凝胶电泳图象分析Band Leader中文使用说明书
凝胶成相仪中文教程
Quantity One Demo Script01 Getting Started1. (26 seconds) (Q1.gettingstarted.01.wav)教程开始啦. Quantity One 有一菜单栏和主工具栏。
主工具栏包括：标准文件操作命令，主浏览工具，以及打开次级工具栏和快捷指南的图标。
如果将鼠标指向任一图标，会出现一个浮出式的命令名，相应的在主工具栏中会显示该命令的简短介绍。
Getting Started. Quantity One has a graphical user interface with a menu bar and a main toolbar. The main toolbar is divided into standard file commands, the main viewing tools, and buttons that open the secondary toolbars and quick guides. If you hold your cursor over any button, the name of the command will appear as a popup tooltip, and a short description of the command will be displayed in the status box on the main toolbar.2. (26) (Q1.gettingstarted.02.wav)Quantity One次级菜单包括数组相关的命令。
例如，图象工具栏包括修剪工具，图像旋转工具，过滤指南，数据反转命令等。
揿工具栏中右下脚按钮，可改变它的水平或垂直的分布方式。
对新用户而言，可以采用扩展窗口形式查看命令。
The secondary toolbars in Quantity One contain groups of related commands. For example, the image toolbar contains the crop tool, image rotating tools, Filter Wizard, and Invert Data command. The toolbars can be reconfigured vertically or horizontally by clicking on the reformat button in the lower right corner. The toolbars can be also be displayed in expanded format for new users.3. (25) (Q1.gettingstarted.03.wav)扩展窗口在每一图标边显示该命令的名称，并有一问号图标可打开相应的在线帮助。
SDS凝胶电泳操作手册
各项检验操作注意事项一.SDS-PAGE操作及注意事项1.制胶按如下配方制备分离胶和浓缩胶4%浓缩胶（3ml）10%分离胶（4ml）AB-3 0.25mLAB-6 0.8mL3×gel buffer 0.75mL 1.335mL50%甘油(v/v) 0.64mLH2O 2mL 1.235mL10%APS(w/v) 22.5uL 20uLTEMED 2.25Ul 2uL注意事项：（1）配制前先将两块玻璃板夹紧，可以先试漏。
首先配置分离胶，用水封，静置40min 后，将水吸干，再注入浓缩胶，插上梳子，注意要避免梳孔出现气泡。
（2）在加入APS（10%过硫酸铵）和TENED后要尽快将胶注入，防止其凝固后无法注入玻璃板内。
2. 电泳注意事项：（1）制样：取40uL待测样，加入10uL5×SDS PEGE loading buffer，混匀后煮沸10min （电磁炉1000W），制好的样放至室温后，放4℃保存，待电泳。
（2）电泳：在电泳槽底部加入阳极缓冲液，将制好的胶连同装置放入电泳槽中，在两块胶之间注入阴极缓冲液。
取2uL Marker注入胶孔中作为参照，再一次取5uL样品缓慢注入胶孔中，调整电压800-100V。
待溴酚蓝从浓缩胶进入分离胶后，电压加至120-155V。
继续电泳直到溴酚蓝抵达分离胶底部，断开电源。
小心撬开玻璃板，除去浓缩胶，取出分离胶，加入R250考马斯亮蓝染色40min，再用脱色液脱色。
