大鼠白细胞介素10IL-10酶联免疫分析
il-10指标偏高
il-10指标偏高IL-10是一种细胞因子，它在免疫系统中发挥着重要的调节作用。
然而，当IL-10指标偏高时，可能会引发一系列健康问题。
本文将以IL-10指标偏高为题，探讨其对人类健康的影响以及相关的研究进展。
IL-10是一种由多种免疫细胞分泌的细胞因子，它在抗炎和免疫调节过程中起到重要的作用。
正常情况下，适度的IL-10水平可以帮助维持免疫系统的平衡，抑制过度炎症反应。
然而，当IL-10指标偏高时，可能会导致免疫系统的异常调节，从而引发一系列疾病。
IL-10指标偏高与免疫系统失调有关。
研究表明，IL-10的过度分泌可以抑制细胞免疫和体液免疫的功能，导致机体对病原体的抵抗力下降。
这可能会增加感染疾病的风险，使人容易患上各种感染性疾病。
IL-10指标偏高还与自身免疫性疾病的发生和发展密切相关。
自身免疫性疾病是免疫系统对自身组织产生异常免疫反应，导致组织和器官损伤。
IL-10过度分泌可能会抑制自身免疫细胞的活性，导致免疫耐受的丧失，从而引发自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、炎症性肠病等。
IL-10指标偏高还与肿瘤的发生和发展有关。
研究发现，IL-10能够抑制免疫细胞的抗肿瘤活性，促进肿瘤细胞的逃逸和生长。
因此，IL-10过度分泌可能会增加肿瘤的发生风险，并使肿瘤对治疗的抵抗力增强。
针对IL-10指标偏高的治疗策略主要包括抑制IL-10的产生和功能。
目前，已经有一些药物用于抑制IL-10的产生或阻断其受体的结合，以恢复免疫系统的正常功能。
此外，通过调节免疫细胞的活性，也可以间接地影响IL-10的水平。
然而，这些治疗策略仍处于研究阶段，需要进一步的临床试验验证其疗效和安全性。
IL-10指标偏高可能会引发多种健康问题，包括免疫系统失调、自身免疫性疾病和肿瘤的发生等。
针对IL-10指标偏高的治疗策略仍在研究中，希望能够为患者提供更有效的治疗手段。
通过深入研究IL-10的功能和调控机制，我们可以更好地理解其在健康和疾病中的作用，为相关疾病的预防和治疗提供科学依据。
人白细胞介素-10(IL-10)
人白细胞介素-10（IL-10）酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测人白细胞介素-10（IL-10），只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
用途：用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-10（IL-10）的测定。
工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人白细胞介素-10（IL-10）的水平。
向预先包被了人白细胞介素-10（IL-10）单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素-10（IL-10），温育；洗涤后，加入HRP标记过的白细胞介素-10（IL-10）抗体。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人白细胞介素-10（IL-10）的浓度呈正相关。
试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1．37℃恒温箱。
2．标准规格酶标仪。
3．精密移液器及一次性吸头4．蒸馏水，5．一次性试管6．吸水纸注意事项1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差3．建议所有标准品、样本都做双份检测。
如标本中待测物质含量过高，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再按说明书操作进行测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
4．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.5．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
7．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
洗板方法手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少注入孔内，浸泡1-2分钟。
根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
常见的细胞因子及主要生物学作用
常见的细胞因子及主要生物学作用细胞因子是一类分泌型蛋白质，它们在细胞间传递信号，调节和协调免疫、炎症、增殖和分化等生物学过程。
细胞因子在机体内起到桥梁的作用，调控细胞间的相互作用和通讯，对维持机体内稳态起到重要作用。
在这篇文章中，我们将介绍几种常见的细胞因子及其主要生物学作用。
1. 白细胞介素-1（IL-1）白细胞介素-1（IL-1）是一种重要的炎症介质，主要由活化的巨噬细胞和树突状细胞产生。
IL-1能够刺激免疫细胞产生炎症反应，增强血管通透性，促进炎症局部的渗出和浸润。
此外，IL-1还能够促进肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素-6（IL-6）的产生，进一步增强炎症反应。
IL-1对机体的免疫应答和炎症反应具有重要影响。
2. 白细胞介素-2（IL-2）白细胞介素-2（IL-2）是一种免疫调节因子，主要由激活的T细胞产生。
IL-2能够促进T细胞的增殖和分化，增强细胞免疫应答。
此外，IL-2还能够激活自然杀伤细胞（NK细胞），增强其杀伤活性。
IL-2在免疫治疗中被广泛应用，用于增强机体免疫功能，治疗某些肿瘤和免疫缺陷疾病。
3. 肿瘤坏死因子（TNF）肿瘤坏死因子（TNF）是一种重要的炎症介质，主要由巨噬细胞、T细胞和NK细胞产生。
TNF能够刺激炎症反应，增强血管通透性，促进炎症局部的渗出和浸润。
此外，TNF还能够抑制肿瘤生长和转移，参与体内的免疫监视和清除肿瘤细胞。
然而，过度产生的TNF 会导致炎症反应过度，引发严重的炎症性疾病。
4. 白细胞介素-6（IL-6）白细胞介素-6（IL-6）是一种多功能的细胞因子，主要由巨噬细胞、T细胞和B细胞产生。
IL-6在炎症反应中起到重要作用，能够刺激肝脏产生急性期反应蛋白，增强免疫细胞的增殖和活化。
此外，IL-6还能够促进B细胞的分化和抗体产生，参与体内的免疫应答。
IL-6的异常产生与多种炎症性和自身免疫性疾病的发生发展密切相关。
5. 白细胞介素-10（IL-10）白细胞介素-10（IL-10）是一种抗炎细胞因子，主要由活化的T细胞和B细胞产生。
il10受体分类
IL-10（白细胞介素-10）是一种细胞因子，具有抗炎和免疫调节的作用。
IL-10受体是指与IL-10结合并传递信号的受体分子。
IL-10受体可以分为两类：IL-10R1和IL-10R2。
1. IL-10R1：IL-10R1是IL-10受体的主要亚单位，它与IL-10结合后形成高亲和力的复合物。
IL-10R1是一种细胞膜上的受体，广泛分布在多种免疫细胞表面，如单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和B细胞等。
IL-10R1的结构包括外膜区、跨膜区和胞浆区，胞浆区与信号传递相关。
2. IL-10R2：IL-10R2是IL-10受体的辅助亚单位，它与IL-10R1共同形成功能完整的IL-10受体复合物。
IL-10R2主要存在于细胞膜上，与IL-10R1结合后增强了IL-10与细胞膜的亲和力。
IL-10R2的结构也包括外膜区、跨膜区和胞浆区，胞浆区与信号传递相关。
IL-10受体的结合和信号传递可以调节多种免疫细胞的功能，抑制炎症反应和免疫应答，起到抗炎和免疫调节的作用。
研究IL-10受体的分类和功能有助于深入理解免疫调节的机制，并为相关疾病的治疗提供新的思路。
IL10升高的临床意义 (2)
IL10升高的临床意义
IL-10（白细胞介素-10）是一种免疫调节因子，它起着重
要的抗炎作用。
IL-10的升高在临床上可能具有以下几个意义：
1. 抑制免疫反应：IL-10能够抑制炎症反应和免疫细胞的活化，减少炎症介质的释放，从而降低免疫反应。
在炎症性
疾病如风湿性关节炎、炎症性肠病等中，IL-10的升高可以减轻炎症症状，缓解疾病的进展。
2. 免疫耐受：IL-10能够促进免疫系统对自身抗原的耐受，抑制自身免疫反应。
在自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮、多发性硬化症等中，IL-10的升高可以减少自身免疫攻击，缓解疾病的发展。
3. 对肿瘤的抑制作用：IL-10能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散，并促使肿瘤细胞凋亡。
IL-10的升高在肿瘤治疗中可能有助于增强免疫反应，抑制肿瘤生长。
4. 预后评估：IL-10的升高在某些疾病中可能与预后有关，如感染性疾病、重症肺炎等。
通过监测IL-10水平的变化，可以评估疾病的进展和治疗效果。
综上所述，IL-10的升高在临床上可能与炎症调节、免疫耐受、肿瘤抑制和预后评估等方面有关。
然而，IL-10的升高在临床上的具体意义还需要进一步的研究和证实。
医生应综合考虑患者的病情和其他指标来综合评估。
白介素10__人白介素10-IL-10使用说明书
GMP级重组人白介素10（冻干粉）Recombinant Human IL-10作用机理：白细胞介素-10(IL-10)是多种哺乳动物细胞类型产生的免疫抑制细胞因子，包括巨噬细胞、单核细胞、T细胞、B 细胞和角质形成细胞。
IL-10 抑制 IL-1 和 TNF-α等促炎细胞因子的表达.和 IL-4 一样，IL-10 增强了体液免疫反应，减弱了细胞介导的免疫反应.人白细胞介素-10 对小鼠细胞具有活性，而小鼠白细胞介素-10 对人细胞无活性。
规格参数：货号：TL-639 规格：50ug产品信息：表达宿主：人HEK293细胞同源名称：B-TCGF, CSIF, TGIF ,IL-10,IL10A ,GVHDS,MGC126450,MGC126451,RP11-262N9.1,Interleukin-10 蛋白序列：DNA 序列编码人 IL-10（NP_000563.1）表达带有 His 标签在 C 末端分子量：IL-10 包含 166 个氨基酸，预测分子量为 19.5kd纯度：≥95%采用 SDS-PAGE 凝胶和高效液相色谱分析内毒素：≤0.01EU/ug（凝胶法）生物活性：确定通过剂量依赖性作用，与人白细胞介素 4(IL-4)共同刺激 MC/9 细胞，ED 50为≤2.0ng/mL，对应的特异性活性为≥5×105 IU/mg纯化方式：层析纯化性状：白色疏松体保存温度：2-8℃有效期：24 个月生产厂家：同立海源生物使用说明：稳定性和储存：冻干的样本的可以在4℃保存 24 个月，溶解后的液体可以于-20℃保存 6-12 个月，并且避免反复冻融相关产品：Human IL-2、Human IL-15、Human IL-12、Human IL-6、Human IL-18、Human IL-21、Human IFN-γ、Human GM-CSF、Human EGF、NK细胞培养试剂盒。
白细胞介素-10的免疫双重作用及抗炎应用进展
