第13章第5节 分枝杆菌属
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13 分枝杆菌
二、蛋白质
结核菌素可与蜡质D结合，引起机体的迟
发型超敏反应。
三、多糖 使中性粒细胞增多或是特异性表面抗原 四、核酸：rRNA是免疫原，刺激机体产生特异性细胞免疫
五、荚膜：对菌体具有保护作用
1.与巨噬细胞表面的补体3（CR3）结合。
2.所含酶能降解宿主组织大分子物质，为菌
的繁殖提供营养。 3.防止宿主有害物质入菌体，保护菌体。
德国科学家Robert Koch在1882年发现了
一种特殊的微生物——结核杆菌，结核 病的致病细菌。他还证明了这种微生物 是可以在培养基里培养出来的。这一发 现使得结核的实验研究成为现实。
世界结核病防治现状
自发现 MTB 以来，全球约有两亿人死
于TB，且疫情发展日趋严重。
WHO 已将 TB 作为重点控制的传染病之
方法： 目前多用PPD法。取PPD-C和BCG-PPD 各5单位分别注入两前臂皮内，48～72 h后， 红肿硬结小于 5 mm 者为阴性反应；超过 5 mm者为阳性；≥15 mm为强阳性。PPD-C 侧 大于 BCG-PPD 时为感染 , 反之可能为卡介苗接 种所致
结核菌素试验的意义
1.阳性：
① 感染过结核，或接种过BCG，但不一定患病。 ② 强阳性者可能为活动性结核。 2．阴性： ① 未感染过结核菌，或未接种过BCG。
2．肺外感染
结核性脑膜炎 皮肤结核
肾及输尿管结核
骨结核
脊椎结核
肠结核
免疫性
1．人群对结核杆菌的免疫是有菌免疫
2．以细胞免疫为主。
3．机体产生的特异性抗体只对胞外的结核杆菌有作用
4．免疫与超敏反应同时存在。
结核菌素试验
原理 将一定量结核菌素注入皮内，如受试者曾感 染结核杆菌，则在注射部位出现迟发型超敏反应炎 症，判为阳性，未感染者则为阴性。此法可用于检 测可疑患者曾否感染过结核菌、接种卡介苗后是否 阳转以及检测机体细胞免疫功能。 结核菌素试剂有两种：
分枝杆菌属
– 须与非结核分枝杆菌进行鉴别 ➢加热法：非结核分枝杆菌加热2分钟即失去抗酸性，而 结核分支杆菌则不然
• 结核菌素皮肤试验：检测潜伏结核感染的唯 一的方法
• 细菌学基因诊断：PCR • 动物试验
结核分枝杆菌痰标本抗酸染色 结核分枝杆菌尿标本抗酸染色
荧光金胺染色
结核分枝杆菌
涂片镜检的报告方式
半定量报告
未找到抗酸菌 可疑抗酸杆菌； 再送标本检测
石炭酸复红染色：抗 荧光染色：抗酸
酸杆菌（1000×）
杆菌
（450×）
0 1～2/300视野
0 1～2/70视野
1＋
1～9/100视野
2～18/50视野
2＋
1～9/10视野
4～36/10视野
3＋
1～9/视野
4～36/视野
4＋
>9/视野
>36/视野
结核病快速诊断方法
分枝杆菌属
• 分类
–结核分枝杆菌复合群 • 结核分枝杆菌 • 牛型分枝杆菌 • 非洲分枝杆菌 • 田鼠分枝杆菌
–麻风分枝杆菌
–非结核分枝杆菌
根据生长速度
快生长菌 慢生长菌
一、 结核分枝杆菌
Mycobacterium tuberculosis (TB)
流行病学
• 结核病的病原菌
– 1882年德国细菌学家 Koch 证明
培养特性
• 专性需氧，最适pH6.5-6.8 • 生长缓慢：繁殖一代耗时18h • 营养要求高
– 罗氏培养基：甘油、天门冬素、 蛋黄、马铃薯、无机盐类、孔 雀蓝
– 液体培养基 吐温-80 (Tween 80)
培养特性
• 细菌在罗氏培养基上菌落呈颗粒、 结节或花菜状，乳白色或米黄色， 不透明。在液体培养基中由于接 触营养面大，细菌生长较为迅速。 一般1～2周即可生长。临床标本 检查液体培养比固体培养的阳性 率高数倍。
• 结核菌素皮肤试验：检测潜伏结核感染的唯 一的方法
• 细菌学基因诊断：PCR • 动物试验
结核分枝杆菌痰标本抗酸染色 结核分枝杆菌尿标本抗酸染色
荧光金胺染色
结核分枝杆菌
涂片镜检的报告方式
半定量报告
未找到抗酸菌 可疑抗酸杆菌； 再送标本检测
石炭酸复红染色：抗 荧光染色：抗酸
酸杆菌（1000×）
杆菌
（450×）
0 1～2/300视野
0 1～2/70视野
1＋
1～9/100视野
2～18/50视野
2＋
1～9/10视野
4～36/10视野
3＋
1～9/视野
4～36/视野
4＋
