血吸虫胶体染料法快速检测说明书
血吸虫病检测标准
血吸虫病检测标准
血吸虫病是一种寄生虫病,由血吸虫寄生于人体内引起。
该疾病主要
存在于亚洲、非洲和拉丁美洲等地区,广泛分布于农村和沿海地区。
为了及时发现和治疗患者,血吸虫病检测标准是十分关键的。
一、检测方法
1. 血清学检测:通过检测患者血液中的抗体来判断是否感染了血吸虫。
常用的方法是酶联免疫吸附试验(ELISA),常规判断标准是OD值
≥0.1为阳性。
2. 粪便检测:通过检测患者的粪便中是否存在血吸虫卵来判断是否感
染了血吸虫。
常用的方法是KATO-KATZ法,其标准是每克粪便中血
吸虫卵数量≥100个为阳性。
二、判断标准
血清学检测和粪便检测两者结合使用才能更加准确地判断患者是否感
染了血吸虫。
在实际应用中,若仅通过血清学检测,为避免假阳性结果,需进行复检。
若仅通过粪便检测,需连续检测三天才能判断是否
感染血吸虫。
同时,血清学检测和粪便检测在治疗后的跟踪评估中也
十分重要,可了解治疗效果。
三、注意事项
1. 检测时间:血吸虫病检测一般在发病后4-6周进行,若检测时机过早,则可能出现假阴性结果。
2. 收集样本:对于血清学检测样本,需严格遵守规定,采集15ml左
右的静脉血;对于粪便检测样本,需收集新鲜粪便,或在24小时内保存在4℃下,避免样本的泛化和干燥。
3. 仪器设备:检测时需确保仪器设备的精度和稳定性,以避免影响检
测结果。
通过科学合理的血吸虫病检测标准,早期发现感染者,及时进行治疗,可有效控制该疾病的传播。
同时,对于长期在疫区工作和生活的人来说,定期检查也是非常重要的,以确保身体健康。
实验二十 日本血吸虫病实验室诊断技术
实验二十日本血吸虫病实验室诊断技术日本血吸虫病是一种人畜共患的寄生虫病,被世界卫生组织列为全球重点防治疾病之一。
它严重威胁着疫区人和动物的健康和生命安全,给畜牧业带来巨大的经济损失。
在我国,本病严重流行于长江流域及其以南13个省、市、自治区。
家畜如牛、羊、猪感染日本血吸虫后,不仅祸害自身,更重要的是作为人体血吸虫病的主要保虫宿主,为传播本病起了重要作用。
大量调查研究表明,家畜是血吸虫病流行最主要的传染源和污染源。
控制传染源是综合防治疫病、扑灭疫情的重要环节,而控制传染源的前提是确诊传染源。
因此,应用灵敏、快速、经济的诊断方法确诊传染源,己成为日本血吸虫病流行病学调查、疫情监测、以及控制其流行和扑灭疫情必需解决的问题,这样才能做到有的放矢,减少在人力、物力和财力等方面的浪费。
当前对于日本血吸虫病的诊断方法已有大量的报道,根据本科教学的需要,下面介绍几种本科阶段应该掌握或者需要了解的实验室常用的日本血吸虫病诊断方法。
一、实验目的及要求1.熟悉日本血吸虫卵和毛蚴的形态特征。
2.掌握血吸虫病虫卵检查方法。
3.掌握血吸虫病毛蚴孵化方法。
4.了解血吸虫病的几种常见的血清学(免疫学)诊断方法。
二、实验器材(一)病原学诊断1.直接涂片法。
(1)检验材料:新鲜动物粪便;(2)试剂:50%甘油水溶液或普通水;(3)器材:载玻片、滴管、盖玻片、显微镜。
2.沉淀法。
(1)检验材料:新鲜动物粪便;(2)试剂:普通水;(3)器材:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛、滴管、金属环、载玻片、显微镜(普通离心机)。
3.浮集法。
(1)检验材料:新鲜动物粪便;(2)试剂:普通水、饱和食盐水、33%的硫酸锌溶液;(3)器材:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛(60目/英寸)、滴管、金属环、载玻片、显微镜。
