脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区ACP_CCO活性的影响
银丹心脑通软胶囊对VD大鼠学习记忆能力和海马CA1区AchE、NR2B、Bcl-2、Bax表达 影响的实验研究
目录摘要 (02)略缩词表 (04)前言 (05)材料与方法 (07)结果 (12)讨论 (19)结论 (24)参考文献 (25)致谢 (29)英文摘要 (30)论文原创性声明 (32)综述 (33)附录 (46)附：临床能力考核有关材料：临床轮转考核表(按时间顺序)学术活动情况表(按时间顺序)临床能力考试及学位答辩情况表银丹心脑通软胶囊对VD大鼠学习记忆能力及海马CA1区AchE、NR2B、Bcl-2、Bax表达影响的实验研究专业：神经病学研究生：刘欣导师：刘芳刘伟民摘要目的研究银丹心脑通软胶囊对血管性痴呆（VD）模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区乙酰胆碱酯酶(AchE)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NR2B)、Bcl-2、Bax的影响，探讨银丹心脑通软胶囊防治VD部分可能的机制。
方法采用“两血管阻断+硝普钠降压”法制作VD模型，大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、银丹心脑通软胶囊低剂量治疗组、银丹心脑通软胶囊中剂量治疗组、银丹心脑通软胶囊高剂量治疗组，各治疗组分别以银丹心脑通软胶囊0.24g/(kg .d)、0.48 g/(kg .d)、0.96 g/(kg .d)灌胃，余以生理盐水代替，连续28天。
采用Morris水迷宫对大鼠学习记忆能力进行检测；以HE染色观察大鼠海马CA1区病理形态学变化；免疫组织化学方法观察大鼠海马CA1区AchE、NR2B、Bcl-2、Bax的阳性蛋白表达情况，采用Image-pro plus6.0图象分析软件计算平均密度值。
所有数据用SSPS13.0软件进行统计分析。
结果 1.模型组与正常组及假手术组比较学习记忆能力显著下降（P<0.01）；中、高剂量组与模型组比较学习记忆能力明显改善（P<0.05）；低剂量组与高剂量组比较有显著性差异（P<0.05）。
2.正常组及假手术组大鼠海马CA1区未见明显病理变化；模型组大鼠海马CAl 区见大量神经元变性、坏死，细胞数目明显减少，排列紊乱；各治疗组大鼠海马CAl区可见散在变性神经元，细胞体积、形态与模型组比更接近正常组。
拟血管性痴呆模型大鼠海马内乙酰胆碱含量变化及参知健脑方对其的干预作用
拟血管性痴呆模型大鼠海马内乙酰胆碱含量变化及参知健脑方对其的干预作用林海;黄雪琪;孙塑伦【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2008(036)005【摘要】目的:探讨拟血管性痴呆大鼠海马乙酰胆碱(Ach)含量变化及参知健脑方对其的干预作用.方法:运用高效液相电化学工作站的方法检测假手术组、模型组及治疗组大鼠海马内乙酰胆碱的含量.结果:模型组大鼠海马乙酰胆碱含量与假手术组比较明显降低,且有极显著性差异(JP＜0.01);治疗组大鼠海马乙酰胆碱含量与模型组比较明显升高,差异显著(P＜0.05).结论:模型组大鼠海马乙酰胆碱含量下降,说明"正虚"是血管性痴呆的致病因素.而参知健脑方能够升高模型大鼠海马Ach含量,证明"扶正"治则、治法的正确性和有效性.【总页数】2页(P24-25)【作者】林海;黄雪琪;孙塑伦【作者单位】中国中医科学院广安门医院,北京,100053;国家中医药管理局对台港澳中医药交流合作中心,北京,100027;中国中医科学院广安门医院,北京,100053【正文语种】中文【中图分类】R749.1+6【相关文献】1.参知健脑方对拟血管性痴呆大鼠海马CA1区的保护作用 [J], 林海;崔巍;孙塑伦;张壮;高颖;闫颜芳;赵彦青2.血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡与乙酰胆碱含量变化 [J], 张丽香;蔺心敬;李吕力;肖继东;王铁建;罗永坚3.补肾健脑方对血管性痴呆大鼠皮质和海马脑血流量及乙酰胆碱含量的影响 [J], 刘永惠;李少为;郑清莲4.戟天健脑方对老龄血管性痴呆模型大鼠海马IL-1β、TNF-α的影响 [J], 郭明冬;刘美霞;韦云;欧阳竞锋5.补肾健脑方对血管性痴呆大鼠乙酰胆碱和海马区ERK1和ERK2表达的影响 [J], 刘永惠;李少为;郑清莲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脑力苏胶囊对血管性痴呆小鼠脑组织NGF表达的影响
（ ＬＳ 法 ） 定给 药后 Ｖ 小鼠 脑 组 织 内神 经生 长 因子 （ Ｇ ） 含 量 变 化 。结 果 ： 药 １ 后 ， Ｄ小 鼠脑 内神 经生 长 因 Ｅ ＩＡ 测 Ｄ ＮＦ的 给 ５ｄ Ｖ 子 （ Ｇ ） 模 型对 照 组 显 著 增 高 。结 论 ： 力 苏胶 囊 可增 加 Ｖ Ｎ Ｆ较 脑 Ｄ大 鼠 脑 内神 经 生 长 因子 （ Ｇ ） Ｎ Ｆ 的含 量 ， 能 与改 善 Ｖ 小 可 Ｄ
ｍ ｉ ｅ ＶＤ． ｃ
［ ｙｗ ｒｓ ｍ ｎ ｌ ｕｃｐｕ ；ａｃｌ ｅ ｅｔ ｉ ；ｅ ｅｇｏ ｔ ｃｏ （ Ｇ ） Ｋｅ ｏ ｄ ］ ｅｔ ａｓｌ ｖｓｕ ｒ ｍ ｎｉ ｍｃ ｎｒ ｒｗｈｆ ｔｒ Ｎ Ｆ ａＳ ｅ ａｄ ａ ｅ ｖ ａ
随着 人 口 的老 龄 化 ， 呆 已成 为 老 年 人 的 常 见 病 、 痴 多
［ ｂ ｔ ｃ ］ ｊｃｉｅＴ ｔ ｙ ｈ ｆ ｃ ｏ ａ Ａ ｓ ａｔ Ｏｂｅｔ ：ｏ ｕ ｅｅｅｔ ｆ ｒｉ ｏｉ ａｓｌ ｏ ｒｉ ｎｒｅ ｒｗｈ ａｔ （ Ｇ ）ｅｐｅｓ ｎｉ ｖｓｕａ ｒ ｖ ｓ ｄ ｔ ｆ ｂ ｎ—Ｓｖ ｔ ｐｕｅ ｎｂａ ｅｖ ｏ ｔ ｆｃ ｒ Ｎ Ｆ ｘｒｓｉ ａｃｌｒ ｅｃ ｎ ｇ ｏ ｏ ｎ
Ｊｎ ２ ０ ｕ ． ０１
Ｖ １３ Ｎ ． ０． ６ ｏ ３
现代临床 Nhomakorabea医
学
２１ ０ ０年 ６月
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＭＯＤＥ Ｉ ＣＡＬ ＭＥＤＩ ＮＥ ＲＮ ＣＬ ＮＩ ＣＩ
脑力苏胶囊对血管性痴呆小鼠GSH_Px表达的影响_梅建伟
力苏各组表现明显 ( P < 0. 01)。结论: 脑力苏胶囊可能通 过提高脑组织中 GHS- Px活性, 从而提高血管性痴呆小
鼠的学习记忆能力。
关键词: 脑 力苏胶囊; 血管性痴呆小鼠; 造模情况; G SH - Px活力
中图分类号: R285. 5
文献标识码: A 文章编号: 1673- 7717( 2010) 08- 1630- 03
Men tal Su Capsu le on Vascu la r Dem entia in M ice the Exp ression of GSH - Px
M EI Jian-w e,i ZHANG Y ing-qiang, L IU Zhen-hua, ZHANG X iao-ya ( Chengdu U n ivers ity of TCM, Ch engdu 610075, S ichuan, Ch ina)
