试管婴儿胚胎培养液
移植前胚胎培养液IL-8在评价胚胎质量和妊娠结局中的价值
移植前胚胎培养液IL-8在评价胚胎质量和妊娠结局中的价值黄官友;龙爱专;赵淑云;周桦;杨朝;田维婷【摘要】目的:探讨移植前人胚胎培养液中白细胞介素-8(IL-8)在评价胚胎质量和妊娠结局中的价值。
方法:选取330例行体外受精-胚胎移植(IVF/ICSI)前胚胎培养液标本作为研究组,再将研究组分为IL-8阳性组(IL-8〉0.19 ng/L)和IL-8阴性组(IL-8≤0.19 ng/L);另选9例没有放置胚胎的培养液作为阴性对照;采用液相芯片高通量蛋白质分析技术(LHTPA)测定培养液中IL-8含量,比较阴性对照组、IL-8阳性组和IL-8阴性组移植前人胚胎培养液中IL-8水平,比较IL-8阳性组和IL-8阴性组孕妇的年龄、不孕时间、病因(原发不孕、继发不孕及输卵管因素)、胚胎移植周期数、获卵数、移植胚胎数及妊娠期失访率,比较普通胚胎和优质胚胎移植组被检者移植前胚胎培养液中IL-8阳性和阴性构成及妊娠率,比较IL-8阳性组和IL-8阴性组妊娠率、临床妊娠率、种植率、生化妊娠率、流产率、活产率及活婴出生例数与接受胚胎移植患者总例数比值(NLBPP)。
结果:研究组IL-8的阳性率为32.42%,IL-8阳性组中IL-8水平高于阴性对照组和IL-8阴性组(P 〈0.05);IL-8阳性组和IL-8阴性组被检者的年龄、不孕时间、病因(原发不孕和继发不孕)、胚胎移植周期数、注射HCG日的子宫内膜厚度、获卵数、移植胚胎数和妊娠期失访率比较,差异均无统计学意义(P〉0.05);IL-8阳性组和IL-8阴性组移植优质或普通胚胎构成比比较,差异无统计学意义(P=0.76);IL-8阳性组移植优质胚胎的妊娠率高于IL-8阴性组(P=0.02),而移植普通胚胎的妊娠率,差异无统计学意义(P=0.82),IL-8阳性组患者妊娠率、胚胎种植率显著高于IL-8阴性组(P〈0.05);其余指标比较差异无统计学意义(P≥0.05)。
胚胎培养液
胚胎培养液胚胎培养液的主要成分包括:水、离子、能量物质、氨基酸、维生素、核酸前体、蛋白质、生长因子激素、缓冲系统及气体,都有商品化现成的培养液可供购买。
水是组成任何培养液的主要成分,在IVF实验室,一般使用Milipore-Q系统产生无致热原的高质量的水( Mii-o)准备培养液及洗涤所有玻璃制品及设备。
目前我们对离子在种植前的作用了解很少,因为在培养液中有许多复杂的相互作用,很难了解一种离子的单独作用。
哺乳动物的输卵管液的特征是高钾和高氯化物浓度。
Roblero等报告高钾有利于精子获能和胚胎发育,培养液中离子的最大作用是控制培养液的渗透压,而渗透压对于人的胚胎发育是很重要的。
种植前胚胎的营养物质包括丙酮酸、乳酸和葡萄糖,胚胎从2细胞发育至囊胚期的各个阶段所需要的各种营养物质的浓度是不同的。
氨基酸在种植前和种植期间对于哺乳动物的发育有生理作用,Hardy和Gardner等观察到在培养液中加入氨基酸可加速小鼠和金黄地鼠胚胎的发育。
人IVF中最常用的蛋白质的来源是血清,一般浓度为5%~10%。
蛋白质在胚胎培养液中的作用不仅仅是固定的氮的来源,并可作为有害金属离子的整合物。
但Caro等发现人胚胎在含有或不含有母亲血清的T6培养液中培养,其受精率、胚胎分裂率和妊娠率无明显差异。
大多数胚胎培养液利用碳酸氢盐/二氧化碳作为缓冲系统以维持培养液的生理pH值为7.2—7.4,这是哺乳动物细胞周围液体的生理性缓冲液。
其缺点是若培养液暴露在空气中时间过长,pH值迅速增加可引起胚胎损伤或坏死。
在培养液上覆盖一层油可减慢培养液中的气体交换。
磷酸盐( HERPES)作为缓冲系统可不需要二氧化碳内环境维持其在空气中的pH 值。
胚胎培养液中的两种气体是氧和二氧化碳,二氧化碳不仅维持碳酸氢盐缓冲液的pH值,还可使种植前各个阶段的小鼠胚胎与蛋白质和核酸结合。
大多数IVF中心应用5%的二氧化碳。
许多作者证明,在培养液中将氧的水平减低至5%~7%时,与空气中20%的氧相比对胚胎发育更有利。
胚胎培养液中人绒毛膜促性腺激素水平与胚胎发育潜能的关系探讨
