睫状神经营养因子及雪旺神经营养活性物质对大鼠视神经脶伤修复的作用
睫状神经营养因子在脊髓损伤修复中的研究进展
睫状神经营养因子在脊髓损伤修复中的研究进展作者：赵彩霞来源：《科技创新导报》2011年第10期摘要:本文是关于睫状神经营养因子在脊髓损伤修复中研究进展的综述。
主要从CNTF的特点、分布、作用、SCI修复中的研究进展以及应用前景等方面进行论述。
关键词:睫状神经营养因子(CNTF) 脊髓损伤(SCI)中图分类号:R651 文献标识码:A 文章编号:1674-098X(2011)04(a)-0002-02脊髓是中枢神经系统中较易受到损伤的部位,随着社会经济的发展和生活节奏的加快,脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的发生日益增多,该病致瘫率高,给病人造成极大的身心痛苦,而且给国家、社会和家庭带来了沉重的负担。
由于SCI是一个非常复杂且多因素参与的疾病,如何治愈SCI仍然是一个世界性难题。
因此,研究SCI后的变化和修复机制,对促进损伤脊髓组织的修复和功能重建具有重要的现实意义。
多年来,神经科学工作者一直在为寻求SCI修复策略而努力着。
神经营养因子(Neurotrophic Factors,NTFs)的发现和研究,为神经修复的治疗带来新的希望,这是一类具有促进和维持神经细胞生长、存活和分化作用的特异性蛋白质,是有力的神经生长促进因子。
睫状神经营养因子(Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF)是NTFs中的一员,它生理作用广泛,最突出的功能是促进中枢和周围运动神经元的存活,防止受损神经元退变,以及维持运动神经元的功能,这对于SCI后的再生和修复具有重要意义[1]。
鉴于此,本文就CNTF本身特点及其在SCI修复中的研究进展及前景做一概述。
1 CNTF的介绍1.1 CNTF的发现和结构CNTF于1976年在鸡胚眼组织睫状神经节中发现,因其对睫状神经元有营养作用而得名,它是目前发现的唯一具有神经营养和肌肉营养双重作用的因子。
人类的CNTF基因位于第l1号染色体长臂近端,属单拷贝基因,编码区长600 bp,人、兔、大鼠CNTF同源性达84％左右。
睫状神经营养因子在神经损伤及修复中的地位
股 外 侧 皮 神 经 拱 门综 合 征 高低杠屈体弹杠
女子高低杠
跑 投 掷
跑多劳损
肘 关 节病 和 拱 门 压 迫 体 操 ，举 重 旋 前 圆肌 收 缩压 迫 动 发球 投 掷
细胞 中的ＣＮ Ｆ 能会 从合成部 位释放 到细胞 间隙 中， Ｔ 可 使 细胞 中的 Ｃ Ｔ Ｎ Ｆ下 。 ｅ ｄｎ ｒ ；Ｓ ｎ ｔｅ 等 研 究也显 示，
在 ２ ｄ 内无髓鞘 包绕 ，随后许 旺细胞 移行 包绕轴 突， 还发现 许 旺细胞 包绕的再 生轴 突较 无许 旺细胞 包绕 的
纳入标 准：与神经损伤 与睫状神 经营养 因子研 究现 状与发展 密切相 关 ，包括神经元损伤后 的变化 ；睫状神 经营养因子对神经元 的修 复机制及保 护作 用 ， 对修 复过 程 的调控 ，对神 经元轴浆运输功 能的恢 复，对损伤 神经
ｋ ｓ ０ｉ ｅ ．ｓ ｘ 及 Ｐ ｂ ｄ 数 据 库 （ 址 ｈｔ： ｎ ５ ／ ｄ ｘａ ｐ ） ｎ ｕ Ｍｅ 网 ｔ ／ ｐ／
细胞器和许旺细胞的变化：周 围神 经损 伤后部分神经
元死亡而消失，部 分存 活神 经元呈现程度 不同的逆行 变 化 ，如胞核偏位 、粗 面内质 网解 聚、溶酶体增 多及一些 酶的活性发 生变化 ｌＪ １。当神 经元轴 突断裂，尼 氏小体逐 ］ 渐分解 以致 消失 ，这种现 象称 为染 色体溶 解，同时高尔 基 器分散到 细胞周 边，随后 断裂消失，称为 高尔基 网消
伤 ，Ｃｌ ｒ ｅ ｒｔ ｐ ｃｏ ，Ｎ ｒｅＪ ｕｅ 。文献检 ｉ ｙｎ ｕｏｒ ｈ ｆ ｔｒ ｅｖ ｊｒ” ｉ ａ ｏ Ｊ ａ ｃ ｎ 索无语种 限制。
纳入与排除标准：
的残余物 ，有 利于神 经伤 口的愈合 ，不宜加 以抑制【 。 】
睫状神经营养因子和雪旺细胞神经营养活性物质对大鼠视神经损伤后轴突数的影响
睫状神经营养因子和雪旺细胞神经营养活性物质对大鼠视神经损伤后轴突数的影响【关键词】眼损伤关键词: 眼损伤;视神经;睫状神经营养因子;雪旺细胞神经营养活性物质;大鼠摘要:目的观察睫状神经生长因子（ciliary neurotrophic factor，CNTF）和雪旺细胞神经营养活性物质（Schwann cells neurotrophic agent，SCNA）对视神经损伤后轴突的形态和纤维数目变化的作用. 方法采用镊夹法制作大鼠视神经损伤模型，损伤后立即一次性向玻璃体内注射CNTF（50ng）或SCNA（10μL），在损伤后1，2，3和4wk时观察夹伤视神经的形态，及进行图像分析和轴突纤维计数. 结果损伤后视神经轴突减少，间质增多.CNTF组和SCNA组的轴突数密度在1wk时分别为正常值（0.1065±0.0056个・μm-2 ）的0.59和0.61，而对照组为0.55，实验组与对照组比较差异显著（P<0.05）.但在夹伤2wk后3个组间、各时间点间数据差异均不显著（P>0.05）. 结论 CNTF及SCNA一次玻璃体给药能在1wk内减缓视神经损伤后轴突数目的减少.Keywords:eye injury;optic nerve;ciliary neurotrophic fac-tor;Schwann cells neurotrophic agent;ratAbstract:AIM To study the effects of ciliary neurotrophic factor（CNTF）and Schwann cell neurotrophic agent （SCNA）on changes of configuration and the number of nerve fibers in a rat’s model of the crushed optic nerve.METHODS The optic nerve injury model of rats was induced by crushed at the optic nerve1mm retrobulbarlly.Then an intravitreal injec-tion of CNTF（50ng）or SCNA（10μL）was performed.The cross-section morphology changes were observed1，2，3and4weeks after injury，and the number of nerve fibers was de-termined by using a computerized image analysis system at the time points.RESULTS The axon number of crushed op-tic nerve decreased but the matrix increased.The axon num-ber density of the CNTF group and the SCNA group was0.59and0.61of the normal level（0.1065±0.0056）one week after injury，while the control group’s was0.55（P<0.05）.But there was no difference in three groups2，3and4weeks after injury.CONCLUSION An intravitreal injection of CNTF or SCNA can reduce the loss of optic nerve fibers in crushed optic nerve，so far only noted within one week after injury.0 引言19世纪末至20世纪初，科学家们发现低等脊椎动物如鱼类和两栖类的中枢和外周神经系统（PNS）损伤后都能再生.然而在哺乳动物中，只有外周神经系统损伤后可以再生，而在中枢神经系统（CNS）则不能［1］ .直到80年代初So等［2］发现体外中枢神经可以再生，体内神经细胞的轴突不能再生的原因可能为环境因素和抑制因素所致，从此该领域的研究取得一些突破性成果，特别是近十年来的研究工作使人确信，提供适当条件后CNS也是能够再生的.神经再生不仅是神经科学研究的一项重要课题，也是临床医学期待解决的问题之一.视神经损伤是临床上常见的眼外伤，往往引起视力丧失［3］ .由于视神经属于中枢神经系统，损伤后缺乏神经修复和再生所需的微环境和物质，因此视神经损伤后的治疗和功能恢复是临床上的一个难题［4］ .睫状神经营养因子（CNTF）能够促进多种神经细胞的存活，在神经系统发育、分化和损伤修复中具有非常重要的作用［5，6］ ;雪旺细胞是周围神经系统的髓鞘形成细胞，它能分泌数种神经营养因子、细胞外基质、细胞粘附分子等，在周围神经系统成功再生过程中起关键作用［6，7］ .雪旺细胞源性神经营养活性物质（SCNA）是体外无血清培养乳鼠雪旺细胞3～5d时的培养液上清的超滤产物［5，7］ .我们采用大鼠视神经夹伤模型［8］，观察夹伤后视神经横断面的形态学变化和视神经轴突纤维数［9，10］的变化规律，初步评估CNTF和SCNA对大鼠视神经损伤后修复的作用.1 材料和方法1.1 材料二级成年SD大鼠，2～3mo龄，雌雄不限，体质量200～250g，由本校实验动物中心提供.自由饮食，在光/暗周期为12h/12h（光照时间6:00～18:00）、背景噪音（40±10）db，温度（20±3）℃条件限制下饲养.研究者已获得实验动物使用许可证.实验动物及实验使用条件符合国家科学技术委员会的《实验动物管理条例》.将实验动物随机分为对照组、CNTF组和SCNA组3组，各组又分为7，14，21和28d等4组，每组5只动物.小号动脉阻血镊（上海医疗器械厂，前端1mm宽），CNTF（Sigma公司，美国），体外无血清培养乳鼠的SCNA（西京医院眼科黄蔚博士馈赠）.1.2 方法①视神经夹伤模型制作和玻璃体给药:大鼠im846麻醉剂（1mL・kg-1 ）后置于手术盘中，消毒手术眼局部，于双目显微镜下切开外眦，打开Tenon囊，分离外直肌并剪断，沿颞侧巩膜表面钝性分离至视神经，于眼球后2～3mm处用小号动脉阻血镊夹压视神经15s.治疗组用微量注射器先作前房穿刺，放出约10～15μL 房水，然后自角巩膜缘后方0.5～1mm处穿刺入玻璃体，注入CNTF50ng 或体外无血清培养乳鼠的SCNA（西京医院眼科黄蔚博士馈赠）10μL ［5，11］，微量注射器注射头外径0.05mm.将眼球复位，缝合Tenon 囊及外眦，于直接检眼镜下观察视网膜血供良好者纳入试验.②动物灌注固定及取材:分别在夹伤后1，2，3和4wk时，经ip戊巴比妥钠（100mg・kg-1 ）深麻醉实验动物，开胸，经左心室插管至升主动脉做灌注固定.先用100mL生理盐水冲净血液，再灌注500mL含40g・L-1 多聚甲醛（Sigma公司，美国）的0.1mol・L-1 磷酸缓冲液（PBS，pH7.3），持续1.5～2.0h.于动物头顶正中切开暴露脑组织并将其完整去除，显露视交叉及视神经，沿视神经走行分离至球后，紧贴眼球将8～10mm长短的视神经完整取下，去除视神经周围筋膜及脂肪组织，置于40g・L-1 多聚甲醛中后固定24h，置于30g・L-1 戊二醛磷酸盐缓冲液中4℃冰箱保存.③标本超薄切片及甲苯胺蓝染色:保存的标本用100mL蔗糖缓冲液（0.18mol・L-1 ）冲洗，10g・L-1 四氧化锇磷酸盐缓冲液再次后固定，梯度丙酮溶液依次脱水，1kg・L-1 丙酮/混合包埋剂（1∶1）浸透，Epon812包埋.在损伤区远端2mm处用LKB-NOVO 型超薄切片机切取1μm半薄横截切片，10g・L-1 甲苯胺蓝染色，自来水冲洗，照相，保存.切片自然晾干，香柏油封片保存.④计算机图像分析:A.神经横截面分析视场选取方法在100倍镜下作视神经横截面的十字形分割线，然后在200倍镜下以纵向定位线中点为中心由上向下连续选取3个方形视场，每个视场面积为12271.45μm2 （图像分析仪固定数值）.B.神经轴突计数使用北航病理图像分析系统进行视神经轴突计数［10］ .首先作图像分割，将神经纤维与间质分割开来，分割好图像后定制将要选取的图像中神经纤维点平均积分光密度值（DPI）的最大值和最小值，最大值为2000，最小值为100.计算机自动图像分析系统自动校正放大率，所测数值均为实际值.C.神经纤维数密度的计算将图像分析仪已数好的神经纤维数文件导入软件Microsoft Excel（Microsoft公司，美国），每组数据均选取DPI值在0.20～1.50范围内的神经纤维点，以保证各样本的统一.