第59卷 第2期2023年04月青岛大学学报(医学版)J O U R N A LO FQ I N G D A O U N I V E R S I T Y (M E D I C A LS C I E N C E S)V o l .59,N o .2A pr i l 2023[收稿日期]2021-03-25; [修订日期]2023-03-31[基金项目]山东省新旧动能转换重大工程重大课题攻关项目(鲁发改重大办[2018]1268号);山东省重大科技创新工程项目(2018C X G C 1404)[第一作者]王贞丽(1971-),女,硕士,副主任药师㊂E -m a i l :q d -w z h e n l i @163.c o m ㊂[通信作者]丁会芹(1987-),女,博士,高级工程师㊂E -m a i l:d i n g h u i q i n @k l t ph a r m.c n ㊂白细胞介素-10的免疫双重作用及抗炎应用进展王贞丽1,秦欢2,王建刚3,丁会芹2,3(1 中国人民解放军海军青岛特勤疗养中心质量管理科,山东青岛 266071;2 青岛大学基础医学院;3 康立泰生物医药(青岛)有限公司)[摘要] 白细胞介素-10(I L -10)是抗炎细胞因子,近年来,大量研究显示I L -10兼具免疫刺激和免疫抑制的双重作用㊂本文分析了I L -10发挥双重免疫调节作用的机制与主要抗炎作用通路,综述了I L -10在炎性疾病中的治疗潜力及I L -10的药物开发方向㊂[关键词] 白细胞介素10;免疫调节;炎症;基因治疗[中图分类号] R 979.5 [文献标志码] A [文章编号] 2096-5532(2023)02-0313-04d o i :10.11712/jm s .2096-5532.2023.59.061[开放科学(资源服务)标识码(O S I D )][网络出版] h t t ps ://k n s .c n k i .n e t /k c m s 2/d e t a i l /37.1517.R.20230522.1154.011.h t m l ;2023-05-23 17:09:07A D V A N C E S I NT H ED U A LI MM U N O R E G U L A T O R YR O L EO FI N T E R L E U K I N -10A N DI T SA P P L I C A T I O NI N A N T I -I N F L A M -M A T I O N WA N GZ h e n l i ,Q I N H u a n ,WA N GJ i a n g a n g ,D I N G H u i qi n (Q u a l i t y M a n a g e m e n tS e c t i o no fQ i n g d a oS p e c i a l S e r v i c eS a n a t o r i u m C e n t e r o f P L A N a v y ,Q i n gd a o 266071,C h i n a )[A B S T R A C T ] I n te r l e u k i n -10(I L -10)i s a na n t i -i nf l a mm a t o r y c y t o k i n e ,a n d i n r e c e n t y e a r s ,a l a r gen u m b e r o f s t u d i e sh a v e s h o w n t h a t I L -10h a s t h e d u a l r o l e o f i mm u n o s t i m u l a t i o n a n d i mm u n o s u p p r e s s i o n .T h i s a r t i c l e a n a l yz e s t h em e c h a n i s mo f t h e d u a l i mm u n o r e g u l a t o r y r o l e o f I L -10a n d t h em a i n a n t i -i n f l a mm a t o r y p a t h w a y s o f I L -10a n d r e v i e w s t h e t h e r a p e u t i c p o t e n t i a l o f I L -10i n i n f l a mm a t o r y d i s e a s e s a n d t h e f u t u r e d i r e c t i o n f o r d r u g d e v e l o pm e n t .[K E Y W O R D S ] i n t e r l e u k i n -10;i mm u n o m o d u l a t i o n ;i n f l a mm a t i o n ;g e n e t i c t h e r a p y30年前,人们首次发现白细胞介素-10(I L -10),认为其是T h 2细胞分泌的标志性细胞因子㊂在I L -10发现初期,人们便证明它可以抑制T h 1细胞产生炎性细胞因子[1],以及通过下调主要组织相容性复合体Ⅱ(MH C -Ⅱ)抑制单核细胞的抗原递呈能力,从而阻止T 细胞特异性增殖[2]㊂但随着研究的深入,人们逐渐发现I L -10不仅具有抗炎的免疫抑制作用,同时又有免疫刺激作用,这可能是阻碍I L -10临床应用的重要原因㊂本文通过对I L -10免疫双重作用的分析及抗炎作用的机制研究进展进行综述,分析I L -10抗炎方面的治疗潜力,旨在为I L -10抗炎作用的临床应用和药物开发提供参考依据㊂1 I L -10结构与来源I L -10是由两个非共价键结合的单体组成的同型二聚体分子,分子量约36000,每个单体由160个氨基酸组成,在单体之间存在两个二硫键连接㊂I L -10主要由活化的T 细胞㊁单核细胞㊁巨噬细胞㊁树突状细胞㊁自然杀伤细胞和B 细胞分泌,其中T 细胞是I L -10的主要来源[3]㊂值得注意的是,近年来研究显示,一些非造血细胞(如上皮细胞)也能够产生I L -10,当内源性和外源性递质(例如脂多糖㊁儿茶酚胺和c AM P 升高药物)激活这些细胞时,I L -10就会释放出来[4]㊂2 I L -10在免疫反应中的双重作用及影响因素早先的研究认为,I L -10的主要作用是抑制炎症反应㊂然而,近些年的研究结果却表明I L -10可能存在免疫双重作用,即在某些情况下促进炎症反应的发生而非抗炎,这一作用可能是阻碍I L -10在炎症性疾病中应用的原因之一㊂例如,R E N N I C K 等[5]研究发现,I L -10缺陷型小鼠自发性发展为炎症性肠病(I B D ),体内产生大量促炎细胞因子;而过表达I L -10的小鼠可以抵抗葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎,这表明内源性I L -10能够预防I B D 的发生㊂此外,I L -10在胰腺炎[6]㊁糖尿病[7]㊁脓毒症[8]动物模型中均表现出了抑制炎症作用㊂然而临床研究结果却与预期相反,给予重组人源I L -10(r h I L -10)病人临床症状并没有显著地改善,且疗效在病人间存在较大差异,r h I L -10对疾病严重程度高㊁内源性I L -10血清水平低病人的疗效高于疾病严重程度低㊁I L -10血清水平高的病人[9];此外,低至中剂量的r h I L -10给药可改善病人临床症状,而高剂量r h I L -10全身给药促进疾病进展,这与血清促炎细胞因子水平升高有关[10]㊂以上研究结果提示,I L -10的免疫双重作用取决于炎症程度和I L -10剂量,此外还与靶细胞类型㊁免疫反应阶段等有关系㊂2.1 I L -10作用于不同靶细胞介导不同的免疫效应I L -10在免疫系统中的作用可以分为固有免疫与适应性免疫两个方面㊂在固有免疫中I L -10作用于抗原递呈细胞Copyright ©博看网. All Rights Reserved.314青岛大学学报(医学版)59卷(A P C s),主要诱导免疫抑制反应㊂A P C s如巨噬细胞(Mø)和树突状细胞(D C s)表达高水平的I L-10受体(I L-10R),并在激活后进一步上调其表达[11],A P C s中I L-10信号通路的一般功能是维持免疫稳态,抑制促炎反应㊂因此,在固有免疫中I L-10发挥抗炎作用㊂而适应性免疫中I L-10发挥免疫双重作用,这取决于T 细胞的异质性㊂T细胞主要参与适应性免疫,不同于A P C s 本身高表达I L-10R,T细胞一般在激活后才上调I L-10R,即在幼稚T细胞中表达最低,在记忆T细胞中表达最高[12]㊂因此,I L-10影响T细胞在不同炎症阶段的功能㊂一方面, I L-10在炎症过程中直接抑制C D4+T细胞亚群的促炎效应[13]㊂F o x p3高表达的C D4+T细胞是重要的促炎细胞,其表面表达C D40L蛋白,能够激活B细胞从而促进炎症的发生[14]㊂此外I L-10还可影响F o x p3+调节性T细胞(F o x p3+ T r e g)的稳定性,抑制炎症的发生㊂而1型调节T(T R1)细胞是一类F o x p3低表达的C D4+T细胞,其特征是表达多种共抑制受体(L A G-3㊁T I M-3㊁P D-1㊁C T L A-4㊁T I G I T)但不表达C D40L,研究发现I L-10能促进T R1细胞的稳定性和功能,发挥抗炎作用[15]㊂此外,I L-10还能够抑制T h17细胞的分化[16]㊂另一方面,I L-10调控C D8+T细胞可能发挥相反的效应,肿瘤内C D8+T细胞经I L-10诱导后释放I F N-γ和颗粒酶/穿孔素,I F N-γ一般可促进炎症,但也有报道认为其与I L-10可能在免疫抑制中起协同抗炎作用;另外,I L-10还刺激C D8+T细胞的细胞毒性功能以及记忆免疫的形成,发挥促炎作用[17]㊂2.2 T细胞中I L-10的浓度与功能的关系在健康志愿者体内进行的I L-10临床试验显示,在脂多糖(L P S)诱导内毒素血症的情况下,高剂量的r h I L-10除了能够抑制A P C s和C D4+T细胞活化外,还可诱导细胞毒性C D8+T细胞活化[18]㊂提示I L-10的双重功能不仅依赖于靶细胞,还依赖于I L-10的浓度,即A P C s和C D4+T细胞在低浓度和高浓度I L-10水平时均可以被控制,而C D8+T细胞则需要高浓度I L-10才能被激活㊂但是I L-10在什么情况下激活相同靶细胞(如C D8+T细胞㊁T h1细胞和T h17细胞)的促炎或抗炎信号还需要进一步的研究㊂此外,I L-10的细胞来源和辅助因子(如其他细胞因子)是否会影响I L-10的双重功能尚不清楚㊂在肿瘤治疗研究方面,N A I N G等[19]选择晚期实体瘤病人作为研究对象,聚乙二醇修饰的I L-10(P E G-I L-10)以1~ 40μg/k g剂量每日一次皮下给药,研究药物安全性和耐受性,结果表明P E G-I L-10可激活全身免疫反应,免疫刺激细胞因子升高,血清中转化生长因子β降低,其中1例葡萄膜黑色素瘤病人和4例肾细胞癌病人以20μg/k g剂量治疗8周后病情缓解㊂而在炎症性疾病的研究方面,F E D O R A K 等[20]应用r h I L-10(1~20μg/k g)治疗轻度至中度活动性克罗恩病病人,结果显示5μg/k g剂量的治疗效果最佳㊂此外T I L G等[21]研究显示,应用20μg/k g剂量r h I