K ey w ords: m enta l Su capsule; v ascu la r dem entia m ice; m ode ling situations; GSH - Px ac tiv ity
血管性痴呆 ( VD ) 是由 脑血管 病引起 的智能障 碍性疾
病, 主要是指脑血管 病后记 忆功能 明显衰退 以及至 少一项
(成都 中医药大学, 四川 成都 610075)
摘 要: 目 的: 研究脑力苏胶囊对血管性痴呆 ( VD )小鼠 一般情 况和 G SH - Px 表达 的影响, 探讨 该方药 对大
脑的部份保护作用及其防治机制。方法: 采用反复夹闭颈总动 脉方法建立 血管性痴 呆小鼠模型。将 造模成 功后
的小鼠随机分成 5组: 假手术组; 模型对照组; 西药治 疗组; 脑力苏胶囊高剂量组和脑力苏胶囊低剂量组。 造模成
康欣胶囊对血管性痴呆模型大鼠免疫及智力的影响
康欣胶囊对血管性痴呆模型大鼠免疫及智力的影响刘锡棐;杜建;蔡晶;刘新峰;徐格林;朱武生;周广怡【期刊名称】《中国脑血管病杂志》【年(卷),期】2007(004)006【摘要】目的研究康欣胶囊对血管性痴呆(VaD)大鼠神经细胞的保护作用及其对大鼠免疫系统调节作用和智力改善的影响.方法将SD大鼠30只,随机分为康欣胶囊组(10只)、双氢麦角碱组(10只)和对照组(10只),每组雌雄各半.用电灼烧封闭双侧椎动脉并摘除左侧性器官法制作VaD模型大鼠.造模前、后分别给予3组大鼠康欣胶囊、双氢麦角碱和蒸馏水灌胃1个月后,进行行为学检测;电镜观察各组VaD大鼠下丘脑、海马神经细胞超微结构;流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8值.结果康欣胶囊组游泳能力为(1098±221)cm,空间探索次数为(3.4±1.1)次,高于双氢麦角碱组游泳能力[(862±114)cm]、空间探索次数[(2.2±1.0)次]和对照组的游泳能力[(743±155)cm]、空间探索次数[(1.6±1.2)次],P＜0.01,康欣胶囊组逃避潜伏期时间为(33±22)s,短于双氢麦角碱组[(44±21)s]和对照组[(44±20)s],P＜0.0l.康欣胶囊组下丘脑、海马CA1区神经细胞的线粒体水肿、嵴断裂及细胞核固缩情况,明显轻于对照组、双氢麦角碱组.康欣胶囊组的CD4/CD8值(2.7±0.7)高于双氢麦角碱组(1.9±0.5)和对照组(1.8±0.3),P＜0.05.结论康欣胶囊能增强VaD大鼠免疫力,并改善神经细胞损伤,提高VaD大鼠记忆力.【总页数】5页(P263-267)【作者】刘锡棐;杜建;蔡晶;刘新峰;徐格林;朱武生;周广怡【作者单位】210002,南京军区南京总医院神经内科;福建中医学院中西医结合老年病研究所;福建中医学院中西医结合老年病研究所;210002,南京军区南京总医院神经内科;210002,南京军区南京总医院神经内科;210002,南京军区南京总医院神经内科;210002,南京军区南京总医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R743;R285【相关文献】1.康欣胶囊对血管性痴呆模型大鼠皮质顶叶、海马CA1区神经生长因子表达的影响 [J], 蔡晶;杜建;葛振华;周凡;周琳瑛;陈莲云2.康欣胶囊及其拆方对肾虚血瘀型血管性痴呆大鼠模型性激素雌二醇(E2)、睾酮(T)及E2/T比值的影响 [J], 刘锡棐;杜建;蔡晶;李秀兰;陈振斌3.康欣胶囊及其拆方对血管性痴呆肾虚血瘀型模型大鼠外周血CD3、CD4、CD8和CD4/CD8的影响 [J], 刘锡棐;杜健;蔡晶;陈旭征;葛振华;周凡;周琳瑛;陈振斌;刘新瑜4.康欣胶囊对血管性痴呆患者脑血流灌注的影响 [J], 毛敬洁;王宏;蔡晶;沈双宏;杜建5.康欣胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马CA_1区n-NOS表达的影响 [J], 蔡晶;杜建;葛振华;周凡;周琳瑛;陈莲云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脑立轻胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区细胞凋亡的影响
Ｅｆ ｃ ｓ ｏ ｏｌ ｎ ｐ ｕｅ ｏ ｓ ｕａｒＤｅｍｅｎ ｉ ｔ ＣＡ ｆ ｔ ｆＮａ ｇ Ｃａ ｓ ｌ ｎ Ｖａ ｃ ｌ ｅ ｉ ｑｉ ｔａ Ｒａ ｓ’ １ Ｒｅｇｉｎ ｏ
ｏ ｉ ｐ ｃ ｍ ｐ ｌＮｅｒ ｅ Ｃｅｌ Ａｐ ｔ ｓ ｓ ｆＨ ｏ ａ ｐ ａ ｖ ｌ ｏｐ ｏ ｉ
．
２ Ｄｅ ａｔ ｎ ｆＴＣＭ ， ｈｙ ｎ Ｐｅ ｐｅＳＨｏ ｐｔｌＳ ｉａ ４ ０ ０ ． ｐ ｒｍｅ ｔｏ Ｓ ｉａ ｏ ｌ’ ｓ ｉ ， ｈｙ ｎ４ ２ ０ ） ａ
Ａ ｓｒｃ ｂ ｔ ｔ：Ｏｂｅｔ ｅ ｏ ｓｕ ｙ ｔｅｅｆｃｓｏ ａｌ ｉｇ ｃｐｕｅｏ ａｃｌｒｄ ｍｅｔ ｙｄ ｃｅｓ ｇ ｔｅｎ ｍｂ ｒｏ ａ ｊｃｉ ：Ｔ ｔｄ ｈ ｆ ｔ ｆＮ ｏｉ ｎ ａ ｓ ｌ ｎ ｖｓｕａ ｅ ｎｉ ｂ ｅｒ ｉ ｈ ｕ ｅ ｆ ｖ ｅ ｑ ａ ａｎ
ｔ ｈ ｔ ｆ ｈ ｃ ｒ ｏｉｅｇ ｏ ｐ Ｐ＞ Ｏ ０ ） Ｃ ｎ ｌｓｏ ．Ｎａ ｌ ｉｇ ｃｐ ｕｅｃｎｄ ｃｅ ｓ ｈ ｐ ｐ ｏ ｉ ｏ ｈ ｏｔ ａ ｅＮｉｅｇ ｌ ｒｕ （ ｏ ｔ ｎ ．５． ｏ ｃｕ ｉｎ． ｏｉ ｎ ａ ｓ ｌ ａ ｅ ｒ ｅｔ ｅａ ｏ ｔ ｓｓ ｆｔ ｅＣＡ１ｒｇｏ ’ｅｖ ｑ ａ ｅ ｉｎｎ ｒ ｅ
脑 立 轻胶 囊 对 血 管性 痴 呆 大 鼠海 马 Ｃ １区 细胞 凋 亡 的 影 响 Ａ
赵 光 恒 ，王正 君 ，朱飞 奇。 海燕。 ，张 ，刘仁 斌
（ ．湖北 中医学 院 ２ ０ １ ０ ４级硕士研 究生 ， 湖北 武汉 ４ ０ ６ ； ． ３０ １ ２ 湖北 省 十堰 市人 民医院中医科 ， 湖北 十堰 ４ ２ ０ ） ４ ０ ０
抑制大鼠海马 Ｃ １区神经细胞 的凋亡 ， Ａ 这可能是脑立轻胶囊治疗血管性痴呆的主要机制之一。
脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠行为学及TXB_2、6-Keto-PGF_1a的影响
血 浆 ，置低 温 冰 箱（ ０ 待测 。 ． ＂ ３ Ｃ）
１ 统计 学方 法 ． ４
所 有数 据 以 “ 均数 ±标 准差 ”（ ± Ｓ）表 示 ，经 检验 所
得 数据 均 符合 正 态分 布 ，组 间 比较采 用 ｔ 验 ，并应 用 Ｃ ｒ ｌ ｅ进 行相 关 检 ｏｒ ａ ｅｔ
倒 混匀 ，注 入 试 管 内，置 入冰 浴 １ｒｉ ，４ ０ ｎ ℃离 心 ３ ０ ｒ ｉ ， １ ｒ ｎ ａ ０ ０／ ｎ ０ ｉ ，分 离 ａ ｒ ａ
囊对 ＶＤ 大 鼠学 习记 忆 能力 的影 响及 Ｔ Ｂ Ｘ ２、６Ｋ ｔ．Ｇ ｌ － ｅ Ｐ Ｆａ的变 化 ，以探 ｏ 讨其 对 ＶＤ 的作用 机制 。
次数 越 多 ，说 明其 学 习记忆 保 持 能力 越差 ，提 示 学 习记 忆受 损越 重 ② 放 免法 Ｔ Ｂ Ｘ ２、６Ｋ ｔ—ＧＦａ测定 学 习记忆 能力 测 试后 ， 合 氯醛 ３ ０ ＆ｇ －ｅ Ｐ ｌ ｏ 水 ０ｍｇ
视 空 间及人 格等 方 面缺 损 为主 要表 现 的 获得 性智 能 障碍 综合 征 。 随着 全球 人 的老龄 化 和脑 血 管疾病 发 生率 的 不断 升高 ，ＶＤ 的发 生率 也在 逐年 上 升 ，
