银杏内酯注射液对大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的保护作用_曹磊

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银杏内酯B对大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

银杏叶为银杏科银杏属多年生落叶乔木银杏的叶，是我国传统中药品种，《本草纲目》和《中药志》中均有记载，其味甘、苦、涩，性平，具有益心敛肺、化湿止泻之功效。

现代药学研究发现，萜内酯类化合物为银杏叶的主要有效成分，包括银杏内酯A、B、C、M和白果内酯。

研究表明银杏内酯为血小板活化因子（PAF）拮抗剂，活性最强的即为银杏内酯B（Ginkgolide B，GB），银杏内酯B能够通过抑制细胞凋亡而对脑缺血再灌注、肝脏缺血再灌注等起到一定的保护作用[1-3]。

但银杏内酯B是否对心肌缺血再灌注后细胞凋亡具有抑制作用及其作用机制的研究报道尚不多见。

本实验通过制备心肌缺血再灌注大鼠模型并给予银杏内酯B进行干预治疗，观察银杏内酯B对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达的影响，以期为临床用药提供依据。

1 实验材料1.1 动物实验用SD大鼠（清洁级，雄性，鼠龄8周龄，220～260g）购自河北省实验动物中心，动物合格证号：SCXK（冀）2013-1-003。

饲养环境：温度22～25℃，湿度55%~60%，通气良好。

1.2 药物与试剂银杏内酯B购自美国Sigma公司（批号：BAT2016012）。

四氮唑（TTC）购自美国Sigma公司（批号：M2128）；苏木精-尹红（HE）试剂盒、TUNEL试剂盒购自南京建成生物工程研究所（批号分别为：170214、160925）；Bcl-2、Bax、激活型Caspase-3多克隆抗体购自上海碧云天生物技术有限公司（批号分别为：201701024、20161217、20170104）。

1.3 仪器酶标仪（WD-2102A型，北京六一生物科技有限公司）；组织匀浆机（FS-2型，金坛市盛威实验仪器厂）；多用电泳仪、电泳槽（DYY-11型、JY-SCZ2型，北京六一仪器厂）；石蜡切片机（RMI255型，德国Leica公司）；光学显微镜（日摘要目的：研究银杏内酯B 对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白B 细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X 蛋白（Bax）、激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达的影响。

银杏内酯B对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

银杏内酯B对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究目的观察银杏内酯B对心肌缺血再灌注（MI/R）损伤的保护作用，探讨其作用机制。

方法采用冠状动脉结扎使心肌缺血30min再灌注2h的方法建立MI/R损伤大鼠模型，按随机数字表法分为模型组、银杏内酯B三个剂量组（2、4、8mg/kg）、假手术组（n=10），于术前1h和再灌注即刻分别进行尾静脉注射给药。

取血清，测定CK、LDH、SOD活性及MDA含量：取心脏，测定心肌梗死面积。

结果银杏内酯B高剂量可明显缩小MI/R损伤大鼠的心肌梗死面积，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）：银杏内酯B高、中剂量可显著降低血清CK和LDH活性（P＜0.05或P＜0.01），低剂量可明显降低血清CK活力（P＜0.05）：银杏内酯B各剂量组的血清SOD活性显著升高（P＜0.05或P＜0.01），血清MDA 含量则明显降低（P＜0.01）。

结论银杏内酯B预处理对MI/R损伤的保护作用与其减少自由基的产生、抑制脂质过氧化反应等有关。

标签：银杏内酯B：心肌缺血再灌注损伤：超氧化物歧化酶：丙二醛心肌缺血再灌注（myocardial ischemia/reperfu-sion，MI/R）损伤是心肌组织在较长时间缺血后恢复血液灌流，反而出现比再灌注前更严重的损伤和功能障碍，包括冠状动脉血流量减少心脏收缩功能降低及血管反应性改变等。

目前临床上对于MI/R损伤的防治研究尚无突破性进展，从中药和天然药物中寻找具有潜在临床应用价值的心肌保护药正逐渐受到研究人员的重视银杏内酯B（ginkgolide B）是中药银杏叶的活性成分，具有抗炎、抗过敏、抗移植排斥及神经保护等作用，临床用于防治脑血管疾病。

近年研究证实，银杏内酯B 对MI/R动物的心肌损伤具有一定的改善作用。

本研究应用MI/R损伤大鼠模型，探讨银杏内酯B的心肌保护作用及其可能的作用机制。

1.材料和方法1.1动物：清洁级SD大鼠，雌雄各半，体重（220±20）g，由河北医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCxK（冀）2008-1-1003。

银杏二萜内酯对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响及其机理研究

银杏叶为银杏科银杏属多年生落叶乔木银杏的叶，是我国传统中药品种，《本草纲目》和《中药志》中均有记载，其性味甘苦涩平，具有益心敛肺、化湿止泻之功效。

现代药学研究发现，银杏二萜内酯类化合物为银杏叶的主要有效成分，银杏二萜内酯葡胺注射液（DGMI）主要成分为银杏内酯，其中银杏内酯A占35%，银杏内酯B占60%，银杏内酯C占2%，银杏内酯K占2%。

既往研究发现DGMI具有抑制氧化应激、抑制细胞凋亡等多种生物学作用[1-2]，但DGMI是否对心肌缺血再灌注后细胞凋亡具有抑制作用及其作用机制报道尚不多见。

本研究通过结扎冠状动脉前降支建立心肌缺血再灌注大鼠模型，造模前7d开始给予DGMI进行干预，探讨DGMI对心肌缺血再灌注后细胞凋亡的影响及其可能的机制。

1 实验材料1.1 实验动物健康清洁级雄性SD大鼠（8周龄，220~260g），购自河北省实验动物中心，动物合格证号：SCXK（冀）2013-1-003。

饲养环境：23℃~25℃，相对湿度55%~60%，适应性饲养1周后进行实验。

1.2 药物与试剂银杏二萜内酯葡胺注射液（DGMI）购自江苏康缘药业股份有限公司（批号：20170416）；TTC购自美国Sigma公司（批号：M2128）；TUNEL试剂盒购自南京建成生物工程研究所（批号：161208）；Bcl-2、Bax、激活型Caspase-3多克隆抗体购自上海碧云天生物技术有限公司（批号：20170316、20170401、20170329）。

1.3 仪器生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）；石蜡切片机（德国Leica公司）；BI-2000医用图像分析系统（成都泰盟科技有限公司）；FA25匀浆机（上海洽姆仪器科技有限公司）；倒置光学显微镜（日本Olympus公司）；DYCZ-24D双垂直电泳槽、DYCZ-40B转印电泳槽、DYY-11型多用电泳仪（北京六一仪器厂）；低温离心机（德国eppendorf公司）。

银杏二萜内酯葡胺注射液对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

银杏二萜内酯葡胺注射液对大鼠局灶性脑缺血的保护作用作者：罗燕平张红胡晗绯曹泽彧张新庄曹亮王振中萧伟来源：《中国中药杂志》2017年第24期[摘要] 探讨银杏二萜内酯葡胺注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤（MCAO）的保护作用，并探讨其可能的作用机制。

雄性SD大鼠140只，随机分为假手术组、模型组、银杏提取物注射液（金纳多，1.0 mL·kg-1）、尼莫地平注射液（0.2 mg·kg-1）组、银杏二萜内酯葡胺注射液（5.2，2.6，1.3 mg·kg-1）组；所有动物手术前4 d尾静脉注射给药（模型组及假手术组给予生理盐水）。