>9/视野
>36/视野
结核病快速诊断方法
分枝杆菌属
• 分类
–结核分枝杆菌复合群 • 结核分枝杆菌 • 牛型分枝杆菌 • 非洲分枝杆菌 • 田鼠分枝杆菌
–麻风分枝杆菌
–非结核分枝杆菌
根据生长速度
快生长菌 慢生长菌
一、 结核分枝杆菌
Mycobacterium tuberculosis (TB)
流行病学
• 结核病的病原菌
– 1882年德国细菌学家 Koch 证明
培养特性
• 专性需氧，最适pH6.5-6.8 • 生长缓慢：繁殖一代耗时18h • 营养要求高
– 罗氏培养基：甘油、天门冬素、 蛋黄、马铃薯、无机盐类、孔 雀蓝
– 液体培养基 吐温-80 (Tween 80)
培养特性
• 细菌在罗氏培养基上菌落呈颗粒、 结节或花菜状，乳白色或米黄色， 不透明。在液体培养基中由于接 触营养面大，细菌生长较为迅速。 一般1～2周即可生长。临床标本 检查液体培养比固体培养的阳性 率高数倍。
分枝杆菌属的特点
分枝杆菌属的特点分枝杆菌属（Bacillus）是一类革兰氏阳性的芽孢杆菌，其中包括许多常见的细菌种类。
以下是分枝杆菌属的一些主要特点：1. 形态：分枝杆菌属的细菌是革兰氏阳性细菌，通常呈现为长杆状的细胞形态，有时会有分枝的外观，因此得名“分枝杆菌”。
2. 芽孢形成：这类细菌有很强的芽孢形成能力。
在适宜条件下，它们会形成芽孢，这是一种耐受恶劣环境的休眠状态，可以保护细菌免受极端温度、干旱、紫外线等条件的伤害。
3. 好氧性：大多数分枝杆菌属细菌是好氧生物，也就是说它们需要氧气来生存和进行代谢。
然而，有一些分枝杆菌属细菌也可以在缺氧条件下生长。
4. 好热性：分枝杆菌属有一些细菌种类在高温下生长能力强，甚至可以在70°C以上的温度下生存。
5. 好盐性：部分分枝杆菌属细菌对盐的耐受力较强，可以在含盐的环境中生活。
6. 常见食源细菌：分枝杆菌属的一些细菌是常见的食源细菌，例如肉毒杆菌和炭疽杆菌。
它们会引起食物中毒或其他食源性疾病。
总的来说，分枝杆菌属细菌的特点包括形态特征、芽孢形成能力、好氧性、热耐受性、盐耐受性等。
不同的分枝杆菌属细菌种类可能具有不同的特点。
当然，还有一些其他特点：7. 嗜酸性：某些分枝杆菌属细菌能够在酸性环境中生存和繁殖，这使得它们在一些发酵食品（如酸奶）的制作过程中发挥重要作用。
8. 广泛存在：分枝杆菌属细菌广泛分布于自然界中的土壤、水体、空气等环境中，同时也存在于宠物、农产品和人体等生物体表面和内部。
9. 产生酶和代谢产物：分枝杆菌属的许多细菌能够产生多种酶，例如淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶，以利用和分解广泛的有机物质。
此外，一些分枝杆菌属细菌还能产生抗生素等代谢产物。
10. 重要的工业应用：由于其特殊的生理特性和代谢功能，分枝杆菌属细菌在食品加工、饲料添加剂、环境修复和生物工程等领域中具有重要的应用价值。
需要注意的是，尽管分枝杆菌属细菌中的一些种类对人类和环境具有积极作用，但也有一些种类是致病菌，可以引起人类和动物的疾病。
微生物第章 分枝杆菌属
微生物第章：分枝杆菌属一、概述分枝杆菌属（Bacillus）是革兰氏阳性的芽孢杆菌科中最常见的属之一。
其名称来源于其在培养基上形成的分枝的菌体形态。
该属菌体大小相对较大，形态多样，包括直形、杆形、梭形或球形等不同类型。
分枝杆菌属包括很多种类的细菌，一些种类在自然环境中很常见，有着重要的生态、工业和医学应用价值。
二、生态学和鉴定分枝杆菌属中的细菌生活在许多不同的环境中，包括土壤、水、植物、食品和动物的肠道中。
细菌在自然环境中存在着极为广泛的分布，在枯萎的植物、渣滓、泥炭、海水和河流等地方都可以发现其存在。
在实验室条件下，分枝杆菌属可以通过形态特征、代谢特性和生长特点等鉴定方法进行分离和鉴定。
最常用的方法是通过对分枝杆菌在特定培养基上的生长型态观察和菌落形态分析来确定其种属。
三、病原学分枝杆菌属在人类和动物中可以引起多种疾病，包括但不限于食物中毒、牲畜疾病和人类疾病。
尽管其中很多细菌是无害的或有益的，但某些菌株却可以对人类或动物健康构成威胁。
常见的分枝杆菌病原体包括：芽孢杆菌（B. anthracis）, 糖原芽胞杆菌（B. cereus），乳酸吸收性芽胞杆菌 (B. coagulans) 和枯草杆菌（B. subtilis）等。