洼 ：与 Ｊ ｓ组 比较 ， Ｐ＜ ．１ ＯＯ ：与 Ｎ 组 比较 ， Ｐ ００ ； Ｍ 组 比较 ， Ｐ ０ ５ Ｐ ００ ＜ ５与 ＜０； ＜． ５
下 同
１ 实验 方法 ． ２
模 型 制作 参照 ｄｌ Ｔ ｒ ｅ ｏｒ 【采用 双侧 颈 总动 脉永 久 性阻 ａ ｅ等 １ ］
第 ８ 第 ８期 总 第 ８ 卷 ８期 二 。一 。年 四月 ・ 下半 月刊
ｌ哼 为现 远 教 荩 代程育
脑力苏胶囊对血管性痴呆小鼠血清SOD和MDA的影响
［ ］Ｋ ｍ ｒ Ｙ ｎｄ ，Ｂ ｃｎ Ｄ，ｅａ．Ｒ ｇｌｔ ｎｏ ｉｉｃ ｅｓ ７ ｕ ａ Ｒ， ｏ ｅａＪ ｕ ａａＣ ｔ １ ｅｕａｏ ｆ ｓ ｎｔｔｐ ｉ ｄｔ ｓ
［ ４］Ｙ ｈＧ， ｕａｏｉ ａ Ｆ ｃｂｒ Ｙ，Ｍｃｒ ｅＧ，ｅ ａ．Ｅ ｏｓｉｈｎ ｎ ｃｉ ｔｎ ｂｉ ｔ ｄ １ ｘｎｗ ｃｉｇａｄａｔａｉ ｖ ｏ
ｏ ｒｍａ ａ ｄｅ ｂｙ ｎｃｆ ｒｂａｔ ｒｗ ｈ ｆｃ ｒ Ｆ Ｆ—Ｆ Ｆ ｒｃｐ ｆｔ ｓ ｏ ｌ ｎ ｍ ｒｏ ｉ ｉ ｏ ｌｓ ｇｏ ｔ ａ ｔ （ Ｇ ｂ ｏ Ｇ ｅ ｅ －
［ ５］Ｍａ ｓｎＭＰ，Ｍａ ｉ Ｉ ｔｏ ｔ ｒｎ ＦＲ，Ｇｏｈ ｔ ｒｔｅＣ，ｅ ａ．Ｎｅｍｐ ｔｅｉ ｉｎ ｔ１ ｕ ｍ ｅｔｅｓ ａ ｖ ｇｌ
ｔａ ｓ ｕ ｔ ｎ：ｒｌｖｎ ｅｔ ｔｏ ｅ ｕ ｏｃ ｏ ｅ ａ ｖ，９ ７， ｒｎ ｄ ｅｉ ｏ ｅｅ ａ ｃ ｏｓｒｋ ．ＪＮｅ ｒｓｉＢｉｂ ｈ ｖＲｅ １ ９ ２１
之 间 ｂ Ｇ 、Ｇ Ｒ一 Ｆ Ｆ Ｆ Ｆ ２表 达 无 显 著 性 差 异 ， 示 ｂ Ｇ Ｆ Ｆ 提 Ｆ Ｆ、Ｇ Ｒ一
ａ ｄ ｔ ｍｏ ｎ ｉ ｇ ｎ ｓｓ ｏ ｒｈ ｔｐ ｃ ｉ ｌｎｔｔ ｎ ｏ ｕ ｎ ａ ｔ ｃ ｎ ｕ ｒ ａ ｇｏ ｅ ｅ ｉ ｆ ｏ ｔｏ ｏ ｉ ｍｐ ａ ａｉ ｆ ｈ ｍａ ｇ ｓｒ ｏ ｉ
础， 提示 ｂ Ｇ Ｆ Ｆ可能是引起 细胞 恶性转化 的一个重要 因素 ， 并 通过促进间质血管 生成加 速恶变 细胞进 入淋 巴道 和血 道形 成转移瘤 ， 因此 ｂ Ｇ Ｆ Ｆ的异常表 达与 恶性肿 瘤生 物学行 为密
切 相 关 。 有 报 道 表 明 ，Ｆ Ｆ能 增 强 内 皮 细 胞 的 抗 凋 亡 能 力 ， ｂＧ 保 护 癌 细 胞 免 遭药 物 引起 的程 序 性 死 亡 ， 而 增 加 了肿 瘤 细 从 胞 的 抗 药 性 。 这也 从 另 一 个 角 度 说 明 ，Ｇ Ｆ Ｆ能延 长 肿 瘤 细 胞
脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠行为学及血液流变学的影响
００ ） ． ５ 。③ 各组大鼠水迷 宫实验记忆成绩 比较 见表 ２ 。表 ２为
２ ｈ后复测结果，各组大 鼠进入盲端次数和游完全程时间所呈 ４
现趋势与前相 同。统计学处理表 明，假手术组与模型组 比较差 异显著 （ ＜Ｏ Ｏ ） 尸 ． １ ；与模型组 比较，脑力素胶囊治疗组 、健脑
健 脑 组 大 鼠 记 忆 能 力 得 到 改 善 且 差 异 有 统 计 学 意 义 （ ＜ 户
１２ 实验方 法 模型制作参照 ｄ ｌ ｏ ｒ ． ｅ ａ Ｔ ｒ ｅ等 。 采用双侧颈总
动脉永久性组断法 （ －Ｖ ） ２ Ｏ 进行 ，将大 鼠经腹腔注射 １％ 合 ０水 氯醛 ３ ０ ｇｋ ０ ｍ ／ ｇ麻醉 ，保证手术期间有 自主呼吸，仰 卧固定于 手术台上， 剪毛， 颈部正中切开， 钝性 分离双侧颈总动脉 （Ｃ ） ＣＡ ， 套以 １ 号手 术线双重 结扎 ，逐层缝合 。手 术后肌 肉注射青霉素 ４ Ｏ万 ｕ 只，每 日 １次，连续 ３ ／ ｄ预防感染 。模 型复制大 鼠 １ 周
． ．帅 后． ｊ
一
关键 词 ：脑 力苏胶 囊 ：血管 性痴 呆 ；学习记 忆 能力 ：血液 流变 学 ｄ ｉ ０３６ ￣ｉ ｎ１７—７ ９ ００１． ８ ｏ ：１．９９ ．ｓ． ２２７ ． １． １ ｓ ６ ２ ０６ 文章 编号 ： １７ ７９ （０ ０ １．１２０ ６２２ ７ ２ １）．００ ９．２
易 一 、视 空间及人格等方面缺损为主要表现的获得性智 认识 、语言 现榔
！ 呲 － 迈
１ 资料 与方 法
血管性痴呆 （Ｄ Ｖ ）是指发生在脑血 管病基础上 的以记忆 、
其学习记忆 保持能力越差 ，提示学习记忆 受损越重 。②血液流
变 学指标 学习记忆能力测试后，水合氯醛 ３ ０ ｇ ｋ ０ ｍ ／ ｇ麻醉 ，将
醒脑胶囊对拟血管性痴呆大鼠脑内 GSH-PX和 AchE活性影响的实验研究
关 键词 ： 血 管性 痴 呆 ； 醒脑胶 囊 ； 谷 胱甘 肽过 氧化 物 酶 ； 乙酰胆 碱 酯酶
中图分 类 号 ： Ｒ ７ ４ ９ ． １ ６ 文 献标 识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ２—２ ３ ９ ２ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ３— ０ ０ ３ ９— ０ ３
明显减 少穿梭 箱 实验过 程 中 Ｖ Ｄ 大鼠 的 电 击 次数 和 电击 时 间。 结论 ： 治 疗后 的 Ｖ Ｄ Ｐ ｘ 活性得 到提 高 ， 而Ａ ｃ ｈ Ｅ活性 降低 ， 表 明 醒脑 胶 囊 能 改善 Ｖ Ｄ 的痴 呆程 度 ， 促进 Ｖ Ｄ
医学 科 学 院 药 物 研 究 所 ； 电动 玻 璃 匀 浆 机 Ｄ Ｙ ８ ９—１ 型， 宁波 ； 托盘 式扭 力天 平 Ｔ Ｎ一１ ０ ０ Ｂ型 ， 上海 ； 分 析 振
荡器 Ｆ Ｚ Ｑ一２型 ， 江苏 ； ７ ２ ２光栅 分光 光度 计 ， 上海 第 二
分析 仪器 厂 。
１ ． １ ． ４ 试 剂
后脑 组 织 内 Ｇ Ｓ Ｈ—Ｐ ｘ和 Ａ ｃ ｈ Ｅ活性 的 改 变以及 穿梭 箱行 动 能力 测试 结果 进行 比照 分析 。结果 ： 统 计 分 析表明， 醒 脑胶 囊 可有 效增 强 Ｖ Ｄ 大鼠脑 组 织 中 Ｇ Ｓ Ｈ— Ｐ Ｘ 的 活性 ， 有 效 降低 脑组 织 中 Ａ ｃ ｈ Ｅ 活性 ， 同时
１ ． １ 实验材 料
１ ． １ ． １ 动物 选 用 由黑 龙 江 省 肿 瘤 医 院 实 验 动 物 中心 提 供 的
谷胱 甘肽 过氧 化物 酶 （ Ｇ Ｓ Ｈ—Ｐ Ｘ） 测定 试 剂 盒 ， 乙 酰胆碱 酯 酶 （ Ａ ｃ ｈ Ｅ ） 测定 试剂 盒 ， 考马斯 亮 蓝 蛋 白测 定 试剂盒 ， 均 由南 京建 成 生物 工 程研 究所 提 供 ； Ｂ一淀 粉 样 蛋 白标 准 品 由美 国 Ｓ ｉ ｇ ｍａ 公 司 提供 。
海马氨基酸参与调控运动性疲劳大鼠学习记忆能力及海马ca1、ca3区c-fos的表达
海马氨基酸参与调控运动性疲劳大鼠学习记忆能力及海马ca1、ca3区c-fos的表达摘要: 本研究旨在探索海马氨基酸参与调控运动性疲劳大鼠学习记忆能力的机制以及海马CA1、CA3区C-Fos的表达情况。
通过T-maze试验，结果显示，与正常对照组相比，疲劳大鼠学习记忆能力显著下降，而在运动疲劳大鼠组，三个氨基酸分别为多巴胺，GABA和谷氨酸各自的表达量也显著降低。
此外，我们还发现，在海马CA1、CA3区，当使用不同剂量GABA和多巴胺作为药物时，会影响疲劳大鼠C-Fos的表达，即在CA1区，GABA可促进C-Fos的表达，而在CA3区，多巴胺可以促进C-Fos的表达。
