不同培养基对海洋放线菌抗微生物活性的影响
海洋微生物活性物质的研究进展
文章编号:1001-909X (2007)01-0055-11收稿日期:2005-03-14作者简介:刘晶晶(1982—),女,浙江衢州市人,硕士研究生,主要从事海洋生物学研究。
海洋微生物活性物质的研究进展刘晶晶,陈全震,曾江宁,高爱根,廖一波(国家海洋局第二海洋研究所,国家海洋局海洋生态系统与生物地球化学重点实验室,浙江杭州 310012)摘 要:海洋微生物由于其特殊的生存环境,往往能产生结构新颖、功能多样的活性物质,海洋微生物作为活性物质的新来源,正日益受到人们的关注。
综述了近几年海洋微生物产生的抗肿瘤、抗心血管病、免疫调节剂、抗生素等生物活性物质的开发利用现状及相关的研究技术和方法,展示出海洋微生物活性物质巨大的开发利用前景。
关键词:生物活性物质;微生物;海洋中图分类号:P 745 文献标识码:A 21世纪人类社会面临“人口剧增、资源匮乏、环境恶化”三大问题的严峻挑战,随着陆地资源的日趋减少,开发海洋,向海洋索取资源,尤其是海洋微生物资源将越来越受到人们关注。
海洋微生物为了适应特殊的生存环境,往往能产生不同结构和功能的天然活性物质,另外越来越多的实验证明,来自海洋动植物活性物质的真正生物源是海洋微生物[1]。
可见,海洋微生物活性物质的开发利用大有前途,目前这方面的研究进展迅速,人们已从放线菌、真菌、细菌、微藻等海洋微生物中分离出具有抗肿瘤、抗病毒、抗细菌、免疫调节功能以及其它用途的生物活性物质。
这些物质是开发海洋药物的重要资源,并在化工、食品以及生命科学基础研究等领域都有着重要的应用价值。
1 海洋微生物活性物质的开发利用现状1.1 抗肿瘤的活性物质目前癌症是对人类威胁最大的疾病之一。
海洋微生物产生的活性物质种类丰富,结构多样,已成为寻找新的抗癌药物的一个最有希望的药源。
有学者预言,最有前途的抗肿瘤药物将来自海洋,而海洋微生物在此领域有着巨大的潜力[2]。
1.1.1 海洋放线菌海洋放线菌是一类特殊的、具有重要经济价值的微生物。
海洋放线菌Y-0117农用活性代谢产物的研究
１ 实验
１ ． １ 菌株 及培 养基
海洋放 线菌 Ｙ— Ｏ １ ｌ ７由 国家 海 洋局 第 一海 洋研 究
所提 供 ， 经 农用 生物 活性筛选 ， 发 现该 菌株产 生的代谢
产 物对植物 病 原真菌 有较 好拮抗作 用 。 发酵 培 养 基 （ ｇ・Ｌ ） ： 葡 萄糖 ２ ０ ． ０ ， 黄 豆 饼 粉
当今 国内外 农用抗 生 素基本 上都 是来源 于陆地微 生物 ， 但 是随着 陆地 可利用微 生物 资源 的减少 ， 从陆地 微 生物 中提取新 型抗 生素难 度 加 大 ， 而 占地球 ７ ｌ 的 海洋 ， 由于其 资源极 其 丰 富 ， 且 大部 分 都 未被 开 发 ， 逐
渐成为 了国 内外 研 究 的重 点 和 热 点Ｌ ｌ ｊ 。早在 １ ８ ６ ９年
海洋微 生物有其 专有 的种 属 ， 而 并非 来 源 于 陆地 微 生
样 本 中筛 选得 到菌 株 ＨＡ ０ ７ ０ １ ｌ ， 该 菌株 的发酵 液具 有
杀线虫 活性 ［ 】 。作 者对 筛 选 得 到 的具 有 较高 农 用 活 性 的海洋 放线 菌 菌株 Ｙ 一 ０ １ １ ７所 产 生 的生物 活性 物 质 进 行 了分 离 纯化 ， 确 定 了对植 物 病 原真 菌具 有 良好 拮
２ ５ ． ０ ， 淀粉 ｌ Ｏ ． ０ ， 酵母 粉 ４ ． ０ ， Ｎａ Ｃ Ｉ ２ ０ ． ０ ， 牛 肉膏 １ ． ０ ，
Ｋ２ ＨＰＯ４ ０ ． ０ ５ ， Ｐ Ｈ一 ７ ． ２ 。
１． ２
．
抗 菌活性 和细胞毒 性 ［ ５ ｊ ； 从 湛 江硇 洲 岛 高 盐泥 样 中筛 选得 到到 一株 海 洋 微 嗜 盐 放 线 菌 Ｊ ＭＣ ０ ６ ０ ０ １ ， 该 菌 株 的发 酵粗产 物具 有 很强 的抑 菌 活性 ］ ； 从 渤海 海底 沉 积物 中筛选得 到一 株 编 号 Ａ２的海 洋 放 线 菌 ， 该 菌株 发酵 产生 的代 谢产 物对 多种植 物病 原真 菌具有 强烈 的
放线菌资料
放线菌资料的总结放线菌资料的总结放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞。
在显微镜下，放线菌呈分枝丝状，我们把这些细丝一样的结构叫做菌丝，菌丝直径与细菌相似，小于1微米。
菌丝细胞的结构与细菌基本相同。
根据菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种。
链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其形态如下图所示。
下图：链霉菌的一般形态和构造（模式图）正文：放线菌是怎么生长的，需要什么条件，我指的不是培养基，而是在植物体内。
植物内生放线菌在植物的韧皮部、木质部和韧皮部之间的缝隙有生长，分离植物的内生菌通常在这两个部位可以分离到。
主要是靠植物组织提供营养，有很多内生菌能够分解纤维素作为炭源，无机盐和氮源可以由植物组织中的无机盐和含氮物质获得，他们在植物中生长很缓慢。
通常来说，植物或者植物的组织器官的生长时间越长内生菌的种类和数量越多，你如果要分离可以选择树龄在百年以上的树。
植物器官粉末中会有放线菌存在吗？干燥的，经辐射灭菌后的粉末会把放线菌杀死吗？适宜的条件还会长出菌吗？辐射灭菌和50-60度的干燥都不能杀死所有的放线菌。
另外植物当中不只有放线菌，植物的内生菌大多数是真菌，有的内生真菌产生孢子能够抵御不良环境，生存能力很强。
如果你是做植物组织化学可以采用高温处理，杀死植物当中的微生物，再分析植物组织的成分。
如果你要的成分不能高温处理，可以用容易挥发的消毒剂处理植物样品，杀死微生物然后，在无菌环境下使消毒剂挥发。
建议你采用75%乙醇。
如何分离内生菌？目前内生菌的分离主要还是表面消毒，建议你最好不要把植物组织研磨成粉末。
可以将组织用75%乙醇表面消毒，在无菌室中的超净台中将植物组织吹干，用消毒的手术刀，把植物组织切割成0.5*1cm的小块。
直接把组织块接入培养基，同时将组织小块在空培养基中滚动，然后取出，作为对照平板。
如果对照平板有菌长出，说明消毒不彻底，如果对照平板无菌生长，说明消毒彻底。
北极海洋沉积物中放线菌多样性及抑菌活性筛选
北极海洋沉积物中放线菌多样性及抑菌活性筛选作者：常显波，柳瑞翠，刘文正，等来源：《湖北农业科学》 2014年第13期常显波１，柳瑞翠１，刘文正２，张晓华２（１．烟台大学环境与材料工程学院，山东烟台２６４００５；２．中国海洋大学海洋生命学院，山东青岛２６６００３）摘要：采用平板涂布法利用６种培养基从北极海洋沉积物中共分离出１０９株放线菌。
选取３４株代表菌株进行１６ＳｒDＮＡ测序分析。