4.毛蚴孵化法。
(1)检验材料:新鲜动物粪便;(2)试剂:pH约6.8-7.2,温度约20-30℃的灭菌自来水(脱氯处理);(3)器械:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛(40目/英寸)、尼龙筛网兜(260目/英寸)、塑料袋、长颈烧瓶(或三角瓶)(500ml)、脱脂棉、天平、温箱。
血吸虫病免疫诊断技术规范
25μl于第3孔(纵向),同上混匀使血清成1:20稀释。后吸出25μl于第4 孔纵向),同上混匀使血清成1:40稀释,后吸出25μl弃去,自动卸去吸头。 同上操作进行第2~n号样本、阴性对照、阳性对照倍比稀释。倍比稀释 一个样本一个吸头。
9) 在第1孔吸出25μl于第2孔(纵向),同上混匀使血清成1:10稀释。后吸出
+++:红细胞形成薄层凝集,边缘呈现不规则的皱褶。
6 注意事项
1) 结果观察时不能移动反应板,如条件限制则要非常小心慢移,切勿摇动反应板,以免凝集分 散,影响结果判断。结果观察时下垫白纸。 2) 血凝板以96孔“V”型底角应为90度有机玻璃板为适宜,确保所用器材清洁,血凝板清洗不能 用毛刷、移液吸头不能触碰反应孔,以避免损坏反应孔,造成假阳性。 3) 待测血清或血浆不能混有红细胞或被细菌污染。标本不能及时检测可在内4℃度保存2 ~3 天。长时间保存应放冰箱冻存。 4) 结果判断的时间与温度有关,应根据作业指导书在相同温度相同时间条件下判断。 5) 使用加样器加样,每测1个样本要更换滴头,在倍比稀释待检血清中,混匀时应避免产生气泡 (混匀吸打都在第一档进行)而影响吸量准确性。 6) 试剂盒于2~8℃避光保存。自检定合格之日起有效期为2年。醛化红细胞能耐60℃加热,并可 反复冻融不破碎,在4℃可保存3~6个月,在-20℃可保存一年以上。从冰箱取出使用时先要 放室湿平衡一定时间。
4 实验操作步骤
1) 样本编号,从左到右按1~n号排列。 2) 取一块96孔“V”型反应板横向平放纵向使用。 血凝反应板编号:1)横 向(行)从左到右编号:1、2、3、……、阴、阳; 2) 纵向(列)从上 到下编号:1:5、1:10、1:20、1:40。 3) 稀释对照品:阴性对照、阳性对照品各加100μl蒸馏水稀释溶解,加盖混 匀后放回原处备用。 4) 配置致敏红细胞悬液:启开安瓶,以每支冻干致敏红细胞加1ml致敏红细 胞稀释液(蒸馏水、红瓶)稀释混匀备用。 5) 启开标本稀释液(生理盐水、兰瓶)安瓶。 6) 调节移液器为100μl。血凝反应板的第1行(横向)第1孔各加标本稀释液 100μl。
疟疾快速检测卡使用说明书
疟疾快速检测卡(胶体金法)使用说明书【产品名称】通用名称:疟疾快速检测卡(胶体金法)英文名称: Malaria Test【包装规格】25人份/盒。
【预期用途】疟原虫抗原检测试剂盒(胶体金法)是体外免疫层析试验,用于定性检测具有疟疾症状和体征人群EDTA抗凝静脉血或毛细血管血中的恶性疟原虫抗原和间日疟原虫抗原,可对恶性疟原虫、间日疟原虫做出辅助诊断,并可对恶性疟原虫和间日疟原虫做出鉴别诊断。
该试验不用于无症状人群的筛查。
【检验原理】疟原虫抗原检测试剂盒(胶体金法)使用的是薄膜免疫层析技术,该技术用单克隆抗体检测静脉血和末梢血中的恶性疟原虫抗原和间日疟原虫抗原,这两种抗体与对照抗体固定到膜支持物上形成三条不同的线,膜支持物与样品垫相连,结合有可视粒子的对照抗体和抗疟原虫抗体浸渗在样品垫上,组成检测条。
检测条位于一块书形铰链状的检测卡中,与冲洗垫和吸收垫一道参与检测板闭合后薄膜的清洗。
检测时,将全血加到样品垫上,标本中存在的疟原虫抗原与抗疟原虫抗体结合物结合。