本研究的结果提示，海马氨基酸可以调控运动性疲劳大鼠学习记忆能力，其中包括GABA和多巴胺，以及它们在海马CA1、CA3区C-Fos的影响。
关键词：氨基酸，运动性疲劳，学习记忆能力，多巴胺，GABA，海马，C-Fos正文：1 引言运动性疲劳是大部分人会面临的问题之一, 对其影响的探索一直是研究者们所关注的焦点。
运动性疲劳影响大脑的各个结构和功能，如神经信号传导、学习记忆能力和生物定位的影响，其中，海马是主要参与学习记忆的大脑结构。
目前的研究表明，在Aβ损伤，抑郁和NGF缺乏等大脑疾病中，GABA和多巴胺参与了神经信号传导和记忆学习的调控，但关于GABA和多巴胺在运动性疲劳大脑中的作用机制仍比较生疏。
2 材料和方法（1）实验动物及组织处理以大鼠为实验动物，分别以45天龄雄性SD大鼠（25－30g）为实验对象，随机分为正常对照组和疲劳组，每组8只，每天12点进行实验，一共三只。
处理药物前，测定大鼠的体温，用机械步态计训练，并且每天使用动物显微镜观察大鼠的体型，确定大鼠的健康情况。
（2）记忆轨道学习测试采用T Maze实验準备法，将学习时间从第一天开始，在10天内依次增加，实验分为正常对照组和疲劳组，将实验动物分别在T Maze实验室中进行实验，并采用摄像头记录大鼠的实验过程，以保证实验的公正性。
补脑软胶囊对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及海马区神经细胞损伤的影响
组、模型组、阳性对照组和补脑软胶囊高、中、低剂量组，各给药组给予相应药物灌胃。除假手术组注射生理
盐水外，其余各组大鼠均在左侧脑室海马区注射聚集态 Aβ1-42 制作 AD 大鼠模型。灌胃给药 14 d 后，采用 Morris 水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力；取大鼠海马组织，HE 染色，镜下观察神经细胞损伤修复情况；大鼠脑组
LI Xixiang, DOU Jinyan, PAN Congze, CHEN Erlin, ZHANG Zhirui, LI Xiang Gansu Provincial Hospital of TCM, Lanzhou 730050, China
Abstract: Objective To investigate the effects of Bunao Soft Capsules on learning and memory ability and hippocampal nerve cell injury of Alzheimer disease (AD) rats induced by intracerebroventricular injection of Aβ1-42; To discuss its possible mechanism for treatment of AD. Methods Totally 90 male Wistar rats were randomly divided into sham-operation group, model group, positive control group, and Bunao Soft Capsules high-, medium-, and low-dosage groups. Each administration was given relevant medicine for gavage. Except for sham-operation group, all the other rats were injected with aggregated Aβ1-42 into the left hippocampus to make AD rat models. After 14 days of gavage administration, the learning and memory ability of rats was evaluated by Morris water maze test; Rat hippocampus tissue was taken and stained with HE, and the repair of nerve cell injury was observed under microscope; Preparation of homogenate in rat brain tissue was used to determine the activity of CAT, GSH-Px, SOD and MDA content; Immunohistochemistry was used to detect β-secretase activity in rat hippocampus. Results Compared with the sham-operation group, the escape latent period of model group was significantly prolonged (P<0.01); the times of crossing target quadrant significantly decreased (P<0.01); the activity of CAT, GSH-Px and SOD in brain tissue decreased; the level of MDA increased significantly (P<0.05, P<0.01); the activity of β-secretion in the hippocampus increased significantly (P<0.05). Compared with the model group, the escape latency period of Bunao
脑心通胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i的影响
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脑心通胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i的影响黎红;何明大;黄旖旎【期刊名称】《中药药理与临床》【年(卷),期】2006(022)003【摘要】目的:观察脑心通胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经细胞静息态游离Ca2+浓度 ([Ca2+]i) 的影响,初步探讨脑心通胶囊治疗血管性痴呆的机制.方法:采用大脑中动脉闭塞法(MCAO)制作血管性痴呆动物模型;使用胰蛋白酶消化法制备海马组织单细胞悬液,Fura-2/AM负载分离的神经细胞,双波长荧光法测定海马神经细胞内静息态[Ca2+]i.结果:模型组大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i为437.42±32.14nmol/L,显著高于假手术组189.83±18.57 nmol/L(P<0.05);脑心通组和喜德镇组大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i为252.61±20.15 nmol/L、237.34±19.83 nmol/L,较模型组显著降低(P<0.05).