除假手术组，其他动物通过右侧大脑中动脉线栓塞法（MCAO）制作局灶性脑缺血再灌注模型。

缺血3 h 后，所用动物再次尾静脉注射给药。

大鼠缺血再灌注后进行神经行为学评分并采用TTC染色法观察脑组织梗死率；测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、乳酸（LA）含量及脑脊液中 Ca2+，谷氨酸（Glu），天冬氨酸（Asp）以及磷酸肌酸激酶（CK-BB）和乳酸脱氢酶（LDH）含量的变化。

与假手术组相比，模型组大鼠脑梗死率显著增加，神经严重缺损；脑组织匀浆中MDA、LA含量升高，GSH、SOD含量降低；脑脊液中Ca2+浓度降低，Glu和Asp的含量及CK-BB、LDH含量显著升高。

与模型组相比，银杏二萜内酯葡胺注射液高、中剂量组能显著减少脑梗死率，改善脑神经功能缺损症状；提高 SOD、GSH活性，减少血清中MDA、LA含量；升高脑脊液中Ca2+浓度，减低神经递质Glu和Asp的含量及CK-BB、LDH的含量。

银杏二萜内酯葡胺注射液能明显改善模型动物的神经功能缺损，其机制可能与修复血脑屏障，减少自由基，减少细胞外游离钙内流，降低脑脊液中兴奋性氨基酸含量等有关，从而保护脑缺血。

[关键词] 银杏二萜内酯葡胺注射液；脑缺血再灌注；超氧化物歧化酶；神经递质；钙离子[Abstract] To investigate the protective effects of ginkgo diterpene lactone meglumine injection （GDLMI） on cerebral focal ischemia reperfusion injury induced by middle cerebral artery occlusion （MCAO） in rats， and explore its possible mechanism. One hundred and forty male SD rats were randomly divided into sham operation group， model group， ginkgo biloba extract injection （Ginaton， 1.0 mL·kg-1） group， nimodipine （0.4 mg·kg-1） group， and GDLMI （5.2， 2.6， 1.3 mg·kg-1） groups； All of rats received corresponding drugs by tail vein injection 4 days before operation （normal saline in model group and sham operation group）. Except the sham operation group， the cerebral ischemic stroke model was established by MCAO method in right brain of the other rats. After 3 h of ischemia， all the animals received intravenous administration again. The neurobehavioral scores of rats after ischemia-reperfusion were evaluated and the infarct rate of brain tissue was observed by TTC staining. The super oxide dismutase （SOD）， glutathione （GSH）， malondialdehyde （MDA） and lactic acid （LA） contents in brain tissue homogenate and the concentration of Ca2+， glutamate （Glu） and aspartate（Asp）， creatine phosphate kinase （CK-BB） and lactate dehydrogenase （LDH） content changes in cerebrospinal fluid were measured. As compared with the sham operation group， the cerebral infarction rate was increased significantly in the model group； the content of MDA and LA in the homogenate of brain tissue was increased， and the content of GSH and SOD was decreased；in cerebrospinal fluid， Ca2+ concentration was decreased， and the content of Glu and Asp， CK-BB and LDH increased significantly. As compared with the model group， the high and medium dose GDLMI groups can significantly reduce the cerebral infarction rate and improve the symptoms of neurological impairment； increase SOD and GSH activity， reduce MDA and LA content in serum； increase Ca2+ concentration in cerebrospinal fluid and decrease the content of neurotransmitter Glu and Asp as well as CK-BB and LDH. GDLMI could obviously improve neurologic impairment in model rats， and the mechanism may be related to recovering the blood brain barrier， scavenging free radicals， decreasing free Ca2+ inflow into the cells and the content of excitatory amino acid in cerebrospinal fluid to improve its protective effect on cerebral ischemia.[Key words] ginkgo diterpene lactone meglumine injection； cerebral ischemia reperfusion injury； super oxide dismutase； neurotransmitter； Ca2+据统计，我国约有7 000万脑卒中患者，其中缺血性脑卒中约占70%。

银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤少突胶质细胞的保护作用

HEILONGJICNG MEDICINE AND PHARMACY Oct.244,Vol.42No.4-237•银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤少突胶质细胞的保护作用①王淑英4李尧4，李文4侯丽然4李慧玲认王为光2,庞庆林4乔然（，王凤新（，王景霞4（4!木斯大学基.（学），黑龙江住木斯84727；2,8!木斯大学附属第一黑龙江住木斯84278）摘要：目的：研究EGB（Extract of Gin/go PiO/v）对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤少W胶质细胞的作用。

方法：大鼠随机分为对照组（A组），缺血-再灌注组（B组）,EGB治疗组（C组），每组34只。

应用大脑中动脉插线法制作大鼠局灶性脑缺血模型，大鼠缺血2h再灌注24h后断头处死取脑，通过硝酸银染色、免疫组化法研究再灌注损伤及EGB治疗时少突胶质细胞的形态变化及相应蛋白的表达。

结果：缺血再灌注组少突胶质细胞胞体肿胀，细胞数量减少；EGB治疗组少突胶质细胞形态和结构与对照组较接近EGB治疗组标本；MBP阳性细胞数量比缺血组增多明显，但较对照组少。

结论:EGB对少突胶质细胞具有一定的保护作用。

关键词：局灶性脑缺血-再灌注;银杏叶提取物；少突胶质细胞；大鼠中图分类号:R235.5文献标识码:A文章编号：1003-4144（2210）44-4037-40在中枢神经系统,少突胶质细胞是髓鞘的形成细胞,其包绕神经细胞的轴突而形成髓鞘，髓鞘对轴突传导功能起重要作用。

在脑缺血后，对缺血缺氧性损伤少突胶质细胞更为敏感［）＞~,甚至在个别脑区少突胶质细胞对短暂缺血性损伤敏感性甚至超过神经细胞［］。

本研究应用大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型，探讨EGB对少突胶质细胞在缺血-再灌注中的影响。

1材料与方法41动物WPtar成年大鼠，230-359g重,随机被分为对照组（A组）:不进行栓塞，只手术分离大脑中动脉;缺血-再灌注组（B组（，大脑中动脉栓塞2h再灌注240;EGB治疗组（C组（：大脑中动脉栓塞2h，栓塞后2min内EGB尾静脉注射（29mg/kg），再灌注24h,中间一共给药3次。

银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注氧化损伤的保护作用

６０只，随机等分为 ①对照组， ②模型组， ③假手术组， ④ＥＧＢ低剂量组， ⑤ＥＧＢ中剂量组， ⑥ＥＧＢ高剂量组。第①～③组灌胃给予蒸馏水１０ｍｌ／ｋｇ，第 ④～⑥组分别灌胃给予含ＥＧＢ２５、５０、１００ｍｇ／ｋｇ的蒸馏水混悬液１０ｍｌ／ｋｇ，连续１４ｄ。最后一次灌胃后１ｈ， ②、 ④、 ⑤、 ⑥组大鼠均结扎双颈总动脉造成不完全性脑缺血１ｈ，复灌３０ｍｉｎ； ①组不做处理， ③组仅做手术处理不结扎颈总动脉。取各
组大鼠大脑皮层制备组织匀浆，检测超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）￣Ｎ－氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性，谷胱甘肽（ＧＳＨ）￣ｇ丙二醛（ＭＤＡ）含量以及总抗氧化能力（Ｔ — ＡＯＣ）等指标的变化。结果与对照组相比，模型
组脑组织中的ＳＯＤ活性、ＧＳＨ含量和Ｔ — ＡＯＣ显著下降，而ＮＯＳ活性；￣ＵＭＤＡ含量明显升高；与模型组相比，给于ＥＧＢ使脑组织中ＳＯＤ活性、ＧＳＨ含量和Ｔ — ＡＯＣ明显升高，ＮＯＳ活性＊［１ＭＤＡ含量明显
空军医学杂志２０１３年６Ｂ第２９卷第２期ＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｉｒＦｏｒｃｅ，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．２，Ｊｕｎｅ，２０１３
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银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注
ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｌｅａｆｏｎｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａ／

