酸性染料比色法测定福王草中总生物碱的含量
聚焦微波辅助提取-酸性染料分光光度法测定农吉利中总生物碱
聚焦微波辅助提取-酸性染料分光光度法测定农吉利中总生物碱樊轻亚;游国叶【摘要】采用聚焦微波辅助提取(FMAE)结合溴麝香草酚蓝分光光度法测定农吉利中总生物碱.粒径为0.180 mm的样品,以甲醇为溶剂,料液比为1比25,在微波功率中火条件下提取50 min.在pH7.2的磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液中,提取得到的生物碱与溴麝香草酚蓝酸性染料形成缔合物,用三氯甲烷萃取后,在最大吸收波长417 nm处测量其吸光度.总生物碱的质量浓度在0.25～250mg· L-1范围内呈线性,方法的检出限(3S/N)为1.5 mg· L-1.应用该方法测定农吉利药材中总生物碱,加标回收率为105％,测定值的相对标准偏差(n=6)小于3.0％.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2015(051)003【总页数】4页(P289-292)【关键词】分光光度法;酸性染料;聚焦微波辅助提取;农吉利;生物碱【作者】樊轻亚;游国叶【作者单位】信阳职业技术学院药学院,信阳464000;信阳职业技术学院药学院,信阳464000【正文语种】中文【中图分类】O657.32农吉利为豆科猪屎豆属多年生直立小草木，具有清热解毒，除湿消积的功效，用于治疗痢疾、疮疖、小儿疳积，近年来，在临床上用作抗癌药［13］。
农吉利含有黄酮类化合物及多种生物碱，其中含量较多的生物碱为农吉利乙素、农吉利丙素及农吉利甲素［4－8］。
微波辅助提取（MAE）根据装置的不同可分为聚焦微波辅助提取（FMAE）和密闭微波辅助提取（PMAE）两种［9－11］。
MAE技术具有选择性高、操作时间短、溶剂消耗量少、不产生噪声、适合用热不稳定成分等优点，进一步拓展了MAE技术在天然药物有效成分提取中的应用前景。
本工作以农吉利全草为研究对象，将FMAE技术应用于农吉利中总生物碱的提取，结合有机溶剂萃取法，采用正交试验方法对FMAE提取试验条件进行了优化，采用酸性染料分光光度法法测定农吉利总生物碱的含量，得出FMAE提取农吉利总生物碱的最佳工艺条件。
酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱的含量吕伟;田实民【摘要】目的:建立自芥子中总生物碱含量测定的方法.方法:采用酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱含量.结果:酸性染料比色法显色的条件为pH 4.2的缓冲液10 mL,0.04%的溴甲酚绿溶液2.0 mL,三氯甲烷萃取4次,每次5 mL,检测波长332 nm.芥子碱硫氰酸盐在1.696～16.960μg·mL-1与吸光度呈良好的线性关系,平均回收率99.75%,RSD=1.16%(n=6).结论:该方法灵敏度高,准确性,重现性好.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2011(013)004【总页数】3页(P18-20)【关键词】酸性染料比色法;白芥子;总生物碱;含量测定【作者】吕伟;田实民【作者单位】枣庄市药品检验所,山东,枣庄,277102;枣庄市药品检验所,山东,枣庄,277102【正文语种】中文白芥子为十字花科植物白芥Sinapis alba L.的干燥成熟种子，具有温肺豁痰利气、散结通络止痛的功能[1]。
化学成分与药理研究表明，以芥子碱为代表的生物碱类成分是其有效部位之一[2-4]，《中国药典》采用HPLC对芥子碱含量进行控制[1]。
本文首次采用酸性染料比色法，以主要有效成分芥子碱硫氰酸盐为对照品，建立白芥子中总生物碱的含量测定方法，为进一步全面控制白芥子药材质量提供实验依据。
UV-2401PC紫外-可见分光光度计(日本岛津)，超声波药品处理机(济宁金百特电子有限公司)。
芥子碱硫氰酸盐对照品(中国药品生物制品检定所，批号111702-200501)。
所用试剂均为分析纯。
白芥子样品，购自不同产地，经山东中医药大学石俊英教授鉴定为十字花科植物白芥Sinapis alba L.的种子。
2.1 对照品贮备液制备精密称取芥子碱硫氰酸盐对照品10.6 mg，用pH 4.2的醋酸-醋酸钠缓冲液溶解并定容至25 mL，作为芥子碱硫氰酸盐对照品贮备液(浓度424 μg·mL-1)。
酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱的含量曾宝;李生梅;古俊辉;唐君苹;林吉;赖小平【摘要】目的建立巴豆中总生物碱含量的测定方法,对不同产地的巴豆总生物碱质量分数进行比较研究.方法以木兰花碱作为对照品,采用酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱质量分数.结果酸性染料法的显色条件为加pH 6.0缓冲液至8 mL,加溴麝香草酚蓝3.5 mL,振摇3min,静置40 min,三氯甲烷8mL萃取,测定波长为420 nm,在0.024 6～0.147 3 mg范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率99.0％,RSD为2.75％.结论本含量测定方法操作简单,灵敏度高,准确性、重复性好,可用于巴豆中总生物碱的含量测定.%Objective To establish a method for the assay of the total alkaloids in Croton tiglium, and investigate the contents from different origins. Methods Acidic dye colorimetry was used for the determination of total alkaloids in Croton tiglium with magnoflorine as reference substance. Results Acid dye colorimetric conditions were as follows; pH6.0 buffer to 8.0 mL, adding 3. 5 mL bromothymol blue, extracting with 8 mL chloroform, shaking out for 3 minutes, stewing for at least 40 min, then determining at the wavelength of 420 nm. The concentration of magnoflorine showed good linearity within the range of 0. 024 6-0. 147 3 mg, r = 0. 999 5, and the average recovery ratio was 99. 0% with RSD of 2. 75%. Conclusion This method is simple, highly sensitive, accurate and reproducible, which can be used for determination of the total alkaloids in Croton tiglium.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2012(028)002【总页数】3页(P170-172)【关键词】酸性染料比色法;巴豆;木兰花碱;总生物碱【作者】曾宝;李生梅;古俊辉;唐君苹;林吉;赖小平【作者单位】广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808【正文语种】中文【中图分类】R927.2巴豆为大戟科植物巴豆(Croton tiglium L.)的干燥成熟种子，主产于我国西南及福建、湖北、湖南、广东、广西等地。