L-10皮下注射治疗克罗恩病会导致病人血清I F N-γ水平升高,不仅没有观察到对克罗恩病的临床疗效,反而观察到发热㊁头痛等副作用㊂以上结果提示低剂量I L-10可抑制C D4+T细胞发挥抗炎作用,用于治疗炎症疾病;而高剂量I L-10可诱导C D8+T 细胞活化,抗炎作用减弱,但可用于抗肿瘤治疗㊂3I L-10抗炎作用相关级联通路I L-10作用于靶细胞后发生何种反应取决于细胞表面I L-10R的参与和细胞内的信号级联[22]㊂I L-10R由α㊁β两个亚基组成,I L-10Rα主要表达于白细胞,与I L-10高亲和性结合,而I L-10Rβ则是广泛表达的,与I L-10辅助性结合㊂与I L-10Rα亚单位相关的J a n u s激酶(J A K)和与I L-10Rβ亚单位相关的酪氨酸激酶(T Y K)在I L-10的作用下发生磷酸化,然后激活信号转导蛋白和转录激活蛋白(S T A T s)同源/异源二聚化并移位到细胞核中,进而调节免疫反应,如降低MH C-Ⅱ的表达,减少A P C s分泌促炎细胞因子,以及上调参与调节巨噬细胞失活的肌腱膜纤维肉瘤基因B型蛋白,从而抑制炎性因子的表达㊂研究表明,除经典的J A K-S T A T 级联通路外,I L-10还可以通过激活磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸-3-激酶(P I3K)/A k t级联通路,增强抗凋亡因子B c l-2和B c l-x l的表达,同时降低c a s p a s e-3的表达水平,从而阻止细胞凋亡[23]㊂E D D I E I P等[24]提出了另一条与I L-10代谢有关的机制通路:I L-10抑制L P S诱导的葡萄糖摄取和糖酵解,并促进氧化磷酸化;此外,I L-10通过激活S T A T-D D I T4通路抑制雷帕霉素靶蛋白(m T O R)靶点的活性来控制细胞代谢,并认为I L-10的这种代谢控制对炎症的控制至关重要㊂因此,与其多重来源一样,I L-10也靶向多种细胞和通过多种分子途径来抑制或刺激免疫反应[22]㊂4I L-10的抗炎应用研究进展4.1外源性I L-10蛋白治疗鉴于I L-10具有广泛的抗炎作用,人们首先想到通过应用外源性I L-10治疗疾病,目前已在多种动物模型或临床试验中证实了重组I L-10蛋白对疾病的疗效㊂MA Z E R等[25]通过建立小鼠脓毒症模型研究显示,I L-10一方面抑制单核细胞产生T N F-α,降低炎症反应;另一方面激活适应性免疫促进T细胞产生I F N-γ,激活机体抗感染反应,表明I L-10不论是对先天性免疫的抑制作用还是对适应性免疫系统的刺激作用均对脓毒症具有积极的治疗作用㊂K R I S HN A-MU R T H Y等[26]对小鼠急性心肌梗死模型研究显示,造模后第0㊁1㊁3㊁5㊁7天皮下注射50μg/k g重组I L-10可改善心室功能,减轻心肌纤维化,降低小鼠死亡率㊂HO S等[27]建立了角膜缝线诱导的大鼠角膜新生血管模型,结膜注射小鼠重组I L-10蛋白10μg/L治疗,结果表明I L-10可以抑制炎症反应并抑制血管生成,证明I L-10具有治疗病理性角膜炎的潜力㊂T I N S L E Y等[28]的研究显示,连续向孕鼠腹腔注射r h I L-10可减轻其子痫样症状㊂Z HA O等[29]用不同浓度I L-10处理小鼠视网膜色素上皮细胞(R P E),结果显示I L-10可抑制R E P细胞增殖和迁移,下调炎症因子分泌,表明I L-10Copyright©博看网. All Rights Reserved.2期王贞丽,等.白细胞介素-10的免疫双重作用及抗炎应用进展315具有改善风湿性视网膜脱离的潜力㊂尽管外源性I L-10蛋白治疗在动物实验中表现出了不错的效果,然而在临床试验中却并未表现出良好的疗效㊂原因可能是由于I L-10半衰期短,药代动力学不确定,作用机制复杂,很难通过简单地提供外源性I L-10蛋白来达到临床需求㊂4.2I L-10抗体药物治疗I L-10全身性给药不仅治疗效果不佳,还容易引起不良反应,新的开发策略倾向于I L-10的靶向给药㊂例如,由意大利P h i l o g e n公司开发的单克隆抗体-细胞因子融合蛋白F8-I L-10(D e k a v i l)就是基于抗体的药物传递策略,由人F8抗体(靶向纤维连接蛋白结构域A)与I L-10融合,能够在疾病部位传递和积累细胞因子,在治疗类风湿性关节炎(R A)和I B D中很有前景[30]㊂F R A N Z等[31]研究显示,F8/I L-10在慢性排斥反应发展过程中有治疗效果㊂G A L E A Z Z I等[32]在临床试验中应用F8/I L-10与甲氨蝶呤联合治疗R A,与安慰剂组相比显示出较好的疗效㊂Q I A O等[33]则开发了基于西妥昔单抗的I L-10融合蛋白,能够延长I L-10半衰期并有助于I L-10肿瘤靶向递送,具有更好的抗肿瘤效果㊂I L-10抗体药物解决了单独使用重组I L-10蛋白给药特异性差的问题,是未来新药开发的一个有效途径㊂4.3I L-10基因治疗基因治疗和基因编辑(基因的功能修饰)代表了人类疾病治疗的未来方向㊂I L-10的基因治疗同样成为了近年来主要的研究方向㊂C Y P E L等[34]在肺移植前使用编码I L-10的腺病毒载体(A d h I L-10)进行基因治疗以修复原发性移植物功能障碍导致的供体肺损伤,结果显示A d h I L-10治疗后肺功能(动脉氧压和肺血管阻力)有显著改善,促炎细胞因子表达向抗炎细胞因子表达转变,肺泡-血液屏障恢复完整性㊂O I S H I等[35]研究也显示,慢病毒I L-10基因疗法增加了肺移植模型小鼠I L-10的表达,具有积极作用㊂为了对抗移植排斥反应,J E O N G等[36]构建了携带巨细胞病毒I L-10(v I L-10)基因重组腺病毒载体,治疗供体大鼠1h后进行皮肤异体移植,结果证明移植物中的v I L-10基因提高了移植物存活率并减少急性排斥反应,证明I L-10基因治疗是预防移植排斥反应的一种有效的免疫抑制方法㊂此外,结肠炎小鼠模型直肠给药编码I L-10的慢病毒载体和腹腔注射编码I L-10的质粒均安全地穿透局部黏膜组织,对小鼠结肠炎有治疗作用[37]㊂将编码h I L-10质粒注入去卵巢大鼠牙龈,能抑制牙槽骨吸收,抑制促炎细胞因子的表达,治疗牙周炎[38]㊂不同于以上研究中直接使用I L-10基因载体,有研究构建了慢病毒C X C L10载体,以C X C L10启动子基因间接调节I L-10的过表达,结果显示R A病人滑膜细胞产生的炎症细胞因子减少,该研究提供了一种适用于R A的诱导型局部基因治疗方法㊂综上所述,I L-10是一种具有抗炎和促炎特性的多效细胞因子,炎症程度㊁I L-10剂量㊁靶细胞类型㊁免疫反应阶段等均可影响I L-10的抗炎效应㊂外源性重组I L-10蛋白已经在众多炎症性疾病动物模型中表现出了良好的药理作用,近年来,随着抗体药物与基因治疗的发展,研究者们开始致力于I L-10融合蛋白药物㊁抗体药物或基因治疗药物的开发㊂本综述聚焦在I L-10免疫调节双重作用的因素与I L-10成药性研究上,旨在为I L-10抗炎药物开发提供参考㊂[参考文献][1]F I O R E N T I N O DF,Z L O T N I K A,MO S MA N N T R,e ta l.I L-10i n h i b i t sc y t o k i n e p r o d u c t i o nb y a c t i v a t e d m a c r o p h a g e s[J].T h e J o u r n a l o f I mm u n o l o g y,1991,147(11):3815-3822.[2]N E UMA N N C,S C H E F F O L D A,R U T Z S.F u n c t i o n sa n dr e g u l a t i o no fTc e l l-d e r i v e d i n t e r l e u k i n-10[J].S e m i n a r s i n I m-m u n o l o g y,2019,44:101344.[3]WA N GXT,WO N G K,O U Y A N G WJ,e t a l.T a r g e t i n g I L-10f a m i l y c y t o k i n e s f o r t h et r e a t m e n to fh u m a nd i s e a s e s[J].C o l dS p r i n g H a r b o rP e r s p e c t i v e si n B i o l o g y,2019,11(2):a028548.[4]O U Y A N G W J,O G A R R A A.I L-10f a m i l y c y t o k i n e s I L-10a n d I L-22:f r o mb a s ic s c i e n c e t o c l i n i c a l t r a n s l a t i o n[J].I mm u-n i t y,2019,50(4):871-891.[5]R E N N I C K D M,F O R T M M.L e s s o n s f r o m g e n e t i c a l l y e n g i-n e e r e da n i m a lm o d e l s.Ⅻ.I L-10-d e f i c i e n t(I L-10(-/-)m i c ea n d i n t e s t i n a l i n f l a mm a t i o n[J].A m e r i c a n J o u r n a l o fP h y s i o l o-g y G a s t r o i n t e s t i n a la n d L i v e r P h y s i o l o g y,2000,278(6):G829-G833.[6]林荣贵.白介素-10对重症急性胰腺炎大鼠血脑屏障损伤的影响及机制研究[D].福州:福建医科大学,2018.[7]赵辉.过表达I L-10的脂肪间充质干细胞促进糖尿病小鼠慢性创面愈合的研究[D].北京:北京协和医学院,2019. [8]翁金森,林静萍,叶勇,等.I L-10对脓毒症大鼠心肌损伤保护作用的实验研究[J].福建医药杂志,2019,41(6):148-149, 162.[9]F E D O R A K R N,G A N G L A,E L S O N C O,e t a l.R e c o m b i-n a n t h u m a ni n t e r l e u k i n10i nt h et r e a t m e n to f p a t i e n t s w i t hm i l d t om o d e r a t e l y a c t i v eC r o h n s d i s e a s e.T h e I n t e r l e u k i n10I n f l a mm a t o r y B o w e l D i s e a s e C o o p e r a t i v e S t u d y G r o u p[J].G a s t r o e n t e r o l o g y.2000,119(6):1473-1482.[10]王佳丽,刘丽华.I L-10对肿瘤免疫双向调节的研究进展[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2016,23(1):130-134.