银杏叶注射液对脑缺血再灌注大鼠脑组织琥珀酸脱氢酶和肌酸激酶脑型同工酶活性的影响

基金项目：安徽省高校自然科学基金资助项目（ＫＪ２００８Ｂ３０８）作者简介：姜丹，副主任医师，Ｅｍａｉｌ：ｊｉａｎｇｄａｎ８７＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
·３９０年８月第１３卷第４期ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＨｅａｌｔｈｃ，Ａｕｇｕｓｔ２０１０，Ｖｏｌ．１３，ＮＯ．４
缺血性中风是最常见的脑血管疾病，中医药在其防治方面积累了一定经验，取得了一些疗效。脑缺血后能量代谢障碍是其主要病理生理机制之一，本实验通过观察银杏叶注射液对局灶性脑缺血再灌
注模型大鼠脑组织能量代谢相关酶琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和肌酸激酶脑型同工酶（ＣＫＢＢ）活性的影响，探讨其抗脑缺血再灌注损伤的机制。１材料与方法１．１动物与分组健康ＳＤ大鼠１０５只，雌雄各半，体质量２８０～３２０ｇ，由南京医科大学实验动物中心提供，许可证号ＳＣＸＫ（苏）２００２００３１。将动物随机分为假手术组、模型组、银杏叶注射液治疗组和川
姜丹，张乐，马军，马连星
（安徽省立新安医院神经内科，合肥２３００２２）
［摘要］目的观察银杏叶注射液对脑缺血再灌注大鼠脑组织琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和肌酸激酶脑型同工酶（ＣＫＢＢ）活性的动态影响。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，随机分为假手术组、，分别再灌注１ｄ、３ｄ、７ｄ，分别给予相应的药模型组、银杏叶注射液治疗组和川芎嗪药物对照组。脑缺血２ｈ物腹腔注射。采用密度离心及差速离心法提取脑组织线粒体用于ＳＤＨ活性测定，采用化学比色法测定脑组ＫＢＢ活性。结果模型组再灌注各时间点脑组织ＳＤＨ活性显著降低，ＣＫＢＢ的活性显著升高织匀浆Ｃ（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；再灌注３ｄ、７ｄ时各治疗组ＳＤＨ活性显著升高（Ｐ＜０．０５），再灌注各时间点ＣＫＢＢ的活性显著降低（Ｐ＜０．０５）；舒血宁注射液治疗组和川芎嗪治疗组组间比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论银杏叶注射液可以通过提高ＳＤＨ活性和降低ＣＫＢＢ的活性，抗脑缺血再灌注损伤。［关键词］脑缺血；琥珀酸脱氢酶；肌酸激酶，ＢＢ型；银杏；川芎嗪［中图分类号］Ｒ７４３．３［文献标识码］Ａ［文章编号］１６７２６７９０（２０１０）０４０３８９０３ＥｆｆｅｃｔｏｆｅｘｔｒａｃｔｏｆｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｌｅａｖｅｓｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＳＤＨａｎｄＣＫＢＢｉｎｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅａｆｔｅｒｌｏｃａｌｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎＭＡＣＯｒａｔｓＪＩＡＮＧＤａｎ，ＺＨＡＮＧＬｅ，ＭＡＪｕｎ，ＭＡＬｉａｎｘｉｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ＡｎｈｕｉＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＸｉｎ＇ａｎＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｈｅｆｅｉ２３００２２，Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｈｕｘｕｅｎｉｎｇｐａｒｅｎｔｅｒａｌｓｏｌｕｔｉｏｎｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＳＤＨａｎｄＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｌｏｃａｌｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒＣＫＢＢｉｎｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅａｆｔｅｒｌｏｃａｌｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎＭＡＣＯｒａｔｓ．ｆｕｓｉｏｎｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｉｎｔｒａｌｕｍｉｎａｌｔｈｒｅａｄｏｃｃｌｕｓｉｏｎｏｆｔｈｅｍｉｄｄｌｅｃｅｒｅｂｒａｌａｒｔｅｒｙ（ＭＣＡＯ），ｔｈｅａｎｉｍａｌｓ，ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｓｈｕｘｕｅｎｉｎｇｐａｒｅｎｔｅｒａｌｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｃｈｕａｎｘｉｏｎｇｑｉｎｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｓｈａｍｇｒｏｕｐｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｄｅｎｓｉｔｙｃｅｎｉｒｉｆｕｇａｔｉｏｎａｎｄｓｐｅｅｄｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ，ｔｈｅｎａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＳＤＨｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄ．ＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＣＫＢＢｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｕｓｉｎｇｂｉｏｃｈｅｍｉｅａｌｍｅｔｈｏｄｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＳＤＨｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｗａｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｓｈａｍｇｒｏｕｐｉｎＭＣＡＯｒａｔｓ，ｂｕｔｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣＫＢＢＴｗａｓｈｉｇｈｅｒ（Ｐ＜０．０５ｏｒＰ＜０．０１）．ｔｈｅａｃ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣＫＢＢｗａｓｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＳＤＨｉｎｔｗｏｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓｆｏｒ３ｄａｎｄ７ｄｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｌｏｗｅｒｉｎｔｗｏｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５）；ＴｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｃｅｓｈｕｘｕｅｎｉｎｇｐａｒｅｎｔｅｒａｌｓｏｌｕｔｉｏｎｇｒｏｕｐｔｏｃｈｕａｎｘｉｏｎｇｑｉｎｇｒｏｕｐｉｓＳＤＨａｎｄＣＫＢＢａｃｔｉｖｉｔｙ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＳｈｕｘｕｅｎｉｎｇｐａｒｅｎｔｅｒａｌｓｏｌｕｔｉｏｎｃｏｕｌｄｐｒｏｔｅｃｔｆｒｏｍｐａｔｈｏｌｏｇｉｃｉｎｊｕｒｙａｆｔｅｒｆｏｃａｌｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａａｎｄｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎＭＣＡＯｒａｔｓｂｙｐｒｏｍｏｔｉｎｇｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＳＤＨａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＣＫＢＢ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｂｒａｉｎｉｓｃｈｅｍｉａ；Ｓｕｃｃｉｎａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ；Ｃｒｅａｔｉｎｅｋｉｎａｓｅ，ＢＢｆｏｒｍ；Ｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ；Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｐｙｒａｚｉｎｅ

银杏内酯B注射液对局灶性脑缺血的保护作用

工厂生产。批号：９５０２２１）。
的保护作用。
１材料
１．１动物
１．３仪器
ＳＤ雄性大鼠１４０只，体重２５０～３００ｇ．南北京维通利华实验动物巾心提供。合格证号为：ＳＣＸＫ
ＥＣＡ与ＩＣＡ分叉处约０．５ｅｍ的颈总动脉处作一切口，插入一端涂有石蜡的尼龙线（直径为０．２８５ｍｍ）．插入深度为１８．５＋－０．５ｍｍ．实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。结扎入口处，尼龙线外留约ｌｅｍ，缝合皮肤。３ｈ后轻轻提拉所留线头至略有阻
２．２．３结果
表１显示．术后２４ｈＭＣＡＦ模型组大鼠、各给
药组的大鼠均有不同程度梗塞灶．银杏内酯Ｂ注射液８ｍｇ、４ｍｇ／ｋｇ可明显减少梗塞程度与ＭＣＡＦ
表２显示模型组大鼠在缺血后３ｈ再灌注２１ｈ均出现偏瘫样症状．主要表现为手术对侧前肢内收．肩内旋．前肢肌张力降低，肩抗力下降．向
２．１．３结果
２．２．２分组及给药７４只大鼠随机分为六组．每组１２～１３只，即模型组、银杏内酯Ｂ注射液８ｍｇ、４ｍｇ、２ｍｇ／ｋｇ组、金纳多２３．３ｍｇ／组、假手术组。造模前预防给药两天（ｉｐ），一Ｅｌ一次；造模后给药（ｉｐ）一次。

