大蒜根尖有丝分裂制片与观察
大蒜根尖诱导多倍体观察实验报告
大蒜根尖染色体观察实验报告高熹168615140001实验目的:1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握大蒜根尖制片的方法。
3、通过对玻片的观察,统计染色体数目。
4、对比不同的大蒜根尖染色体数目,理解二倍体和四倍体的区别。
实验背景:在自然条件下,机械损伤,射线辐射,温度骤变,及其它一些化学因素刺激,都可以使植物材料的染色体加倍,形成多倍体种群。
近几十年来,随着人们对多倍体诱导机制研究的深入,由人工模拟自然条件来诱导多倍体植物获得了长足进展,形成了不少由价值的人工多倍体种群。
实验原理:用秋水仙素溶液处理植物的种子或幼苗,是常用的人工诱导多倍体的有效方法。
秋水仙素是从百合科秋水仙属的一个种,秋水仙的种子及器官中提取出来的一种生物碱,其分子式为C22H25NO6,秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合,从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成,但是姐妹染色单体照常想成,只是没有被拉向两级,于是染色体数目加倍。
当药剂的作用消除后,由于多倍体细胞继续分裂,便得到多倍体组织,以后则产生新的多倍体植株。
实验器材:刀片,镊子,双目显微镜,载玻片,盖玻片,烧杯,滤纸。
实验材料:经秋水仙素处理过的大蒜根。
(秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g(先用少量95%乙醇助溶),溶于250~500ml蒸馏水中,配成浓度为0.2~0.4%的溶液,冰箱中保存。
将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。
待根尖长到1cm时,将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上,避光处理24小时,然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。
)实验试剂:1mol/L的HCl溶液,改良苯酚品红溶液。
实验步骤:1、取2-4根大蒜根放入烧杯中,加入1mol/L的HCl浸没,60℃水域水解5min。
2、弃掉HCl,自来水冲洗大蒜根三次,冲洗干净表面的HCl。
3、在载玻片上切下2-3mm的根尖,用纸吸去多余的水分,在载玻片上用刀片切碎根尖,滴加1滴改良苯酚品红溶液,染色15min。
四种植物细胞有丝分裂的观察与比较
四种植物细胞有丝分裂的观察与比较作者:林松来源:《中学生物学》2014年第01期摘要针对“观察植物细胞的有丝分裂”实验,对洋葱、大蒜、风信子和水仙等四种材料根尖的有丝分裂情况进行了对比研究,实验结果表明只要处理方法得当,均可获得满意的观察效果。
关键词实验材料有丝分裂实验改进分裂指数中图分类号 G633.91 文献标识码 B“观察植物细胞的有丝分裂”是普通高中生物课程标准中要求完成的一个基本实验,活动的目标是通过学习掌握植物细胞有丝分裂制作技术,观察植物细胞在不同分裂时期的染色体的变化特征。
该活动推荐的观察材料是洋葱根尖,而在教学实践中,许多材料只要处理方法得当,均可以在一个装片中找到有丝分裂各期的细胞,现将大蒜、风信子、水仙与洋葱等四种实验材料的装片制作过程和结果比较如下。
1 实验材料的准备1.1 根尖的培养与预处理大蒜与洋葱成熟后进入休眠期,需低于10℃以下方能解除休眠。
两种材料在根尖培养前喷少量水后装进袋子,放入冰箱冷藏室3~5 d,有利于解除休眠,促进发根。
除去洋葱、水仙、风信子外层干死的鳞片叶,剥去大蒜瓣的膜质枯衣,用细竹签串起蒜瓣,选择杯口适中的烧杯,让实验材料的底部与烧杯的水接触,每天换水,室温培养至根长到2 cm左右时,将培养装置放入4℃冰箱低温处理24 h。
1.2 根尖的固定于上午10:30~11:30,取洋葱、水仙和风信子的根尖和已发根的蒜瓣(大蒜根较细,待需要时再剪取),用卡诺氏固定液浸泡24 h,经体积分数为80%的乙醇溶液处理0.5 h后再转移到70%的乙醇中,放入4℃冰箱备用。