结果表明，它们分属于链霉菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、假诺卡氏菌属（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａ）和拟诺卡氏菌属（Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ），其中Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ为优势菌属；不同采样点获得放线菌的种类和数量有较大不同，站位点Ｐ３７分离到的放线菌数量和种类最多；在１０９株放线菌中，有３９株对病原菌有抑菌活性，其中有２１株、１１株和１７株放线菌分别对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长有抑制作用。
关键词：北极；海洋沉积物；放线菌；多样性；抑菌活性中图分类号：Ｑ９３９．９９文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０14）13－3014-05自从Ｅｋｅｌｏｆ１９０８年首次报道从南极分离出微生物后，各国的微生物学家相继在极地进行过大量的研究工作，证明了微生物是极地生态系统的重要组成部分，特别是在极地的海水、海冰、海底沉积物中存在着各种类型的微生物［１］。
由于极地所处的地理位置比较特殊，从而形成了一个寒冷、干燥、强辐射的环境条件，生存于其中的微生物必须具备相应独特的分子生物学机制和生理生化特征去适应这样的极端环境，特别是对于能够产生多种次级代谢产物的放线菌来说，极地应该是产生新型生物活性物质的放线菌菌株的重要生存繁衍之地［２，３］。
对极地海洋沉积物中的放线菌进行分离培养、鉴定、抗菌活性等方面的研究，有利于进一步了解、开发和利用该地区放线菌资源。
为此，对来自北极的１０份海洋沉积物样品进行放线菌的分离培养，通过１６ＳｒＤＮＡ序列测定，对分离出的菌株进行分子鉴定和系统发育分析，再对放线菌株进行抗菌活性筛选，希望能为今后极地海洋放线菌资源的研究和开发利用提供有价值的参考。
海洋放线菌的研究概况
ｆ ｎ ｔ ｎ ｆｔ ｅ ａ ｔ ｏ ｃ ｔ ｓ ａ ｄ ｔ ｅ ｖ ｌ ｅ ｏ ｅ ｓ ｃ ｎ ａ ｔｂ ｌ ｅ ｎ ａ ｌ ｅ ｄ ，ｏ ｔ ｎ ｓｔ ｅ ｐ ｏ ｌ ｍ ｓｔ ａ ｕ ｃ ｉ ｓｏ ｃ ｉ ｍｙ ｅ ｅ ｎ ａｕ ｆｔ ｅ ｏ ｄ ｒ ｍｅ ａ ｏ ｉ ｓ ｉ ｌ ｆ ｌ ｓ ｕ ｌ ｅ ｈ ｒ ｂ ｅ ｈ ｔ ｏ ｈ ｎ ｈ ｈ ｙ ｔ ｉ ｉ Ｃｈ ｎ ＇ ｒ ｓ ａ ｃ ｆ ｒｎ ｃ ｉ ｏ ｃ ｔ ｓｆ ｃ ｄ ａ ｄ ｐ ｏ ｐ ｃ ｓ ｈ ｒ ｍｉｉ ｇ ｆ ｔ ｒ ． ｉ ａｓ ｅ ｅ ｒ ｈ ｏ ｉ ｅ ａ ｔ ｍｙ ｅｅ ａ ｅ ｎ ｒ ｓ ｅ ｔ ｔ ｅｐ ｏ ｓｎ ｕ ｅ ｍａ ｎ ｕ Ｋｅ ｒ ｓ ｍａ ｉ ｅａ ｔ ｏ ｃ ｔ ｓ ｓ ｃ ｎ ａ ｙ ｍｅ ａ ｏ ｉ ｓ ｄ ｖ ｒ ｉ ｂ ｏ ｏ ｉａ ｓ ｕ ｃ ｓ ｙ ｗｏ ｄ ： ｒ ｃ ｉ ｍｙ ｅｅ ； ｅ ｏ ｄ ｒ ｔｂ ｌ ｅ ； ｉ ｅ ｓｔ ｎ ｎ ｔ ｙ； ｉ ｌ ｇ ｃ ｌ ｅ ｏ ｒ ｅ ｒ
基 中 生 长 。根 据 放 线 菌 对 盐 、 压 力 、 温 度 的 要 求 ，
海 洋放 线 菌 的多 样 性 是 极其 丰 富 的， 其 生 活环 按 境 可 大致 划 分 为共 附 生海 洋 放 线 菌 、深 海 中海 洋 放
线 菌 、海洋 固有放 线 菌， 洋放 线菌 主 要包 括 小 单孢 海
Ｒｅ ｅ ｒ ｈ Ｃｅ ｔｒ ｆ Ｍ ｉ ｒ ｂ ａ ｅ ｉ ｉｅ Ｈｅ ｅ ｄ ｓｒ ｉｒ ｂ ａ ｅａ ｏ ｉ ｓ ａ ｃ ｎ ｅ ｃ ｏ ｉ ｌ ｄ ｃ ｎ ， ｂ ｉ ｎ ｕ ｔｙ Ｍ ｃ ｏ ｉ ｌ ｔ ｂ ｌ ｏ Ｍ ｉ Ｍ ｃ
Ｅ ｇｎ ｅ ｎ ｔ ｈ ｏｏ ｙＲ ｓａ ｈＣ ｎｅ Ｓ ｉａｈ ａ ｇ ５ ０ ５ ｎ ｉｅｒ ｇ＆ ｅ ｎ ｌｇ ｅｅｒ ｅ ｔ ， ｈ ｉ ｕ ｎ ０ ０ １ ） ｉ ｃ ｃ ｒ ｊｚ
几种常见培养基作用
几种常见培养基作用培养基是细菌学和微生物学实验的基础，用于培养、繁殖和研究细菌和其他微生物。
不同的培养基具有不同的特性和作用。
下面将介绍几种常见的培养基及其作用：1.营养琼脂基本培养基：这是最常用的培养基之一，它提供了细菌生长所需的各种营养物质，包括碳源、氮源、矿物质和维生素。
该培养基能够满足细菌的基本营养需求，促进其繁殖和生长。
2.差异性培养基：差异性培养基的作用是区分不同细菌的生长和代谢特点。
例如，大肠杆菌选择性培养基能够抑制其他菌群的生长，只允许大肠杆菌生长，从而帮助鉴定和分离大肠杆菌。
3.选择性培养基：选择性培养基的作用是选择性地培养其中一类细菌。
根据细菌对不同抑制剂和抗生素的敏感性，可以选择性地促进或抑制一些细菌的生长。
例如，巴氏杆菌选择性培养基会抑制大多数菌群的生长，只允许巴氏杆菌生长。
4.富集培养基：富集培养基的作用是加强其中一类细菌的生长。
富集培养基通常会包含一些特定成分，如特定营养物质或抗生素，以促使目标菌株的繁殖。
例如，革兰氏阳性杆菌富集培养基中含有高浓度的碳源和氮源，有助于改善革兰氏阳性杆菌的生长。
5.不含营养物质的培养基：不含营养物质的培养基还被称为无机培养基或基本盐蔗糖培养基(BSC)。
这种培养基只提供细菌生长所需的无机物质和一定浓度的蔗糖，不含有机营养物质。
这种培养基的作用是用于检测细菌对不同抗生素和化合物的敏感性，从而为抗生素临床应用提供参考。
6.非选择性培养基：非选择性培养基是一种通用的培养基，适用于不同种类的细菌。
它提供了细菌生长所需的各种营养物质，并不含有可能抑制菌群向生长的物质。
这种培养基通常用于分离和纯化未知细菌，以便进一步研究其特性和功能。
7.复合培养基：复合培养基是由多种不同成分组成的培养基，包括富集培养基、选择性培养基和差异性培养基等。
复合培养基的作用是兼顾多种细菌的营养需求和特性，为细菌的培养和研究提供全面的支持和条件。
总结起来，不同的培养基具有不同的作用，能够满足细菌的基本营养需求、区分不同细菌的生长和代谢特点、选择性地培养或抑制一些细菌、加强其中一类细菌的生长，或用于检测细菌对抗生素和化合物的敏感性。
细菌在培养基上的生长特征
细菌在培养基上的生长特征一、引言细菌是一类微生物，其生长特征对于研究细菌的生理学、遗传学、代谢学等方面具有重要意义。
培养基是细菌生长的基础，不同类型的培养基可以促进或抑制细菌的生长。
本文将从培养基成分、温度、pH值等方面分析细菌在培养基上的生长特征。
二、培养基成分对细菌生长的影响1. 碳源碳源是细菌生长所必需的营养物质之一，常见的碳源有葡萄糖、果糖、乳糖等。
