甲苯胺蓝染色
甲苯胺蓝染色渗透试验
甲苯胺蓝染色渗透试验
1.目的
根据ASTM F1929-2012标准方法采用染色渗透法检测无菌包装封口泄漏性能2.设备及工具、材料
天平（万分之一）10mL注射器，甲苯胺蓝、曲拉通X-100（氚X-1004）、纯化水、烧杯、试管
3.配制方法
3.1.用天平称量0.5g Triton X-100，与20ml纯化水混合，搅拌或摇动容器，混合二者。
待Triton X-100分散后。
再加入纯化水定容至100ml。
3.2.用天平称量0.05g甲苯胺蓝，加入混合了Triton X-100的溶液中,搅拌或摇动容器混合均匀，即成0.05%甲苯胺蓝染色液。
4.试验方法
4.1.把已灭菌产品包装在试验开始之前，放置于大气温度23±2℃（73.4±3.6oF）和相对湿度50±2%环境中进行存贮24小时。
4.2.依据ASTM F1929-2012标准，将足够的染料渗透液注入包装中，覆盖最长的封边，深度约5mm（0.25英寸）（注入方法：可以使用带有软管的注射器通过切口送入染料渗透剂）使染料渗透液与封边保持接触最少5s最多20s的时间，旋转包装使每道封边都能接触渗透液，如有需要可以补充染色液，确保每道封边都能接触足够量的染色液。
通过包装的透明面目力检测密封区，看有无泄漏或者通道出现，也可使用放大镜进行细致的观察。
5.检验标准
在包装透明的一边，用肉眼检测封口区域。
即可看见封口区的通道。
检查染色液有无透过密封区到达另一侧或染色液有无通过确定的通道进入密封区内部的迹象。
6.注意事项
染色渗透液与包装材料封边的作用时间不应超过20秒。
甲苯胺蓝染色方法改进
【】 １ 杜卓民． 实用组织学技术【 ． Ｍ】北京 ： 人民卫生出版社 ，９ ８ １９ ．
［ 陆 云， ２ 】 汤美 蓉． 甲苯胺蓝快染肥大 细胞的体会叨． 皖南 医学院学报 ，
１ ９ ，０ ４ ：８ ． ９ １ １ （ ）２ ９
［ 闭慎金． ３ ］ 幽门螺杆菌 甲苯胺蓝法在 胃黏膜免疫组化复染中的应用叨．
异染性 （ 弱阳性 ）为紫色或紫红 色 ； 异染性 （ ， 一 阳性 ） 为红色。 ，
但此种异染性染色后 经酒精脱水时 ， 又转变成正色性『 １ １ 。此染料 特点是对于 神经元 的尼 氏体染 色效果好 ， 还可染黏液 、ຫໍສະໝຸດ 软骨基 质、 大细胞等。 肥
甲苯胺 蓝在组 织学 、 病理 学 中应用较 为广 泛。具 文献报 道， 甲苯 胺 蓝可 快速 染 肥大 细胞 【； 胃黏膜 免 疫组 织 化学 在 １ 反应 中 ， 甲苯 胺蓝 复染 后 ， 经 胃黏膜 组织 内的幽 门螺旋 杆菌
被染 为 蓝 色 ； 早期 识 别活 体 中无 症状 的 口腔 鳞 癌 ， 可 良性
溃疡 通 常具 有非 常 明确 的边缘 着 色 ，而癌前 病变 或恶 性病
变 的 边 缘 是 弥 散 的【； 口服 甲 苯 胺 蓝 胃 内 染 色 有 助 于 胃 癌 的
冲洗 ， 尼氏体着色效果更佳 。 可能是 由于尼 氏体为嗜碱性物质，
即出现形态变化甚 至溶解 因此实验用水 ｐ 。 Ｈ值对实验结果非 常重要 ， 其在 临床病理诊 断中 ， 尤 一定要排 除实验条件对实验
结 果 的干 扰 。
参考文献：
细胞 核 着蓝 色 ， 此法 简便 易行 、 果好 ， 只限 于宫 颈 癌 的 效 但
早期诊 断 『 ６ １ 氏体位 于神 经元 的核周 部 ， 。尼 由大量 平行 排列 的粗 面 内质 网 和游离 核糖 体组 成 ，为 易被碱 性染 料着 色 的 嗜染 质 。笔 者就 甲苯胺 蓝 显示 神经 元尼 氏体 的方 法进 行 了 改进 ， 体如 下 。 具
两种固定液对甲苯胺蓝染色效果的影响
显 微镜下 清晰 分辨 出肥大 细胞 ， 呈紫 红色 颗粒 ， 背景 呈 淡 蓝 色 甲 苯 胺 蓝 染 色 的 方 法 不 断 被 研 究 人 员 改 良， 以求得 到更 好 的染 色效 果 ， 有关 不 同固定 液对 但
文 献 标 识 码 ： Ｂ
文 章 编 号 ： ５ ９６ ０ （ ０ ０ ０ — ０ ５０ ０ ２ ０ ５ ２ １ ） ９０ １ — ２
一
甲苯 胺 蓝 染 色 法 是 目前 观 察 肥 大 细 胞 最 常 用 的 种细胞 化学 染 色方 法 。由于 该 方 法 简单 便 捷 ， 还
