马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒苗快繁生产管理技术
薯原种的生产数量，而脱毒马铃薯的优
* 快繁瓶装苗的控制
快繁瓶口 !'#2.（注意不要让小苗挨上
势，即高产和不易腐烂，被农民（特别是
在快繁脱毒苗时，瓶中如少放脱毒 快繁瓶瓶口，以防感染），剪带 ! 片小叶
靠天吃饭及高海拔地区的农民）及市场 苗，其长得快，脱毒苗节间长、叶大且须 茎放在快繁瓶中。盖上盖子，在苗瓶外
度高，污染增高，所以室内需装空调。一 无菌室所需物品放在无菌室固定位置， 般温度应控制在 #%'#(范围内，温度 启动超净工作台，通风杀菌，并将室内 高于 #)，则苗顶端易产生烧苗现象， 紫外灯打开消毒，工作人员快速离开无
和强壮生长。 # 温度对瓶装脱毒苗生长的影响 夏天昼长夜短，日光灯照射比冬天
短，而 自然 照射光多，可提高组培瓶苗
新脱毒瓶苗，每年应通过剥离茎尖组织 脱毒苗被取出时，就会污染正在做的培
的办法培养新鲜无病毒瓶苗，以确保继
代培养脱毒瓶苗质量。 ( 无菌操作室内消毒灭菌 ("! 操作前消毒 一是无菌室刚开始工作或间隔 !'
响
$ 瓶苗污染的控制
壁用打号枪注明该品种的编号及快繁
日期。 ) 定期检查 放在生长间的快繁脱毒苗，一般每
隔 -, 要用稀释好的清洁尔灭喷撒灭 菌，每天早关灯和晚开灯时，发现有污
培养基包括大量元素、微量元素、 在脱毒瓶苗的继代培养过程中，常 染的瓶苗，必须马上将其拿出生长间，
铁盐、食用白糖、自来水、琼脂。试管苗 因种种原因出现细菌类和真菌类污染， 并放入高压灭菌锅灭菌，然后用清洁热
单节切断繁殖宜采用固体培养基，如果 细菌污染苗极弱，且扩繁后下一代大部 水加入适量洗衣粉，用刷子涮洗苗瓶，
工作人员在培养基灭菌过程中，不慎放 分表现为细菌污染，在生产中通常用抗 并换水冲洗，然后倒置木架上晾干水珠 气不均，一般灭菌后拿出来的培养基过 生素来处理细菌污染。对于真菌污染的 待用。健康苗 #% 多天就可快繁或移栽
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯作为我国重要的经济作物之一，是广大农民和经济发展所依靠的重要农业领域。
而随着现代农业发展的不断推进，马铃薯种植也面临着各种各样的困难和问题。
其中，病毒病是马铃薯种植过程中最严重的问题之一。
为了解决这一问题，现在越来越多的科技工作者开始探索马铃薯脱毒试管苗快繁技术。
以下就从马铃薯脱毒试管苗的定义、制备流程、优势及应用等方面进行详细介绍。
马铃薯脱毒试管苗是指利用组织培养和生物学技术手段在无菌条件下，从被病毒污染的母株中取材，经过一系列处理，得到一定数量无菌苗，最终培育成符合生产要求的健康幼苗。
二、制备流程1、材料准备选择健康的马铃薯作为原材料，对其进行外观检查和芽眼筛选。
同时还需准备有较高的生长潜力和再生能力，无菌培养必需的基本培养基、辅助培养基及添加适量激素和营养物质的诱导培养基等。
2、无菌处理将马铃薯进行消毒处理，以确保材料无菌化。
处理方法包括酒精消毒、盐酸消毒、滴定消毒等。
3、切瘤、分化在消毒的基础上，进行切瘤和分化处理，分离出芽鳖、块茎鳖、滋液鳖等预备试管苗材料。
4、根、茎、叶分离通过培养基的诱导，将原始材料中的根、茎、叶进行分离和再生，形成独立的无菌苗，以便进行大规模培养和繁殖。
5、无菌培养得到无菌苗后，进行无菌培养，增殖数量，以期达到无菌苗的快速繁殖和生长。
6、弱化适应繁殖的苗期过长、适应性不足，则会极大地限制试管苗的生长和繁殖。
为此，可以通过加强营养管理、控制温度环境以加强其适应能力。
三、优势及应用1、提高繁殖能力试管苗繁殖效率高，可以在很短时间内繁殖出大量的健康马铃薯苗，提高其生产效益。
2、保证生产质量脱毒试管苗繁殖过程严格按照国家标准执行，每批苗都具有相同的生长特征和品质，可以保证生产质量。
3、有效防控病害通过脱毒试管苗快繁技术，可以有效避免病毒病等病害的传播，提高马铃薯的健康状态，减少生产损失。
4、推动可持续发展脱毒试管苗效益显著，有助于推动现代化农业发展和可持续发展，为农民增收和增加就业构建了良好的平台。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯脱毒试管苗快繁技术是近年来在马铃薯生产中得到广泛应用的一项先进技术，通过试管苗快速繁殖可以大幅提高马铃薯的繁殖效率和质量，有效地避免了病毒和病菌的传播，提高了马铃薯的产量和品质。
本文将从马铃薯脱毒试管苗原理、技术流程、应用前景等方面进行介绍。
一、马铃薯脱毒试管苗原理马铃薯脱毒试管苗技术是通过将健康的组织培养在无菌的培养基中，通过适宜的营养和生长条件，使其快速生长和分化为幼苗，然后继续培养和繁殖，最终获得大量无病害的苗种。
其原理主要包括以下几点：1. 选择健康组织：选择健康的马铃薯组织，如叶片、茎芽等，进行无菌处理，去除表面的病菌和病毒。
2. 建立培养基：根据马铃薯生长的特点和营养需求，配置适宜的无菌培养基，提供充足的营养和生长因子。