此点数除以视场面积即为神经纤维密度，单位:个・μm-2 .统计学处理:全部数据应用Micro cal Origin5.0软件包进行处理，对实验数据求均数及标准差，健眼作为正常对照.CNTF组、SCNA 组和对照组各组各时间点的数据之间分别进行配对t检验和单因素方差分析.2 结果2.1 视神经夹伤后形态学的变化视神经夹伤后，从横断面上观察到神经纤维组织疏松，排列紊乱;神经髓鞘大量脱失，染色深浅不均;间质增多;1wk时轴突广泛水肿;继续观察可见水肿消失，轴突纤维数大量减少，并出现许多空泡状结构（Fig1）.2.2 视神经夹伤后神经纤维密度的变化正常值为（0.1065±0.0056）个・μm-2 ，各组神经纤维密度在夹伤后1～3wk 内均有大幅度的下降（Tab1）.3 讨论视神经损伤后影响神经细胞变性、坏死和修复的因素较多，通过本实验，意在证明视神经损伤后能够减轻神经纤维坏死的因素.临床视神经损伤分为非横断性损伤和横断损伤，非横断伤有一定的修复再生基础［12］ .本实验采用视神经夹伤模型，致伤部位选择在视神经球后段，致伤程度基本定量.视神经夹伤时间15s，时间太短不足以创造可明确观察的损伤，时间太长容易将视神经夹断. 视神经纤维准确计数是观察视神经损伤、修复和再生的一个量化程度很高的方法［5，13］ .Sanchez等［9，10］通过视神经横断面神经髓鞘甲苯胺蓝染色，清楚地数清了猴和人视神经的神经纤维数.正常大鼠视神经纤维数约为106 ～1.2×107［14］ .传统的石蜡切片和冰冻切片均太厚，视神经横断面上不能准确数清大鼠全部视神经纤维.本研究通过对大鼠视神经组织进行电镜方法的固定、包埋、作横断面的1μm超薄切片和视神经纤维髓鞘的特异染色，利用计算机自动图像分析系统，对正常大鼠视神经内一定大小直径的神经纤维数和夹伤后大鼠视神经内相应直径的神经纤维数的变化规律进行了观察和分析.在本视神经夹伤模型［4，11］中观察到球后视神经夹伤引起的神经纤维减少主要发生在夹伤后3wk内，此期间视神经纤维数下降了70%左右，4wk视神经纤维数仅下降了1.3%.图1 略表1 视神经夹伤后神经纤维密度的变化略为了使神经营养因子与其受体直接结合，需将CNTF，SCNA 等神经营养物质注射到玻璃体内［5］ .虽然重复玻璃体内注射可能会增加RGC的存活，但同时也增加了并发白内障和视网膜缺血的危险性.因此，在视神经损伤后我们采用了玻璃体内一次性注射神经营养物质的方法［5］ .CNTF作为神经营养因子的一种，在神经活动中起着重要作用［15］ .CNTF在进化上是高度保守的，不同种属之间有较大的同源性，人和大鼠、兔子的同源性达85%以上［6］ .Mey等［5］在大鼠视神经横断模型实验中结合他人研究反复实验，得出体内应用的CNTF的有效剂量为50ng.本实验在视神经夹伤后将50ng（10μL）重组人CNTF注入玻璃体内，观察到实验组神经纤维数的下降慢于对照组，在损伤早期尤为明显，说明重组人CNTF对于成年SD大鼠视神经损伤后轴突的坏死，神经纤维髓鞘的崩解有一定的保护作用.雪旺细胞（SC）是周围神经系统的胶质细胞，SC在周围神经系统再生过程中起关键作用［2，5，7］ .SC能分泌神经营养因子，产生细胞外基质和细胞粘附分子等，这些物质都与神经再生有密切关系［16］ .本实验应用含多种神经营养因子的体外无血清培养的乳鼠雪旺细胞上清浓缩液，经检测具有较高的蛋白浓度（45g・L-1 ）［11］，在视神经夹伤后马上将SCNA注入大鼠夹伤眼玻璃体内，发现在夹伤后1wk 内能够减缓视神经纤维的变性和坏死速度，与对照组相比差异显著.CNTF和SCNA仅在早期起作用可能在于:①视神经夹伤后仅在损伤当时玻璃体内一次给药，药物有效浓度及保留时间不明;②损伤后的修复与再生需要多个因子参与，单纯CNTF或SCNA不能够长期起作用;③由于本实验是将重组人CNTF应用于大鼠，可能会因种属差异导致CNTF作用降低.CNTF组和SCNA组间在各个时间点均无明显差异，表明在本组实验条件下两者对视神经损伤后的修复起着相似的作用.参考文献:［1］Han JS.Theneurosciencecompendium ［M］.Beijing:Science and Technology Press，1993:2-3，35，117-121.［2］So KF，Aguayo AJ.Lengthy regrowth of cut axons from gan-glion cells after peripheral nerve transplantation into the retina of adult rats ［J］.Brain Res，1985;328（2）:349-354.［3］Cook MW，Levin LA.Traumatic optic neuropathy.A meta-analysis ［J］.Arch Otolaryngol Head Neck Surg，1996;122（4）:389-392.［4］Tsai RK，Wang HZ，Sheu MM.Capability of neurite regenera-tion of retinal explant from adult rat after optic nerve injury ［J］.Kao Hsiung I Hsueh Ko Hsueh Tsa Chih（Kaohsiung J Med Sci），1998;14（5）:274-249.［5］Mey J，Thanos S.Intravitreal injections of neurotrophic factors surport the survival of axotomized retinal ganglion cells in adult rats in vivo ［J］.Brain Res，1993;602（2）:304-317.［6］He C，Lu CL，Ao SZ.Evolving of ciliary neurotrophic factor study ［J］.Shengli Kexue Jinzhan（Biophisiol Sci Devel），1996;27（1）:53-56.［7］Gu LQ，Zhu JK，Gu XF.Research of Schwann cells neu-rotrophic agent ［J］.Zhonghua Xianwei Waike Zazhi（Chin J Microsurg），1993;16（2）:125-128.［8］Liebrmen AR.Some factors affecting retrograde neuronal response to axonal lesions ［R］.In assays of the Nervous System（Bellairs G and Gray EG eds）.Clarendon Press，Oxford，1974:71-105.［9］Sanchez RM，Dunkelberg GL，Quigley HA.The number and diameter distribution of axons in the monkey optic nerve ［J］.Invest Ophthalmol Vis Sci，1986;27（5）:1342-1350.［10］Yang L，Li MY.The human eye’s neural histology study:Counting of optic nerve fiber and measuring of optic disk diame-ter and area ［J］.Zhonghua Yandibing Zazhi（Chin J Ocular Fundus Dis），1999;15（1）:16-22.［11］Huang W，Hui YN，Liu B.The effect of Schwann cells neu-rotrophic agent to injuried rat retinal ganglion cells ［J］.Zhonghua Yandibing Zazhi（Chin J Ocular Fundus Dis），2000;16（1）:45-47.［12］Lesseu S.Inderect optic nerve trauma ［J］.Arch Ophthal，1989;107（3）:382-386.［13］Cui Q，So KF，Yip HK.Major biological effects of neurotrophic factors on retinal ganglion cells in mammals ［J］.Biol Signals Recept，1998;7（4）:220-226.［14］Paxinos G.The rat nervous system ［M］.New York:Academic Press，1995:833-838.［15］Cui Q，Lu Q，So TF，not other trophic factors，pro-motes axonal regeneration of axotomized retinal ganglion cells in adult hamsters ［J］.Invest Ophthalmol Vis Sci，1999;40（3）:760-766.［16］Raisman e of Schwann cells to induce repair of adult CNS tracts ［J］.Rev Neural Paris，1997;153（8-9）:521.11。
旺细胞在神经元损伤后修复中的作用
神经生长因子基因修饰的雪旺细胞在神经元损伤后修复中的作用于志勇杨大志刘洪涛徐亮王多汪代东 ［摘要］ 目的 探讨神经生长因子（ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）基因修饰的雪旺细胞（Ｓｃｈｗａｎｎ ｃｅｌｌｓ，ＳＣｓ）在脊神经节（ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉｏｎ，ＤＲＧ）嵌压伤后促进神经元修复中的作用及其作用机制。
方法 选取成年雌性ＳＤ大鼠３２只，建立右侧Ｌ４－６慢性神经根及ＤＲＧ嵌压伤的动物模型，造模２周后手术取出致压物，随机分为对照组（左侧作为正常对照）、ＳＣｓ组、携带神经生长因子腺病毒（ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ－ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，Ａｄ－ＮＧＦ）组和ＳＣｓ＋ＮＧＦ组。
治疗后２周观察各组动物行为学变化。
处死动物切取神经根组织，行Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测神经根组织裂解液内ＮＧＦ前体的含量；双标记荧光免疫组织化学荧光染色分别计数ＤＲＧ内神经元标记物β微管蛋白Ⅲ（β－ＴｕｂｕｌｉｎⅢ）及损伤神经元标记物转录激活因子３（ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ３，ＡＴＦ３）阳性细胞，计算神经元密度及损伤神经元所占比例。
结果 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示：ＳＣｓ＋ＮＧＦ组神经根组织裂解液内ｐｒｏＮＧＦ含量明显增加。
双标记免疫组织化学荧光染色显示：ＳＣｓ＋ＮＧＦ组与其它组比较，ＤＲＧ内存活神经元（β－ＴｕｂｕｌｉｎⅢ阳性细胞）密度明显增加，损伤神经元（ＡＴＦ３阳性细胞）比例明显降低。
结论 ＮＧＦ基因修饰ＳＣｓ在ＤＲＧ嵌压伤后的修复中具有促进其内神经元存活，并降低受损神经元比例的作用，可能是其促进慢性神经根嵌压伤后神经修复的作用机制。
