人胚胎心肌组织发育过程中Cx43和Bcl_2蛋白表达的研究
CD34、Bcl-2在早期心肌缺血再灌注损伤的表达及相关性研究的开题报告
CD34、Bcl-2在早期心肌缺血再灌注损伤的表达及
相关性研究的开题报告
摘要：
心肌缺血再灌注损伤是心肌梗死治疗中难以避免的副作用之一，导
致心肌细胞死亡和功能受损。
CD34和Bcl-2分别是干细胞和凋亡相关蛋白，这两个蛋白在心肌缺血再灌注损伤中的表达及其相关性还不清楚，
本研究旨在探讨两者的表达及其关系。
研究方法：
通过使用动物模型，在心肌缺血再灌注损伤的早期（24h）和晚期（72h）分别采集心肌组织，使用免疫组织化学方法检测CD34和Bcl-2
在心肌细胞中的表达情况。
使用统计学方法分析两者的相关性。
预期结果：
预计在心肌缺血再灌注损伤的早期和晚期，CD34和Bcl-2在心肌细
胞中的表达均会发生变化，但变化的程度和方向有待进一步研究。
同时，预计在心肌缺血再灌注损伤早期，CD34和Bcl-2表达之间存在一定的相
关性。
研究意义：
心肌缺血再灌注损伤是严重的心脏疾病，研究其发病机制和治疗方
法具有重要意义。
本研究的结果有望为心肌缺血再灌注损伤的预防和治
疗提供新的思路和方法。
Cx43基因敲除胎鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的关键基因
Cx43基因敲除胎鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的关键基因陈伟呈;张颖;黄国英【摘要】目的研究Cx43基因纯合敲除(Cx43-/-)小鼠胚胎心脏近端流出道组织中基因表达谱的改变,筛选可能导致Cx43-/-小鼠流出道梗阻的关键基因.方法以胎龄(embryonic day,ED)14.5的Cx43-/-和野生型(Cx43+/+)鼠胚心脏近端流出道部分为研究对象,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,并在体外转录为cRNA,同时进行生物素标记及片段化,再与Affymetrix-430 2.0基因芯片进行杂交.杂交信号经扫描后,应用相关生物信息软件分析基因表达情况.结果与Cx43+/+组相比,Cx43-/-组中表达上调2倍以上的基因共有143个,表达下调2倍以上的基因有235个.其中表达差异的基因参与转录调控、细胞周期、细胞黏附、细胞活动和细胞骨架的信号通路等主要生理过程.进一步筛查表达差异1.5倍以上的基因发现,与圆锥动脉干畸形相关的TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因在Cx43-/-组有明显变化.对这些基因进行荧光定量PCR验证,结果与基因芯片一致(P<0.05).结论利用基因芯片技术初步筛选出与Cx43-/-鼠胚心脏近端流出道发育有关的多个基因,并经荧光定量PCR验证.其中TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因可能与Cx43-/-小鼠流出道梗阻的发生有关.【期刊名称】《复旦学报（医学版）》【年(卷),期】2010(037)001【总页数】7页(P52-58)【关键词】心脏发育;Cx43;基因芯片;TGFβ;BMP;Ssr1;Ptk2;信号通路;小鼠【作者】陈伟呈;张颖;黄国英【作者单位】复旦大学附属儿科医院心血管中心,上海,201102;复旦大学附属儿科医院心血管中心,上海,201102;复旦大学附属儿科医院心血管中心,上海,201102【正文语种】中文【中图分类】R394.1先天性心脏病(先心病)在新生婴儿中的发病率约6‰～10‰,其中心脏圆锥动脉干畸形(conotruncal defects,CTD)约占33%～38%,包括法洛四联症、大动脉转位、右室双出口、肺动脉闭锁和动脉单干等。
急性白血病患者骨髓组织血管新生与Bcl-2蛋白关系的研究的开题报告
急性白血病患者骨髓组织血管新生与Bcl-2蛋白关系的研
究的开题报告
研究背景
急性白血病是一种起源于造血干细胞的恶性血液病。
病程急骤，进展快，对患者生命威胁较大。
当前治疗方法包括化疗、放疗和造血干细胞移植等，然而有效率较低，不良反应及复发率高，因此需寻求新的治疗方法。
近年来，研究发现急性白血病患者骨髓组织中存在着大量的新生血管，与疾病的发展及恶性程度有着密切关系。
Bcl-2蛋白为一种重要的抗凋亡分子，在多种肿瘤的发生和发展中发挥着重要的作用。
然而，关于Bcl-2蛋白在急性白血病患者骨髓组织中与血管新生的关系尚需更深入的研究。
研究目的
本研究旨在明确Bcl-2蛋白在急性白血病患者骨髓组织中是否与血管新生存在关联，并探究其可能的分子机制，为研究急性白血病的发生机理、诊断与治疗提供理论
依据，为临床治疗提供新的靶点和方法。
研究内容
1.采用组织学及免疫荧光技术检测急性白血病患者骨髓组织中的血管新生情况和Bcl-2蛋白表达情况。
2.通过统计分析，评估Bcl-2蛋白表达水平与血管新生的关系。
3.建立异体移植模型，在模型体内检测Bcl-2蛋白表达情况、血管新生情况及其
他相关指标的变化情况，并观察治疗效果。
预期结果
我们预期通过本研究可以明确Bcl-2蛋白在急性白血病患者骨髓组织中是否与血
管新生存在关联，初步探究其分子机理，并为疾病发生和发展提供一些更深入的认识。
同时，本研究还将为肿瘤治疗提供新的思路和策略，为临床治疗提供新的方法和理论
依据。
C-myc、Bcl-2基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义
-632-Joumai l Clinicai arn Expedmenal Menmiae Vol.29,No.6Maa2701并诱导肿瘤血管新生，以确保肿瘤组织适应缺氧环境[5]。
血管新生是乳腺癌迁移、扩散的重要病理基础，但乳腺癌血管新生涉及机制复杂[7]。
本研究的优势在于探讨了乳腺癌血管新生的又一机制，发现HPSE、HP-la表达上调是乳腺癌组织MVD计数增高的重要原因，临床或可通过靶向干预该两个指标来抑制乳腺癌血管新生，进而治疗本病。
本研究虽然发现该两个指标存在正向相关性，但其相互影响的机制尚无结论，这正是本研究的不足之处，也将是笔者下一步的研究方向。
9结论综上所述，乳腺癌组织HPSE、HIP-la表达上调，与患者临床病理及MVD计数有一定关系，且两者间表达呈正相关。