3. 培养和繁殖：将经过无菌处理的马铃薯组织培养在无菌培养基中，控制适宜的温度、光照和湿度，促进组织的生长和分化为幼苗，然后进行继代培养和繁殖。
通过以上原理，可以有效地实现马铃薯的脱毒繁殖，得到大量无病害的试管苗，为马铃薯生产提供了可靠的种苗资源。
马铃薯脱毒试管苗技术的流程主要包括组织培养、无菌处理、培养基配置、培养和繁殖等步骤，下面将对其具体流程进行介绍。
2. 无菌处理：将经过消毒处理的组织放入无菌工作台中，进行进一步的无菌处理，包括盆栽、割取等操作，确保组织的无菌状态。
3. 培养基配置：按照配方将无菌培养基配置好，包括营养盐、植物生长激素、碳源等成分，确保提供足够的营养和生长因子。
马铃薯脱毒试管苗技术在马铃薯生产中具有广阔的应用前景，主要体现在以下几个方面：1. 提高繁殖效率：传统的马铃薯繁殖方式存在生长周期长、繁殖效率低的问题，而通过试管苗快速繁殖技术可以大大提高繁殖效率，节约时间和成本。
2. 避免病毒传播：马铃薯作为病毒携带者，传统繁殖方式易导致病毒的传播，而试管苗繁殖可以避免病毒的传播，有效保证马铃薯的健康和质量。
3. 提高产量和品质：无病害的试管苗具有较高的生长力和抗逆性，可以提高马铃薯的产量和品质，为种植户带来更好的经济效益。
脱毒马铃薯试管微型薯繁育技术
脱毒马铃薯试管微型薯繁育技术作者：马纪来源：《中国果菜》 2017年第5期马纪（黑龙江农业科学院植物脱毒苗木研究所，黑龙江哈尔滨 150086）摘要：马铃薯受到病毒的感染后会出现退化现象，进而降低马铃薯的产量。
通过对马铃薯进行脱毒，并使用试管微型薯繁殖技术培养无毒的马铃薯种子，可大大提高马铃薯的产量，保证马铃薯的品质。
本文对马铃薯脱毒技术进行分析的基础上，明确脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术要点，并对马铃薯繁殖技术中病毒检测方法进行了讨论，以期促进脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术的发展，提高马铃薯的经济效益。
关键词：脱毒马铃薯；试管微型薯繁殖技术；茎尖脱毒；病毒检测中图分类号：S532 文献标志码：A 文章编号：1008-1038(2017)05-0073-03DOI：10.19590/ki.1008-1038.2017.05.022收稿日期：2016-12-26作者简介：马纪（1967—）女，副研究员，研究方向为脱毒马铃薯试管苗及微型薯栽培马铃薯是茄科茄属的双子叶种子植物，生产上绝大多数使用块茎进行无性繁殖。
马铃薯受到病毒的侵染会出现退化现象，主要表现为花叶、卷叶、束顶等症状。
病毒会使植株生长速度减缓，叶片卷曲坏死，块茎变小、变尖、龟裂、内部网状坏死等，甚至会失去发芽能力，不能作为种子使用。
病毒会逐年积累，病情会逐年加重，造成马铃薯严重减产。
研究发现，侵染马铃薯的病毒有18种，其中9种是专门存在于马铃薯上的。
当前解决因病毒引起的马铃薯退化问题，就培育无毒种薯，其中最行之有效的方法就是茎尖脱毒。
马铃薯脱毒种薯是经薯块室内催芽、切取茎尖分生组织、试管苗培养、切段快繁等一系列技术措施后获得的，笔者结合多年研究、实践操作经验，总结出一套高效的脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术要点。
1 脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术要点脱毒马铃薯试管微型薯繁殖技术要点：先将带毒薯块进行催芽和消毒处理，然后在无菌条件下切取茎尖分生区组织，在试管中进行培养，分生区组织生长4个月，待茎尖分生区组织长成植物苗后，对试管苗进行病毒检测，从中鉴定出不带病毒的脱毒苗，再进行切断快繁，后进行诱导、良种繁殖，最后选出具有原品种特性的脱毒马铃薯，从而实现复壮的目的。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是一种重要的作物，全球范围内都有大量的种植。
由于土壤中存在的病毒和细菌的侵害，马铃薯的产量和质量往往受到一定的影响。
为了解决这一问题，马铃薯脱毒试管苗快繁技术应运而生。
本文将为大家介绍马铃薯脱毒试管苗快繁技术的原理、方法和应用前景。
一、原理马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种利用组织培养和生物技术手段快速产生无病毒的马铃薯试管苗的技术。
它的原理主要是通过选择健康无病毒的马铃薯组织，将其进行无菌培养，促进组织再生和植株生长，最终获得大量的无病毒马铃薯试管苗。
二、方法1. 选择健康的母株：首先需要选择健康的母株作为试管苗快繁的材料。
这些母株应该是没有明显的病害和病毒感染的，以保证脱毒后的试管苗是健康的。
2. 组织培养：将选取的健康组织（例如茎、叶或芽）进行消毒处理，然后进行无菌培养。
在无菌条件下，利用培养基和植物生长调节剂促进组织再生和植株生长。
