率显著下降,而在35摄氏度以上也会受到影响。
因此,在实际应用中需要选择适宜的温度条件来提高球孢白僵菌的萌发率。
湿度是影响真菌生长发育的另一个重要因素。
适宜的湿度条件可以促进球孢白僵菌的生长,从而提高其萌发率。
一项研究发现,保持基质湿润可以显著提高球孢白僵菌的萌发率,而干旱的条件下会导致球孢白僵菌无法顺利萌发。
因此,在实际应用中需要注意保持适宜的湿度条件来促进球孢白僵菌的生长和萌发。
基质是支持真菌生长的重要环境因素。
不同的基质成分和性质对球孢白僵菌的生长和萌发率有着重要的影响。
一项研究发现,在富含有机质的基质条件下,球孢白僵菌的萌发率显著提高,而在缺乏有机质的基质条件下,球孢白僵菌的生长会受到限制。
因此,在实际应用中需要选择适宜的基质条件来提高球孢白僵菌的萌发率。
综上所述,不同处理条件对球孢白僵菌的萌发率有着重要的影响。
因此,在农业生产中需要根据实际情况选择适宜的处理条件来提高球孢白僵菌的生物防治效果。
未来的研究方向可以进一步探讨不同处理条件对球孢白僵菌萌发率的综合影响,为其在农业生产中的应用提供更加科学的依据。
白僵菌形态特征
白僵菌形态特征白僵菌是一种真菌,也被称为白色木霉,属于子囊菌门、白僵菌属。
它们具有许多独特的形态特征,包括生长方式、色彩、菌丝等。
以下将详细介绍白僵菌的形态特征。
一、生长方式白僵菌的生长方式是以子囊体为主,它们通常在木材或其他有机物上形成小型圆锥体或球形。
这些子囊体通常呈现出白色或灰色的颜色,并且可以在不同的环境条件下形成不同大小和形状的结构。
二、颜色正如其名字所示,白僵菌通常呈现出白色或灰色的颜色。
但是,在某些情况下,它们可能会表现出其他颜色。
例如,在某些类型的木材上生长时,它们可能会呈现出黄色或棕色。
三、菌丝白僵菌具有典型的真菌结构——由细胞壁包裹的单个细胞——称为孢子。
这些孢子之间通过细长而纤细的线状物质相连,这就是所谓的“菌丝”。
白僵菌的菌丝通常呈现出白色或灰色,但在某些情况下也可能呈现出其他颜色。
四、子囊体子囊体是真菌形态特征中最显著的部分之一。
这些结构通常由多个孢子组成,它们被包裹在一个壳体内,并且通常在木材或其他有机物的表面上形成。
白僵菌的子囊体通常呈现出圆锥形或球形,直径为0.5至2毫米。
五、孢子孢子是白僵菌最重要的生殖器官之一。
它们由不同类型的细胞壁包裹,包括透明、棕色或黑色。
这些孢子可以通过多种方式传播,例如空气传播和接触传播。
六、环境条件对形态特征的影响环境条件对白僵菌的形态特征有着显著影响。
例如,在温度较低和潮湿环境下生长时,它们可能会呈现出更加灰暗和矮小的结构。
而在温度较高和干燥环境下生长时,则会呈现出更加明亮和高大的结构。
七、总结综上所述,白僵菌具有许多独特的形态特征,包括生长方式、颜色、菌丝、子囊体和孢子等。
这些特征可以帮助我们更好地了解白僵菌的生态和生物学特性,同时也对其在木材和其他有机物中的分解过程有着重要的意义。
球孢白僵菌与哈茨木霉对玉米苗期促生抗逆的影响
㊀山东农业科学㊀2023ꎬ55(8):39~47ShandongAgriculturalSciences㊀DOI:10.14083/j.issn.1001-4942.2023.08.006收稿日期:2022-11-26基金项目:山东省农业科技园区产业提升工程项目(2019YQ037)ꎻ国家重点研发计划项目(2017YFD0301003)ꎻ山东省自然科学基金项目(ZR2018LC016)作者简介:李子正(1998 )ꎬ男ꎬ山东寿光人ꎬ硕士研究生ꎬ主要从事作物栽培与耕作学研究ꎮE-mail:247532857@qq.com通信作者:褚鹏飞(1982 )ꎬ男ꎬ山东安丘人ꎬ副教授ꎬ主要从事作物高产生理生态研究ꎮE-mail:chupengfei@lcu.edu.cn王旭清(1967 )ꎬ男ꎬ山东莱阳人ꎬ研究员ꎬ主要从事作物生理生态及农业气象研究ꎮE-mail:saaswxq@163.com球孢白僵菌与哈茨木霉对玉米苗期促生抗逆的影响李子正1ꎬ蔡廷阳1ꎬ李元鑫1ꎬ杨婧1ꎬ张蕾蕾1ꎬ燕志翔1ꎬ褚鹏飞1ꎬ孟维伟2ꎬ王旭清2(1.聊城大学农学与农业工程学院ꎬ山东聊城㊀252000ꎻ2.山东省农业科学院作物研究所ꎬ山东济南㊀250100)㊀㊀摘要:为探明真菌内生特性对玉米苗期的促生抗逆效果ꎬ本研究以球孢白僵菌(Beauveriabasssiana)和哈茨木霉(Trichodermaharzianum)为研究对象ꎬ设置4个处理ꎬ包括CK(无菌水施用土壤)㊁BB(球孢白僵菌孢悬液施用土壤)㊁TH(哈茨木霉孢悬液施用土壤)和BB+TH(球孢白僵菌与哈茨木霉孢悬液联合施用土壤)ꎬ分析不同处理对玉米苗期生长指标和生理生化特性的影响ꎮ结果表明ꎬ接种后10dꎬBB+TH处理玉米叶㊁茎中的菌定殖率显著提高ꎬ分别达到39.80%和75.60%ꎻ而根部的定殖率仅次于TH处理ꎬ达82.40%ꎬ二者差异不显著ꎮ接种后20dꎬBB+TH处理茎和根中的菌定殖率最高ꎮ接种后30dꎬBB+TH处理叶㊁茎和根中的菌定殖率均最高ꎮ接种后10㊁20㊁30dꎬBB+TH处理的地上部干重㊁根干重和总生物量在不同采样期均最高ꎬ且均显著高于CKꎮBB㊁TH和BB+TH处理的株高㊁茎粗㊁最大叶长和叶宽㊁叶片SPAD值在不同采样期均高于CKꎬ且均以BB+TH处理最高ꎮ接种后3d和7dꎬBB+TH处理的叶绿素a和叶绿素a+b含量均显著高于CKꎬ叶绿素b和类胡萝卜素含量在接种后7d显著高于CKꎮ接种后3dꎬ各处理叶片净光合速率和气孔导度间无显著差异ꎻ接种后7dꎬBB和BB+TH处理叶片净光合速率显著高于CKꎬBB+TH处理叶片气孔导度显著高于CKꎮBB+TH处理叶片过氧化氢酶(CAT)㊁超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性均显著高于CKꎮ综上ꎬ本试验条件下球孢白僵菌和哈茨木霉均有促进玉米生长和提高抗逆性的作用ꎬ且以两种真菌联合施用效果更优ꎮ这为球孢白僵菌和哈茨木霉在农业生产实际中的联合施用提供了理论参考ꎮ关键词:球孢白僵菌ꎻ哈茨木霉ꎻ玉米ꎻ苗期ꎻ生长指标ꎻ生理生化特性中图分类号:S476.1+S513㊀㊀文献标识号:A㊀㊀文章编号:1001-4942(2023)08-0039-09EffectsofBeauveriabassianaandTrichodermaharzianumonGrowthPromotionandStressResistanceofMaizeSeedlingsLiZizheng1ꎬCaiTingyang1ꎬLiYuanxin1ꎬYangJing1ꎬZhangLeilei1ꎬYanZhixiang1ꎬChuPengfei1ꎬMengWeiwei2ꎬWangXuqing2(1.CollegeofAgronomyandAgriculturalEngineeringꎬLiaochengUniversityꎬLiaocheng252000ꎬChinaꎻ2.CropResearchInstituteꎬShandongAcademyofAgriculturalSciencesꎬJinan250100ꎬChina)Abstract㊀InthisstudyꎬBeauveriabasssianaandTrichodermaharzianumwereselectedassubjectstoex ̄ploretheeffectsoffungalendophyticcharacteristicsongrowthpromotionandstressresistanceofmaizeatseed ̄lingstage.FourtreatmentsweresetasCK(soilappliedwithsterilewater)ꎬBB(soilappliedwithsporesus ̄pensionofB.bassiana)ꎬTH(soilappliedwithsporesuspensionofT.harzianum)andBB+TH(soilappliedwiththesporesuspensionofB.bassianaandT.harzianum).Theeffectsofdifferenttreatmentsonthegrowthindexesandphysiologicalandbiochemicalcharacteristicsofmaizeseedlingswereanalyzed.Theresultsshowedthatat10daysafterinoculationꎬthecolonizationrateofthefungiinleavesandstemsofmaizeunderBB+THtreatmentincreasedsignificantlyꎬreaching39.80%and75.60%ꎬrespectively.ThecolonizationrateinrootsunderBB+THtreatmentreached82.40%ꎬsecondonlytoTHtreatmentꎬandtheirdifferencewasnotsignifi ̄cant.At20daysafterinoculationꎬthecolonizationrateoftheinstemsfungiandrootswasthehighestunderBB+THtreatment.At30daysafterinoculationꎬthecolonizationratesofthefungiinleavesꎬstemsandrootsunderBB+THtreatmentwerethehighest.At10ꎬ20and30daysafterinoculationꎬtheabovegrounddryweightꎬrootdryweightandtotalbiomassunderBB+THtreatmentwerethehighestindifferentsamplingperi ̄odsꎬandweresignificantlyhigherthanthoseofCK.TheplantheightꎬstemdiameterꎬmaximumleaflengthandwidthꎬandleafSPADvalueunderBBꎬTHandBB+THtreatmentswereallhighercomparedtoCKindif ̄ferentsamplingperiodsꎬandthoseunderBB+THtreatmentwerethehighest.At3and7daysafterinocula ̄tionꎬthecontentsofthechlorophyllaandchlorophylla+binBB+THtreatmentweresignificantlyhigherthanthoseinCKꎬandthatofchlorophyllbandcarotenoidweresignificantlyhigherthanthoseinCKat7daysafterinoculation.Therewerenosignificantdifferencesinphotosyntheticrateandstomatalconductanceamongalltreatmentsat3daysafterinoculation.ThenetphotosyntheticrateofBBandBB+THtreatedleaveswassignifi ̄cantlyhigherthanthatofCKat7daysafterinoculationꎬandthestomatalconductanceofBB+THtreatedleav ̄eswassignificantlyhigherthanthatofCK.Theactivityofcatalase(CAT)ꎬsuperoxidedismutase(SOD)andperoxidase(POD)inBB+THtreatedleavesweresignificantlyhigherthanthoseinCK.InconclusionꎬbothB.bassianaandT.harzianumhadtheeffectsofpromotingmaizegrowthandimprovingstresstoleranceundertheexperimentalconditionsꎬandthecombinedapplicationofthetwofungiwasbetter.ThisstudycouldprovidetheoreticalreferencesforthecombinedapplicationofB.bassianaandT.harzianuminagriculturalproductionpractice.Keywords㊀BeauveriabassianaꎻTrichodermaharzianumꎻMaizeꎻSeedlingstageꎻGrowthcharactersꎻPhysiologicalandbiochomicalcharacteristics㊀㊀玉米(ZeamaysL.)