将A试剂液加到检测条的底部,使抗原结合物复合物沿检测条流动,在固定抗体处被捕获,形成检测线,固定的对照抗体捕获对照结合物,形成对照线。
一旦血标本流过检测条,就将检测板闭合,使加到冲洗垫中的A试剂把检测条上多余的血液冲去。
检验结果可用紫红色线的存在与否来解释。
15分钟读数时,阳性结果将包括一条检测线(或两条检测线)和一条对照线,阴性结果只产生一条对照线,阴性表明标本中未检出疟原虫抗原。
如果不出现对照线,不管检测线出现与否,结果都为无效。
【主要组成成份】1.2.A试剂:含去污剂和叠氮钠的Tris缓冲液。
3.毛细管:EDTA抗凝毛细管,用于将末梢全血加入到检测卡中。
自备材料采血针、灭菌拭子或棉球、时钟、秒表或跑表注:加样时,要使用能加样15μl体积的经过校准的加样器。
【储存条件及有效期】试剂盒在2-37℃贮藏。
试剂有效期为自生产之日起24个月。
试剂在满足贮藏条件的情况下可稳定使用至效期(效期标注在外包装和试剂盒内)结束。
血吸虫抗体快速检测试剂盒(胶体金法)
血吸虫抗体快速检测试剂盒(胶体金法)血吸虫病概述:血吸虫病是由血吸虫寄生于人体引起地方性的寄生虫病,主要有埃及、曼氏、日本这3种血吸虫,而我国只有日本血吸虫病流行。
由于血吸虫病是一种分布广泛、严重危害人畜共患的寄生虫病,自从20世纪80年代以来,血吸虫病防治策略由消灭媒介钉螺转向以治疗为主的综合性防治措施,因此,血吸虫病早期快速筛查工作具有重要的作用和意义!产品简介:血吸虫快速检测试剂盒采用了金标斑点渗滤法定性检测人血清中特异性血吸虫IgM抗体,适用于疑似血吸虫病的大量人群进行快速筛查。
检测原理:本试剂盒利用斑点免疫金渗滤技术,将血吸虫抗原预先包被在固相载体硝酸纤维素薄膜上,待检测时,将预先处理好的样本血清滴加在加样孔中,通过渗滤使抗体和抗原在膜上发生特异性免疫结合反应,形成抗原抗体复合物。
然后滴加红色胶体金标记的第二抗体(显色液),与复合物中对应的的抗体结合,则形成肉眼可读取的检测结果。
试剂盒组成:1、血吸虫快速检测板(含预先包被的血吸虫抗原)2、试剂A(洗涤液1瓶,0.02moI/L PH7.4PBS)3、试剂B(显色液1瓶,含胶体金标记物)4、原版说明书1份包装规格:24T/盒,单人份独立包装检测样本:只限血清储存条件:原试剂盒包装于2-8℃密封避光保存有效日期:18个月生产企业:广州市标健生物科技有限公司样本要示:样本只限血清,建议最好采用新鲜血清标本,若是陈旧血清或高血脂血清恐影响检测效果。
检验方法:1、将试剂盒取出,和样本一起恢复室温25℃左右。
2、拆开试剂包装,将检测板水平放于工作台。
3、在反应孔中间垂直加入2滴(试剂A),待液体完全渗透。
4、在反应孔正中央垂直加入50ul待检血清,待血清完全渗透。
5、加入4滴显色液(试剂B),待液体完全渗透。
6、加入2滴(试剂A),待液体完全渗透,观察结果。
检测结果的解释:阳性结果:检测板的C端出现红色线条,T端也出现红色线条,表明血吸虫IgM抗体阳性。
血吸虫虫卵抗体检测试剂盒(胶体金法)使用说明书
血吸虫虫卵抗体检测试剂盒(胶体金法)使用说明书【产品名称】1、通用名称:血吸虫虫卵抗体检测试剂盒(胶体金法)2、商品名称:血吸虫虫卵抗体检测试剂盒(胶体金法)3、英文名称:Diagnostic Kit for Antibody to Schistosoma Egg(DIGFA)【包装规格】20人份/盒;40人份/盒;50人份/盒;100人份/盒【预期用途】本产品采用胶体金免疫渗滤斑点法原理,定性检测人血清中的血吸虫虫卵抗体,主要用于日本血吸虫感染的临床辅助诊断。