3. 溶液的配制：（1）正极缓冲液Anode buffer(1×)：12.114gTris加少量ddH2O溶解后，用HCL调PH至8.9，最后用容量瓶定容至500mL，4℃保存。
（2）负极缓冲液Cathode buffer (1×)：6.057gTris+8.96gTricine+0.5SDS加入少量ddH2O 溶解后，定容至500mL，4℃保存。
（3）凝胶缓冲液Gel buffer (3×)：36.342gTris+0.3gSDS加ddH2O定容至100mL，HCL调PH=8.45，过滤4℃保存。
伯乐凝胶成像说明书
伯乐凝胶成像说明书一、产品简介伯乐凝胶成像系统是一款功能强大的凝胶成像分析设备，适用于各种凝胶电泳实验的成像分析，如DNA、RNA和蛋白质的分离、染色和检测。
本系统具有高灵敏度、高分辨率和高可靠性，可广泛应用于生物学、医学和分子生物学等领域的研究和实验工作。
二、仪器特点1.高灵敏度：采用先进的检测技术，可检测低至纳克的样品；2.高分辨率：高清晰度成像，能够清晰分辨样品中的不同成分；3.多功能：适用于不同类型和浓度的样品，包括DNA、RNA和蛋白质等；4.自动化：配备自动进样器和图像分析软件，提高实验效率和准确性；5.可靠性：高品质的零部件和材料，保证长时间稳定运行。
三、操作步骤1.准备好电泳后的凝胶；2.将凝胶放置在成像系统的样品台；3.打开电源和软件，启动系统；4.通过软件进行参数设置，如曝光时间、波长等；5.点击开始按钮，进行成像；6.通过软件对图像进行分析和保存。
四、注意事项1.使用前应仔细阅读本说明书，并确保了解操作步骤和注意事项；2.使用时应注意安全，避免触电和烫伤等危险；3.避免使用过期或变质的试剂和耗材；4.定期进行设备的维护和保养。
五、常见问题与解答Q: 为什么成像结果不清晰？A: 请检查凝胶是否均匀，曝光时间和波长是否设置正确。
Q: 为什么无法打开软件？A: 请检查软件是否与操作系统兼容，并确保已正确安装和更新。
Q: 为什么保存的图像有水印？A: 请检查是否已购买正版软件或许可证。
六、维护与保养为保证设备的正常运行和使用寿命，应定期进行以下维护与保养工作：1.清洁表面：使用柔软的湿布定期擦拭设备表面；2.检查部件：确保进样针、光源等部件没有损坏或松动；3.软件更新：定期检查是否有软件更新，并按照提示进行更新；4.防尘：保持设备放置区域的清洁，避免灰尘进入影响成像质量。
七、存储条件伯乐凝胶成像系统应存放在干燥、通风良好且避免阳光直射的环境中。
室内温度应保持在10-30℃，相对湿度应保持在30-80%。
凝胶电泳及其应用ppt课件
按下式计算相对迁移率：
影响电泳速度的因素：
样品本身：带电量，分子大小，形状 电场强度：电压 缓冲液：成分， pH ，离子强度 支持介质：电渗作用，吸附作用 温度
SUCCESS
THANK YOU
2019/5/6
ddH2O 30%Acr Buffer
10%SDS 10%Ap TEMED
配胶
分离胶(10% 10ml) 浓缩胶(5% 10ml)
4.05ml
6.8ml
3.3ml
1.5mol/L pH=8.8 Tris-HCl 2.5ml
100µl
1.7ml
0.5mol/L pH=6.8 Tris-HCl 1.25ml
凝胶电泳及其应用
主要内容
1
凝胶电泳相关概念
2
凝胶电泳的原理
3
凝胶电泳的应用
4
聚丙烯酰胺凝胶电泳
2
凝胶电泳相关概念
凝胶：凝胶是胶体体系的一种存在形式，它是由胶体体系中分散相颗 粒相互联结，搭成具有三维结构的骨架后形成的，具有空间网状结构 体系，胶体体系中原有的分散介质（液体）充填在网状结构的空隙之 中。
凝胶电泳原理图
电泳过程中分子迁移的规律，小分子走在前头，大分子滞后。
凝胶电泳装置图
垂直式电泳装置
水平式电泳装置
影响凝胶电泳的因素
影响电泳速度的因素：
样品本身：带电量，分子大小，形状 电场强度：电压 缓冲液：成分， pH ，离子强度 支持介质：电渗作用，吸附作用 温度
BandScan5.0说明书
1、安装好以后就会在桌面上出现BandScan的图标。
双击打开，打开后的界面如图。
2、在工具栏上点击file，再进入子菜单open image from tiff，jpg file format，选中待分析的电泳图片。
3、打开后这时候凝胶图像显示出来。
1道是低分子量标准，2道是诱导表达的蛋白，3道是未诱导的对照。