分枝杆菌的病原性与其产生的细胞外毒素和内毒素有关，而这些毒素的分泌与生长环境和条件有很大关系。
四、工业应用除了在疾病治疗上的作用外，分枝杆菌属在工业生产中还有广泛的应用。
例如，在饮食加工业中，分枝杆菌可以用于制造豆腐、酱油等食品。
同时，分枝杆菌的一些菌株也可以进行微生物发酵生产出某些化合物，如抗生素、植酸酶、纤维蛋白溶酶等。
这些化合物在医药和普通日常生活中也被广泛使用。
五、分枝杆菌属在自然环境、医学、动物和食品加工业、以及其他工业领域都存在着广泛的应用和研究价值。
随着科学技术的发展和研究范围不断扩大，分枝杆菌属的多样性和作用将会得到更深入的了解和研究。
分枝杆菌属
白喉棒状杆菌
Corynebacterium. diphtheriae
形态与染色
• 革兰阳性，细长弯 曲，一端或两端膨 大呈棒状
• 美蓝或奈瑟染色， 菌体两端或一端可 见着色较深的异染 颗粒
培养特性
• 需氧或兼性厌氧 • 吕氏培养基 • 亚碲酸钾血琼脂平板
变异、抵抗力
• 变异
–形态、菌落和毒力 –S型变为R型
–无鞭毛，不形成芽胞
• 人工培养必须有新鲜血液成分（主要是X因 子和V因子）才能生长，故名嗜血杆菌
培养特性
• 需氧或兼性厌氧 • 生长需要含X因子、V
• 结核病是一种古老的疾病。从新石器 时代人类的遗骨和古代木乃伊的骨关 节的病理组织中，已发现人类在史前 时代已患过结核病。
• 中国医史中，结核病最早记载于《内 经》并形容为“虚痨”之症。古代文 献有提及肺痨为痨虫于肺所致，但未 能确定致病的成因。
• 19世纪，结核病在欧洲和北美大肆 流行，散布到社会的各个阶层，生 活困顿的人群成了结核病的温床。 而且是当时造成死亡的主要原因， 被人们称为“巨大的白色瘟疫”。
出现超敏反应 不表示正患结核病
硬结直径超过 15mm以上
表明可能有活动性结 核，应进一步检查
注射部位有针眼大的 红点或稍有红肿，硬 结直径小于5mm
无结核感染，但应考虑： 原发感染的早期 正患严重结核病 正患其他传染病（麻疹） 细胞免疫功能低下
结核菌素试验应用
• 1. 选择卡介苗接种对象、测定卡介苗接种 后的免疫效果
麻风分枝杆菌
Mycobacterium leprae
麻风分枝杆菌（M. leprae）
• 麻风病的病原菌
–慢性传染病
• 世界各地均有报道
第十三章分枝杆菌属-课件
坏死和全身中毒症状，结核结节形成
3.多糖
与脂质成分结合存在于胞壁中
4.rRNA
刺激机体产生特异性的细胞免疫
5.荚膜
11
（二）所致疾病
结核病，以肺结核常见
传染源：排菌的肺结核患者
传播途径：呼吸道、消化道、皮肤黏膜损伤.
12
临床类型
肺部感染：原发感染
继发感染
肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖器官等
全身播散性结核 消化道结核 皮肤结核
13
结核分枝杆菌 肺泡
吞噬细胞内繁殖释放 原发综合症
(原发灶)肺泡渗出性炎症 淋巴管炎 肺门淋巴结肿大 特异性免疫建立
14
机体抵抗力强 形成结核结节→纤维化→钙化
→自愈
结局
（但病灶内常有细菌的潜伏）
机体抵抗力差 活动性肺结核→干酪样坏死 全身播散→粟粒样结核 或结核性脑膜炎
15
（2）继发感染 内源性感染或外源性感染
第十三章分枝杆菌属
精品jin
分 类： 结核分枝杆菌
非结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌
1882年3月24日德国Koch发现结核病的病原菌 全球处于结核病紧急状态中 回升的原因
艾滋病流行 多种耐药菌株的出现
我国被WHO列为“特别引起警示的国家和地 区”之一
2
第一节 结核分枝杆菌 (M. tuberculosis)
一、生物学性状
“红、馋、懒、顽、变”
（一） 形态与染色
菌体细长微弯，有分枝，排列不规则，多单个散在， 易发生L型，无芽胞、鞭毛,抗酸染色阳性（红色）。
红
抗酸染色 1000× 3
（二）培养特性
专性需氧，pH偏酸6.5-6.8 馋
营养要求高，罗氏花样菌落”，乳白色干燥不透明，
3.多糖
与脂质成分结合存在于胞壁中
4.rRNA
刺激机体产生特异性的细胞免疫
5.荚膜
11
（二）所致疾病
结核病，以肺结核常见
传染源：排菌的肺结核患者
传播途径：呼吸道、消化道、皮肤黏膜损伤.