银杏内酯注射液辅助治疗急性脑梗死的临床效果

银杏内酯注射液辅助治疗急性脑梗死的临床效果作者：汪贰成杨明波来源：《中外医学研究》2020年第23期【摘要】目的：探讨银杏内酯注射液辅助治疗急性脑梗死（acute cerebral infarction，ACI）的临床效果。

方法：选取2016年4月-2018年6月笔者所在医院收治的60例ACI患者作为研究对象，按随机数字表法分为试验组和对照组，每组30例。

对照组给予常规西药治疗，试验组在对照组基础上加用银杏内酯注射液治疗，对比两组临床疗效、神经功能、日常生活能力、治疗前后血清S-100β蛋白、神经元特异烯醇化酶（NSE）、同型半胱氨酸（Hcy）水平。

结果：试验组总有效率为90.00%，显著高于对照组的66.67%（P<0.05）;试验组治疗后美国国立卫生研究院脑卒中量表（NIHSS）评分低于对照组，Barthel指数评分高于对照组（P<0.05）;试验组治疗后S-100β蛋白、NSE及Hcy水平均低于对照组（P<0.05）。

结论：银杏内酯注射液辅助治疗ACI的临床效果理想，能改善患者神经功能，提高日常生活能力，促进神经功能恢复。

【关键词】银杏内酯注射液急性脑梗死神经功能日常生活能力doi：10.14033/ki.cfmr.2020.23.014 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2020）23-00-03Clinical Effect of Ginkgolide Injection in the Adjuvant Treatment of Acute Cerebral Infarction/WANG Ercheng， YANG Mingbo. //Chinese and Foreign Medical Research， 2020， 18（23）： -40[Abstract] Objective： To explore the clinical effect of Ginkgolide Injection in the adjuvant treatment of acute cerebral infarction （ACI）. Method： Sixty patients with ACI admitted to our hospital from April 2016 to June 2018 were selected as the research object. The patients were divided into the experimental group and the control group according to the random number table method， 30 cases in each group. And the control group was treated with conventional western medicine treatment. The experimental group was treated with Ginkgolide Injection on the basis of the control group. The clinical efficacy， neurological function， daily living ability， serum S-100β protein， neuron-specific enolase （NSE） and homocysteine ?（Hcy） levels of the two groups were compared. Result： The total effective rate of the experimental group was 90.00%， which was significantly higher than 66.67% of the control group （P<0.05）. After treatment， the National Institutes of Health Stroke Scale （NIHSS） score in the experimental group was lower than that of the control group， and Barthel index score was higher than that of the control group （P<0.05）. The levels of S-100β protein， NSE and Hcy in the experimental group after treatment were lower than those of the control group （P<0.05）. Conclusion： Ginkgolide Injection in the adjuvant treatment of ACI has a satisfactory clinical effect，which can improve the patients’ neurological function， improve daily living ability， and promote the recovery of neurological function.[Key words] Ginkgolide Injection Acute cerebral infarction Neurological function Daily living abilityFirst-author’s address：Yunan County People’s Hospital， Yunan 527199， China急性脑梗死（acute cerebral infarction，ACI）是一种由各种原因引起的脑局部组织供血障碍，导致脑组织缺血、缺氧、变性坏死，以失语、偏瘫、感觉障碍等为主要临床表现[1-2]。

银杏内酯B对糖耐量异常动物早期脑缺血再灌注损伤干预[发明专利]

专利名称：银杏内酯B对糖耐量异常动物早期脑缺血再灌注损伤干预
专利类型：发明专利
发明人：孙晶,刘佳明
申请号：CN201410166849.6
申请日：20140420
公开号：CN105012323A
公开日：
20151104
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及治疗脑缺血再灌注损伤的药物，其中包含的活性组分为银杏内酯，该治疗脑缺血再灌注损伤的药物对缺血再灌注脑损伤有一定的治疗作用。

本发明提供了一个可能的糖耐量异常阶段脑缺血再灌注损伤期具有治疗和保护作用的药物，本发明的化合物通过多靶点作用，对缺血与再灌注损伤的病理过程多步骤的阻断作用表现出很强的抗缺血与再灌注损伤作用，比单一作用机制的药物有更好的治疗效果，对临床用药具有一定的指导意义。

申请人：温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院
地址：325000 浙江省温州市鹿城区学院西路109号
国籍：CN
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银杏叶内酯N对实验性大鼠脑缺血再灌注损伤的保护功效

银杏叶内酯N对实验性大鼠脑缺血再灌注损伤的保护功效实验目的：探讨银杏叶内酯N对实验性大鼠大脑局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。

实验方法：采用栓线法阻断大鼠大脑中动脉缺血2小时后再灌注22小时模型，探索银杏内酯N模型大鼠的神经缺损症状，脑梗塞，脑水含量和超氧化物歧化酶（sod）、丙二醛含量和大脑皮层神经元在脑组织钙离子，水平影响。

实验结果：跟假手术组比较，缺血再灌注神经缺损评分，含水率，梗死率，脑组织丙二醛含量增加，超氧化物歧化酶（sod）活性降低，减少脑组织钙离子含量显著升高；跟脑缺血再灌注组相比，银杏叶内酯N高，中剂量组，阳性对照组大鼠神经缺损评分，脑含水率，脑梗死率显著降低，银杏叶内酯N各剂量组间结果亦有显著差异【1】。

实验结论：银杏叶内酯N能够保护局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠，这个可能与其减少大鼠脑缺血再灌注后脑组织钙离子浓度、抗自由基损伤有关系。

标签：脑缺血再灌注；银杏叶内酯N；超氧化物歧化酶目前的研究表明，血小板激活因子参与缺血性脑损伤，血小板激活因子被认为是一种内源性介质进一步加重脑缺血再灌注损伤的大脑；血小板活化因子受体特异性拮抗剂可以预防或逆转后遗症引起的脑缺血脑损伤，银杏内酯能够显著提高脑缺血损伤大叔脑神经元中脑源性神经营养因子表达水平，抑制缺血脑组织INOS的表达减轻缺血后脑损害的作用。

小编第一次分离出来新化合物银杏叶内酯N，为内酯B衍生物，水溶性特好。

此次通过观察银杏内酯N对大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮层神经元细胞内钙离子浓度，及脑梗塞，脑水含量，超氧化物歧化酶（sod）活性，丙二醛含量的影响【2】，因此研究它对脑缺血再灌注损伤保护的作用。

一、实验材料（1）所需动物：选取体重约为230克左右的雄性大鼠180只（注意：选取的大鼠必须都是健康没有任何毛病的）。

实验药品和仪器：银杏叶内酯N，尼莫地平注射液，超氧化物歧化酶（sod），丙二醛试剂盒等，多功能酶标仪。

二、实验方法以每组30只为单位随机将大鼠分配成6小组，分别为：假手术组，缺血再灌注组，尼莫地平组，银杏叶内酯N高、中、低剂量组。

银杏内酯注射液用于急性缺血性脑卒中溶栓治疗中对炎性因子及Lp-PLA2、NSE、Hcy水平的影响

临床医学研究与实践2021年2月第6卷第4期临床医学DOI :10.19347/ki.2096-1413.202104023作者简介：余豹（1987-），男，汉族，河南固始人，主治医师。