紫外分光光度法测定两面针中总生物碱的含量
·50· Chinese Journal of Information on TCM Jan.2008 Vol.15 No.1紫外分光光度法测定两面针中总生物碱的含量章伟1,刘韶2,何桂霞1,(1.湖南中医药大学药学院,湖南 长沙 410004；2.中南大学湘雅医院药剂科,湖南 长沙 410008)摘要：目的 建立紫外分光光度法测定两面针中总生物碱含量的方法。
方法 采用紫外分光光度法,以氯化两面针碱为对照,在329 nm波长处进行含量测定。
结果 线性范围为3～8 µg/mL,回归方程：Y＝97.746X－0.025 5,r＝0.999 1 (n＝6)。
氯化两面针碱的平均回收率为99.5%,RSD＝2.32%(n＝5)。
结论 方法简便、提取完全、重现性好、结果准确。
关键词：两面针；生物碱；含量测定；紫外分光光度法中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2008)01-0050-02Determination of Alkaloids in Zanthoxylum Nitidum by Ultraviolet Spectrophotometry ZHANG Wei1, LIU Shao2, HE Gui-xia1(1.Hunan University of TCM, Changsha 410004, China；2.Xiangya Hospital of South China University, Changsa 410008, China)Abstract：Objective To establish a simple method for determination the Alkaloids contents from Zanthoxylum nitidum. Methods Adopting nitidunechloride as reference, alkaloids in Zanthoxylum nitidum were by ultraviolet spectrophotometry at 329 nm.Results The liner arrange was 3～8 µg/mL, regression equation：Y＝97.75X－0.025 5, r＝0.999 1 (n＝6). The mean recovery of Nitidunechloride was 99.46%, RSD＝0.93% (n＝5).Conclusion The method performed is accurate and simple. The reproducibility and rate of extraction are also desirable.Key words：Zanthoxylum nitidum；Alkaloids；content determination；ultraviolet spectr-ophometry两面针[Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.]为芸香科花椒属植物,在我国主要分布于福建、广东、广西、云南等地,是民间常用的一种植物药。
酸性染料比色法测定虎舌红中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定虎舌红中总生物碱的含量【摘要】目的成立测定虎舌红总生物碱的含量测定方式。
方式采纳溶剂萃取酸性染料比色法测定，以去氢飞廉碱（C16H22N4O2）为对照品，溴甲酚绿为酸性染料，用氯仿萃取，检测波长418 nm。
结果去氢飞廉碱在～ mg/L范围内与吸光度呈良好线性关系，回归方程为：Y= 5(n=5)，平均回收率为%，RSD为%（n=5）。
结论所成立方式简便、准确、选择性强。
【关键词】虎舌红总生物碱；酸性染料比色法；去氢飞廉碱Abstract：ObjectiveTo establish a method for quantitative determination of the total alkaloids in the root of Ardisia content was determined by solvent extraction and acid dye colorimetiy, with Acanthoine Ruscope-ine （C16H22N4O2）as a control criterion and bromocresol green as the acid dye, and the wavelength was at 418 nm. ResultsAcanthoine Ruscope-ine showed a good linear relationship with absorbance when its concentration was within ～mg/L. The regression equation established was Y= 7,r= 5(n=5). The recovery of Acanthoine Ruscope-ine was %,RSD was % (n=5).ConclusionThis method is easy, accurate and specific.Key words：Ardisia mamillata total Alkaloid; Acid Dye Colorimetiy; Acanthoine Ruscope-ine虎舌红Ardisia mamillata，又名红毛毡、宝鼎红、天仙红衣、毛凉伞、金丝红珠等，为紫金牛科紫金牛属。
药物分析（习题）
（习题一）药物的鉴别与杂质检查一、练习思考题1. 药物鉴别的意义是什么？药品质量标准中常用的鉴别方法有哪些？2．什么是一般鉴别试验？什么是特殊鉴别试验？举例说明。
3．如何利用色谱法来鉴别药物？4．什么叫鉴别反应的空白试验和对照试验？其意义何在？5．试述杂质检查的意义、来源？6．什么叫限度检查？杂质限量如何计算？7．何谓特殊杂质？何谓一般杂质？分别举例说明？8．试述氯化物、硫酸盐、铁、重金属的检查原理、反应条件、标准溶液及最适宜的浓度范围。
9．什么叫恒重？恒重操作要注意哪些问题？10．氯化钠注射液（0.9%）中重金属检查：取相当于氯化钠0.45g的注射液，蒸发至约20mL，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH 3.5）2mL和水适量使成25mL，依法检查，含重金属不得过千万分之三。