2 临时装片的制作过程剪取根尖2~3 cm,放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精的混合液(1∶1)的培养皿中进行解离。
待根尖酥软后,用镊子取出放入盛有清水的培养皿,反复漂洗若干次,取出根尖放在载玻片中,用镊子截取含分生区的乳白色根尖尖端(2~3 mm),去除根尖其余的部分。
滴一滴改良苯酚品红染液,用镊子的钝头在染液中直接将根尖捣碎,染色几分钟后盖上盖玻片,用吸水纸覆盖在盖玻片上。
大蒜根尖分生组织细胞周期观察
大蒜根尖分生组织细胞周期观察一、实验原理在植物体中,有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞。
高等植物细胞有丝分裂的过程,分为分裂问期和有丝分裂期的前期、中期、后期、末期。
可以用高倍镜观察植物细胞有丝分裂的过程,根据各个时期细胞内染色体或染色质的变化情况,识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。
细胞核内的染色体容易被碱性染料(如龙胆紫、醋酸洋红)溶液着色。
二、目的要求1.观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期。
2.学会制作大蒜根尖有丝分裂装片的生物技术。
3.学会使用高倍镜和绘生物图的方法。
材料大蒜(可以用蒜、葱代替)。
三、材料用具显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿3个,、剪刀,镊子,滴管。
药品质量分数为15%的盐酸,酒精的体积分数为95%的溶液,龙胆紫的质量浓度为0.01 g/mL的或0.02 g /mL的溶液(或醋酸洋红液)。
四、方法步骤(一)大蒜根尖的培养在上实验课之前的3d~4d,取大蒜一个,放在广口瓶上。
瓶内装满清水,让大蒜的底部接触到瓶内的水面。
把这个装置放在温暖的地方,注意经常换水,使大蒜的底部总是接触到水。
待根长5 cm时,可取生长健壮的根尖制片观察。
以上操作已由实验老师提前完成。
(二)装片的制作1.解离下午2时是大蒜有丝分裂的高峰期,可在此时剪取大蒜的根尖2 mm~3 mm,立即放入盛有氯化氢的质量分数为15%的溶液和酒精的体积分数为95%溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,在室温下解离3 min~5 min后取出根尖。
2.漂洗待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min. 3.染色把大蒜根尖放进盛有龙胆紫的质量浓度为0.01g/mL或0.02 g/mL的溶液(或醋酸洋红液)的玻璃皿中,染色3 min~5 min。
4.制片用镊子将这段大蒜根采取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并且用镊子尖把大蒜根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。
然后,用拇指轻轻地压盖玻片,这样可以使细胞分散开来。
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得体会
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得
体会
观察植物细胞有丝分裂是高中时期生物学科的重要实验之一,在实验中能够让我们清楚地观察到植物细胞有丝分裂中不同时期展现
出来的特点,帮助提高我们对于有丝分裂的理解,提高生物学习兴趣。
本文分析了植物细胞有丝分裂实验的描述和体会,希望能够让植物细胞有丝分裂实验的变得更加完善和精准。
植物细胞的有丝分裂是把母细胞中的遗传物质,通过分裂的方式平均分配到两个字细胞中的过程。
母细胞的遗传物质主要是存在于细胞核的染色体上,在有丝分裂过程中,染色体形态并不是固定的,而是连续变化的,因此染色体的有丝分裂分为间期、前期、中期、后期等阶段,不同的是其中染色体的差别比较大,因此通过实验,能够让我们更加清晰的观察和理解植物细胞有丝分裂的变化过程。