作为我国三大主粮作物之一ꎬ广泛种植于我国北方地区ꎬ产量已超过稻谷㊁小麦[1]ꎮ玉米生长除遭受干旱㊁高温及土壤营养不足等非生物胁迫外ꎬ病虫害也是影响玉米产量形成的重要因素[2]ꎮ近年来ꎬ随着玉米单产和种植面积增加ꎬ化肥和化学农药用量逐年升高ꎬ加剧了土壤营养流失和微生物多样性丧失ꎬ导致植食性害虫抗药性增加[3]ꎮ因此ꎬ人们陆续实施可持续粮食生产系统行动和战略ꎬ如有害生物综合管理(IPM)和发展有机农业等[4-5]ꎬ其中一项重要措施是生物防治剂(BCAs)的应用ꎬ即基于微生物及其代谢产物控制病虫害对作物的危害ꎬ增强植物对非生物胁迫的 免疫力 和促进作物生长等[6-7]ꎮ哈茨木霉(Trichodermaharzianum)作为木霉属最常见的菌种ꎬ广泛存在于土壤㊁植物残体及根际等[8]ꎮ有研究表明其在植物体内的定殖可以发挥防治植物病原菌和促进植物生长的双重作用[9-10]ꎬ一些哈茨木霉菌株的定殖可通过直接作用或间接诱导植物防御机制来抵御害虫的危害[11]ꎮ亦有研究证实ꎬ某些昆虫病原真菌[如球孢白僵菌(Beauveriabasssiana)]可通过人工接种的方式定殖于多种作物体内(如玉米㊁小麦㊁高粱等)[12-13]ꎬ并作为内生菌以直接或间接的方式提高植物对病虫害[14-15]或干旱等不良环境[16]的抗性ꎬ还可改善植物对养分的吸收ꎬ刺激生长类激素产生ꎬ促进植物生长[17]ꎮ目前ꎬ生物防治剂的研发从单一有益菌的使用逐渐转向多菌种联合应用ꎬ以发挥对植物更积极的影响[18]ꎮShrivastava等[19]研究指出ꎬ丛植菌根(AMF)与球孢白僵菌联合施用条件下ꎬ番茄植株部分萜类物质(如单萜㊁倍半萜㊁新单萜)含量显著增加ꎬ甜菜夜蛾危害显著减少ꎮFarias等[20]研究发现ꎬ淡紫拟青霉㊁球孢白僵菌㊁金龟子绿僵菌㊁厚垣普奇尼亚菌㊁棘孢木霉5种菌株联合施用显著促进大豆和玉米生长ꎮBatool等[21]研究指04㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀出ꎬ球孢白僵菌与棘孢木霉联合处理种子的玉米株高㊁产量显著增加ꎬ同时有效降低了亚洲玉米螟的危害ꎬ植株体内的过氧化物酶和过氧化氢酶等防御酶活性以及脯氨酸含量提高ꎬ且与茉莉酸-乙烯信号通路及抗氧化酶相关的基因表达量增加ꎮ本研究分析球孢白僵菌与哈茨木霉单独或联合土壤施用条件下玉米苗期干物质积累量㊁农艺性状㊁光合特性和抗性相关酶活性的变化规律ꎬ旨在探明两种生防真菌对玉米苗期生长的影响及其诱导玉米植株抗性的协同效应ꎬ以期为球孢白僵菌与哈茨木霉在农业生产中的联合施用提供理论依据ꎮ1㊀材料与方法1.1㊀试验材料本研究使用的球孢白僵菌菌株购于中国农业微生物菌种保藏中心ꎬ该菌株来源于吉林省农业科学院ꎬ菌种保存号为ACCCNo.30110ꎻ哈茨木霉菌株由德国哥廷根大学植物保护系提供ꎬ菌株号为T39ꎮ供试玉米品种为黄淮海地区广泛种植的郑单958ꎮ1.2㊀试验设计与方法1.2.1㊀试验设计㊀试验共设置4个处理:CK(无菌水施用土壤)㊁BB(球孢白僵菌孢悬液施用土壤)㊁TH(哈茨木霉孢悬液施用土壤)和BB+TH(球孢白僵菌与哈茨木霉孢悬液联合施用土壤)ꎮ1.2.2㊀孢子悬浮液的制备㊀将球孢白僵菌孢子粉接种至PDA(potatodextroseagar)培养基培养21dꎬ刮去孢子粉并用无菌水(含0.1%Tween80)混匀ꎬ通过内置脱脂棉的灭菌注射器过滤残渣ꎬ置于磁力搅拌器上充分振荡混匀15min后ꎬ使用Neubauer血细胞计数板计算孢子数量ꎮ接种前将孢子悬浮液调整至1ˑ108conidia/mL备用ꎮ在PDA培养基上进行孢子萌发试验ꎬ萌发率达到90%以上方可使用ꎮ哈茨木霉孢悬液制备同球孢白僵菌的方法ꎬ接种前将孢子悬浮液调整至1ˑ107conidia/mL备用ꎮ1.2.3㊀玉米种植及菌株接种㊀玉米种子消毒参考Akello等[22]的方法ꎬ略有改动ꎮ种子在70%乙醇中表面消毒3minꎬ1.5%次氯酸钠表面消毒3minꎬ然后用无菌水冲洗3次ꎮ吸取100μL冲洗水在PDA培养基上培养ꎬ进行消毒效果评价ꎮ将泥炭土与蛭石按照2ʒ1的比例混匀后装入塑料花盆(15cmˑ15cmˑ20cm)ꎮ每盆种两粒玉米种ꎮ温室条件(25ħʃ1ħꎬ每天光照14h㊁黑暗10hꎬ相对湿度75%)下生长至三叶一心ꎬ分别于幼苗根际附近均匀施入孢子悬浮液10mLꎬ连续2d各施用1次ꎬ第2次施用的第2天开始记录接种天数ꎮ随后将玉米放在温室条件下生长ꎮ所有花盆每周浇水施肥1次ꎬ以保证幼苗正常生长发育ꎮ1.3㊀测定项目及方法1.3.1㊀不同菌株在玉米植株内的定殖率㊀接种后10㊁20㊁30dꎬ每个处理选取5株玉米的根㊁茎㊁叶分别进行测定ꎮ根㊁茎㊁叶清洗后分别用1.5%次氯酸钠表面消毒3minꎬ再用70%乙醇表面消毒3minꎬ用100μL无菌水冲洗3次[23]后在无菌滤纸上干燥ꎮ将已消毒处理的根㊁茎和叶切成约0.5cm2的小块放入PDA培养基上ꎬ每个培养皿放置同一植株同一器官的9份样品ꎬ(25ʃ2)ħ避光培养21dꎬ定期观察真菌生长情况ꎮ最后冲洗的100μL无菌水在选择性培养基上培养2周ꎬ用以检测是否有菌丝生长ꎬ确定消毒效果[23]ꎮ根据公式计算定殖率:定殖率=生长菌丝的样品数/样品总数[24]ꎮ每处理重复5次ꎮ1.3.2㊀玉米生长指标㊀接种后10㊁20㊁30dꎬ每处理选玉米5株ꎬ使用SPAD-502Plus叶绿素仪(日本KONICAMINOLTA公司)测定叶片SPAD值ꎻ挖取玉米整株ꎬ测量株高㊁茎粗㊁最大叶长和叶宽ꎬ统计叶片数ꎻ将其地上部和地下部分别装入纸袋ꎬ75ħ烘干后称重ꎬ计算干物质积累量和根冠比ꎮ1.3.3㊀玉米叶片光合特征参数㊀接种后第3天和第7天选取完全展开的功能叶ꎬ用便携式光合仪(CIRAS-2ꎬ美国汉莎科学仪器有限公司)测定功能叶净光合速率(Pn)和气孔导度(Gs)ꎮ1.3.4㊀玉米叶片光合色素含量和生理指标㊀接种后第3天和第7天选取完全展开的功能叶ꎬ取样后立即用液氮冷冻ꎬ在-80ħ超低温冰箱中保存ꎮ采用分光光度计法测定玉米叶片光合色素含量[25]ꎬ分别在470㊁645㊁663nm处测定吸光度ꎮ采用氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性ꎬ采用紫外吸收法测定过氧化氢酶(CAT)活性ꎬ采用愈创木酚法测定过氧化物酶14㊀第8期㊀㊀㊀㊀㊀李子正ꎬ等:球孢白僵菌与哈茨木霉对玉米苗期促生抗逆的影响(POD)活性ꎬ分别在560㊁240㊁470nm测定吸光度[26]ꎮ每个指标重复测定5次ꎮ1.4㊀数据处理与分析采用SPSS23.0软件进行单因素方差分析(one-wayANOVA)ꎬ通过Duncan