酸 二 氢 钠 （ Ｈ Ｏ ・ Ｈ Ｏ） ， 酸 氢 二 钠 Ｎａ Ｐ ４ｇ 磷
研 制 其 生 物 制 剂 奠 的 以
抗病 效果 。 参 考文 献 ：
［ ］ Ｌ ｂ ｎＡ，Ｔｏ ｇ ｄＦ ｉｋ ｅｗｅｎｉｎ ｔ ｎ ｄ ｐｉｅｉ １ ｅｏ ｕ ｈ ．Ｌｎ ｓｂ ｔ ｅ ｎ ａｅａ ｄａａ ｔ ｍ— ｖ ｍｕ ｉ ｉｔｐ ｉｔｒ ｒｎ［］ ｕ ｒｎ ｉｉｎｉ Ｉ ｎｔ ｖａ ｙ ｅＩｎｅｆ ｏ Ｊ．Ｃ ｒｅｔ ｎｏ ｍｍｕ ｏ ｙ ｅ Ｏｐ ｎ ｎｌ
（ ２ Ｏ ６ ５ ｇ， 蒸 馏 水 至 １０ ０ ｍＩ。 Ｎａ ＨＰ ） ． 补 ０
被 广 泛 运 用 于 卡 式 肺 孢 子 虫 囊 壁 上 的 圆 括 号 状 小 体 、 涂 片及骨髓 涂 片 中嗜 碱性 粒 细胞 、 颈 癌 、 血 宫 幽 门螺杆菌 等 的检 测＿ ］ １ 。通 过 甲 苯 胺 蓝 染 色 可 以 在
水 中 ； 已溶解 的 Ａ液 煮 沸 １ ｎ 再 将 已溶解 的 将 ０ｍｉ，
Ｂ液 逐 滴 加 入 Ａ 液 中 ， 煮 沸 １ ｎ 用 蒸 馏 水 补 再 ０ｍｉ ，
肥大细胞PAS-甲苯胺蓝染色法(教学课件)
讨论
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3. 通过PAS-甲苯胺蓝染色显示肥大细胞 形态结构典型，胞质内嗜碱性颗粒清 晰。显示肥大细胞中颗粒是识别和判 断及其功能状态提供的研究方法，也 为科研提供了较好的方法。
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• 在组织学观察中，我们怎样能够显示肥大 细胞的结构及特征呢？
学习任务 结果分析
镜检
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取材 固定
染色
组织取材
取皮下组织铺片
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组织固定
AFA固定液配制:
95%酒精 85ml 甲醛 15ml 冰醋酸 5ml
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染色
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PAS-甲苯胺蓝染色
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肥大细胞PAS-甲苯胺蓝染色法
Mast cell PAS- Toluidine blue staining
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这张照片中我们能看 到什么现象？
• 就是过敏（a添加标题
• 当肥大细胞受到过敏原刺激时，体内浆细 胞，生成IgE抗体，IgE与肥大细胞的IgE受 体结合后，机体对该过敏原便处于致敏状 态，作为过敏原与肥大细胞表面的IgE结合 使其激活脱颗粒，引起过敏反应。
取出固定好组织放入蒸馏水洗净， 置于氧化剂放置6min，自来水 冲洗1次，蒸馏水浸洗2次，放入 Schiff试剂，置于室温阴暗处，
浸染色10min，取出组织玻片在蒸 馏水洗净，将洗净的组织玻片放入
0.5%甲苯胺蓝液，其染色时间 只需30秒。
甲苯胺蓝染色
甲苯胺蓝染色液
产品号 401002 401041 401081 401032
产品 细胞周期检测试剂盒 线粒体膜电位试剂盒(JC-1) Caspase 3 活性检测试剂盒 AO/EB 双染试剂盒
产品号 401033 401072 401052 401037
-1-
-2-
产品组成：
甲苯胺蓝染色液(细胞专用)
产品编号 甲苯胺蓝染色液(细胞专用)
BB-44527-1 20ml
BB-44527-2 50ml
储存条件： 室温避光保存。
有效期： 一年。
产品简介： 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类，这类染