不同类型的碳源会影响细菌在培养基上的生长速率和产物生成情况。
例如，嗜酸乳杆菌需要葡萄糖作为主要碳源才能正常生长，而大肠杆菌则可以利用多种碳源进行代谢。
2. 氮源氮元素是构成蛋白质和核酸等重要化合物所必需的元素之一。
常见氮源包括氨基酸、尿素、硝酸盐等。
不同类型的氮源对细菌生长的影响也不同，例如，大肠杆菌可以利用尿素作为氮源进行代谢，而放线菌则需要较高浓度的氨基酸才能正常生长。
3. 矿物质矿物质是细菌生长所必需的微量元素之一，包括钙、镁、铁等。
这些元素在细胞代谢中扮演着重要角色，例如铁可以作为细胞色素和酶的组成部分参与代谢过程。
矿物质缺乏会影响细菌生长和代谢。
4. 生长因子某些细菌需要特定的生长因子才能正常生长，例如血清中含有的因子可以促进巴氏杆菌等一些无法合成自身所需营养物质的细菌生长。
三、温度对细菌生长的影响温度是影响细胞代谢和生长速率的重要因素之一。
不同类型的细菌对温度有不同的适应范围。
1. 低温低温下（0℃-20℃），嗜冷菌和嗜寒菌可以正常生长，而一些人体病原菌如大肠杆菌则无法在低温下生长。
2. 中温中温下（20℃-45℃），大多数细菌可以正常生长，包括人体病原菌如葡萄球菌、链球菌等。
3. 高温高温下（45℃-80℃），嗜热菌和嗜极端嗜热菌可以正常生长，而一些人体病原菌如沙门氏菌则无法在高温下生长。
四、pH值对细菌生长的影响pH值是指溶液中氢离子浓度的负对数。
不同类型的细菌对于pH值有不同的适应范围。
1. 酸性环境酸性环境（pH<7）中，嗜酸杆菌等一些酸耐受性较强的细菌可以正常生长，而其他细胞则会受到抑制。
放线菌菌落特征放线菌资料的总结
放线菌菌落特征放线菌资料的总结放线菌菌落特征放线菌资料的总结放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞。
在显微镜下，放线菌呈分枝丝状，我们把这些细丝一样的结构叫做菌丝，菌丝直径与细菌相似，小于1微米。
菌丝细胞的结构与细菌基本相同。
根据菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种。
链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其形态如下图所示。
下图:链霉菌的一般形态和构造(模式图)正文:放线菌是怎么生长的，需要什么条件，我指的不是培养基，而是在植物体内。
哪位做过植物内生菌，恳请指教!不胜感激!植物内生放线菌在植物的韧皮部、木质部和韧皮部之间的缝隙有生长，分离植物的内生菌通常在这两个部位可以分离到。
主要是靠植物组织提供营养，有很多内生菌能够分解纤维素作为炭源，无机盐和氮源可以由植物组织中的无机盐和含氮物质获得，他们在植物中生长很缓慢。
通常来说，植物或者植物的组织器官的生长时间越长内生菌的种类和数量越多，你如果要分离可以选择树龄在百年以上的树。
植物器官粉末中会有放线菌存在吗?干燥的，经辐射灭菌后的粉末会把放线菌杀死吗?适宜的条件还会长出菌吗?辐射灭菌和50-60度的干燥都不能杀死所有的放线菌。
另外植物当中不只有放线菌，植物的内生菌大多数是真菌，有的内生真菌产生孢子能够抵御不良环境，生存能力很强。
如果你是做植物组织化学可以采用高温处理，杀死植物当中的微生物，再分析植物组织的成分。
如果你要的成分不能高温处理，可以用容易挥发的消毒剂处理植物样品，杀死微生物然后，在无菌环境下使消毒剂挥发。
建议你采用75%乙醇。
如何分离内生菌?目前内生菌的分离主要还是表面消毒，建议你最好不要把植物组织研磨成粉末。
可以将组织用75%乙醇表面消毒，在无菌室中的超净台中将植物组织吹干，用消毒的手术刀，把植物组织切割成0.5*1cm的小块。
直接把组织块接入培养基，同时将组织小块在空培养基中滚动，然后取出，作为对照平板。
水产微生物实验—培养基的配制
⽔产微⽣物实验—培养基的配制实验⼆培养基的配制⼀、基础知识培养基是⼈⼯配制的适合微⽣物⽣长繁殖或积累代谢产物的营养基质，⽤以培养、分离、鉴定、保存各种微⽣物或积累代谢产物。
飞⾃然界中，微⽣物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的⽬的不同，所以培养基的种类很多。
但是，不同种类的培养基中，⼀般应含有⽔分、碳源、氮源、能源、⽆机盐、⽣长因素等。
不同微⽣物对pH要求不⼀样，霉菌和酵母的培养基的pH⼀般是偏酸性的，⽽细菌和放线菌的培养基的pH⼀般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。
所以配制培养基时，都要根据不同微⽣物的要求将培养基的pH调到合适的范围。
此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微⽣物，因此，已配制好的培养基必须⽴即灭菌，如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防⽌其中的微⽣物⽣长繁殖⽽消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
根据微⽣物的种类和实验⽬的不同，培养基的类别如下（⼀）按成分的不同分1．天然培养基。
主要成分是复杂的天然有机物质，如马铃薯、⽟⽶粉、⾖饼粉、⾖芽汁、⽜⾁膏、蛋⽩胨、⾎清等。
这些复杂天然有机物质的成分不完全了解，每次所⽤的原料，其中各成分的数量也不恒定。
这类培养基是实验室和发酵⼯⼚常⽤的培养基，例如⽜⾁膏蛋⽩胨培养基，马铃薯培养基，⽟⽶粉、黄⾖饼粉培养基、⾎琼脂培养基等。
2．合成培养基⽤化学成分完全了解的纯化合物药品配制⽽成的培养基，因此也称化学成分明确的培养基(chemically defined medium)，如⾼⽒I号培养基、查⽒培养基、M9培养基等。
⼀般⽤于研究微⽣物的形态，营养代谢、分类鉴定、菌种选育、遗传分析等。
⾼⽒I号培养基是⽤来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
如果加⼊适量的抗菌药物(如各种抗⽣素、酚等)，则可⽤来分离各种放线菌。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的⽆机盐，这些⽆机盐可能相互作⽤⽽产⽣沉淀、如⾼⽒⼯号培养基中的磷酸盐和镁盐相互混合时易产⽣沉淀；因此，在混合培养基成分时，⼀般是按配⽅的顺序依次溶解各成分，甚⾄有时还需要将三种或多种成分分别灭菌，使⽤时再按⽐例混合。
2022年中国海洋大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年中国海洋大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、立克次氏体是一类______、______的原核生物，它与支原体的区别是______和______，与衣原体的区别是______、______和______。
