薄层色谱层析操作规程
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
薄层色谱层析操作规程
薄层色谱(TLC)是一种基于物质在液态或液固两相上的分配行为而进行的色谱分析方法。
它主要用于快速检测物质的分离纯化、成分分析和化学反应进程监测等方面。
下面是薄层色谱层析操作规程:
1. 准备工作:
- 检查所使用的薄层色谱板,确保其没有破损或污染。
- 准备合适的展开室和展开剂,一般常用的展开剂有:正己烷/乙酸乙酯(4:1)、己烷/醋酸乙酯(3:1)等。
- 预先准备好试样和标准品溶液,并标记清楚。
2. 样品的准备:
- 根据需要,选择适当的试样溶剂将需要进行分析的样品溶解。
确保试样之间的溶解度保持一致。
- 如果有需要,可以进行样品的预处理,如提取、浓缩或分离纯化等。
3. 样品的上样:
- 在薄层色谱板的底端绘制一条基线,用铅笔或者铅笔描红的方式标记。
- 在基线上标记好样品的位置,并用微量注射器或者吸嘴均匀地将样品滴在相应的位置上。
一般上样量控制在1-5微升之间。
4. 开展过程:
- 将涂有样品的薄层色谱板放入展开室中,注意不要让样品滴过基线。
- 加入展开剂混合溶液至展开室中,确保液位超过薄层色谱板的底端。
展开室的盖子上开一个小缝隙,以防止气体积聚。
5. 色谱板的检测:
- 根据需要,可以将薄层色谱板放在紫外灯下照射,观察化合物的荧光情况。
- 可以将薄层色谱板放在显色剂的气氛中,显色剂可以是碘酒、鲭鱼抽提液等。
注意控制显色时间和显色剂的浓度。
6. 结果分析:
- 在色谱板上观察到的斑点(Spot)数量、颜色和位置可以提供样品中化合物的分离情况。
- 对照标准品进行比对,根据斑点的颜色、距离和形状,可以确定分析物质的成分和浓度。
7. 记录和报告:
- 将实验结果记录在实验笔记本中,包括样品的标记、色谱展开室的条件、显色剂的使用和结果的观察等。
- 根据结果,撰写实验报告,并附上所使用的薄层色谱板的照片。
总结:薄层色谱层析操作规程主要包括准备工作、样品的准备、样品的上样、开展过程、色谱板的检测、结果
分析、记录和报告等步骤。
正确的操作规程可以提高实验的准确性和可靠性,为进一步的分析工作提供参考依据。