神经生长因子；许旺细胞；神经节，脊；大鼠Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＮＧＦ ｇｅｎｅ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｓｃｗｈａｎｎ ｃｅｌｌｓ ｏｎ ＤＲＧ ｎｅｕｒｏｎｓ ｒｅｐａｉｒ ａｆｔｅｒ ｃｏｍｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎｊｕｒｙ ＹＵ Ｚｈｉ－ｙｏｎｇＹＡＮＧ Ｄａ－ｚｈｉＬＩＵ Ｈｏｎｇ－ｔａｏＸＵ ＬｉａｎｇＷＡＮＧ ＤｕｏＷＡＮＧ Ｄａｉ－ｄｏｎｇＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｐｉｎａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ， Ｔｈｅ ２ｎｄ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｊｉｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｈｏｏｌ， Ｓｈｅｎｚｈｅｎ ５１８０２０， Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ＮＧＦ ｇｅｎｅ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＳＣｓ ｏｎ ＤＲＧ （ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉｏｎ） ｎｅｕｒｏｎｓ ｒｅｐａｉｒ ａｆｔｅｒ ｃｏｍｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎｊｕｒｙ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ＳＣｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｏｎｅ ｅｎｚｙｍｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ． ＳＣｓ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ＮＧＦ ｇｅｎｅ ｂｙ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ． Ｔｈｉｒｔｙ－ｔｗｏ ｆｅｍａｌｅ ＳＤ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉａ ｏｎ ｒｉｇｈｔ ｌｕｍｂａｒ ｎｅｒｖｅ ｒｏｏｔｓ． ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｉｎｔｏ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｇｒｏｕｐｓ：Ｎｏｒｍａｌ ｓａｌｉｎｅ （ＮＳ） ｇｒｏｕｐ， Ｐｕｒｅ ＳＣｓ ｇｒｏｕｐ， Ａｄ－ＮＧＦ ｇｒｏｕｐ， ａｎｄ ＳＣｓ＋ＮＧＦ ｇｒｏｕｐ． Ｎｅｒｖｅ ｒｏｏｔ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｅｒｅ ｈａｒｖｅｓｔｅｄ ２ ｗｅｅｋｓ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ． Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｐｒｏＮＧＦ ｖｏｌｕｍｅ ｉｎ ｎｅｒｖｅ ｒｏｏｔ ｔｉｓｓｕｅ ｌｙｓｉｓ； Ｄｏｕｂｌｅ－ｌａｂｅｌｉｎｇ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ （ＩＨＣ） ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｃｏｕｎｔ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ β－Ｔｕｂｕｌｉｎ Ⅲ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ３ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｉｎｊｕｒｅｄ ｎｅｕｒｏｎｓ ｔｏ ｓｕｒｖｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｎｓ ｗａｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｏｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｐｒｏＮＧＦ ｖｏｌｕｍｅ ｉｎ ｎｅｒｖｅ ｒｏｏｔ ｔｉｓｓｕｅ ｌｙｓｉｓ ｏｆ ＳＣｓ＋ＮＧＦ ｇｒｏｕｐ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｄｒａｍａｔｉｃａｌｌｙ． Ｄｏｕｂｌｅ－ｌａｂｅｌｉｎｇ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ＩＨＣ ｓｈｏｗｅｄ ＳＣｓ＋ＮＧＦ ｇｒｏｕｐ ｖｓ ａｎｙ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｄｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ｓｕｒｖｉｖｅｄ ＤＲＧ ｎｅｕｒｏｎｓ （β－Ｔｕｂｕｌｉｎ Ⅲ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ） ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ， ｍｅａｎｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｉｎｊｕｒｅｄ ｎｅｕｒｏｎｓ （ＡＴＦ３ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ） ｉｎ ｓｕｒｖｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｎｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｄｒａｍａｔｉｃａｌｌｙ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＮＧＦ ｇｅｎｅ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＳＣｓ ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ＤＲＧ ｎｅｕｒｏｎｓ ａｆｔｅｒ ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｉｎｊｕｒｅｄ ｎｅｕｒｏｎｓ．Ｗｅ ｃｏｎｃｌｕｄｅ ｔｈａｔ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ａ ｎｅｗ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｓｔｒａｔｅｇｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｈｏ ｓｕｆｆｅｒ ｆｒｏｍ ｃｈｒｏｎｉｃ ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｏｎ ｎｅｒｖｅ ｒｏｏｔｓ ａｎｄ ＤＲＧ ｎｅｕｒｏｎｓ．Ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ；， Ｓｃｈｗａｎｎ ｃｅｌｌｓ； Ｇａｎｇｌｉａ， ｓｐｉｎａｌ； Ｒａｔｓ １０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３－２３５２．２０１１．１２．０１０ 作者单位：５１８０２０深圳，暨南大学第二临床医学院（深圳市人民医院）脊柱外科［于志勇（现深圳市宝安区福永人民医院骨科工作）、杨大志、刘洪涛、徐亮、王多、汪代东］切除双结 果讨 论经元活性＠＠［１］于志勇，杨大志，刘洪涛，等．转染ＮＧＦ基因的Ｓｃｈｗａｎｎ细胞 对慢性神经根嵌压伤后神经修复的作用．脊柱外科杂志，２００９， ７（５）： ２９８－３０１．＠＠［２］张雪宝，曾园山，陈穗君．一种快速、经济、省时的施万细胞体 外培养和纯化方法．解剖学报，２００７，３８（５）： ６２８－６３０．＠＠［３］ Ｔａｎｎｅｍａａｔ ＭＲ， Ｖｅｒｈａａｇｅｎ Ｊ， Ｍａｌｅｓｓｙ Ｍ． Ｔｈｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒｓ ｔｏ ｅｎｈａｎｃｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｆｔｅｒ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｎｅｒｖｅ ｒｅｐａｉｒ． Ｎｅｕｒｏｌ Ｒｅｓ， ２００８， ３０（１０）： １０３９－１０４６．＠＠［４］杨大志，王坤正，陈君长，等．神经根慢性嵌压损伤的动物模型 建立．中国脊柱脊髓杂志，２００４，１４（５）： ２９０－２９４．＠＠［５］ Ｔａｎｇ ＺＹ， Ｓｈｕ Ｂ， Ｃｕｉ ＸＪ， ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉａ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｄｅｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｃｅ ｄｕｒｅ： ａ ｎｏｖｅｌ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｒａｄｉｃｕｌｏｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ． Ｊ Ｎｅｕｒｏ ｔｒａｕｍａ， ２００９， ２６（２）： ２８９－２９５．＠＠ ［６］ Ｘｉａｏ Ｊ， Ｗｏｎｇ ＡＷ， Ｗｉｌｌｉｎｇｈａｍ ＭＭ， ｅｔ ａｌ． ＢＤＮＦ ｅｘｅｒｔｓ ｃｏｎｔｒａｓｔ ｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＧＦ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｎｄ ＢＤ ＮＦ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＤＲＧ ｎｅｕｒｏｎｓ． Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ， ２００９， ２９ （１３）： ４０１６－ ４０２２．＠＠ ［７］ Ｌｕ Ｂ． Ｐｒｏ－ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｓ： ｒｏｌｅ ｉｎ ｓｙｎａｐｔｉｃ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ． Ｎｅｕｒｏｎ， ２００３， ３９（５）： ７３５－７３８．＠＠ ［８］ Ｈｕ Ｚ， Ａｎｄ（ａ）ｎｇ Ｍ， Ｎｉ Ｄ， ｅｔ ａｌ． Ｎｅｕｒａｌ ｃｏｇｒａｆｔ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｓｕｒ ｖｉｖａｌ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ａｄｕｌｔ ｍａｍｍａｌｉａｎ ａｕｄｉｔｏｒｙ ｓｙｓｔｅｍ． Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ， ２００５， １０５１ （１－２）： １３７－ １４４．＠＠ ［９］ Ｓｉｎｇｈ ＲＰ， Ｃｈｅｎｇ ＹＨ， Ｎｅｌｓｏｎ Ｐ， ｅｔ ａｌ． Ｒｅｔｅｎｔｉｖｅ ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｃｙ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉａ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ． Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ， ２００９， １８（１）： ５５－６８．＠＠［１０］ Ｇｕｎｊｉｇａｋｅ ＫＫ， Ｇｏｔｏ Ｔ， Ｎａｋａｏ Ｋ， ｅｔ ａｌ． Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｒａｔ ｔｒｉｇｅｍｉｎａｌ ｇａｎｇｌｉｏｎ ａｆｔｅｒ ｕｐｐｅｒ ｍｏｌａｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ． Ａｃｔａ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ Ｃｙｔｏｃｈｅｍ， ２００９， ４２（５）： １４３－１４９．