胚胎培养液中人绒毛膜促性腺激素水平与胚胎发育潜能的关系探讨李汝斐;李柳铭;吴洪波【摘要】目的:探讨D3胚胎培养液中人绒毛膜促性腺激素水平与胚胎发育潜能的关系.方法:应用酶联免疫吸附试验法测定体外受精胚胎移植助孕患者D3培养液中hCG水平,比较不同胚胎质量间胚胎培养中hCG水平的差异,并比较妊娠组与未妊娠组、不同种植率组间移植胚胎培养液中hCG水平.结果:D3胚胎培养液中hCG 水平与胚胎卵裂球数目、分级无相关性(P>0.05);妊娠组移植胚胎培养液中hCG 水平高于未妊娠组[(1.14±0.10)IU/L与(1.09±0.04)IU/L,(P<0.05)];胚胎种植率分别为0%、50%、100%对应组的胚胎培养液中hCG水平为(1.09±0.04),(1.11±0.07),(1.29±0.05)IU/L,差异具有统计学意义(P <0.01).结论:胚胎培养液中hCG水平可以作为筛选胚胎、预测胚胎发育潜能的一个指标.【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2014(031)003【总页数】3页(P440-442)【关键词】胚胎培养液;人绒毛膜促性腺激素;体外受精-胚胎移植;胚胎发育潜能【作者】李汝斐;李柳铭;吴洪波【作者单位】广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心南宁530021;广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心南宁530021;广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心南宁530021【正文语种】中文【中图分类】R711.6对于接受体外受精—胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕患者,胚胎移植后能否获得成功妊娠取决于诸多因素,包括胚胎质量、子宫内膜容受性、母—胎间的相互识别、免疫耐受和血液营养供应等[1]。
目前卵子成熟度、胚胎质量主要通过形态学来评估,而临床上常遇到移植日会有数个胚胎质量评分相同的胚胎,且移植多个胚胎可能导致多胎妊娠,此时能否根据另一无创性参数评选出更具发育潜能的胚胎成为众多研究者关注的热点。
试管婴儿胚胎培养液对宝宝有什么影响
试管婴儿胚胎培养液对宝宝有什么影响孩子是父母爱情的结晶,使人类的生命得以延续。
然而在现实生活中,有不少夫妻因种种原因不能正常孕育宝宝。
不过,试管婴儿技术的问世,让不孕不育患者燃起了希望的火光。
但与此同时,很多人也担心,试管婴儿会比自然受孕出生的宝宝长大后是否存在某些健康隐患等问题。
相关专家介绍自人类辅助生殖技术问世以来,现已广泛应用于不孕不育患者的治疗,是一项日趋成熟的技术,给越来越多的不孕症患者带来了福音。
但近年来,全球更多的学者以及不孕症夫妇对人类辅助生殖技术的安全性问题倍加关注。
试管婴儿出生的宝宝和自然怀孕后出生的宝宝一样吗?他们的身高、体重、发育会有不一样吗?越来越多的学者对这项技术的各个环节进行了安全性评估,今天让我们来告诉你胚胎体外培养液是否会影响试管婴儿的出生体重。
在试管婴儿的治疗过程中,医生在B超引导下完成取卵,取出的luan*子经过分离、清洗等处理后,就要被转移到提前平衡好的培养液里,再放入温度、湿度、气体条件相对恒定的培养箱里静静地等待和精子的相会。
一旦精卵结合成功受精,受精后的胚胎将继续在培养液中发育。
因此,我们常说培养液是试管婴儿在体外培养的最早也是最重要的“摇篮”。
正是因为培养液和luan*子、胚胎或者囊胚的这种“亲密接触”,培养液的每一个参数都非常重要,如酸碱值、渗透压、营养成份、能量物质等等。
胚胎发育过程中每一个环节都可能会影响到胚胎的质量和发育潜能。
首先,让我们来了解一下培养液的成份。
一般来说,人胚胎培养液主要包括:水、盐类、能量物质、氨基酸、维生素、蛋白质、等,这些成份模拟了正常女性体内胚胎发育的内环境。
每种成份都有自己重要的功能:(1)培养液中盐类的最大作用是控制培养液的渗透压,这对于人胚胎的发育是很重要的。
哺乳动物的输卵管液特征是高钠和高钾,如高钠和高钾有利于精子获能、精卵结合、促进胚胎发育。
(2)各种营养物质为胚胎的早期发育提供了能量需求,如种植前胚胎的营养物质包括丙酮酸、乳酸和葡萄糖,不仅如此胚胎从二细胞发育至囊胚期的各个阶段所需要的各种营养物质的浓度也是不同的,因此我们也会根据胚胎发育的不同阶段来调整培养液中对应营养物质的含量。