4、按住鼠标左键从凝胶图左上角划到右下角，松开鼠标，划出的长方形框包扩了整个待分析的范围。
这时，命令框内均变成黑色的（可以操作）。
上面那个undorect可以取消选框，下面的image options可以选择是否和如何旋转图像。
如不改动，直接单击accept selected region。
4、继续会出现color to signal selections复选框。
这个是选择信号检测方式直接用默认的original image，或选择gray scale（灰阶）。
如不改动，单击use current image。
7、这时每一个条带都自动被框起来了：）红色+记号是条带的中心位置，兰色竖线是泳道位置。
同时出现了一个复选框select more or select few bands。
可以根据总灰度、最大灰度和大小为标准来自动选择蛋白条带。
拉动左边的滚动条，可以增加或减少条带的数量。
选好后单击ok。
9、现在就可以看看蛋白的表达量了。
打开window/band table。
出现了一个bandlocation的表格。
把它最大化，放到右边。
这里的数据是每个条带的中心位置（红色+的位置）。
10、在band location的数据类型data type中，选择percent signal，就会出现各个条带灰度值占本泳道条带总灰度值的百分比。
单击自己的表达条带，则条带中心的+和相应的百分数的背景都会变成绿色。
我表达的融合蛋白约占细菌总蛋白的29.8%。
我们要的数据就得到了。
聚丙烯酰胺凝胶电泳(共42张PPT)全
配制20ml不同浓度分离胶 所需各种试剂用量/ml
5% 7.5% 10% 15%
配制10ml浓缩 胶 所需试剂用量
3%
3.33 5.00 6.66 10.00
-
2.50 2.50 2.50 2.50
-
-
-
-
-
3.0
-
-
-
-
1.25
0.20 0.20 0.20 0.20
0.10
1%TEMED 重蒸馏水
SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳
概述
❖1967年由Shapiro建立。
❖1969年由Weber和Osborn进一步完善。
他们发现样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入 离子去污剂（SDS）以后,蛋白质亚基的电泳迁移 率主要取决于亚基分子量的大小,电荷因素可以忽 视。
基本原理
1.蛋白质分子的解聚
(1)SDS
（十二烷基硫酸钠，sodium dodecyl sulfate, SDS)
阴离子去污剂 变性剂
助溶性试剂
断裂分子内和分子间的氢键 分子去折叠
破坏蛋白质分子的二级和三级结构
❖ (2)强还原剂 巯基乙醇、二硫苏糖醇（DTT）
使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂，这样分离出的 谱带即为蛋白质亚基。
实验原理
浓缩效应：不连续性所致 制胶缓冲液：Tris-HCl （根据亚基分子量分离蛋白质） (3)二硫键是否完全被还原 与蛋白质的结合量：大多数1. (2)样品缓冲液的离子强度 混匀后，置真空干燥器中，抽气10min 圆盘电泳 不连续SDS-PAGE 1967年由Shapiro建立。 注入电极缓冲液 用 (3)二硫键是否完全被还原 选择适当的凝胶浓度。 （根据亚基分子量分离蛋白质） ＞100 糊状不成形，易破碎。
《凝胶电泳》课件
目录
• 凝胶电泳简介 • 凝胶电泳实验操作 • 凝胶电泳的优缺点 • 凝胶电泳的发展趋势与展望 • 凝胶电泳与其他分离方法的比较
01
凝胶电泳简介
定义与原理
定义
凝胶电泳是一种利用凝胶作为支持介质的电泳技术，用于分离和检测生物分子 。
原理
利用电场的作用，使带电分子在凝胶介质中迁移，从而实现分离和检测。
减少污染
通过改进实验操作和加强实验室管理，减少 凝胶电泳过程中的污染。
缩短实验时间
研究更有效的染色和检测方法，缩短凝胶电 泳的实验时间。
拓展应用范围
进一步探索凝胶电泳在其他领域的应用，如 医学、生物工程等。
04
凝胶电泳的发展趋势与展望
研究方向
新型凝胶材料的研发
探索具有优异分离性能和稳定性的新型凝胶材料，以提高凝胶电 泳的分离效果和检测灵敏度。
应用广泛
高灵敏度
凝胶电泳不仅可以用于DNA和RNA的分析 ，还可以用于蛋白质分离和纯化等，应用 范围广泛。
