药物分析chapter10

CH2OH HO C O OH
O
结构特点： 结构特点： 位为羰基、 位间为双键， ① A环3位为羰基、4，5位间为双键，形 成共轭体系，标记为： 酮基（ 成共轭体系，标记为：Δ4-3-酮基（又称 α、β不饱和酮结构），或写成: Δ4不饱和酮结构），或写成: 结构），或写成 C3=O； =O； 11位上有羰基或羟基 位上有羰基或羟基； ② C环11位上有羰基或羟基； 17位上有 位上有α 醇酮基侧链 ③ D环17位上有α- 醇酮基侧链 （
甾体激素类药物多由其它甾体化合物 或结构类似的其它甾体激素经结构改造而 来，所以可能带来原料、中间体、异构体、 所以可能带来原料、中间体、异构体、 降解产物以及试剂和溶剂等杂质。有些杂 降解产物以及试剂和溶剂等杂质。 质与该甾体激素药物结构类似， 质与该甾体激素药物结构类似，也具有一 定的药理作用而又互不相同， 定的药理作用而又互不相同，因此在甾体 激素类药物的质量控制中， 其他甾体” 激素类药物的质量控制中，“其他甾体” 的限度检查显得很重要。 的限度检查显得很重要。
C O CH2OH
），并且多数还具α 羟基。 ），并且多数还具α-羟基。 并且多数还具
二、雄性激素及蛋白同化激素 （1）临床常用的雄性激素为睾丸素（睾酮） 临床常用的雄性激素为睾丸素（睾酮） 睾丸素 的衍生物，如丙酸睾丸素、苯乙酸睾丸素。 的衍生物，如丙酸睾丸素、苯乙酸睾丸素。 （2）常用的蛋白固化激素有苯丙酸诺龙（苯 常用的蛋白固化激素有苯丙酸诺龙（ 丙酸去甲睾酮）、康力龙、康复龙等。 ）、康力龙 丙酸去甲睾酮）、康力龙、康复龙等。
第一节 基本结构和分类
甾体激素类药物均具有环戊烷骈多氢 甾体激素类药物均具有环戊烷骈多氢 菲母核，基本骨架为： 母核，基本骨架为：
C
12 11 19 1 2 9 18 13 21 20
C
D
17
16 15
C
14 8 7 6
A
3 5 4
10
B
一、肾上腺皮质激素 常用的有氢化可的松、醋酸可的松、 常用的有氢化可的松、醋酸可的松、 氢化可的松 醋酸泼尼松等。 醋酸泼尼松等。
加水稀 再观察 释后
H2SO4
观察颜色、 观察颜色、荧光
（二）官能团的反应 1、 C17 －α－醇酮基的反应 皮质激素C 醇酮基具有还原性， 皮质激素C17-α-醇酮基具有还原性， 能与许多氧化剂，如氨制AgNO3、斐林 能与许多氧化剂，如氨制AgNO3、 AgNO3 试剂、四氮唑盐反应。其中以四氮唑盐的 试剂、四氮唑盐反应。其中以四氮唑盐的 四氮唑盐 显色反应最为常用， 显色反应最为常用，不但可用作层析法的 显色剂，还可用于含量测定。 显色剂，还可用于含量测定。
一、其它甾体的检查
我国药典和一些国家近版药典，采用 我国药典和一些国家近版药典，采用TLC法或 法或 HPLC法检查甾体激素类药物中的“其它甾体”。因为 法检查甾体激素类药物中的“其它甾体” 该法具有简便、快速、灵敏、分离效果好等优点， 该法具有简便、快速、灵敏、分离效果好等优点，而广 泛用于甾体激素药物的鉴别、 泛用于甾体激素药物的鉴别、检查结构相似的杂质等质 量控制的方法。 量控制的方法。 采用高低浓度对比法进行， 采用高低浓度对比法进行，即供试液与对照液均为 同一物，但仅浓度有所不同。 同一物，但仅浓度有所不同。 结果判断： 结果判断：中国药典正文中对供试品规定了杂质斑 点数目和每个杂质斑点不得超过的限量。 点数目和每个杂质斑点不得超过的限量。