胚胎培养的操作步骤
胚胎培养的操作步骤一、获取胚胎在胚胎培养过程中,首先需要获取胚胎。
这一步骤通常在试管婴儿程序中进行,通过超排卵和人工受精等方法获取胚胎。
二、胚胎质量检查在获取胚胎后,需要对胚胎进行质量检查。
通过显微镜观察胚胎的形态和发育情况,评估胚胎的等级和发育潜力。
这一步骤有助于选择优质的胚胎进行培养。
三、胚胎培养液准备为了提供胚胎生长所需的营养物质,需要准备适当的胚胎培养液。
根据胚胎的发育阶段和实验需求,可以选择不同的培养液配方。
确保培养液的清洁度和适宜的温度,以维持胚胎的正常生长。
四、胚胎移植将经过质量检查的胚胎转移到准备好的培养液中,进行进一步的体外培养。
在这一步骤中,要确保胚胎在适宜的环境中顺利生长。
五、培养环境控制胚胎培养的环境对胚胎的生长至关重要。
控制培养室的温度、湿度、气体浓度等参数,确保环境条件适宜胚胎发育。
定期监测和记录环境数据,确保胚胎生长环境的稳定性。
六、观察胚胎发育在胚胎培养过程中,需要定期观察胚胎的发育情况。
通过显微镜观察胚胎形态变化,记录胚胎生长数据,评估胚胎的健康状况。
及时发现和处理异常情况,确保胚胎正常生长。
七、胚胎移植回体当胚胎发育到一定阶段时,需要将胚胎移植回母体或代孕母亲体内。
这一步骤需要根据程序指南和伦理要求进行。
确保移植过程中的安全性和有效性,关注移植后的护理和监测工作。
八、后续护理在胚胎移植后,对母体或代孕母亲进行适当的护理和监测。
这包括提供必要的医疗支持和心理辅导,以及定期进行产前检查。
密切关注母体和胎儿的健康状况,确保妊娠过程的顺利发展。
胚胎培养液用途
胚胎培养液用途
胚胎培养液是一种用于辅助生殖技术中的妇产科和避孕器械,它能够提供胚胎所需的营养和环境。
以下是胚胎培养液的一些主要用途:
1. 在IVF(体外受精)中,胚胎培养液用于支持胚胎的正常发育。
在培养过程中,医生可以监测胚胎的发育情况,并选择最健康的胚胎进行移植,以提高妊娠成功率。
2. 胚胎培养液还可以在胚胎冷冻和胚胎植入前的基因检测中使用。
在胚胎冷冻过程中,胚胎被保存在低温下,以备将来使用。
培养液可以提供胚胎所需的保护和支持,以确保其在冷冻和解冻过程中的存活率和发育能力。
3. 除了在IVF中的应用,胚胎发育培养液还可以用于避孕器械的研发和测试。
通过在培养液中培养人工合成的胚胎模型,科研人员可以评估不同避孕器械对胚胎发育的影响,以确保其安全性和有效性。
总之,胚胎培养液在辅助生殖技术和避孕器械研发中具有重要作用,能够为胚胎提供必要的营养物质和稳定的环境,提高胚胎的存活率和发育能力。
e3胚胎培养基成分
e3胚胎培养基成分
E3胚胎培养基是一种常用的培养基,用于体外培养和发育早期胚胎。
它的成分可以根据具体实验目的和研究需求而有所不同,但通常包含以下主要成分:
盐溶液:E3胚胎培养基中的盐溶液通常包含氯化钠、氯化钾、氯化钙、磷酸二氢钠等,以提供细胞所需的离子平衡和维持渗透压。
营养物质:E3胚胎培养基中的营养物质包括葡萄糖、氨基酸、维生素和有机酸等,以提供胚胎发育所需的能量和营养物质。
血清替代物:为了避免使用动物血清,E3胚胎培养基中通常添加血清替代物,如胎牛血清替代物(FBS)或人血清白蛋白(HSA),以提供细胞所需的生长因子和蛋白质。
缓冲剂:为了维持培养基的酸碱平衡,E3胚胎培养基中通常添加缓冲剂,如HEPES(N-2-羟乙基-哌嗪-2-乙磺酸)。
需要注意的是,E3胚胎培养基的具体配方可能因研究目的、实验条件和个人偏好而有所不同。
因此,在具体实验中,建议参考相关文献或咨询实验室的专业人员,以获取最适合您实验需求的E3胚胎培养基配方。
胚胎培养液的配制方法与流程
胚胎培养液的配制方法与流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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胚胎移植液工作原理
胚胎移植液工作原理
胚胎移植液是一种辅助生殖技术,其工作原理涉及多个方面。
首先,胚胎移植液是在体外受精(IVF)过程中培育出的受精卵发育成胚胎的培养液。
在IVF过程中,女性的卵子和男性的精子在实验室中结合,形成受精卵。