[11]WA N G W W,WA N GY M,L IK,e t a l.I L-10f r o md e n d r i t i cc e l l s b u t n o t f r o m Tr e g u l a t o r y c e l l s p r o t e c t s a g a i n s t c i s p l a t i n-i n d u c e d n e p h r o t o x i c i t y[J].P L o SO n e,2020,15(9):e0238816.[12]B E D K ET,MU S C A T EF,S O U K O U,e t a l.T i t l e:I L-10-p r o-d u c i n g Tce l l s a n d t h e i r d u a lf u n c t i o n s[J].S e m i n a r s i n I mm u-n o l o g y,2019,44:101335.[13]K UMA RR,N GS,E N GW E R D AC.T h e r o l e o f I L-10i nm a-l a r i a:ad o u b l ee d g e ds w o r d[J].F r o n t i e r si nI mm u n o l o g y, 2019,10:229.[14]V O G E LI,V E R B I N N E NB,MA E SW,e t a l.F o x p3+r e g u l a-t o r y Tc e l l s a r e a c t i v a t e d i n s p i t e o f B7-C D28a n dC D40-C D40Lb l oc k ad e[J].E u r o pe a nJ o u r n a l of I mm u n o l og y,2013,43(4):1013-1023.Copyright©博看网. All Rights Reserved.316青岛大学学报(医学版)59卷[15]B R O C KMA N N L,G A G L I A N IN,S T E G L I C H B,e t a l.I L-10r e c e p t o r s i g n a l i n g i s e s s e n t i a l f o rT R1c e l l f u n c t i o n i nv i v o [J].J o u r n a lo fI mm u n o l o g y(B a l t i m o r e,M d:1950),2017, 198(3):1130-1141.[16]L IQ S,A N D E R S O N C D,E G I L M E Z N K.I n h a l e dI L-10s u p p r e s s e s l u n g t u m o r i g e n e s i sv i aa b r o g a t i o no f i n f l a mm a t o r y m a c r o p h a g e-T h17c e l l a x i s[J].J o u r n a l o f I mm u n o l o g y(B a l t i-m o r e,M d:1950),2018,201(9):2842-2850.[17]B A T C HU R B,G R U Z D Y N O V,K O L L IB K,e t a l.I L-10s i g n a l i n g i n t h e t u m o rm i c r o e n v i r o n m e n t o f o v a r i a n c a n c e r[J].A d v a n c e s i nE x p e r i m e n t a lM e d i c i n ea n dB i o l o g y,2021,1290:51-65.[18]L A UW FN,P A J K R TD,H A C KCE,e t a l.P r o i n f l a mm a t o-r y e f f e c t s o f I L-10d u r i n g h u m a ne n d o t o x e m i a[J].J o u r n a l o fI mm u n o l o g y(B a l t i m o r e,M d:1950),2000,165(5):2783-2789.[19]N A I N G A,P A P A D O P O U L O S K P,A U T I O K A,e ta l.S a f e t y,a n t i t u m o r a c t i v i t y,a n d i mm u n e a c t i v a t i o n o f p e g y l a t e d r e c o m b i n a n t h u m a n i n t e r l e u k i n-10(AM0010)i n p a t i e n t sw i t ha d v a n c e d s o l i d t u m o r s[J].J o u r n a l o fC l i n i c a lO n c o l o g y:O f f i-c i a lJ o u r n a lo ft h e A m e r i c a n S o c i e t y o f C l i n i c a l O n c o l o g y,2016,34(29):3562-3569.[20]F E D O R A K R N,G A N G L A,E L S O N C O,e t a l.R e c o m b i-n a n t h u m a ni n t e r l e u k i n10i nt h et r e a t m e n to f p a t i e n t s w i t h m i l d t om o d e r a t e l y a c t i v eC r o h n s d i s e a s e.T h e I n t e r l e u k i n10I n f l a mm a t o r y B o w e l D i s e a s e C o o p e r a t i v e S t u d y G r o u p[J].G a s t r o e n t e r o l o g y,2000,119(6):1473-1482.[21]T I L G H,V A N MO N T F R A N SC,V A N D E N E N D E A,e ta l.T r e a t m e n t o fC r o h n s d i s e a s ew i t h r e c o mb i n a n t h u m a n i n-t e r l e u k i n10i n d u c e st h e p r o i n f l a mm a t o r y c y t o k i n e i n t e r f e r o ng a mm a[J].G u t,2002,50(2):191-195.[22]S A R A I V A M,V I E I R AP,O G A R R A A.B i o l o g y a n d t h e r a-p e u t i c p o t e n t i a lo f i n t e r l e u k i n-10[J].T h eJ o u r n a lo fE x p e r i-m e n t a lM e d i c i n e,2020,217(1),e20190418.[23]L I N LZ,C H E N H B,Z H A N G Y X,e ta l.I L-10p r o t e c t sn e u r i t e s i no x y g e n-g l u c o s e-d e p r i v e dc o r t i c a ln e u r o n st h r o u g h t h eP I3K/A k t p a t h w a y[J].P L o S O n e,2015,10(9): e0136959.[24]E D D I E I P W KE,H O S H IN,S HO U V A LDS,e t a l.A n t i-i n-f l a mm a t o r y e f f e c t o f I L-10m e d i a t e db y m e t a b o l i c r e p r og r a m-m i n g o fm a c r o p h a g e s[J].S c i e n c e(N e w Y o r k,N Y),2017, 356(6337):513-519.[25]MA Z E R M,U N S I N G E RJ,D R E WR Y A,e ta l.I L-10h a sd i f fe r e n t i a l ef f e c t s o n t h e i n n a t e a n d a d a p t i v e i mm u n e s y s t e m so f s e p t i c p a t i e n t s[J].J o u r n a l o f I mm u n o l o g y(B a l t i m o r e,M d: 1950),2019,203(8):2088-2099.[26]K R I S H N AMU R T H Y P,R A J A S I N G H J,L AM B E R SE,e ta l.I L-10i n h ib i t s i n f l a mm a t i o na n da t t e n u a t e s l e f tv e n t r ic u l a rr e m o d e l i n g a f t e rm y o c a r d i a l i n f a r c t i o nv i a a c t i v a t i o n o f S T A T3a n d s u p p r e s s i o no fH u R[J].C i r c u l a t i o n R e s e a r c h,2009,104(2):e9-e18.[27]H O SD,B U C H E RF,R E G E N F U S SB,e t a l.I L-10i n d i r e c t l yr e g u l a t e s c o r n e a l l y m p h a n g i o g e n e s i sa n dr e s o l u t i o no f i n f l a m-m a t i o nv i am a c r o p h a g e s[J].T h eA m e r i c a n J o u r n a l o f P a t h o l o-g y,2016,186(1):159-171.