＠＠［ １１ ］ Ａｏｋｉ Ｙ， Ａｎ ＨＳ， Ｔａｋａｈａｓｈｉ Ｋ， ｅｔ ａｌ． Ａｘｏｎａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｌｕｍｂａｒ ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉｏｎ ｎｅｕｒｏｎｓ ｉｎ ａｎ ｏｒｇａｎ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｙｓｔｅｍ： ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｏｆ ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｎｅｕｒｏｎｓ ｔｏ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｉｎ ｊｕｒｙ ａｎｄ ａｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅ． Ｓｐｉｎｅ （Ｐｈｉｌａ Ｐａ １９７６）， ２００７， ３２（８）： ８５７－８６３．＠＠［１２］ Ａｔｌａｓｉ ＭＡ， Ｍｅｈｄｉｚａｄｅｈ Ｍ， Ｂａｈａｄｏｒｉ ＭＨ， ｅｔ ａｌ． Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｉ ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉｏｎ ｎｅｕｒｏｎｓ ｆｏｌｌｏｗ ｉｎｇ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｎｅｒｖｅ ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｒｅｐａｉｒ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｒａｔ． Ｉｒａｎ Ｂｉｏｍｅｄ Ｊ， ２００９， １３（２）： ６５－７２．２０１１－０３－０１・消 息・。
睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的保护作用
（． １ 内蒙古医学院 ２ ０ ０ ５级研 究生 ， 内蒙古 呼和 浩特 ２ 内蒙古 自治区医院 眼科， 蒙古 呼和浩特 ． 内 ０ ０５ ； １ ０ ９
００ １ ） １ ０ ７
［ 摘要 ］目的 ： 探讨玻 璃体腔 内注射外 源性 睫状神经 营养 因子（ ＮＴ ） 否对 大 鼠视神 经 中度 不全损 伤 Ｃ Ｆ是 视 网膜神 经 节细胞（ Ｇ ｓ具 有保护作 用。方 法 ： Ｒ Ｃ） 采用无 创血 管钳 对 成年 大 鼠造 成视 神经 中度 不全 损伤 ， 实 验 组伤 后 即时 １ ２ ４周分 别 向玻 璃体腔 内注射 Ｃ Ｆ溶液 ２ ； 、、 ＮＴ ｌ同实验 组操作 ， 对照组 在每 个时 间点 向玻璃 体腔 内注 射 ２ 双 蒸水。 在伤 后 １ ２ ４ ８周 时 分 别 做 生 长相 关蛋 白 一４ （ ｒｗｔ ｓ ｃ ｔｄｐｏｅ 、、、 ３ ｇｏ ｈ ａｓ ｉ ｅ ｒｔ ｎ一４ ， ｏａ ｉ ３ Ｇ ＡＰ一４ ） ３ 免疫组 织化学 检 测和 光镜 的组 织 学观 察。 结果 ： 伤 后 １周 对 照组 和实 验 组视 网膜 均 有水 肿 ， ① Ｒ Ｓ ＧＣ 肿胀 。伤后 ２周 ２组视 网膜神 经 节细胞 层 （ Ｃ ） 变稀疏 ， Ｇ Ｌ均 实验 组水 肿 明显减 轻。伤 后 ４周水 肿 消 退，Ｃ Ｇ Ｌ层 细胞数 明显下降。８周 实验组 视 网膜厚 度 正 常， 对照 组各 层 变 薄。② 伤 后 １周 对 照组 和 实验 组 Ｇ Ｐ一４ Ａ ３在 Ｇ Ｌ层 表达 呈阳性 。伤 后 ２ ４ ８周 Ｇ Ｃ 、、 Ｐ Ａ 一４ ３在 Ｇ Ｌ层表 达至 高峰 。实验组 明 显强于对照 组 Ｃ （ Ｐ＜０ ０ ） ．１ 。结论 ： ＮＴ Ｃ Ｆ对大 鼠视 神经 损伤 后 Ｒ Ｃ 具 有 明显的保护 作用。 Ｇ ｓ ［ 关键词 ］睫状神经 营养 因子 ； 网膜神 经 节细胞 ； 长相关蛋 白 一４ 视 生 ３
神经营养因子对周围神经损伤的修复作用
神经营养因子对周围神经损伤的修复作用摘要】周围神经损伤（PNS）是由各种原因引起的受该神经支配的区域出现感觉、运动和营养障碍的临床常见损伤。
周围神经损伤后,雪旺细胞（SCs）分泌多种营养因子及细胞活性成分,这些营养因子维持神经元活性,引导轴突生长，促进神经再生。
本文试就SCs分泌的各种神经营养因子在神经修复过程中的作用做一总结，以期为临床上治疗PNS提供新的思路。
【关键词】神经营养因子；周围神经损伤修复；雪旺细胞PNS发生后，损伤神经远端发生华勒氏变性，神经纤维及髓鞘崩解。
SCs大量增殖形成Büngner带，引导新生轴突延伸；同时合成和分泌多种神经营养因子（NTFs），为周围神经再生提供适宜的微环境。
目前已发现的NTFs有20多种，主要分为4大类[1]：①神经生长因子家族，包括神经生长因子（NGF）、脑源性神经生长因子（BDNF）、神经营养素3、4/5 (NT-3、4/5) ②睫状神经营养因子（CNTF）③成纤维细胞生长因子（FGF）④其他NTFs,包括胶质源性神经生长因子（GDNF）、胰岛素样生长因子（IGFs）等。
1.NGF家族：1.1神经生长因子（NGF）是神经营养因子家族中最具活力的生物活性因子之一，主要分布于神经胶质细胞,雪旺细胞等。
在神经损伤修复过程中，NGF对周围神经结构和功能的恢复有明显的促进作用。
早期有学者[2]研究发现，适量浓度的 NGF可以促进SCs的增殖。
另有研究发现[3]，外源性NGF可以在PNS 早期激活去分化SCs的自噬，进而促进轴突和髓鞘再生。
高延明[4]等研究发现NGF对周围神经再生有明显的促生长作用。
另有研究表明[5]，外源性NGF能使PNS后残存的运动神经元数目增多，并可明显促进脊髓前角神经元重新表达NGF受体。
1.2 脑源性神经营养因子（BDNF）属于NGF家族，主要分布于脑、心、肺和脊髓运动神经元的外周靶组织。
PNS后，BDNF能够通过激活神经元内源性生长能力，增强抗远端萎缩的分化作用，利于轴突再生。
神经营养因子在周围神经损伤后的作用
神经营养因子在周围神经损伤后的作用周围神经损伤后的修复和再生是个复杂的临床问题，如何提高周围神经损伤后重建的治疗效果一直是临床的研究热点。
周围神经损伤后，发生瓦勒氏变性，雪旺细胞随即分裂、增殖，在原来的神经膜管内形成Burgner带，引导轴突以出芽方式再生并长入远侧残端，同时分泌神经营养因子等促进神经的再生[1]。
脑源的神经营养因子（BDNF）是1982年Barde由猪脑提取液中获得的一种神经营养因子，其基本功能是促进神经元存活和突起生长，参与调节神经元的分化、增殖和存活。
近年来研究发现BDNF在外周神经损伤后的修复中也发挥了重要作用。
本文对这方面的研究进展综述如下：1 BDNF的理化性质BDNF是一种碱性蛋白，由120个氨基酸组成，分子量为l2.3KD，等电点为10，在生理状态下以二聚体的形式存在，氨基酸序列55%~60%与NGF、NT-3具有同源性，1989年，Leibroch等[3]实验证明BDNF与NGF、NT-3为同一个基因家族，被统称为神经营养素家族BDNF有两种不同的前体形式，分别是长链和短链前体，目前已知短链前体由248个氨基酸组成。
人BDNF基因全长共744 bp，起始密码子为ATG，终止密码子为TAG。
BDNF所诱导的突触增强作用由cAMP介导的门控系统来调控。
2 BDNF的分布及来源BDNF广泛分布于大脑和外周组织中，大脑皮质、海马及纹状体为BDNF 的主要分布区域，在中枢神经系统的背索与上丘含量亦较高。
部分初级感觉神经元也可合成BDNF，并在周围靶组织和脊髓背角释放，其靶组织位于中枢和周围神经系统中。
Wetmore等[4]在实验中发现，海马有能与BDNF特异结合的编码crKB基因高度表达，海马锥体细胞中有BDNF的存在；BDNF mRNA在海马锥体细胞、齿状回的颗粒细胞和皮质表现为阳性分布。
目前公认的BDNF来源有神经元、雪旺细胞、血小板等。
雪旺细胞是应激状态下周围神经组织BDNF增多的主要来源，损伤后神经断端远侧部有较多的BDNF。
雪旺细胞对周围神经损伤修复作用的研究进展
临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical2019 年第 6 卷第 5 期2019 Vol.6 No.5197雪旺细胞对周围神经损伤修复作用的研究进展李大伟1，张析哲2，周 琪2（1.内蒙古医科大学研究生学院，内蒙古 呼和浩特 010000；2.赤峰市医院，内蒙古 赤峰 024000）【摘要】背景 周围神经损伤发生率高、致残严重，促使人们越来越关注雪旺细胞对周围神经损伤修复的促进作用。
目的 对雪旺细胞促进损伤的周围神经修复作用进行综述。
内容雪旺细胞参与周围神经组成、雪旺细胞增殖与迁移及改变损伤周围神经所处的微环境、分泌营养因子等机制促进外周神经损伤后修复。
趋向可以通过促进雪旺细胞生物活性进而促进损伤周围神经修复，为临床周围神经损伤修复提供新的思路。
【关键词】雪旺细胞；周围神经损伤；微环境；神经营养因子【中图分类号】R338 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.5.197.02引言：周围神经损伤的发生率越来越高，且周围神经损伤再生修复的效果很不理想，一直是困扰医务工作者的难题之一。
周围神经损伤后的功能恢复实为轴突的再生，保护神经元、促进轴突再生，预防所支配效应器萎缩，是周围神经损伤修复的关键[1]。
雪旺细胞，是周围神经的胶质细胞，为轴突提供支持，参与形成髓鞘，对神经纤维的存活、生长及再生具有重要意义。
1 周围神经损伤后变性周围神经损伤后，神经元的轴突与胞体会发生一系列的变化。
神经元胞体发生肿胀和染色质溶解，尼氏体分散、胞体呈相对嗜酸性改变、细胞核偏心性移位[2]。
轴突也会发生一系列变性，其中Wallerian 变性起主要作用。
Wallerian 变性是以损伤处为分割点，在受损神经的远端，轴突成串珠样肿胀，继而细胞骨架成颗粒状崩解，崩解的碎片被雪旺细胞吞噬。
在神经发生变性的过程中，雪旺细胞大量增殖，与巨噬细胞一起吞噬崩解碎片的同时，还可以从其他不同角度促进周围神经损伤的修复。
睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后视觉电生理的影响
睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后视觉电生理的影响作者：崔志利惠延年康军王琳【关键词】视神经关键词: 视神经;损伤;睫状神经营养因子;闪光视觉诱发电位;大鼠摘要:目的观察睫状神经生长因子（ciliary neurotrophic factor，CNTF）对视神经损伤后视觉电生理变化的作用. 方法采用镊夹视神经法制作大鼠视神经损伤模型，夹伤后立即向球后一次性注射CNTF50ng，并于损伤当时和损伤后1，2，3和4wk时检测夹伤视神经眼的闪光视觉诱发电位（flare-visional evoked potential，F-VEP）. 结果视神经夹伤后损伤眼F-VEP的P1波振幅（wave amplitude，WA）在1wk时下降，后回升;峰潜时（wave latency，WL）延长.CNTF组中WA在视神经夹伤后1wk和2wk时与对照组相比差异显著（P<0.05），WL仅在视神经夹伤后1wk时与对照组相比具显著差异（P<0.05）. 