3. 病毒检测：在组织培养过程中，需要对脱毒后的试管苗进行病毒检测，确保其无病毒。
通常采用ELISA法和PCR法等技术进行检测。
4. 试管苗生根：经过病毒检测合格的试管苗，可以进行生根处理，促进其根系的形成和长成。
5. 扩繁：经过生根的试管苗可以进行扩繁，通过分株或离体再生等方法，迅速繁殖大量的无病毒试管苗。
三、应用前景马铃薯脱毒试管苗快繁技术在马铃薯种植中有着广阔的应用前景。
通过脱毒试管苗快繁技术，可以及时有效地消除马铃薯中的病毒和细菌，保证种子的健康。
这样不仅可以提高马铃薯的产量和质量，还可以减少农药的使用，对环境保护具有积极意义。
脱毒试管苗快繁技术可以加快马铃薯种苗的繁殖速度，满足市场需求。
传统的种苗繁殖需要时间较长，而脱毒试管苗快繁技术可以大大减少这一时间，提高种苗的产量和质量。
脱毒试管苗快繁技术还可以为育种工作提供良好的材料。
利用这一技术，可以快速繁殖无病毒的马铃薯试验材料，为马铃薯新品种的选育提供更多可能。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种十分重要的新技术，它将对马铃薯生产和种植起到重要的促进作用。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是全球重要的食用作物之一，其种植面积和产量在世界范围内都很大。
马铃薯种薯中常常存在着多种病毒，这些病毒会严重影响马铃薯的生长和产量。
研究人员开发了马铃薯脱毒试管苗快繁技术，该技术能够高效地将马铃薯病毒脱毒，并快速繁殖出健康的马铃薯苗，为马铃薯种植业提供了重要的支持。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术基于组织培养技术，利用马铃薯体细胞和组织的特性进行操作。
从感染病毒的马铃薯植株中采集组织和细胞，经过消毒处理后，将其接种到含有适当培养基的试管中。
培养基中含有营养物质、激素和抗生素等成分，可以提供细胞生长所需要的养分和激素，同时抗生素可以防止细菌和真菌感染。
随着培养的进行，马铃薯细胞和组织会不断增殖和分化，形成新的组织。
一段时间后，研究人员会对试管中的新组织进行检测，以判断是否成功脱毒。
常用的检测方法有PCR、ELISA等，通过检测病毒的存在来判断是否脱毒成功。
若检测结果为阴性，则表示新组织已经脱毒，并且不再存在病毒感染。
此时，研究人员会进一步将新组织进行快速繁殖。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术的快速繁殖过程主要是通过分化和增殖组织来实现的。
研究人员会将脱毒成功的新组织进行切割，然后将切割后的组织培养在含有适当培养基的培养瓶中，利用培养基提供的营养物质和激素等，新组织会不断分化并形成新的马铃薯苗。
这样一来，可以快速繁殖出大量的健康马铃薯苗，为马铃薯种植提供了可靠的种苗。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术具有许多优势。
通过试管培养，可以在较短的时间内大量繁殖出健康的马铃薯苗，提供了高效的种苗来源。
通过脱毒处理，可以去除马铃薯病毒，保证种苗的健康。
该技术相比传统繁殖方法，减少了土地的占用和对环境的侵害，有利于可持续农业的发展。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是世界上重要的粮食作物之一，广泛种植于全球各地。
目前马铃薯种植中存在一个重要问题，就是马铃薯的毒素含量较高。
马铃薯中的毒素主要来自于马铃薯根茎中的龙葵碱成分，长期摄入会对人体健康造成一定的危害。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术的研究和应用，对于提高马铃薯生产的安全和质量具有重要的意义。
一、马铃薯脱毒试管苗快繁技术的意义马铃薯脱毒试管苗快繁技术是利用植物组织培养技术，将健康的母株马铃薯组织培养在营养基上，通过细胞分裂和组织再生的方式，快速繁衍大量健康的马铃薯试管苗。
这项技术对于解决马铃薯繁殖过程中的病虫害传播、品种保存、疫病侵染和生产质量的提高都具有非常积极的意义。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术可以有效地防止病虫害的传播。
传统方式繁殖的马铃薯苗地下茎或种子上易携带病菌，一旦植入下一代土壤中，会进一步传播疾病。
而试管苗快繁技术可以通过无菌培养的方式，快速繁殖大量无病繁殖的健康马铃薯试管苗，有效地避免了这一现象的发生。
该技术可以用作品种保存和资源库的建设。
通过马铃薯脱毒试管苗技术，可以将母株的遗传物质以及优良品种进行保存和繁殖，确保了马铃薯种质资源的多样性和稳定性，为马铃薯品种的改良和繁衍提供了重要的物质基础。
马铃薯脱毒试管苗技术还可以提高生产的质量和效率。
传统的马铃薯繁殖方式往往需要较长的时间，且容易受到疾病和气候等环境因素的影响，生产效率较低。