实验材料选择
大蒜根尖培养。
想要看到染色体的行为变化,选择材料是最关键的一步,材料选择中需要考虑各种因素,例如说洋葱,生长容易受到季节的影响,同时染色体的体积较小,因此在这次试验中我选择了大蒜作为实验材料,大蒜的根尖细胞中染色体的体积比较大,便于观察,同时培养期比较短,不用受到季节的限制。
在室内温度 15-26C的环境中,大蒜根部生长速度较快,首先把蒜瓣用铁丝串号,放在装满水的韶破上,这趟能够让大蒜的底部接触到水面同时不会被水淹没,然后把烧杯放到 25C的恒温箱中,每隔六个小时就需要换睡衣次,不
到两天的时间,根部就会长出根尖。
必须要注意经常换水,否则容易因为阳气不足导致生长缓慢或者是腐烂。
大蒜根尖细胞有丝分裂周期性研究
16 染 色 将 根尖置 于载玻 片上 , . 用刀 片切 下前 端 部分 ( m ( 1 m) 每个 时间点 做 3张制 片 ) 用 解 剖针 压 ;
季节的限制 ; 育根方便且发芽率高 ; 色体数 目少 染
(n=1 )在 显 微镜 下容 易观 察 , 以大 蒜 是 大 量 2 6, 所 学生实 验 材料 的 首 选 。笔 者 在 实 验 教 学 中发
作者简介 : 李爱玲( 9 8 ) 女 , 17 一 , 江苏徐州人 , 讲师 , 硕士, 主要从事生物学教学与研究。E— a : wl_ m i i .o m i s jle a @s a cm l a l n
维普资讯
李爱玲 , 加建斌 : 根尖细胞有丝分裂周期性研究 大蒜
・ 5・ 2
散 良好 , 一张制片 中可以计数单细胞 80个 ~10 0 00
个 。从 每个时 间 点 上 的 3张 制 片 中 随机 选 取 10 00
“ 有丝分 裂 实 验 ” 中学 生 物学 和大 学 遗 传 学 是 课程 的基础实验 , 实 验要 求 学生 了解 有 丝分 裂 的 该 全过程 及染色体 的 动态 变 化情 况 , 握 有 丝分 裂 各 掌
时期 的特征 。有丝分 裂 的各 时期包 括间期 、 前期 、 中 期、 后期 和末 期 。中期 和后期 是观察 染 色体形 态 , 进 行染 色体计 数 的 较 佳 时 期 , 此 , 验 制 片 中处 于 因 实
也 较 旺盛 ) 尤其是 上 午 8时至 1 , 0时, 就能获 得大量 的有 丝分裂 中后 期 分裂相 细胞。从 而省去 了用秋 水
仙 素等试 剂处理 大蒜根 尖的步骤 , 降低 了实验 费用, 缩短 了操作 时 间。
大蒜根尖染色体观察实验
大蒜根尖染色体实验报告一、实验目的与实验要求1、掌握洋葱培养的方法,掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握洋葱根尖制片的方法,复习染色、压片的基本操作。
3、通过对于有丝分裂相的观察,统计洋葱染色体数目,加深对于细胞有丝分裂过程的理解。
4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖,理解四倍体与二倍体的区别,认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。
5、体验开放式实验教学,培养生物实验意识,提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。
二、实验方案1、实验仪器显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等2、实验药品新鲜、健康的洋葱鳞茎一个;0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液,碱性品红、乙酸,乙醇等。
3、实验原理(1)洋葱的根尖洋葱根尖的整体结构如右图,其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象,其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