结论视神经损伤后一次性球后注射CNTF在早期加强了神经系统对损伤的反应强度，促进了视神经损伤后神经冲动传导功能的恢复.Keywords:optic nerve;injury;ciliary neurotrophic factor;flare-visional evoked potential;ratAbstract:AIM To study the effects of ciliary neurotrophic factor（CNTF）on changes of flare-visional evoked potential（F-VEP）in the crushed optic nerve rats.METHODS The optic nerve injury models were induced by crushing the optic nerve2mm retrobulbarly.Then an retrobulbar injection of CNTF （50ng）was performed.The F-VEP was observed1，2，3and4weeks after injury.RESULTS The F-VEP P1wave amplitude（WA）of optic nerve-crushed eyes of Spraque-Dawley（SD）rats was decreased at1week after in-jury，then recovered partially later.The P1wave latency（WL）was delayed after injury.At1and2weeks after crush，the P1WA of CNTF group was significantly greater than that of the control groups（P<0.05）.At1week after crush，the P1WL of CNTF group was shorter than that of the control groups （P<0.05）.CONCLUSION An retrob-ulbar injection of CNTF after optic nerve crush can enhance the responses of optic nerve system，improve the recovery of nerve impulse transition.0 引言视神经损伤往往引起视力丧失［1］ .治疗和功能恢复困难［2］ .研究发现睫状神经营养因子（ciliary neurotrophic factor，CNTF）能够促进多种神经细胞的存活，在神经系统发育、分化和损伤修复中具有非常重要的作用［3］ .我们采用大鼠视神经夹伤模型，观察视神经夹伤眼的视觉电生理改变，以评价CNTF对大鼠视神经损伤后功能恢复的作用.1 材料和方法1.1 材料二级成年SD大鼠，2～3mo龄，雌雄不限，体质量200～250g，由第四军医大学实验动物中心提供.自由饮食，在光/暗周期为12h/12h，光照时间6:00～18:00，背景噪音（40±10）db，温度（20±3）℃条件限制下饲养.将实验动物随机分为对照组和CNTF组，各组又分为7，14，21和28d4个时间组，每组5只动物，每只动物进行单眼试验.视神经所采用小号动脉阻血镊前端1mm宽（上海医疗器械厂），所用重组人CNTF购买自美国Sigma公司.1.2 方法视神经夹伤模型制作和球后给药:846麻醉剂1mL・kg-1 im，置于手术盘中，消毒手术眼局部，于双目显微镜下切开外眦，打开Tenon囊，分离外直肌并剪断，沿颞侧巩膜表面钝性分离至视神经，于眼球后2～3mm处用小号动脉阻血镊夹压视神经10s，加压时完全闭合阻血镊完成夹伤.治疗组在手术后当时用微量注射器向球后注入CNTF50ng，对照组注入生理盐水10μL.将眼球复位，缝合Tenon囊及外眦，于直接检眼镜下观察视网膜血供良好者纳入试验.为了做到视神经损伤程度一致，在视神经夹伤模型制作时，统一在。
睫状神经营养因子对周围神经损伤后再生的影响
睫状神经营养因子对周围神经损伤后再生的影响韩久卉;张英泽;许秀兰;田德虎【期刊名称】《中国骨伤》【年(卷),期】2000(013)010【摘要】目的研究睫状神经营养因子（CNTF）对周围神经损伤后再生的影响。
方法用硅胶管桥接大鼠双侧坐骨神经缺损，形成神经再生室。
左侧室内注入基因重组人CNTF，右侧注入生理盐水（NS）。
术后14、30、60和90天取材，行大体、光镜、电镜观察。
术后90天行轴突图像分析、电生理检测及霍乱毒素—辣根过氧化物酶（CB-HRP）逆行追踪。
结果与对照侧相比，实验侧再生有髓神经纤维数目较多、轴突较粗且髓鞘较厚，复合肌肉动作电位（CMAP）的潜伏期较短、神经传导速度较快且波幅较高。
实验侧CB-HRP标记的脊髓前角运动细胞数明显多于对照侧。
结论外源性hCNTF有明显促进周围神经再生作用。
【总页数】3页(P585-587)【作者】韩久卉;张英泽;许秀兰;田德虎【作者单位】河北医科大学第三医院，河北石家庄050051;河北医科大学第三医院，河北石家庄050051;河北医科大学第三医院，河北石家庄050051;河北医科大学第三医院，河北石家庄050051【正文语种】中文【中图分类】R65【相关文献】1.周围神经损伤后的神经再生和种植体周围神经再生的影响因素 [J], 尹程程;李保胜;蔡青;孟维艳2.睫状神经营养因子对急性面神经损伤端侧吻合后促进再生作用的研究 [J], 刘洪飞;张宇彤;徐勇忠3.睫状神经营养因子对周围神经损伤后功能恢复的影响 [J], 韩久卉;张经崎4.不同剂量睫状神经营养因子对大鼠坐骨神经损伤后再生的影响 [J], 杨恒文;曾琳;刘媛;李强;李应玉;陈恒胜;龙在云;伍亚民5.周围神经损伤后慢性失神经及其对神经再生的影响分析 [J], 罗志华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠视神经损伤及修复过程中睫状神经营养因子受体mRNA的表达
大鼠视神经损伤及修复过程中睫状神经营养因子受体mRNA的表达林鸿;徐国兴;郑学栋【期刊名称】《福建医药杂志》【年(卷),期】2006(28)3【摘要】目的探讨大鼠视神经损伤及修复过程中睫状神经营养因子受体(CNTFR)mRNA在视神经上的表达及意义.方法135只健康雄性斯普拉-道来(SD)大鼠,随机取45只作为正常对照组;另两组为视神经单纯切断组和视神经-坐骨神经吻合组,每组各45只大鼠.建立大鼠视神经单纯切断和视神经-坐骨神经吻合模型,分别于建立模型后3、7、14 d取视神经组织,应用半定量逆转录-聚合酶链反应方法观察正常大鼠及各模型大鼠视神经上CNTFR mRNA的表达情况.结果正常大鼠视神经内CNTFR mRNA有少量表达.视神经单纯切断组,与正常对照组比较,其表达增加,有显著性差异.视神经剪断后桥接坐骨神经组,表达增加更明显,有显著性差异.结论视神经损伤后,可通过提高内源性CNTFR来应答轴索损伤,促进轴突再生,为外源性睫状神经营养因子(CNTF)的应用提供理论依据.【总页数】3页(P96-98)【作者】林鸿;徐国兴;郑学栋【作者单位】福建医科大学附属第一医院眼科中心,350005;福建医科大学附属第一医院眼科中心,350005;福建省眼科研究所,350005【正文语种】中文【中图分类】R77【相关文献】1.在大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中按摩对神经型一氧化氮合成酶、肝细胞生长因子mRNA表达的影响 [J], 杨辉;唐成林;常青;黄思琴;唐念珍;谢辉;陈晓琳;田源;张毅2.雌性大鼠尿道括约肌损伤修复过程中机械生长因子mRNA表达的改变 [J], 王娟;王志莲;郝敏3.视神经损伤时视网膜睫状神经营养因子受体的表达 [J], 杨小丽;张皙;顾青;张喜梅;孙晓东4.坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠脊髓背角内5-羟色胺4-7受体亚型mRNAs 的表达变化 [J], 陈晶;周亮;王亚云;李云庆;武胜昔5.大鼠视网膜和视神经中睫状神经营养因子mRNA的表达定位 [J], 张巍;叶剑;陈春林;邹倩;许建涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后视觉电生理的影响
睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后视觉电生理的影响崔志利;惠延年;康军;王琳【期刊名称】《第四军医大学学报》【年(卷),期】2002(023)007【摘要】目的观察睫状神经生长因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)对视神经损伤后视觉电生理变化的作用.方法采用镊夹视神经法制作大鼠视神经损伤模型,夹伤后立即向球后一次性注射CNTF 50 ng,并于损伤当时和损伤后1,2,3和4 wk 时检测夹伤视神经眼的闪光视觉诱发电位(flare-visional evoked potential,F-VEP).结果视神经夹伤后损伤眼F-VEP的P1波振幅(wave amplitude,WA)在1 wk时下降,后回升;峰潜时(wave latency,WL)延长.CNTF组中WA在视神经夹伤后1 wk和2 wk时与对照组相比差异显著(P<0.05),WL仅在视神经夹伤后1 wk时与对照组相比具显著差异(P<0.05).结论视神经损伤后一次性球后注射CNTF在早期加强了神经系统对损伤的反应强度,促进了视神经损伤后神经冲动传导功能的恢复.【总页数】3页(P626-628)【作者】崔志利;惠延年;康军;王琳【作者单位】第四军医大学西京医院眼科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院眼科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院眼科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院眼科,陕西,西安,710033【正文语种】中文【中图分类】R774.10【相关文献】1.神经干细胞移植对大鼠视神经损伤后视觉电生理的影响 [J], 刘永生;宋来君;庞长河;郝燕燕;龙江2.腺病毒介导脑源性神经营养因子基因转染对大鼠视神经损伤后视觉电生理的影响[J], 侯旭;胡丹;惠延年;郭守一;张作明3.人重组睫状神经营养因子对大鼠视神经不全损伤后功能恢复的影响 [J], 李灿;王一;王仕军;申永刚4.睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的保护作用 [J], 王山丹;钱志敏5.睫状神经营养因子对大鼠视神经不全损伤后轴浆运输的影响 [J], 李灿;王一因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
睫状神经营养因子对面神经损伤修复大鼠面神经核内STAT3磷酸化的影响
睫状神经营养因子对面神经损伤修复大鼠面神经核内STAT3磷酸化的影响季兴;熊绍虎【期刊名称】《中国神经免疫学和神经病学杂志》【年(卷),期】2005(012)005【摘要】目的探讨重组人睫状神经营养因子(ciliary neurotrophica factor,CNTF)对面神经损伤修复大鼠面神经核运动神经元STAT3活性的影响.方法成年大鼠面神经切断后行端端吻合,局部给予CNTF,以生理盐水为对照.术后7 d,运用抗磷酸化STAT3抗体做免疫印迹(immuobloting,IB)以检测面神经核抽提物STAT3的磷酸化变化.结果局部给予CNTF组大鼠面神经核内p-STAT含量较对照组高(P＜0.05).结论局部给予重组CNTF可增强面神经损伤修复大鼠面神经核内STAT3的磷酸化.【总页数】3页(P308-310)【作者】季兴;熊绍虎【作者单位】解放军第303医院神经内科,广西,南宁,530021;第二军医大学人体解剖学教研室,上海,200433【正文语种】中文【中图分类】R745.12【相关文献】1.管灸对面神经损伤家兔面神经核内BDNF及其受体TrkB表达的影响 [J], 肖雪;宋军;田丰玮;黄靖云;赵金发;杨金蓉2.鞘内注射丹参酮ⅡA对坐骨神经慢性压迫性痛大鼠脊髓背角内磷酸化p38MAPK 的影响 [J], 徐玉英;彭普基;游言文;任秀花3.大鼠面神经压榨损伤对面神经核神经元p27蛋白表达的影响 [J], 王巍;王建平4.大鼠面神经切断及修复对面神经核磷酸化的影响 [J], 卢连军;王锦玲;邱建华;黄维国;刘顺利5.面神经损伤与修复对大鼠面神经核内信号转导子和转录激活子3活性的影响 [J], 季兴;熊绍虎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
睫状神经营养因子与神经再生
睫状神经营养因子与神经再生
胡玮;周梁
【期刊名称】《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》
【年(卷),期】1998(33)6
【摘要】神经再生是神经科学研究中的一项重要课题，其涉及各临床学科，是临
床医学上有待解决的问题之一。
神经损伤后有强大的再生能力，但神经损伤修复后恢复正常功能却不常见。
早期，大多数学者认为雪旺细胞（Ｓｃｈｗａｎｎｃｅｌ，ＳＣ）和神经膜管对神经再生起着机械引导作用...