[28]T I N S L E YJH,S O U T HS,C H I A S S O N VL,e t a l.I n t e r l e u-k i n-10r e d u c e si n f l a mm a t i o n,e n d o t h e l i a l d y s f u n c t i o n,a n db l o o d p r e s s u r ei n h y p e r t e n s i v e p r e g n a n tr a t s[J].A m e r ic a nJ o u r n a l o fP h y s i o l o g y R e g u l a t o r y,I n t e g r a t i v ea n d C o m p a r a-t i v eP h y s i o l o g y,2010,298(3):R713-R719.[29]Z H A O Q,J I M L,WA N G X M.I L-10i n h i b i t sr e t i n a l p i g-m e n t e p i t h e l i u mc e l l p r o l i f e r a t i o n a n dm i g r a t i o n t h r o u g h r e g u-l a t i o n o fV E G F i n r h e g m a t o g e n o u s r e t i n a l d e t a c h m e n t[J].M o-l e c u l a rM e d i c i n eR e p o r t s,2018:17(5):7301-7306. [30]B R U I J N E N S T G,C H A N D R U P A T L A D M S H,G I O-V A N O N N IL,e t a l.F8-I L10:an e w p o t e n t i a l a n t i r h e u m a t i cd r u ge v a l u a t e d b y a P E T-g u i d e dt r a n s l a t i o n a la p p r o a c h[J].M o l e c u l a rP h a r m a c e u t i c s,2019,16(1):273-281.[31]F R A N Z M,D O L LF,G RÜN K,e t a l.T a r g e t e dd e l i v e r y o fi n t e r l e u k i n-10t o c h r o n i c c a r d i a c a l l o g r a f t r e j e c t i o nu s i n g ah u-m a na n t i b o d y s p e c i f i c t o t h e e x t r a d o m a i nAo f f i b r o n e c t i n[J].I n t e r n a t i o n a l J o u r n a l o fC a r d i o l o g y,2015,195:311-322.[32]G A L E A Z Z I M,B A Z Z I C H IL,S E B A S T I A N IG D,e ta l.Ap h a s e I Bc l i n i c a l t r i a lw i t hD e k a v i l(F8-I L10),a n i mm u n o r e-g u l a t o r y a r m e d a n t i b o d y f o r t h e t r e a t m e n t o f r h e u m a t o i d a r-t h r i t i s,u s e d i nc o m b i n a t i o nw i I hm e t h o t r e x a t e[J].T h e I s r a e l M e d i c a lA s s o c i a t i o n J o u r n a l,2014,16(10):666.[33]Q I A OJ,L I UZD,D O N GCB,e t a l.T a r g e t i n g t u m o r sw i t hI L-10p r e v e n t sd e n d r i t i cc e l l-m e d i a t e dC D8+Tc e l l a p o p t o s i s[J].C a n c e rC e l l,2019,35(6):901-915.e4.[34]C Y P E L M,L I U M Y,R U B A C H A M,e t a l.F u n c t i o n a l r e p a i ro fh u m a n d o n o rl u n g s b y I L-10g e n et h e r a p y[J].S c i e n c e T r a n s l a t i o n a lM e d i c i n e,2009,1(4):4r a9.[35]O I S H IH,J U V E TSC,MA R T I N U T,e t a l.An o v e l c o m-b i n e d e x v i v oa n d i n v i v o l e n t i v i r a l i n t e r l e u k i n-10g e n ed e l i v e r ys t r a t e g y a t t h e t i m eo f t r a n s p l a n t a t i o nd e c r e a s e sc h r o n i c l u n ga l l o g r a f t r e j e c t i o ni n m i c e[J].T h eJ o u r n a lo fT h o r a c i ca n dC a r d i o v a s c u l a r S u r g e r y,2018,156(3):1305-1315.[36]J E O N G Y,P A R KJK H,E U NS.V i r a l v e c t o rm e d i a t e d i n-t e r l e u k i n-10g e n e t r a n s f e r i n s k i n a l l o g r a f t[J].T r a n s p l a n t a t i o n P r o c e e d i n g s,2020,52(6):1864-1868.[37]MA T S UMO T O H,HA G A K,O H N OI,e t a l.M u c o s a l g e n et h e r a p y u s i n g a p s e u d o t y p e d l e n t i v i r u s v e c t o r e n c o d i n g m u r i n ei n t e r l e u k i n-10(m I L-10)s u p p r e s s e st h ed e v e l o p m e n ta n dr e-l a p s e o f e x p e r i m e n t a lm u r i n e c o l i t i s[J].B M C G a s t r o e n t e r o l o-g y,2014,14:68.[38]L IYF,MASZ,G U OJB,e t a l.E f f e c t o f l o c a l h I L-10g e n et h e r a p y o ne x p e r i m e n t a l p e r i o d o n t i t i si n o v a r i e c t o m i z e dr a t s [J].A c t aO d o n t o l o g i c aS c a n d i n a v i c a,2017,75(4):268-279.(本文编辑黄建乡)Copyright©博看网. 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细胞因子IL-10、IL-6与EBV阳性DLBCL诊断与预后相关研究
细胞因子IL-10、IL-6与EBV阳性DLBCL诊断与预后相关研究摘要：选取山东省莒南县人民医院2021年7月～2021年12月间健康体检者30例为对照组，患DLBCL疾病者30例为观察组，采用酶联免疫吸附试验（ELlSA）的测定方法分别测定30例观察组和对照组血清IL-6、IL-10水平。
研究IL-6、IL-10对EBV阳性的弥漫大B细胞淋巴瘤诊断与预后的相关性，为临床诊断与预后提供方法和依据。
关键词：IL-6；IL-10；DLBCL1.研究背景白细胞介素是一种由多种细胞产生并用于多种细胞的细胞因子。
多为多肽或糖蛋白具有低分子量、可溶性的特质。
作为体内免疫调节网络的重要组成部分，参与免疫细胞的发育、分化和功能调控;控制抗感染、抗肿瘤、诱导细胞凋亡等功能。
它主要用于特定疾病的辅助诊断、疾病疗效的检测和指导用药、机体免疫状态的评估。
白细胞介素-6(IL-6)是一种淋巴因子由成纤维细胞和活化T细胞产生，通过集落刺激因子的配合，促进原始髓源细胞的生长和分化，增强自然杀伤细胞的分裂。
在许多疾病中IL-6都表现出显著的改变。
IL-6表达障碍可引起多种疾病,其临床表现主要是IL-6水平在早期升高。
疾病的活跃阶段、肿瘤发展的变化、排斥反应的程度和治疗的有效性与IL-6水平的升高密切相关。
此外,研究表明,预后不良的DLBCL患者血清IL-6水平显著升高,这表明血清IL-6是DLBCL患者预后不良的因素之一。
白细胞介素-10(IL-10)是主要由单核细胞、巨噬细胞、T、B淋巴细胞产生的重要抗炎因子。
IL-10免疫调节作用具有双向性。
IL-10可通过抗原呈递细胞(APC)进行免疫抑制,通过T细胞进行负调控,对肿瘤环境中的免疫反应具有负调控作用。
弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse Large B-cell lymphoma,DLBCL), 起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤，Alves Ricardo da SILva[1]收集了使用电化学发光免疫测定法测量的90名EBV阳性的DLBCL患者血液中的白细胞介素IL-10、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子a(TNF-x)的数据，诊断和治疗后血液IL-10水平升高与EBV阳性的DLBCL患者的无进展生存期(PFS)差相关(分别为P=0.0183和P=0.0002)。
人白介素10(IL-10)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人白介素10（IL-10）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：12.5pg/ml-800pg/ml,最低检测限：3pg/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人IL-10，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-10含量。
说明?试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
?浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