问：（1）应取标准铅溶液（10μg Pb/mL）多少毫升？（2）若以氯化钠计，在该测定条件下，重金属的限量是多少？二、选择题1．下列叙述中不正确的说法是（B ）A. 鉴别反应完成需要一定时间B. 鉴别反应不必考虑“量”的问题C. 鉴别反应需要有一定的专属性D. 鉴别反应需在一定条件下进行E. 温度对鉴别反应有影响2．药物杂质限量检查的结果是1.0ppm，表示（E ）A. 药物中杂质的重量是1.0μgB. 在检查中用了1.0g供试品，检出了1.0μgC. 在检查中用了2.0g供试品，检出了2.0μgD. 在检查中用了3.0g供试品，检出了3.0μgE. 药物所含杂质的重量是药物本身重量的百万分之一3．药物中氯化物杂质检查的一般意义在于它（D ）A. 是有疗效的物质B. 是对药物疗效有不利影响的物质C. 是对人体健康有害的物质D. 可以考核生产工艺和企业管理是否正常E. 可能引起制剂的不稳定性4．微孔滤膜法是用来检查（C ）A. 氯化物B. 砷盐C. 重金属D. 硫化物E. 氰化物5．干燥失重主要检查药物中的（D ）A. 硫酸灰分B. 灰分C. 易碳化物D. 水分及其他挥发性成分E. 结晶水6．检查某药品杂质限量时，称取供试品W(g)，量取待检杂质的标准溶液体积为V(mL)，浓度为C(g/mL)，则该药品的杂质限量是（C ）A. W/（C．V）ⅹ100%B. C．V．Wⅹ100%C. V．C/Wⅹ100%D. C．W/Vⅹ100%E. V．W/Cⅹ100%（习题二）制剂分析一、练习思考题1．药物制剂分析有何特点？2．含量均匀度的含义是什么？什么情况下要进行含量均匀度测定？3．什么叫标示量？制剂的含量限度表示方法有哪几种类型？4．中药制剂的常用鉴别试验有哪些？5．生化药物的特点是什么？6．精密量取维生素C注射液4mL（相当于维生素C 0.2g），加水15mL与丙酮2mL，摇匀，放置5min，加稀醋酸4mL与淀粉指示液1mL，用碘滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显蓝色，并持续30s不褪。
酸性染料比色法测定苦马豆中总生物碱含量
酸性染料比色法测定苦马豆中总生物碱含量赵清梅;余永涛【摘要】采用酸性染料比色法测定苦马豆[Swainsonia salsulaTaubert(Sphaerophysa salsula (Pall.)DC.)]中总生物碱含量.以苦参碱为标准品,溴麝香草酚蓝为染色液,在pH 7.6缓冲溶液中与生物碱反应,反应产物用氯仿萃取,萃取液于414 nm处测定其吸光度.应用建立的酸性染料比色法对宁夏不同地区采集的苦马豆样品中总生物碱含量进行分析.结果表明,苦参碱在0.001 7～0.013 3 μg/μL内与吸光度线性关系良好,回归方程为y=50.549 0x-0.047 7 (R2=0.999),苦参碱的平均回收率为103.17(RSD为1.70％),测得宁夏平罗县、盐池县、银川市采集的苦马豆中总生物碱质量分数分别为0.026％、0.024％、0.017％.该方法灵敏、可靠、操作简便,可用于苦马豆中总生物碱含量的测定.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2015(000)007【总页数】4页(P1710-1712,1716)【关键词】苦马豆[Swainsonia salsula Taubert(Sphaerophysa salsula (Pall.)DC.)];酸性染料比色法;总生物碱;苦参碱【作者】赵清梅;余永涛【作者单位】北方民族大学生物科学与工程学院,银川750021;国家民族事务委员会发酵酿造工程生物技术重点实验室,银川750021;宁夏大学农学院,银川750021【正文语种】中文【中图分类】R927.2;O657.32苦马豆［Swainsonia salsula Taubert（Sphaerophysa salsula （Pall.）DC.）］是豆科苦马豆属草本植物，别名羊卵蛋、羊尿泡、尿泡草、红花苦豆子等，广泛分布于内蒙古、宁夏、甘肃、青海、新疆等地［1］。
苦马豆全草、果可入药，民间用于治疗肾炎、慢性肝炎、肝硬化腹水等疾病。
酸性染料比色法测定不同种质槟榔总生物碱的含量
酸性染料比色法测定不同种质槟榔总生物碱的含量杨新全;何明军;卢丽兰;侯明【摘要】目的:建立一种简便且准确测定槟榔中总生物碱含量的方法.方法:以氢溴酸槟榔碱为对照品,采用酸性染料比色法测定总生物碱的含量,测定波长为618 nm.结果:槟榔总生物碱在20 ～120 μg呈线性关系,回归方程为Y=4.226 7 X-0.005 2(r=0.999 6),平均回收率为99.6％,RSD=1.54％.稳定性、精密度和重复性都比较高,RSD分别为1.32％,0.109％,2.18％.样品分析结果为红心槟榔含量最高,常见槟榔含量次之,西瓜槟榔较低.结论:该方法操作简便、灵敏、准确,可用于槟榔总生物碱的质量控制.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2014(016)003【总页数】3页(P199-201)【关键词】酸性染料比色法;槟榔;总生物碱【作者】杨新全;何明军;卢丽兰;侯明【作者单位】中国医学科学院药用植物研究所海南分所,海南万宁 571533;海南省南药资源保护与开发重点实验室,海南万宁571533;中国医学科学院药用植物研究所海南分所,海南万宁 571533;海南省南药资源保护与开发重点实验室,海南万宁571533;中国医学科学院药用植物研究所海南分所,海南万宁 571533;海南省南药资源保护与开发重点实验室,海南万宁571533;中国医学科学院药用植物研究所海南分所,海南万宁 571533;海南省南药资源保护与开发重点实验室,海南万宁571533【正文语种】中文槟榔是棕榈科植物槟榔Areca catechu L.的干燥成熟种子，原产于马来西亚，在我国主产于海南、台湾、云南河口及西双版纳热带雨林间，广西、广东及福建仅有少量分布[1]。
槟榔作为我国著名四大南药之首，是一种常用中药，其主要成分是生物碱。
据目前分析测定，槟榔含生物碱0.3%～0.6%，主要为槟榔碱，含量为0.1%～0.5%；其余为槟榔次碱、去甲基槟榔次碱、去甲基槟榔碱、槟榔副碱和高槟榔碱等，它们均与鞣酸结合而存在[2]。
酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量 (1)
酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量一、目的要求掌握酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱含量的原理和方法。
二、基本原理在适当的介质中，生物碱（B ）可与氢离子（H +）结合成阳离子（BH +），一些酸性染料，如溴百里酚蓝、溴酚蓝、溴甲酚紫或溴甲酚绿等，在此条件下可解离成阴离子（In -）。
上述阳离子与阴离子定量地结合成有色配位物（BH +In -）离子对，可以定量地溶于某些有机溶剂，在一定波长处测定该溶液有色离子对的吸光度，即可计算出生物碱含量。
++−→←+BH H B-++−→←In H HIn有机相水相)()(__In BH In BH In BH ⋅−→←⋅−→←+++-+三、实验方法对照品溶液的配制 取延胡索乙素对照品约2mg ，精密称定，置25ml 量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的配制 取延胡索粉末约0.5g ，精密称定，置50ml 具塞锥形瓶中，加少量氨水湿润（约20滴），密塞放置15分钟，精密加乙醚-三氯甲烷-甲醇（25：8：2.5）混合溶剂25ml ，轻轻摇匀，称重，冷浸一周，称重，补足重量，滤过，精密吸取续滤液10ml ，置25ml 具塞锥形瓶中，水浴加热挥干溶剂，精密加入三氯甲烷10ml ，使完全溶解，摇匀，即得。