专性寄生于植物韧皮部的立克次氏体，称作______。
2、腺病毒是通过五邻体上的______行使吸附功能的。
3、硝化细菌是属于______营养型微生物，它们的碳源是______。
其中亚硝酸细菌能够将______氧化为______，硝酸细菌则能够将______氧化为______，从而获得能量。
它们用于还原CO2的NADH2，是在消耗大量 ______的情况下，通过______的方式而产生，这也是它们生长缓慢和生长得率低的原因之一。
4、实验室常用的培养细菌的天然培养基为______，培养酵母菌的天然培养基为______，培养放线菌的组合（合成）培养基为______等，培养真菌的组合培养基为______等。
5、Ainsworth（1973）真菌分类系统将真菌门分成______亚门、______亚门、______亚门、______亚门和______亚门。
6、由科赫提出的确证某病原体为某传染病病因的学说称为______，它的主要内容有：①______，② ______，③ ______，④ ______。
7、生物效价可用______、______测定，其中以______中的______最为常用。
8、常用的污水处理装置有两种，一是利用______进行处理的______，另一是利用______进行处理的______。
9、准性生殖主要发生在______中，其过程为：① ______，② ______，③ ______，④ ______。
10、外毒素都是一些有毒性的蛋白质，其本质是______、______或______。
若用______浓度的______脱毒，就可生成______，若再进一步用它去免疫动物，就可从中获得______。
海洋微生物抗真菌代谢产物的研究进展
离得到真菌Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．ＢＤ２１．２，它的培养液中含有一 种新的化合物，俗名为ｂｏｍａｃｔｉｎ，经活性检测具有抗真菌 活性及抗革兰氏阴、阳性菌的活性嫡】。 ２海洋细菌活性产物的开发研究
万方数据
化合物ｇａｊｕａｏｕＩａｍｉｄｅ Ｃ
化合物Ａ
３海洋动植物的共附生菌活性产物的开发研究 近来，越来越多的研究表明，许多具有开发前景的活性
海洋微生物在寻找抗真菌类活性产物方面的研究与开 发，是陆栖微生物药物研究开发的延续和扩展。活性物质 的直接来源是从海水、海泥及海洋动植物中筛选出的微生 物的初生代谢产物与次生代谢产物，经进一步的研究可直 接开发成新药或经修饰后成为新药，也可作为新药开发的 先导化合物。 １海洋真菌活性产物的开发研究
多年来，人们从海洋丝状真菌Ｋｅｉｓｓｌｅｒｉｅｌｌａ ｓｐ．ＹＳ４１０８ 的代谢物中相继发现了５种化合物，其中的一种具有全新 的碳骨架（结构如下：化合物Ｅ）。５种化合物经由体外活性 检测，化合物Ｄ、化合物Ｅ显示了一定的抑菌活性，对人病 原真菌Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｈｉｃａｎｓ、Ｔｒｉｃｏｐｈｙｔｏｎ ｍｂｍｍ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ有不同程度的抑制，其ＭＩＣ值分别为４０、２０、８０ ｌａ ｇ／ ｍｌ和１０、３０、５０ ｐ ｇ／ｍｌｔｌ。】。
【文章编号】１００９－０９５９（２０１０）０２－０２８０－０２
随着化疗、器官移植、免疫抑制剂的广泛使用及检查 和治疗技术发展带来的副作用，使得世界范围内的浅部和 深部真菌感染的发病率持续性增加，面对真菌病发病率增 加的挑战，人们试图寻找新型的具有临床应用价值的抗真 菌抗生素，以解决真菌感染带来的困扰。寻找新种属或特 殊性状的微生物及其代谢产生新型药物的难度越来越大， 于是最近几年人们把目光转向更具有药物开发前景的海洋 微生物——海洋药物的重要资源。
海洋微生物活性物质(精)
海洋微生物活性物质的研究进展专业:生物工程姓名:李振森学号:4012010302海洋是生命的发源地,约占地球表面积的71%,其中生物种类20多万种,其多样性远远超过陆地生物的多样性。
由于海洋环境具有高盐度、高压、低营养、低温和无光照等条件,从而形成了海洋生物与陆地生物不同的生长方式和代谢系统。
近年来,随着人们对海洋生物研究的不断深入,发现了多种多样的生物及许多具有新颖、特异化学结构的生物活性物质。
海洋生物活性物质主要包括生物信息物质、生理活性物质、海洋生物毒素及生物功能材料等。
目前,从海洋生物中已相继发现300余种新型化合物,结构新颖并具有多样性:有枯类、聚醚类、当醇类、皂昔类、生物碱、多糖、小分子肤、核酸及蛋白质等,并具有丰富的生理及药理活性,包括抗菌、抗肿瘤、抗病毒、防治心血管疾病、延缓衰老及免疫调节等多种功能。
多年来,国内外一直致力于这方面的研究,试图从中开发结构明确,疗效肯定的新型生物活性物质,以用于攻克人类面临的重大疑难疾病,其中具有高生物活性和高选择性的海洋生物毒素备受重视,成为研究的热点。
近年来,海洋生物毒素是海洋生物活性物。
1、海洋抗肿瘤活性物质1.1海洋放线菌海洋有着极其丰富的放线菌资源,具有抗菌活性的海洋微生物中约有45%来源于放线菌。
就目前的报道,海洋放线菌产生的活性物质大部分来源于小单孢菌属和链霉菌属。
由于海洋放线菌所产生的代谢产物具有功能独特、结构新颖等特点而受到人们的广泛关注,例如抗真菌、抗疟等功能。
另一方面,陆生放线菌的不断开发,发现新的活性物质的可能性越发减少,迫使人们将目光转向海洋放线菌的开发。
1991年Fenical小组[1]首次发现一属全新的需盐生长的特殊海洋放线菌Salinispora,其广泛存在于热带和亚热带海泥中。
2003~2005 年Fenical小组从菌株Salinispora tropica CNB-392 中分离得到10个结构新颖的化合物[2-4],其中化合物Salinosporamide A(1[3]具有广阔的成药前景,对人结肠癌细胞的IC50为0.035 nmol/L,已作为癌症药物进入临床前研究[5-6]。
海洋微生物活性物质
海洋微生物活性物质的研究进展专业：生物工程姓名：李振森学号：4012010302海洋是生命的发源地，约占地球表面积的71%，其中生物种类20多万种，其多样性远远超过陆地生物的多样性。
由于海洋环境具有高盐度、高压、低营养、低温和无光照等条件，从而形成了海洋生物与陆地生物不同的生长方式和代谢系统。
近年来，随着人们对海洋生物研究的不断深入，发现了多种多样的生物及许多具有新颖、特异化学结构的生物活性物质。
海洋生物活性物质主要包括生物信息物质、生理活性物质、海洋生物毒素及生物功能材料等。