(2)多倍体的诱导多倍体的诱导使用秋水仙素,秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合,从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成,但是姐妹染色单体照常想成,只是没有被拉向两级,于是染色体数目加倍。
各步骤的作用:固定液可以迅速杀死细胞,保持细胞形态在有丝分裂相。
解离可以破坏细胞的胞间层(果胶),使细胞之间的联系变松散,有利于压片和染色。
漂洗可以洗去过量的盐酸,防止解离过度破坏细胞结构或影响染色效果(盐酸是酸性,而醋酸洋红是碱性染料)。
(3)有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期(合成前期)、S期(合成期)、G2期(合成后期)和M期(分裂期),其中G1期、S期和G2期合称间期,细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备,而M期又可以分为前期、中期、后期和末期,为了形态观察的方便,本实验采用后一种分法。
如表一。
表一植物有丝分裂各时期特点4、实验步骤(1)将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中,加入清水,放进25℃恒温培养箱中2~3天,催化大蒜生根。
观察根尖分生组织细胞有丝分裂
5.对洋葱根尖分生区细胞的正确描述是
A. 既小且方 B. 形态不规则
A
C. 细胞已经开始分化
D. 无间期细胞
6、在“观察根尖分生组织细胞的 有丝分裂”实验中,以下操作
B
和结论正确的是
• A.剪取5cm根尖,用酒精和吡 罗红混合液解离染色
• B.右图是高倍显微镜下调解细 准焦螺旋看到的视野
的分布。 (2)人的 口腔上皮细胞可用于观察 线粒体及
DNA和RNA在细胞内的分布情况,而观察 细胞减 数分裂 时则选用动物的精巢细胞作为实验材料。
(3)观察叶绿体时常选用藓类的叶,因为 藓类 植物的叶片薄而小,常是一层细胞,叶绿体清楚,易
于观察和操作。
8、染色剂的使用
试剂 甲基绿 吡罗红或派 洛宁染液
被染成分 DNA
RNA
健那绿
线粒体
龙胆紫 醋酸洋红
染色体
呈现颜色 绿色
红色
蓝绿色 紫色 红色
9、小鼠常被用作研究人类遗传病的模式动物。请填充观察小 鼠细胞减分裂的实验步骤: 供选材料及试剂:小鼠的肾脏、睾丸、肝脏,苏丹Ⅲ染液、 醋酸洋红染液、詹纳斯绿B(健那绿)染液,解离固定液。 取材:用(__小__鼠__)__睾__丸__作实验材料 制片:①取少量组织低渗处理后,放在_解__离__固__定__液___溶液中 ,一定时间后轻轻漂洗。 ②将漂洗后的组织放在载玻片上,滴加适量__醋__酸__洋__红__染__液。 ③一定时间后加盖玻片,___压__片_______。
2、碱性染料(龙胆紫溶液或醋酸洋红液)能将染色 体(或染色质)染成深色。
3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散,用盐酸处 理植物的根尖,可以使根尖细胞彼此容易分离。
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂在高等植物体内,有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。
由于各个细胞的分裂是独立进行的,因此在同一个分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。
通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体(或染色质)的存在状态,就可以判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程。
(1)根尖材料的准备将洋葱、大蒜或葱(蒜为宜)的下1/3部分浸泡在盛有清水的烧杯中,放在室温(约25℃)下培养。
大约经过一周时间,有根尖出现。
大蒜出现根尖的时间快一些,大约在第五天时长出2cm左右。
待根尖长到1cm时即可取用,并不非要等根尖长到4~5cm才使用。