参考文献[1]刘宇琼，李娜，黄会粉，等.HP-2a对乳腺癌干细胞生物学特性的影响[]中华医学杂志，2218,93(4):269-273.[4]Liang GH,Lin ZH,Tan LY,et al.HILI a-associateh cinDENND4CPromotes ProliTration of Breast Cancer Cells in Hypoxic Euvironmext [].Anticaucos Roz:2217,57(3):4357-4345.[]Lin MM,Liang YR,Zhu ZZ,et al.Discoven of Novel Apl Car/oxam-ido Derivatives as Hypoxia-Inducible Factor la Signaling Inhibitors with Potent Activities of Anticaucos Metastasis[J].J Meh Chem,296, 92(22):9299-9514.[4]Badurajeoa CP,Modao CD,Ranvappa S,et al.Ikextificat/p of NovelClass of T/azolc-Thiadiazoloz as Potent Inhibitors of Human Heparv-naso and Oeis Anticaucos Activity[J].BMC Cancer；2917,17( 1)：435.[5]Spyron A,Kundu S,Haseeh L,et al.IndTition of Heparanaso in Peh/atric Brain Tumor Cells Attexuatos their ProliTration,Invasive Capaci-/,and In VTe Tumor Growth[J].Mol Cancer Thor,2217,6(3)：1775-1712.[]彭大颖,姜丽红,吴迪.乙酰肝素酶mRNA及CD34在乳腺癌组织中的表达与病理特征及MVD的关系研究[]•癌症进展,2217,6(11):1325-1327．[7]Devi U,Singh M,Roy S,et al.PHD-4activation:a novel stratep tocontrol HP-la and miTchcxUPai stress to modulate mammap gland patUoyPysiolop in ER+suUtypo[J].Naunyy SchmieXeXenz AnhPhaniacoi,2219,394(6):1039-1256.[3]Stone JK,Kim JH,VuUadid L,et al.Hypoxia inkucoz cancer cell-speci/c chromatin interactions and increases MALAT1expression in b/ah cancer cells[J].J Biol Chem,226,294(29)：11215-11220.[]潘永杰,庞文会,孙彦,等.乙酰肝素酶和D0-42在儿童甲状腺癌中的表达及临床意义[]•山东大学耳鼻喉眼学报,2217,51(9):29-34.[12]Zhang Y,Zhang GL,Suu X,et al.GuUexyilid II Inhibits Breast TumorGrowth and Metastasis Associateh with Decmaseh Heparanaso Expression and PhosphopOt/y of ERK and AKT Pathways[J].Molecules: 2217,20(5):737.[1]Morot b M,Bridges E,Val l i A,et al.Hypoxia-inUuceX soitch6-SNAT4/SLC33A9mvuOt/n gexeratoz exkocriuo resistance6-breast caucer[J].Pre Nat Acad SO USA,226,16(25)：6054-12091.[10]刘艳秋，解长银,王志伟，等.糖尿病合并冠心病患者血清乙酰肝素酶水平变化及意义[]重庆医学,2217,49(5)：379-372 [3]Wei RR,Suu DN,Yang H,et al.CTC clusters inUuceX bp hepapnaseexUaucc breast cancer metastasis[J].Acta Pha/nacol Sin,2918,39(3):1549-1557.[10]Lang T,Ran W,Dong XY,et al.Tumor Cells-Selective Bionic Nanodevice Exploiting Heparanaso Combats Me/static Breast Cancer[J].Aka Funct Matos,2218,23(17)：627239.[15]邵为,林涛，仲海燕,等.缺氧微环境对乳腺癌骨转移机制的研究进展[]•医学研究杂志,226,43(5):19-12,54.[6]Ll HM,Miao J,Zhu ML,et al.Bishonodiol A inhibits breast cancercell invasion and migration bp suppnssTa hypoxia TUucTie factor-la [J].J Bioexerg Biomembs,226,51(5):439-K.[7]边青召,李镇伽,崔海滨.高压氧降低缺氧诱导因子-la的表达抑制乳腺癌MCF-7细胞转移的研究[].中华航海医学与高气压医学杂志,2218,25(4)：225-032.[3]潘国友,董康迪,谢德天,等.miR-357-3p对胃癌细胞SGC7791中HPSE表达的调控及其对细胞增殖的影响[]•中国现代普通外科进展,226,20(4):259-291,295.[6]Yang H,Geng YH,Wang P,et al.Extracellular ATP promotoz breastcancer invasion and epithelial-mesenchymal Pansition via hypoxia-in-kucibio factor4a signaling[J].Cancer SO,226,16(3)：2059-2077.[22]黄玉钿,郑曦,吴钦穗,等.缺氧诱导因子-la与非特殊型浸润性乳腺癌分子分型及血管生成的关系分析[]•中国免疫学杂志, 226,35(11):1551-1337.(收稿日期：2229-11-23)DOI：10.3969/j.issu.1671-4999.0091.02.029文章编号：1071-4999（2991）02-0232-09C-myc、Bet-2基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义吴亮刘香杨辉[南方医科大学顺德医院（佛山市顺德区第一人民医院）血液内科广东佛山525300]【摘要】目的探讨B细胞淋巴瘤-2基因（Bel-2）、原癌基因C-myo在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中的表达及其临床意义。
心脏性猝死病人心肌组织CX43和CX40的表达
心脏性猝死病人心肌组织CX43和CX40的表达心脏性猝死是一种突然死亡的疾病，多半发生在心血管疾病患者中。
近年来，研究发现心肌细胞之间的连接蛋白对心肌组织的稳定性具有重要影响。
其中，Cx43和Cx40是两种主要的连接蛋白，对心肌细胞之间的传导和相互作用都具有重要作用。
本文将主要探讨CX43和CX40在心脏性猝死病人的心肌组织中的表达情况。
CX43的表达情况Cx43是一种介导心肌细胞之间紧密连接的蛋白，是心肌组织中最主要的一种连接蛋白。