二、硒的检查
本类中一些药物在后工序用二氧化硒脱氢， 本类中一些药物在后工序用二氧化硒脱氢， 故应检查硒。 故应检查硒。
三、残留溶剂检查（甲醇和丙酮的检查） 残留溶剂检查（甲醇和丙酮的检查）
此为地塞米松磷酸钠残留溶剂检查，中国药 此为地塞米松磷酸钠残留溶剂检查， 典采用GC法检查。 法检查。 典采用 法检查
CH2OCOCH3 C=O O OH
OH
+
H2O
N N N N
O
O
CH C=O
+ OH -
OH
OH
+
N N
N N
+ CH3COOH
O
红色
2、 酮基的呈色反应 机理：分子中C =O能与 机理：分子中C3 =O 和 C20 =O能与 一般羰基试剂如：2，4-二硝基苯肼、异 一般羰基试剂如： 二硝基苯肼、 烟肼、硫酸苯肼等显色。主要是C 烟肼、硫酸苯肼等显色。主要是C3 =O 与 异烟肼缩合生成异烟腙而呈黄色。 异烟肼缩合生成异烟腙而呈黄色。 缩合生成异烟腙而呈黄色
盐酸酸性条件下： 盐酸酸性条件下： Δ4-3＝O：即刻反应 Δ1，4-3＝O ：1Байду номын сангаас3min C20＝ C20＝O ：长时间
3、甲酮基或活性亚甲基的反应 C=O（甲酮基） 含H3C-C=O（甲酮基）和活性亚甲基 的激素类药物与亚硝基铁氰化钠、芳香醛、 的激素类药物与亚硝基铁氰化钠、芳香醛、 间二硝基苯反应呈色。 间二硝基苯反应呈色。 （1）甲酮基的呈色反应： 甲酮基的呈色反应： 如黄体酮
六、高效液相色谱法 在一定的色谱条件下， 在一定的色谱条件下，比较甾体激素 样品与其对照品峰的保留时间进行鉴别。 样品与其对照品峰的保留时间进行鉴别。 一般都规定在含量测定项下的高效液相 色谱图中， 色谱图中，供试品峰的保留时间进行应 与对照品峰的保留时间一致。 与对照品峰的保留时间一致。
第三节 特殊杂质检查
1、与碱性酒石酸铜试液反应 铜（Ⅱ）在碱性条件下可被还原物质还原为红色 的氧化亚铜沉淀。 的氧化亚铜沉淀。如：中国药典鉴别氢化可的松
CH2OH C=O HO OH
＋ 2Cu
2+
+ 4OH
-
OH CH
O
OH
C=O HO OH
+ Cu2O + H2O
橙红色
O
2、与氨制硝酸银试液的反应 银（Ⅰ）在碱性条件下可被还原物质还原为黑色的 金属银沉淀。 金属银沉淀。如：中国药典鉴别醋酸去氧皮质酮
O H
H O
C3
雄性激素与 肾上腺皮质激 蛋白同化激 雌激素 孕激素 素 素 C3 ＝O C3 ＝O C3 －OH C3 ＝O Δ4-3=O Δ4-3=O A环为苯环 Δ43=O 或Δ1，4-3＝O 有的两个 有的一个 （ C13 ） C13有一个 有两个 角甲基
C10 C13 有两个角甲基
C17
（三）孕激素 又称黄体素或孕酮， 又称黄体素或孕酮，临床上主要为黄体 酮、己酸孕酮、安宫黄体酮和甲地孕酮等。 己酸孕酮、安宫黄体酮和甲地孕酮等。 酮基（ 不饱和酮结构 结构）； ① A环Δ4-3-酮基（α、β不饱和酮结构）； 17位上有甲基酮，有些具有羟基； 位上有甲基酮 ② D环17位上有甲基酮，有些具有羟基；