(2)固定解离取材时间为上午10:30~11:30为宜。
取根尖2~3mm,立即放入盛有固定液的玻璃皿中,在室温下解离3~5min。
对于洋葱根尖,4min较好;对于大蒜根尖,时间可稍短一些,3min为宜。
用15%盐酸和95%酒精(1∶1)混合液作为固定液,如果换用较高浓度的盐酸可以加速解离的时间;改用卡诺氏液(无水酒精∶冰醋酸为3∶1)进行固定更好,这样原生质不发生收缩。
固定完毕后,将根尖用纯酒精洗2~3次直到根尖不含冰醋酸,根尖的固定这一步骤是将根尖杀死,使根尖分生区的细胞固定在有丝分裂的不同时期,避免染色体在解离时状态的改变。
根尖的解离是实验的关键步骤之一,解离可以除去细胞间的果胶,并使细胞壁纤维素软化,根尖解离是否合适,直接关系到染色的效果和压片时细胞能否分散。
然后放入70%的酒精中保存。
以上两步由教师在课前完成,以节省学生实验时间。
(3)漂洗取出根尖,放入盛有清水的培养皿中,漂洗约10min。
漂洗时间不能少于10min,如果时间过短,染色效果不好。
刚开始漂洗的2~3min内用镊子搅动,然后浸泡即可;把经解离的根尖先放在1%的碳酸钠溶液中,经过1分钟即可除去根尖中的酸。
然后取出用清水漂洗3次即可。
(4)染色可采用质量分数为0.01g/mL的龙胆紫溶液染色,染色时间为3~5min。
考点三 (实验)制作和观察根尖细胞有丝分裂简易装片
考点三(实验)制作和观察根尖细胞有丝分裂简易装片1.实验原理2.实验步骤(1)取材时为什么只能剪2~3 mm,而不能过长?提示若剪得过长会包括伸长区,伸长区无细胞分裂,增加了寻找观察细胞的难度。
(2)实验操作中漂洗和染色的顺序能不能互换?并说明原因。
提示不能。
漂洗的目的是洗去根尖组织细胞中的药液,有利于碱性染料的着色,若二者顺序颠倒,解离液中的盐酸会影响染色的效果。
(3)使细胞分散开的操作措施有哪三种?提示①解离;②镊子尖弄碎根尖;③拇指按压载玻片。
1.实验成功的关键点2.关注洋葱在实验中的“一材多用”结合观察植物细胞的有丝分裂,考查观察提问实验设计的能力1.(2014·全国卷Ⅰ,29)回答下列问题。
(1)在观察大蒜根尖细胞有丝分裂的实验中,常用盐酸酒精混合液处理根尖,用龙胆紫溶液染色。
实验中,盐酸酒精混合液的作用是____________________;龙胆紫溶液属于________性染料,能够使细胞中的________着色。
(2)用光学显微镜观察细胞,可以看到细胞核。
细胞核的功能可概括为:________ _____________________________________________________________________。
解析(1)盐酸酒精混合液是解离液,用于解离过程,解离的作用是使组织中的细胞相互分离开来。
龙胆紫溶液用于染色过程,为碱性染料,能使细胞核中的染色体(质)着色。
(2)对细胞核功能较为全面的阐述应该是:细胞核是细胞内遗传物质储存、复制和转录的主要场所,是细胞代谢和遗传的控制中心。
答案(1)使组织中的细胞相互分离开来碱染色体(2)细胞核是细胞内遗传物质储存、复制和转录的主要场所,是细胞代谢和遗传的控制中心2.(2019·福建泉州毕业班质检)微核是细胞在有丝分裂过程中因各种有害因素的损伤,使细胞核成分残留在核外而形成的微小染色质块。
当外界环境中存在一定浓度的致突变物时,会使具有微核的细胞增多。
大蒜实验报告观察根尖
一、实验目的1. 学习和掌握制作临时装片的技能。
2. 观察大蒜根尖细胞有丝分裂的过程,了解细胞分裂的各个阶段。
3. 熟悉显微镜的使用方法。
二、实验原理细胞有丝分裂是细胞生命周期中的一个重要过程,通过观察细胞有丝分裂,可以了解细胞分裂的各个阶段及其特点。
大蒜根尖细胞具有分裂能力,可以用来观察细胞有丝分裂过程。
三、实验材料1. 大蒜根尖2. 显微镜3. 龙胆紫溶液4. 盐酸酒精混合液5. 生理盐水6. 刮刀7. 玻片8. 载玻片9. 吸水纸四、实验步骤1. 准备根尖:将大蒜根尖用刮刀刮取2-3mm,放入盛有生理盐水的玻璃皿中。
2. 解离:将根尖放入盛有盐酸酒精混合液的玻璃皿中,室温下解离3-5分钟。
3. 漂洗:将解离后的根尖用生理盐水漂洗2-3次。