通过现代化的染色和检测技术，凝胶电泳 可以检测到低浓度的DNA或RNA，灵敏度 高。
缺点
01
时间长
凝胶电泳通常需要几小时甚至更 长时间才能完成分离，对于需要 快速得到结果的实验不太适用。
03
易受污染
。
标准化与规范化
随着凝胶电泳技术的普及和应用 ，标准化和规范化的需求将逐渐 凸显，需要制定相关标准和规范
，促进技术的健康发展。
05
凝胶电泳与其他分离方法的 比较
离心分离
离心分离是通过离心力将不同 密度的物质进行分离的方法。
离心分离的优点是操作简便、 分离速度快，适用于大量样品 的分离。
实验7 聚丙烯酰胺凝胶电泳共19页word资料
实验7 聚丙烯酰胺凝胶电泳原理一聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE），由称盘状电泳。
这种电泳是在区带电泳的基础上，以孔径大小不同的聚丙烯酰胺凝胶作为支持物，采用电泳基质的不连续体系（即凝胶层的不连续性、缓冲液离子成分的不连续性、pH的不连续性及电位梯度的不连续性），使样品在不连续的两相间积聚浓缩成很薄的起始区带（厚度为10-2cm），然后再进行电泳分离。
圆盘电泳名称来源即由于此法的原理是依靠基质的不连续性（discontinuity），凑巧在垂直柱形凝胶上分散出的区带也很象圆盘状（discoid shape），取“不连续性”和“圆盘状”的英文字头“disc”。
因此英文名称为“disc electrophoresis”，中文直译为盘状电泳。
仪器装置：如图A所示，上下两个槽为圆形或方形，其中注入缓冲液（图中曲线表示缓冲液面）。
上下槽的缓冲液分别有正负电极通入。
下槽外壳在必要时可通入冷水促使降温，水流方向用箭头表示。
上槽底部有许多小孔，可插入装有聚丙烯酰胺的玻璃管。
图A在圆盘电泳过程中有三种物理效应：①样品的浓缩效应，②凝胶的分子筛效应，③一般电泳分离的电荷效应。
由于这三种物理效应，使样品分离效果好，分辨率高。
下面就圆盘电泳过程中的三种物理效应的原理加以说明：1.样品的浓缩效应：由于电泳基质的4个不连续性，使样品在电泳开始时，得以浓缩，然后再被分离。
（1）凝胶层的不连续性：浓缩胶：为大孔凝胶，有防止对流的作用。
分离胶：为小孔凝胶，也有防止对流的作用。
样品在其中进行电泳和分子筛分离。
蛋白质在大孔凝胶中受到的阻力小，移动速度快。
进入小孔凝胶时遇到的阻力大，速度就减慢了。
由于凝胶的不连续性，在大孔胶与小孔胶的界面处就会使样品浓缩，区带变窄。
（2）缓冲离子成分的不连续性。
(3)电位梯度的不连续性。
(4)pH的不连续性：在浓缩胶和分离胶之间有pH的不连续性，浓缩胶应有的pH应为8.3，分离胶应有的pH为8.9。
双向凝胶电泳的图像分析
第三节 双向电泳凝胶图像分析原理
一、蛋白质斑点检测 包括：胶内点的定位、点的形状确定及点的 体积（丰度）和面积的计算。 点的检测是各步分析的基础。为了缩短 处理时间，检测前预先要用鼠标圈定要处 理点所在的区域，处理区域越小，后续分 析所耗费的时间就越短。 斑点检测产生x/y位置的n数组、形状参 数和整合的斑点强度。
三、数字化图像加工
图像增强：平滑操作、增强对比度、边缘 检测和背景消减是图像加工最熟悉的工具。 例如：在双向电泳凝胶的数字化图像上分 析蛋白质斑点。平滑操作、增强对比度、边缘 检测和背景消减是以一种精确的方式来决定蛋 白质斑点的形状和大小。在某些领域，这些操 作主要用于图像增强，以提高图像的光学质量， 分析科学可依靠这些操作提供明确的数据。
首先在整个分析范围内选定一个代表区域进入一个有9个格子的小窗口在每一个格子中都反映所选代表区域点检测的执行情况二点检测假设斑点区域的灰度值显著高于背景的灰度值并且它们与背景区域有一个界线所要求的阈值可自动适应每一个新的图像
第四章 双向凝胶电泳的图像分析
第一节 概述 一、图像分析工具
1.硬件设备： 一定的电脑配置,Pentirm 166处理器，64M 内存，3G硬盘，1024*768分辨率 ，256色， SCI接口，windows操作系统 2.软件技术： PDQuest双向凝胶图像分析软件，Bio-Rad Laboratory,Hercules,CA
二、图像分析流程
双向电泳图谱经扫描或摄影等转换为像素为基础、 具有不同灰度强弱和一定边界方向的斑点的电脑信号。
双向凝胶电泳的图像分析解读
第五节 凝胶配比分析