测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液1ml ，分别置分液漏斗中，各精密加三氯甲烷9ml ，再分别加溴甲酚绿溶液5ml ，振摇3分钟后，静置使分层；同法制备空白溶液。
分取上述三种溶液的三氯甲烷液，在410nm 的波长处测定吸光度，按下式计算，即得。
%100%)1(25(%)⨯-⨯⨯=水分含量样对对样W C A A式中 A 样与A 对分别为供试品溶液与对照品溶液吸光度；C 对为对照品溶液中延胡索浓度，g/ml ；W 样为取样量，g 。
四、思考题1．酸性染料比色法的影响因素有哪些？2．本法中使用的溶剂均有挥发性，操作中应注意哪些事项？。
酸性染料比色法测定千里光总生物碱含量
海科导超声仪器公 司）Ｒ 一０ ０ ； Ｅ ３０ 旋转蒸发器（ 上海 亚荣生化仪器厂 ）Ｆ Ｂ 型万能粉碎机 （ ；Ｙ ５ 天津市泰
斯 特仪 器有 限责任 公 司 ）Ｌ ４ ２型离 心 机 （ 京 医 ；Ｄ — 北 用 离心 机厂 ）ｐ Ｓ ２Ｃ型数 字酸 度 计 （ ；Ｈ 一 ５ 梅特 勒 仪器 有 限公 司 ） 试剂 均为 分析 纯 。
［ ｓｒｃ］Ｏ ｊｃｉｅ Ｔ ｅ ｒ ｎ ｅｔｔ ｌ ｌｉｓ ｏｔｎ ｉ Ｓｎｃｏｓａｄ ｎ ｕ ｈ一 ｍ Ｍｅｈ ｄ ： ｓ ｇｔｅｏｙ ａ ｉｅａ Ａｂｔａｔ ｂｅｔ ： ｏｄｔ ｍｉｅｔ ａ ａ ａｏ ｎｅｔｎ ｅｅ ｉ ｃｎ ｅｓＢ ｃ ． ｖ ｅ ｈ ｏｌ ｋ ｄ ｃ Ｈａ ． ｔｏ ｓ Ｕ ｉ ｘｍ ｔｎ ｓ ｎ ｈ ｒ
密 加 入 ７ ％乙 醇 １ Ｌ超 声 溶 解 千 里 光 总 碱 ， ０ ０ｍ 冷
１ ． ０
ｍＬ ， ２５ 项 操作 “ ”
．
， ４ ２ｌ 在 ２ ｍ波 长 处测 定 吸光 度 ， ｑ ＿ 计
算 回收率 ， 结果 见表 ｌ 。
表 １ 回收 率 实验结 果
却， 补重 ， 作为千里光样品储备溶液。
２１ 加样 回收率 实验 精 密称 取适 量千里光药 ． １ 材 ， ９份 ， 表 １ 别 精 密 加 入 氧 化苦 参 碱 对 照 共 按 分
品溶液（． ５ｍ ／Ｌ ， ０１ ｇ ）每个梯度平行操作 ３ ， ３ ｍ 份 按
“ ４ 项方法制备样品储备液 ， ２ ” 精密取上述溶液
．
取２ ， 次 每次 １ ， ． ｈ 过滤 ， ５ 合并提取液 ， 回收乙醇 ， 得 浸 膏。加 ３ 倍量 ２ ％盐酸至浸膏中， 超声溶解 ， 加适 量石油醚分 ２次进行脱脂 ， 脱脂后 的酸水液加氨水 调 ｐ ＝０ 用氯仿萃取 ２ ， Ｈ １， 次 合并氯仿液 ， 加蒸馏水 洗涤氯仿液 ， 回收氯仿得千里光总碱。精密称定 ， 精
酸性染料比色法测定斜脉暗罗茎、叶和皮中总生物碱含量
（ Ａ Ｒ） ； 溴 甲酚绿 （ Ａ Ｒ） ； 小檗碱标准品 （ 成都领航者生物 ） ； ｐ Ｈ 值为４ ． ５的醋 酸 一醋酸钠缓 冲液 ； ０ ． ０ １ ｍｏ ｌ ／ Ｌ氢 氧化 钠溶液
（ 用乙醇溶解 ） 。 斜脉 暗罗采 自海南省 昌江县霸王 岭 自然保护 区 ， 由海南
匀 即得 ２ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ标准溶液 。取 小檗碱对照 品溶液 ， 显色后进 行可见 一紫外全波长扫描 ， 结果表明对照品溶液在 ６ ２ ８ ｎ ｍ处
有最大 吸收峰 。经多次重复 ， 峰形一致且空白对 照无干扰 ， 故 选择 ６ ２ ８ ｎ ｍ作为 样 品测定 的波长 。取标 准溶 液 １ ． ２ 、 ２ ． ４ 、 ３ ． ６ 、 ４ ． ８ 、 ６ ． ０ 、 ７ ． ２ ｍ Ｌ分别置于 ２ ０ ｍ Ｌ容量瓶 中， 用三氯 甲烷
江苏农业科学 ２ ０ １ ４年第 ４ ２卷第 １ 期
刘冰 晶， 曾 靖， 李
一 ２ ６ ３一
超， 等． 酸性染料 比色法测定斜脉暗罗茎、 叶和皮中总生物碱含量 ［ Ｊ ］ ．江苏农 业科 学， ２ ０ １ ４ ， ４ ２ （ １ ） ： ２ ６ ３ — ２ ６ ４
酸性染料 比色法测定斜脉暗罗茎 、 叶和皮 中总生物碱含量
罗 总生 物碱含量 的测定。
关键 词 ： 斜脉暗罗 ； 总生物碱 ； 紫外分光光度法 ； 茎； 叶； 皮
中图分类号 ： Ｒ ２ ８ ４ ． ２ 文献标 志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ４） ０ １— ０ ２ ６ ３— ０ ２
斜脉暗罗 （ Ｐ ｏ ｌ ｙ ａ ｌ ｔ ｈ ｉ ａ ｐ ｌ ａ ｇ ｉ ｏ ｎ ｅ ｕ ｒ ａ ） 属番荔枝科 （ Ａ ｎ ｎ ｏ ｎ ａ ｅ ｅ —
酸性染料比色法测定雅连中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定雅连中总生物碱的含量李雪磊;米盈盈;王秋红;匡海学【摘要】Objectiue:To determine total alkaloids in coptidis deltoideae, which can be used for quality control. Methods: Berberine hydrochloride was used as a control standard. The contents of total alkaloids were determined by acid dye colorimetry. Results:The linear range of berberine hydrochloride was 44.7~178.8μg·mL-1, the regres-sion equation wasY=1.7765x+0.124, r=0.9991. The average recovery was 100.35%, and RSD was 1.02%. Conclu-sion:This method is accurate with good reproducibility, which can be used for quality control.%目的:测定雅连中总生物碱的含量,为其质量的控制提供实验依据.方法:以盐酸小檗碱为标准品,采用酸性染料比色法测定雅连总生物碱的含量.结果:盐酸小檗碱在44.7~178.8μg·mL-1内,回归方程为Y=1.7765x+0.124,r=0.9991,吸光度与浓度具有良好的线性关系,平均回收率分别为100.35%,RSD=1.02%.结论:该方法准确度好,有一定的专属性,为雅连质量的控制提供实验依据.【期刊名称】《化学工程师》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】3页(P29-31)【关键词】雅连;总生物碱;酸性染料比色法【作者】李雪磊;米盈盈;王秋红;匡海学【作者单位】黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040【正文语种】中文【中图分类】R927.2雅连为四川著名道地药材，来源于毛茛科植物三角叶黄连（Coptis deltoideaC.Y.Cheng et Hsiao）的根茎，其味苦，寒，归心、脾、胃、肝、胆、大肠经，清热燥湿，泻火解毒。
染料化学论文酸性染料比色法测定苦参药材中总生物碱的含量
染料化学论文/酸性染料比色法测定苦参药材中总生物碱的含量【摘要】目的：建立酸性染料比色法测定苦参药材中总生物碱的含量。
方法：将苦参的酸水提取液用氢氧化钠溶液调节至中性后，依次加入pH=7.6缓冲溶液，溴代麝香草酚蓝指示液、氯仿混合振摇，静置分层，于413 nm波长处测定氯仿层吸收度。
结果：苦参碱检测浓度在0.004mg/mL～0.02 mg／mL范围内与吸收度线性关系良好，平均加样回收率为98.96%(RSD=1.59%)，并对实际药材进行了含量测定。