4. 染色:将漂洗后的根尖放入盛有龙胆紫溶液的玻璃皿中,染色3-5分钟。
5. 制片:将染色后的根尖用吸水纸吸去多余的水分,将根尖放在载玻片上,用刮刀轻轻刮取根尖细胞,制成临时装片。
6. 观察:将临时装片放在显微镜下,先用低倍镜观察,找到合适的细胞,再换用高倍镜观察细胞有丝分裂的各个阶段。
五、实验结果与分析1. 解离:盐酸酒精混合液可以杀死细胞,并使细胞散开,便于观察。
2. 漂洗:漂洗可以去除细胞中的杂质,提高观察效果。
3. 染色:龙胆紫溶液属于碱性染料,可以将染色体着色,便于观察。
4. 制片:临时装片的制作要均匀、薄,避免影响观察。
5. 观察:通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂的各个阶段,可以了解到细胞分裂的过程,包括前期、中期、后期和末期。
(1)前期:细胞核开始缩小,染色体逐渐凝聚,成为染色体。
(2)中期:染色体排列在细胞中央,形成赤道板。
(3)后期:染色体分离,向细胞两极移动。
(4)末期:染色体到达细胞两极,细胞开始分裂。
六、实验结论通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂,我们了解了细胞分裂的各个阶段及其特点。
实验结果表明,盐酸酒精混合液、漂洗、染色和制片等步骤对观察效果有重要影响。
低温诱导植物染色体数目的变化
低温诱导植物染色体数目的变化【摘要】本文介绍了在植物的染色体的研究中的几个重要的问题:有丝分裂、减数分裂、多倍体诱发和染色体畸变。
具体包括以下四个实验:第一,大蒜根尖细胞有丝分裂的制片与观察;第二,玉米花粉母细胞减数分裂制片与观察;第三,大蒜根尖细胞多倍体诱发;第四,玉簪花染色体结构变异的观察。
细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。
细胞增殖是生物体生长、发育繁殖的基础。
真核细胞的分裂方式有三种:有丝分裂、无丝分裂和减数分裂。
本实验主要介绍有丝分裂和减数分裂。
在大蒜根尖细胞有丝分裂实验中,通过将生长旺盛的大蒜根尖分生组织进行取材、固定、解离、染色和压片,我们可以清楚地在显微镜下观察到有丝分裂前期、中期、后期和末期;在玉米花粉母细胞减数分裂的实验中,我们可以清楚地看到减数分裂各个时期的不同特点。
多倍体是指细胞核内具有三个或三个以上染色体组,如3n、4n、6n等的植物。
多倍体广泛地存在于自然界中,例如,小麦是异源六倍体,棉花是4倍体等。
我们同样可以利用人工的方法进行多倍体诱发。
通过用秋水仙素处理大蒜的根尖细胞,进行多倍体诱发,我们可以在光学显微镜下清楚地数出大蒜四倍体细胞的染色体数目——4n=32。
染色体畸变也叫染色体变异,指染色体数目的改变和结构的改变。
染色体结构变异是自然界中存在的一种生物进化和新物种形成的重要因素之一。
染色体结构变异主要有缺失、重复、倒位、易位四种。
这些改变一般可在显微镜下看到。
在对紫萼玉簪花的花粉母细胞的减数分裂的观察中,我们能够看到:染色体桥、落后的断片、微核等。
【关键词】有丝分裂减数分裂秋水仙素染色体畸变微核染色体桥生命体的遗传信息是通过细胞的有丝分裂和减数分裂向下一代传递的,有丝分裂和减数分裂是遗传的基础。
有丝分裂是将亲代细胞的染色体经过复制后,精确地平均分配到两个子细胞中去。
由于染色体上有遗传物质,因而在生物的亲代和子代之间保持了遗传物质的稳定性。
细胞的有丝分裂对于生物的遗传有重要的意义。
大蒜根尖有丝分裂
压片
单侧慢放盖玻片 滤纸吸干多余液体 镊子轻敲使细胞分散 如镜检发现细胞分散不完全可重复按压细胞
镜检
10倍或4倍镜锁定目标细胞 40倍镜观察细节并绘图
各个时期细胞实物图及手绘图
间期
前期 中期
末期
后期
注意事项
操作盐酸和染液时要小心不要接触皮肤,不要溅到实验 台或显微镜上 酸解时间一定不要超过5分钟 酒精灯加热可略,长期加热会造成染液挥发 染色前务必用解剖针将根尖分省组织捣碎 显微镜使用规范 最终完成的制片选择一个好的视野在10倍镜下供老师检 查(细胞分散度,染色程度) 标准图片
实验材料及流程
大蒜 2n=16
1.根冠
2.分生区
3.伸长区