?中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
?刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
概述：白细胞介素10（IL-10）是近几年新发现的细胞因子，又称细胞素合成抑制因子，为含178个氨基酸残基的单肽链糖蛋白（其中Ｎ端18个氨基酸信号肽序列）。
IL-10分子量35-40kDa，通常为二聚体，其基因为单拷贝基因。
人的IL-10基因定位于第1号染色体上，限制性内切图谱提示该基因至少含3个间隔序列，同其他已知细胞因子基因的核苷酸序列货对应的蛋白质序列比较，IL-10与这些细胞因子无明显的顺序同源性。
IL-10主要由Th2细胞产生，但Tho 细胞、Th细胞、CD8+T细胞、活化的B细胞、单核-巨噬细胞、kupffer细胞、肝细胞、角化细胞等也可产生。
IL-10是具有多向性生物学活性的强免疫抑制因子，能改变机体的免疫应答和MHCⅡ类抗原的表达，并介导Th1和Th2两类细胞之间的相互调节。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗IL-10抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-10抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-10呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
白细胞介素—10检测及其临床意义
白细胞介素—10检测及其临床意义250?Labeledlmmunoassays&ClinMed.Dec咖ber2001.V ol8.N0.4检测技歹了白细胞介素一10检测及其临床意义董晓军(解放军总医院科技开发由一,北京100853)白细胞介素一10(简称白介素10,inlet—leukin一10,IL一10)是具有多种生物功能的细胞因子,它与机体自身免疫疾病,感染性疾病和肿瘤等有着密切关系.IL10主要由单核细胞,巨噬细胞,肥大细胞,T,B淋巴细胞和激活的角质细胞产生.人的IL1O是一种单肽链的.由160个氯基酸组成的酸性蛋白,分子量为18.7kD(不包括N端18个氨基酸构成的信号肽序列),等电点为8.1,通常为二聚体(39kD)人IL一1O和鼠II～10核苷酸序列同源性达81%,氯基酸序列同源性达73%.人IL1O对人细胞和小鼠细胞均有作用,小鼠IL一10只对鼠细胞有作用,而对人细胞无作用.白介素的基因是单拷贝基因,其位置在第一染色体上.IL～1O基因的核苷酸序列或蛋白质氯基酸顺序和其他的细胞因子无明显的顺序同源性而IL一10基因和EBV基因组中有一段开放读码区的BCRF1有大于80%的明显同源性.IL1O是一种具有免疫抑制和免疫刺激作用的细胞因子,人IL一10在单核细胞存在下,能直接抑制T细胞增殖和白介素的产生.当它作为免疫抑制因子时,能抑制多种细胞合成其他细胞因子ll10抑制细胞性免疫应答,主要是通过抑制T1产生IL一2,干扰素一(IFN一)等,抑制II2R的作用.在机体免疫应答中,既有对机体起保护作用的一面,也有不利于机体的一面.IL一10 能增强体液免疫应答IL1O在机体多种自身免疫疾病的产生过程中起着重要的作用,与白血病关系较为密切.IL10与11,3和IL一4协同因子能刺激未成熟的肥大细胞增殖内源性IL一10也能抑制同种异体MLR表达IL一10和转化生长收稿日期:2001—02—18:修回日期:2001'05—28 因子(TGF)可通过抑制一氧化氮的产生而干扰IFN一对单核细胞活化.IL1O对NK细胞的抑制作用是间接的而非直接,IL10抑制NK细胞产生IFN—I1一10不抑制LAK细胞活性.成熟的B细胞才能分泌IL一10,IL1O是B细胞有效的增殖和分化因子,它对B细胞活化和增殖有着效应.在TGF口存在下,IL—l0能提高lgA分泌能力,在IL4存在下IL10能提高IgE生物活性.IL10检测对疾病的临床诊断,免疫病理和免疫调节等方面的研究都是必需的.IL一1O的检测方法和临床意义:1放射免疫分析法和酶免疫吸附法这类检测方法简称为RIA和ELISA法,检测特异性高,较生物活性检测方法快速,其灵敏度可达Pg水平.可测患者的血,细胞液和尿液等标本中的IL1O水平,已有成套试剂盒可供使用,操作也十分方便和简单.2斑.杂交法用地高辛甙标记的eDNA作为探针的点杂交方法,可检测系统红斑狼苍(SLE)患者IL一1O mRNA的含量.实验结果表明,LES患者IL一1O mRNA表达量比正常人高二倍,提示IL一10与SLE发病有直接关系,并表明了IL10拮抗剂有可能用于SLE病的治疗.这种方法操作简便,并有助于SLE疾病的临床治疗和用于选择合适的免疫调节剂.3反转录一PCR检测法这种检测法简称为RT—PCR,检测IL1O特定基因转录产物RNA的表达水平.它可以从血清,血浆,细胞,腹水和组织液等,一步处理,快速分离样品中的RNA,可从50pgRNA中扩增出所需片段,最大扩增片段超过2kb,因此具有高特异记免疫分析与临床2001年l2月第8卷第4期性和高灵敏度.4免提荧光法采用双标记免疫荧光法,可检测唾液腺炎患者唾液腺组织中IL—l0,IL—l2和IFN一的表达水平,而大部分IL—l0表达阳性的单个核细胞, CD4也阳性,又称双阳性免疫荧光标记法采用免疫双染色法可检测类风湿性关节炎和骨关节炎患者的滑膜细胞培养液中IL—l0的水平,结果表明类风湿性关节炎患者II一10水平为358—5501pg/mL,骨关节炎患者Il一l0水平为310—3390pg/mL.这表明IL—l0是由l滑膜里层单核细胞和聚集的淋巴细胞(T细胞)产生的5ELISA一点技术这项技术简称为ELI—SPOT,用ELI—SPOT25l能检测单个细胞水平IL—l0的产生,对研究IL—l0在细胞间进行信息传递的作用,具有重要的意义.操作步骤:将单细胞悬液加到包被抗IL—l0抗体的反应孔中,经诱导产生IL—l0,后者与生物素化的第二抗体产生结合反应,当加入碱性磷酸酶标记的链亲和素和显色剂后,显色反应在覆盖的琼脂胶中进行,最后用倒置显微镜计数蓝色斑点.本法操作简单,可以使细胞处于与体内的状态非常相近的条件.ELI—SPOT法还可用来跟踪疾病产生,调整治疗方案等.如用于重症肌无力患者外周血T细胞分泌IL—l0(和IFN—)的研究;用于检测多发性硬化患者外周单个细胞IL—l0分泌水平.(胨泮藻编委审张增武编辑)用流式细胞仪测定母血中胎儿红细胞含量的新方法周春喜(解放军总医院雕璺宴验锺试中..北京100853)本文介绍一种快速而准确地测量母血中胎儿红细胞含量的方法.它通过流式细胞仪检测母血中胎儿红细胞胞内的血红蛋白(HbF)和红细胞表面i抗原,可以特异地识别母血中胎儿红细胞.这对预防新生儿溶血症和优生优育具有重要意义.材料与方法l样品处理方法(1)静脉采血lmL,用EDTA抗凝,室温保存备用.(2)用血球计数仪计数并计算抗凝血中红细胞的浓度.(3)用冲洗液将抗凝血稀释成浓度为25x109个/mL的红细胞悬液.(4)取一带盖尖底离fl,管,加入10/~I红细胞悬液及100~-L封闭液,混匀.加入100VI同定液, 混匀,室温温育30rain.收稿日期:2001—05—18;修回B期:2OOl—o8—10 (5)再加2.5mL冲洗液,将离心管颠倒几次洗细胞.1000g离心3min,弃上清,将剩下的细胞混匀.加100/~L破膜液,混匀,室温温育3min. (6)加2.5mL冲洗液,将离心管颠倒几次洗细胞.1000g离心3min,弃上清,用25mL冲洗液再洗细胞一次.离心弃上清,加lmL冲洗液,混匀.2黄光染色方法(1)每份样品取2支流式细胞仪样品管,分别标记为l和2.(2)在l号管中依次加入100/~L细胞悬液,10/~L异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗HbF,10/~L 藻红蛋白(PE)标记的抗i抗原和10/~LDNA染液(LDS751),混匀.(3)在2号管中依次加入100~.L细胞悬液,10~.LFITC标记的IgGl,10vLPE标记的IgM和10t,LLDS751,混匀.(4)将两管于4t避光温育30rain.用2.5mL冲洗液洗1次.。
人 白介素10 IL-10 Elisa试剂盒检测方法原理步骤说明书
人IL-10定量分析酶联免疫检测试剂盒IL-10简介：人IL-10 是由160个氨基酸组成4个α螺旋结构的的细胞因子，分子量为18.5 kDa。
在水溶液中以二聚体形式存在，分子量约为39 kDa。
人IL-10是个多效性的因子，能够对多种细胞起作用，主要表现为免疫抑制和免疫刺激两方面的作用，特别是在调节淋巴系和髓系的细胞功能方面扮演重要的作用。
IL-10 也具有单核细胞/巨噬细胞依赖、抗原刺激引起的的PBMNC 和 NK 细胞合成其它细胞因子的抑制作用。
巨噬细胞膜介导的共刺激引起的T细胞和NK细胞活化后的产物及功能也可被IL-10所抑制。
IL-10是单核细胞/巨噬细胞功能的强有力的调节物。
IL-10作为细胞介导的免疫反应的抑制物，能够抑制像前列腺素E2、TNF-α、IL-1、IL-10和 IL-8等许多引起炎症的细胞因子。
IL-10 能够促进可溶性TNF受体的释放和ICAM－1和B7在细胞表面的表达。
IL-10还参与B细胞、柱状细胞及胸腺细胞的增殖和分化的调控。
人的IL-10与鼠类的IL-10在DNA序列和氨基酸序列上高度同源，其DNA序列中一个开放的基因框与艾伯斯坦-巴尔病毒基因组上基因框BCRF1高度同源，这可能在病毒感染中扮演重要角色的原因。
在许多与寄生虫感染的报道中，IL－10表达也会增加，如曼森氏血吸虫感染、利什曼原虫感染、弓形虫感染、锥虫感染等。
分枝杆菌的感染如麻风分枝杆菌、结核杆菌、鸟分枝杆菌等的感染也会引起IL－10的表达升高。
检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-10 的浓度。
IL-10 捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IL-10 会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
当加入生物素化的抗人IL-10 抗体后，抗人IL-10 抗体与IL-10 接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。
白细胞介素-10调控巨噬细胞以促进眼底新生血管形成