结论: 脑心通胶囊可降低血管性痴呆模型大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i,这可能是脑心通胶囊治疗血管性痴呆的作用机制之一.【总页数】3页(P133-135)【作者】黎红;何明大;黄旖旎【作者单位】中南大学湘雅二医院中医科,长沙,410011;中南大学湘雅二医院中医科,长沙,410011;中南大学湘雅二医院中医科,长沙,410011【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.针刺与中枢:可以从静息的大脑中获取什么?——以静息态的脑默认网络功能影像来分析针刺治疗作用的中枢效应 [J], 李霁;汤伟军;董竞成2.血管性痴呆小鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i及CaMmRNA、CaMPKⅡmRNA 表达的变化 [J], 吕佩源;李文斌;尹昱;王伟斌;梁翠萍3.脑心通胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i的影响 [J], 何明大;黎红4.盐酸多奈哌齐对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经细胞凋亡及突触素表达的影响[J], 孙鹏;董涛;石秋艳5.石杉碱甲对血管性痴呆小鼠模型海马神经细胞静息态[Ca2+]i的影响 [J], 吕佩源;王伟斌;尹昱;粱翠萍;李文斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脑力苏胶囊对血管性认知障碍大鼠学习记忆障碍及额叶皮层神经元作用的实验研究
久性结扎， 术后缝合切 口， 笼内饲养， 保持室温在 ２ ０ ±１ ℃。假手术组动物与实验组做同样手术 ， 但不结
扎双侧 颈 总动 脉 。
２ ４
第１ 期
陈忠义， 脑力苏胶囊对血管性认知障碍大 鼠学习记忆障碍及额叶皮层神经元作用的实验研究 等；
力 障碍 。
１２ １ ２ 造模 方法 ．． ．
只有一条通路可达平 台。实验时若大 鼠误入盲端 ， 则将其诱人通路 。第 ４天开始记录逃避潜伏期， 第
本研究 采用 永久 性 闭塞 双侧 颈 总动 脉 （ ｏ Ｔｗ
中剂量组 、 脑力苏胶囊小剂量组 。用水迷宫进行 学 习、 记忆状 态测 定 ； 借助光学 屁微 镜对 大脑额 叶皮 层组织 形 态结构 进行 观
察 。结果 ： 中剂量脑力苏胶囊 、 大、 喜得镇 治疗 后 ＶＣ 大 鼠学习 、 忆障碍得到明显改善 （ ＜ Ｏ ０ ） 大脑皮 层神经 元数量 显著 Ｉ 记 Ｐ ．５ ； 增 多（ ＜００ ） Ｐ ．５ 。结论 ： 脑力苏胶囊 具有改善 ＶＣ 大 鼠学 习、 Ｉ 记忆 障碍 的能力 ， 其可 能的作 用机制 为改善脑 血流 量 ， 对抗缺 血 缺氧 ， 阻止皮质神经元变性坏步 。 Ｅ 关键词 ： 脑力 苏胶 囊 ； 血管性认知 障碍 ； 学习记忆障碍 ； 叶 ； 额 皮质 神经 元
与 ＮＬ 组 比 ☆ Ｐ Ｏ ０ ， ☆ ☆ Ｐ ０ ０ ； Ｇ１ ＜ ． ５ ＜ ．１
与 ＨＤ Ｇ组 比
△ Ｐ＜Ｏ ０ ， △ △ Ｐ＜０ ０ 。 ． ５ ． １
ｍ ／０ ｇ ｄ 胃（ ｌ１０ ／ 灌 相当于成人每 日用量 的 ｌ 、０ ５ ５ １ 、 倍， 药物浓度分别为 ０ ２ 、． ６ 、．２ ．５ ０ １７ ０１ ５ｇ／ｍ ）均 １， 每天给药 １ 。各实验组均连续灌药 ３ 次 周。 １２３ 观察指标及方法 ．． ①水迷宫试验 （ ｔ ｚ ｔ ｔ ： Ｗａ ｒ ｅ ｍａｅ ｅ ） 水迷 宫为一 ｓ １ ×０ ４ 的棕色有机玻璃槽 ， 的一端 有一平 ×１ ． 槽 台， 动物可爬上休息 。槽 内为迷宫状 ， 有多个盲端 ， 由表 １ 结果显示 ， 药物 治疗后 ， 大剂 量脑力 苏 组、 喜得镇组逃避潜伏期缩短 ， 进入盲端次数减少 ， 与模 型组 比差异有显著性 意义 （ ＜Ｏ ０ ） 与假 手 Ｐ ．１， 术组比差异无显著性意义 （ ＞Ｏ ０ ） 中剂量脑 力 Ｐ ．５；
脑缺血海马CA1区突触可塑性及白藜芦醇苷对缺血性脑损伤的保护机制(一)
脑缺血海马CA1区突触可塑性及白藜芦醇苷对缺血性脑损伤的保护机制(一)【关键词】海马海马CA1区神经元与人类、哺乳动物的学习记忆密切相关，同时海马是脑缺血后选择性易损的脑区之一。
现就脑缺血大鼠海马CA1区突触可塑性及白藜芦醇苷对缺血性脑损伤的保护机制作一综述。
1脑缺氧缺血对海马CA1区功能的影响1.1CA1区的功能海马是一个具有可塑性的脑区，包括结构和功能的可塑性，其中结构可塑性是功能可塑性的基础。
突触传递的长时程增强（，LTP）是指突触前神经元受到短时间的快速重复刺激后，在突触后神经元快速形成的持续时间较强的突触后电位增强。
LTP是研究学习记忆活动在细胞和突触水平的指标。
甲基天冬氨酸（NMDA）受体与学习记忆的关系及在LTP产生过程中的关键性作用已经得到肯定，LTP的形成是由突触后神经元胞质中的Ca2+增加所致。
LTP的诱导和形成机制，文献上研究和讨论最多的是哺乳动物海马CA1区的LTP。
有关机制可以简略概括为：当突触前的传入纤维受到高频刺激时，兴奋性神经递质谷氨酸从突触前膜到突触间隙，和突触后膜上的NMDA受体结合，激活NMDA受体，使阻碍钙离子内流的镁离子被移除，大量钙离子内流，激活细胞内的一系列分子过程，最终形成LTP。
LTP形式和海马突触可塑性与空间学习记忆有关，从细胞水平反映学习记忆，是突触可塑性的具体表现。
有研究显示动物训练前人为使之产生LTP，可明显提高其建立条件反射的速度〔1〕，大鼠在空间分辨率学习过程中海马区的LTP有明显的差异。
NMDA受体激活在突触传递等方面有重要意义，是产生LTP现象的关键环节，因此，LTP被认为是“长期信息的储存装置”。
1.2脑缺血后海马功能改变脑缺血可降低海马齿状回区基本的突触传递；缺血损伤了海马齿状回区群峰电位的长时程增强诱导，而对兴奋性突触后电位的长时程增强诱导有促进作用；缺血损伤了海马齿状回区兴备性突触后电位的长时程抑制诱导，而对群峰电位的长时程抑制诱导没有明显影响〔2〕。
脑力苏胶囊对血管性痴呆小鼠脑组织NGF表达的影响
脑力苏胶囊对血管性痴呆小鼠脑组织NGF表达的影响梅建伟;张英强【摘要】目的:研究脑力苏胶囊对血管性痴呆(VD)模型小鼠脑组织神经生长因子(NGF)表达的影响,以探讨脑力苏胶囊治疗VD的部分作用机理.方法:采用结扎双侧颈总动脉方法制备血管性痴呆小鼠动物模型,用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定给药后VD小鼠脑组织内神经生长因子(NGF)的含量变化.结果:给药15 d后,VD小鼠脑内神经生长因子(NGF)较模型对照组显著增高.结论:脑力苏胶囊可增加VD大鼠脑内神经生长因子(NGF)的含量,可能与改善VD小鼠的认知功能障碍作用相关.【期刊名称】《现代临床医学》【年(卷),期】2010(036)003【总页数】2页(P174-175)【关键词】脑力苏胶囊;血管性痴呆小鼠;脑神经生长因子(NGF)【作者】梅建伟;张英强【作者单位】成都中医药大学,四川,成都,610075;成都中医药大学,四川,成都,610075【正文语种】中文【中图分类】R749.1+3随着人口的老龄化，痴呆已成为老年人的常见病、多发病，严重威胁老年人生命和生存质量。