研究方向：神经内科临床。

急性缺血性脑卒中是临床常见脑血管疾病，主要由脑血管狭窄或堵塞造成血供障碍引起，具有发病急、致残率高、致死率高等特点，对患者健康乃至生命安全构成严重威胁。

急性缺血性脑卒中早期治疗中，应用阿替普酶静脉溶栓是重要手段，能够有效溶解血栓，促进神经功能改善。

不过实践表明，静脉溶栓治疗后仍有许多患者出现治疗效果欠佳的问题，因此需探索更有效的治疗方式[1]。

银杏内酯注射液近年来在急性缺血性脑卒中治疗中获得了较好的效果，其具有抗血小板聚集、保护神经细胞、保护血管内皮细胞等多种作用[2]。

本研究探讨银杏内酯注射液用于急性缺血性脑卒中溶栓治疗中对炎性因子及周围血脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）、神经元特异性稀醇化酶（NSE ）、同型半胱氨酸（Hcy ）水平的影响，以期为临床治疗方式选择提供参考，现报道如下。

1资料与方法1.1一般资料选取2017年3月至2020年3月收治的100例急性缺血性脑卒中患者为研究对象，随机将其分为对照组和观察组，各50例。

对照组男性29例，女性21例；年龄52~74岁，平均年龄（62.84±6.37）岁；发病至入院时间0.5~3.6h ，平均（2.34±0.59）h ；合并高血压13例，糖尿病7例，冠心病4例。

观察组男性30例，女性20例；年龄50~75岁，平均年龄（63.17±7.53）岁；发病至入院时间0.5~3.8h ，平均银杏内酯注射液用于急性缺血性脑卒中溶栓治疗中对炎性因子及Lp-PLA2、NSE 、Hcy 水平的影响余豹，雷志强，马志鹏（固始县人民医院急诊科，河南信阳，465200）摘要：目的探讨银杏内酯注射液用于急性缺血性脑卒中溶栓治疗中对炎性因子及周围血脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）、神经元特异性稀醇化酶（NSE ）、同型半胱氨酸（Hcy ）水平的影响。

银杏总内酯注射液对实验性脑缺血及脑血流量的影响

银杏总内酯注射液对实验性脑缺血及脑血流量的影响
李元静;张月玲;芮菁
【期刊名称】《中药药理与临床》
【年(卷),期】2007(023)004
【摘要】目的:观察银杏总内酯注射液对实验性脑缺血及脑血流量的影响.方法:用小鼠结扎双侧颈总动脉和断头模型观察动物存活和喘息时间;大鼠结扎双侧颈总动脉,观察脑缺血大鼠脑血管通透性;大鼠脑缺血再灌试验,观察血清SOD、MDA的水平;以电磁流量计探头测定麻醉犬颈总动脉血流量,观察脑血流量和脑血管阻力的变化.结果:银杏总内酯注射液1.5mg/kg可明显延长小鼠存活和喘息时间,抑制大鼠脑血管通透性.3.0mg/kg可提高大鼠血清SOD含量、降低MDA水平.0.75mg/kg 明显增加麻醉犬脑血流量,降低脑血管阻力.结论:银杏总内酯注射液对脑缺血及脑血流量具有明显改善作用.
【总页数】4页(P26-29)
【作者】李元静;张月玲;芮菁
【作者单位】天津市药品检验所,天津,300070;天津市药品检验所,天津,300070;天津市药品检验所,天津,300070
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.赤芍总苷注射液对大鼠局灶性脑缺血的保护作用和脑血流量的影响 [J], 马仁强;朱邦豪;陈健文;邱灿华;刘培庆
2.国产银杏内酯和银杏叶提取物对实验性脑缺血治疗的对比研究 [J], 王何;邱小鹰;杨丽莎
3.高效液相色谱法测定银杏总内酯注射液中银杏总内酯的含量 [J], 刘近荣
4.银杏二萜内酯葡胺注射液对局灶性脑缺血大鼠SIRT1/HIF-1α/VEGF信号通路及突触可塑性的影响 [J], 王辉;宋爽;赵建传
5.银杏总内酯注射液对大、小鼠脑缺血的改善作用 [J], 芮菁;李元静;张月玲;刘云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

银杏内酯注射液对大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的保护作用

银杏内酯注射液对大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的保护作用曹磊;兰新新;王林晓;丁建花;范益;胡刚【期刊名称】《中国临床药理学与治疗学》【年(卷),期】2015(50)7【摘要】目的:研究银杏内酯注射液对大鼠急性期缺血再灌注脑损伤的保护作用。

方法:采用Longa法制备大鼠暂时性大脑中动脉阻塞(t MCAO)模型,于缺血1.5 h 再灌后1 h给予银杏内酯注射液(0.625,1.25和2.5 mg/kg,i.p.,bid)及阳性药依达拉奉注射液(3.0 mg/kg,i.p.,bid),再灌注72 h后通过TTC染色、神经功能评分及脑水肿测定观察银杏内酯注射液对再灌注损伤的保护作用,应用免疫组化观察药物对主要神经血管单元组分神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞和血管形态和数量的改变。

结果:银杏内酯注射液(2.5 mg/kg,i.p.,bid)显著改善t MCAO模型大鼠急性期神经功能障碍、减少脑梗死体积、降低脑水肿程度,并且能调节神经血管单元组分,表现为减轻缺血再灌后大鼠半影区皮层神经元的丢失,抑制星形胶质细胞和小胶质细胞的增殖活化,降低血管外基质胶原蛋白Ⅳ(Collagen IV)的降解。

结论:银杏内酯注射液对t MCAO模型大鼠急性期脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用。

【总页数】6页(P721-726)【关键词】银杏内酯注射液;缺血再灌注损伤;神经保护;神经血管单元【作者】曹磊;兰新新;王林晓;丁建花;范益;胡刚【作者单位】南京医科大学药理学系【正文语种】中文【中图分类】R965.2【相关文献】1.银杏内酯上调CGRP对大鼠脑缺血再灌注损伤产生保护作用 [J], 谢立新;方芳;刘志晖;肖映华;朱艳萍;刘志雄;李辉;刘勇;宋涛;方云祥2.银杏内酯B注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 张硕峰;黄贱英;王晶;孙建宁;梅世昌3.Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用 [J], 杨俊霞;张成标;4.Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用 [J], 杨俊霞;张成标5.Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用 [J], 杨俊霞;张成标;;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