12
临床类型
肺部感染：原发感染
继发感染
肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖器官等
全身播散性结核 消化道结核 皮肤结核
13
结核分枝杆菌 肺泡
吞噬细胞内繁殖释放 原发综合症
(原发灶)肺泡渗出性炎症 淋巴管炎 肺门淋巴结肿大 特异性免疫建立
14
机体抵抗力强 形成结核结节→纤维化→钙化
→自愈
结局
（但病灶内常有细菌的潜伏）
机体抵抗力差 活动性肺结核→干酪样坏死 全身播散→粟粒样结核 或结核性脑膜炎
15
（2）继发感染 内源性感染或外源性感染
第十三章分枝杆菌属
精品jin
分 类： 结核分枝杆菌
非结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌
1882年3月24日德国Koch发现结核病的病原菌 全球处于结核病紧急状态中 回升的原因
艾滋病流行 多种耐药菌株的出现
我国被WHO列为“特别引起警示的国家和地 区”之一
2
第一节 结核分枝杆菌 (M. tuberculosis)
一、生物学性状
“红、馋、懒、顽、变”
（一） 形态与染色
菌体细长微弯，有分枝，排列不规则，多单个散在， 易发生L型，无芽胞、鞭毛,抗酸染色阳性（红色）。
红
抗酸染色 1000× 3
（二）培养特性
专性需氧，pH偏酸6.5-6.8 馋
营养要求高，罗氏花样菌落”，乳白色干燥不透明，
第5章5 分枝杆菌属
肺部感染 原发感染 肺外感染
继发感染
（三）、免疫性
1.免疫性 感染结核分枝杆菌或接种卡介苗后，机 体可产生对该菌的特异性免疫力。此种免 疫力的维持，依赖于结核分枝杆菌在体内 的存在，这种免疫称为带菌免疫，属于细 胞免疫。细胞免疫与迟发型超敏反应同时 存在，二者均为Ｔ细胞介导的结果。
原发结核
（ 好 细菌繁殖 增殖性炎症 局 结 吸收钙化 病 呼 转 人 肺 菌体成分 部 核 变质性炎症 吸 粟粒性结核 炎 痰 结 扩 道 代谢产物 症 节 渗出性炎症 散 ） 结核性脑膜炎 特点：儿童多见，从感染到发病的时间长约数周。无特异性免 疫，病变易扩散。
继发结核
内源性（原发性活动） 干酪样坏死 结核结节 局部病变发生快
PPD试验强阳性
（2）意义
阳性： 过去/BCG成功，有免疫力 强阳性：现在 活动性 阴性： 无/未接种BCG 假阴性： 感染初期，老年人，严重结核合并其它传染病 使用免疫抑制剂 艾滋病等免疫功能低下者
治疗
治疗原则是早期、联合、规范、足量、 全程用药，尤其以联合和规范用药为重要， 有协同作用，且能降低耐药性的产生。常 用药物有异烟肼、利福平、链霉素、对氨 基水杨酸、乙胺丁醇等。
弱
怕湿热
怕酒精
怕紫外线 怕药物
（一）生物学性状
变异性 形态 菌落 耐药性 毒力 卡介苗： 1908年两位科学家将有毒的牛 型 分枝杆菌接种在含甘油、胆汁、马铃薯的培养 基中，经13年230代传代获得的减毒菌株，即卡 介苗（BCG）沿用至今。
（二）致病性
菌体成分 1.致病物质：
二、麻风分枝杆菌
麻风分枝杆菌俗称麻风杆菌，人是它的唯一宿 主，引起麻风病，1874年由挪威医生汉森发现。
最新分枝杆菌属教学讲义ppt
肺泡 吞噬细胞
吞噬细胞内繁殖
原发性感染 （渗出性炎症）
原发性综合症
全身性粟粒性结核 结核结节 淋巴结病 灶逐渐纤维化和钙化
原发性感染见于学龄儿童及未受过感染的成人。
肺外感染
进入血液循环引起肺内、外播散，如脑、 肾、肠、腹腔
大多与结核分枝杆菌L型有关
三、免疫性
机体抗结核免疫特点：
传染、免疫、超敏反应共存
对常用的抗结核菌药物较耐受 生长温度不如结核分枝杆菌严格 多存在于环境中、为条件致病菌 可引起结核样病变而受到关注 抗原与结核分枝杆菌有交叉
分类
第Ⅰ组：光产色菌 –堪萨斯分枝杆菌，引起人类肺结核样病变
第Ⅱ组：暗产色菌 –瘰疠分枝杆菌，引起儿童淋巴结炎
第Ⅲ组：不产色菌 –鸟-胞内分枝杆菌，可引起结核样病变
防治原则
无特异性预防方法，隔离 早发现，早治疗 目前多采用二三种药联合治疗
第一节 白喉棒状杆菌 (Corynebacterium diphtheriae)
概述
革兰阳性 一端或两端膨大呈棒状，无荚膜、无鞭
肺部感染
原发感染：外源性感染 –多发生于儿童（无免疫力） –原发综合征 (原发病灶、淋巴管炎、肺门淋巴肿 大等) –形成结核结节（即结核肉芽肿），少数病灶扩散， 引起全身TB –转归
原发后感染：外或内源性感染 –多见成人 –病灶局限 引起局部TB、开放性TB（反应剧烈， 干酪性坏死、空洞）
结核分枝杆菌
意义
–48～72h红肿硬结超过5mm,阳性，有免疫力 – 阴性，无免疫力（四种情况除外：1，2，3，4）
应用
选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种 后的免疫效果。结核菌素试验阴性者应 接种或补种卡介苗
在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感 染的流行病学调查,了解人群自然感染率
第九版医学微生物学-第一篇 细菌学 第十三章 分枝杆菌属
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医学微生物学（第9版）
2. 原发后感染（post-primary infection） * 也称继发感染（secondary infection），多见于成年人；