白细胞介素-10调控巨噬细胞以促进眼底新生血管形成隋爱玲;苏婷;高誉硕;朱艳吉;谢冰【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(037)003【摘要】目的·研究白细胞介素-10(IL-10)对眼底新生血管(NV)的影响.方法·采用免疫荧光、RT-PCR、Western blotting等方法检测在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型及VEGF过表达(rho/VEGF)转基因小鼠模型中IL-10的表达.应用IL-10基因敲除鼠,研究IL-10对视网膜、视网膜下及脉络膜新生血管的影响.结果·在OIR及rho/VEGF转基因小鼠模型中,IL-10的免疫荧光染色强度增加,IL-10的mRNA表达量也升高.与正常对照组小鼠相比,IL-10基因敲除鼠(IL-10-/-)由OIR诱导的新生血管和激光诱导脉络膜新生血管(CNV)均显著减少.并且,在IL-10基因敲除鼠中,其低氧诱导因子-1α(HIF-1α)以及血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)的表达均减少.在IL-10基因敲除的OIR小鼠模型视网膜中,巨噬细胞受调控后数量减少.结论·IL-10通过刺激HIF-1α及VEGF、VEGFR1的表达而促进眼新生血管的形成.IL-10在视网膜缺氧时通过调控巨噬细胞,促进眼新生血管的形成.%Objective · To investigate the role of interleukin-10 (IL-10) in regulating ocular neovasc ularization (NV). Methods · Expression of IL-10 was investigated in mice with oxygen-induced retinopathy (OIR) and transgenic mice with VEGF expression in photoreceptors by immunofluorescence,RT-PCR, and Western blotting. Mice deficient in IL-10 were used to test the effect of IL-10 in retinal, sub-retinal, and choroidal NV. Results · In OIR mice and transgenic mice with VEGF expression inphotoreceptors, the staining intensity and mRNA expression of IL-10 were increased. Mice deficient in IL-10 showed a significant reduction in ischemia-induced retinal NV, and choroidal NV at rupture sites in Bruch's membrane. Mice lacking IL-10 showed reduced levels of hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) and suppression of ischemia-induced expression of VEGF and VEGF receptor 1. Macrophage was regulated and reduced in ischemic retina of mice with IL-10 deficiency. Conclusion · IL-10 stimulates ocular NV through modulation of HIF-1α and its target genes VEGF and VEGF receptor 1. IL-10 promotes ocular NV via macrophage response to retina ischemia.【总页数】10页(P278-287)【作者】隋爱玲;苏婷;高誉硕;朱艳吉;谢冰【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科,上海 200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科,上海 200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科,上海 200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科,上海 200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科,上海 200025【正文语种】中文【中图分类】R774.1【相关文献】1.前列腺素对肺泡巨噬细胞分泌白细胞介素-8的调控 [J], 孙秀泓2.巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-10对人外周血单核巨噬细胞产生肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-8的相互作用 [J], 姚婷;王慧娟;秦浚川;孙路虹;季晓辉3.血清巨噬细胞迁移抑制因子和白细胞介素10水平与重症脓毒症患者生存时间的相关性 [J], 陈琛;苏华;许玉环;马琴琴4.O-N-乙酰葡萄糖胺糖基化水平正调控促血管生成素-2表达从而促进小鼠肝癌中肿瘤新生血管形成 [J], 王爱红; 王明全; 杜娟5.磨损颗粒刺激下小鼠骨髓来源巨噬细胞调控白细胞介素-34表达的实验研究 [J], 刘子歌;今出真司;张晨;宋国瑞;陈德胜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
白细胞介素10与临床疾病的相关研究
白细胞介素10(IL-10)与临床疾病的相关研究方礼禄，陈书明*，武文君 ，刘栋(山西农业大学动物科技学院，山西省太谷县，030801)摘要：白细胞介素10（IL-10）是由多种类型细胞分泌的一种多效价细胞因子，主要作为免疫应答的调节剂，其包含了两个截然相反的免疫抑制和免疫促进功能。
其与自身免疫性疾病、传染性疾病、器官移植免疫耐受和癌症的发生有关。
关键词：IL-10，免疫抑制，抗炎作用Advances In Relationship Of Interleukin 10 And Clinical DiseaseFang lilu, Chen shuming, Wu wenjun, Liu dong(College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shanxi Agricultural University, Taigu county, Shanxi province,china,030801)Abstract: Interleukin (IL) 10 is a cytokine secreted by a wide variety of cell types and has pleiotropic activities, mainly as a modulator of the immune response. IL-10 has two converse functions of immunosuppression and immunoenhancement. IL-10 genes were associated with the occurrence of autoimmune disease,infectious disease, immune tolerance of organ transplantation, and cancer.Key words: Interleukin 10, immunosuppression, anti-inflammatory1 IL-10的来源及生物学特性1989年，Fiorentino等[1]发现了一种新的细胞因子，由刀豆素A或抗原刺激Th2细胞系就可分泌细胞因子合成抑制因子(CSIF)，能够抑制Th1细胞系产生IL-2、IL-3、淋巴毒素(LT)/TNF、IFN-γ和粒细胞-巨噬细胞（GM-CSF），但Th2细胞因子的合成没有明显的抑制。
人白细胞介素-10(IL-10)
人白细胞介素-10（IL-10）酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测人白细胞介素-10（IL-10），只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
用途：用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-10（IL-10）的测定。
工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人白细胞介素-10（IL-10）的水平。
向预先包被了人白细胞介素-10（IL-10）单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素-10（IL-10），温育；洗涤后，加入HRP标记过的白细胞介素-10（IL-10）抗体。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人白细胞介素-10（IL-10）的浓度呈正相关。
试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1．37℃恒温箱。
2．标准规格酶标仪。
3．精密移液器及一次性吸头4．蒸馏水，5．一次性试管6．吸水纸注意事项1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差3．建议所有标准品、样本都做双份检测。
如标本中待测物质含量过高，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再按说明书操作进行测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
4．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.5．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
7．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
洗板方法手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少注入孔内，浸泡1-2分钟。
根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
人白细胞介素-10IL-10酶联免疫分析ELISA
人白细胞介素-10（IL-10）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素10（IL-10）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-10（IL-10）水平。
用纯化的人白细胞介素-10抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-10，再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素-10（IL-10）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-10（IL-10）含量。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
二陈丸对非酒精性脂肪性肝病大鼠血清瘦素、脂联素、白细胞介素-10及胰岛素抵抗的影响