但是通过试管苗快繁技术，可以快速地繁殖大量高质量的马铃薯试管苗，提高了生产效率和质量，对于整个马铃薯产业的发展具有重要的意义。
二、马铃薯脱毒试管苗快繁技术的关键技术马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一项复杂的技术，其成功应用需要掌握一系列关键技术。
以下是该技术的关键技术要点：1. 母株选择母株的选择是马铃薯脱毒试管苗快繁技术的第一步。
选择健康、无病毒的母株进行组织培养，是保证繁殖出的试管苗质量的基础。
只有健康的母株才能够保证繁殖出的试管苗也是健康的。
马铃薯试管苗工厂化快繁试验研究
马铃薯试管苗工厂化快繁试验研究多年来，由于农民的自繁自育自留种，使得马铃薯在生产过程中产量逐年下降，品质变劣，商品形状变差等，经科学家研究证明，病毒的侵染及其在薯块内积累是马铃薯“退化”的主要原因。
为了解决我市马铃薯主栽品种严重退化，产量降低这一问题，我所将马铃薯脱毒生产作为重点试验课题，针对脱毒生产中存在的问题进行了试验研究，从而利用了资源，降低了生产成本，为马铃薯的增产与增收提供了科学的理论依据，有力的加快了我市马铃薯脱毒薯生产的现代化进程。
1试验概况1.1试验材料脱毒种苗由中国农科院蔬菜花卉所提供。
品种以我市主栽品种克新1号、克新3号为主，少量引进克新13号、坝薯9号、坝薯10号，以及观察试验品种费乌瑞它、大西洋等。
1.2试验地点试验设在市农科所植物组培与工厂化育苗车间，内配备有空调，可调节温度的变化。
1.3试验日期2004年3月购进脱毒苗，5月实验室仪器购回后开始少批量扩转，7月底进行大批量生产。
2试验方法该试验生产的工艺流程是：培养基配置―装瓶―灭菌―转接―培养。
2.1培养基的配置马铃薯试管苗所需的培养基MS培养基，该培养基的特点是无机盐和离子的浓度高，是较稳定的离子平衡溶液，其营养的数量和比例能满足植物细胞的营养和生理需要。
（1）MS培养基配方：包括大量元素、微量元素、铁盐、有机物、其他（琼脂、糖、灭菌水）；（2）母液配制：为使各种配料称取方便准确，减少误差及烦琐，一般将各种试剂扩大100倍，称取后配成母液，备用。
每次配制培养基时，只需量取母液10ml/L制作培养基。
（3）培养基pH调节：各种配料配好后，用pH试纸或pH仪测pH值，马铃薯试管苗所需的pH为5.8～6，再将琼脂加热至完全溶化即可。
2.2装瓶将培养基装入7×7×10cm的方体四旋口无色玻璃瓶，注意不要把培养基粘附到培养瓶口，一般装培养基的量应以能扶起每一茎段即可，装好后用透气的封口膜封口。
2.3灭菌灭菌采用高压蒸汽灭菌锅，温度调控在121℃（正负误差1℃），时间定为18～20分钟。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是一种重要的农作物，在全球范围内广泛种植。
由于马铃薯易受到病毒感染，其产量和质量往往受到严重影响。
为了解决这个问题，研究人员开发了马铃薯试管苗快繁技术，能够快速繁殖健康、无病毒的马铃薯苗。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种通过离体培养的方法，利用马铃薯的无菌组织进行繁殖。
从健康的马铃薯植株中取得组织样品，将其表面进行消毒处理，以去除可能带有病毒的污染物。
然后，将组织样品切割成小块，将其置于含有适宜培养基的试管中。
培养基是一种含有营养物质和激素的液体或凝胶介质，能够提供细胞生长所需的营养物质和环境条件。
马铃薯试管苗通常使用的培养基是含有葡萄糖、氨基酸和维生素的MS培养基。
在培养基中，马铃薯组织样品会开始不断分裂和增殖，形成新的细胞。
在试管苗的培养过程中，需要注意控制温度、光照和湿度等环境条件，以促进马铃薯组织的生长和发育。
通常情况下，温度保持在20-25摄氏度，光照强度为3000-5000勒克斯，湿度保持在60-70%左右。
经过一段时间的培养，马铃薯组织样品会形成白色的愈伤组织，然后再通过再生诱导、分化和生根等步骤，最终形成健康的无菌试管苗。
在试管苗生长发育良好后，可以将其转移到土壤中进行实验室外的进一步繁殖。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术的优点在于，它能够快速繁殖大量的无病毒马铃薯苗。
相比传统的马铃薯繁殖方法，试管苗技术更加高效和可靠，并且能够避免病毒的传播。
这对于提高马铃薯产量和质量，减少病毒病害的发生具有重要意义。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种重要的马铃薯繁殖方法，能够快速繁殖健康、无病毒的马铃薯苗。
随着这项技术的进一步发展和应用，相信可以为马铃薯产业的发展做出更大的贡献。
马铃薯脱毒试管苗的扩繁技术
马铃薯脱毒试管苗的扩繁技术马铃薯是黑龙江省第五大作物，仅排在水稻、小麦、玉米、大豆之后，是一种可以作为粮食、蔬菜和工业原料等多种用途的农作物。
马铃薯在黑龙江省还是一个新兴产业，只有二十几年的历史。