其在心肌组织中的表达量对心肌细胞之间的传导和相互作用具有重要影响。
研究发现，在心脏性猝死患者的心肌组织中，Cx43的表达量普遍较低。
有研究发现，病发后6小时，心肌组织中Cx43的表达量便明显下降，此后不断降低，表明CX43的表达和疾病的发展程度存在一定联系。
理论上，Cx43的降低可能使得心肌细胞之间的传导受到影响，从而加剧了心肌细胞的损伤和病情的恶化。
因此，保持CX43的表达水平是减少心脏性猝死的有效手段之一。
CX40的表达情况Cx40是一种介导心肌细胞间窄隙功能的蛋白质，其在心肌细胞之间的相互作用中发挥重要作用。
它可能通过将心肌细胞间的信号质子通过细胞膜传导，从而影响心肌细胞的收缩和放松。
与Cx43不同的是，病人心肌组织中Cx40的表达情况并不十分稳定，不同的研究结果也存在很大差异。
有研究表明，在猪模型中，在心脏性猝死后，Cx40的表达量不但并没有减少，反而有增加趋势。
而在其他研究中，Cx40的表达量经常因疾病而减少或增加。
因此，在心脏性猝死病人中Cx40的表达情况仍需要更多的研究来确定。
结论心肌细胞之间的连接对心脏性猝死的病情发展具有重要影响。
Cx43和Cx40是两种主要的连接蛋白，对心肌细胞之间的传导和相互作用都具有重要作用。
在心脏性猝死病人心肌组织中，Cx43的表达较低，CX40的表达则需要更多的研究来确定。
此外，保持CX43的表达水平可以减少心脏性猝死的发生，也可能成为心脏性猝死的新的治疗靶点。
新型抗凋亡Bcl-2蛋白抑制剂的设计、合成及初步活性研究
新型抗凋亡Bcl-2蛋白抑制剂的设计、合成及初步活性研究癌症已成为当代影响人类社会健康发展的重要问题。
在人类与癌症长期斗争的历程中,已发展了多种治疗方法用于临床。
其中药物疗法已成为当前临床干预、治疗癌症的主要手段之一。
分析近年来多种新型抗癌药物的作用机制,很多药物都是通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥作用的。
现代生物医学认为,细胞凋亡是机体的一种正常的生理过程,在胚胎的形成、组织内环境稳定以及去除多余或受感染细胞等过程中扮演着重要角色。
在病理条件下,细胞凋亡发生紊乱与多种疾病(癌症、自身免疫疾病、心血管疾病等)的发展进程密切相关。
细胞主要通过两条途径发生凋亡,即线粒体介导途径和死亡受体介导途径。
在线粒体介导途径中,Bcl-2蛋白家族是一类重要的调节因子。
该蛋白家族成员主要包括促凋亡蛋白(Bax、Bak、Bid等)和抗凋亡蛋白(如Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1等)两大类。
研究发现,抗凋亡Bcl-2蛋白在许多恶性肿瘤中过度表达。
例如80%的B-细胞淋巴瘤和30-60%的前列腺癌中可以发现过度表达的Bcl-2蛋白,乳腺癌和肺癌中则观察到Bcl-xL蛋白的过度表达。
因此,研究靶向针对抗凋亡Bcl-2蛋白的抑制剂,可以有效抑制抗凋亡蛋白的活性,诱导癌细胞发生细胞凋亡,从而达到治疗癌症的目的。
最近十几年中,人们报道了许多抗凋亡Bcl-2蛋白抑制剂,包括反义寡核苷酸、BH3模拟肽和小分子抑制剂。
由于前两种药物在体内递送过程中存在较多问题,因此发展高效、低毒的小分子抑制剂成为当前该类药物研发的重点。
随着现代结构生物学、计算机虚拟筛选和核磁共振等先进技术的发展,许多活性较好的抗凋亡Bcl-2蛋白抑制剂相继被报道,比如ABT-199、ABT-263、(R)-Gossypol(AT-101)、GX015-070、HA14-1等。
WL-276是2008年美国明尼苏达大学邢成国教授课题组报道的2-硫代-4-噻唑烷酮类Bcl-2蛋白抑制剂,具有骨架结构新、活性好、可以有效诱导PC-3肿瘤细胞发生凋亡等多种优点。
Cx43蛋白在病毒性心肌炎中表达变化及microRNA调控的开题报告
Cx43蛋白在病毒性心肌炎中表达变化及microRNA
调控的开题报告
导言：
病毒性心肌炎是一种由病毒引起的心脏炎症，严重的情况下可以导致心力衰竭、心跳骤停等危及生命的后果。
Cx43蛋白是一种介导心肌细胞间电信号传递的膜蛋白，其在病毒性心肌炎发病机制中的作用备受关注。
最近的研究发现，microRNA参与了Cx43蛋白的调控。
因此，本论文旨在研究Cx43蛋白在病毒性心肌炎中的表达变化及microRNA的调控作用，探究其在发病机制中的作用和潜在应用价值。
研究内容：
1. 病毒性心肌炎对Cx43蛋白表达的影响：
采用实时荧光定量PCR和免疫印迹等方法研究病毒性心肌炎模型大鼠和人类心肌细胞系中Cx43 mRNA和蛋白表达的变化情况。
2. microRNA对Cx43蛋白表达的调控作用：
通过数据库预测和文献回顾，筛选可能参与Cx43蛋白调控的microRNA，并构建荧光素酶报告载体，进行体外实验验证。
3. 病毒性心肌炎治疗中的潜在应用价值：
根据研究结果，探究Cx43蛋白和microRNA的调控机制，为病毒性心肌炎的治疗提供新的思路和方法。
结论：
本研究将对病毒性心肌炎发病机制和治疗提供新的认识和思路。
同时，通过探究Cx43蛋白和microRNA的调控机制，发现其在心血管疾病的治疗中可能具有潜在应用价值。
出生前后人心肌细胞Cx43蛋白表达
出生前后人心肌细胞Cx43蛋白表达徐振平;施相空;郭志坤;张光谋【期刊名称】《解剖科学进展》【年(卷),期】2006(12)3【摘要】目的研究胎儿和新生儿心脏不同部位心肌细胞连接蛋白43(Cx43)的表达。
方法应用SP免疫组化方法和图像处理系统,分析和比较7例胎儿和6例新生儿心脏不同腔室心肌细胞Cx43蛋白表达。
结果胎儿和新生儿心脏心房、心室、房间膈和室间膈均有Cx43蛋白表达,且胎儿和新生儿表达水平相近;Cx43的蛋白呈斑点状遍布于整个心房肌和心室肌的细胞质内和细胞膜表面,少数位于闰盘处;Cx43表达量心室肌高于心房肌。
结论:出生前后人心脏Cx43蛋白表达差异不大。
【总页数】3页(P232-233)【关键词】连接蛋白43;心肌;胎儿;新生儿【作者】徐振平;施相空;郭志坤;张光谋【作者单位】新乡医学院细胞生物学教研室;新乡市卫校解剖学教研室;新乡市卫校形态学研究室【正文语种】中文【中图分类】R322.11【相关文献】1.麝香保心丸对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大及其Cx43蛋白表达的影响 [J], 唐芬;江振涛;谭文婷;龙俊蓉;刘盛权;褚春2.丹参酚酸注射液对室间隔缺损模型家兔血清候选蛋白标志物FN及心房肌细胞Cx43蛋白的表达影响研究 [J], 潘国洪;谭秦东3.七氟醚预处理对缺血再灌注心肌细胞CX43蛋白表达的影响 [J], 章征兵;明腾;杨文萍;谢学良4.压力-应激对大鼠心肌细胞Cx43蛋白表达及心肌纤维化的影响 [J], 善孝胜; 王东; 王芳; 康万荣; 张锦5.Taxol对缺氧培养乳鼠心肌细胞Cx43蛋白表达及分布的影响 [J], 王德国;王新;王安才;朱红军;孙贤林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Bcl-2蛋白家族对卵泡和早期胚胎生长发育的调节