料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用， 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染 料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，可染细胞核 使之呈蓝色。另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染 性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。
贝博甲苯胺蓝染色液(细胞专用)适用于细胞内酸性黏液多糖染色，尤其适用于含硫用方法：
使用注意事项： ● 为了证实染色效果，可选用慢性粒细胞白血病血片(嗜酸性粒细胞)或再生障碍性贫血骨髓涂片(组
织嗜酸性粒细胞)作对照。 ● 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞涂片染色 1、细胞涂片后，立即放入 95%的乙醇中固定 15s，取出放在纸巾上； 2、滴加甲苯胺蓝染色液进行滴染 5min； 4、滴加等量蒸馏水于涂片上混匀，染色 15min； 5、水洗、晾干、镜检。
结果分析： 细胞内酸性黏液多糖呈红色。
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)简介：甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。
Leagene 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。
组成：操作步骤(仅供参考)：(一)肥大细胞染色1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。
4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速和无水乙醇脱水。
6、 二甲苯透明，封固。
染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(二)软骨染色1、 石蜡切片入二甲苯。
2、 系列乙醇各。
3、 自来水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。
5、 自来水洗，滤纸吸干水分。
6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、 逐级乙醇脱水。
编号 名称 DA0059 Storage Toluidine Blue O stain (0.5%,硼酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份8、二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(三)细胞涂片染色1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。
2、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。
3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。
4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。
5、无需干燥，直接镜检。
PH1040 软骨染色液 甲苯胺蓝法实验方法 Phygene
PH1040|甲苯胺蓝染色液（软骨专用）
Cartilage Staining Solution with Toluidine Blue
Catalog No：PH1040Size：☐50mL|☐100mL Store at RT
试剂简介
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类,这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。
软骨染色液(甲苯胺蓝法)呈强碱性，更利于软骨组织的着色。
该试剂仅用于科研使用，不得应用于其他领域使用。
试剂存储
常温保存，12个月有效；
使用参考
1、常规脱钙，包埋、固定。
2、石蜡切片入二甲苯2次，每次15min。