这项产业的形成与发展是伴随着马铃薯脱毒技术的研究与开发诞生的。
桦川县通过“院县共建”扶贫开发项目的顺利实施，在省农科院专家教授的指导下，建立了以苏家店镇，梨丰乡为主的脱毒马铃薯繁殖基地，大大提高了我县马铃薯的栽培技术水平和产量品质水平。
平均亩产达到2000公斤左右，淀粉含量达20%左右。
为了进一步提高脱毒种薯的生产水平，我们对马铃薯脱毒试管苗的扩繁技术进行了研究，主要技术如下：1.无毒苗的选择用于扩繁的无毒试管苗必须经过严格的病毒检测。
确实不含任何病毒和类病毒。
生长健壮，株高5～6厘米，节间中等、茎租，叶大的无毒试管苗。
2.培养基的准备无毒试管苗扩繁采用MS培养基。
加入适量琼脂。
由于目前市场所售琼脂含量不等，配制前须先进行试验。
大约用量在6～13克/升。
将培养液加热煮沸趁热灌人试管，每支试管灌6～7毫升，灌好塞上棉塞装入灭菌锅。
灭菌压力为15磅（121℃）保持20分钟即可彻底杀灭病菌。
灭菌后取出冷却，凝固后即可用于扩繁。
3.扩繁设备有条件的单位可使用无菌操作台，我们着重探索了利用简易接种箱进行扩繁的技术。
除操作箱外还需要一个酒精灯，栽植钩、铁盘、火柴和装有1/3酒精杯子。
4.消毒在扩繁前一天，用3～5%的来苏尔将室内全面消毒，消毒前用75%酒精将消毒箱擦净，取相当于无毒苗（每次扩繁的）5～6倍的灭完菌的培养基，消毒后放入操作箱。
再次将操作箱内外消毒。
扩繁时把手伸入操作箱内，将栽植钩与剪刀沾一下酒精，在酒精灯上点燃后马上放到铁盘上自然冷却。
同时将培养基取5～6管拔去棉塞，将一支试管苗的管口在酒精灯上边灼烧边取下棉塞。
用栽植钩将苗勾到大部分露出试管，再用剪刀每管培养基中剪取2～3段，每隔一节带一片叶。
剪完后，用栽植钩将每管中的切段直立（不可倒插）地插入培养基中。
马铃薯的脱毒培养快繁
马铃薯的脱毒试管苗
再将其转入生长箱中，每天光照16 h， 光照强度3000-4000 lx。2 周后去掉顶芽， 以促进腋芽的生长。当腋芽长到1-2 cm时， 折下腋生枝，用于消毒、接种。
（2）消毒： 水洗干净，无菌条件下先用70%的酒精
浸组织15-20 s，再用2%次氯酸钠溶液浸泡 4-5 min，然后用无菌水冲洗3 次。
2、影响脱毒效果的因素
（1）外植体大小：0.2-0.3 mm，带1-2个原基为好
（2）茎尖所处部位：块茎脐部休眠芽的生长点、 块茎顶部的粗壮芽、植株主茎的生长点
（3）病毒种类及复合感染（脱毒更困难）
PSTV（条纹病毒）、PVS（S病毒）、PVX （X病毒）、PVM（M病毒）、PAMV（丛矮病 毒）、PVY（Y病毒）、PVA（A病毒）、PVRV （卷叶病毒）
茎尖成活）。加入调节物质6-BA 0.5 mg/L， NAA 0.1-1.0 mg/L。 培养条件：温度25±2 ℃，光照16 h/d
当新梢长至2-3 cm时，转至生根培养基 （MS培养基中加入0.3 mg/L的NAA）
（5）病毒鉴定（指示植物法）： 马铃薯的病毒指示植物：苋科的千日红、
藜科的杖藜、茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。 从被检植株上取下叶片，置于等容积的
当小植株4-5 cm时，进行第二步培养。
（2）微型薯诱导： 要求：有一定量的植物生长物质，暗培养 培养基：MS+50-100 mg/L香豆素的液体 或固体培养基
2、微型薯温室多层架盘工厂化生产
➢4-6 层架进行培养，育苗盘规格60 cm×25 cm×4-6 cm，育苗基质为蛭石或马粪。
➢三角瓶繁殖的脱毒苗以单茎节或双茎节扦 插，在人工调控的温度、光照下，经过6090 d即可收获。
马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程
马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程马铃薯是我国重点经济作物之一，但由于土壤病原菌的日益严重，日益增多的药害，以及自然灾害等因素，导致马铃薯产量和品质日渐下降。
因此，马铃薯脱毒试管苗繁育技术也逐渐得到了广泛应用。
1.脱毒试管苗的定义与意义脱毒试管苗即是指将马铃薯组织培养于无菌培养基上，通过消毒、筛选、分离等技术手段，去除其中携带的病毒和其他病原物质，最终得到无毒、无病的马铃薯幼苗，以提高繁殖材料的质量和育种进程的效果。
2.脱毒试管苗的繁育流程以下列举的是脱毒试管苗的繁育流程，同时应注意每个步骤中的具体操作方法和关键要点。
(1)马铃薯组织样品的采集选取茎、芽、花、叶、根等马铃薯组织细胞样品，可直接使用自然生长或者割取新鲜的植株，保持组织的完整性和新鲜度。
(2)材料的处理及消毒将采集到的样品进行去皮、去芽、去内部瘤、清洗、消毒等处理，以保证材料的无菌状态。
消毒方式常用的有热水消毒、酒精消毒和过氧化氢消毒等方法。
(3)培养基的配制配制培养基成为无菌状态的重要条件，如常用的MS培养基。
在配制时需注意不能存在杂质、要保证pH值适当等。