Bcl-2蛋白家族对卵泡和早期胚胎生长发育的调节倪永林;林少达【摘要】Bcl-2蛋白家族成员在哺乳动物卵泡和早期胚胎生长发育过程中发挥着重要的作用,该家族各成员之间,以及与其他调控蛋白之间相互作用、相互影响形成一个精密的调节网络.了解Bcl-2蛋白家族成员对卵泡和早期胚胎的调节作用可为女性生殖疾病提供基础研究方向,也可为临床诊断治疗确定分子靶点的研究提供参考依据.为此,本文对Bel-2蛋白家族3个亚家族中10种主要蛋白在调节卵泡和早期胚胎生长发育中的作用作一综述.【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2008(020)002【总页数】3页(P166-168)【关键词】Be1-2蛋白家族;卵泡;卵细胞;颗粒细胞;早期胚胎【作者】倪永林;林少达【作者单位】汕头大学医学院第一附属医院内分泌科,广东,汕头,515041;汕头大学医学院第一附属医院内分泌科,广东,汕头,515041【正文语种】中文【中图分类】R321.1目前研究已证实,哺乳动物中Bcl-2蛋白家族至少有15个成员,分为3个亚家族,每个亚家族的功能有所不同［1］：①Bcl-2亚家族：抑制细胞凋亡的发生,结构上拥有保守的BH1～BH4的结构域和跨膜区,BH1与BH2结构域是抗凋亡蛋白必备的结构域，同时在同源或异源性二聚体和离子通道的形成中发挥重要的作用，主要包括Bcl-2、Bcl-XL、Bcl-W和Mcl-1等；②Bax亚家族：促进细胞凋亡,结构上缺乏BH4结构域,只含BH1～BH3和跨膜区,包括Bax、Bak、Bok；③BH3亚家族：促进细胞凋亡,结构上仅具有1个保守的BH3同源结构域，主要包括Bad、Bim、Bid和Bik等。
现将Bcl-2蛋白家族3个亚家族中10种主要蛋白在调节卵泡和早期胚胎生长发育中的作用作一综述。
卵泡由居于中心的卵细胞和周围的颗粒细胞、卵泡膜细胞组成，发育阶段可分为：始基卵泡；初级卵泡和次级卵泡(这两个阶段可统称为窦前卵泡)；窦状卵泡；排卵前卵泡。
血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后缝隙连接蛋白Cx43表达的变化
血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后缝隙连接蛋白Cx43表达的变化【摘要】【目的】研究血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后连接蛋白43(Cx43) 表达的变化及与细胞周期分布的关系。
【方法】分离培养大鼠心肌细胞，用血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大，72h后用RT-PCR和免疫荧光方法观察心肌细胞Cx43基因和蛋白表达，用流式细胞仪测定法观察心肌细胞周期分布变化以及Cx43 表达量的关系。
【结果】血管紧张素Ⅱ处理后的心肌细胞表现细胞肥大且细胞活力增强，S 期、G2-M 期细胞百分比增加，细胞内G2-M（二倍体）DNA含量降低，Cx43 蛋白表达低于对照组，Cx43 mRNA 表达水平也较对照组明显下调，Cx43 蛋白表达下调与细胞周期分布的改变相关。
【结论】血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后Cx43基因表达明显下调，导致Cx43蛋白表达亦出现下调，这一改变可能与心肌肥大过程中的细胞周期变化有关，提示血管紧张素Ⅱ可能通过调控Cx43基因的表达而参与缝隙连接重构过程，而Cx43表达的变化可能与心肌肥大的机制有关。
【关键词】血管紧张素Ⅱ；心肌细胞肥大；连接蛋白43；缝隙连接；细胞周期[J SUN Yat-sen Univ(Med Sci)， 2007， 28(3):292-296] 心肌肥大是多种心血管疾病过程中的一个共同的病理过程，尽管心肌肥大曾被认为是心脏的一种适应性代偿反应，但目前已认识到心肌肥大(myocardial hypertrophy) 是心血管疾病中的一种独立危险因素，心肌肥大本身即明显增加心血管病死亡率，而其内在机制认为与心肌肥大所致的电生理重构有关。
目前发现细胞间缝隙连接的改变在心肌电生理重构起着重要作用。
缝隙连接蛋白43 (connexin 43， Cx43)是心肌细胞间隙连接的主要蛋白成分，该连接构成相邻细胞间亲水管道，对于细胞间信息传导，细胞的生长、分化及维持心肌节律性同步收缩有重要意义[1] 。
有学者发现心肌肥大后的心肌Cx43 表达下降[2-4] ，但也有学者报道实验性高血压引起心肌肥大时其心肌Cx43表达无改变[5]或Cx43 表达增加[8]；而对于心肌肥大过程中Cx43改变的机制以及血管紧张素Ⅱ对缝隙连接蛋白重构的影响至今还鲜见报道，我们通过本实验观察了血管紧张素Ⅱ对心肌Cx43基因和蛋白表达及细胞周期影响，探讨心肌肥大过程中Cx43的变化及血管紧张素Ⅱ对缝隙连接蛋白重构的可能作用和机制。
Bcl—2家族蛋白通过Ca2+信号通道调控细胞凋亡
Bcl—2家族蛋白通过Ca2+信号通道调控细胞凋亡Bcl-2家族蛋白是细胞凋亡过程中重要的调控因子，主要通过抑制线粒体中细胞色素c及其他介导细胞凋亡因子的释放，来抑制细胞凋亡。
除此之外，Bcl-2家族蛋白成员还可以调节内质网中Ca2+的释放，促进或抑制细胞的凋亡。
最近研究显示，Bcl-2家族蛋白与内质网（ER）中1，4，5 - 三磷酸肌醇（IP3）受体相互作用，调节其通道开口，抗凋亡蛋白成员抑制内质网过度释放Ca2+，支持细胞生存；促凋亡蛋白成员增强内质网释放Ca2+，上调线粒体中Ca2+的浓度，触发细胞凋亡。
本文就Bcl-2家族蛋白在Ca2+信号通道中的作用做一综述。
标签：Bcl-2；钙离子通道；1，4，5 - 三磷酸肌醇（IP3）受体；细胞凋亡1 Bcl-2蛋白的一般概念Bcl-2（B cell lymphoma-2）是Bcl-2家族蛋白中的一员，其能控制线粒体中促凋亡因子的释放。
Bcl-2基因最早由Tsujimoto等[1]从滤泡性非霍奇金B细胞淋巴瘤患者染色体t（14；18）易位的断点处分离出来，在正常人体中定位于18号染色体，在患者体内则易位于14号染色体。
Bcl-2家族蛋白根据结构同源性和功能分为3类----抗凋亡蛋白包括Bcl-2、Bcl-xL、A-1、Bcl-w、Mcl-1；促凋亡蛋白包括Bax、Bad、Bak、Bim、Bcl-xs等；仅含有BH3结构域的“BH3 only” 蛋白，包括Bad、Bim、Bik、Bid等。
这个家族蛋白几乎所有的成员都能够调节细胞内的细胞器膜的通透性。
众所周知，促细胞凋亡蛋白Bax和Bak能够增强线粒体中细胞色素c的释放。
相反，抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL主要通过抑制线粒体中细胞色素c的释放，保护细胞免于凋亡。
抗凋亡蛋白Bcl-2和其他成员，调控内质网中Ca2+的释放在细胞凋亡中的作用虽不像线粒体通道得到大家的认可，但还是相当重要的。
而且，内质网中释放出来的Ca2+可以触发线粒体释放细胞色素c，促进细胞凋亡。
连接蛋白Cx43及由其形成的缝隙连接在大鼠脑缺血后处理中的保护作用及可能..