一、原因 通过多次凝胶电泳的结果提高实验的可靠性，就 需要进行不同凝胶间斑点的配比分析。 包括：凝胶的匹配和斑点的比较 匹配的目的是为了对已经进行了点检测的凝胶之 间找出代表同一蛋白质的点。匹配过程能把位于不 同凝胶上的同一蛋白质点联系起来，比较则是在不 同凝胶上对同一蛋白质点的蛋白质进行不同凝胶上 的蛋白质表达情况的分析。
三、数字化图像加工
图像增强：平滑操作、增强对比度、边缘 检测和背景消减是图像加工最熟悉的工具。 例如：在双向电泳凝胶的数字化图像上分 析蛋白质斑点。平滑操作、增强对比度、边缘 检测和背景消减是以一种精确的方式来决定蛋 白质斑点的形状和大小。在某些领域，这些操 作主要用于图像增强，以提高图像的光学质量， 分析科学可依靠这些操作提供明确的数据。
二、图像分析流程
双向电泳图谱经扫描或摄影等转换为像素为基础、 具有不同灰度强弱和一定边界方向的斑点的电脑信号。
典型流程：
• • • • • • • 凝胶图像的扫描： 图像加工： 斑点检测和定量： 凝胶配比： 数据分析： 数据呈递（report） 2-DE数据库的建立：
第二节 双向凝胶电泳图像采集
第四节 蛋白质点的检测
一、检测方法 自动执行：软件将在设定的算子大小下根据 凝胶背景等因素确定最佳灵敏度来识别凝 胶中的蛋白质点。 手动执行：首先在整个分析范围内选定一个 代表区域，进入一个有9个格子的小窗口， 在每一个格子中都反映所选代表区域点检 测的执行情况
二、点检测
如何分析琼脂糖凝胶电泳图
凝胶电泳结果分析常见问题原因对策DNA条带模糊DNA降解实验过程中应避免核酸酶污染。
电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，PH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。
TBE建议使用10就更换。
所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm，温度<30℃，巨大DNA链电泳，温度<15℃，检查所用电泳缓冲液的缓冲能力，注意经常更换。
DNA上样量过多减少凝胶中DNA上样量DNA含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除多余盐分。
有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白。
DNA变性电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
出现片状拖带或涂抹带PCR扩增时出现涂抹带、片状带或地毯样带，往往由于酶量多或者酶的质量差，dNTP浓度高，Mg2+浓度高，退火温度过低，循环次数多。
减少酶量或更换酶，减少dNTP浓度，适当降低Mg2+浓度，增加模板量，减少循环次数。
不规则DNA 带迁移电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm，温度<30℃，巨大DNA链电泳，温度<15℃，检查所用电泳缓冲液的缓冲能力，注意经常更换。
DNA变性电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
带弱或无DNA 带DNA上样量不够增加DNA上样量，聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度高，上样量可适当降低。
DNA降解实验过程中应避免核酸酶污染。
DNA跑出凝胶缩短电泳时间，降低电压，增加凝胶浓度。
EB染色的DNA所用光源不合适应用短波长（254nm）的紫外光源。
DNA带缺尖DNA跑出凝胶缩短电泳时间，降低电压，增加凝胶浓度。
分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间，核准正确凝胶浓度DNA变性电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
DNA链大，常规电泳不合适。
在脉冲凝胶电泳上个分析。
电泳时ladder 扭曲配胶的缓冲液与电泳的缓冲液不是同时配制。
同时配制，电泳缓冲液高出胶的1-2mm即可。
电泳时电压过高电泳时电压不应超过20V/cm。
凝胶成像仪使用步骤及注意事项
琼脂糖凝胶成像系统使用说明一、主操作界面。
二、打开仓门，将用电泳仪跑好的含Goldview染料的胶块转移到照胶仪的载胶板上，将胶块摆正，然后关紧仓门。