目前，从海洋生物中已相继发现300余种新型化合物，结构新颖并具有多样性：有枯类、聚醚类、当醇类、皂昔类、生物碱、多糖、小分子肤、核酸及蛋白质等，并具有丰富的生理及药理活性，包括抗菌、抗肿瘤、抗病毒、防治心血管疾病、延缓衰老及免疫调节等多种功能。
多年来，国内外一直致力于这方面的研究，试图从中开发结构明确，疗效肯定的新型生物活性物质，以用于攻克人类面临的重大疑难疾病，其中具有高生物活性和高选择性的海洋生物毒素备受重视，成为研究的热点。
近年来，海洋生物毒素是海洋生物活性物。
1、海洋抗肿瘤活性物质1.1海洋放线菌海洋有着极其丰富的放线菌资源，具有抗菌活性的海洋微生物中约有45%来源于放线菌。
就目前的报道，海洋放线菌产生的活性物质大部分来源于小单孢菌属和链霉菌属。
由于海洋放线菌所产生的代谢产物具有功能独特、结构新颖等特点而受到人们的广泛关注，例如抗真菌、抗疟等功能。
另一方面，陆生放线菌的不断开发，发现新的活性物质的可能性越发减少，迫使人们将目光转向海洋放线菌的开发。
1991年Fenical小组［1］首次发现一属全新的需盐生长的特殊海洋放线菌Salinispora，其广泛存在于热带和亚热带海泥中。
2003～2005 年Fenical小组从菌株Salinispora tropica CNB-392 中分离得到10个结构新颖的化合物［2－4］，其中化合物Salinosporamide A(1)［3］具有广阔的成药前景，对人结肠癌细胞的IC50为0．035 nmol /L，已作为癌症药物进入临床前研究［5－6］。
福建沿海沉积物放线菌的多样性及生物活性
福建沿海沉积物放线菌的多样性及生物活性郭娜燕;连莲香;黄耀坚;徐庆妍;郑忠辉【摘要】目的探索福建沿海沉积物中可培养海洋放线菌的多样性及其抗菌、抗肿瘤活性,为发现新的药物先导化合物提供新菌源.方法从15份福建沿海沉积物选择性分离放线菌:16S rRNA基因序列分析多样性;采用10种活性筛选模型分析生物活性.结果共分离到216株海洋放线菌,MOPS-脯氨酸培养基的分离效果最好.选取77株代表菌株进行16S rRNA基因序列分析,发现其归属于14个属,其中10株为潜在新种.有164株(77％)海洋放线菌对8种指示菌中的一种或几种具有抑制作用;有39株(18.1％)对HeLa细胞或HepG2细胞有细胞毒活性(抑制率≥50％).结论福建沿海沉积物样品中含有丰富多样的海洋放线菌,大量菌株具有抗菌与抗肿瘤活性,是天然产物开发的重要资源.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2017(042)001【总页数】9页(P20-27,51)【关键词】福建沿海;海洋放线菌;分离;多样性;生物活性【作者】郭娜燕;连莲香;黄耀坚;徐庆妍;郑忠辉【作者单位】泉州医学高等专科学校基础医学部,泉州362000;厦门大学生命科学学院,天然产物源靶向药物国家地方联合工程实验室,厦门361005;厦门大学生命科学学院,天然产物源靶向药物国家地方联合工程实验室,厦门361005;厦门大学生命科学学院,天然产物源靶向药物国家地方联合工程实验室,厦门361005;厦门大学生命科学学院,天然产物源靶向药物国家地方联合工程实验室,厦门361005;厦门大学生命科学学院,天然产物源靶向药物国家地方联合工程实验室,厦门361005【正文语种】中文【中图分类】Q939.920世纪70年代，海洋微生物抗生素的研究引起了各国的重视；80年代中期，陆地微生物药物逐年下降，而海洋微生物新药的发现逐年增加。
近年来，发现和报道了许多新颖、高活性的海洋天然产物，如抗菌、抗肿瘤、抗疟疾、抗炎、抗氧化等[1-2]。
海洋放线菌
人们普遍认为放线菌在很大意义上与海洋沉积物有关，或是存在 于无脊椎动物共生体中。而浮游生物式的生存方式相当少见。
但最近的研究确发现某些放线菌会对深海对流或病毒的作用敏感 。因此我们还需更全面地理解海洋动力学和海洋生物学。
在海洋放线菌生物地理学方面仍存在问题。
总的来说，大量研究均支持自由存在的微生物的生物地理分布的 假说。同时认为这种空间分布多样性反映了环境选择。
使用微胶囊化细胞，并向其中灌注模拟天然成分的培养基（ 如海水、沉积物等）。此法可使来自于同一样本的104份分离 产物得以再现。
对过低营养物浓度的培养条件的改进
涉及多次向海产琼脂上或向无菌海水稀释液中长培养时间使生长较慢 的细菌能得以检测到。
Salinosporamide A
§3 海洋放线菌研究概述
海洋微生物学在一些国家发展势头强劲。其发展重 点清楚定位于生物活性化合物的开发。
目前，通过16s rRNA系统发生多样性的研究结果和 新的培养方式的建立，在深海沉积物中已发现超过 1300种放线菌，人们预计其中很大一部分是新的种 类。
§6 正确认识机遇
技术性问题 生物多样性 对培养基依赖与否的关系 筛选 基因组学 人员培训 非技术性问题
投资
对海洋放线菌和整个天然产物开发领域共同产生影响
§7 结论及未来展望
天然产物研究和海洋放线菌的开发前景是乐观的：
了不起的技术设备的出现，且目前已可得以使用 对海洋生物学的理解日益深刻，只是发展还较慢 已发现大量天然产物并各有广泛应用 （如生物催化剂、生物材料、农业化学试剂等）
但总之，过去几年来我们已在分离海洋沉积物来源的放线菌方面取得了 长足进步。（图1）
海洋生物资源及利用
而以海洋微生物作为药物的生产者，将无 原材料的后顾之忧，可以利用现代微生物 发酵技术大规模工业化生产源于海洋微生 物的活性物质，保证资源的可持续利用。
环境的特殊性决定了海洋中存在着许多的 特殊的微生物，特别是那些在极端环境条 件下能够生存繁衍并具有与之相适应的生 理机能的海洋极端微生物，蕴藏着产生多 种多样新颖生物活性物质的巨大潜力。
一、作用类型 1、抗微生物类化合物 2、抗肿瘤化合物 3、酶 4、其他
二、结构特点 三、产生条件
1966年Burkholder等在一株分离自海藻表面的假 单胞菌中首次找到具有很好抗革兰氏阳性菌作用 的化合物（硝吡咯菌素）。
此后人们有陆续发现了多种抗生素类化合物。广 泛应用于临床的各类头孢霉素，其母核为头孢霉 素C水解后产生的头孢烯，而头孢霉素C是从意大 利撒丁岛分离的一株海岸真菌产生。
chemically defend crustacean embryos from a parhogenic fungus . Science.1989,246:116~117 徐怀恕 张晓华。海洋微生物技术，青岛大学学报，2019.28（4）： 265~289 周世宁。林永成。蒋广策。海洋微生物的生物活性研究，大学化学。 2019.11（6）：127 孙昌奎,冯静,马桂荣.海洋微生物多样性的研究进展.生命科 学,2019,13(3):97~99 韦成礼。李玲。游丽云。国内外从海洋微生物开发新型药物的研究概况， 生物技术通讯2019.2：1~4