结论：本方法操作简便、准确，可用于苦参药材的质量控制。
【关键词】酸性染料比色法苦参碱含量测定Abstract Objective：To establish a method to determine total alkaloids in radix Sophora lavescens by acid dye colorimetry．Methods：total alkaloids of radix Sophora lavescens were extracted by acidified water，then adjusted to neutral by sodium hydroxide solution, dissolved with buffer solution，then were mixed with 0.025％ of bromothymol solution and chloroform，and then the mixture was shaken，standing and demixed，the absorbability of chloroform layer was detected at the wavelength of 413nm．Results：The detection concentration of matrine showed good linearity with its absorbability within the range of 0.004 mg/mL～0.20 mg／mL(r=0.9992)，the average recovery was 98.96％(RSD=1.59％)．three radix Sophora lavescens from different source were determined with this method.Conlusion：The established method is simple and accurate，which can be used for quality control of Radix Sophora flavescentis.Key words Acid dye colorimetry；Matrine；Content determination中药苦参是豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根，所含有的生物碱是苦参药理作用的主要有效成分，具有抗炎、抗肿瘤、镇痛、抗心律失常、平喘、镇咳、杀菌等作用［１，２］。
酸性染料比色法测定玛咖总生物碱含量的方法研究_卢馨
酸性染料比色法测定玛咖总生物碱含量的方法研究卢馨1，刘文虎1，曾里1，黄张君2，易彬2，曾凡骏1*1. 四川大学食品科学与工程系（成都 610065）；2. 泸州老窖集团养生酒业有限责任公司（泸州 646000）摘要以苦参碱为对照品, 采用酸性染料比色法测定玛咖总生物碱的含量, 研究并建立玛咖总生物碱的测定方法。
对检测方法使用的最大吸收波长、缓冲液pH、缓冲液用量、0.05%溴甲酚绿显色剂用量、溶液振摇时间、氯仿萃取时间进行了优化研究。
结果显示, 此方法精密度RSD=0.95%, 回收率为108.03%, RSD=0.79%, 表明该方法具有较好的精密度和稳定性; 且操作简单, 具有良好的可重复性。
此方法测得云南丽江玛咖总生物碱含量为0.7%, 苦参碱最低检测限为0.86 μg。
关键词酸性染料比色法; 玛咖; 总生物碱Determination of Total Alkaloids in Maca by Acid Dye Colorimetry Lu Xin1, Liu Wen-hu1, Zeng Li1, Huang Zhang-jun2, Yi Bin2, Zeng Fan-jun1*1. Department of Food Science, Sichuan University (Chengdu 610065);2. Luzhou Laojiao Group Health Wine Industry Co., Ltd. (Luzhou 646000)Abstract With the matrine as reference, establish a method for the determination of total alkaloids in Maca by acid dye colorimetry, and research and establish the determination methods of total alkaloids in Maca. The detection method of the maximum absorption wavelength, buffer pH, the dosage of buffer solution, 0.05% of bromocresol green coloration agent dosage, solution of shaking time, chloroform extraction time were studied. The results showed that the RSD=0.95% of precision, the recovery was 108.03%, RSD=0.79%, showed that the method had good precision and stability; And the operation is simple, with good repeatability. This method measured the content of alkaloids was 0.7% of Maca, the lowest detection limit of matrine was 0.86 μg.Keywords acid dye colorimetry; Maca; total alkaloids玛咖（Lepidium meyenii Walp），十字花科独行菜，属一年生或2年生草本植物，原产于秘鲁安第斯山区[1]，其块根可以药食兼用，具有悠久历史，近十多年来更逐渐成为开发的热点之一。
酸性染料比色法测定对叶百部中总生物碱含量
收稿日期：2022-07-11基金项目：广西壮瑶药重点实验室基金资助项目（桂科基字［2014］32号）；广西2011协同创新中心基金资助项目（桂教科研［2013］20号）；广西南宁市科学研究与技术开发计划基金资助项目（20193120）作者简介：吴港圆（1997-），女（侗族），湖南通道人，在读硕士研究生，研究方向为叶百部野生及迁地栽培品种种质资源开发，（电话）158****8597（电子信箱）*****************；通信作者，王孝勋（1973-），男，湖南常德人，研究员，博士，主要从事中药品种、质量及资源开发研究，（电话）159****1099（电子信箱）****************。
吴港圆，覃海琴，胡东南，等.酸性染料比色法测定对叶百部中总生物碱含量［J ］.湖北农业科学，2023，62（12）：154-157．中药百部为百部科百部属植物直立百部（Ste⁃mona sessilifolia Miq.）、蔓生百部（Stemona japonica （Bl.）Miq.）或对叶百部（Stemona tuberosa Lour.）的干燥块根，甘、苦，微温，归肺经，具有润肺下气止咳、杀虫灭虱的功效［1］，对叶百部是目前市场上百部类药材的主要来源［2］。