【检验原理】用纯化的日本血吸虫虫卵特异性蛋白抗原,点样于滤膜上,利用胶体金免疫渗滤斑点法(DIGFA)原理,将胶体金标记SPA;当测试样本从滤膜滤过时,固定于膜上的日本血吸虫虫卵抗原与试验样本中的特异性抗体形成抗原—抗体复合物,这种抗原—抗体复合物与标记有SPA的胶体金结合形成肉眼可见的红色斑点。
【主要组成成份】20人份/盒40人份/盒50人份/盒100人份/盒试剂板20人份40人份50人份100人份洗涤液7.0ml×1 7.0ml×2 6.0ml×3 7.0ml×5金标液 2.5ml×1 2.5ml×2 3.5ml×2 2.5ml×5终止液 2.5ml×1 5.0ml×1 5.0ml×1 5.0ml×2冻干阴性血清0.1ml×1 0.1ml×1 0.1ml×1 0.1ml×1冻干阳性血清0.1ml×1 0.1ml×1 0.1ml×1 0.1ml×1试剂板由已包被了测定点和对照点的硝酸纤维素膜、不渗水海绵、吸水垫等经渗水惰性(不与试验中任何物质发生作用)胶水粘贴而成,再分切成固定宽度的板状,外加聚苯乙烯塑料外壳制成洗涤液缓冲液中加入一定量的保护剂、洗涤剂配置而成的无色或淡黄色液体金标液由胶体金标记的SPA红色液体冻干阴性血清正常人血清冻干阳性血清血吸虫虫卵抗体阳性病人血清不同批号试剂盒中的各组分不能相互交换使用。
血吸虫抗体快速检测试剂盒综述资料
1、产品预期用途1.1产品预期用途:血吸虫抗体快速检测试剂盒(斑点免疫金渗滤法)简称试剂盒,是用于体外定性人血清中是否有血吸虫抗体,是用于诊断血吸虫病的依据,也是血吸虫病预防控制的基础、流行病学调查的工具、疫情监测的手段。
1.2与预期用途有关的临床适应症背景情况:血吸虫病免疫学诊断方法是十分可靠的辅助诊断依据,也是流行病学调查最常用的工具。
1.3相关的临床或实验室诊断方法及产品现状等:血吸虫病是一种严重威胁人类健康的流行性传染病,发展有效的诊断筛查方法能促进血吸虫病流行的预防控制工作。
国内外已建立用于血吸虫病诊断的病原学、免疫学及分子生物学等多种方法,病原学诊断方法(粪便查虫卵)由于敏感性较低,分子生物学方法(如PCR)需要特殊的仪器设备,均难以在流行区现场推广。
目前,常用的血吸虫病现场筛查方法仍以免疫学方法为主,如酶联免疫吸附法(ELISA)、环卵沉淀(COPT)、间接血凝(IHA)。
随着现代免疫理论和技术的进步,免疫学检测技术得到了不断发展和更新,快速简便,易于操作的免疫学诊断方法更易于被医技人员,尤其是现场防治人及患者所接受。
上海疾控生物科技有限公司生产的“血吸虫抗体快速检测试剂盒”操作简便,不需要使用仪器设备,结果易于判读,适合于各级医疗卫生机构及现场血吸虫病防治人员使用。
此方法纳入了中华人民共和国卫生行业标准—血吸虫病诊断标准(WS261-2006)目前国内外尚无类似产品。
2、产品描述2.1 产品所采用的技术原理:氯金酸(HauCI )在还原剂的作用下可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液称胶体金。
胶体金颗粒表面带有负电荷与蛋白质等生物大分子的正电荷基团因静电作用形成牢固结合,而蛋白质的生物活性无明显的改变。
当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点。
2.1.1血吸虫抗体试剂盒测定原理:斑点免疫金渗滤法(Development of dot immunogold filtration assay,DIGFA)是以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔膜的可滤过性和毛细管作用,使抗原抗体反应在一个特殊的渗滤装置上,以液体渗滤过膜的方式迅速完成。