生根-取材-前处理-固定解离-漂洗-染色-压片-镜检
生根(已完成)
水培法 暗处培养
取材(已完成)
上午9-11点 下午3-5点 1.5-2cm
前处理
目的:获得大量有丝分裂期细胞 方法:0.1%秋水仙素处理2-4h 原理:抑制纺锤体(微管)形成,姐妹染色单体无法顺 利分离,大量细胞被阻断在有丝分裂中期。 本次试验略去此步骤
实验报告要求
课上完成实验记录(目的,方法,结果) 教师签字 课后补充完成全部实验报告(原理,照片等其他细节) 实验结果的要求:每个时期的细胞图片(手绘或者照片) 中期和后期细胞必须有手绘实物图 有丝分裂各个时期的模式图不要求,但必须在结果中注 明各时期细胞图片中的显著特点。
பைடு நூலகம் 漂洗
目的:去除残留的盐酸,恢复低渗环境 方法:纱布内用蒸馏水或清水漂洗干净,之后在平皿中 浸泡待用
剥离分生组织
1 截取3mm左右根尖区域,置于载玻片上 2 用解剖针去除半透明状非分生组织,留取白色分生组织 3 滤纸吸干多余水分后用解剖针将组织碾碎(利于染色) 注意:宁滥毋缺
大蒜根尖有丝分裂观察及多倍体诱导
大蒜根尖有丝分裂观察及多倍体诱导生命科学学院 141270054 赵子杰一.实验目的1.通过大蒜根尖的制片,初步学会植物根尖压片法的基本技术。
2.通过大蒜根尖制片,了解细胞分裂的整个过程及染色体在各个时期的变化。
3.学会并掌握染色体简易永久片的制片技术。
4.了解和掌握秋水仙素溶液诱导多倍体的一般方法。
5.了解植物多倍体的一般形态特征及多倍体的细胞学特点。
6.对比进行多倍体诱导前后的大蒜根尖,理解四倍体与二倍体的区别。
7.通过对于有丝分裂相的观察,统计大蒜染色体数目,加深对于细胞有丝分裂过程的理解。
二.实验原理1.有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期(合成前期)、S期(合成期)、G2期(合成后期)和M期(分裂期),其中G1期、S期和G2期合称间期,细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备,而M期又可以分为前期、中期、后期和末期,为了形态观察的方便,本实验采用后一种分法。
观察有丝分裂,重点在于观察染色体的形态。
在细胞分裂前期,细胞核解体,染色质凝聚显现出染色体的形态;在前中期,染色体散乱地分布于细胞的中部;在中期,纺锤体形成,染色体受到微管的牵引,着丝粒成行排列于赤道板上;在后期,染色体受到动粒微管的牵引,向细胞两级运动;在末期,染色体重新解螺旋,细胞核重新形成。
细胞染色体过程示意图见图1.图1:细胞有丝分裂过程示意图大蒜根尖的整体结构如图2,其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象,其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
图2:大蒜根尖结构示意图3.多倍体诱导多倍体的诱导使用秋水仙素,秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合,从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成,但是姐妹染色单体照常想成,只是没有被拉向两级,于是染色体数目加倍。
图3:秋水仙素的化学结构式三.实验材料与器材1.实验材料及试剂:大蒜,0.02%秋水仙素,0.2%秋水仙素,甲醇,冰醋酸固定液,70%酒精,95%酒精,醋酸洋红染液,1NHCL溶液。
植物细胞有丝分裂的制片与观察
无法观察
染色时间过短—染色体颜色过浅,
影响观察
操作:用镊子尖把大蒜根尖弄碎(或者将根尖均
匀切成三份),用卡宝品红染色,6~8分钟后,
盖上盖玻片,再盖上一个载玻片,用拇指轻
压载玻片,随即用一次性筷子进行敲片。
目的:使细胞分散开,有利于观察
注意:染色时敲片的力度要适中
No Image
No Image
No Image
固定的作用:杀死细胞,固定细胞形态, 维持染色体的完整
性,提 高染色效果
四、实验流程
1.大蒜根尖培养及固定
2.装片制作
解离液:1mol/L的HCl 目 的:使组织中的细胞分离开