对叶百部包含生物碱类和其他非生物碱类化学成分。
生物碱类是百部属植物的主要化学成分及活性成分［3］，是百部止咳和杀虫的主要活性物质［4，5］。
百部药材中的生物碱成分在类别和含量上有差异，直立百部和蔓生百部的化学成分基本相同，而对叶百部与直立百部、蔓生百部的化学成分差异显著［6-8］。
中药材的质量评价以2020年《中华人民共和国药典（一部）》（以下简称《中国药典》）为准则，保证中药安全、有效、稳定及可控。
《中酸性染料比色法测定对叶百部中总生物碱含量吴港圆1a ，覃海琴1a ，胡东南2，张淼1b ，谢凤凤1b ，王孝勋1a（1.广西中医药大学，a.药学院；b.广西壮瑶药重点实验室，南宁530200；2.广西壮族自治区药用植物园，南宁530023）摘要：采用酸性染料比色法测定不同发育时期的对叶百部（Stemona tuberosa Lour.）中总生物碱含量，采用酸性染料比色法，以对叶百部碱为对照品，溴麝香草酚蓝为酸性染料，甲醇、三氯甲烷提取，4%盐酸溶解，在413nm 波长下测定。
酸性染料比色法测定飞龙掌血提取物中总生物碱的含量
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பைடு நூலகம்
AC T A U N IVER SIT AT IS T R ADIT IO N IS M EDIC ALIS SIN EN SIS PHAR M AC O LO GIAEQ U E SHAN GHAI Vol． 26 N o． 1 Jan．，2012
1 材料
1． 1 药物与试剂 飞龙掌血饮片购于河北省安国 市冷背药材有限公司，并经上海中医药大学生药教 研室赵志礼教授鉴定为飞龙掌血 Toddalia asiatica Lam． 的根。氯化两面针碱对照标准品，购自中国药 品生物制品检定所，编号： 110848-200502，供含量测定 用。溴百里香草酚蓝（ 染色剂） 、溴酚蓝（ 染色剂） 、溴 甲酚绿（ 染色剂） 、柠檬酸（ 分析纯） 、十二水合磷酸氢 二钠（ 分析纯） 、甲醇（ 分析纯） 、乙醇（ 分析纯、工业
磨至粉末充分溶解后，加入 200 ml 的蒸馏水稀释， 移入具塞的广口瓶中备用； 溴酚蓝： 称取 0． 1 g 溴酚 蓝粉 末，于 研 钵 中，加 入 3． 0 ml 的 0． 05 mol / L NaOH，研磨至粉末充分溶解后，加入 200 ml 的蒸馏 水稀释，移入具塞的广口瓶中备用； 溴甲酚绿： 称取 0． 1 g 溴 甲 酚 绿 粉 末，于 研 钵 中，加 入 2． 8 ml 的 0． 05 mol / L NaOH，研 磨 至 粉 末 充 分 溶 解 后，加 入 200 ml 的蒸馏水稀释，移入具塞的广口瓶中备用。 2． 1． 4 缓冲溶液的配制 称取十二水合磷酸氢二 钠（ Na2 HPO4 ·12H2 O） 和柠檬酸（ 2-hydroxy-1，2，3propanetricarboxylic acid） 固体，分别用蒸馏水充分溶 解。将十二水合磷酸氢二钠作为碱溶液缓缓加入柠 檬酸溶液中以调配 不 同 pH 值 的 缓 冲 液。本 文 以 pH 3． 5、4． 0、4． 5、5． 0 和 5． 5 为筛选对象，研究不同 pH 值的缓冲液对含量测定的影响。 2． 2 测试波长的选择 精密吸取对照品溶液和供 试品溶液各 400 μl，分别放入已盛有 5． 0 ml pH = 4． 0缓冲液的分液漏斗，再分别加入溴百里香草酚
酸性染料比色法测定百部养肺膏中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定百部养肺膏中总生物碱的含量摘要目的：建立百部总生物碱的测定方法，测定百部及其制剂总生物碱的含量。
方法：以盐酸麻黄碱为对照品，采用酸性染料比色法，在波长414 nm处测定百部总生物碱含量。
结果：在51.5～206 ng范围内百部总生物碱的线性关系良好，回归方程Y＝0.004 6X+0.038 4，相关系数r＝0.999 3(n=5);平均回收率为99.3 %（RSD＝1.0%）。
结论：该方法准确、可靠、重复性好，可作为百部及其制剂的质量控制标准。
关键词百部生物碱比色法百部养肺膏是我院治疗咳嗽的特色制剂，主药百部为常用中药，性味甘、苦、微温，归肺经,具有润肺止咳、杀虫灭虱的功效,可用于治疗咳嗽、肺痨、百日咳、体虱、癣疥等。
百部主要有效成分是其所含的多种百部生物碱，为有效地对该药进行质量控制，笔者建立了百部的含量测定方法，以提高百部养肺膏中总生物碱的得率和含量。
1 仪器与试药1.1 仪器VIS-UV 2450型可见-紫外分光光度计(日本岛津)；Sartorius BS124S 型电子天平(德国赛多利斯公司，1/万)；BRANSONB5200S－DT超声清洗仪(必能信超声上海有限公司)；梅特勒-托利多DELTA320型pH计。
1.2 试剂与药品盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号：171242-200405)；溴甲酚绿(分析纯，上海试剂三厂)；醋酸钠、冰醋酸、正丁醇、甲醇等试剂均为分析纯。
6批百部养肺煎膏（本院制剂室生产，批号分别为060404，060608，060911，061124，070404，070530）；百部饮片3批（上海虹桥饮片厂提供，批号分别为060427，061101，070411）。
2 方法与结果2.1 样品供试液的制备百部饮片：精密称取通过60目筛的百部粉末0．5 g ，精密加入水饱和正丁醇40 mL，放置过夜，超声20min，滤过，残渣用少量水饱和正丁醇冲洗滤过，合并所有滤液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至5 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
酸性染料比色法测定川乌、草乌中总乌头生物碱的含量
由表2最末一行可见,因素B 的离差平方和与空白列的离差平方和相同,所以认为因素B 对试验结果没有影响,同时,把S B 值合并在空白列的平均离差平方和中作为误差估计,提高分析的精确度。
结果见表3。
表3 方差分析表方差来源离差平方和自由度方差F显著性A S A =S 1=0.05920.02958.433CS C =S 4=0.00920.0045 1.29误差Se =S 2+S 3=0.01440.0035∑0.0828 注:F 1-0.01(2,4)=18.0;F 1-0.05(2,4)=6.94;F 1-0.10)(2,4)=4.32。
4 讨论从用L 9(34)正交表对扶正胶囊进行提取工艺比较的结果来看,对黄芪甲甙含量的影响程度为煎煮次数>加水量>煎煮时间,最佳提取条件为A 3B 2C 3,但A Ⅱj 值与A Ⅲj 值两者相比较,几乎在同一数量级上,由于A 2较之A 3煎煮次数少1次,从省时节能、降低成本的角度及含固量的多少等角度考虑选择,则A 2B 2C 3为最佳提取方案,即扶正胶囊的最佳提取条件为煎煮2次,每次1h ,加水12倍量。
参考文献:[1] 鲁 静,王宝琴.黄芪甲甙的薄层扫描法测定[J ].中成药,1992,14(6):34[2] 王宝琴,苏 健,鲁 静,黄芪甲甙的检测在中药质控中的应用[J ].中国中药杂志,1996,21(3):161酸性染料比色法测定川乌、草乌中总乌头生物碱的含量李云霞, 孙 照, 郭艳玲(承德中药集团有限责任公司,河北承德067000)摘要:目的:摸索快速简便的毒性中药川乌、草乌的含量测定方法。
方法:用酸性染料比色法测定制川乌、草乌中的总乌头生物碱含量。