这些受精卵会在培养皿中放置,并在胚胎移植液的环境中进行培育。
其次,胚胎移植液提供了受精卵所需的营养和环境条件,以促进其正常的发育。
这种培养液中包含了各种营养物质、氨基酸、糖类和矿物质等,以满足胚胎在体外培育过程中的生长需求。
另外,胚胎移植液也提供了一种稳定的温度和PH值的环境,以模拟人体内子宫的生理条件,有利于受精卵的发育。
这种稳定的环境能够最大程度地模拟母体子宫内的生理条件,提供了一个适宜的生长环境,有助于受精卵的发育和成熟。
总的来说,胚胎移植液通过提供营养物质和稳定的生长环境,促进受精卵在体外培育过程中的正常发育。
这样,培育出的胚胎可以在一定程度上模拟自然受孕的过程,为后续的胚胎移植和妊娠奠定基础。
值得注意的是,胚胎移植液的配方和使用方法会根据不同
的实验室和医疗机构有所差异,因此在具体使用时需要遵循医生的建议和指导。
胚胎培养液对新生儿出生体重及身长的影响
胚胎培养液对新生儿出生体重及身长的影响目的探索体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)新鲜分裂期胚胎移植周期中不同商品化胚胎培养液(Cook、Vitrolife)对新生儿出生体重及身长的影响。
方法回顾性分析2014年8月~2015年12月于南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心行IVF/ICSI术移植双分裂期胚胎成功分娩的1441例患者临床资料。
根据分娩胎数和胚胎培养液不同进行分组,单胎周期和双胎周期分别分为Cook组和Vitrolife组。
分别比较单胎组和双胎组中两种培养液培养后新生儿的出生体重和身长。
结果单胎组中,Cook组新生儿出生体重及身长较Vitrolife组差异无统计学意义(P > 0.05);双胎组中,Cook组新生儿出生体重及身长较Vitrolife组差异无统计学意义(P > 0.05)。
结论两种商品化胚胎培养液(Cook、Vitrolife)在IVF/ICSI新鲜分裂期胚胎移植周期中对新生儿出生体重和身长无显著性影响。
[Abstract] Objective To investigate the effect of two commercial embryo culture media (Cook,Vitrolife)on the birthweight and length of newborns after fresh embryo transfer in IVF/ICSI. Methods The data of 1441 patients conceived through IVF/ICSI in Reproductive Medicine Center,the Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School from August 2014 to December 2015 were analyzed retrospectively. According to the fetal number and embryo culture media,these patients were divided into two groups:singletons group and twins group,both the two groups included Cook and Vitrolife subgroups. The birthweight and length of newborns were compared in singletons and twins groups. Results There were no significant differences in birthweight and length of the newborns between the Cook and Vitrolife subgroups in singletons group (P > 0.05);while there were no significant differences in birthweight and length between the Cook and Vitrolife subgroups in twins group (P > 0.05). Conclusion It can be concluded that embryos cultured in Cook and Vitrolife media after fresh cleavage embryo transfer do not affect the birthweight and length of newborns.