s法进行多重比较ꎬ采用GraphPadPrism8软件进行绘图ꎮ2㊀结果与分析2.1㊀不同处理下玉米植株不同部位真菌定殖率分析由表1可知ꎬ与CK比较ꎬ不同采样时期玉米各器官均有一定比例的菌定殖ꎮBB处理条件下ꎬ接种后10dꎬ茎和根中的菌定殖率达到最高ꎬ分别为51.00%和37.60%ꎬ根㊁茎㊁叶中的菌定殖率表现为茎>根>叶ꎻ接种后20dꎬ叶中的菌定殖率达到最高ꎬ为31.00%ꎮTH处理条件下ꎬ根㊁茎㊁叶中的菌定殖率均在接种后10d达到最高ꎬ分别为84.60%㊁28.60%㊁13.20%ꎮBB+TH处理下根㊁茎㊁叶中的菌定殖率均在接种后10d达到最高ꎬ分别为82.40%㊁75.60%㊁39.80%ꎮ㊀㊀表1㊀不同处理玉米植株不同部位真菌定殖率%接种后天数处理叶茎根10CK0.00ʃ0.00c0.00ʃ0.00d0.00ʃ0.00cBB26.60ʃ7.65ab51.00ʃ6.83b37.60ʃ5.77bTH13.20ʃ2.20bc28.60ʃ0.40c84.60ʃ8.23aBB+TH39.80ʃ5.75a75.60ʃ9.63a82.40ʃ5.61a20CK0.00ʃ0.00c0.00ʃ0.00c0.00ʃ0.00cBB31.00ʃ6.60a37.60ʃ10.40ab28.80ʃ7.64bTH11.00ʃ3.48ab17.60ʃ2.69bc73.60ʃ5.61aBB+TH22.00ʃ3.48a53.40ʃ11.96a78.00ʃ9.84a30CK0.00ʃ0.00b0.00ʃ0.00b0.00ʃ0.00dBB15.40ʃ5.61a33.20ʃ7.92a17.60ʃ2.69cTH8.80ʃ4.12ab11.00ʃ3.48b60.20ʃ4.58bBB+TH19.80ʃ4.12a37.60ʃ5.77a75.80ʃ4.12a㊀㊀注:数据为平均值ʃ标准误ꎬ同列同一时期数据后不同小字母表示处理间差异显著(P<0.05)ꎬ下同ꎮ2.2㊀不同处理对玉米苗期生长指标的影响2.2.1㊀对苗期干物质积累的影响㊀由表2可知ꎬ球孢白僵菌和哈茨木霉单独或联合土壤施用条件下ꎬ3个采样时期玉米植株地上部干重㊁根干重和总生物量较CK均有一定增加ꎮ其中ꎬBB+TH处理下3个采样时期的地上部干重㊁根干重和总生物量均最高ꎮ接种后30dꎬ地上部干重㊁植株总生物量处理间差异显著ꎬ均表现为BB+TH>TH>BB>CKꎮ接种后10d时BB处理的根冠比显著低于CKꎬ接种后30d时TH和BB+TH处理的根冠比显著低于CKꎬ其余时期各处理间差异不显著ꎮ㊀㊀表2㊀不同处理玉米苗期单株干物质积累量接种后天数处理地上部干重/g根干重/g总生物量/g根冠比10CK0.5758ʃ0.006c0.2303ʃ0.003c0.8061ʃ0.008c0.4000ʃ0.0007aBB0.6480ʃ0.014ab0.2435ʃ0.003b0.8915ʃ0.016b0.3760ʃ0.0050bTH0.6263ʃ0.016b0.2507ʃ0.002b0.8770ʃ0.018b0.4011ʃ0.0076aBB+TH0.6688ʃ0.009a0.2705ʃ0.005a0.9393ʃ0.013a0.4043ʃ0.0039a20CK1.3205ʃ0.070b0.3812ʃ0.003c1.7017ʃ0.073b0.2918ʃ0.0146aBB1.4345ʃ0.045ab0.4215ʃ0.009b1.8560ʃ0.052ab0.2944ʃ0.0053aTH1.4315ʃ0.052ab0.4163ʃ0.006b1.8478ʃ0.058ab0.2917ʃ0.0065aBB+TH1.5733ʃ0.023a0.4389ʃ0.003a2.0122ʃ0.026a0.2791ʃ0.0030a30CK1.9428ʃ0.012d0.5912ʃ0.010c2.5239ʃ0.021d0.2302ʃ0.0020aBB2.1579ʃ0.024c0.6454ʃ0.002b2.8023ʃ0.026c0.2304ʃ0.0014aTH2.2665ʃ0.038b0.6509ʃ0.003ab2.9174ʃ0.040b0.2232ʃ0.0023bBB+TH2.4596ʃ0.052a0.6665ʃ0.003a3.1261ʃ0.055a0.2134ʃ0.0029c2.2.2㊀对苗期农艺性状及SPAD值的影响㊀接种后10dꎬ各处理的株高㊁茎粗及最大叶宽和叶长变化规律一致ꎬ均表现为BB+TH>TH>BB>CKꎮBB+TH处理的株高㊁茎粗㊁最大叶长和叶宽较CK分别显著增加15.08%㊁10.59%㊁9.43%㊁4.85%(图1A~D)ꎻ各处理间叶片数无显著差异(图1E)ꎻBB+TH㊁TH㊁BB处理的叶片SPAD值均显著高于CKꎬBB+TH与TH和BB处理间差异显著ꎬTH与BB处理间差异不显著(图1F)ꎮ接种后20dꎬ各处理的株高和茎粗变化规律一致ꎬ均表现为BB+TH>TH>BB>CKꎮBB+TH处理的株高和茎粗较CK分别显著增加13.88%和12.70%(图1A㊁B)ꎮ各处理的最大叶宽㊁最大叶长㊁叶片数和叶片SPAD值变化规律一致ꎬ均表现为BB+TH>BB>TH>CKꎮBB+TH处理的最大叶长㊁最大叶宽和叶片SPAD值较CK分别显著增加17.71%㊁4.34%和8.82%ꎮ各处理间叶片数无显著差异ꎮBB+TH㊁TH㊁BB处理的叶片SPAD值均显著高于CKꎻBB+TH㊁TH处理间差异显著ꎬ但与BB处理间差异均未达显著水平(图1C~F)ꎮ接种后30dꎬBB+TH㊁TH㊁BB处理的株