结果:在浓度1.85～18.52μg/ml 范围内线性关系良好,加样回收率为101.23%,RSD 为1.42%。
结论:建立的方法可用于川乌、草乌的定量测定。
关键词:川乌草乌;酸性染料比色法;乌头碱中图分类号:972.2 文献标识码:B 文章编号:100121528(2000)0920662202收稿日期:2000203230作者简介:李云霞(1960～),女,河北承德市人,高级工程师,研究方向:中药制剂与质量标准研究。
苗药紫金龙中生物碱含量的酸性染料比色法测定
㊀ә基金项目:贵州ＧＮＹＬ(２０１７)００８ꎬ黔苗医药Ｋ字[２０１７]０３６㊀作者简介:杨雅欣(１９９０－)ꎬ女ꎬ从事中药民族药有效成分分离分析研究ꎮ㊀∗通讯作者:张敬杰(１９７１－)ꎬ女ꎬ教授ꎬ从事民族药资源及活性成分的研究ꎮ苗药紫金龙中生物碱含量的酸性染料比色法测定ә杨雅欣１㊀徐仕娟１㊀冯小翠１㊀罗国勇１㊀张敬杰２∗(１.贵阳中医学院贵州省苗医药重点实验室ꎬ贵州㊀贵阳㊀５５００２５ꎻ㊀２.贵阳中医学院第二附属医院ꎬ贵州㊀贵阳㊀５５０００２)摘㊀要㊀目的:测定苗药紫金龙中总生物碱的含量ꎬ为其质量控制提供实验依据ꎮ方法:以乌头碱为标准品ꎬ采用酸性染料比色法测定紫金龙总生物碱的含量ꎮ结果:乌头碱在０.１ｍｇ/ｍＬ~０.３ｍｇ/ｍＬ范围内ꎬ回归方程为Ｙ＝２.７６Ｘ＋０.０３８６(ｒ＝０.９９９)ꎬ吸光度与浓度具有良好的线性关系ꎬ平均回收率为９３.１５％ꎬＲＳＤ＝０.０２％ꎮ结论:该方法准确度好ꎬ具有一定的专属性ꎬ为紫金龙质量的控制提供实验基础ꎮ关键词㊀紫金龙ꎻ总生物碱ꎻ酸性染料比色法中图分类号:Ｒ２９１.６㊀文献标识码:Ｂ㊀文章编号:１００６－６８１０(２０１８)１０－００４１－０２㊀㊀紫金龙为毛茛科乌头属植物深裂黄草乌(Ａｃｏｎｉｔｕｍｖｉｌ￣ｍｏｒｉｎｉａｎｕｍｖａｒ.ａｌｔｉｆｉｄｕｍＷ.Ｔ.Ｗａｎｇ)的根及根茎ꎮ收载于«贵州省中药材㊁民族药材质量标准»(２００３版)ꎮ是苗族习用药材ꎬ具有祛风除湿ꎬ温经止痛的功效ꎬ用于治疗风湿性关节炎等病症[１]ꎮ据文献报道ꎬ该属植物中的化学成分包括生物碱㊁黄酮㊁甾体及糖苷类等ꎬ其中有效成分及特征成分主要为二萜生物碱类[２－４]ꎮ因二萜生物碱类化合物广泛的生物活性ꎬ一直是药物学家寻找新药的一个重要来源[５]ꎮ目前ꎬ未见紫金龙总生物碱含量测定的文献报道ꎮ酸性染料比色法是测定中药总生物碱含量的一种经典方法[６－７]ꎬ本文拟通过紫外－可见分光光度计ꎬ利用酸性染料比色法测定苗药紫金龙中总生物碱的含量ꎮ旨在建立紫金龙提取物中总生物碱含量测定的方法ꎬ为其质量评价提供科学依据ꎮ１㊀仪器与试药１.１㊀仪器㊀紫外可见分光光度计(ＵＶ－５００ꎬ上海元析仪器有限公司)ꎬ超声波清洗器(ＳＫ８２１０ＨＰꎬ上海科导超声仪器有限公司)ꎬ恒温水浴锅(ＤＲＨＨꎬ上海双捷实验设备有限公司)ꎬ分析天平(ＡＲ２１４０ꎬ上海奥豪斯有限公司)ꎮ１.２㊀试药㊀乌头碱对照品(３０２－２７－２ꎬ贵州迪大科技有限责任公司ꎬ纯度ȡ９８％)ꎻ无水乙醇(分析纯ꎬ天津市富宇精细化工有限公司)ꎬ石油醚(分析纯ꎬ天津市凯信化学工业有限公司)ꎬ正丁醇(分析纯ꎬ天津市富宇精细化工有限公司)ꎬ氯仿(分析纯ꎬ西陇化工股份有限公司)ꎬ甲醇ꎬ氢氧化钠等均为分析纯ꎻ溴甲酚绿(指示剂ꎬ天津市科密欧化学试剂有限公司)ꎬ实验用水为蒸馏水ꎮ１.３㊀药材㊀药材购自贵阳市万东桥中药市场ꎬ经贵阳中医学院孙庆文教授鉴定为毛茛科乌头属植物深裂黄草乌Ａｃ￣ｏｎｉｔｕｍｖｉｌｍｏｒｉｎｉａｎｕｍｖａｒ.ａｌｔｉｆｉｄｕｍＷ.Ｔ.Ｗａｎｇ的根茎ꎮ２㊀方法与结果２.１㊀试液溶液的制备２.１.１㊀供试品溶液的制备㊀精密称取紫金龙药材粉末(过６０目筛)２.０ｇ于２５ｍＬ的圆底烧瓶中ꎬ按紫金龙最佳提取方案[８]ꎬ加入固液比１:８的６５％乙醇溶液１６ｍＬꎬ８５ħ水浴回流提取２.５ｈꎬ冷却ꎬ过滤ꎬ７０ħ蒸干溶剂ꎬ浸膏加入７５％乙醇１５ｍＬ使之溶解ꎬ转入分液漏斗中ꎬ分别用等体积的石油醚㊁氯仿㊁正丁醇依次萃取３次ꎬ合并萃取液ꎬ取氯仿萃取液所得浸膏用７５％乙醇５ｍＬ溶解至完全ꎬ精密量取０.３ｍＬ于５ｍｌ容量瓶中ꎬ７５％乙醇定容至刻度ꎬ即得供试品溶液ꎮ２.１.２㊀对照品溶液的制备㊀精密称取乌头碱对照品５.０ｍｇꎬ甲醇定容至５ｍＬꎬ制得１.０ｍｇ/ｍＬ对照品贮备液ꎬ逐级稀释ꎬ得到０.１㊁０.１５㊁０.２㊁０.２５㊁０.３ｍｇ/ｍＬ的乌头碱对照品溶液ꎮ２.１.３㊀酸料染料的制备[９]㊀０.０５ｍｏｌ/Ｌ氢氧化钠溶液的配制:精密称取氢氧化钠０.２ｇ于１００ｍＬ锥形瓶中ꎬ加入蒸馏水使之溶解并稀释至刻度ꎬ即得ꎮ溴甲酚绿缓冲液的配制:精密称取溴甲酚绿０.１ｇꎬ加入０.０５ｍｏｌ/Ｌ氢氧化钠２.８ｍＬ使之溶解ꎬ再加水稀释至２００ｍＬꎬ即得ꎮ２.２㊀测定条件的选择２.２.１㊀酸性染料的显色方法㊀精密吸取乌头碱对照品或供试品溶液１.２ｍＬ置６０ｍＬ的分液漏斗中ꎬ分别加入溴甲酚绿溶液２４ｍＬ和氯仿１２ｍＬꎬ密塞剧烈振摇２０ｍｉｎꎬ静置分层１０ｍｉｎꎬ取氯仿层进行紫外－可见光检测ꎮ２.２.２㊀测定波长的选择㊀以２.１.１ꎬ２.１.２的方法分别制备供试品及对照品溶液ꎬ并按照２.２.１的显色方法显色ꎬ在１９０~８００ｎｍ波长范围内进行光谱扫描ꎬ考察吸收波长ꎮ结果表明ꎬ供试品在４１０~４２０ｎｍ处有最大吸收ꎬ乌头碱对照品在４１０~４１５ｎｍ处有最大吸收峰ꎬ综合考虑ꎬ最终选择４１５ｎｍ作为实验检测波长ꎮ２.３㊀酸性染料比色法的方法学考察２.３.１㊀标准曲线的制备㊀精密称取乌头碱对照品５.０ｍｇꎬ１４中国民族医药杂志㊀２０１８年１０月㊀第２４卷㊀第１０期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀甲醇定容至５ｍＬꎬ制得１.０ｍｇ/ｍＬ对照品贮备液ꎬ逐级稀释ꎬ得到０.１㊁０.１５㊁０.２㊁０.２５㊁０.３ｍｇ/ｍＬ的乌头碱对照品溶液ꎮ分别精密吸取１.２ｍＬ置６０ｍＬ的分液漏斗中ꎬ加入溴甲酚绿溶液２４ｍＬ和氯仿１２ｍＬꎬ密塞剧烈振摇２０ｍｉｎꎬ静置分层１０ｍｉｎꎬ取氯仿层于４１５ｎｍ波长处测定吸光度值ꎮ以对照品浓度为横坐标ꎬ吸光度值为纵坐标绘制曲线ꎬ得回归方程为Ｙ＝２.７６Ｘ＋０.０３８６(ｒ＝０.９９９ꎬｎ＝５)ꎮ结果表明ꎬ乌头碱的浓度在０.１ｍｇ/ｍＬ－０.３ｍｇ/ｍＬ范围内与吸光度值呈良好的线性关系ꎮ图1标准曲线的绘制２.３.２㊀精密度试验㊀精密吸取浓度为０.２ｍｇ/ｍＬ的乌头碱对照品置于分液漏斗中ꎬ按 ２.２.１ 项下的操作方法ꎬ取氯仿层于４１５ｎｍ波长处测定吸光度ꎬ连续测定６次ꎬ测得ＲＳＤ＝０.７４％ꎬ说明仪器所测得数据准确可靠ꎮ２.３.３㊀重现性试验㊀取同一批紫金龙药材细粉６份ꎬ每份２.０ｇꎬ按照 ２.１.１ 项下方法制备供试品溶液ꎬ精密吸取供试品溶液６份ꎬ每份１.２ｍＬꎬ依 ２.２.１ 项下方法处理显色后ꎬ于４１５ｎｍ波长处测定吸光度ꎬ结果紫金龙中总生物碱平均含量为７.８２ｍｇ/ｇꎬＲＳＤ＝１.４３％ꎬ表明实验方法重现性良好ꎮ２.３.４㊀稳定性试验㊀精密吸取同一供试品溶液１.２ｍＬꎬ依 ２.２.１ 项下方法处理显色后ꎬ分别在０ꎬ２０ꎬ４０ꎬ６０ꎬ８０ꎬ１００ｍｉｎ于４１５ｎｍ波长处测定吸光度ꎬ结果ＲＳＤ＝０.８０％ꎬ表明供试品溶液在１００ｍｉｎ内基本稳定ꎮ２.３.５㊀加样回收率试验㊀精密称取已知含量的紫金龙药材粉末６份ꎬ分别加入等量乌头碱对照品ꎬ按 ２.１.１ 项下方法制备供试品溶液ꎬ依 ２.２.１ 项下方法处理显色后ꎬ于４１５ｎｍ波长处测定吸光度ꎬ根据回归方程计算回收率ꎮ结果见表１ꎮ表１㊀紫金龙总生物碱加样回收率测定结果样品量(ｍｇ)对照品量(ｍｇ)吸光度回收率(％)平均回收率(％)ＲＳＤ(％)５００.０４.８９６０.６５８９０.