(4)移植组织样品将经过消毒的样品去除无用部位，移植到培养基上，营造无菌培养环境，需要注意材料的位置、密度和距离等。
(5)形成愈伤组织通过调节培养基的营养成分、植物生长素、生长素哈尔农等，利用组织培养技术尽可能地促进细胞组织分裂和增生，并实现愈伤组织的形成和扩增。
(6)脱毒处理和筛选鉴定通过各种方法，如脱毒剂处理、病毒分离、RT-PCR检测等技术手段，对愈伤组织进行脱毒处理并筛选鉴定，从而得到无毒、无病的苗木。
3.结论总之，马铃薯脱毒试管苗繁育技术是一项现代化、高效率的培育技术，可以大幅度提高马铃薯原种的品质和繁殖效果，走向了一条绿色生产、高质量发展的道路。
但是操作时要注意条件营造、材料选择和具体技术细节等问题，才能真正实现试管苗优良品种的快速、规范和高效繁殖和应用，为农业产业和农业经济的发展贡献力量。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯脱毒试管苗快繁技术一、引言马铃薯是我国重要的粮食作物之一，也是世界上著名的经济植物之一。
然而由于病毒的不断侵袭和疫病的流行，马铃薯的产量和品质不断下降，给农民带来了巨大的经济损失。
因此，繁殖健康无害的马铃薯脱毒试管苗已成为种植业的重要课题。
本文将就马铃薯脱毒试管苗快繁技术进行详细描述。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是指利用组织培养技术，从马铃薯营养组织中培养出无菌结果愈伤组织，然后通过激素处理，使其分化成愈伤组织和根发生体，并再次通过激素培养，使其分化成幼苗。
经过快速繁殖和转移，只需数月就可以获得大量无菌试管苗。
1、原种资料筛选首先要去毒源，选择健康、无病毒的马铃薯株作为原种资料。
2、表型鉴定通过观察和检测，鉴定选定的原种资料是否存在病害。
3、进行消毒处理将所选的马铃薯根茎进行消毒处理，保证原种资料无菌。
4、组织培养将原种资料营养组织分离出来，并进行无菌培养，培养至结果愈伤组织。
5、激素处理将结果愈伤组织分裂成愈伤组织和根发生体，经过激素处理，使愈伤组织分化成为幼苗。
6、快速繁殖和转移幼苗经过快速繁殖和转移，可以在数月时间内获得大量的无菌试管苗。
1、高效快捷马铃薯组织培养技术可以在短时间内获得大量无菌马铃薯苗，极大地提高了马铃薯繁殖的效率。
2、无病毒由于是无菌培养，可以避免病毒的传播和侵袭，从根本上解决了马铃薯病害的问题。
3、一致性强试管苗的形态、生长状态、品种、性状和同一生产人群下的分布均一。
4、推广灵活马铃薯组织培养技术可以根据不同地区和不同需求进行灵活推广和应用。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术具有广阔的应用前景，可以成为解决马铃薯病害的重要手段。
同时，随着科技不断发展和创新，马铃薯脱毒试管苗快繁技术将进一步提高繁殖效率和质量，并推动种植业的发展。
马铃薯脱毒苗组培快繁技术
马铃薯脱毒苗组培快繁技术(酒泉职业技术学院秦晓萍甘肃?酒泉 730500) 摘要本论文主要从培养基的制作、脱毒苗的制取、继代培养、培养条件、瓶装苗污染控制等方面介绍了马铃薯脱毒苗快繁技术，为马铃薯快繁生产提供参考。
关键词马铃薯脱毒苗快繁技术马铃薯是我国主要的粮食、蔬菜及工业原料作物，其国民经济意义十分重要，在保证粮食安全生产方面发挥了重大作用。
随着农业产业结构的调整，我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加。
但在连年的栽培过程中，病毒或类病毒不断的侵染和积累，从而导致马铃薯种性变劣，长势逐步减弱，产量逐年降低。
马铃薯快繁是在短时间内利用组织培养技术获得大量高质量的试管苗，应用种薯脱毒技术，[1]培养无毒组培苗，在提高产量、保证品质、耐贮藏方面体现出了独特的优势。
1 培养基的制作1.1培养基的配方利用提供的母液和材料MS+0.01mg/L NAA+3%蔗糖+0.56%的琼脂，PH为5.8，配置培养基1000ml,并均匀分装到24个培养瓶，进行灭菌。
母液浓度/扩大倍数配置体积(ml) 母液吸取量(ml) 称取量(g) 大量元素 20 50 —钙盐母液 20 50 —磷酸盐溶液 20 50 —铁盐 100 10 —微量元素 100 10 — 1000有机物 100 10 —萘乙酸(NAA) 0.1mg/L 0.1 —蔗糖 3% — 30琼脂粉 0.56% — 5.6 1.2 培养基的配制1.2.1仪器、用具与试剂(1)仪器:PH试纸、电磁炉、高压灭菌锅(2)用具:移液抢、移液管、量筒、容量瓶、培养瓶、玻璃棒、洗瓶、烧杯、搪瓷缸、镊子、钥匙、称量纸、胶头滴管、抹布、卷纸、标签纸、(3)试剂:配置MS培养基的各种母液、激素母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、0.1mol/LHCL、0.1mol/LNaOH1.2.2 培养基制作(1)准备工作将配置好的MS培养基母液从冰箱中取出，检查是否沉淀或变色，避免使用已失效的母液。