[Key words] IVF;Embryo culture medium;Birthweight;Length隨着质量控制体系的逐步完善,商品化胚胎培养液逐步应用于人类胚胎,例如Vitrolife、G5、Cook、HTF和Quinn′s advantage[1-2]。
(三)早期胚胎的体外培养(IVC)1、培养液基本成分主要
透明带钻孔(Zona drilling, ZD)
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ活精子
透明带部分切口(Partial zona dissection, PZD)
卵母细胞质内注射(Intracytoplasmic sperm injection, ICSI)
这些通过对哺乳类配子进行显微操作以协助其受精的技术 称为显微受精。
精子显微注射体外受精技术
(三)早期胚胎的体外培养(IVC)
1、培养液:基本成分主要包括无机盐、氨基酸、维生 素、碳水化合物和蛋白质等。
2、胚胎体外培养系统:常规培养系统、输卵管离体培 养系统、与体细胞共培养系统。
3.培养方法:卵子在受精24h后,转移到预先制备好 的颗粒单层中继续培养。一般使用微滴培养法。
4、培养的温度和气相环境:和卵母细胞成熟的条件一 样。
•
③各种体细胞:如胎儿成纤维细胞,乳腺细
胞,皮肤细胞(耳、成体、胎儿),肌肉细胞,卵丘
细胞,内脏细胞(肝、脾、心、肺、肠、舌);
•
④生殖系列细胞:PGCs、精母细胞、足细
胞和精巢细胞。
• 核受体: ①去核卵母细胞;
•
②去核合子;
•
③去核2-细胞期胚胎的卵裂球。
(一)动物克隆研究的历史和现状
体细胞克隆首例
Intracytoplasmic Sperm Injection: ICSI
显微受精技术在动物受精和发育机理研究、畜牧业生产及人医 临床实践中有着广阔的应用前景:
➢精液的利用率可成百万倍的提高,可以使优良种公畜
得到最充分的应用;
➢精子的保存技术将大为简化,将来或许只要精子核物
质完整就可以达到受精的目的,这对世界珍稀动物资 源的保护将产生深远的影响;
胚胎培养液成分
胚胎培养液成分
胚胎培养液是用于人类或动物胚胎体外培育的一种液体营养物质,并包含了多种成分以支持胚胎的生长和发育。
以下是常见的胚胎培养液成分:
1. 氨基酸:胚胎需要氨基酸来合成蛋白质和细胞组分。
2. 葡萄糖:是胚胎的主要能量来源,有助于促进细胞分裂和发育。
3. 矿物质和微量元素:包括钙、镁、锌、铜等。
这些元素对于胚胎发育和细胞分裂过程中的酶催化有重要作用。
4. 维生素:胚胎需要维生素来支持其发育进程,例如维生素C 有助于抑制自由基的生成。
5. 氧气:胚胎需要充足的氧气来支持其能量代谢和细胞分裂。
6. 胎牛血清:在某些胚胎培养液中添加胎牛血清可以提供胚胎所需的生长因子和促进胚胎发育的物质。
总之,胚胎培养液是一个复杂的混合物,由多种成分组成,旨在支持胚胎的生长和发育。
不同类型的胚胎培养液可能具有不同的成分组合,以适应不同类型的胚胎培养需求。
- 1 -。
胚胎培养液:HEPES-TALP培养液解决方案
胚胎培养液:HEPES-TALP培养液解决方案
胚胎培养液分为复杂的和化学成分明确的培养液两大类。
复杂培养液中的成分很多,除无机和有机盐外,还添加维生素、氨基酸、核苷酸和嘌呤等营养成分和血清。
常用的胚胎培养基有M199、KSOM和F10,用它们培养胚胎时,可以采用体细胞共培养体系,即体细胞与胚胎在微滴中共同培养,利用体细胞生长过程中分泌的有益因子,促进胚胎发育,克服发育阻断。
HEPES-TALP培养液——HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。