二陈丸对非酒精性脂肪性肝病大鼠血清瘦素、脂联素、白细胞介素-10及胰岛素抵抗的影响操电群;刘毅【摘要】目的观察二陈丸对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠血清脂联素(APN)、瘦素(LP)、白细胞介素10(IL-10)和胰岛素抵抗的影响.方法 70只SD大鼠随机分为空白对照组(20只)和高脂饮食组(50只),采用高脂饲料构建NAFLD模型,取成功建模45只大鼠随机分为模型组、二陈丸低剂量组(低剂量组)、二陈丸高剂量组(高剂量组).低剂量组和高剂量组每天灌胃二陈丸5g/kg、15g/kg,空白组和模型组灌胃等量蒸馏水,疗程8周.检测空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINs)及血清APN、LP、IL-10的变化,同时计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果二陈丸治疗后,低剂量组大鼠血清LP、FPG、FINS水平及HOMA-IR值和高剂量组血清LP、FPG、FINS水平及HOMA-IR值均明显低于模型组,APN、IL-10水平高于模型组,差异具有显著性;高剂量组血清LP、FPG、FINS水平和HOMA-IR值均低于低剂量组APN、IL-10水平高于低剂量组,差异具有显著性.结论二陈丸可降低NAFLD大鼠血清瘦素水平,升高脂联素、白细胞介素-10水平,改善胰岛素抵抗.【期刊名称】《牡丹江医学院学报》【年(卷),期】2019(040)002【总页数】3页(P42-44)【关键词】非酒精性脂肪性肝病;二陈丸;脂联素;瘦素;白细胞介素10【作者】操电群;刘毅【作者单位】安庆医药高等专科学校药学系,安徽安庆246035;安庆医药高等专科学校药学系,安徽安庆246035【正文语种】中文【中图分类】R285.5非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatry liverdisease，NAFLD)发病率较高，在我国位于慢性肝病第二位。
大量研究数据表明，NAFLD与肥胖、胰岛素抵抗我国位于慢性肝病第二位。
大量研究数据表明，NAFLD与肥胖、胰岛素抵抗(IR) 、代谢综合征(MS)、遗传以及环境等因素密切相关[1-2]。
IL10升高在肿瘤患者中的免疫治疗应用前景分析
IL10升高在肿瘤患者中的免疫治疗应用前景分析在肿瘤治疗领域，免疫治疗一直是一个备受关注的研究方向。
最近的研究表明，IL-10（白细胞介素-10）在肿瘤患者中的升高可能会对免疫治疗产生影响。
本文将对IL-10升高在肿瘤患者中的免疫治疗应用前景进行分析。
首先，我们需要了解IL-10在肿瘤免疫治疗中的作用机制。
IL-10是一种免疫调节因子，它可以抑制炎症反应和抗肿瘤免疫反应。
在体内，IL-10主要由白细胞和其中的Th2细胞产生。
IL-10通过抑制细胞因子的产生和T细胞的活化来减弱免疫反应，从而提供了一种逃逸免疫监视的策略，使肿瘤细胞能够逃脱免疫攻击。
然而，IL-10升高也可能对特定的免疫治疗产生影响。
一种可能的影响是IL-10升高会降低肿瘤患者对免疫治疗的反应。
IL-10的抑制作用可能会降低免疫细胞对肿瘤细胞的攻击能力，从而导致治疗的失败。
一些研究表明，肿瘤患者中的IL-10升高与较差的治疗效果和预后相关。
另一方面，IL-10升高在肿瘤患者中也可能提供一些机会。
IL-10在调节免疫反应中发挥着重要的作用，它可以抑制炎症反应和自身免疫反应，并促进免疫耐受。
因此，IL-10升高可能有助于降低肿瘤免疫治疗的不良反应和副作用。
一些研究已经发现，IL-10在某些免疫治疗方法中可能会发挥积极的调节作用，提高治疗的安全性和耐受性。
此外，IL-10升高还可能与肿瘤免疫治疗的耐药性相关。
免疫监视逃逸是肿瘤发展的主要机制之一，其中IL-10的升高可能是激活逃逸机制的重要因素。
因此，对于那些IL-10升高的肿瘤患者，可能需要采取一些策略来克服耐药性，如联合应用其他免疫疗法、靶向治疗或放化疗等。
虽然IL-10升高在肿瘤患者中可能会对免疫治疗产生不利影响，但我们并不应完全排除其应用前景。
IL-10的调节作用使其成为一个潜在的治疗靶点，可以通过合理设计的免疫治疗方法来干预其作用。
例如，通过抑制IL-10的产生或阻断其信号通路，我们可以增强免疫细胞对肿瘤细胞的攻击能力并提高治疗效果。
大鼠白介素10 ELISA试剂盒
大鼠白介素10ELISA试剂盒产品编号：SEKR-0006适用于大鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本仅供研究，不用于临床诊断目录背景介绍 (01)检测原理 (01)注意事项 (02)安全提示 (02)试剂盒组成及储存 (03)自备实验器材 (03)样品收集及储存 (03)试剂准备 (04)检测步骤 (06)结果判断 (06)参数表征 (07)参考文献 (09)常见问题分析及解决办法 (10)背景介绍：IL-10是一种多效性细胞因子，是α-螺旋细胞因子IL-10家族成员。
小鼠、大鼠和人IL-10cDNA序列均含178个氨基酸残基，内有18氨基酸信号肽序列。
成熟IL-10分子为160氨基酸残基，小鼠和人IL-10分子中分别含5个和4个半胱氨酸残基，分子量为35～40kDa。
在氨基酸水平上，大鼠IL-10与人和小鼠IL-10分别有85％和74％的同源性。
IL-10为调控病毒感染、过敏反应、自身免疫炎症的关键分子，促进吞噬摄取和Th2应答，但抑制抗原提呈和促炎症反应应答。
IL-10的单核细胞可有效调节单核/巨噬细胞功能。
能抑制前列腺素E2和产炎性细胞因子包括TNF- ,IL-1,IL-6和IL-8的产生等。
检测原理：本ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。
将抗大鼠IL-10单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的大鼠IL-10会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗大鼠IL-10抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的大鼠IL-10发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的大鼠IL-10，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的大鼠浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中大鼠的浓度。
肿瘤患者IL10升高的诊断及监测方法研究
肿瘤患者IL10升高的诊断及监测方法研究引言：肿瘤是一种常见的恶性疾病，其发展过程中，会产生一系列的细胞因子和分子，其中包括白细胞介素10（Interleukin-10, IL-10）。
IL-10是一种具有免疫调节功能的细胞因子，它在肿瘤形成和发展中起着重要作用。
因此，准确监测和诊断肿瘤患者IL-10水平的变化对肿瘤的诊断和治疗具有重要意义。
一、肿瘤患者IL-10升高的临床意义IL-10是一种具有重要的免疫调制功能的细胞因子，它具有抑制炎症反应和增强肿瘤免疫逃逸的作用。
在肿瘤过程中，肿瘤细胞和肿瘤微环境中的免疫细胞产生大量的IL-10，这种大量的IL-10会抑制免疫细胞对肿瘤细胞的攻击，并促进肿瘤的生长和扩散。
因此，肿瘤患者IL-10升高可能意味着肿瘤的发展进展，也可能是肿瘤免疫疗法效果不佳的重要标志。
二、肿瘤患者IL-10升高的诊断方法1. 血清IL-10水平检测：通过采集患者的血液样本，利用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）等技术检测血清中的IL-10水平。
高血清IL-10水平可能与肿瘤的存在和进展相关。
然而，需要注意的是，IL-10水平的升高也可能与其他疾病，如慢性炎症和自身免疫性疾病等相关。
2. 组织中IL-10的表达：通过手术获得肿瘤组织或癌症周围组织，利用免疫组化等技术检测组织中IL-10的表达情况。
IL-10的组织表达可以协助肿瘤的诊断，并提供肿瘤治疗的参考。
此外，IL-10的组织表达还可以作为预测肿瘤预后的重要指标。
三、肿瘤患者IL-10升高的监测方法1. 定期监测IL-10水平：对已经确诊为肿瘤的患者，可以定期监测其血清IL-10水平的变化。
通过不断地观察IL-10水平的变化情况，可以更准确地评估肿瘤的发展和治疗效果。
然而，需要注意的是，仅仅依靠血清IL-10水平的监测并不能完全代表肿瘤的发展情况，还需要结合其他临床指标进行综合评估。
高质量体检项目解读血清白介素(IL)异常指标的分析
高质量体检项目解读血清白介素（IL）异常指标的分析白介素（Interleukin，简称IL）是一类具有重要调节作用的细胞因子。
在机体的免疫系统中起着重要的角色，参与调节炎症反应、免疫应答、细胞增殖和分化等生物学过程。
体检中检测IL的水平能够为临床诊断和治疗提供有益的信息。
本文将就血清白介素（IL）异常指标进行分析和解读。
一、血清白介素IL-1β的异常指标IL-1β是一种早期炎症细胞因子，参与免疫炎症反应的调控。
其异常的水平提示机体可能存在炎症反应或感染。
IL-1β的正常水平在体检中通常为低浓度或不被检出。
如果IL-1β的水平升高，可能提示机体正处于炎症状态。
这种情况下，临床医生需要综合患者的病史、其他体检指标及影像学等资料进行全面分析，以确定炎症的原因并制定相应的治疗计划。
二、血清白介素IL-6的异常指标IL-6是一种细胞因子，能够促进免疫反应和炎症过程。
在炎症反应或感染时，机体会释放更多的IL-6，导致其血清水平升高。
IL-6的升高可能与各种疾病相关，如感染性疾病、风湿性关节炎、结缔组织病等。
因此，血清IL-6的异常水平提示着可能存在炎症反应或疾病的存在。
临床医生需结合其他检查结果，如白细胞计数、C反应蛋白等进行综合分析，以确定病因并制定合理的治疗方案。
三、血清白介素IL-10的异常指标IL-10是一种具有抗炎作用的细胞因子，能够抑制炎症反应和免疫细胞的活化。
在某些疾病过程中，机体对炎症反应产生过度的抑制，导致血清IL-10水平升高。
这种情况常见于某些免疫调节失衡的疾病，如系统性红斑狼疮、肿瘤等。
当血清IL-10水平异常升高时，需要进一步检查以明确病因，并辅助指导治疗及判断预后。
四、血清白介素IL-17的异常指标IL-17是一类炎症反应过程中产生的细胞因子，参与自身免疫疾病的发生和发展。
当机体免疫系统异常活化时，IL-17的水平会明显升高。
异常的IL-17水平可能提示某些自身免疫疾病的存在，如类风湿性关节炎、强直性脊柱炎等。
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大鼠白细胞介素10（IL-10）酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：48T
3 ng/L -100 ng/L
使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素10（IL-10）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白细胞介素10（IL-10）水平。
用纯化的大鼠白细胞介素10（IL-10）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加白细胞介素10（IL-10），再与HRP标记的白细胞介素10（IL-10）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素10（IL-10）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠白细胞介素10（IL-10）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。