马铃薯组培脱毒试管苗繁育技术
马铃薯组培脱毒试管苗繁育技术赵佐敏,艾 勇(贵州省安顺市农科所 562109)中图分类号:S532 文献标识码:A 文章编号:167223635(2003)0523012041 前 言马铃薯通过组织培养途径,从而建立无病毒生产体系是一种非常有效的高新生物技术实用化措施。
发达国家早在上世纪50年代就采用多种脱毒途径生产无病毒种薯,取得巨大成功。
70年代初吉林农业大学进行了马铃薯茎尖组织培养,以后黑龙江省农科院马铃薯研究所、中国科学院微生物研 收稿日期:2003-10-20 作者简介:赵佐敏(1967-),女,农艺师,主要从事园艺及生物技术研究.究所、植物研究所、内蒙古乌盟农科所也相继开展了这方面的研究工作。
目前已有20多个省、市、60多家单位成功利用此项技术,已获得近百个品种的脱毒种薯。
我们从2001年开始马铃薯脱毒组培快繁研究,至今已得到“米拉”、“威芋3号”的脱毒试管薯千余粒、微型薯万余粒,这些脱毒种薯是全面大幅度提高马铃薯产量和质量的可靠保证。
2 马铃薯病毒与检测主要危害马铃薯的病毒有PL RV、PVA、PV Y、PVM、PVX、PVS、PAMV七种,类病毒有PSTV。
一般情况下,首先采用聚丙烯酰胺凝胶[10]Peteroen M.Progress and prospects for field use of Bt genes incrops.Trends in Biotechnology,1997,15:173-177.[11]郭三堆.苏云金芽孢杆菌δ-内毒素基因改造后的杀虫活性研究[J].中国农业科学,1993,26(5):77-81.[12]Vaeck M A.Transgenic plant protected from insect attack.Na2ture,1987,328:33-37.[13]Barton K A.Bacill us thuri ngiens is delta-endotoxin expressedin transgenic nicotian provides resistance to lepidopteran insects.Plant Physiol,1987,85:1103-1109.[14]张智奇,周音,王少鸥等.抗虫基因及其在植物上的应用[J].吉林农业大学学报,1996,18(1):91-95.[15]杨虹.苏云金芽孢杆菌δ-内毒素基因导入水稻和原生质体后获得转基因植株[J].中国农业科学,1989,22(6):1-5.[16]谢道昕,范云六.苏云金芽孢杆菌杀虫基因导入中国栽培水稻品种中花11号获得转基因植株.中国科学B辑,1991,21(8):830-834.[17]谢道昕,范云六,黄俊麟等.苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因导入棉花获得转基因植株[J].中国科学B辑,1991, 21(4):367-373.[18]Peteroen M.Progress and prospects for field use of B.t.genesin crops.Trends in Biotechnology,1997,15:173-177. [19]Mackenzie D.G enes sans frontiers.New Scientist,1997,153:2071-2079.[20]G atehouse A M R.Introduction of genes conferring insect inBrighton.Crop Protection Conference,1988,3:1245-1254.[21]John C Thomasetal.Introduction and expression of an insect pro2teinase inhibitor in alfafa(Medicago saliva).Plant Cell Re2 ports,1994,14:31-36.[22]刘春明.豇豆胰蛋白酶抑制剂抗虫转基因烟草的获得[J].科学通报,1992,37(18):1694-1697.[23]王志斌,李学勇,郭三堆.植物凝集素与抗虫基因工程[J].生物技术通报,1998(2):5-10.[24]Boulter D,Edwards G A,and G atehouse A M R.Additive pro2tective effects of different plant derived insect resistance genes in transgenic tobacco plants.Crop Prot,1990,9:351-354. [25]Edward G A,Hepher A,and Clerk S P.Pealectin is correctlyprocessed,stable and active in leaves of transgenic potato plants.Plant Mol Biol,1991,17:89-100.