三、打开电脑菜单中的Image Lab软件，运行程序。
选项左边选框中打上“√”。
2、在应用程序/选择/核酸凝胶/Ethidum Bromide或根据实验要求选择其它种类。
确定后进入下一页面。
3、选择滤光片1，确定。
（本实验室此仪器只有1个滤光片）4、利用放大镜调整胶块大小，调好后选择运行实验协议开始照胶。
5、实验协议运行完成后，胶版上显现泳道和条带，利用左边的工具栏中各种工具对图像进行编辑，使图像达到满意的效果。
完成后将结果保存在一个文件夹中，以便于以后查阅。
注意事项：（1）不要戴手套触摸电脑鼠标、键盘、仓门和灯箱电源开关，防止污染；（2）注意开机顺序，先开凝胶成像系统，再开软件。
（3）使用过程中禁止开门，防止紫外线外漏。
（4）试验结束后，务必将内部的胶取出，关闭软件。
（5）保持观测室内环境干燥，及时将遗留在观测板上的水或其他液体檫干（可使用软质纸，一般卷纸即可）。
（6）每天晚上请关闭系统电源，并关闭电脑。
DNA琼脂糖电泳方法——后染法（泡胶法）（1）在锥形瓶中用0.5×TBE 配置琼脂糖溶液（浓度一般为0.8%~2%根据自己需要）。
置于微波炉中加热至沸腾，使琼脂糖完全溶解。
将锥形瓶取出，摇晃均匀，再将琼脂糖置于微波炉中加热至沸腾，置室温冷却。
准备制胶板，插好梳齿。
当琼脂糖冷却至70℃左右（手握烧瓶可以耐受），将凝胶倒入制胶板（注意不要产生气泡，若有可用刀片赶置胶末端）。
（2）在室温下静置约30分钟，待凝胶完全凝固后，小心拔去梳齿。
（3）将凝胶放入电泳槽中加入0.5×TBE置液面漫过凝胶表面1-2mm。
将样品小心加入电泳凝胶的样品孔中。
正确连接电泳仪器电极，以8V/cm的恒定电压电泳25-30分钟。
（4）电泳结束后，关闭电泳仪。
凝胶电泳仪器使用方法
凝胶电泳仪器使用方法嘿，你问凝胶电泳仪器使用方法啊？这可得好好讲讲。
要用凝胶电泳仪器呢，首先得准备好各种东西哇。
要有凝胶、缓冲液、样品、电极啥的。
凝胶得提前做好，不能太稀也不能太稠。
我记得有一次，我做凝胶的时候没掌握好比例，结果太稀了，根本没法用。
准备好东西后，把凝胶放进电泳槽里。
要放得平平整整的，不能歪歪斜斜的。
可以用尺子比着，确保凝胶放得正。
我有个朋友，他放凝胶的时候没放好，结果电泳的时候凝胶都歪了。
然后呢，把缓冲液倒进电泳槽里。
缓冲液不能倒太多也不能倒太少，要刚刚好没过凝胶。
我有一次倒缓冲液的时候倒多了，都溢出来了。
接着，把样品加到凝胶上。
可以用微量移液器加，要加得准确点，不能加多了也不能加少了。
我有一次加样品的时候手抖了一下，加多了，结果电泳出来的结果都不好看了。
加好样品后，把电极插上。
电极不能插反了，不然就没法电泳了。
可以看看说明书，确定好正负极。
我有个同事，他插电极的时候插反了，等了半天也没反应。
插好电极后，就可以打开电源开始电泳了。
要调节好电压和电流，不能太大也不能太小。
太大了会把凝胶烧坏，太小了又跑得太慢。
我有一次电泳的时候电压调得太大了，结果凝胶都冒烟了。
在电泳的过程中，要注意观察哇。
看看样品跑得怎么样，有没有异常情况。
如果有问题，要及时关掉电源检查。
我有一次电泳的时候，发现样品跑得特别慢，后来检查发现是电极接触不良。
电泳结束后，要把凝胶取出来进行分析。
可以用染色剂染色，或者用紫外灯照射看看。
我有一次染色的时候染得太浓了，都看不清样品了。
我给你讲个事儿吧。
有一次我去一个实验室，看到他们在使用凝胶电泳仪器。
他们可认真了，准备东西、放凝胶、倒缓冲液、加样品、插电极、调节电压、观察电泳过程、分析结果，每一步都做得很仔细。
他们说这凝胶电泳仪器得小心使用，才能得到准确的结果。
从那以后，我就觉得使用凝胶电泳仪器一定要注意这些方法。
所以啊，凝胶电泳仪器使用方法有准备东西、放凝胶、倒缓冲液、加样品、插电极、打开电源、调节电压、观察过程、结束后分析结果。
凝胶电泳图象分析Band Leader中文使用说明书
Band Leader凝胶电泳图象分析工具，共享软件，45天之内得向Magnitec公司注册，无注册费。
帮助文件有该软件所有功能的指南。
提供处理DNA或蛋白分子凝胶电泳图象和从凝胶电泳图象获得相关数据的工具。