痴呆以阿尔茨海默病(AD)、血管性痴呆(VD)为主，其中VD是指各种血管病引起的脑功能障碍而产生的获得性智能损害综合征，为慢性进行性疾病，占全部痴呆的1/4～1/3，在我国和日本比例更高，且我国的血管性痴呆发病呈逐年上升的趋势。
近年来，科研工作者已认识到脑内神经生长因子(NGF)对中枢神经系统损伤后有较好的保护作用。
本实验旨在探讨脑力苏胶囊作用于VD小鼠后脑内NGF的影响变化，以期进一步揭示脑力苏胶囊的脑保护作用机理，为脑力苏胶囊临床防治血管性痴呆提供实验依据。
1.1 实验动物取成年健康昆明小鼠，雌雄各半，体重18～22 g，由成都中医药大学实验动物中心提供，合格证号为SCXK (川)2008-11。
实验前动物均放于实验室适应环境7 d，按性别分笼饲养，自由进食、饮水，室温控制在24±2 ℃，相对湿度12%左右，自然光照，造模术前禁食12 h。
养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马CA1区GSK-3β及β-catenin蛋白表达的影响＊
养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马CA1区GSK-3β及β-catenin蛋白表达的影响＊伞云琨;罗永伟;刘斌;马原源;毛文静;张晋霞;李世英【摘要】This study was aimed to observe the effect ofYang-Xue Qing-Nao(YXQN) granules on expressions of glycogen synthase kinase-3β (GSK-3β) andβ-catenin in CA1 area of hippocampus among vascular dementia (VD) rats. A total of 72 SD rats were randomly divided into the sham operation group, VD group (model group) and the YXQN granules treatment group (treatment group). The VD rat model was prepared by modified Pulsineli’s four-vessel occlusion. The expressions of GSK-3β andβ-catenin in CA1 area of hippocampus were detected by immunohistochemistry and western blotting at the 1st week, 2nd week,4th weeks and 8th week after VD model operation. The results showed that expressions of GSK-3βwere increased in the model group at different time points, which were many quantities of expression at the 1st week, and a large number of expressions at the 2nd week. It reached peak at the 4th week; and began to decline but still higher at the 8th week. Compared with the sham operation group, the expression of GSK-3β was significantly increased in the model group at different time points (P < 0.01). The expression ofβ-catenin was increased in the model group at different time points. However, there was no statistical significance compared with the sham operation group (P > 0.05). Compared with the model group, expressions of GSK-3β andβ-catenin were significantly increased in thetreatment group at different time points (P < 0.01). It was concluded that YXQN granules upregulated the expression of GSK-3β andβ-catenin, which may be helpful to VD treatment.%目的：观察养血清脑颗粒对血管性痴呆（VD）大鼠海马CA1区糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）蛋白及β-连环蛋白（β-catenin）表达的影响。
脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区ACP、CCO活性的影响
脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区ACP、CCO活性的影响岳仁宋;申勇;陈忠义【期刊名称】《成都中医药大学学报》【年(卷),期】2005(28)1【摘要】目的采用酶组化的方法,通过脑力苏胶囊对血管性痴呆(VascularDementiaVaD)大鼠酸性磷酸酶(AcidphosphataseACP)、细胞色素氧化酶(CytochromeOxidaseCCO)酶活性影响的研究,探讨脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠智能障碍的改善效果及作用机理。
方法根据Olsson方法,采用永久性阻断双侧颈总动脉复制VaD大鼠模型,随机分为模型组、喜德镇组、大剂量脑力苏胶囊组、中剂量脑力苏胶囊组、小剂量脑力苏胶囊组,并加假手术组(每组10只) ,共用药2 1d。
用酶组化方法对海马CA1区ACP、CCO酶活性进行观测。
结果大剂量脑力苏胶囊、喜德镇治疗后大鼠海马CA1区ACP酶活性低于模型组,CCO酶活性高于模型组。
结论脑力苏胶囊可以改善脑缺血状态,保护脑缺血性损伤,提高神经细胞对缺氧的耐受性,从而对缺血引起的VaD具有益智、增智作用。
大剂量脑力苏胶囊的作用与喜德镇相近。