高和茎粗均显著高于CKꎬBB+TH处理的株高和茎粗较CK分别显著增加12.52%㊁14.38%(图1A㊁B)ꎮBB和BB+TH处理的最大叶长和最大叶宽均显著高于CKꎬBB+TH处理的最大叶长和最大叶宽24㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀较CK分别显著增加9.14%和15.96%ꎬBB处理则较CK分别显著增加4.84%和8.45%(图1C㊁D)ꎮ各处理间叶片数无显著差异(图1E)ꎮBB+TH㊁TH㊁BB处理的叶片SPAD值均显著高于CKꎬ其中ꎬBB+TH处理较CK显著增加9.11%ꎬ且显著高于BB和TH处理ꎬBB与TH处理间差异不显著(图1F)ꎮ上述结果表明ꎬ单独或联合施用球孢白僵菌和哈茨木霉ꎬ玉米植株的农艺性状指标及SPAD值均有一定程度增加ꎬ以联合施用效果最好ꎮ同时期柱上不同小写字母表示处理间差异显著(P<0.05)ꎬ下同ꎮ图1㊀不同处理下玉米苗期农艺性状及SPAD值2.3㊀不同处理对玉米叶片净光合速率、气孔导度的影响图2显示ꎬ与CK相比ꎬ各处理接种后第3天和第7天的叶片净光合速率和气孔导度均有一定增加ꎬ以BB+TH处理的提升幅度最大ꎮ接种后3dꎬ各处理间叶片的净光合速率和气孔导度无显著差异ꎻ接种后7dꎬBB㊁BB+TH处理的净光合速率分别较CK显著提高6.39%㊁9.18%ꎬBB+TH处理的气孔导度较CK显著提高14.14%ꎮ表明单独或联合接种球孢白僵菌和哈茨木霉均能提高玉米叶片净光合速率ꎬ增加气孔导度ꎬ进而提高光合产物形成ꎬ促进玉米生长ꎮ2.4㊀不同处理对玉米叶片光合色素含量的影响与CK相比ꎬBB㊁TH和BB+TH处理接种后第3天和第7天玉米叶片光合色素含量均有一定程度的增加(图3)ꎮ接种后3dꎬBB㊁BB+TH处理叶绿素a和叶绿素a+b含量分别较CK显著提高6.34%㊁6.82%和5.98%㊁6.46%ꎬTH处理与CK无显著差异ꎻ各处34㊀第8期㊀㊀㊀㊀㊀李子正ꎬ等:球孢白僵菌与哈茨木霉对玉米苗期促生抗逆的影响理的叶绿素b和类胡萝卜素含量与CK均无显著差异ꎮ接种后7dꎬBB㊁TH㊁BB+TH处理叶片叶绿素a㊁b含量分别较CK显著提高7.64%㊁10.86%㊁10.26%和4.97%㊁9.00%㊁7.28%ꎻBB㊁TH㊁BB+TH处理的叶绿素a+b和类胡萝卜素含量分别较CK显著提高6.98%㊁10.40%㊁9.51%和8.12%㊁12.33%㊁9.55%ꎮ上述结果表明单独或联合施用球孢白僵菌和哈茨木霉均能增加玉米幼苗在接种初期的叶片叶绿素含量ꎬ为光合能力的提升和后期生长发育提供有力条件ꎮ图2㊀不同处理玉米叶片净光合速率、气孔导度图3㊀不同处理玉米叶片光合色素含量2.5㊀不同处理对玉米叶片抗性相关酶活性的影响图4显示ꎬ各处理接种后第3天和第7天的CAT㊁SOD和POD活性均较CK有所提高ꎬ部分处理间差异显著ꎮ接种后3dꎬBB+TH处理叶片CAT活性较CK显著提高6.02%ꎻBB处理叶片SOD活性较CK显著提高10.37%ꎮBB和BB+TH处理叶片POD活性分别较CK显著提高4.93%和7.67%ꎮ接种后7dꎬBB㊁TH㊁BB+TH处理叶片CAT㊁SOD㊁POD活性均显著高于CKꎬ处理间表现为BB+TH>TH>BB>CKꎮBB+TH处理叶片CAT㊁SOD㊁POD活性较CK分别显著提高16.23%㊁25.49%㊁19.64%ꎻTH处理叶片CAT㊁SOD㊁POD活性较CK分别显著提高13.20%㊁20.22%㊁16.58%ꎻBB处理叶片CAT㊁SOD㊁POD活性较CK分别显著提高11.26%㊁16.41%㊁13.78%ꎮ表明真菌单独或联合接种初期玉米抗性相关酶活性提高ꎬ使玉米产生诱导性系统抗性ꎬ从而减轻外界不良因素对玉米幼苗的伤害ꎮ44㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀图4㊀不同处理玉米叶片抗性相关酶活性3㊀讨论与结论Wei等[27]发现在土壤施用条件下能够检测到球孢白僵菌在番茄植株根㊁茎㊁叶中的定殖且定殖率较浸种处理高ꎮJaber等[28]研究指出ꎬ球孢白僵菌土壤施用后其在甜椒茎和根内的定殖率最高且较为稳定ꎮ影响内生生防真菌在玉米中定殖的因素有很多ꎬ包括栽培介质㊁接种方法㊁表面活性剂特性㊁菌株种类等[29]ꎮBatool等[21]研究发现ꎬ球孢白僵菌与棘孢木霉联合土壤施用下能够从根部传播至叶片ꎮ本研究同样发现球孢白僵菌和哈茨木霉联合土壤施用下ꎬ能够从根部转移至叶片内ꎬ且在玉米植株不同部位均检测到其定殖ꎮ此外ꎬ本试验条件下ꎬ两种真菌均能在玉米植株内定殖ꎬ单独施用时哈茨木霉更易在根部定殖ꎬ而球孢白僵菌在茎内的定殖率更高ꎮ当两种真菌联合施用时ꎬ两者在根部和茎部均有较高的定殖率ꎮ前人研究证实球孢白僵菌和哈茨木霉单独施用均具有促进植物生长的作用ꎮGonzalez ̄Guzman等[30]研究表明ꎬ土壤施用球孢白僵菌能显著增加小麦总根长和茎伸长阶段的根表面积以及细根的根长和根表面积ꎮPachoute等[31]研究发现球孢白僵菌在土壤施用条件下显著提高豇豆植株的株高㊁叶片数和生物量ꎬ其叶片气孔导度㊁蒸腾速率㊁CO2同化率以及叶绿素a+b含量亦显著升高ꎮShukla等[32]指出ꎬ哈茨木霉在水稻根部的定殖促进根系生长ꎮ齐素敏等[33]发现哈茨木霉根部定殖能够显著增加草莓植株的生物量㊁产量和叶绿素含量ꎮBatool等[21]研究发现ꎬ球孢白僵菌和棘孢木霉联合施用较两种生防真菌单独施用更有利于促进玉米生长和产量形成ꎮ本试验表明土壤施用条件下ꎬ球孢白僵菌和哈茨木霉单独施用均能促进玉米地上部和地下部生长ꎬ叶绿素含量亦增加ꎬ且两种真菌联合施用对玉米幼苗生长发育的促进效果更显著ꎬ但其协同机制尚需进一步研究ꎮ有研究指出ꎬ生防真菌的定殖能够诱导植物自身诱导系统性抗性和获得系统性抗性ꎬ以提高其对病虫害等不良外界环境的适应能力:Tomilo ̄va等[34]通过浸根的方式分别将球孢白僵菌和罗伯茨绿僵菌接种到马铃薯体内ꎬ发现球孢白僵菌浸根处理植株的SOD活性和POD活性有一定程度的增加ꎻ费泓强等[35]研究表明ꎬ球孢白僵菌的定殖能够增加玉米幼苗POD㊁SOD㊁CAT㊁PAL㊁PPO活性ꎬ有利于提高玉米幼苗抗逆性ꎻ许绍欢等[36]研究发现球孢白僵菌和摩西球囊霉菌混合接种能够显著提高成熟期烟草植株的CAT㊁POD㊁SOD活性ꎬ进而提高其抗逆性ꎮ本试验结果表明ꎬ球孢白僵菌的定殖可增加CAT㊁SOD㊁POD活54㊀第8期㊀㊀㊀㊀㊀李子正ꎬ等:球孢白僵菌与哈茨木霉对玉米苗期促生抗逆的影响性ꎬ从而提高植株的抗逆性ꎬ且球孢白僵菌和哈茨木霉联合接种处理叶片的酶活性均最高ꎮ球孢白僵菌和哈茨木霉作为农林业生产中常见的昆虫病原真菌和病原拮抗真菌ꎬ探明两种真菌使用的最佳方式和浓度ꎬ能够减少化学肥料和农药的施用ꎬ不仅提高生产者的农业收入ꎬ而且还促进农林业的可持续发展ꎮ本试验条件下ꎬ哈茨木霉和球孢白僵菌联合土壤施用(BB+TH)时ꎬ其在玉米植株不同部位的定殖率明显高于其他处理ꎬ且在根部的定殖率最高ꎻBB+TH处理下3个采样时期的地上部干重㊁根干重和总生物量均最高ꎬ植株农艺性状及叶片SPAD值表现最优ꎬ明显提高叶片叶绿素含量ꎬ提高玉米叶片净光合速率ꎬ增加气孔导度ꎻ联合施用处理叶片CAT㊁SOD㊁POD活性显著高于CK和单球孢白僵菌处理(BB)ꎬ较CK分别显著提高16.23%㊁25.49%㊁19.64%ꎮ本研究结果可为两种有益微生物的联合施用提供理论参考ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[1]㊀刘绍熹ꎬ刘帅.我国玉米进出口市场势力的变化分析[J].玉米科学ꎬ2022ꎬ30(2):183-190.[2]㊀MiedanerTꎬJuroszekP.Globalwarmingandincreasingmaizecultivationdemandcomprehensiveeffortsindiseaseandinsectresistancebreedinginnorth ̄westernEurope[J].PlantPatholo ̄gyꎬ2021ꎬ70(5):1032-1046.[3]㊀ElnahalASMꎬEl ̄SaadonyMTꎬSaadAMꎬetal.Theuseofmicrobialinoculantsforbiologicalcontrolꎬplantgrowthpromo ̄tionꎬandsustainableagriculture:areview[J].EuropeanJour ̄nalofPlantPathologyꎬ2022ꎬ162(4):759-792. 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球孢白僵菌生物学特性与其对小菜蛾致病力相关性分析
26( 2) 143- 148 中国生物防治Chinese Journal of Biological Control 2010 年5 月球孢白僵菌生物学特性与其对小菜蛾致病力相关性分析1 2 1* , 陈冬虹 1( 1 华南农业大学资源环境学院, 广州510642; 2 广东省农科院植保所, 广州510640)摘要: 为明确球孢白僵菌的各项生物学指标与其对小菜蛾致病力间的相关性, 对一株球孢白僵菌菌株GXU Bb 进行单孢分离, 测定了菌株GXU Bb 及其分离子菌株GXU Bb16、GXU Bb10、GXU Bb13 和GXU Bb05 这5 个菌株的生长速率、产孢量、孢子萌发率、胞外蛋白酶水平和几丁质酶水平等多项生物学指标。
结果表明, 各菌株间生长速率和孢子萌发率无显著差异; 产孢量变化范围 1 54 107~ 2 98 107个/ml; 胞外蛋白酶水平变化范围 1 04~ 1 19; 几丁质酶水平变化范围 1 05~ 1 14; 各菌株间对小菜蛾二龄幼虫的致病力差异较大, 校正死亡率变化范围为39 81% ~ 83 79% 。
将各生物学指标与菌株对小菜蛾二龄幼虫的校正死亡率进行回归分析得出, 球孢白僵菌对小菜蛾的致病力与菌株生长速率、孢子萌发率无显著相关关系; 与产孢量、胞外蛋白酶水平呈极显著正相关关系; 与几丁质酶水平呈显著正相关关系。
关键词: 球孢白僵菌; 小菜蛾; 生物学特性; 致病力; 相关性中图分类号: S476 12 文献标识码: A 文章编号: 1005 9261( 2010) 02 0143 06Correlation between Biological Characteristics of Beauveria bassianaand Its Virulence to Plutella xylostellaLEI Yan yuan 1, LU Li hua2, HE Yu rong1* , CHEN Dong hong1( 1 College of Resour ces and Environment, South China Agricultural University, Guangzhou 510642;2 Plant Protection Research Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China)Abstract: To explicit the correlation between biological characteristic and virulence of Beauveria bassianato Plutella xylostella, five B. bassinana strains, including parental strain GXU Bb and its four singlespore isolations were assayed on the growth rate, sporulation, spore germination rate, extracellular protease level, chitinase level and their virulence to the second instar larvae of P. xylostella. Resultsshowed there was no significant difference in growth rate and spores germination rate among the strains.The sporulation of these strains was 1 54 107- 2 98 107 conidial/ ml. The extracellular protease leveland chitinase level were 1 04- 1 19 and 1 05- 1 15, respectively. The corrected mortality of eachstrain to the second instar larvae was 39 81% - 83 79% . Factors affecting the virulence were analyzed收稿日期: 2009 07 22基金项目: 公益性行业( 农业)科研专项( 200803001) ; 广东省农业攻关项目( 2006B20301037)作者简介: 雷妍圆(1981- ) , 女, 博士研究生; * 通讯作者, E mail: yrhe@scau. edu. cn。