【总页数】3页(P377-379)
【作者】胡玮;周梁
【作者单位】上海第二医科大学附属仁济医院耳鼻咽喉科
【正文语种】中文
【中图分类】R651.3
【相关文献】
1.神经生长因子与睫状神经营养因子促进大鼠坐骨神经再生的协同作用研究 [J],
李强;伍亚民;申屠刚;李民
2.重组人睫状神经营养因子对大鼠坐骨神经再生长的影响 [J], 张少华;曹福元;张永杰;田青;王建枝
3.玻璃体内单剂量注射睫状神经营养因子对金黄地鼠视神经再生的影响 [J], 吕强;赵发国;张卫清;张英谦;石进
4.外源性睫状神经营养因子干预缺损神经再生及运动功能的恢复 [J], 姜广擎;张庭
深
5.睫状神经营养因子和神经生长因子促进自体去神经带血管移植肌的神经再生 [J], 苏刚;刘贵麟;王德文;高亚兵
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复合神经营养因子应用于大鼠视神经损伤的研究
复合神经营养因子应用于大鼠视神经损伤的研究王宏;成霄黎【期刊名称】《中国药物与临床》【年(卷),期】2007(7)6【摘要】目的观察玻璃体腔注射复合神经营养因子(睫状神经营养因子,CNTF和脑源性神经营养因子,BDNF)对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞存活的作用.方法60只健康成年大鼠、体重200～225 g、雌性,随机分为对照组、CNTF治疗组、BDNF治疗组及复合神经营养因子(CNTF+BDNF)治疗组.各组又分为7、14、21d 3个时间组,每组5只大鼠,每只动物进行单眼实验,另外一眼为正常对照.荧光金逆行标记视网膜神经节细胞(RGCs),7 d后做成视神经损伤模型.4组术后分别向玻璃体腔内注射生理盐水、CNTF、BDNF、CNTF+BDNF.按视神经损伤后不同时间点,分别将动物灌注固定.做全视网膜铺片,荧光显微镜下观察,在每张视网膜距视乳头1 mm部位随机取4个视野拍片,对每个视野中标记的RGCs进行计数,求平均值,计算视神经损伤后玻璃体腔内注射不同药物、不同时间所剩余的RGCs数.结果视神经夹伤后各组RGCs随时间推移逐渐减少.与对照组相比,CNTF治疗组、BDNF治疗组及CNTF+BDNF治疗组7、14、21 d各组RGCs数均明显多于对照组(P＜0.01),且CNTF+BDNF治疗组RGCs数亦明显多于单独应用一种神经营养因子的CNTF治疗组、BDNF治疗组(P＜0.01).结论在对大鼠视神经损伤的治疗中,应用CNTF+BDNF明显优于单独应用一种神经营养因子(CNTF或BDNF).【总页数】4页(P425-428)【作者】王宏;成霄黎【作者单位】030002,太原,山西省眼科医院眼肿瘤科;山西医科大学第一医院眼科【正文语种】中文【中图分类】R74【相关文献】1.以脑源性神经营养因子等干预视神经损伤大鼠视神经拉伸力学的特性分析 [J], 王玲;吕雪漫;姜琦2.以脑源性神经营养因子等干预视神经损伤大鼠视神经应力松弛特性分析 [J], 王玲;李鹏;姜琦3.视神经半损伤后复合神经营养因子辅助再生的动态生物学研究 [J], 邵立功;黄湛;骆彦君4.复合神经营养因子对大鼠视神经损伤后轴突数的影响 [J], 王宏;成霄黎5.以脑源性神经营养因子等干预视神经损伤大鼠视神经蠕变分析 [J], 王瑛韬; 郭鑫; 齐兵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
睫状神经营养因子对脑出血大鼠的神经保护作用
睫状神经营养因子对脑出血大鼠的神经保护作用李昕;王建平;刘春岭;李楠;白宏英【期刊名称】《中国实用神经疾病杂志》【年(卷),期】2008(011)009【摘要】目的观察睫状神经营养因子(CNTF)对脑出血大鼠的神经保护作用及可能机制.方法实验大鼠随机分为对照组、模型组和睫状神经营养因子治疗组,每组24只,对照组仅给予生理盐水尾壳核注射,后2组采用自体股动脉血注入大鼠尾壳核建立脑出血模型,CNTF治疗组于术后经侧脑室注射CNTF.分别于术后12 h、1d、3d、5d处死取脑, TUNEL法检测神经元凋亡.结果术后各组神经元的凋亡均在3 d时达高峰,CNTF治疗组大鼠脑血肿周围组织神经元凋亡的数量明显低于模型组.结论CNTF对脑出血后损伤神经细胞具有保护作用,可能机制为减少脑出血灶周细胞的凋亡.【总页数】2页(P47-48)【作者】李昕;王建平;刘春岭;李楠;白宏英【作者单位】郑州大学第二附属医院神经内科,郑州,450014;郑州大学第二附属医院神经内科,郑州,450014;郑州大学第二附属医院神经内科,郑州,450014;郑州大学第二附属医院神经内科,郑州,450014;郑州大学第二附属医院神经内科,郑州,450014【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.睫状神经营养因子对大鼠急性高眼压眼视网膜神经节细胞的保护作用 [J], 武劲圆;孙丰源;唐东润;张蕊2.睫状神经营养因子对大鼠急性高眼压眼视网膜神经节细胞的保护作用 [J], 武劲圆;孙丰源;唐东润;张蕊3.睫状神经营养因子对糖尿病早期大鼠视网膜神经组织的保护作用 [J], 梁紫岩;张卯年4.睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的保护作用 [J], 王山丹;钱志敏5.睫状神经营养因子对大鼠急性高眼压视神经损害的保护作用 [J], 武劲圆;王万辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
神经营养因子促进视神经夹伤后视网膜生长相关蛋白-43表达
神经营养因子促进视神经夹伤后视网膜生长相关蛋白-43表达崔志利;王琳;胡丹;康军;惠延年【期刊名称】《眼科新进展》【年(卷),期】2003(023)002【摘要】目的观察大鼠视神经夹伤后视网膜的神经生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)的表达变化及睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)和腺病毒介导脑源性神经营养因子(adenovirally delivered brain-derived neurotrophic factor,Ad-BDNF)对视神经夹伤的保护作用.方法在眼球后2mm处作视神经夹伤,制作SD大鼠视神经夹伤模型,通过巩膜进行玻璃体微量注射神经营养因子(neurotraphic factors,NFs),应用免疫印迹法观察视网膜的GAP-43表达量的变化.结果正常SD大鼠视网膜上GAP-43呈现低表达,分子量约为46.7ku;玻璃体注射CNTF,大鼠视神经夹伤后2周,GAP-43的表达增强(P<0.05);玻璃体注射Ad-BDNF,在视神经夹伤后4周内GAP-43的表达增强(P<0.05),但这种作用以视神经损伤后1周时最为明显.结论玻璃体注射NFs能够在一定时间范围内促进视神经夹伤的SD大鼠视网膜上GAP-43表达,其中Ad-BDNF的促进作用能够维持相对较长的时间.【总页数】3页(P76-78)【作者】崔志利;王琳;胡丹;康军;惠延年【作者单位】710032,陕西省西安市,第四军医大学西京医院眼科;710032,陕西省西安市,第四军医大学西京医院眼科;710032,陕西省西安市,第四军医大学西京医院眼科;710032,陕西省西安市,第四军医大学西京医院眼科;710032,陕西省西安市,第四军医大学西京医院眼科【正文语种】中文【中图分类】R774【相关文献】1.活化的巨噬细胞促进视神经损伤后视网膜中生长相关蛋白-43的表达 [J], 王峰;王继群;苏颖;山艳春;徐锦堂;陈剑2.活化的巨噬细胞对钳夹伤大鼠视神经生长相关蛋白-43表达的影响 [J], 陈春林;叶剑;尹小磊;陈小璠3.银杏叶提取物对兔视神经夹伤后视网膜视神经节细胞的保护作用 [J], 乔锋;刘永霞;刘金华;蒋力平;成云翠4.神经营养因子影响视神经夹伤后视网膜GAP-43mRNA表达变化 [J], 崔志利;康军;王琳;王静;惠延年;胡丹5.转化生长因子-β1对成年大鼠视神经夹伤后视网膜节细胞及视神经功能影响的实验研究 [J], 白珏;赵璇;张林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
雪旺细胞活性对大鼠同种异体面神经移植再生效果的影响的开题报告
雪旺细胞活性对大鼠同种异体面神经移植再生效果的影响的开题报告1. 研究背景和意义面神经受到损伤或切除后，可能导致重要的面部运动和感觉功能障碍。
传统治疗方法主要是通过神经吻合或植入人工神经进行修复，但效果有限。
近年来，同种异体面神经移植已成为备受关注的治疗方法。
然而，移植后新生神经丝的数量和质量仍存在一定差异，影响了治疗效果。
因此，研究影响移植后神经再生的因素，对提高移植效果具有重要意义。
雪旺细胞是支持神经细胞再生和重塑的重要细胞类型，通过分泌生长因子和细胞外基质在神经组织的再生中起重要作用。
因此，雪旺细胞的活性可能影响同种异体面神经移植的再生效果。
本研究旨在通过实验探究雪旺细胞活性对大鼠同种异体面神经移植再生效果的影响，为同种异体面神经移植的临床应用提供理论依据。
2. 研究内容和方法（1）建立大鼠面神经损伤模型：选用健康成年大鼠，采用手术方法制造面神经损伤模型。
（2）移植同种异体面神经：提取同种异体面神经，经过打擦法制备成神经丝。
将神经丝移植到大鼠面神经损伤部位，分为两组：实验组和对照组。
（3）实验组注射雪旺细胞：在实验组中，向移植部位注射激活后的雪旺细胞。
对照组注射等体积的盐水或不做处理。
（4）观察神经再生和行为学表现：在移植后1、2、4、8周，取出移植部位组织，观察神经再生情况。
记录大鼠面部运动和感觉表现，比较两组之间差异。
（5）统计学分析：采用SPSS统计软件进行数据分析，比较两组之间神经再生和行为学层面的差异。
3. 预期研究结果预计通过实验方法，对雪旺细胞的活性对同种异体面神经移植再生效果的影响进行定量和定性分析。