(1)解离 操作:先用95%的酒精漂洗,在HCL中
60℃水浴5min左右 注意(:a)解离充分是实验成功的必备条件
(b)解离过度,细胞结构被破坏 (c)解离时,细胞已死亡
四、实验流程
1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作
(1)解离 (2)漂洗
漂洗液:清水(先置于清水中浸泡2min左右)
目的:洗去解离液,便于染色
次数:2-3次 注意:若不漂洗 解离过度(HCl作用)
影响染色(HCl与碱性染 料反应)
备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中
四、实验流程
1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 (1)解离
四、实验流程
1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作
解离→漂洗→取材→染色
3.观察
低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察
注意:a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞,在
一个视野里观察时,要注意边观察边移动装片, 观察有丝分裂各个时期。 b.显微镜下观察到的都是死细胞,不能看到细 胞分裂的动态变化。 c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
王飞
实验目的
掌握植物根尖细胞有丝分裂的制片技术 观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征程
大蒜 2n=16
1.根冠 2.分生区 3.伸长区 根冠 分生区 伸长区
生根-取材-前处理-固定解离-漂洗-染色-压片-镜检
生根(已完成)
水培法 暗处培养
间期
前期 中期
末期
后期
注意事项
操作盐酸和染液时要小心不要接触皮肤,不要溅到实验 台或显微镜上 酸解时间一定不要超过5分钟 酒精灯加热可略,长期加热会造成染液挥发 染色前务必用解剖针将根尖分省组织捣碎 显微镜使用规范 最终完成的制片选择一个好的视野在10倍镜下供老师检 查(细胞分散度,染色程度) 标准图片
染色
染色液:石碳酸品红(卡宝品红),染色质特异染料 步骤: 1 滴加1-2滴染色液 2 酒精灯加热2秒钟(可略) 3 染色5min 5min
压片
单侧慢放盖玻片 滤纸吸干多余液体 镊子轻敲使细胞分散 如镜检发现细胞分散不完全可重复按压细胞
镜检
10倍或4倍镜锁定目标细胞 40倍镜观察细节并绘图
各个时期细胞实物图及手绘图
解离
目的:破坏细胞间果胶质和纤维素,使细胞容易散开 方法:1M HCl 烧杯60℃预热 处理5min 注意:每组统一用纱布取根尖样本,流水漂洗数秒,转 移样本到烧杯内并计时
漂洗
目的:去除残留的盐酸,恢复低渗环境 方法:纱布内用蒸馏水或清水漂洗干净,之后在平皿中 浸泡待用
剥离分生组织
1 截取3mm左右根尖区域,置于载玻片上 2 用解剖针去除半透明状非分生组织,留取白色分生组织 3 滤纸吸干多余水分后用解剖针将组织碾碎(利于染色) 注意:宁滥毋缺
取材(已完成)
上午9-11点 下午3-5点 1.5-2cm
前处理
目的:获得大量有丝分裂期细胞 方法:0.1%秋水仙素处理2-4h 原理:抑制纺锤体(微管)形成,姐妹染色单体无法顺 利分离,大量细胞被阻断在有丝分裂中期。 本次试验略去此步骤
固定(已完成)
目的:终止细胞生长过程及一切生理生化反应,避免实 验过程中细胞生活状态的改变 方法:Carnoy固定剂(3份95%乙醇,1份乙酸),处理 2-4h 原理:迅速穿透细胞致死,乙醇-脱水收缩 乙酸-膨胀
实验报告要求
课上完成实验记录(目的,方法,结果) 教师签字 课后补充完成全部实验报告(原理,照片等其他细节) 实验结果的要求:每个时期的细胞图片(手绘或者照片) 中期和后期细胞必须有手绘实物图 有丝分裂各个时期的模式图不要求,但必须在结果中注 明各时期细胞图片中的显著特点。