3、系列乙醇各1min，自来水洗2min。
4、入软骨染色液，浸染15～20min。
根据不同组织，染色时间不完全相同。
5、自来水洗2min，滤纸吸干水分。
6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、逐级乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
注意事项
1、针对于较难着色组织的染色，浸染的时间应相应延长。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞核染色方法及原理
细胞核染色方法及原理
细胞核染色是生物学领域中常用的实验技术之一，用于研究细胞核的结构和功能。
目前常用的细胞核染色方法包括苏木精-
伊红染色法、甲苯胺蓝染色法和荧光染色法等。
苏木精-伊红染色法是最常见的细胞核染色方法之一。
其原理
是将标本固定后，用苏木精染料染亮细胞核，然后用伊红染料染暗胞质细胞器。
染色后的样本可以通过显微镜进行观察。
苏木精主要染色DNA，使细胞核呈现为紫红色，而伊红主要染
色胞质蛋白质，使胞质呈现为粉红色。
甲苯胺蓝染色法主要用于观察细胞核的细胞形态和染色体结构。
其原理是将标本固定后，用甲苯胺蓝染料染色，然后对其进行脱水、透明化等处理，最后用显微镜观察。
甲苯胺蓝染料可以与DNA结合，使细胞核呈现出深蓝色。
荧光染色法是一种利用荧光染料标记细胞核的方法。
其中，常用的荧光染料有荧光素、荧光素同工异构体和DAPI等。
这些
染料可以与DNA结合，在荧光显微镜下观察细胞核。
荧光染
色法可以提供更高的分辨率和更准确的定位信息，常用于细胞核的三维结构研究和基因表达等研究领域。
细胞核染色方法的选择要根据实验的目的和需要来决定，不同的染色方法有不同的优缺点。
细胞核染色的目的是为了更好地观察和研究细胞核的结构、功能和变化，从而揭示细胞核在生物体内扮演的关键角色。
石蜡甲苯胺蓝染色
石蜡切片的甲苯胺蓝染色法
方法一
配方：甲苯胺蓝1g 溶于95%酒精100ml ，置60℃温箱中2h后降至室温。
染液于室温下可保存3个月，若放于4℃冰箱则可保存半年左右，但该液的染色效果在早期为最佳，若染液存放时间较长，则染色偏淡，应适应延长染色时间。
1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液20～30min。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗3～5min。
4、(可选)0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速95%和无水乙醇脱水。
6、二甲苯透明。
7、封固。
方法二
配方：甲苯胺蓝0.5g蒸馏水定容至100ml。
冰醋酸液：冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml
1.组织切片常规脱蜡至水
2.入甲苯胺蓝液30min
3.稍水洗
4.入冰醋酸液分化，直到胞核和颗粒清晰。
5.稍水洗，用冷风吹干
6.二甲苯透明，中性树胶封固。
甲苯胺蓝(TB)染色实验
甲苯胺蓝（TB）染色一、甲苯胺蓝（TB）染色简介甲苯胺蓝（Toluidine blue，TB）是常用的人工合成染料的一种，属于醌亚胺染料类，这类染料一般含有两个发色团，一个是胺基，一个是醌型苯环，来构成色原显色。
染料除有发色团外，还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。
助色团能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色。
甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，为碱性染料，甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
二、染色步骤（软骨组织为例）1、常规脱钙，包埋、固定。
2、石蜡切片入二甲苯2次。
3、系列乙醇各1min自来水洗。
4、入软骨染色液浸染。
根据不同组织，染色时间不完全相同。