血吸虫抗体快速检测试剂盒综述资料
1、产品预期用途1.1产品预期用途:血吸虫抗体快速检测试剂盒(斑点免疫金渗滤法)简称试剂盒,是用于体外定性人血清中是否有血吸虫抗体,是用于诊断血吸虫病的依据,也是血吸虫病预防控制的基础、流行病学调查的工具、疫情监测的手段。
1.2与预期用途有关的临床适应症背景情况:血吸虫病免疫学诊断方法是十分可靠的辅助诊断依据,也是流行病学调查最常用的工具。
1.3相关的临床或实验室诊断方法及产品现状等:血吸虫病是一种严重威胁人类健康的流行性传染病,发展有效的诊断筛查方法能促进血吸虫病流行的预防控制工作。
国内外已建立用于血吸虫病诊断的病原学、免疫学及分子生物学等多种方法,病原学诊断方法(粪便查虫卵)由于敏感性较低,分子生物学方法(如PCR)需要特殊的仪器设备,均难以在流行区现场推广。
目前,常用的血吸虫病现场筛查方法仍以免疫学方法为主,如酶联免疫吸附法(ELISA)、环卵沉淀(COPT)、间接血凝(IHA)。
随着现代免疫理论和技术的进步,免疫学检测技术得到了不断发展和更新,快速简便,易于操作的免疫学诊断方法更易于被医技人员,尤其是现场防治人及患者所接受。
上海疾控生物科技有限公司生产的“血吸虫抗体快速检测试剂盒”操作简便,不需要使用仪器设备,结果易于判读,适合于各级医疗卫生机构及现场血吸虫病防治人员使用。
此方法纳入了中华人民共和国卫生行业标准—血吸虫病诊断标准(WS261-2006)目前国内外尚无类似产品。
2、产品描述2.1 产品所采用的技术原理:氯金酸(HauCI )在还原剂的作用下可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液称胶体金。
胶体金颗粒表面带有负电荷与蛋白质等生物大分子的正电荷基团因静电作用形成牢固结合,而蛋白质的生物活性无明显的改变。
当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点。
2.1.1血吸虫抗体试剂盒测定原理:斑点免疫金渗滤法(Development of dot immunogold filtration assay,DIGFA)是以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔膜的可滤过性和毛细管作用,使抗原抗体反应在一个特殊的渗滤装置上,以液体渗滤过膜的方式迅速完成。
血吸虫病抗体检测(IHA)作业指导书20
血吸虫病抗体检测-间接血球凝集法(IHA)SOP1、目的规范血吸虫病抗体检测中间接血球凝集法操作规程,确保检验结果快速、准确。
2、职责2.1检验人员按作业指导书认真操作。
2.2检验科科长负责检验方法的更新。
3、方法3.1原理受检者血清中的特异性抗体,在适宜的条件下,与吸附了可溶性血吸虫卵抗原(SEA)的致敏红细胞结合,在电解质作用下,红细胞被动凝集,出现肉眼可见的凝集反应。
3.2器材与试剂移液器25µl 、100µl、1000µl,配套吸头、吸头盒及移液器架、“V”型反应板、白纸、记号笔、微量震荡器、温箱或水浴箱、实验记录纸、记录笔、废弃物杯等。