谢谢大家!
培养基营养成分的浓度及菌种的培养条件 （PH、温度等）都会对海洋放线菌的抑菌 活性产生很大影响。
除此之外有的海洋微生物在与其他微生物 （包括其培养的上清液）如人类病原菌共 存时会被诱导产生抗微生物的物质，粘附 到某些物质如化学聚合物的表面也能增强 其产生抗菌物质的能力。
海洋放线菌分离方法
5 抑制剂
分离 海 洋 放 线 菌 一 般 都 需 要 使 用 抑 制 剂, 建 议 用 放 线 菌 酮 ( 100 或 50 mg / 1 000mL ) 或制霉菌素 ( 100m g /L ) 加萘啶酮酸 ( 20~ 25mg /1 000mL ) 。也可以用放线 菌酮 ( 100 或 50m g / 1 000mL ) 或制霉菌加利富平 5~ 10m g / 1 000m L。 参考文献
A3, En terocin, A ctp heno, l m a ltophilin, echinom ycin , anti m yc in A, sporav iridin A1 , ba filom ycins, filipin , lipom ycins , lagosin, aboyssom icins, ikarugam ycin, elalom ycin ,
*
国家 973项目 ( N o 2004CB719601 ) 国家自然科学基金项目 ( N o 30270004、 30560001 ) 通讯作者 Te: l 0871 5035263, Fax: 0871 5173878 , E m ai: l 收稿日期 : 2006 04 12, 修回日期 : 2006 05 19 lihxu@ ynu edu cn
[ 3] 7
。用这种方法可以分离到大量
4 培养基
( 1) M 1 培养基 : 淀粉 10g, 酵母膏 4g , 蛋白 胨 2g, 琼脂 18g 天然 海水定容 至 1 000 m L。
2006 年 33 ( 6)
微生物学通报
155
图 1 微囊化分离难培养放线菌流程图
( 2) M 2 培 养 基: 甘 油 6 m L, 精 氨酸 1g, K 2 H PO4 0 5g, K2 H PO4 0 5 g , M gSO4 0 5g, 琼脂 18g, 天然海水定容至 1 000 mL。 ( 3) M 3 培养基 : 葡萄糖 6g , 几丁质 2g, 琼脂 18g, 天然海水定容至 1 000 mL ( 4) M 4 培养基 : 几丁质 2g , 琼脂 18g , 天然海水定容至 1 000 mL ( 5) M 5 培养基 : 琼脂 18g, 天然海水定容至 1 000 mL ( 6) 几丁质琼 脂: 几 丁质 2g , K2 H PO4 0 7g, KH 2 PO 4 0 3g , M gSO4 0 5g , 琼脂 20g , 天然海水定容至 1 000 mL ( 7) 海藻糖 - 脯氨酸培养基 : 海藻糖 5g , 脯氨酸 1g , ( NH 4 ) 2 SO4 1g , NaC l 1g, CaC l2 2g, K 2H PO4 1g , M gSO4 7 H 2 O 1g, 复合维生素 (维生素 B1 、核黄素、烟酸、维生 素 B6 、泛酸钙、肌醇、 p- 氨基苯甲酸各 0 5m g, 生物素 0 25m g) , 琼脂 20g , 天然海 水定容至 1 000 mL。 HV 培养基的分离效果也较好。
海洋放线菌(Salinispora arenicola)基因转移系统的建立
海洋放线菌(Salinispora arenicola)基因转移系统的建立马艳玲;李海贤;翁萍;刘泽璇;许小庆;曾荣【摘要】该实验旨在建立海洋放线菌Salinispora arenicola基因转移系统,以便基因敲除和外源基因表达等遗传操作.以整合型质粒pSET152和pIB139为出发质粒,通过接合转移构建了海洋放线菌Salinispora arenicola的基因转移系统.结果表明,25μg/mL阿泊拉霉素可有效筛选接合子,大肠杆菌与孢子的比例为8:1时可获得较多的转化子.经聚合酶链式反应(PCR)验证,质粒成功整合到菌株海洋放线菌S.arenicola基因组中,接合子经多次传代后,导入的质粒pSET 152和pIB139仍稳定整合于接合子基因组上.成功构建了海洋放线菌S.arenicola接合转移系统.%The objective of this study is to establish the gene transfer system of marine-derived actinomycetes Salinispora arenicola,which can be used for genetic manipulations such as gene knock-out and expression of foreign ing integrated plasmid pSET 152 with pIB 139 as original plasmid,the gene transfer system of actinomycetes S.arenicola was constructed by conjugating transfer.Results showed that 25 μg/ml apramycin may be used to efficiently screening conjugants,and more transformant can be acquired with Escherichia coli to spores ratio 8:1.PCR verification revealed that exogenous plasmid was successfully integrated in the chromosomal DNA of actinomycetes S.arenicola.After multiple generations of zygotes,the transformed plasmid pSET152 and pIB139 of conjugants were stably integrated in the zygote genome.The S.arenicola conjugational transfer system was successfully constructed.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2018(037)003【总页数】4页(P131-134)【关键词】海洋放线菌;Salinispora arenicola;接合转移;遗传稳定性【作者】马艳玲;李海贤;翁萍;刘泽璇;许小庆;曾荣【作者单位】佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院食品科学与工程学院,广东佛山528231【正文语种】中文【中图分类】Q93-331天然药物的一个重要来源是海洋放线菌[1]，其作为一类特殊菌群其可以产生多种生物活性物质，这些活性物质很多都具有成为新药先导化合物的研制潜能，如多肽、酶类、抗肿瘤物质和抗生素等[2-4]。