其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值.在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中.大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色.。
辅助生殖用培养液技术要求
辅助生殖用培养液技术要求随着科技的不断发展,辅助生殖技术已经成为解决不孕不育问题的有效手段之一。
而辅助生殖用培养液作为其中的重要组成部分,对于培养和保护胚胎发育起着至关重要的作用。
本文将就辅助生殖用培养液的技术要求进行探讨。
辅助生殖用培养液的基本要求是能够提供胚胎生长所需的营养物质和环境。
培养液中需要包含适量的氨基酸、糖类、脂类、维生素和无机盐等营养物质,以满足胚胎发育所需的能量和物质。
此外,培养液还应该具备维持适宜的温度、pH值和氧气浓度等环境条件的能力,以保证胚胎在培养过程中的生长和发育。
辅助生殖用培养液的无菌性要求非常高。
胚胎在培养液中的生长发育过程是一个极其微妙的过程,任何微小的污染物都可能对胚胎的发育产生不利影响。
因此,辅助生殖用培养液的制备过程必须严格控制,保证其无菌性,避免任何可能的污染。
辅助生殖用培养液的稳定性也是一个重要的技术要求。
由于胚胎的发育是一个时间较长的过程,因此培养液需要具备长时间的稳定性,以保证胚胎在整个培养过程中能够得到持续的营养和保护。
在辅助生殖用培养液的技术要求中,还有一个重要的方面是对于培养液成分的优化。
科学家们通过研究不同的培养液配方,不断优化培养液的成分,以提高胚胎的存活率和发育质量。
例如,一些研究表明,添加一定浓度的胎牛血清可以提高胚胎的存活率和发育能力。
而其他研究则发现,添加适量的维生素C和E可以减少胚胎的氧化应激,提高胚胎的发育质量。
因此,对于辅助生殖用培养液的优化研究,将会为辅助生殖技术的发展带来更多的机会和挑战。
总结起来,辅助生殖用培养液技术要求是非常严苛的。
它需要满足营养物质和环境条件的要求,具备无菌性,保持稳定性,并且不断优化其成分。
只有通过不断的研究和技术创新,才能够为辅助生殖技术的发展提供更好的支持和保障。
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试管婴儿胚胎培养液
试管婴儿胚胎培养液是在做试管婴儿过程中必不可少的重要的物质。
这是一段非常“幸福”的过程。
试管婴儿进行到受精的时候,精卵在体外结合形成受精卵,然后就会将受精卵放置在培养液中进行培养,这样做是为了模拟子宫环境,使得胚胎得到最好的发育。
那么。
我们通常使用到的培养液有哪些呢?“滔滔顾问”来为我们一一列举出来:
第一种,Isolate梯度分析液。
包括Lower Layer高密度分析液和Upper Layer低密度分离液,用于精子分离。
第二种,IVF30。
用于受精、体外培养、胚胎移植和精子洗涤等。
第三种,Gamete30。
主要用于精子洗涤。
卵子清洗、ICSI操作等。
第四种,透明质酸酶。
主要用于去除颗粒细胞。
第五种,PVP液。
用于ICSI时精子制动。
第六种,卵泡冲洗液。
ASP、PBS。
第七种,组织培养油。
OVOIL,用于覆盖培养液。
第八种,囊胚培养液。
G2,用于囊胚培养期胚胎的培养与移植,使用时需加外源性蛋白(如HSA)。
取卵前一日下午准备取卵要使用的液体(也即准备培养液)过程:
第一步,查看卵细胞数和E2值,估计培养皿数目并进行准备。
第二步,准备培养液。
第三步,卵泡冲洗液:ASP或PBS。
第四步,OCCC清洗液:每个3001培养皿中加入2.5ml Gamete30。
第五步,洗精液:每个患者准备4mlIVF30。
第六步,受精液:四孔培养皿中每孔加入100μl IVF30培养液,并在上面覆盖0.8ml 组织培养液,置于二氧化碳培养箱中平衡过夜。
用于卵母细胞的培养及受精。
第七步,将足够次日用的培养液放入培养箱。
准备培养液的注意事项:
1、必须在专用的超净工作台内准备液体。
2、使用无菌操作技术。
3、准备以上培养液时应尽快,减少开封的培养液在培养箱外的时间。
4、加液体时,不能碰孔边,避免气泡。
5、仔细检查液体,确保其被组织培养油完全覆盖。
6 将培养皿放入培养箱时按先后顺序放置,以方第二天使用,避免拿错。