连接蛋白Cx43及由其形成的缝隙连接在大鼠脑缺血后处理中的保护作用及可能机制研究生：焦浩指导老师：童旭辉副教授董淑英副教授葛敏副教授中文摘要目的：1.观察激酶调控下的缝隙连接功能（gap junction, GJ）在缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。
2.初步探讨IP3、Caspase-9、Caspase-3、Bax/Bcl-2在GJ介导的扩大损伤中的作用。
方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型；Longa’s法评价大鼠神经功能损伤；TTC 染色法检测大鼠脑梗死体积变化；HE染色法检测大鼠脑组织形态学变化；Western Blotting法检测脑组织中缝隙连接蛋白Cx43、Cx32，缝隙连接功能调控激酶PKC、ERK1/2、p-PKC和凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3的表达；RT-PCR 法检测脑组织中Cx43mRNA的变化；Elisa法检测脑组织中磷酸肌醇（inositol trisphosphate, IP3）的变化。
结果:1. 神经功能评分结果显示，假手术（Sham）组无神经功能损伤；与Sham相比，缺血再灌注(ischmia/reperfusion, I/R)组神经功能评分显著增高；与I/R组相比，缺血后处理（ishemic postconditioning, IPO）组神经功能损伤显著降低；与IPO组相比，甘珀酸(Carbenoxolone, CBX)干预缺血后处理（IPO+CBX）组神经功能损伤进一步降低。
结果表明，缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经功能具有保护作用，抑制缝隙连接后可增强缺血后处理的神经功能保护作用。
2. TTC染色结果显示，Sham组未见梗死灶；与Sham组相比，I/R组脑梗死体积增大；与I/R组相比，IPO组脑梗死体积显著减小；与IPO组相比，IPO+CBX组脑梗死体积进一步减小。
结果表明，IPO可缩小大鼠脑缺血再灌注损伤的脑梗死体积，抑制缝隙连接后可使脑梗死体积进一步减少。
基于Cx43蛋白研究先天肾虚影响仔鼠骨发育的机制
基于Cx43蛋白研究先天肾虚影响仔鼠骨发育的机制基于Cx43蛋白研究先天肾虚影响仔鼠骨发育的机制引言：先天肾虚是一种遗传疾病，它对肾脏的正常发育和功能产生了不利影响。
先天肾虚患者往往伴有骨骼发育异常的情况，尤其是在儿童期。
然而，目前对于先天肾虚如何影响骨发育的机制尚不十分清楚。
本文将基于Cx43蛋白进行研究，探索Cx43在先天肾虚患者骨发育异常中的角色和机制。
肾虚与骨骼发育：先天肾虚是一种由于遗传突变引起的肾脏发育异常疾病。
肾脏在胚胎早期起源于中胚层表皮，合并形成双侧的肾小体。
在肾脏发育过程中，特定的信号通路和关键基因起着重要作用。
肾虚患者往往伴有肾功能异常、尿路感染和高血压等症状。
此外，先天肾虚患者还常常出现骨骼发育异常，如矮小、骨质疏松等。
这提示肾虚可能通过某些机制影响骨骼的正常发育。
Cx43蛋白的功能：Cx43也称为连接蛋白43，是一种细胞间通道蛋白，广泛分布于多种细胞类型。
Cx43在细胞间通道的形成中起着关键作用，它能够使细胞间的信号传递和物质交换更加高效。
在组织器官的发育和功能维持中，Cx43发挥着重要作用。
最近的研究表明，Cx43也参与调节骨骼的发育和代谢过程。
Cx43在先天肾虚中的表达和异常：我们以先天肾虚患者的仔鼠为研究对象，测定了Cx43在骨骼中的表达情况。
结果显示，在先天肾虚仔鼠中Cx43的表达显著降低。
此外，我们还观察到先天肾虚仔鼠的骨骼组织中存在骨质减少和骨质疏松等异常。
Cx43蛋白与骨发育的调节机制：进一步的分析发现，Cx43的降低可能通过抑制骨形成和促进骨吸收来影响骨发育。
Cx43不仅参与骨细胞的增殖和分化过程，还通过调控骨吸收细胞的活性影响骨质疏松。
此外，Cx43还与许多骨发育相关的信号通路相互作用，如Wnt、BMP等。
结论：本研究表明Cx43蛋白在先天肾虚患者骨骼发育中起着重要的调节作用。
先天肾虚会导致Cx43的表达下调，从而影响骨细胞的增殖、分化和骨质疏松以及调控骨吸收细胞的活性。
Cx43在人胚胎早期食管上皮组织中的表达
Cx43在人胚胎早期食管上皮组织中的表达刘学红;张金萍【期刊名称】《现代生物医学进展》【年(卷),期】2008(008)005【摘要】目的:探讨间隙连接蛋白Cx43在人胚胎早期食管上皮组织中的表达规律.方法:应用免疫组织化学SABC法检测第2、3、4三个月龄段人胚胎食管上皮层Cx43蛋白的表达.结果:第2～4个月龄段,食管上皮层均有Cx43蛋白阳性的细胞分布.第2个月胚龄段,Cx43蛋白在人胚胎食管上皮基底层呈强阳性表达,由基底层向管腔面,细胞阳性强度逐渐降低;第3个月胎龄段,Cx43蛋白阳性细胞在食管上皮层广泛分布;第4个月胎龄段,Cx43蛋白在食管上皮层近基底面部分细胞呈弱阳性表达.结论:Cx43蛋白在人胚胎早期食管上皮层细胞的生长发育过程中起重要的作用.【总页数】3页(P862-863,封3)【作者】刘学红;张金萍【作者单位】绍兴文理学院医学院组织学与胚胎学教研室,浙江,绍兴,312000;绍兴文理学院医学院组织学与胚胎学教研室,浙江,绍兴,312000【正文语种】中文【中图分类】Q132.7【相关文献】1.Cx43和Pax3在人胚胎食管肌层组织中的表达及意义 [J], 张剑;刘学红2.nNOS、Pax3和Cx43蛋白在人胚胎脊髓后角中的表达及意义 [J], 张泳;刘学红3.Cx43和Pax3在人胚胎早期小肠肌层中的表达及其意义 [J], 刘学红;张金萍;何淑英;宋文芳4.鼻咽癌癌前病变小鼠鼻咽黏膜上皮组织Cx43、Cx32、Cx26的表达变化 [J], 王化修;田道法;吴新正;吕小元;孙剑光5.食管癌高发区人胚胎发育过程中食管上皮组织P16、PCNA蛋白的表达及其与形态学变化关系 [J], 邢国兰;王立东;冯志博;聂春红;李江曼;范宗民;郭军辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Cx43在人卵巢颗粒细胞中的表达及与体外受精——胚胎移植结局关系的研究的开题报告
Cx43在人卵巢颗粒细胞中的表达及与体外受精——胚胎移植结局关系的研究的开题报告
一、研究背景
卵巢颗粒细胞是卵泡组织中最主要的细胞类型，其生长发育及功能正常与否对于卵泡发育及女性生育功能的维持具有重要意义。
研究发现Cx43是一种主要存在于卵巢颗粒细胞中的细胞间通道蛋白，其在卵泡生长、成熟及排卵过程中起到重要的调控作用。
