甲苯胺蓝染色

软骨细胞甲苯胺蓝染色

1%甲苯胺蓝配制

原液：1g甲苯胺蓝粉末+10ml 70%酒精溶解（据说可保存6个月）

工作液：取上述原液1ml+9ml 1% NaCl 溶解，滤纸过滤（用时新鲜配制）

1% NaCl：1gNaCl + 100ml 蒸馏水（用时新鲜配制）

染色步骤：

（1）爬片用PBS洗2次，直接用4% 多聚甲醛固定于6孔板中1h或更长时间（4度）（2）自来水洗15分钟，最好不要直接冲爬片，易脱片

（3）蒸馏水洗5分钟

（4）加1%甲苯胺蓝浸染2h

（5）去除多余染液，我觉得可以用注射器从6孔板中吸走。有人说用90%酒精的，但一定要慎重。否则时间稍长，就会将颜色洗脱。当然洗脱后仍然可以从（4）开始重复。

（6）镜下观察，满意后晾干，中性树胶封片（或者镜下观察）。