银杏内酯注射液

银杏内酯注射液所呈现的药理效应，在于再通血流和脑保护，双重拯救缺血半暗区。
再通血流
增加颈内动脉血流量
银杏内酯注射液具有良好的抗脑缺血、脑缺氧、抗血栓及溶栓作用。
徐江平，等。银杏内酯对犬脑血流量的影响。中西医结合学报，2005,3（1）：50-53
脑保护
抑制兴奋性氨基酸的释放① 抑制神经细胞Ca2+超载，防止脑水肿②
银杏内酯注射液治疗脑梗塞的实验与临床验证
显著降低大鼠脑梗塞神经缺陷评分和脑梗死容积
Ⅱ期临床试验报道（疗效、安全性、不引起出血）
显著降低脑梗塞患者神经缺血评分，优于银杏叶提取物
Ⅱ期临床试验报道（疗效、安全性、不引起出血）
百裕®银杏内酯注射液
国际第一个银杏有效部位注射剂；国际第一个成分明确结构清晰的银杏注射剂；国际第一个有效成分达95%以上的银杏注射剂；国际第一个质控标准最全、检查方法最新、监控指
标最高的天然药物注射剂；国内第一个最新《药品注册管理办法》开闸后批准
上市的天然药物注射剂。
兴奋性氨基酸的释放引起神经细胞Ca2+超载，是神经细胞死亡的“最后共同通路”。银杏内酯注射液可显著抑制兴奋性氨基酸的释放和Ca2+超载，保护脑神经细胞。
①王何，等。国产银杏内酯对大鼠脑缺血损伤影响的实验研究。中国中医基础医学杂志，2002,8（6）：17-18 ②秦兵，等。银杏内酯B对脑缺血再灌注神经元损伤的保护作用。中国中西医结合急救杂志，2005,1（1）：17-20
银杏黄酮, 24%
非药效学不明成分, 70%
银杏萜内酯, 6%
银杏黄酮银杏萜内酯非药效学不明成分
银杏叶提取物非常重要的药效学成分
银杏内酯是银杏叶提取物最重要的药效成分

银杏内酯对小鼠和大鼠脑缺血的保护作用

银杏内酯对小鼠和大鼠脑缺血的保护作用于庆海;游松;张予阳;盛丽;孙萍【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2001(017)006【摘要】目的研究银杏内酯(TG)对小鼠密闭缺氧、急性脑缺血和大鼠局灶性脑缺血的保护作用.方法采用小鼠密闭缺氧实验,观察TG对耗氧速度和存活时间的影响 ;结扎小鼠双侧颈总动脉及迷走神经造成脑缺血,观察TG对死亡率及死亡时间的影响;电凝大鼠一侧大脑中动脉造成局灶性脑缺血(MCAO),观察TG对脑梗塞面积、行为及组织病理形态的影响.结果 TG(32 mg·kg-1)降低脑缺血小鼠的死亡率,延长死亡时间;4, 8, 16 mg·kg -1降低MCAO大鼠脑梗塞范围,改善行为障碍及脑组织病理形态.对密闭缺氧小鼠耗氧速度、存活时间无影响.结论银杏内酯具有抗脑缺血作用.【总页数】3页(P667-669)【作者】于庆海;游松;张予阳;盛丽;孙萍【作者单位】沈阳药科大学中药药理学教研室,沈阳,110016;沈阳药科大学中药药理学教研室、制药系,沈阳,110016;沈阳市中医研究所药理室,沈阳,110004;沈阳市中医研究所药理室,沈阳,110004;沈阳药科大学中药系1996级学生【正文语种】中文【中图分类】R-332;R284.1;R322.81;R743.310.5【相关文献】1.银杏内酯A对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及其抑制NF-κB信号通路下调p53、Caspase-3表达的机制 [J], 葛建彬;顾锦华;李梅;吴锋;秦正红2.银杏内酯B对大鼠脑缺血-再灌注的保护作用研究 [J], 宋先兵;陈晓宇3.银杏内酯注射液对大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 曹磊;兰新新;王林晓;丁建花;范益;胡刚4.银杏内酯对三种脑缺血模型大鼠的保护作用 [J], 任俊;贾正平;邓虹珠;何晓英;张汝学;李琳5.银杏内酯A和B混合物对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用 [J], 王旋;顾振纶;秦振红;张慧灵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

银杏内酯B对大鼠脑缺血-再灌注的保护作用研究

银杏内酯B对大鼠脑缺血-再灌注的保护作用研究宋先兵;陈晓宇【期刊名称】《齐齐哈尔医学院学报》【年(卷),期】2014(035)008【摘要】目的研究银杏内酯B对大鼠脑缺血-再灌注模型的保护作用及其可能机制.方法通过栓线法建立大鼠大脑缺血3小时再灌注21小时模型,观察银杏内酯B 对大鼠神经行为改变、脑梗死范围和缺血侧大脑含水量的改变,同时检测脑组织匀浆中SOD活性、MDA、NO、GSH、GSH-PX及CAT含量的改变.结果银杏内酯B中剂量,高剂量组能够明显改变模型大鼠神经行为、脑梗死范围和缺血侧大脑含水量,银杏内酯B治疗能够明显升高大鼠大脑组织匀浆SOD活性,降低MDA和NO含量,提高GSH、GSHPX含量及降低CAT活性.结论银杏内酯B对缺血-再灌注脑损伤具有一定的保护作用,其机制可能是与抗自由基损伤,提高机体清除自由基的能力,自由基产生减少有关.【总页数】3页(P1097-1099)【作者】宋先兵;陈晓宇【作者单位】230601合肥,安徽医学高等专科学校人体解剖与组织胚胎教研室;230032合肥,安徽医科大学组胚教研室【正文语种】中文【相关文献】1.银杏内酯B对缺血再灌注大鼠心脏保护作用的实验研究 [J], 张根葆;陈冬云;桂常青;陆晓华2.银杏内酯B对脑缺血-再灌注神经元损伤的保护作用 [J], 秦兵;张根葆;陈冬云;许敏;李爱华3.注射用蒺藜总皂苷对局灶性脑缺血及局灶性脑缺血再灌注大鼠的治疗和保护作用[J], 严令耕;王爱云;宋伟;陆茵4.通络注射液对局灶性脑缺血及局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用 [J], 孙世顷;张蕾;胡小鹰5.miR-26在大鼠脑缺血再灌注神经损伤中的保护作用与机制研究 [J], 李巍;吕彦;张景华;赵子艾;孙显辉;刘欣;赵永刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用杨俊霞;张成标【期刊名称】《系统医学》【年(卷),期】2017(002)017【摘要】目的研究银杏内酯B(ginkgolidesB,GB)在减轻大鼠脑缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)损伤时质膜微囊结构蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)的变化及这种变化对GB减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法 2017年2—7月,徐州医科大学麻醉学重点实验室,将240～260 g的S-D雄性大鼠48只随机分为4组,每组12只:假手术+生理盐水组(Sham+NS);假手术+GB组(Sham+GB);缺血再灌注+生理盐水组(I/R+NS);缺血再灌注+GB组(I/R+GB).采用Western blot检测各组Cav-1蛋白的表达变化.采用Zea Longa 5分制对各组大鼠进行行为学评分.结果 Western blot检测显示缺血再灌注组大鼠大脑中动脉支配区域Cav-1表达较假手术组明显降低[I/R+NS vs Sham+NS、Sham+GB,(0.744±0.4090)vs(1.8804±0.2780),(1.890±0.29180)(P<0.001)];灌胃给药GB 3 d能明显抑制Cav-1的减少[I/R+GB vsI/R+NS(1.3507±0.2143)vs(0.744±0.4090)(P<0.01)].神经行为学评分显示:GB不能逆转在大脑中动脉支配脑区行立体定位注射针对Cav-1的siRNA组大鼠神经行为学评分的升高[I/R+GB+siRNA-SC vs I/R+GB+siRNA-Cav-1,I/R+NS+siRNA-Cav-1,I/R+NS+siRNA-SC(1.5605±0.3125)vs(3.769±0.2345),(3.864±0.3542),(3.674±0.2789)(P<0.00 1)].结论 Cav-1在灌胃给GB的脑缺血再灌注组大鼠大脑中动脉支配脑区表达较对照组升高,在相应脑区干扰Cav-1后,GB不能改善缺血再灌注组大鼠的神经行为学表现,说明Cav-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中起重要作用.【总页数】5页(P5-8,34)【作者】杨俊霞;张成标【作者单位】徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室 & 江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室,江苏徐州 221000;徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室 & 江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室,江苏徐州 221000【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.银杏内酯B对老龄大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤炎症反应的作用 [J], 刘晖;张嘉伟;林宇;王秀清;赵旭伟2.金属硫蛋白在大鼠全脑缺血再灌注损伤中的神经保护作用 [J], 刘学忠;崔旭;王捍东;王宗元3.Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用 [J], 杨俊霞;张成标;4.Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用 [J], 杨俊霞;张成标;;5.通络清脑注射粉针对脑缺血-再灌注损伤大鼠的脑保护作用及神经元自噬相关蛋白表达的影响研究 [J], 陈琰琰;张业昊;徐立;姚明江;王光蕊;宋文婷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