球孢白僵菌营养需求及培养条件
3.加入微量元素铜、锌对提高孢子含孢量和萌发 率都有促进作用, 实验中只分别加入了各种微量元 素, 如混合加入微量元素, 其对孢子质量指标的影 响可作进一步探究。
4.3五个因素对孢子质量指标的综 合影响
碳源(A)、氮源(B)、温度(C)、Ph(D)及微量元素(E) 五个因素对球孢白僵菌 孢子含孢量和萌发率的影响可见表 2, 就含孢量而言, 五个因子中, 温度的极 差值最大, 为 1.67, 其次是碳源和 pH 值, 微量元素的极差值最小, 仅为 0.90, 这说明对含孢量影响最大的因素是温度, 其次是碳源和 pH 值, 微量元素对 含孢量影响作用最小, 各因素对含孢量影响的主次顺序为 C>A>D>B>E; 就 萌发率而言, 五个因素中, 也是以温度的极差值最大, 为 11.78, 其次是 pH 值的, 碳源的极差值最小, 仅为 2.74, 这说明温度对萌发率的影响最大, 其次 是 pH 值, 碳源影响最小, 各因素对萌发率影响的主次顺序为 C>D>E>B>A。 综合上面结果分析, 球孢白僵菌最适宜的产孢培养基为 A1B4C3D2E3, 即 4%葡萄糖、1%酵母粉、1% 蛋白胨、2%琼 脂 、0.1%KH2PO4、0.1%MgSO4、0.01%ZnSO4。培养基 最佳 pH 为 6 左右, 培养最佳温度为20℃
5.讨论
1 在球孢白僵菌培养基中, 无论是孢子含孢量还是 孢子萌发率, 碳源都是单糖利用效果优于双糖和多 糖;在添加的氮源中, 虽然有机氮蛋白胨对于提高 含孢量和萌发率都有很好的效果, 但价格较高, 若 单从提高含孢量角度考虑, 可以选用价格低、使用 方便的无机氮硝酸钾。
2.此次实验只采用了含孢量和萌发率这两个质量 指标来评价球孢白僵菌孢子粉的质量, 因为含孢量 反映了菌株的产孢力、可能的扩散传播能力; 萌发 率反映了菌株的可能侵染性、致病力等, 而没有采 用反映孢子在环境中的抗逆性的另一指标含水量, 主要是考虑到生产ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ来的白僵菌孢子粉其含水量 可以进行人为控制,现在可以将孢子粉的含水量冷 冻干燥到 4%以下, 完全可以达到白僵菌制剂所要 求的孢子粉含水量。
白僵菌应用研究进展
白僵菌在人工培养施用过程中ꎬ菌株毒力会在
[23]
大量白僵菌菌株ꎬ并进行了毒性测定等研究 [29 - 30] ꎮ
ꎮ 在野外的试验中也发现了类似的问题ꎬ从松
墨天牛 Monochamus alternatus 幼虫分离得到的 2 株
株致死率均显著高于自然菌株 [33 - 35] ꎮ 将白僵菌的
孢子悬浮液置于紫外灯下进行诱变处理ꎬ筛选获得
2 1 自然筛选法 自然筛选法是一种常规选育方
从法国、哈萨克斯坦、澳大利亚以及我国 11 个省份
共采集了 90 株球孢白僵菌ꎬ分析其遗传多样性和种
法ꎬ通过从野外采集白僵菌致死虫体上分离得到自
然菌株ꎬ根据其产孢量和毒力高低从中筛选具有较
群遗传结构时ꎬ发现不同地区的菌株遗传多样性呈
强侵染能力的菌种ꎮ 研究发现ꎬ在不同的自然环境
性、高毒力菌株选育、菌株高毒力稳定性、施菌方式
菌药互配等方面研究进行概述ꎮ
菌生物制剂不断涌现ꎬ目前全球以球孢白僵菌为有
1 白僵菌生物学特性
登记的 11 种真菌杀虫剂中有 6 种为球孢白僵菌产
1 1 白僵菌的致病性 白僵菌是在自然界广泛存
保护部联合发布« 关于推进山水林田湖生态保护修
进行传播 [10] ꎮ 以有丝分裂孢子进行增殖ꎬ其孢子在
Nanchang 330013ꎬChina)
Abstract:Beauveria is one of entomopathogenic fungiꎬwith strong pathogenicityꎬwide range of infec ̄
tionꎬstrong adaptability and no environmental pollution. As a kind of microbial broad ̄spectrum insecti ̄
10株白僵菌菌株形态学与分子鉴定
10株白僵菌菌株形态学与分子鉴定刘宝生;谷希树;田涛;霍建飞;孙淑琴【摘要】对10株白僵菌属菌株的菌落形态、产孢结构和分生孢子形状、大小作了观察与测量,形态学鉴定为球孢白僵菌.同时对此10株球孢白僵菌核糖体DNA - ITS进行了测序分析,与NCBI数据库中的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)多个菌株的同源性达99.10%~99.64%.依此,10株白僵菌菌株分子鉴定结果为球孢白僵菌(Beauveria bassiana).%In this study, the colony morphology, spore structure and spore shape and size of 10 Beauveria strains were observed and measured, and they were initially identified as Beauveria bassiana. At the same time, their ribosomal DNA - ITS were sequenced and compared with that of Beauveria bassiana in NCBI database. The results showed the homology was 99.10% -99.64%. Eventually these 10 strains were identified as Beauveria bassiana.