预期结果将说明：（1）雪旺细胞的激活对大鼠面神经移植后神经再生具有显著促进作用。
（2）注射雪旺细胞的实验组和对照组相比，大鼠面部运动和感觉表现有明显差异，其中实验组的表现更好。
（3）分析雪旺细胞的激活程度和神经再生之间的相关性。
4. 项目进度安排本研究计划在2022年3月至2023年3月期间完成，主要进度安排如下：（1）2022年3-5月：文献综述和实验设计；（2）2022年6-8月：制备同种异体面神经和雪旺细胞；（3）2022年9-12月：大鼠面神经损伤模型建立和同种异体面神经移植；（4）2023年1-3月：取出组织样本，记录行为学表现和数据统计分析。
雪旺细胞对大鼠视神经保护机制的实验研究的开题报告
雪旺细胞对大鼠视神经保护机制的实验研究的开题报告一、选题背景视神经是连接眼球和大脑视觉中枢的重要通道，伴随着人类生活质量的提高，视神经病变相关的疾病也逐渐上升。
针对这一问题，近年来研究人员逐渐加强了对于视神经保护机制的研究，其中雪旺细胞作为视神经周围组织中的一种主要成分，被广泛关注。
二、研究目的本研究旨在探究雪旺细胞在大鼠视神经保护机制中的作用及相关机制，为深入解析视神经病变的形成过程提供理论支持。
三、研究内容1.大鼠模型的建立及视神经病变评估采用维新碱致神经休克模型建立大鼠视神经病变模型，之后使用电生理检测手段及组织学检测手段对视神经损伤程度进行评估。
2.雪旺细胞处理及相关注射将大鼠分为对照组和处理组，分别注射雪旺细胞和生理盐水，建立雪旺细胞处理组及对照组。
3.视神经病变程度的对比通过电生理检测手段及组织学检测手段对两组大鼠的视神经病变程度进行比较，探究雪旺细胞在视神经保护中的作用。
4.相关指标的检测及分析对于大鼠视神经内积分质末梢的相关指标进行检测及分析，探究雪旺细胞在保护视神经内积分质末梢中的相关机制。
四、研究意义通过探究大鼠视神经损伤与雪旺细胞之间的关系，为深入研究人类视神经疾病的发生机制及其预防和治疗提供理论支持，具有重要的理论与实际意义。
五、参考文献1. Chen Y, et al. (2019). Schwann cell transplantation promotes retinal ganglion cell survival and axon regeneration after optic nerve crush injury in rodents. Exp Eye Res 183: 107690.2. Qiu ZL, et al. (2017). Neuroprotective effects of ESCs-derived Schwann cells on retinal ganglion cells in vitro. Exp Eye Res 165: 1-11.。
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英文缩写词表英文缩写英文全名中文译名ＣＮＳＰＮＰＮＳＯＮＲＧＣＳＣＳＣＮＡＮＴＦＮＧＦＣＮＴＦＢＤＮＦＦＧＦＧＤＮＦＮＴ．３ＥＣＭＣＡＭＣｅｎｔｒａＩｓｙｓｔｅｍＰｅｒｉｐｈｅｒａＰｅｒｉｐｈｅｒａｓｙｓｔｅｍｎｅｒｖｏｕｓ中枢神经系统ｎｅｒｖｅ周围神经ｎｅｒｖｏｕｓ周围神经系统Ｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅ视神经Ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌ视网膜神经节细胞Ｓｃｈｗａｎｎｃｅｌｌ雪旺细胞Ｓｃｈｗａｎｎｃｅｌｌｓ雪旺细胞神经营ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃａｇｅｎｔ养活性物质Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ神经营养因子Ｎｅｕｒａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ神经生长因子Ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ睫状神经生长因ｆａｃｔｏｒ子Ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ脑源性神经营养ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ因子Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈ成纤维细胞生长ｆａｃｔｏｒ因子Ｇｌｉａｌ—ｄｅｒｉｖｅｄ胶质细胞源性神ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ经营养因子Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎ一３神经营养物质一３Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ细胞外基质Ｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｖｅ细胞粘附分子ｍｏｌｅｃｕｒｅ２ＶＥＰＦ－ＶＥＰＥＯＧＥＲＧＩＥＧＧＡＰ．４３ＧＦＡＰＮＦＰＢＴＡＢＤＰＩＶｉｓｉｏｎａｌｅｖｏｋｅｄ视觉诱发电位ｐｏｔｅｎｔｉａｌＦｌａｒｅ－ｖｉｓｉｏｎａＪｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌＥｌｅｃｔｒｏｏｃｕｌｏｇｒａｍＥｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｅｇｒａｍＩｍｍｅｄｉａｔｅｅａｒｌｙｇｅｎｅｓＧｒｏｗｔｈ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ４３ＧｌｉａＩｆｉｂｒｉｌｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎＮｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔＰｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒｉｎｇＴｏｌｕｅｎｅａｍｉｎｅｂｌｕｅＤｏｔｐｅｒｉｎｃｈ闪光视觉诱发电位眼电图视网膜电图早期反应基因生长相关蛋１兰１－４３胶质纤维酸性蛋白神经丝磷酸盐缓冲液甲苯胺蓝每英寸点数３第目军医大掌硕士掌位论文睫状神经营养因子和雪旺细胞神经营养活性物质对大鼠视神经损伤修复的作用中文摘要目的：，慨神经损伤后常引起严重的视力丧失，临床缺乏有效的救治措旌。
实验发现受损神经元的存活、再生和功能恢复与其所处微环境中神经营养因子等因素有关毒本文（１）通过ｓＤ大鼠视神经夹伤后神经纤维计数，观察Ｃ卜ｉＴＦ和ＳＣＮＡ对视神经损伤、坏死和修复的作用；（２）用视觉电生理方法观察视神经夹伤后功能下降和ＣＮＴＦ对其恢复的作用。
，ｆ方法：ｌ第呻ｇ分：ＣＮＴＦ和ＳＣＮＡ对夹伤视神经纤维数变化的作用１．大鼠视神经夹伤模型的建立成年ＳＤ大鼠分离暴露视神经，于眼球后２—３ｍｍ处用小号动脉阻血镊夹压视神经１５ｓ。
２．视神经夹伤后玻璃体内给药视神经夹伤后立即用微量注射器向各组动物玻璃体内分别注入重组人ＣＮＴＦＳ０ｎｇ（１０ｐＬ），体外无血清培养乳鼠的ＳＣＮＡｌＯＩＪＬ和生理盐水１０ｐＬ。
３．视神经纤维计数分别于夹伤后１、２、３和４周处死动物，取视神经横断面半薄切片作甲苯胺蓝染色，行图像分析和视神经纤维计数。
第二部分：ＣＮＴＦ对夹伤视神经视觉电生理变化的作用１．大鼠视神经夹伤模型的建立方法同前，夹压时间改变为１０ｓ。
２．视神经夹伤后球后给药夹伤后立即向球后分别注入Ｉｌｌｌ３２３ＣＮＴＦ５０ｎｇ（１０１ａＬ）和生理盐水１０１ＪＬ。
视觉电生理检查分别于夹伤后当时、夹伤后１、２、３和４周检测夹伤眼Ｆ－ＶＥＰ，观察Ｐ１波振幅和峰潜时变化。
结果：视神经夹伤后失去正常神经纤维组织结构，髓鞘大量脱失，间质增多，夹伤后１周内轴突广泛水肿，１周后水肿消失。
视神经夹伤后１、２、３和４周神经纤维数密度分别为０．０５３＋０００２、０．０４３＋＿０．００８、０．０３０＋０．００４和０．０２９＋０．００１（ｎ＝５，个，ｕｍ２），为正常对照组的４９．９％、４０．０％、２８．４％和２７．１％。
ＣＮＴＦ组相应的纤维数密度分别为０．０６４＋０００３、Ｏ．０４５＋０．００５、０．０３３±０．００７和Ｏ．０２８＿＋０．００４（ｎ＝５，个／ｕｍ２），为正常对照组的５９６％、４２．Ｏ％、３１．Ｏ％和２６．６％，１周时的数据与夹伤对照组差异显著（Ｐ＜Ｏ．０５）。
ＳＣＮＡ组相应的纤维数密度分别为０．０６５＋０．００５、０．０４２＋０．００８、００３１±０．００８和０．０２８＋０．００３（ｎ＝５，个，ｕｍ２），为正常对照组的６１．３％、３９７％、２８．９％和２６．２％，１周时的数据与夹伤对照组差异显著（Ｐ＜Ｏ．０５）。
其余各组同一时间点数据间差异不显著（Ｐ＞Ｏ．０５）。
正常ＳＤ大鼠Ｆ—ＶＥＰ检查Ｐ１波振幅为７４．５６＋７。
５２ｕＶ，峰潜时为７．６１＋１．７４ｍｓ（ｎ＝１７）。
夹伤后当时、夹伤后１、２、３和４周时Ｆ－ＶＥＰ检查Ｐ１波振幅分别为４．２５＋０．５１、９．８３＋１．６１、９．３６±０．８０、９．０５±１．４１和８．８４＋１．３１ＩＪＶ，峰潜时分别为８９．３８＋２．６６、１０４．８８＋４．９２、９０．５＋９．５８、８７．１３＋８．０６和８２．２５±６．５５ｍｓ：ＣＮＴＦ组相应的Ｐ１波振幅为４．２１士０．８５、１６．３１±２．Ｓ５、１４．４５＋２．７１、１０．５７＋１．９６和８．９３＋０．９６１ａＶ，峰潜时为９１．７５±３．６６、９２±３．８７、８９．２５＋８．６６、８８．７５＋４．２９和８０．７５±５．４ｍｓ（ｎ＝５）。
１－２周时实验组Ｐ１波振幅均高于对照组，差异显著（尸＜０．０５），１周时实验组Ｐ１波峰潜时均低于对照组，差异显著（Ｐ＜Ｄ．０５）。