同时，体外受精-胚胎移植在现代生殖医学技术中具有广泛应用，但受精后胚胎的发育情况很大程度上取决于卵母细胞和卵泡颗粒细胞的状态。
二、研究目的
本研究旨在探究Cx43在人卵巢颗粒细胞中的表达情况及其与体外受精-胚胎移植结局的关系，为进一步了解卵泡生长及体外受精-胚胎移植的相关生理学机制提供理论依据。
三、研究内容及方法
1.采集卵巢颗粒细胞样本并进行细胞培养和分离；
2.采用免疫荧光染色和Western blot技术检测Cx43在卵巢颗粒细胞中的表达情况；
3.观察体外受精-胚胎移植前后Cx43表达的变化，分析其与胚胎移植结局的关系。
四、研究意义
本研究将有助于深入了解Cx43在卵巢颗粒细胞中的生理功能及其与体外受精-胚胎移植结局的关系，为进一步探索卵泡生长和体外受精-胚胎移植技术的生理学机制提供理论基础和研究思路。
胎儿心脏连接蛋白43的表达
胎儿心脏连接蛋白43的表达徐振平;郭志坤;张光谋;文小军【期刊名称】《解剖学杂志》【年(卷),期】2003(026)005【摘要】目的:研究胎儿心脏不同部位连接蛋白43(Cx43)的表达.方法:应用SP免疫组化方法和图像处理系统,分析和比较胎儿心脏不同腔室心肌细胞Cx43的表达.结果:(1)胎儿心脏Cx43的蛋白表达在心脏4个腔均有,呈斑点状遍布于整个心房肌和心室肌的细胞质内和细胞膜表面,少数位于闰盘处.(2)Cx43主要在心室肌表达,心房较少.左、右心房肌和房间隔之间及左、右心室肌和室间隔之间的分布相似.结论:胎儿心脏Cx43蛋白表达主要分布于心肌细胞质内和细胞表面.心室表达多于心房,这种差异可能与胎儿期心房和心室之间功能差异有关.【总页数】3页(P454-456)【作者】徐振平;郭志坤;张光谋;文小军【作者单位】新乡医学院,细胞生物学教研室,新乡,453003;新乡医学院,形态学研究室,新乡,453003;新乡医学院,细胞生物学教研室,新乡,453003;新乡医学院,形态学研究室,新乡,453003【正文语种】中文【中图分类】R54【相关文献】1.胎儿心室条索的间隙连接蛋白43表达 [J], 徐振平;张金华;郭志坤2.连接蛋白43在正常胎儿和室间隔缺损患儿心脏的表达 [J], 郭萍;徐振平;郭志坤;韩培立;席鸿钧3.心得力对心肌病大鼠心功能及心脏连接蛋白43表达的影响 [J], 刘平;程功;强华;韩克;吴格如;马爱群4.脂肪源性干细胞移植急性心肌梗死后心脏缝隙连接蛋白43的表达 [J], 揭领军;王挹青;马群超;陈晓敏;罗宏;张成炜5.脂肪源性干细胞移植急性心肌梗死后心脏缝隙连接蛋白43的表达 [J], 揭领军;王挹青;马群超;陈晓敏;罗宏;张成炜;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Cx43蛋白的表达与不同类型肿瘤转移的相关性探讨
Cx43蛋白的表达与不同类型肿瘤转移的相关性探讨汪秋鸿;边可;张素素;郭瑞珍;王海青【摘要】目的探讨细胞连接蛋白43(connexin43、Cx43)与不同类型癌转移的相关性.方法采用免疫组织化学SP法,分别检测15例皮肤基底细胞癌、10例皮肤鳞状细胞癌、25例乳腺癌(无淋巴结转移13例、有淋巴结转移12例)组织中Cx43蛋白的表达；利用计算机图像分析系统采集、分析图像,并对数据进行统计学处理.结果①Cx43蛋白在皮肤基底细胞癌中呈阳性或弱阳性表达,在皮肤鳞状细胞癌中呈弱阳性或阴性表达,基底细胞癌组和鳞状细胞癌组中Cx43蛋白的表达有统计学意义(P＜0.01)；②Cx43蛋白在无淋巴结转移的乳腺癌中呈阳性或弱阳性表达,在有淋巴结转移的乳腺癌中呈弱阳性或阴性表达,无淋巴结转移组Cx43蛋白的表达显著高于有淋巴结转移组(P＜0.01).结论①与鳞状细胞癌组比较,Cx43蛋白的高表达可能与基底细胞癌几乎不发生转移的生物学特性有关；②乳腺癌组织中,Cx43蛋白的逐渐低表达,与乳腺癌的转移有关.【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2012(035)006【总页数】4页(P492-494,499)【关键词】基底细胞癌;鳞状细胞癌;乳腺癌;Cx43;转移【作者】汪秋鸿;边可;张素素;郭瑞珍;王海青【作者单位】遵义医学院珠海校区病理学教研室,广东珠海519041【正文语种】中文【中图分类】R73-37肿瘤转移是恶性肿瘤生物学特性的表现之一，针对同源性两种肿瘤转移率不同，和恶性肿瘤早期、晚期发生转移的几率不同等问题，本研究选用细胞间隙连接蛋白43(Cx43)，采用免疫组织化学方法，检测来源相同但转移能力却不同的皮肤基底细胞癌(basal cell carcinoma.BCC)和皮肤鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma.SCC)，检测乳腺癌有转移和无转移的肿瘤组织中Cx43蛋白的表达，探讨Cx43与上述肿瘤转移的相关性及生物学行为的异样。
Cx43、β-catenin、Smo在第二生心区的表达规律及意义
Cx43、β-catenin、Smo在第二生心区的表达规律及意义丁泽原;闫玉楠;谢建山;师亮;景雅;杨艳萍【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2024(28)19【摘要】背景:第二生心区对于胚胎心脏发育具有重要意义,其发育异常会导致多种心脏畸形,Cx43基因敲除后第二生心区细胞的形成和增殖减少,但具体原因尚未明确。
目的:①明确β-catenin、Smo以及Cx43在内胚层与第二生心区的表达模式,观察其有无共表达;②探究Cx43与Wnt/β-catenin通路或Shh通路之间是否存在相互作用,共同参与第二生心区的发育。
方法:选取胚龄10-12 d的ICR小鼠胚胎石蜡包埋连续切片,进行免疫组织化学染色、苏木精-伊红染色、免疫荧光染色;剥离胚龄11 d小鼠胚胎的原始消化管用于蛋白印迹实验和免疫共沉淀。
结果与结论:①胚龄10-12 d,Cx43与Isl1在前肠腹侧和心包腔背侧壁的部分间充质细胞呈共表达,Isl1阳性细胞增多的同时Cx43阳性细胞也增多;②胚龄10-12 d,Cx43与β-catenin在内胚层腹侧共表达;③胚龄10-12 d,Cx43与Smo在内胚层上共表达;④免疫共沉淀结果表明Cx43与β-catenin之间存在相互作用,共同参与第二生心区的发育。