CH3 C O
O
（四）雌激素 临床上常用雌二醇及其各种酯和炔雌醇 临床上常用雌二醇及其各种酯和炔雌醇 雌二醇 及其衍生物，以及活性的雌酮、雌三醇等。 及其衍生物，以及活性的雌酮、雌三醇等。 环为苯环， 位上有酚羟基，10位无角 ① A环为苯环，3位上有酚羟基，10位无角 甲基； 甲基； 17位上有羟基或羰基 位上有羟基或羰基， ② D环17位上有羟基或羰基，有的还有乙炔 基。
7、酯的反应 一些甾体激素类药物具有醋酸酯、 一些甾体激素类药物具有醋酸酯、戊酸酯及 已酸酯的结构，可先行水解， 已酸酯的结构，可先行水解，根据水解产物来鉴 别。本类药物C17或C21位上羟基的酯，可发生水 本类药物C17或C21位上羟基的酯， C17 位上羟基的酯 解反应，生成相应的酸与醇，如为醋酸酯，水解 解反应，生成相应的酸与醇，如为醋酸酯， 后生成的醋酸可与乙醇反应， 后生成的醋酸可与乙醇反应，生成有香气醋酸乙 酯。 戊酸或己酸酯类水解后可生成有特臭的戊酸或 己酸，进行鉴别。 己酸，进行鉴别。
OH
+
+ N=N
COO
OH
SO3-
H
+
苯甲酸雌二醇
COO N=N SO3H
5、炔基的沉淀反应 含炔基的甾体激素，如炔雌醇、炔诺酮， 含炔基的甾体激素，如炔雌醇、炔诺酮， 遇硝酸银试液， 遇硝酸银试液，即生成白色的炔雌醇银盐沉 淀及白色炔诺酮银沉淀。 淀及白色炔诺酮银沉淀。 6、卤素的反应（有机氟的呈色反应） 卤素的反应（有机氟的呈色反应） 一些含有氟的甾体激素药物（ 一些含有氟的甾体激素药物（如醋酸氟 轻松、醋酸地塞米松等），以氧瓶燃烧后生 轻松、醋酸地塞米松等），以氧瓶燃烧后生 ）， 成无机氟化物， 成无机氟化物，再与茜素氟蓝及硝酸亚铈起 呈色反应。 呈色反应。
CH2OCOCH3 C=O
＋2Ag
OH CH
+
+ 2OH
-
NH3
O
OH
C=O
+2Ag +2Ag
黑色
O
+ CH3COOH
3、与碱性四氮唑盐显色反应 氯化三苯四氮唑（或蓝四氮唑） 氯化三苯四氮唑（或蓝四氮唑）在碱性条件下可被 还原物质还原为红色的单甲鐕 或蓝色的双甲鐕 还原物质还原为红色的单甲鐕（或蓝色的双甲鐕）。
二、制备衍生物测定熔点
利用甾醇、 利用甾醇、甾酮类药物与一些试剂反应生成 缩氨脲， 酯、肟、缩氨脲，或用醇制碱液水解甾体酯类生 成相应的母体，然后测定它们的熔点进行鉴别。 成相应的母体，然后测定它们的熔点进行鉴别。 （一）缩氨基脲的生成 如苯丙酸诺龙（甾酮） 如苯丙酸诺龙（甾酮）+ 缩氨脲 苯丙酸诺龙缩氨脲 （二）酯的水解 如丙酸睾丸素
OH
O
（1）结构特征（两种激素之共同点）： 结构特征（两种激素之共同点）： ① A环3位Δ4-3-酮基（又称α、β不饱和 酮基（又称α 酮结构）； 结构）； ② D环17位上无侧链，多为羟基。 17位上无侧链 多为羟基。 位上无侧链， （2）两种激素结构之不同点： 两种激素结构之不同点： 结构之不同点 蛋白同化激素10位上大多无角甲基， 蛋白同化激素10位上大多无角甲基， 10位上大多无角甲基 有的4位有卤素。 有的4位有卤素。