其它时间点５１各组Ｐ１波振幅和峰潜时差异不明显（Ｐ＞ｏ．０５）ｆ厂一，结论：１．本视神经夹伤模型中神经纤维数下降主要发生在早期１—３周内，说明轴突的变性坏死主要发生在神经损伤早期阶段。
２．视神经夹伤后玻璃体内注射重组人ＣＮＴＦ和同种ＳＣＮＡ在损伤后１周内对神经纤维数减少有保护作用，后期作用不明显。
二者作用差异不明显。
３．正常ＳＤ大鼠Ｆ－ＶＥＰ检查Ｐ１波振幅为７．６１±１．７４ｐＶ，峰潜时为７４．５６＋７．５２ｍｓ，个体变异程度相对较大。
４．视神经夹伤球后一次性注入重组人ＣＮＴＦ，在２周内Ｆ－ＶＥＰ恢复程度好于对照组。
关键词：视神垂／睫状神经营养因子雪旺细胞神经营养活性、一一—一“—”。
～———————＿，—～物质。
神经纤维计数闪光视觉诱发电位ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＣＮＴＦａｎｄＳＣＮＡｏｎｃｒｕｓｈｅｄｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｉｎｒａｔｓ英文摘要ＰｕＲＰＯＳＥ：Ｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｉｎｊｕｒｙａｆｔｅｒｒｅｓｕｌｔｉｎｓｅｖｅｒｅｖｉｓｕａｌｌｏｓｓａｎｄｃｏｕｌｄｎｏｔｂｅｔｒｅａｔｅｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｅｖｉｄｅｎｃｅｉｓｎｏｗｅｍｅｒｇｉｎｇｔｈａｔｓｕｒｖｉｖａｌ．ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆｉｎｊｕｒｅｄｎｅｕｒｏｎｓｉｎｔｈｅｃｅｎｔｒａＩｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍ（ＣＮＳ）ａｒｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒｓｅｘｉｓｔｉｎｔｈｅｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．１ｎｐｒｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙｗｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ（ＣＮＴＦ）ａｎｄＳｃｈｗａｎｎｃｅｌｌｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃａｇｅｎｔ（ＳＣＮＡ）ｏｎｃｒｕｓｈｅｄｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｉｎｖｉｖｏ，（１）ＴｈｅｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｆｉｂｅｒｓｗｅｒｅＣＯＵｒｔｔｅｄａｆｔｅｒｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｃｒｕｓｈｅｄｗｉｔｈｉｎｔｒａｖｉｔｒｅａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆＣＮＴＦａｎｄＳＣＮＡ；（２）Ｆｌａｒｅ－ＶｉｓｕａｌＥｖｏｋｅｄＰｏｔｅｎｔｉａｌｓ（Ｆ－ＶＥＰ）ｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄａｆｔｅｒｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｃｒｕｓｈｅｄｗｉｔｈｒｅｔｒｏｂｕｌｂａｒｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆＣＮＴＦ．ＭＥＴＨ００Ｓ：Ｐａｒｔ１：ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＣＮＴＦａｎｄＳＣＮＡｏｎｔｈｅｃｒｕｓｈｅｄｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｆｉｂｅｒｎｕｍｂｅｒｓ１．ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＯｐｔｉｃｎｅｒｖｅｃｒｕｓｈｍｏｄｅＩｌｎｒａｔｓ．ＴｈｅｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｏｆａｄｕｌｔＳｐｒａｑｕｅ－Ｄａｗｌｅｙｒａｔｓｗａｓｅｘｐｏｓｅｄ．Ｔｈｅｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｗａｓｃｒｕｓｈｅｄａｔ２－３ｍｍｂａｃｋｏｆｔｈｅｅｙｅｂａｌｌｕｓｉｎｇｓｐｅｃｉａｌｆｏｒｃｅｐｓｆｏｒ１５ｓｅｃｏｎｄｓ．２．Ｉｎｔｒａｖｉｔｒｅａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．Ａｆｔｅｒｔｈｅｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｃｍｓｈｅｄ，ＣＮＴＦ５０ｒｉｇ（１ＯｐＬ），ＳＣＮＡ１０ｐＬｏｒｓａｌｉｎｅ１ＯｐＬｗｅｒｅｉｎｊｅｃｔｅｄｉｎｔｏｔｈｅｖｉｔｒｅｏｕｓｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．７３ＯｐｔｉｃｎｅｒｖｅｆｉｂｅｒｓｃｏｕｎｔｉｎｇＴｈｅｒａｔｓｗｅｒｅｅｘｅｃｕｔｅｄａｔ１，２。
３ａｎｄ４ｗｅｅｋａｆｔｅｒｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｃｒｕｓｈｉｎｇ．Ｔｈｅｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｓｗｅｒｅｔａｋｅｎａｎｄｔｈｅｔｒａｎｓｅｃｔｏｆｔｈｅｃｒｏｓｓ．ｓｅｃｔｉｏｎｗａｓｓｔａｉｎｅｄｗｉｔｈｔｏｌｕｅｎｅａｍｉｎｅｂｌｕｅ（ＴＡＢ）．Ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｓｏｆｎｅｒｖｅｆｉｂｅｍｗｅｒｅｃｏｕｎｔｅｄｂｙｕｓｉｎｇａｃｏｍｐｕｔｅｒｉｚｅｄｉｍａｇｅａｎａｌｙｓｉｓｓｙｓｔｅｍ．Ｐａｎ２：ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＣＮＴＦａｎｄＳＣＮＡ０１１Ｆ－ＶＥＰｉｎｒａｔｓｗｉｔｈｃｒｕｓｈｅｄｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅ１．ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔＯｐｔｉｃｎｅｒｖｅｃｒｕｓｈｍｏｄｅｌｉｎｒａｔｓ．Ｉｂｉｄｅｍ．Ｔｈｅｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｗａｓｃｒｕｓｈｅｄｆｏｒ１０ｓｅｃｏｎｄｓ．２．Ｒｅｔｒｏｂｕｌｂａｒｉｎｊｅｃｔｉｎｇｏｆｒｅａｇｅｎｔ．ＣＮＴＦ５０ｎｇ（１ＯｐＬ）ｏｒｓａｌｉｎｅ１０ｐＬｗｅｒｅｉｎｊｅｃｔｅｄｒｅｔｒｏｂｕｌｂａｄｙｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙａｆｔｅｒｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｓｃｒｕｓｈｅｄ．３．Ｆ—ＶＥＰｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ．Ａｔ１，２，３ａｎｄ４ｗｅｅｋｓａｆｔｅｒｃｒｕｓｈ，ｔｈｅＦ・ＶＥＰｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｗｉｔｈｖｉｓｕａｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｔｅｓｔｉｎｇｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ．ＴｈｅＰ１ｗａｖｅａｍｐｌｉｔｕｄｅａｎｄｌａｔｅｎｃｙｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ：１Ｎｏｒｍａｌｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｆｉｂｅｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅｗａｓｄａｍａｇｅｄａｆｔｅｒｃｒｕｓｈ．Ｄｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎａｎｄａｘｏｎｅｄｅｍａｏｃｃｕｒｒｅｄｉｎｆｉ隅ｔｗｅｅｋ，ａｎｄｍａｓｓｍａｔｒｉｘｆｏｒｍａｔｉｏｎｗａｓｎｏｔｅｄｓｉｎｃｅｔｈｅｓｅｃｏｎｄｗｅｅｋ．２．ＴｈｅａｖｅｒａｇｅｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｆｉｂｅｒｎｕｍｂｅｒｗａｓＯ．１０６５±０．００５６（ｎ＝５，ｆｉｂｅｄｐｍ２）．Ｉｎｃｏｎｔｒａｌｇｒｏｕｐｔｈｅｙ’ｒｅ０．０５３１±ｏ．００２１，０．０４２６±０．００７６，０．０３０３±０．００４１ａｎｄ０．０２８９±０．００１２（ｎ＝５，ｆｉｂｅｄｐｍ２）ａｔ１，２，３ａｎｄ４ｗｅｅｋａｆｔｅｒｃｒｕｓｈｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｙｗｅｒｅ４９．９％，４０．０％，２８．４ａｎｄ２７．１％ｏｆｔｈｅｎｏｒｍａｌｌｅｖｅｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＩｎＣＮＴＦｇｒｏｕｐ．ｔｈｅｎｅｒｖｅｆｉｂｅｒｎｕｍｂｅｒｓｗｅｒｅ０．０６３５±０．００３３（５９．６％）。