5、自来水洗2min，滤纸吸干水分。
6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、逐级乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
8、结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色三、样本说明1、石蜡切片取材：1、组织离体后需及时固定；2、组织标本不宜过大、过厚。
固定：1、固定液：10%福尔马林（4%多聚甲醛）或10%中性甲醛；2、用量：一般固定液的量与组织体积比为10:1～20:1；3、固定：适宜的固定时间，主要根据材料的大小、松密程度及固定液的穿透速度而定。
保存：切片经60℃烤片3-5小时后，可于常温或4℃干燥保存。
2、冰冻切片取材：取材后需立即置于超低温冰箱或液氮中保存。
固定：样本冰冻切片后，应立即放入甲醇、丙酮、95%酒精、4%多聚甲醛等固定液中固定。
保存：固定好的切片自然风干，密封后置于-80℃、-20℃保存，尽快用于后续实验。
3、细胞块石蜡切片细胞量较多的样品，可离心分离所需细胞，用中性甲醛固定后制作成琼脂细胞块，然后按照制作石蜡切片的操作流程进行切片。
4、细胞爬片在孔板里做的细胞爬片，爬片取出后，用PBS洗涤2次（根据研究目的，PBS洗涤可选择不做），用4%多聚甲醛4℃固定15分钟，将表面液体吹干，置于-20℃保存。
尼氏染色液(甲苯胺蓝法)
南京森贝伽生物科技有限公司 网址：/第1页仅供科研 版本号：180917尼氏染色液(甲苯胺蓝法)【产品组成】【保存条件】室温,避光,12个月【产品概述】神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。
在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。
尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。
染色的变异、pH 和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。
尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。
各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。
尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。
尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。
尼氏染色液(Nissl Stain ，甲苯胺蓝法)采用甲苯胺蓝(Toluidine blue)作为核心染料，可以用于石蜡组织切片的尼氏体染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。
【使用方法】1、新鲜组织固定于乙醇、Carnoy 固定液或10%中性福尔马林溶液后，常规脱水包埋。
2、切片厚6-8µm ，常规脱蜡至水。
3、蒸馏水冲洗。
4、切片入Toluidine blue Stain ，将染色缸置于恒温箱50-60℃浸染25-50min 。
5、蒸馏水稍冲洗。
6、入70%乙醇冲洗。
7、95%乙醇迅速分化。
分化不易控制，如果分化失败，可重复步骤4。
8、无水乙醇迅速脱水。
二甲苯透明，中性树胶封固。
【染色结果】【注意事项】1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。
甲苯胺蓝试验液配制方法
甲苯胺蓝染色渗透试验
1.目的
根据ASTM F1929-2012标准方法采用染色渗透法检测无菌包装封口泄漏性能
2.设备及工具、材料
天平（万分之一）10mL注射器，甲苯胺蓝、曲拉通X-100（氚X-1004）、纯化水、烧杯、试管
3.配制方法
3.1.用天平称量0.5g Triton X-100，与20ml纯化水混合，搅
拌或摇动容器，混合二者。
待Triton X-100分散后。
再加入纯化水定容至100ml。
3.2.用天平称量0.05g甲苯胺蓝，加入混合了Triton X-100的溶