对于那些从事遗传学和分析生物学研究和开发等涉及到凝胶电泳及相关技术的人员是一个非常有帮助的软件.从扫描仪获得凝胶电泳的图象之后，Band Leader可做如下操作：1，将图象显示在计算机屏幕上2，对图象作一些处理使感兴趣的信号更明显3，分析图象，通过对所选择区域进行密度分析来获得相关数据4，将获得的数据存盘系统要求：硬件：386或更高配置，鼠标，软件：Windows 操作系统软件安装：解开BandLeader.zip，执行install.exe文件，会在选定的路径下看到包含以下文件的文件夹 BANDLEADER（缺省路径C：\）：1. LEADER.EXE (executable)2. LEADER.HLP (help file)2. DIB.DRV (driver)3. README.WRI (This file)4. *.BMP (various sample images)5. REGISTER.WRI (registration form)运行：双击leader.exe即可运行。
出现如图主窗口，用法：点击下拉菜单file, 选取load, 即可载入相应的图形文件，可识别bmp或tif格式的灰阶图形，彩色图形将被转化为灰阶，图形文件由扫描仪等得到。
载入图形后，成如下界面：在VIEW→ZOOM IN （ZOOM OUT）中，可对载入的图形放大、缩小，在PROCESS中，可转换前景色和背景色（REVERSE），还可以对图形进行降噪处理（CLEAR NOISE），即通过软件的运算使图形背景更干净一些。
OPTION，选择参数，如GRID网格行列各多少格，SPOT类型（方点或圆点，点的大小，等），如何判断BAND等。
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Band Leader
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从扫描仪获得凝胶电泳的图象之后，Band Leader可做如下操作：1，将图象显示在计算机屏幕上
2，对图象作一些处理使感兴趣的信号更明显
3，分析图象，通过对所选择区域进行密度分析来获得相关数据
4，将获得的数据存盘
系统要求：
硬件：386或更高配置，鼠标，
软件：Windows 操作系统
软件安装：
解开BandLeader.zip，执行install.exe文件，会在选定的路径下看到包含以下文件的文件夹 BANDLEADER（缺省路径C：\）：
1. LEADER.EXE (executable)
2. LEADER.HLP (help file)
2. DIB.DRV (driver)
3. README.WRI (This file)
4. *.BMP (various sample images)
5. REGISTER.WRI (registration form)
运行：
双击leader.exe即可运行。
出现如图主窗口，
用法：
点击下拉菜单file, 选取load, 即可载入相应的图形文件，可识别bmp或tif格式的灰阶图形，彩色图形将被转化为灰阶，图形文件由扫描仪等得到。
载入图形后，成如下界面：
在VIEW→ZOOM IN （ZOOM OUT）中，可对载入的图形放大、缩小，在PROCESS中，可转换前景色和背景色（REVERSE），还可以对图形进行降噪处理（CLEAR NOISE），即通过软件的运算使图形背景更干净一些。
OPTION，选择参数，如GRID网格行列各多少格，SPOT类型（方点或圆点，点的大小，等），如何判断BAND等。
在TOOL菜单中，选取选定工具，有四个选项：profile, grid, spot, ruler,对应于选定的区域和形状，profile→整块矩形区域, grid→网格状矩形区域, spot→圆点或方点, ruler→尺子，用于测量两点之间的距离。
下面结合几种应用为例说明此软件的应用：
1，确定一条泳道内的条带。
此应用在用于测序等凝胶电泳图谱分析时较为有用。
profile →框取感兴趣的泳道→ process 做相应的平滑、设置阈值、峰值等处理，得到的曲线即可较为直观的看到相应的band,
2, 条带之间的灰度比较，这是凝胶图象处理上的一个很重要的功能，假如不说是全部功能的话。
Tool → grid →框取并分隔开感兴趣的条带，即可出现灰度值，然
后选取process→normalize, 即可出现如图所示相对值。
如在option 里预先设定grid的参数，则可比较两个到多个条带。
3，spot,检测相应点的灰度值。
4，ruler, 测定选择两点之间的距离。
以上是一个关于Band Leader功能的简单介绍，更详细的介绍请见该软件自带的help文件。