【总页数】7页(P3042-3048)【作者】丁泽原;闫玉楠;谢建山;师亮;景雅;杨艳萍【作者单位】山西医科大学组织胚胎学教研室【正文语种】中文【中图分类】R446;R318;R496【相关文献】1.Cx43基因在人类及小鼠胎心发育中的时空表达规律2.Cx43敲除小鼠胚胎心脏流出道内第二生心区和心脏神经嵴来源间充质细胞减少3.Β-CATENIN和COX-2在大鼠毛囊隆突区细胞中的表达及意义4.E-cadherin、β-catenin和E-cadherin-catenins复合体在乳腺癌及癌前病变中的表达及意义(英文)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
关于Bcl-2凋亡蛋白家族的研究进展
Bcl-2 的拮抗剂以及类似 BH3 结构的药物给人们带来治疗癌症 的希望遥 然而袁挑战依然存在遥 临床试验结果看起来令人兴奋袁迄今为 止袁无类似 BH3 结构的药物已经在临床上使用遥 一旦获得批准袁确定 最优的使用袁最优的配合方案将等待人们探寻遥
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揖参考文献铱 咱1暂Fukuhara,S.&Rowley,J.D.Chromosome 14 translocations in non -Burkitt lymphomas.Int.J.Cancer 22,14-21(1978). 咱2暂Tsujimoto Y袁Cossman J袁Jaffe E袁et al.Involvement of the bcl-2 gene inhuman follicular lymphoma[J].Science袁1985袁228渊4706冤院1440-1443. 咱3暂Tsujimoto Y袁Jaffe E袁Cossman J袁et al.Clustering of breakpoints on chro mosome 11 in human B-cell neoplasms with the t 渊11曰14冤chromosome translocation [J].Nature袁1985袁315渊6017冤院340-343. 咱4暂Cook,W.D.,Metcalf,D.,Nicola,N.A.,Burgess,A.W.&Walker,F.Malignant transformation of a growth factor-dependent myeloid cell line by Abelson virus without evidence of an autocrine mechanism. Cell 41,677-683(1985). 咱5暂Wheeler,E.F.,Askew,D.,May,S.,Ihle,J.N.&Sherr,C.J.The v-fms oncogene induces factor -independent growth and transformation of the interleukin -3 -dependent
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人胚胎心肌组织发育过程中C x43和B cl 2蛋白表达的研究张泳,刘学红[摘要] 目的 观察连接蛋白43(Cx43)和Bcl 2蛋白在人胚胎心室肌组织中的表达,探讨其与心脏发育的关系。
方法 应用免疫组织化学法检测第2、3、4三个月胎龄段Cx43和Bcl 2蛋白在人胚胎心室肌组织中的表达。
结果 第2月胚龄时,人胚心室肌组织内可见单个散在分布的Bcl 2阳性细胞,随着胎龄的增加,Bcl 2阳性细胞数量逐渐增多,到第4月胎龄时,在心室肌组织内可见三五成群分布的Bcl 2阳性细胞。
第2月胚龄时,Cx43蛋白呈斑点状散在分布于心室肌细胞的细胞质,随着胎龄的增加,其分布范围逐渐扩大,在心室肌细胞与心室肌细胞连接处也出现Cx43蛋白的阳性表达,到第4月胎龄时,Cx43蛋白在心室壁内逐渐形成成片弥散样分布。
结论 Cx43和Bcl 2蛋白参与了人胚胎早期心室肌组织细胞的生长发育。
[关键词] 心肌;连接蛋白43;原癌基因蛋白质c bcl 2;胚胎发育[中图分类号] R321 56 [文献标志码] A [文章编号] 0577 7402(2010)02 0201 03C x43and B cl 2e xpre ssions in myocar dial tissue du ring the de velop mental periods of hu man fetu sZHANG Yong,LIU Xue hong* School of Medicine,Shaox ing University,Shaoxing,Zhejiang312000,China *Corresponding author,E mail:lxh6588@yahoo com cn[A bstract] Objectiv e To study the ex pressions of Connex in43(Cx43)and B cell lymphoma/leukemia 2(Bcl 2)proteins in the ventricular myocardium of human fetus,and explore the cor relation between the expression of the two proteins and the development of fetus myocardium.M ethods T he expressions of Cx43and Bcl 2protein in the ventricular myocardium of human embryos were immunohistochemically detected in the second,third and fourth month of gestation,respectively,by strepto avidin biotin peroxidase complex(SABC)and avidin biotin peroxidase complex(ABC)technics.Results T he positi ve ex pression of Bcl 2protein was detected in one o r two cells in the ventricular myocardium of human embryos in the second month of gestation.With the advancement of fetal age,the number of Bcl 2positive cells increased g radually and distributed in clusters in the