液中,搅拌或摇动容器混合均匀，即成0.05%甲苯胺蓝染色液4.试验方法
4.1.把已灭菌产品包装在试验开始之前，放置于大气温度23±
2℃（73.4±3.6oF）和相对湿度50±2%环境中进行存贮24小时】
4.2.依据ASTM F1929-2012标准，将足够的染料渗透液注入包装中，
覆盖最长的封边，深度约5mm（0.25英寸）（注入方法：可以使用带有软管的注射器通过切口送入染料渗透剂）使染料渗透液与封边保持接触最少5s最多20s的时间，旋转包装使每道封边都能接触渗透液，如有需要可以补充染色液，确保每道封边都能接触足够量的染色液。
通过包装的透明面目力检测密封区，看有无泄漏或者通道出现，也可使用放大镜进行细致的观察
5.检验标准
在包装透明的一边，用肉眼检测封口区域。
即可看见封口区的通道。
检查染色液有无透过密封区到达另一侧或染色液有无通过确定的通道进入密封区内部的迹象
6.注意事项
染色渗透液与包装材料封边的作用时间不应超过20秒
编写：日期：。
甲苯胺蓝染液使用说明书
颜色变化。
准备
使用前新鲜配制甲苯胺蓝工作液。
甲苯胺蓝工作液的配制：1 份甲苯胺蓝染液 A+9 份甲苯胺蓝染液 B，即得甲苯胺蓝工作液。
使用说明
1. 样品处理：石蜡切片样品脱蜡水化：二甲苯脱蜡，2×5min；依次浸入梯度乙醇（无水乙
醇、无水乙醇、95%、85%、75%乙醇）和蒸馏水中各 5min 水化，蒸馏水水洗三遍。
2. 甲苯胺蓝工作液染 1~3min；
3. 蒸馏水漂洗 3 次，
4. 95%乙醇、100%乙醇、100%乙醇快速脱水（每次蘸 10 下，因为在乙醇中可快速褪色）；
5. 二甲苯透明，2×3min，中性树胶封固。
结果
肥大细胞应为蓝紫色/紫红色。
注意事项
1. 需自备梯度乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它
胞，多见于血管周围、黏膜下等。肥大细胞染色意义较大，可用于某些过敏性疾病、肥大细
胞增生性疾病、肥大细胞瘤等的诊断，本产品能够快速染色，且特异性强，效果稳定，能将
肥大细胞的典型形态结构显示清楚。
肥大细胞含有肝素和由组胺组成的颗粒。甲苯胺蓝将肥大细胞染为蓝紫色。由于染料
pH，染料浓度和温度的不同，它可能将细胞染成不同的颜色。蓝色染料可能会有一个红色的
封片剂。
2．第一次使用本试剂盒时建议先取 1~2 个样品做预实验。
温馨提示
为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。
储存温度
2~8℃避光储存。
包装清单
货号
品名
包装
HCY132A
甲苯胺蓝染液 A
10mL
HCY132B
甲苯胺蓝染液 B
100mL
说明书
甲苯胺蓝染色在诊断子宫内膜病变中的研究进展
Ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇａ ｕ ｔ ｈ ｏ ｒ ： ＫＯ ＮＧ Ｘｉ ａ ｎ — ｃ ｈ ａ ｏ ， Ｅ— ｍａ ｉ ｌ ： ｘ ｉ ｕｃ ａ ｈ ｏ ｏ ｋ ＠ｔ ｏ ｍ． ｃ ｏ ｉ ｎ
ｃ ｈ ｏ． Ｈａ ｒ ｂ ｉ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ￡ ， Ｈａ ｒｂ ｉ ｎ １ ５ ０ ０ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ（ Ｃ Ｕ ｔ Ｓ ｈ ｕ － ｍｉ ｎ ） ； Ｔ ｈ ｅ Ｓ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ Ａ ｆ ｉｌ ｆ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ｌ ａ ｏ ｆＨ ｒｂ ａ ｉ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ 子宫 内膜肿瘤 ；癌前状态 ；官腔镜 ；诊断
Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｐｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎ Ｔｏ ｌ ｕ ｉ ｄ ｉ ｎ ｅ Ｂｌ ｕ ｅ Ｓ ｔ ａ ｉ ｎ ｉ ｎ ｇ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ Ｄｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ Ｅｎ ｄ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｉ ａ ｌ Ｐａ ｔ ｈ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｅ ｓ ＣＵ ／Ｓ ｈ ｕ — ｍｉ ｎ， ＫＯ ＮＧ Ｘｉ ａ ｎ—
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x小体的染色 甲苯胺蓝磷酸盐法
x小体的染色甲苯胺蓝磷酸盐法染色是一种对物体表层进行着色的方法，通过改变物体的颜色，实现美化和增强其视觉效果的目的。
在染色中有许多方法和化学物质被应用于不同的物体上。
其中，甲苯胺蓝磷酸盐法是一种常用的染色方法，下面将对其原理和应用进行详细介绍。
甲苯胺蓝磷酸盐法是一种常用的染色方法，它是利用甲苯胺蓝和磷酸盐的相互作用来实现染色效果的。
甲苯胺蓝是一种有机染料，具有很好的亲水性和亲脂性，在水性和油性物体上均能有效染色。
磷酸盐是一种无机化合物，它在染色中所起的作用是增强染色效果和稳定染色剂。
首先，准备甲苯胺蓝和磷酸盐。
甲苯胺蓝可以溶解在水中，所以我们可以直接将其溶解在适量的水中，形成甲苯胺蓝溶液。
磷酸盐可以溶解在无机溶剂中，所以我们可以将其溶解在适量的无机溶剂中，形成磷酸盐溶液。
然后，将需要染色的物体浸泡在甲苯胺蓝溶液中。
甲苯胺蓝具有较好的渗透性，可以在物体表层形成均匀的染色层。
浸泡的时间可以根据物体的大小和染色效果的要求来确定，一般为数分钟到数小时。
接下来，将物体从甲苯胺蓝溶液中取出，并用清水进行洗涤，以去除多余的染料。
清水的用量要足够，以确保物体表层的染料被充分清洗干净。
洗涤的时间可以通过观察水的颜色来判断，当水不再有明显的染料溶出时，即可停止洗涤。
最后，将物体浸泡在磷酸盐溶液中，以固定染色剂。
磷酸盐可以与甲苯胺蓝发生反应，形成稳定的染色层，防止染料在后续使用中褪色。
浸泡的时间一般为数分钟到十几分钟，根据物体的大小和染色效果的要求来确定。
通过上述步骤，就可以使用甲苯胺蓝磷酸盐法对物体进行染色。
该方法具有操作简单、染色效果良好、染料稳定等优点，所以在实际应用中得到了广泛的应用。
甲苯胺蓝磷酸盐法在实际中的应用非常广泛。
它可以用于纺织品、皮革、纸张、玻璃等物体的染色，能够提高它们的装饰性和美观性。
此外，甲苯胺蓝还具有良好的抗紫外线性能，可以用于防晒衣物和防晒窗帘的染色。
在工业领域中，甲苯胺蓝磷酸盐法也被广泛应用于染色检测和颜色测定中。
SD大鼠甲苯胺蓝染色步骤
SD大鼠甲苯胺蓝染色步骤1、甲苯胺蓝染色法鉴定软骨细胞表型将第二代软骨细胞以2x105/ml的密度接种到24孔细胞培养板上，并在与原代培养相同的条件下制备细胞爬片。
常规培养48小时后，进行甲苯胺蓝染色。
具体操作步骤如下：(1)倾去培养液，pbs充分漂洗3次，加入10％的中性甲醛常温下固定30min。
(2)倾去10％的中性甲醛，pbs充分漂洗3次，加入70％的乙醇固定30min除去四价铵离子，以免影响染色。
（3）倒出70%乙醇溶液，用PBS冲洗3次，在空气中干燥，加入甲苯胺蓝乙醇溶液（0.2g甲苯胺蓝溶于100m1的30%乙醇中）染色20分钟(4)pbs充分漂洗3次，迅速用无水乙醇再漂洗1次。
（5）取出爬升件，干燥中性树脂密封件，在电子显微镜下观察并取出。
2.I型胶原免疫细胞化学染色鉴定软骨细胞表型ⅱ代软骨细胞以2×105／ml的密度接种到铺有多聚赖氨酸盖玻片的24孔细胞培养板中，与原代培养条件相同，制作细胞爬片，常规培养48h后行免疫细胞化学法染色。
实验过程严格遵照免疫细胞化学染色试剂盒说明书进行操作，pbs缓冲液代替一抗作为阴性对照组。
具体操作步骤如下：（1）倒出培养基，用冷PBS冲洗3x3分钟，加入1毫升4%多聚甲醛，室温固定15分钟。
（2）使用PBS清洗样品3x3分钟。
每个样品加入1滴新鲜制备的3%H2O2，并在室温下培养10分钟。