* 大多为内源性感染，原发感染的残留菌复燃（recrudescence）或再激活（reactivation）； * 少数由外源性感染所致。 * 原发后感染特点：病灶局限，一般不累及邻近的淋巴结；病变发生迅速且剧烈（迟发型
牛分枝杆菌（M. bovis）
牛、人类的结核病
非洲分枝杆菌（M. africanum）
非洲国家部分结核病
田鼠分枝杆菌（M. micoti）
野鼠，豚鼠等的结核病变
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医学微生物学（第9版）
结核病（tuberculosis，TB）
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医学微生物学（第9版）
IFN-γ释放试验
1）原理：感染后，体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞，当再次遇到抗原刺激时， 能迅速活化增殖，产生多种细胞因子，其中IFN-γ是关键的细胞因子
2）方法：以结核分枝杆菌与BCG差异蛋白ESAT-6和CFP10多肽刺激致敏的T细胞 分泌IFN-γ，通过酶联免疫斑点试验（ELISPOT）进行检测
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医学微生物学（第9版）
（一）致病物质
二、致病性
1. 脂质（lipid）：主要毒力因子，多为糖脂形式，种类多
医学微生物学（第9版）
2. 原发后感染（post-primary infection） * 也称继发感染（secondary infection），多见于成年人；
* 大多为内源性感染，原发感染的残留菌复燃（recrudescence）或再激活（reactivation）； * 少数由外源性感染所致。 * 原发后感染特点：病灶局限，一般不累及邻近的淋巴结；病变发生迅速且剧烈（迟发型
牛分枝杆菌（M. bovis）
牛、人类的结核病
非洲分枝杆菌（M. africanum）
非洲国家部分结核病
田鼠分枝杆菌（M. micoti）
野鼠，豚鼠等的结核病变
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医学微生物学（第9版）
结核病（tuberculosis，TB）
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医学微生物学（第9版）
IFN-γ释放试验
1）原理：感染后，体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞，当再次遇到抗原刺激时， 能迅速活化增殖，产生多种细胞因子，其中IFN-γ是关键的细胞因子
2）方法：以结核分枝杆菌与BCG差异蛋白ESAT-6和CFP10多肽刺激致敏的T细胞 分泌IFN-γ，通过酶联免疫斑点试验（ELISPOT）进行检测
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医学微生物学（第9版）
（一）致病物质
二、致病性
1. 脂质（lipid）：主要毒力因子，多为糖脂形式，种类多
微生物学：第13章 分枝杆菌属
/肾/肠/骨/关节等结核病) 破损的皮肤黏膜或伤口→皮肤结核 经消化道感染→肠结核(好发部位是回
盲部)
三、免疫性与超敏反应
人体对MTB有相当强的免疫力
(一)免疫性
❖ 结核的免疫为带菌免疫(传染性免疫) ❖ 以细胞免疫为主,免疫力持久 ❖ 机体能产生的抗体中和力弱
(二)免疫与超敏反应 ❖ 免疫防御的同时,引起Ⅳ型超敏反应
❖ 索状因子(分枝菌酸):能破坏宿主细胞线
粒体膜,抑制白细胞游走,引起肉芽肿。
❖ 硫酸脑苷酯:抑制溶菌酶体与吞噬体的结
合,使该菌胞内寄生。 ❖ 蜡质D：佐剂,能引起Ⅳ型超敏反应
Hale Waihona Puke 2. 蛋白质 •菌体内合成,重要的是结核菌素 •单独存在不致病,与蜡质D结合后, 引起较强的迟发型超敏反应。
3.其他(自学)：多糖、核酸、荚膜
(三)免疫与超敏反应
❖ 分别由不同的MTB抗原诱导 细胞免疫:rRNA和十几种分泌蛋白诱导 超敏反应:众多菌体蛋白和蜡质D诱导
❖ 分别由不同的淋巴细胞介导 细胞免疫:Lytl+2- 和Lytl-2-淋巴细胞 超敏反应:Lytl+2+淋巴细胞
(四)结核菌素试验
1.原理:结核菌素+蜡质D→Ⅳ型超敏反应 2.试剂:旧结核菌素(OT)—副作用明显 纯蛋白衍生物(PPDC和BCGPPD)—OT纯化 3.方法:两前臂掌侧各皮内 注射PPDC和BCGPPD 5单 位(目前仍单侧注射PPD), 48～72h后观察结果。
2.原发后感染
(3)开放性TB 浸润型肺结核→干酪样坏死液化 外源性感染→细菌经呼吸道感染 菌体扩散至气管或胸腔→随痰排出→慢 性纤维空洞型肺结核(传染性最强;IV型)
干酪样肺结核 慢性纤维空 洞性肺结核
盲部)
三、免疫性与超敏反应
人体对MTB有相当强的免疫力
(一)免疫性
❖ 结核的免疫为带菌免疫(传染性免疫) ❖ 以细胞免疫为主,免疫力持久 ❖ 机体能产生的抗体中和力弱
(二)免疫与超敏反应 ❖ 免疫防御的同时,引起Ⅳ型超敏反应
❖ 索状因子(分枝菌酸):能破坏宿主细胞线