3.3操作步骤3.3.1对照冻干品稀释:阴、阳性对照冻干品各加100µl稀释液、混匀后备用;3.3.2样本登记:96孔反应板,可检测22个样本及阴阳性对照各一个,每个样本预留4孔,将待测样本编号,在反应板上留下相应编号,并将编号记在实验记录表上;3.3.3加稀释液:在反应板的第一排(横向)所有孔中加稀释液100µl,于反应板的第三、四排加稀释液25µl (第二排不加) ;3.3.4样本稀释:于第一排的第一孔中加待检样品25µl,充分混匀(移液器吸打4次),从中吸出25µl样品混匀液加入第二排的第一孔中,再从第一孔中吸出25µl 样品混匀液加到第三排第一孔中,进行混匀(方法同上),从混匀好的第三排第一孔中吸25µl样品混匀液,加到第四排第一孔中,混匀后吸出25µl样品混匀液弃去;同上操作进行第2~22样品及阴、阳性对照稀释;3.3.5配置致敏红细胞悬液:每支冻干红细胞加1mL稀释液;3.3.6加致敏红细胞液:反应板中每份样本除第一孔不加红细胞液处,其余每孔加致敏红细胞液25µl;3.3.7震荡孵育:反应板于微量震荡器震摇1~2分钟,置37℃恒温箱中孵育30分钟后观察结果;4、结果判断4.1凝集反应的判定:-﹕红细胞全部下沉在孔底,形成肉眼可见紧密、边缘光滑的小圆点;+﹕多数红细胞下沉在孔底形成圆点,周围可见少量凝集红细胞,肉眼可见周边模糊;++﹕孔底中心可见少量红细胞下沉的小圆点,多数凝集红细胞在孔底周围形成小薄层;+++﹕红细胞形成薄层凝集,布满整个孔底,边缘呈现不规则的皱褶。
血吸虫抗体快速检测方法的建立及临床应用
血吸虫抗体快速检测方法的建立及临床应用目的探讨血吸虫抗体其快速检测方法的建立与评价其在进行疾病的预防控制中的应用价值。
方法检测用抗原应用血吸虫虫卵的SEA(可溶性抗原),将其点样于硝酸纤维素的膜上,检测标记物应用胶体金-蛋白A的结合物,应用人工的垂直流检测装置作为抗原抗体的反应体系,并建立血吸虫抗体的金标免疫渗滤法进行检测;以金标免疫渗滤法对血吸虫患者和健康人以及流动人口的血清样本进行检测,记录敏感性与特异性指标作为考核本方法的应用价值与诊断价值。
结果应用金标免疫渗滤法检测100份血吸虫患者的血清,其敏感性为100%;检测100份健康人的血清,对血吸虫病其特异性为100%。
以新创建的金标免疫渗滤法对1000例流动人口进行调查,经查出有血吸虫抗体的阳性为2人,其阳性率为0.2%。
结论应用金标免疫渗滤法对血吸虫抗体进行检测,具有较高的特异性与敏感性。
标签:血吸虫病;金标免疫渗滤法;抗体血吸虫病是危害人类健康与影响经济发展较为严重的传染病[1,2]。
目前在国内市场上还缺乏高效、可靠、快速、简易的检测工具,不能够满足防治血吸虫病工作的要求[3]。
本文应用血吸虫虫卵的SEA(可溶性抗原),将其点样于硝酸纤维素的膜上,检测标记物应用胶体金-蛋白A的结合物,应用人工的垂直流检测装置作为抗原抗体的反应体系,并建立血吸虫抗体的金标免疫渗滤法进行检测;以金标免疫渗滤法对血吸虫患者和健康人以及流动人口的血清樣本进行检测,记录敏感性与特异性指标作为考核本方法的应用价值与诊断价值。
目的在于探讨血吸虫抗体其快速检测方法的建立与评价其在进行疾病的预防控制中的应用价值。
现报告如下。
1资料与方法1.1SEA制备虫卵从感染血吸虫病的家兔其肝脏组织中获取,先冰冻干燥,再研成粉末,对其加入生理盐水,再冷浸与反复冻融后经超声粉碎,在 4 ℃的条件下对其离心1 h,对上清液进行收集即为SEA[4]。
1.2血清样本血吸虫患者的血清一共100份,均来自虫卵检测阳性的患者;100份健康人的血清均为某地区范围内高级知识分子的体检血清,1000例流动人口血清均来自某地区民工群体。
最新寄生虫病检测检验技术
5516.1-2005寄生虫病检测检验技术1一般检查法1.1粪便的检查粪便检查是确定肠道寄生虫病诊断的最主要的方法,也是属于临床化验室常规检查的方法之一。
1.1.1直接涂片法此法用于检查虫卵、滋养体和包囊。
为了避免遗漏,一般需连续检查三张涂片。
此法的优点是操作简便,迅速。
缺点是阳性率较低,视野中杂质较多,虫卵或原虫少时不易查到。
1.1.1.1生理盐水涂片法:操作方法(1)取洁净的载玻片一张,于中央滴1~2滴生理盐水。