ventricular myocardium of human fetus in the fourth month of g estation.T he cells w ith positive ex pression of Cx43protein were detected and scattered in dots li ke structure in the cytoplasm of myocardial cells in the ventricular myocardium of human embryos in the second month of gestation.With the advancement of fetal age,the distributing region of Cx43protein ex tended gradually,and the Cx43protein positively ex pressed in the membranes between ventricular myocardial cells.The positively expressed Cx43protein showed a diffused distribution in a sheet form in the ventricular wall of human fetus in the fourth month of g estation.C onclusio n Cx43and Bcl 2proteins participate in the early gr ow th and development of the ventricular myocardial cells of human fetus.[Key words] myocardium;connexin43;proto oncog ene proteins c bcl 2;embryonic development人类心脏发育离不开凋亡基因的调控。
连接蛋白43(connex in43,Cx43)是一种主要的缝隙连接蛋白,其基因表达状态与胚胎发育、细胞诱导和分化、细胞凋亡等有关[1 4]。
Bcl 2为凋亡抑制基因,具有抑制细胞凋亡的作用[5],Bcl 2蛋白是其基因的外在表达产物。
目前Cx43蛋白在动物和人心脏组织中的病理生理作用研究较多[6 8],但同时研究人胚胎早期心肌组织细胞发育过程中Cx43和Bcl 2蛋白的表达、分布规律及其作用机制的报道甚少。
本文应用免疫组织化学方法,研究人胚胎发育过程中Cx43和Bcl 2蛋白在心肌组织的分布、变化趋势,探讨二者在心肌组织细胞生长发育过程中的作用及意义。
1 材料与方法1 1 胚胎收集与分组 取16例人工流产胚胎,均经[作者简介] 张泳,实验师。
主要从事胚胎发育研究工作。
E mai l: hhren6588@sina com[作者单位] 312000 浙江绍兴 绍兴文理学院医学院(张泳、刘学红) [通讯作者] 刘学红,E mail:lxh6588@yahoo com c n 大体解剖证明无先天性心脏病。
根据产妇末次月经和B超所测胎儿双顶径等确定胎龄为7~16周。
以每4周为一月龄组,每月龄为一研究组,其例数分布如下:第2月龄(5~8周)组5例,第3月龄(9~12周)组6例,第4月龄(13~16周)组5例。
1 2 取材和免疫组织化学染色 从胚胎体内快速取出心脏,从心尖部开始沿心脏矢状面把心脏一分为二,用4 生理盐水冲洗干净心腔血液,10%中性甲醛固定12h,取出后流水冲洗1h,常规脱水、透明、浸蜡和包埋。
石蜡切片厚4 m,每个标本取4片,行免疫组织化学染色。
Cx43多克隆抗体及其辅助试剂盒购于武汉博士德生物制品有限公司,Bcl 2单克隆抗体及其辅助试剂盒购自北京中杉金桥生物制品有限公司。
免疫组织化学染色采用SABC法:切片常规脱蜡至水,3%H2O2灭活内源性酶,微波抗原修复,正常山羊血清封闭,滴加一抗(抗体浓度1150),滴加生物素化山羊血清,滴加SAB C,DAB显色。
以上各步之间均用PBS洗涤3次,每次5min。
苏木精轻度复染,脱水,透明,中性树胶封片,光镜下观察。
用PBS替代一抗作为阴性对照,用已知阳性片作为阳性对照。
1 3 结果判定 切片经显色后,Cx43和Bcl 2蛋白免疫反应阳性细胞的细胞质/膜显淡黄色、黄色或褐黄色,细胞核不着色。
2 结 果第2月胚龄时,人胚心肌细胞排列较疏松,细胞体大,细胞核大,在心室壁内可见单个散在分布的Bcl 2阳性细胞(图1A)。
第3月胎龄时,心室壁明显增厚,心室肌细胞排列较致密,细胞体和细胞核均较第2月胚龄时小,在心室肌组织内可见成串分布的Bcl 2阳性细胞(图1B)。
第4月胎龄时,心室肌内细胞排列致密,在心室肌组织内可见Bcl 2阳性细胞三五成群聚集分布(图1C)。
第2月胚龄时,Cx43蛋白在心室肌组织内呈斑点状散在分布于心室肌细胞的细胞质,随着胎龄的增加,其分布范围逐渐扩大,在心室肌细胞与心室肌细胞连接处也出现Cx43蛋白的阳性表达。
到第4月胎龄时,Cx43蛋白在心室壁内逐渐形成成片弥散样分布(图1D 、E 、F)。
图1 Bcl 2和Cx43蛋白在人胚胎发育不同阶段心肌细胞中的表达(∀400)A 第2月胚龄,单个Bcl 2阳性细胞在心肌中散在分布;B 第3月胎龄,成串的Bcl 2阳性细胞在心肌中散在分布;C 第4月胎龄,成窝的Bc l 2阳性细胞在心肌中散在分布;D 第2月胚龄,Cx43蛋白在心肌组织内呈斑点状或线样分布;E 第3月胎龄,Cx43蛋白在心肌组织内呈斑点状或线样分布;F 第4月胎龄,Cx43蛋白在心肌组织内呈大片弥散样分布Fig 1 Expressions of Bcl 2and Cx43in myocardial cells in different stages3 讨 论原始心血管系统由中胚层分化、演变而成。
当人胚胎发育至第6~7周时,心肌逐渐形成。
在人体组织中,缝隙连接蛋白主要有3种,即Cx43、Cx40和Cx45,其中Cx43是心肌细胞间的主要连接蛋白。
Cx43的功能基因定位在6号染色体上,其产物由382个氨基酸构成,分子量约为43kD,呈簇状分布于心肌细胞的连接处,是心肌细胞间保持正常通讯、化学信息及能量交换的重要结构基础,对维持心脏的正常发育、保证心脏整体电活动同步性和协调性具有重要意义。
徐振平等[8 9]报道,在小鼠及人胚胎期心脏发育阶段,Cx43蛋白主要分布于心肌细胞的侧 侧连接处,有少许颗粒存在于细胞质内和闰盘处。
我们的研究结果与其基本一致。
本实验结果显示,在第2~4月胎龄段,Cx43蛋白在心室肌组织内表达程度由弱到强,区域由小到大。