粒体膜,抑制白细胞游走,引起肉芽肿。
❖ 硫酸脑苷酯:抑制溶菌酶体与吞噬体的结
合,使该菌胞内寄生。 ❖ 蜡质D：佐剂,能引起Ⅳ型超敏反应
Hale Waihona Puke 2. 蛋白质 •菌体内合成,重要的是结核菌素 •单独存在不致病,与蜡质D结合后, 引起较强的迟发型超敏反应。
3.其他(自学)：多糖、核酸、荚膜
(三)免疫与超敏反应
❖ 分别由不同的MTB抗原诱导 细胞免疫:rRNA和十几种分泌蛋白诱导 超敏反应:众多菌体蛋白和蜡质D诱导
❖ 分别由不同的淋巴细胞介导 细胞免疫:Lytl+2- 和Lytl-2-淋巴细胞 超敏反应:Lytl+2+淋巴细胞
(四)结核菌素试验
1.原理:结核菌素+蜡质D→Ⅳ型超敏反应 2.试剂:旧结核菌素(OT)—副作用明显 纯蛋白衍生物(PPDC和BCGPPD)—OT纯化 3.方法:两前臂掌侧各皮内 注射PPDC和BCGPPD 5单 位(目前仍单侧注射PPD), 48～72h后观察结果。
2.原发后感染
(3)开放性TB 浸润型肺结核→干酪样坏死液化 外源性感染→细菌经呼吸道感染 菌体扩散至气管或胸腔→随痰排出→慢 性纤维空洞型肺结核(传染性最强;IV型)
干酪样肺结核 慢性纤维空 洞性肺结核
第5节分枝杆菌属
防治原则
预防：发现和治疗痰菌阳性的患者
新生儿接种卡介苗
35
治疗
一般治疗
合理营养，注意休息
抗结核药物的治疗原则
早期、联合、适量、规律、分阶段治疗和坚持 全程
36
分枝杆菌属要点
结核杆菌的生物学特点
(形态染色、培养特性、抵抗力)
结核菌素试验 卡介苗
37
致病机制尚不清楚
蛋白质
引起迟发性过敏反应
14
所致疾病
结核病
经呼吸道、消化道、 破损皮肤黏膜等进入机 体 侵犯多种组织器官
15
肺部感染－原发感染
多发生于儿童 原发综合征 转归
16
肺部感染－原发后感染
多由原发病灶潜伏的结核菌引起 多发于成年人 病灶多局限 易发生干酪样坏死和形成空洞 为开放性肺结核
L型变异：
结核杆菌经青霉素、环丝氨酸、溶菌酶、 异烟肼作用变成L型结核菌。 耐药性变异： 链霉素、利福平、异烟肼
12
二、致病性与免疫性
13
致病性
多糖 致 病 物 质 脂质
索状因子（破坏细胞线粒体膜，引起肉芽肿） 磷脂（形成结核结节和干酪样坏死） 硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合） 蜡质D（引起迟发性过敏反应）
体液免疫：机体能够产生抗体但无保护性
作用。
20
免疫与超敏反应
细胞免疫为主,迟发型超敏反应同时存在 郭霍现象
21
结核分枝杆菌
免疫和变态反应
皮下注射
结核杆菌
豚鼠
10－14天局部溃烂不愈， 附近淋巴结肿大，细菌 扩散至全身
第13章 分枝杆菌属
* 标准化短程化疗方案：联合使用一组特效抗结核药物
* 六项原则：早期、联合、规律、适量、全程、督导
异烟肼
利福平 一线 链霉素 吡嗪酰胺 乙胺丁醇 二线
阿米卡星
卷曲霉素 丙硫异烟胺 氧氟沙星 帕星肼
第二节 麻风分枝杆菌(M.leprae)
麻风分枝杆菌可引起麻风病。该病是一种慢性传染 病，世界各地均有流行，发展中国家为主。病菌可 侵犯皮肤、黏膜和外周神经组织，晚期可侵入深部 组织和脏器，形成肉芽肿。 从 1985 年以来，麻风病在全球的流行已降低 90% 。 1985年全球有122个国家呈地方流行，到2003年已减 少至 10 个，集中在非、亚和拉丁美洲，高发国家为 印度、尼泊尔和巴西。
结核病流行现状
全球 感染 现患 约20亿 2000万
死亡
我国 活动性肺结核患者 死亡
300万/年
500万 25万/年
世界结核病防治现状
WHO已将TB作为重点控制的传染病之一，并于
1995年起将每年的3月24日定为“世界防治结核病
日”，以提醒公众加深对TB的认识。
世界结核病防治现状
近年有许多报道，肺外结核标本中结核分枝杆菌L型 的检出率比较高，应引起足够重视。
三、免疫性与超敏反应
（一）免疫性
抗结核免疫力的持久性依赖于TB在机体 内的存活，一旦体内TB消亡，抗结核免 疫力也随之消失，这种免疫称为有菌免疫 或传染性免疫。 抗结核免疫主要是细胞免疫，包括致敏T 淋巴细胞和Mφ。
概述
19世纪，结核病在欧洲和北美大肆流行，散布到 社会的各个阶层，生活困顿的人群成了结核病的 温床。而且是当时造成死亡的主要原因，被人们 称为“巨大的白色瘟疫”。 德国科学家Robert Koch在1882年发现了一种特殊 的微生物 ——结核杆菌，结核病的致病细菌。他 还证明了这种微生物是可以在培养基里培养出来 的。这一发现使得结核的实验研究成为现实。
* 六项原则：早期、联合、规律、适量、全程、督导
异烟肼
利福平 一线 链霉素 吡嗪酰胺 乙胺丁醇 二线
阿米卡星
卷曲霉素 丙硫异烟胺 氧氟沙星 帕星肼
第二节 麻风分枝杆菌(M.leprae)
麻风分枝杆菌可引起麻风病。该病是一种慢性传染 病，世界各地均有流行，发展中国家为主。病菌可 侵犯皮肤、黏膜和外周神经组织，晚期可侵入深部 组织和脏器，形成肉芽肿。 从 1985 年以来，麻风病在全球的流行已降低 90% 。 1985年全球有122个国家呈地方流行，到2003年已减 少至 10 个，集中在非、亚和拉丁美洲，高发国家为 印度、尼泊尔和巴西。
结核病流行现状
全球 感染 现患 约20亿 2000万
死亡
我国 活动性肺结核患者 死亡
300万/年