【总页数】4页(P35-38)【关键词】胶囊;脑力;血管性痴呆;大鼠海马;大剂量;ACP;CA1区;CCO;影响;模型【作者】岳仁宋;申勇;陈忠义【作者单位】成都中医药大学附属医院;成都市龙泉区第一人民医院;济南军区一五四医院【正文语种】中文【中图分类】R749;R743【相关文献】1.黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠行为学表现及海马CA1区病理变化的影响 [J], 王艳;谢道俊;鲍远程;张娟;储丹晨;韦彪;孙愘叡;丁伟军;鲍婷婷;2.脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区NOS、AchE活性的影响 [J], 岳仁宋;陈忠义3.银丹心脑通软胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA1区Bcl-2、Bax表达的影响 [J], 刘欣;刘芳;刘伟民4.黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠行为学表现及海马CA1区病理变化的影响 [J], 王艳;谢道俊;鲍远程;张娟;储丹晨;韦彪;孙愘叡;丁伟军;鲍婷婷5.脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区ACP、CCO活性的影响 [J], 岳仁宋;陈忠义;申勇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脑力苏胶囊对血管性认知障碍大鼠学习记忆障碍及额叶皮层神经元作用的实验研究
脑力苏胶囊对血管性认知障碍大鼠学习记忆障碍及额叶皮层神经元作用的实验研究陈忠义;岳仁宋;张发荣【期刊名称】《云南中医学院学报》【年(卷),期】2006(29)1【摘要】目的:探讨脑力苏胶囊改善血管性认知障碍(VCI)大鼠认知障碍的作用机制.方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉法制备慢性脑灌注不足VCI动物模型.实验大鼠随机分为假手术组、模型组、喜得镇组、脑力苏胶囊大剂量组、脑力苏胶囊中剂量组、脑力苏胶囊小剂量组.用水迷宫进行学习、记忆状态测定;借助光学显微镜对大脑额叶皮层组织形态结构进行观察.结果:大、中剂量脑力苏胶囊、喜得镇治疗后VCI大鼠学习、记忆障碍得到明显改善(P＜0.05);大脑皮层神经元数量显著增多(P ＜0.05).结论:脑力苏胶囊具有改善VCI大鼠学习、记忆障碍的能力,其可能的作用机制为改善脑血流量,对抗缺血缺氧,阻止皮质神经元变性坏死.【总页数】5页(P24-27,33)【作者】陈忠义;岳仁宋;张发荣【作者单位】解放军一五四中心医院,河南,信阳,464000;成都中医药大学附属医院,四川,成都,610075;成都中医药大学附属医院,四川,成都,610075【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠行为学及TXB2、6-Keto-PGF1a的影响 [J], 王增义;冯兴建;宫洪涛2.脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠行为学及血液流变学的影响 [J], 王增义;冯兴建;宫洪涛3.脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠行为学及生长抑素影响的实验研究 [J], 宫洪涛4.脑力苏胶囊对血管性痴呆药效学的实验研究概述 [J], 张英强;任培清5.脑力苏胶囊改善VD大鼠认知障碍作用机制的实验研究 [J], 陈忠义;岳仁宋;张效科;马松涛;张发荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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2005年3月第28卷第1期 成都中医药大学学报Mar.2005,V ol.28,N o.1 Journal of Chengdu University of T C M基金项目:四川省中医管理局重点资助课题作者简介:岳仁宋,男,1964年12月生;医学博士,主治医师;研究方向:糖尿病与心脑血管病的中西医结合防治研究。
脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区ACP 、CCO 活性的影响岳仁宋1 申勇2 陈忠义3(11成都中医药大学 附属医院,四川 成都610072;21成都市龙泉区第一人民医院 31济南军区一五四医院)摘 要: 目的 采用酶组化的方法,通过脑力苏胶囊对血管性痴呆(Vascular Dementia VaD )大鼠酸性磷酸酶(Acid phosphatase ACP )、细胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase CC O )酶活性影响的研究,探讨脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠智能障碍的改善效果及作用机理。
方法根据Olss on 方法,采用永久性阻断双侧颈总动脉复制VaD 大鼠模型,随机分为模型组、喜德镇组、大剂量脑力苏胶囊组、中剂量脑力苏胶囊组、小剂量脑力苏胶囊组,并加假手术组(每组10只),共用药21d 。
用酶组化方法对海马C A1区ACP 、CC O 酶活性进行观测。
结果大剂量脑力苏胶囊、喜德镇治疗后大鼠海马C A1区ACP 酶活性低于模型组,CC O 酶活性高于模型组。
结论脑力苏胶囊可以改善脑缺血状态,保护脑缺血性损伤,提高神经细胞对缺氧的耐受性,从而对缺血引起的VaD 具有益智、增智作用。
大剂量脑力苏胶囊的作用与喜德镇相近。
关 键 词: 脑力苏胶囊;血管性痴呆;细胞色素氧化酶;酸性磷酸酶中图分类号: R277.7;R749.1 文献标识码:A 文章编号:100420668(2005)0120035204 血管性痴呆(VaD )是由一系列的脑血管疾病导致的以认知、记忆功能减退为主,伴语言、视空间辨别技能及情感人格障碍为特征的中枢神经系统进行性损害的疾病,系各种脑血管疾病引起的获得性智能损害综合症。
属中医学“呆病”范畴,病因复杂。
脑力苏胶囊系著名中医专家,博士生导师张发荣教授积多年临床经验,通过筛选临床有效药物,利用先进工艺制作而成,经临床验证,效果明显。
为了证实该方的药效作用,本实验应用酶组化等现代科学方法,观察脑力苏胶囊对VaD 大鼠海马C A1区CC O 、ACP 酶活性的影响,探索中药复方脑力苏胶囊改善VaD 智能的有效机理。
1 实验材料111 动物选用10～12月龄的雄性S prague -Dawley (S D )大鼠90只,体重为356g ±28g ,由成都中医药大学动物实验中心提供(合格证号:川实动管质第7号)。
实验过程中动物自由摄食和饮水(术前禁食水),室温20℃±1℃,相对湿度60%～70%,光照12h :12h (光:暗)。
112 主要药物脑力苏胶囊由成都中医药大学药理实验中心制备,每粒含生药2125g ,制备前均经鉴定,非劣质药材。
喜德镇(H ydergin ):瑞士S and oz 与天津制药厂联合出品,1m g/片,批准文号:(90)卫药准字X -356号。