(2)用便签挑取约火柴头大小的一块粪便(约0.1g),置盐水中涂抹均匀,成半透明的混悬液,其厚薄以透过书上的铅字为宜,如果太厚阻碍光线的透过,太薄则影响检查效果(必要时加盖玻片)。
(3)先用低倍镜观察,从边缘开始来回顺序推动移动器,仔细寻找虫卵。
(4)找到虫卵后,应将虫卵移至视野中央,辨认是何虫卵(必要时可换高倍镜进一步观察)。
注意事项:(1)检查痢疾阿米巴原虫时,要挑取带有脓血的粪便。
(2)检查原虫包囊时,所取的粪便应再少一些,粪膜涂的再薄一些,否则包囊不易找到。
(3)检查原虫滋养体时,要注意保温,避免化学药品和尿的污染,影响滋养体伪足的运动。
(4)防止涂片变干,可随时滴加生理盐水。
一般不用油镜观察。
(5)某些植物细胞很像虫卵,是要加以鉴别,植物细胞的内部结构不象虫卵那样规则,外形多扁平,用嘴轻吹时,植物细胞往往易翻动或变形。
(6)要注意虫卵与人类酵母菌的区别,很易与包囊混淆,酵母菌为无色圆形或卵圆形小体,大小不一,内含一个较大的透明体,其四周有狭窄的细胞浆,浆内含有少数折光形小体和核,有时透明体偏于一边。
如用蒸馏水稀释粪便涂片,酵母菌即被裂解消失,而原虫包囊仍存在。
(7)只有雄性寄生虫也无虫卵,切勿随意报告阴性结果。
(8)采集的标本要新鲜,一般不宜超过一昼夜,否则原虫或某些虫卵易变形或者死亡,引起误诊;采集标本的容器要清洁,避免与化学药物或尿混合,否则原虫滋养体很快死亡,影响检出率。
家畜血吸虫病查治技术规范
家畜血吸虫病查治技术规范1 病原学诊断(粪便毛蚴孵化法)1.1 材料准备1.1.1 水:pH值6.8~7.2,无水虫和化学物质污染(包括氯气)的澄清水,否则需作如下处理:有氯气的自来水应在盛器中存放8h以上。
河水、池水、井水、雨水等混有水虫的水加温至60℃,冷却后再用。
或在5万ml水中加含30%有效氯的漂白粉0.35g,搅匀,放置20h,待氯气逸尽;也可在放漂白粉后加入硫代硫酸钠0.2~0.4g脱氯,0.5h后再用。
对混浊的水,于每5万ml水中加明矾3~5g,充分搅拌,待水澄清后用。
1.1.2 器材、试剂:竹筷、40~80目的铜筛滤杯、260目的尼龙筛兜、500ml量杯、粪桶、放大镜、显微镜、吸管、载玻片、盖玻片、取暖炉、水温计、盆、水缸、水桶、剪刀、闹钟、天平、300~500ml长颈平底烧瓶或200~250ml三角烧瓶、脱脂棉。
1.1.3 送粪卡:包括村名、组名、饲养员或畜主姓名、畜别、畜名或畜号、性别、年龄、有无孕、采粪日期。
1.1.4 孵育室(箱)。
室温低于20℃时需有保持20~25℃的环境条件,如有温箱或有取暖设备的房间。
1.2 操作方法1.2.1 采粪和送检:采粪季节宜于春秋两季,其次是夏季,不宜于冬季。
采粪的时间最好于清晨从家畜直肠中采取,或新排出的粪便。
采粪量:牛、马属200g,猪100g,羊和犬粪(农家)40g,每份粪样需附上填好的送粪卡,于采粪当天送到检验室。
1.2.2 洗粪和孵化:将每头家畜的粪便分三份,每份粪量牛、马50g,猪20g,羊、犬10g.然后根据实际情况选用下列一种方法进一步操作。
1.2.2.1 尼龙兜淘洗孵化法:粪便在40目铜筛和量杯中用清水淘洗,细粪渣存于500ml 量杯中,待沉淀后去上清液,沉渣倒入尼龙兜用水冲淘洗,把尼龙兜中的粪渣装入三角烧瓶或长颈平底烧瓶中加25℃左右清水,为便于观察毛蚴,在瓶颈下二分之一处加一块2~3cm 厚的脱脂棉,再加清水至瓶口。
1.2.2.2 塑料杯顶管法:置粪于铜筛量杯中加水充分淘洗,弃去粪筛量杯中的上层水,倒去三分之二,加25℃清水,盖上中间有孔的塑料盖再加满25℃清水,再将盛满水的试管口塞一块2~3cm厚的脱脂棉,倒插入塑料盖孔中。