９２５００.１４.８９７０.６６１９１.８２９３.１５０.０２５００.１４.８９７０.６６５９３.０６５００.２４.８９８０.６７４９５.８１５００.２４.８９８０.６６４９２.７３５００.３４.８９９０.６７０９４.５６２.３㊀样品的含量测定㊀取４个批次的紫金龙提取物ꎬ每个批次平行测定３次ꎬ每次精密量取１.２ｍＬꎬ依 ２.２.１ 项下进行酸性染料比色ꎬ取氯仿层于４１５ｎｍ波长处测定吸光度ꎬ根据标准曲线计算紫金龙总生物碱的含量ꎬ得出紫金龙中总生物碱平均含量为７.２７ｍｇ/ｇꎮ表２㊀紫金龙提取物中总生物碱含量测定结果(ｎ＝３)序号紫金龙提取物批次总生物碱含量(ｍｇ/ｇ)平均含量(ｍｇ/ｇ)１２０１６１００１９.７９２２０１６０１０５８.２３３２０１６０３０７４.６１４２０１６０９０９６.４５７.２７３㊀讨论酸性染料比色法是生物碱类化合物与氢离子生产阳离子ꎬ酸性染料比色与其定量结合成有色络合物ꎬ被有机溶剂提取ꎬ在一定波长处测定其吸光度ꎬ即可计算总生物碱的含量[６]ꎮ酸性染料比色法所测定的结果较准确ꎬ应用较多ꎮ本实验采用酸性染料比色法ꎬ通过紫外－可见分光光度计检测对苗药紫金龙药材总生物碱进行定量分析ꎬ建立其中总生物碱含量测定的方案ꎮ测得紫金龙提取物中总生物碱的含量平均为７.２７ｍｇ/ｇꎮ该方法具有一定的专属性和准确度ꎬ灵敏度高ꎬ简便易行ꎬ适宜紫金龙药材中总生物碱含量测定ꎮ参考文献[１]贵州省药品监督管理局.贵州省中药材㊁民族药材质量标准[Ｍ].贵阳:贵州科技出版社ꎬ２００３:３６８. [２]李谦ꎬ过立农ꎬ郑健ꎬ等.乌头属药用植物的研究进展[Ｊ].药物分析杂志ꎬ２０１６ꎬ３６(７):１１２９－１１４９. [３]安婧娴ꎬ刘芳ꎬ曾光尧ꎬ等.近年来乌头属植物二萜生物碱化学成分及其镇痛活性研究进展[Ｊ].中南药学ꎬ２０１６ꎬ１４(５):５２１－５２５.[４]薛姣ꎬ杨春华ꎬ刘静涵ꎬ等.乌头属植物二萜生物碱研究进展[Ｊ].海峡药学ꎬ２００９ꎬ２１(２):１－１０.[５]杨雅欣ꎬ刘俊宏ꎬ李勇军ꎬ等.紫金龙低极性部位的生物碱成分研究[Ｊ].天然产物研究与开发ꎬ２０１５ꎬ２７(１):６１３－６１６.[６]姜华ꎬ李军ꎬ徐强ꎬ等.白屈菜中总生物碱含量的酸性染料比色法测定[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２０１７ꎬ２８(４):８５４－８５６.[７]姚德中ꎬ闵会ꎬ何厚洪ꎬ等.不同产地浙贝母总生物碱含量测定与比较[Ｊ].中国现代应用药学ꎬ２０１４ꎬ１０(３１):１２４９－１２５１.[８]张琴ꎬ徐斌ꎬ贾琦ꎬ等.Ｃ１８型二萜生物碱化学成分及药理活性研究进展[Ｊ].中成药ꎬ２００９ꎬ３８(５):１１０９－１１１４. [９]卢馨ꎬ刘文虎ꎬ曾里ꎬ等.酸性染料比色法测定玛咖总生物碱含量的方法研究[Ｊ].食品工业ꎬ２０１４ꎬ３５(１):２４１－２４４.２０１８年５月７日收稿２４㊀㊀㊀㊀㊀ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＰｈａｒｍａｃｖｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｉｎｏｒｉｔｉｅｓ㊀Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１８ꎬＶｏｌ.２４Ｎｏ.１０。
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关键 词： 酸性染料 比色法； 福王草 ； 总生物碱； 含量测定 中图分类号： Ｒ ２ ８ ４ ． ２ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １ — ４ ７ ２ １ （ ２ ０ １ ７ ） ０ １ — ０ ０ ２ ６ — ０ ３
ｂ ｅ ｉ ｆ ｎ ｅ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｄ ｅ ｗａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ａ ｓ ａ ｒ ｅ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ． Ｔｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｓ ｏ ｆ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ａ ｌ ｋ ａ ｌ ｏ ｉ ｄ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ ａ ｃ ｉ ｄ ｄ ｙ ｅ ｃ ｏ ｌ ｏ ｒ ｉ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ． Ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ａ ｎ —
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特 产 研 究
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１ ． １ 仪 器
Ｕ Ｖ－ ５ ５ ０ ０ 紫 外可 见分 光光度 仪 （ 上海 元析仪 器有 限公 司） ； Ｂ Ｔ － ２ ５ Ｓ分析 天平 （ 北 京赛 多利 斯 仪器 系 统 有 限公 司） ； Ｒ Ｅ 一 ３ ０ ０ ０旋 转蒸 发仪 （ 上海 亚荣 生化 仪器 厂） ； ＫＱ ３ ２ ０ ０ ＤＥ型 医用数 控超 声波 清洗器 （ 昆山市超
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福 王草 （ Ｐ ｒ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ａ ｔ ａ ｒ ｉ ｎ ｏ ｗｉ ｉ Ｍａ ｘ ｉ ｍ） 又 名盘 果 菊， 为菊科 福王草 属 多年生 草本植 物 ， 分 布于 吉林省 、
辽 宁省 、 内蒙古 自治 区 ， 常 生于 山谷 、 山坡 林缘 、 林下、
ห้องสมุดไป่ตู้
１ 仪器 与试 药
Ｋｅ ｙｗｏ ｒ ｄ ｓ ： ａ ｃ ｉ ｄｄ ｙ ｅ ｃ ｏ ｌ ｏ ｉｍｅ ｆ ｔ ｒ ｙ； Ｐｒ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓｔ ａ ｔ ａ ｒ ｉ ｎ ｏ ｗｉ ｉ Ｍａ ｘ ｉ ｍ． ； ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ａ ｌ ｋ ａ ｌ ｏ ｉ ｄ ｓ ： ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
草地 或 水旁 潮湿 地 ［ １ ， ２ ］ 。研 究发现 ， 福 王草 中含 有 生
酸性染料 比色法测定福 王草 中总生物碱的含量
李 美娟 ， 冯琳琳 ， 王成 ， 赵 春芳 ※
（ 吉林大学药学 院， 长春 １ ３ ０ ０ ２ １ ）
摘要 ： 对福王草 中生物碱含量进行测定 ， 为其质量评价提供依据 。以盐酸小檗碱为对照 品， 采用酸性染料 比色法测定福王草总生 物碱含量 。盐酸 小檗碱在 ２ ０ ． ２ ０ ｐ ｇ ／ ｍＬ ￣ １ ２ １ ． ２ ｇ ／ ｍ Ｌ范 围有 良好 的线 性关系（ 严Ｏ ． ９ ９ ９ ６ ） ， 加样 回收率为 ９ ９ ． ６ ６ ％， Ｒ Ｓ Ｄ ＝ ｔ ． ４ ３ ％。 该方