（3）使用PBS清洗样品3x3分钟。
每个样品加入0.5 m（0.1%Timton+o.1 mg甘氨酸）的膜穿透溶液，并在冰上培养30分钟。
(4)pbs清洗标本3x3min，每张标本滴加5mg／ml的动物非免疫封闭血清(bsa)0.5ml，室温下封闭1h。
（5）向密封膜中加入50ul以1:150稀释的兔抗鼠II型胶原多克隆抗体，使标本与一抗充分接触，并将其置于4℃的湿盒中过夜。
阴性对照组用PBS缓冲液代替一抗。
（6）用PBS清洗样品3x3min，加入二抗工作液，37℃孵育20min。
最新甲苯胺蓝染色
甲苯胺蓝染色------------------------------------------作者xxxx
------------------------------------------日期xxxx
染色方法：
(一）1。
甲苯胺蓝液
甲苯胺蓝０．5g蒸馏水定容至100ｍl
2．冰醋酸液
冰醋酸0。
5ml蒸馏水定容至1０0ｍｌ
染色步骤
１.组织切片常规脱蜡至水
2。
入甲苯胺蓝液30min
3。
稍水洗
4。
入冰醋酸液分化,直到胞核和颗粒清晰。
5．稍水洗,用冷风吹干
6.二甲苯透明,中性树胶封固
（二)
①切片脱腊至水。
②蒸馏水浸洗３次。
③０.１%甲苯胺蓝液浸染1０mｉn。
④水洗,洗去多余染液。
⑤各级酒精脱水。
⑥二甲苯透明,中性树胶封固。
试剂的配制
称取0.１g甲苯胺蓝,溶于10０ｍl 0。
1M醋酸盐缓冲液中,置室温５天后，即可使用染液于室温下可保存３个月，若放于4℃冰
箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为最佳,若染液存放时间较长,则染色偏淡，应适应延长染色时间.。
甲苯胺蓝染色渗透试验
甲苯胺蓝染色渗透试验
1.目的
根据ASTM F1929-2012标准方法采用染色渗透法检测无菌包装封口泄漏性能2.设备及工具、材料
天平（万分之一）10mL注射器，甲苯胺蓝、曲拉通X-100（氚X-1004）、纯化水、烧杯、试管
3.配制方法
3.1.用天平称量0.5g Triton X-100，与20ml纯化水混合，搅拌或摇动容器，混合二者。
待Triton X-100分散后。
再加入纯化水定容至100ml。
3.2.用天平称量0.05g甲苯胺蓝，加入混合了Triton X-100的溶液中,搅拌或摇动容器混合均匀，即成0.05%甲苯胺蓝染色液。
4.试验方法
4.1.把已灭菌产品包装在试验开始之前，放置于大气温度23±2℃（73.4±3.6oF）和相对湿度50±2%环境中进行存贮24小时。
4.2.依据ASTM F1929-2012标准，将足够的染料渗透液注入包装中，覆盖最长的封边，深度约5mm（0.25英寸）（注入方法：可以使用带有软管的注射器通过切口送入染料渗透剂）使染料渗透液与封边保持接触最少5s最多20s的时间，旋转包装使每道封边都能接触渗透液，如有需要可以补充染色液，确保每道封边都能接触足够量的染色液。
通过包装的透明面目力检测密封区，看有无泄漏或者通道出现，也可使用放大镜进行细致的观察。
5.检验标准
在包装透明的一边，用肉眼检测封口区域。
即可看见封口区的通道。
检查染色液有无透过密封区到达另一侧或染色液有无通过确定的通道进入密封区内部的迹象。
6.注意事项
染色渗透液与包装材料封边的作用时间不应超过20秒。
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软骨细胞甲苯胺蓝染色
1%甲苯胺蓝配制
原液：1g甲苯胺蓝粉末+10ml 70%酒精溶解（据说可保存6个月）
工作液：取上述原液1ml+9ml 1% NaCl 溶解，滤纸过滤（用时新鲜配制）
1% NaCl：1gNaCl + 100ml 蒸馏水（用时新鲜配制）
染色步骤：
（1）爬片用PBS洗2次，直接用4% 多聚甲醛固定于6孔板中1h或更长时间（4度）（2）自来水洗15分钟，最好不要直接冲爬片，易脱片
（3）蒸馏水洗5分钟
（4）加1%甲苯胺蓝浸染2h
（5）去除多余染液，我觉得可以用注射器从6孔板中吸走。
有人说用90%酒精的，但一定要慎重。
否则时间稍长，就会将颜色洗脱。
当然洗脱后仍然可以从（4）开始重复。
（6）镜下观察，满意后晾干，中性树胶封片（或者镜下观察）。