500万 25万/年
世界结核病防治现状
WHO已将TB作为重点控制的传染病之一，并于
1995年起将每年的3月24日定为“世界防治结核病
日”，以提醒公众加深对TB的认识。
世界结核病防治现状
近年有许多报道，肺外结核标本中结核分枝杆菌L型 的检出率比较高，应引起足够重视。
三、免疫性与超敏反应
（一）免疫性
抗结核免疫力的持久性依赖于TB在机体 内的存活，一旦体内TB消亡，抗结核免 疫力也随之消失，这种免疫称为有菌免疫 或传染性免疫。 抗结核免疫主要是细胞免疫，包括致敏T 淋巴细胞和Mφ。
概述
19世纪，结核病在欧洲和北美大肆流行，散布到 社会的各个阶层，生活困顿的人群成了结核病的 温床。而且是当时造成死亡的主要原因，被人们 称为“巨大的白色瘟疫”。 德国科学家Robert Koch在1882年发现了一种特殊 的微生物 ——结核杆菌，结核病的致病细菌。他 还证明了这种微生物是可以在培养基里培养出来 的。这一发现使得结核的实验研究成为现实。
分枝杆菌属
分枝杆菌属
（一）分枝杆菌属的主要特点及分类
分枝杆菌属（Mycobacterium）是一类直或 微弯曲、有分枝生长趋势的杆菌。本属细 菌的主要特点是：①细胞壁脂质含量高， 主要是分枝菌酸；②具有抗酸性，革兰染 色不易着色；③专性需氧，营养要求特殊， 大多数生长缓慢，个别菌种尚不能人工培 养；④不产生内、外毒素及侵袭性酶类， 所致疾病常呈慢性，并伴有肉芽肿。
结核分枝杆菌菌落特点（L-J培养基）
结核分枝杆菌菌落特点（L-J培养基）
（二）结核分枝杆菌 （3）生化反应不活泼，不发酵糖类。 利用热触酶试验可区别结核分枝杆菌复合 群与非结核分枝杆菌，前者阴性，后者大 多阳性；利用烟酸试验及硝酸盐还原试验 可区别结核分枝杆菌（均呈阳性）与牛分 枝杆菌（均为阴性）。
分枝杆菌属
(Mycobacterium)
一类细长，略带弯曲， 呈分枝状生长细菌 抗酸染色阳性 抗酸染色方法：涂片固 定， 浓石炭酸复红 染色，盐酸酒精脱色， 美兰复染 革兰染色阳性，无芽胞、 无荚膜 营养要求较高，常用罗 琴培养基 生长缓慢，2~8周后方可 见菌落 G+C mol%为62%~70%
（二）结核分枝杆菌
2. 临床意义 （2）致病特点 ①感染途径多，主要经呼吸 道感染，偶尔可消化道及破损伤皮肤等感 染；②引起多种组织器官的结核病，以肺结 核最多见；③感染率高，发病率低。
结核分枝杆菌(IV)
生化反应: 糖类发酵(-) 耐热触酶(-) Tween水解(-) 耐热磷酸酶(-)，为结核分枝杆菌和非结核分枝 杆菌鉴定试验
（二）结核分枝杆菌 （4）结核分枝杆菌的抵抗力可归纳为“三耐 四敏”。即：耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿 （1:13 000），对湿热、70%乙醇、紫外线及 常用抗结核药敏感（但长期用药易产生耐药 性）。 （5）结核分枝杆菌易发生毒力变异、耐药性 变异及L型变异。
（一）分枝杆菌属的主要特点及分类
分枝杆菌属（Mycobacterium）是一类直或 微弯曲、有分枝生长趋势的杆菌。本属细 菌的主要特点是：①细胞壁脂质含量高， 主要是分枝菌酸；②具有抗酸性，革兰染 色不易着色；③专性需氧，营养要求特殊， 大多数生长缓慢，个别菌种尚不能人工培 养；④不产生内、外毒素及侵袭性酶类， 所致疾病常呈慢性，并伴有肉芽肿。
结核分枝杆菌菌落特点（L-J培养基）
结核分枝杆菌菌落特点（L-J培养基）
（二）结核分枝杆菌 （3）生化反应不活泼，不发酵糖类。 利用热触酶试验可区别结核分枝杆菌复合 群与非结核分枝杆菌，前者阴性，后者大 多阳性；利用烟酸试验及硝酸盐还原试验 可区别结核分枝杆菌（均呈阳性）与牛分 枝杆菌（均为阴性）。
分枝杆菌属
(Mycobacterium)
一类细长，略带弯曲， 呈分枝状生长细菌 抗酸染色阳性 抗酸染色方法：涂片固 定， 浓石炭酸复红 染色，盐酸酒精脱色， 美兰复染 革兰染色阳性，无芽胞、 无荚膜 营养要求较高，常用罗 琴培养基 生长缓慢，2~8周后方可 见菌落 G+C mol%为62%~70%
（二）结核分枝杆菌
2. 临床意义 （2）致病特点 ①感染途径多，主要经呼吸 道感染，偶尔可消化道及破损伤皮肤等感 染；②引起多种组织器官的结核病，以肺结 核最多见；③感染率高，发病率低。
结核分枝杆菌(IV)
生化反应: 糖类发酵(-) 耐热触酶(-) Tween水解(-) 耐热磷酸酶(-)，为结核分枝杆菌和非结核分枝 杆菌鉴定试验
（二）结核分枝杆菌 （4）结核分枝杆菌的抵抗力可归纳为“三耐 四敏”。即：耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿 （1:13 000），对湿热、70%乙醇、紫外线及 常用抗结核药敏感（但长期用药易产生耐药 性）。 （5）结核分枝杆菌易发生毒力变异、耐药性 变异及L型变异。
第13章分枝杆菌属
噬体与溶酶体的融合，结核杆菌在细胞中长期存活
17
• 致病物质
⑵蛋白质--多种（结核菌素）
与蜡质D一起注入体内引起迟发型超敏反应； 具有抗原性，但其抗体无保护作用；
⑶多糖—使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润
(4)核酸—可刺激机体产生特异性细胞免疫; (5)荚膜– 保护菌体，与细胞表面受体结合,侵入细胞.