银杏内酯对大脑中动脉阻塞大鼠脑内iNOS表达的影响

银杏内酯对大脑中动脉阻塞大鼠脑内iNOS表达的影响
任俊; 贾正平; 张汝学; 马慧萍
【期刊名称】《《中国保健》》
【年(卷),期】2004(000)012
【摘要】目的观察银杏内酯对大脑中动脉阻塞大鼠脑内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。

方法采用颈内动脉线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,对使用银杏内酯、尼莫地平、银可络的大鼠进行神经行为评分,筛选造模成功大鼠进行SABC染色。

结果模型组缺血侧脑组织iNOS大量表达,银杏内酯高、中剂量给药组缺血侧脑组织iNOS阳性细胞表达明显减少。

结论银杏内酯可抑制缺血脑组织iNOS的表达,具有减轻缺血后脑损害的作用。

【总页数】3页(P1037-1039)
【作者】任俊; 贾正平; 张汝学; 马慧萍
【作者单位】兰州军区兰州总医院全军临床药理基地甘肃兰州 730050
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.电针对大脑中动脉阻塞大鼠脑内一氧化氮合酶表达的影响 [J], 金竹青;程介士
2.银杏内酯对大脑中动脉阻塞大鼠脑内iNOS表达的影响 [J], 任俊;贾正平;张汝学;马慧萍
3.银杏内酯对大脑中动脉阻塞大鼠脑内bcl-2表达的影响 [J], 任俊;贾正平;何晓英;张汝学;马慧萍
4.银杏内酯对拟AD模型大鼠空间学习记忆能力和脑内ChAT表达的影响 [J], 李清春;蒋天盛;吕心瑞;潘娅;蒋乃昌
5.大脑中动脉阻塞大鼠脑内脑源性神经营养因子蛋白表达变化 [J], 林百喜;谢明;武衡
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银杏叶制剂对大鼠脑缺血再灌注后N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响及脑保护作用(英文)

银杏叶制剂对大鼠脑缺血再灌注后N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响及脑保护作用(英文)李晓红;张峰;赵明霞;张秋玲;赵忠新【期刊名称】《神经科学通报》【年(卷),期】2005(21)3【摘要】目的研究局部脑缺血再灌注后N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体I型亚单位(NR1)mRNA表达与细胞凋亡的关系及银杏叶制剂(Egb)对其影响。

方法140只SD大鼠被随机分成假手术组、缺血再灌组,即MCAO组和Egb治疗组。

每组大鼠再随机分成4组:分别在再灌注后6,24,48,96 h处死。

进行TUNEL染色检测缺血区细胞凋亡情况,并用原位杂交方法检测NR1 mRNA。

结果MCAO组大鼠大脑皮质梗死灶的凋亡细胞和NR1mRNA表达与假手术组比较明显增强(P<0.01),而Egb治疗组这两项指标的表达明显低于MCAO组(P<0.01)。