113 主要仪器和试剂水迷宫(water maze )成都中医药大学动物试验中心研制;恒冷箱切片机(Cyrostat ) 美国AO 公司生产;隔水式电热恒温培养箱 上海市跃进医疗器械厂生产;PM -10AD 光学显微镜Olym pus opti 2cal C o 1LT D ,JAPAN ;Mias -2000图象分析系统,四川大学计算机图象图形研究所研制;无水醇(优级纯)、多聚甲醛(Paraformaldehyde reinst 分析纯)成都化学试剂厂生产;4%多聚甲醛溶液、50m M 磷酸缓冲液(PH714)分析纯,由四川大学华西公共卫生学院毒理实验室配制;二氨基联苯胺四氢氯化物、过氧化氢酶(20UI/m L )、细胞色素C 、萘酚AS -BI 磷酸钠、甲基甲酰胺(DMF )、缓冲六偶氮副品红液等均由美国Sigma 公司提供。
2 实验方法211 造模方法本研究采用永久性结扎双侧颈总动脉(2-VO )法[1]制作慢性脑灌注不足VaD 动物模型,大鼠术前12h 禁食、4h 禁水。
用10%水合氯醛(0135m L /100g )腹腔注射麻醉,必要时补充注射,保证手术期间有自主呼吸。
待翻正反射消失后,仰卧固定木制手术台上。
颈前部去毛,酒精、碘酒消毒后,沿腹侧颈正中切开,依次钝性分离皮下脂肪、胸骨舌骨肌和胸锁乳头肌,再分别分离暴露左、右侧颈总动脉(comm on carotid arteries CC A )及气管(注意勿伤及迷走神经),套以“0”号丝线双重结扎,然后逐层缝合肌肉、皮肤。
其中控制麻醉深度、保持体温恒定是造模成功的关键。
术后动物送至有通风设备动物房饲养。
假手术组动物同法行颈前皮肤切开,分离皮下・53・脂肪、肌肉等组织,分离、暴露但不结扎颈总动脉,逐层缝合切口。
术毕给予注射用青霉素钠水溶液适量局部涂敷,放入笼中饲养,每日肌注青霉素钠20万U/只,连用3d(如出现感染者可延长至1周),防治感染。
212 动物分组经水迷宫检测后,将造模成功的54只VaD大鼠按各鼠平均逃避潜伏期的长短排序,根据随机数字表随机分为:模型组(M odel group,M DG)、喜得镇组(Hydergin group,H DG)、脑力苏胶囊大剂量组(Naolisu group,N LG1)、脑力苏胶囊中剂量组(Naolisu group, N LG2)、脑力苏胶囊小剂量组(Naolisu group,N LG 3),每组10只,并假手术组(Sham operation group, S OG)10只共6组,剩余动物弃之。
213 给药方法造模后第4周开始给药,假手术组和模型组用生理盐水灌胃,1m L/100g,1次/d;喜德镇配成浓度为2%的混悬液,灌胃,0106mg/100g・d,1次/d(为成人用量的20倍);脑力苏胶囊大、中、小剂量组,分别以成药015g/100g・d、0125g/100g・d、01125g/100g・d 灌胃(相当于成人每日用量的20、10、5倍,药物浓度分别为015、0125、01125g/m L,给药量亦为1m L/100g ),1次/d,各组均连续灌药3周。
3周后尚存活的大鼠各组分别为:S OG9只、M DG6只、H DG8只、N LG1 8只、N LG28只、N LG37只。
214 海马神经元C A1区酶活性的测定21411 取材与制片疗程结束并进行学习记忆能力测试后,经10%水合氯醛腹腔注射麻醉,立即背朝下放平动物,固定好四肢,小心剖开腹腔,暴露肝脏,同时迅速剪开横膈膜、断开肋骨,暴露出胸腔和心脏,小心地将吸有生理盐水(37℃)的穿刺针头经左心室刺入升主动脉,灌注生理盐水200m L的同时,剪开右心耳放血排液,随之立即快速地将生理盐水灌入心脏,待多数血液已从右心耳排出,拨去吸有生理盐水的针筒,将灌有300m L的4%多聚甲醛固定液(临用前以011M P BS新鲜配制,PH714。
含有1/1000DEPC以抑制RNA酶)的输液袋的针尖插入左心室同一进针处缓慢且持续地滴注1h,直至肝脏这类血液丰富的器官颜色变白。
此过程中,大鼠四肢、尾部及胸腹部会出现肌肉颤动,此表示灌注成功。
灌注完毕后,立即断头,开颅暴露全脑,沿矢状面方向从正中将脑组织相对称的两部分切开,取左脑视交叉后4mm处至小脑前组织,置于用香烟铝箔制备的样品盒内,液氮骤冷,由样品盒内取出组织块,置于滴有3%的羧甲基纤维素的样品台上,待组织块牢固冻结于样品台上后,调整抗卷板开始恒温(-15℃)次冷冻切片,贴附在同一涂有APES的载玻片上,用电风扇吹20min,使切片尽快干燥,这样一方面可使切片牢固贴于玻片上,同时具有终止细胞代谢,利于保存酶活性作用。
实验中质量控制:切片厚度完全相同,为8μm,且放在同一盖片染色缸内缸染,以避免人为误差,便于同步操作,后放在-20℃的冰箱中备用。
21412 方法CC O酶活性测定采用DAB法(seligman et al。
1968)。
ACP酶活性测定采用偶氮偶联法(Barka and Anders on1962)。
215 图象分析对海马C A1区同一批酶组织化学染色切片进行定量分析,切片放大倍数均为200×,根据染色的底色在相同光学条件下利用Mias-2000图象分析系统以“目标灰度值”作为测量参数,取其平均值作为该切片的灰度值,即平均灰度值(meangray)。
灰度值(gray value)是反映透光密度的定量指标,可间接反映细胞和酶的活性,灰度值越大,其酶活性越低;灰度值越小,其酶活性越高。
所测定的灰度分为256个等级,0级为最暗,256级则为最亮。
在显示屏上选择无阳性细胞处为0级,并选择所输入切片图像最佳处的光密度,即阳性细胞的合适的光密度进行图象分析处理。
216 统计学处理所得结果均采用SPSS1110统计软件包进行单因素方差分析,各组数据均采用均数±标准差( x±s)表示。
P<0105为有统计学意义;P<0101为有高度统计学意义。
3 实验结果与分析将CC O酶反应切片置于光镜下观察,可见中央无色透明,为阴性反应区。
黄褐色沉淀示CC O活性部位,背景为黄色。
而ACP阳性反应产物(酶活性所在)为棕红色颗粒或红色沉淀,分布于胞浆内,核为绿色。
光镜下观察结果,见:假手术组海马神经元细胞ACP呈阳性反应,酶反应颗粒细小,呈浅棕色,细胞边缘较多;模型组海马神经元细胞ACP呈强阳性反应,酶反应颗粒增多,呈鲜红色或棕红色,有些聚集成团,胞核被致密的酶反应颗粒所掩盖,部分胞核被挤向一侧而呈偏心性;大剂量脑力苏组海马神经元细胞ACP酶反应颗粒细小,呈浅棕红色,与假手术组相近。
中小剂量脑力苏组与缺血模型组相比,大鼠海马C A1区神经元ACP反应颗粒有的细小、有的粗大,偶有聚集成团。
应用本文“215”所述方法,对结果进行图象分析,并计算其灰度值,结果见表1。
表1 各组动物海马神经元C A1区CC O、ACP酶活性(以灰度值表示)比较( x±s)组别n灰 度CCO ACPS OG组9148180±9101153189±7140M DG组6174183±5191#120157±6105#H DG组8158185±6165#3141125±6125#3N LG1组8151153±81863Δ148198±71903ΔN LG2组8162100±5175#3※ΔΔ138158±9151#3※N LG3组7167126±4157#※ΔΔ127120±5108#ΔΔ※33与SOG组比#P<0101;与MDG组比3P<0101;与NLG1组比※P <0101;与HDG组比ΔP<0105、ΔΔP<0101;与NLG2比33P< 0101;表1结果显示,模型组与各实验用药组ACP灰度值与假手术组灰度值之差异,均有高度统计学意・63・成都中医药大学学报 2005年3月第28卷义或统计学意义(P<0101或P<0105),提示模型组和实验给药组灰度值均低于假手术组,说明慢性脑灌注不足VaD动物模型其ACP酶活性低于假手术组。