[26]H ilder V A,P owell K S,G atehouse A M R,et al.Expression ofsnowdrop lectin in tranegenic tobacco plants results in added protection against aphids.T ransgenic Research,1995,4:18-25.[27]Anghard M R G atehouse,Rachel E Down,K evins Powell,etal.Transgenic potato plants with enhanced resistance to the peach-potato aphid Myz us persicae.Entomologia Expermentalis et Applicata,1996,79:295-307.电泳法对材料进行PSTV检测,若有PSTV则应坚决淘汰,因茎尖脱毒也难脱掉此种类病毒,故不能作茎尖培养材料。
实验13马铃薯脱毒试管苗快速繁殖
▪ 4 实验用具和仪器
▪ 酒精棉球、小块纱布、枪状镊子、手术剪、 解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工 作台等。
▪ 5 药品和试剂
▪ 马铃薯快速繁殖培马铃薯脱毒试管
7 实验操作流程
▪ 〔1〕准备工作 ▪ ①接种室的清洁和消毒 ▪ ②超净工作台的开机和消毒 ▪ ③剪刀、镊子、已灭菌培养皿、酒精
棉球、酒精灯、待用培养基等的准备 ▪ ④ 实验材料的准备
〔2〕无菌操作
▪ ① 实验操作前，操作人员洗手及手和小臂 消毒〔注意问题？〕
▪ ② 使用的镊子、解剖刀等用95％酒精浸泡， 之后放在酒精灯上灼烧灭菌，再放在灭菌 后的培养皿中冷却后使用。
▪ ③培养瓶外壁的消毒
〔2〕无菌操作
▪ ④将马铃薯试管苗剪为单节茎段后接种到 培养基中，在植入材料的前后，培养瓶的 瓶口须在酒精灯火焰上烧烤灭菌。
▪ ⑤封口、标记、将培养瓶置于培养架上， 在温度20-25℃，光照强度2000-3000lx， 光照时间12-14小时/天的条件下培养。
图1 马铃薯试管苗的茎段扦插繁殖
实验1-3 马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖
▪ 1 实验目的
▪ 通过本次实验，掌握无菌操作的根本技术； 了解马铃薯脱毒种薯生产的过程，为马铃 薯脱毒种薯的生产提供必要的根底苗。
▪ 2 实验方法：单节茎段扦插〔短枝发生型〕 ▪ 3 实验原理
▪ 利用适宜的培养基，诱导带有腋芽的马铃 薯单节茎段进展芽生长和根再生形成单苗， 从而到达快速繁殖的目的。
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马铃薯脱毒试管苗快繁技术
马铃薯是我国重要的经济作物之一，但是也受到各种病毒的威胁，其中普通马铃薯Y 病毒和葡萄叶病毒对产量和品质的影响尤为严重。
因此，马铃薯脱毒试管苗快繁技术应运而生，成为解决马铃薯病毒问题的有效途径。
马铃薯脱毒技术主要应用于普通马铃薯Y病毒、葡萄叶病毒、马铃薯卷叶病毒和马铃薯花叶病毒等病毒的控制。
试管苗快繁技术是指将受病毒侵染的母株去除外在病毒污染，通过组织培养技术培养出无病毒的试管苗，再进行大规模繁殖。
该技术有以下优点：
一、保证马铃薯品种的纯度和优质性
马铃薯试管苗快繁技术可以去除试管苗体内外病毒，降低病毒对马铃薯产量和品质的影响，保证马铃薯品种的纯度和优质性。
二、促进马铃薯种薯产业的发展和壮大
马铃薯试管苗快繁技术可以大规模繁殖马铃薯健康种苗，提高种薯产量和品质，促进马铃薯种薯产业的发展和壮大。
三、降低耕地污染和农业用药量
马铃薯试管苗快繁技术可以去除病毒，降低马铃薯的病害发生率，从而减少对土壤和水的污染，降低农业用药量，保护生态环境。
四、提高农民收益
马铃薯试管苗快繁技术可以提高马铃薯产量和品质，增加农民的收益，改善农民的生活水平。
一、选择底薯并进行消毒。
选用优质种薯作为材料，切割成小块，进行消毒处理，去除外在污染细菌。
二、组织培养获得试管苗。
采取组织培养技术，将马铃薯底薯比如去除病毒后得到的组织块，放在含有营养物质的试管中，在适宜的温度、光照和湿度下培养，最终获得无病毒的马铃薯试管苗。
三、快速繁殖无病毒试管苗。
将无病毒马铃薯试管苗通过快繁技术进行扩繁，获得大量无病毒的马铃薯试管苗，再进行与土壤直接接触的育苗培育。
四、田间移栽。
无病毒的马铃薯试管苗经过特殊处理后，移栽到田间进行培育，获得无病毒的马铃薯种质资源。
总之，马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一项有效的马铃薯病毒控制技术，可以保证马铃薯种质资源的纯度和优质性，为马铃薯种薯产业的发展和壮大提供了有力支撑，也对保护生态环境和提高农民收益具有重要意义。