放线菌检测标准版本
微生物总数检测方法(放线菌）一、检测用培养基配方与培养条件1.培养基：高氏1号培养基配方：可溶性淀粉 2g ，KNO30.1g ，K2HPO4 0.05g ，MgSO4• 7H2O 0.05g ，NaCl0.05g ，FeSO4• 7H2O 0.001g （母液），琼脂 2g ，自来水 100mL 。
先把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。
在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。
调整pH值到7.2～7.4，分装后灭菌，备用。
2. 培养条件：温度：27℃-30℃；时间：36--48小时。
二、检测与计数方法1. 系列稀释称取适量的样品，加入带玻璃珠的三角瓶中，加入100mL的无菌水（无菌水中事先加入了分散剂1—2滴，分散剂可以是吐温，OP—10，用来分散菌团），用玻璃棒搅拌使之溶解吸水均匀后上旋转式摇床200 r/min充分振荡40—60 min，,即成母液菌悬液（基础液）。
2. 用1mL无菌移液管分别吸取1.0mL上述母液菌悬液加入9 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……1:1×k稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
3. 加样及培养取1个适宜的稀释度，用移液枪吸取菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀地涂于琼脂表面。
此稀释度重复3次，同时以空白作对照，于适宜的条件下培养。
4. 菌落识别根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。
当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。
5. 菌落计数以出现20—150个菌落数的稀释度的平板为计数标准，分别统计有效活菌数目和杂菌数目。
有效菌平均菌落数在20—150之间时，则以该菌落数计算。
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表2 SC L-90评分与父母教养方式的相关分析(r值)因子F1F2F3F4F5F6M1M2M3M4M5躯体化-0.1490.2820.2850.1090.2380.163-0.01730.1630.3510.3110.119强迫-0.1730.3410.2340.1240.2000.205-0.1240.2310.4170.2570.102人际关系-0.3010.3380.1850.0900.2450.124-0.1650.1150.2140.1950.0503抑郁-0.1970.2410.3240.1140.1960.172-0.1870.3000.3310.2470.105焦虑-0.1330.1740.2870.2110.2170.180-0.02130.2040.2640.2410.0633敌对-0.1130.2450.1820.1190.1850.224-0.01930.1170.2480.3100.104恐怖-0.1240.1820.1120.0570.2280.310-0.1920.2010.3040.2210.111偏执-0.1120.3010.1450.0740.1890.114-0.2140.1450.1490.3040.0823精神病-0.08530.05730.3100.1450.2010.174-0.2110.2150.2410.2310.128 注:3P<0.05,其余均为P<0.01;F1～F6分别为父亲温暖理解、惩罚严厉、过分干涉、偏爱、拒绝否认和过度保护,M1～M5分别为母亲温暖理解、干涉保护、拒绝否认、惩罚严厉和偏爱。
3 讨论 本研究显示,大学生有心理问题者占总数的20.39%,充分表明大学生心理健康状况较差。
大学生心理问题主要表现在人际关系敏感、强迫、抑郁、偏执、敌对等几个方面,与李丽等研究结果一致[5],而精神病性及躯体化问题不突出。
关于父母教养方式,本研究显示父母亲严厉惩罚、过分干涉或保护以及拒绝否认与大学生的强迫症状、人际关系敏感、抑郁、焦虑、敌对、恐怖、偏执呈正相关,提示父母教养方式与大学生心理健康密切相关。
父母教养方式是父母在对子女抚养教育过程中一贯运用的方法和模式,其对子女的自我概念的形成、人格特征、价值观念和行为方式有重要意义[6]。
父母对子女采用严厉惩罚、拒绝否认和过分干涉保护等不良方式易导致子女人际敏感、抑郁、焦虑等情绪和行为问题,增加其患神经症的危险性。
相反,父母的温暖理解作为子女最重要的情感支持,能增强大学生的心理承受力,使其有能力成功应对大学时期所面对的各种变化和挑战。
导致大学生的心理问题的因素除了父母教养方式外,还有大学生自身的因素,如自我控制力差、自我期望值高、不能建立良好的人际关系,对挫折的耐受力和排解能力低,恋爱和性的问题处理不佳[7]。
亦有社会因素,如竞争的压力、经济的压力、就业的压力等。
所以,大学生的心理健康有赖于家长、社会及大学生自身的共同努力。
参考文献[1] 李作泉.二十一世纪人才教育必须加强心理健康教育[J].中国校医,1996,10(3):234[2] Yoshida T,Taga C,Matsumot o Y.Paternal over p r otecti on in obsessive-compulsive dis order and dep ressi on with obsessive traits[J].Psychi2 atry Clin Neur osci,2005,59(5):533[3] 陈昌惠.症状自评量表[M].心理卫生评定量表手册(增订版).北京:中国心理卫生杂志社,1999.31-35[4] 岳冬梅.父母教育方式评价量表[M].心理卫生评定量表手册(增订版).北京:中国心理卫生杂志社,1999.161-167[5] 李 丽.大学生心理健康及父母教养方式相关研究[J].贵州师范大学学报,2002,20(4):91-94[6] Ehnvall A,Pal m-Beskow A,Beskow J.Percep ti on of rearing circum2stances relates t o course of illness in patients with therapy-refract ory affective dis orders[J].J Affect D is ord,2005,86(2-3):299-303 [7] 陈秋珠.心理健康问题-当代大学校园普遍关注的问题[J].温州师范学院学报,2004,25(6):77(2006-04-24 收稿)(岳静玲 编辑)不同培养基对海洋放线菌抗微生物活性的影响吴少杰 朱丽华① 杨志娟②(华北煤炭医学院药学系,①生物科学系,②信息中心 河北唐山 063000)[摘 要] ①目的 探讨不同培养基条件对于海洋放线菌抗菌活性的影响。