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2012(044)006【总页数】4页(P93-96)【关键词】球孢白僵菌;菌落形态;分子鉴定;DNA-ITS测序【作者】刘宝生;谷希树;田涛;霍建飞;孙淑琴【作者单位】天津市植物保护研究所,天津300381;天津市植物保护研究所,天津300381;天津市植物保护研究所,天津300381;天津市植物保护研究所,天津300381;天津市植物保护研究所,天津300381【正文语种】中文【中图分类】S476+.12白僵菌属(Beauveria Vuill.)又称波氏菌属,是Vuillemin在1912年为纪念法国真菌学家Beauveria而建立的,它是约100属虫生真菌中最常见和最重要的属之一[1],在分类学上属于真菌门,半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目。
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长影响不大 , 但对孢 子萌发有明显的延迟现象 。
关键词 : 球孢 白僵 菌 ; 国白蛾 ; 美 生物学特性 ; 丝生长 ; 菌 孢子萌发
中图 分 类 号 : 6 . S 31 7 文献 标 志码 : A
S u y O lt e b o o ia h r c e itc o a e i b s i n Bbl t d i h i l g c lc a a t rs i f Be uv r a a sa a 1
球孢 白僵 菌 B 菌株 生物 学特 性 研 究 b l 1
国志峰 邵洪波 刘洪 亮 , , , 毕拥 国4 ,苏丽艳 王 学 良 , 6
( 河北 省塞罕坝机械林场 , 1 河北 围场
3河 北省东光县农业局 , 河北 东光 5河北省玉 田县玉 田镇农技站 , 河北 玉田
085 ; 河 北农业 大学 理学院 , 64 32 河北 保定
ntnrt o o s a eh hsa 10 Rt dc ahd10 ae 2h U rd tncuddl o s en— ao e fpr sh i et t0 % t v ̄hr ce % fr 1 . V iaii ol e ys r n i i a s e w t g - e i 0 t r ao a peg
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Ab ta t B a  ̄r a a a i ltd f m i fee a e w n l u awa u i e 1 t h f c f i ee t o dt n , sr c : e u i b  ̄in s ae a o o r ne td fl w b o l p p sp r d ̄ ̄ .T e e e t f rn n i o s l i f 1 od c i s c s mos r , U uha iue t V,l h  ̄a d nlt i o h e l m o t n e n mt n o p rs o e ̄ r o a a. i t n l i  ̄, n te my ei g Nu u w h a d g n i i f so e f B o o / b  ̄/n a B l w r tde h n.Wh ntetmp rtr b 1 ee s idt e u e h e eau e惴 2 ℃ ,h eu t s o e h t h 5 te r sl h w dta ,t emy eim r w d b s a dte g n i s el u go e e t n h e n -
第2 卷 第 1 5 期
201 0年 3 月
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文 章 编 号 :0746 00 0. 5.5 10 —9 12 1) 1 0 70 f 0
bi r i e og u n 66 0 C i ; oe r oeeo gi l r U w rt o l e, adn e Po n ,D ng a g 0 10 , hn 4 F r t C lg vc a sy l fA rut e n e i e i B o i c u sy ft b g 0 10 , hn 5 A rt h i lS t n o ui o n o e r i e Y t n 0 40 , h a; 700 Ci a; go cn o t i f Yc n Tw t  ̄iPo n , ui 6 10 C i 6 e c ao a f t vc a n A r e n o S t no go c i l t i t h c a o f ̄nzo o no I e Poi e Y t n0 4 0 , hn ) gi u Tw e i r n , ui 6 17 C i t ft b v c a a
白僵菌纯菌落 。采用生长速率法 和悬滴法研究 了在不同湿度 、 紫外线 、 营养 液和培养基 条件下对球 孢 白僵 菌
B l 菌株营养生长和孢子萌发 的影响 。结果表 明 ,5 b1 2 ℃时 , 球孢 白僵菌 B l 在湿度为 10 b1 0 %的条 件下菌丝 生 长速度最快 , 孢子萌发率速度最高 , 2 后萌 发率 能够达 到 10 紫外线 照射在 3 i 在 1h 0 %; 0m n以内时 , 菌丝生 对
0 10 ; 66 04河北农业 大学 林学院 , 河北 保 定
01 0 70 ; 0
0 10 ; 700 040 ) 6 17
040 ; 6 10 6河北省玉 田县唐 自头镇农技站 , 河北 玉田
摘要 : 受侵 染的美国 白蛾蛹体 内分 离 出白僵菌 ( eue/ bsa a 菌株 , 从 Batr as r ) a / i 并对该 白僵 菌菌落进 行纯化 , 获得