结论再灌注后脑组织中NR1mRNA表达增强,与细胞凋亡密切相关。

银杏叶制剂可以明显抑制NR1mRNA的表达,减轻细胞凋亡。

【总页数】5页(P210-214)【关键词】银杏叶制剂;大鼠;脑缺血再灌注;N-甲基-D-天冬氨酸;受体表达;NMDA;NR1【作者】李晓红;张峰;赵明霞;张秋玲;赵忠新【作者单位】山东大学附属济南市中心医院神经科;第二军医大学长征医院神经科;泰山医学院生理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R277.733.4;R289【相关文献】1.参龙健脑胶囊对脑缺血大鼠脑组织谷氨酸及N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响[J], 许成勇;黄泉智;张岗;胡亚卓;王发渭;陈利平2.N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断对癫痫模型大鼠行为学、脑电图及脑内泛连接蛋白-1表达的影响 [J], 罗海龙;姜爱英;贾茜;郭艳芹;毕鹏翔;张忠敏;董妍3.大麻素受体1对神经病理性疼痛大鼠空间学习记忆和内侧前额叶脑区 N-甲基-D-天冬氨酸受体 N R1亚基表达的影响 [J], 胡军;于剑锋;张月明;王桂芝;梁映霞;王钢4.羟乙基淀粉对癫痫患者脑组织含水量、颅内压以及脑组织水通道蛋白-4和 N-甲基-D-天冬氨酸受体1表达的影响 [J], 朱姝颖;张宏伟;苏娴5.氯胺酮对局灶性脑缺血损伤大鼠脑N-甲基-D-天冬氨酸受体-1表达的影响 [J], 刘鹏斌;常丹;宋正川;丁晓英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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2 结果
2． 1 银杏内酯注射液对 tMCAO 模型大鼠脑缺血再灌注急性期损伤有效性研究 tMCAO 模型后，Saline 组大鼠缺血侧出现大片脑梗死区域，给予银杏内酯注射液 0． 625、1． 25、2． 5 mg / kg 以及依达拉奉注射液后，大鼠脑梗死区体积较 Saline 模型大鼠分别减小 4． 1% 、17． 8% 、41． 8% 、 29． 5% ，其中银杏内酯 2． 5 mg / kg 组与依达拉奉 3． 0 mg / kg 组大鼠脑梗死区体积与 Saline 模型组相比差异具有统计学意义（ P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05，图 1A、1B）。与脑梗死体积相似，给药组及阳性对照药依达拉奉组大鼠神经行为学评分、脑含水量均降低，其中银杏内酯注射液 2． 5 mg / kg 组和阳性对照药依达拉奉 3． 0 mg / kg 组大鼠较 Saline 组的差异具有统计学意义（图 1C、1D）。这些结果表明，银杏内酯注射液 2． 5 mg / kg 具有治疗 tMCAO 模型所致大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的作用。
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◇ 基础研究 ◇
中国临床药理学与治疗学中国药理学会主办
CN 34-1206 / Ｒ，ISSN 1009-2501 http： / / www． cjcpt． com
2015 Jul； 20（ 7）： 721 － 726
银杏内酯注射液对大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的保护作用
曹磊，兰新新，王林晓，丁建花，范益，胡刚
Tel： 025-86863108 E-mail： ghu@ njmu． edu． cn
的影响，旨在探索其对缺血性脑卒中急性期损伤
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Chin J Clin Pharmacol Ther 2015 Jul； 20（ 7）
的保护作用，为拓宽该药的临床应用提供学术基础。
1 材料与方法
1． 1 实验动物雄性 SD 大鼠，2 月龄，体质量 180 ～ 220 g，清洁级，购自南京医科大学实验动物中心，动物生产许可证号： SCXK（苏） 2013-0005。常规饲养，室温 22 ～ 24 ℃ ，日夜照明各 12 h，适应饲养至少一周，待体质量 250 ～ 300 g用于实验。 1． 2 药品与试剂银杏内酯注射液（ Ginkgolide）：成都百裕科技制药有限公司提供，批准文号：国药准字 Z20110035，批号： 20121201。依达拉奉注射液（ Edaravone）：南京先声东元制药有限公司产品，批准文号：国药准字 H20050280，批号： 86-120902。大鼠脑缺血尼龙栓线 4037 （适用于 250 ～ 280 g 大鼠）、4039 （适用于 280 ～ 330 g 大鼠），美国 Doccol Corporation 公司产品。其它均为市售商品。 1． 3 主要仪器与设备冷光源： XZ-150WA，深圳市瑞沃德生命科技有限公司；调温型电热台板，南昌太阳岛实业有限公司；体视学计数系统： Stereo Investigator，MicroBright Field． Inc，Williston， VT，USA。 1． 4 分组与给药（ 1）对 tMCAO 大鼠急性期有效性研究：将已适应饲养的 SD 大鼠随机分为模型对照组（ Saline）、依达拉奉 3． 0 mg / kg 组、银杏内酯 0． 625、1． 25 和 2． 5 mg / kg 组，受试药临用前以无菌生理盐水稀释，于大鼠缺血再灌注后 1 h 给予（ 2 mL / kg，i． p．，bid，3 d）。（ 2 ）对 tMCAO 大鼠急性期神经血管单元（ NVU）的影响： SD 大鼠随机分为伪手术组（ Sham）、银杏内酯单给药组（ Sham + Ginkgolide 2． 5 mg / kg）、模型对照组（ tMCAO）、Edaravone 治疗组（ tMCAO + Edaravone 3． 0 mg / kg）、银杏内酯治疗组（ tMCAO + Ginkgolide 2． 5 mg / kg），于缺血再灌后 1 h 给药（ i． p．， bid，3 d），伪手术组及模型对照组给予等量的生理盐水。 1． 5 大鼠暂时性大脑中动脉阻塞模型建立实验日大鼠 45 mg / kg 戊巴比妥钠 i． p．麻醉，碘伏消毒后作颈正中线切口 2 cm，从颈外动脉插入栓线通过大脑中动脉起始处至大脑前动脉，结扎近心端丝线固定插入的栓线，解开大鼠四肢及头部，将
“重大新药创制”国家科技重大专项--防治神经退行性疾病、自身免酯注射液可能对脑卒中急性损伤亦具有保护作
疫性疾病和恶性肿瘤新药的临床前药效学评价技术平台
（ 2012ZX09304001）；天然药物活性组分与药效国家重点实验室开放用，然而尚无相关治疗学研究依据支持。因此，本
和卒中研究所（ NINDS）提出的一个中风治疗的概念模型，由神经元、血脑屏障（ blood brain barrier， BBB）、小胶质细胞以及维持脑组织完整性的细胞外基质构成［2-3］，是评价药物对脑卒中治疗效果的重要指标。
银杏叶提取物是临床常用的防治缺血性心脑血管疾病的有效药物，其中银杏总内酯（萜类内酯）是发挥神经保护作用的主要活性成分之一［4］，该类制剂以金纳多为代表，银杏总内酯仅约 6 % 。银杏内酯注射液（成都百裕科技制药有限公司提供）是国内首个获批上市治疗脑卒中的银杏萜类内酯药物之一，银杏总内酯成分达 99% 以上，主要含白果内酯 48% 、银杏内酯 B34% 和银杏内酯 A12% 等，目前临床应用与其它同类药物
血性脑卒中治疗的研究颇具意义。神经血管单元（ neurovascular unit，NVU）是美国国立神经病学
肿测定观察银杏内酯注射液对再灌注损伤的保护作用，应用免疫组化观察药物对主要神经血管单元组分神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞和血管形态和数量的改变。结果：银杏内酯注射液（ 2． 5 mg / kg，i． p．，bid）显著改善 tMCAO 模型大鼠急性期神经功能障碍、减少脑梗死体积、降低脑水肿程度，并且能调节神经血管单元组分，表现为减轻缺血再灌后大鼠半影区皮层神经元的丢失，抑制星形胶质细胞和小胶质细胞的增殖活化，降低血管外基质胶原蛋白Ⅳ（ Collagen IV）的降解。结论：银杏内酯注射液对 tMCAO 模型大鼠急性期脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用。关键词银杏内酯注射液；缺血再灌注损伤；神经保护；神经血管单元
其置于加热板上（温度控制在 27 ～ 30 ℃ ）确保其肛温达 37 ℃ ，缺血 1． 5 h 后解开丝线，轻轻拔出栓线恢复血流，缝合切口待清醒放回笼中室温 25 ℃ 常规饲养。 1． 6 神经功能评分参照 Bederson 评分法［7］，大鼠神经功能完全正常为 0 分；提起鼠尾，大鼠手术对侧前肢屈曲，无法完全伸直为 1 分，大鼠躯体向手术对侧扭转为 2 分；将大鼠置于地面，行走时向手术对侧转圈为 3 分，向手术对侧倾倒或无法自主行走，意识障碍为 4 分；死亡为 5 分。 1． 7 脑梗死体积测定大鼠于缺血再灌注后 72 h 断头取脑，－ 20 ℃ 冰冻 10 min，冠状位以每片 2 mm 厚度将脑切成 6 片，置于 1% TTC 染液中，37 ℃ 染色，待正常组织呈红色、梗死组织为白色时取出脑片，用 10% 多聚甲醛溶液固定 1 h 以上，微距拍照，用 Image-Pro Plus 5． 0 图像分析软件测量脑片梗死面积，以每片脑片正反面梗死面积均数 × 片厚得出每片脑片梗死体积，各脑片梗死体积之和即为该鼠脑梗死体积。 1． 8 脑组织含水量测定大鼠于缺血再灌注后 72 h 断头取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，称量脑湿重，在微距拍照后，将脑片置于 110 ℃ 烘箱烘烤 24 h，称量脑干重，计算脑组织含水量 = （ 1 －脑组织干重 / 脑组织湿重） × 100% 。 1． 9 免疫组织化学染色大鼠 1% 戊巴比妥钠深麻醉，4% 多聚甲醛从主动脉灌注固定后断头取脑，置于 4 % 多聚甲醛中固定过夜，经常规梯度脱水后，冰冻切片机上连续切片（片厚 40 μm），隔六取一用于实验。分别使用一抗：小鼠抗 NeuN 抗体（ 1∶ 800，Millipore，USA ）、兔抗胶质纤维酸性蛋白（ glial fibrillary acidic protein，GFAP）抗体（ 1 ∶ 1 000，Abcam ，Cambridge，MA）、兔抗 Iba-1 抗体（ 1∶ 250，Wako Pure Chemical Industries，Cat #01919741）、兔抗胶原蛋白Ⅳ（ Collagen-IV）抗体（ 1 ∶ 500，Abcam，Cambridge，MA），4 ℃ 过夜。加二抗并在室温孵育 1 h，用二氨基联苯（ diaminobenzidin，DAB）（博世德，湖北武汉）避光染色 5 min，观察 NeuN、GFAP、Iba-1 和 Collagen-IV 的表达变化。 1． 10 细胞体视学计数采用体视学计数系统计算前脑缺血皮层区 GFAP 和 Iba-1 阳性细胞数，细胞计数均在 20 × 物镜下进行。焦平面以外的阳
中图分类号：Ｒ965． 2 文献标志码： A
相似，均为脑卒中病人恢复期或预防性用药，主要用于活血化瘀、通经活络，适用于轻中度脑梗死病人恢复期瘀血阻络证。已有文献报道白果内酯和
银杏内酯 B 均能在脑缺血损伤的急性期发挥神
2015-05-12 收稿 2015-05-20 修回
经保护作用［5-6］，推测主要含这两种单体的银杏内