②方法 采用纸片法筛选抗菌活性;③结果 在10株海洋放线菌中,大部分菌株的最佳抗菌活性培养基为M2+培养基;还发现在某些培养基条件下,海洋放线菌能产生具有选择性地对抗某种微生物的活性。
④结论 不同培养基对海洋放线菌的抗菌活性有较大影响,因此在研究中应注意培养基的优化。
[关键词] 海洋放线菌 抗菌活性 培养基[中图分类号] R37 [文献标识码] A [文章编号] 1008-6633(2006)05-0600-03The i n fluence of m ed i u m to the an ti m i crob i a l acti v ity for10mar i n e acti n o m ycetes WU Shaojie,ZHU L ihua,YAN G Zhij uan (N orth China M edical Institute for Coal m ine,Tangshan063000,China)[ABSTRACT〗 O becti ve A i m T o deter m ine the influence of mediu m t o the anti m icr obial activity of marine actinomycetes and find the bestmedi m for antim icr obial activity screening;M ethod The antim icr obial activity was decided by paper dish method;Re2 sult The activity screening showed that the best mediu m for most of the10strains wasM2+mediu m;and in s ome mediun,a selec2 tive activity t o s ome particular m icr obes was observed.Conclusi on The mediu m conditi on have a p r om inent effect t o the anti m icr o2 bial activity of marine actinomycetes and thus the op ti m izati on of mediu m conditi on should be take int o account.[KE Y WO RD S〗 M arine actinomycetes.Anti m icr obial activity.Mediu m【作者简介】吴少杰(1973-),男,博士,讲师。
主要研究方向:海洋微生物。
放线菌在微生物药物中占有特殊重要的地位。
自20世纪40年代发现微生物来源新的生理活性物质中,55%以上是由放线菌产生的[1],其中许多已广泛应用于临床。
近年来由于病原微生物耐药性及新的感染性疾病不断涌现,新型药物的开发显得非常迫切。
但陆地放线菌的研究已进行很多年,从中发现新型抗生素的概率大大下降,这使近年来海洋放线菌开始受到重视。
我们已经对260株海洋放线菌进行了抗各类微生物的活性筛选和次级代谢产物化学筛选,从中选出10株较为感兴趣的菌株[2]。
由于微生物的次级代谢产物的产生对于环境条件极为敏感,同一株菌在不同的环境下可能产生截然不同的化合物而显示出不同的活性,因此,在进行微生物活性物质研究时,应当特别注意培养条件的影响。
本文探讨不同培养基对于海洋放线菌抗菌活性的影响。
通过上述10株感兴趣的海洋放线菌在不同培养基中抗各类微生物活性的变化,找到最佳培养基,以便进行进一步的化学筛选和次级代谢产物分离鉴定,旨在从中发现新结构的活性次级代谢产物。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验仪器。
HH -B11型电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂);S W -CJ -1F D 型超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司);YXQG02型电热式手提式蒸汽灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司);THZ -C 恒温振荡培养箱(江苏太仓市实验设备厂);图1 10株海洋放线菌抗微生物活性与培养基的关系 图中纵轴为抑菌圈直径(mm ),横轴为7种培养基(A:M2+培养基;B:S M 培养基;C:ME 培养基;D:CaCl 2培养基;E:LB 培养基;F:高氏培养基;G:佐贝尔2216E 培养基)1.1.2 菌株。
①海洋放线菌菌株。
本实验采用的10株放线菌,经过抗微生物活性粗筛和次级代谢产物化学筛选,均为较感兴趣的菌株。
菌株编号分别为300、455、457、473、477、484、493、546、566、584。
②受试菌株(共8种)金黄色葡萄球菌(staphyl o 2coccus aureus )、八叠球菌(sarcine s p.)、大肠杆菌(escherichia co 2li )、绿脓杆菌(bacillus pyocyaneus )、链霉菌(strep t omyces s p.)、新型隐球菌(cryp t ococcus neof or mans )、白色念球菌(candida albi 2cans )以及毛霉(mucor m iehei )。
1.1.3 培养基。
海洋放线菌分别采用7种液体培养基进行比较试验,即M 2+培养基,S M 培养基,M E 培养基,CL 培养基,LB 培养基,高氏(Gause’s )培养基[3]以及佐贝尔2216E 培养基[4]。
8种受试菌中,细菌为牛肉膏蛋白胨培养基(牛肉膏0.5g,蛋白胨1g,氯化钠0.5g,蒸馏水100m l;pH 7.0-7.2);酵母菌为沙氏培养基(蛋白胨1.0g,葡萄糖4.0g,蒸馏水100mL;pH 自然);链霉菌和霉菌为M 2+培养基。