9
10
11
一、生物学性状----形态与染色
抗酸染色阳性（红色）
细长，略带弯曲，
人工培养呈多形性，
常聚集成条索状
抗酸染色 1000×
12
抗酸染色
初染 脱色 5%石炭酸复 红 3%盐酸乙醇 碱性美兰
复染 结果
13
二、生物学性状---培养特性
三 要 点
专性需氧 生长缓慢 营养要求高
生长现象
6
7
世界结核病防治现状
结核病仍然是当今一个主要传染病杀手 ——世界卫生组织《2013年全球结核 病报告》（2013.10.17） 2012年有870万新发病例，有140万人死于 结核病。
13% HIV co-infected
http://www.who.int/iris/bitstream/10665/75938/1/9789241564502_eng.pdf
2.方法：
常规试验： OT或PPD 5单位
皮内注射
两前臂 内侧
48－72h
硬结直径
38
⑶.结果分析： 强阳性：＞1.5cm，可能有活动性结核病（幼儿诊断结核 病参考） 阳性：0.5-1.5cm，感染过结核杆菌或卡介苗接种成功 阴性：＜ 0.5cm， 未感染过结核或未注射卡介苗
阴性者需排 除以下情况
17
• 致病物质
⑵蛋白质--多种（结核菌素）
与蜡质D一起注入体内引起迟发型超敏反应； 具有抗原性，但其抗体无保护作用；
⑶多糖—使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润
(4)核酸—可刺激机体产生特异性细胞免疫; (5)荚膜– 保护菌体，与细胞表面受体结合,侵入细胞.
9
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11
一、生物学性状----形态与染色
抗酸染色阳性（红色）
细长，略带弯曲，
人工培养呈多形性，
常聚集成条索状
抗酸染色 1000×
12
抗酸染色
初染 脱色 5%石炭酸复 红 3%盐酸乙醇 碱性美兰
复染 结果
13
二、生物学性状---培养特性
三 要 点
专性需氧 生长缓慢 营养要求高
生长现象
6
7
世界结核病防治现状
结核病仍然是当今一个主要传染病杀手 ——世界卫生组织《2013年全球结核 病报告》（2013.10.17） 2012年有870万新发病例，有140万人死于 结核病。
13% HIV co-infected
http://www.who.int/iris/bitstream/10665/75938/1/9789241564502_eng.pdf
2.方法：
常规试验： OT或PPD 5单位
皮内注射
两前臂 内侧
48－72h
硬结直径
38
⑶.结果分析： 强阳性：＞1.5cm，可能有活动性结核病（幼儿诊断结核 病参考） 阳性：0.5-1.5cm，感染过结核杆菌或卡介苗接种成功 阴性：＜ 0.5cm， 未感染过结核或未注射卡介苗
阴性者需排 除以下情况
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(1) 含义 : 用结核菌素来测定机体对结核杆菌是否
具
有免疫力的一种皮肤试验。
（2）原理：根据结核杆菌感染、免疫、变态反应
三者共存，测定机体对结核杆菌的菌体成分有无 迟发型超敏反应，从而推测机体是否感染过结核 杆菌，有无免疫力。
(3) 试剂 、方法：OT、PPD （4）用途
皮内注射
◆筛选BCG接种对象，检测BCG免疫效果 ◆辅助婴幼儿结核病的诊断 ◆测定机体的细胞免疫 ◆流行病学调查
5%石炭酸复红加温染色
3%盐酸酒精脱色 美蓝复染 抗酸菌染成红色
非抗酸菌和背景则 被复染成蓝色
染成红色 抗酸菌不被脱色， 仍保持红色
2.培养特性
◆专性需氧 ◆营养要求高 —— 罗氏（ Lowenstein-Jensen ）固 体培养基 ◆生长缓慢： 18 ～ 24h/ 代，一般 2 ～ 4 周可见菌落 生长 菌落特点: 呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米 黄色，不透明，表面粗糙
第五节
分枝杆菌属
(Mycobacterium)
结核分枝杆菌
(Mycobacterium tuberculosis)
结核分枝杆菌
◆结核病 ◆世界上1/3人感染，70%在亚洲 ◆世界防治结核病日(3月24)
一.生物学性状
1.形态与染色 ◆抗酸染色阳性 ◆L型——Much颗粒
齐尼（Ziehl-Neelsen)抗酸染色法
二、所致疾病
◆感染方式
–呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机体
◆所致疾病
–疾病种类多样化 –肺结核最常见
三、免疫性
◆ MTB属胞内寄生菌，以细胞免疫为主 ◆ 结 核 的 免 疫 属 于 感 染 免 疫 (infection immunity)，又称有菌免疫
培养
3.抵抗力
◆耐干燥、耐酸、耐碱 ◆对酒精、湿热和紫外线敏感。 ◆对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙胺
丁醇、卡那霉素、对氨基水杨酸等抗痨药物敏 感，但长期用药容易出现耐药性
4.变异性
毒力变异——BCG
耐药性变异 L型变异
二、致病性
（一）致病物质
1、特殊的菌体成分：脂质、蛋白质
2、其他：分枝杆菌生长素、多糖
四、微生物学检查
1. 直接涂片镜检
2. 分离培养 3. 动物试验 4. 快速诊断
五.防治原则
预 防
治 疗
◆控制传染源
——及时发现和治疗结 核病人；
◆一般治疗
◆抗结核药物
早期 全程 联合 适量 规则
◆提高对MTB的抵 抗力——接种BCG