小鼠大脑中动脉阻塞模型制备的经验总结

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小鼠大脑中动脉阻塞模型制备的经验总结
1.工具准备
-外科手术器械:手术刀、镊子、缝合线等;
-外科手术设备:手术台、显微镜、荧光灯等;
-生理监测设备:体温探头、脑电图电极等;
-药物和试剂:异丙酚、利多卡因、生理盐水等;
- 基因转染试剂:例如小鼠绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)。

2.动物选择
-年龄:通常选用8-12周龄的小鼠,因为此时小鼠脑动脉较为完善;
-性别:建议使用雄性小鼠,因为雌雄激素可能对实验结果产生影响;
-耳标记:在手术前对小鼠进行耳标记以便识别。

3.手术准备
-空间准备:需要充足的操作空间,保证手术精准度;
-洁净实验台:保持手术台面干净,并用75%酒精进行消毒;
-手术准备:将手术刀等手术器具进行高温高压灭菌。

4.麻醉剂选择
-利多卡因+异丙酚:使小鼠在手术过程中保持镇静和无痛觉,确保手
术的顺利进行;
-麻醉深度监测:通过监测小鼠的眼球反射和背足反射来判断麻醉深度。

5.手术操作步骤
-手术部位定位:根据小鼠的头骨结构找到手术位置,通常是颅顶中央附近;
-手术部位准备:用75%酒精擦拭手术部位,保持清洁;
-切口:在小鼠的头部皮肤上进行横切口,清除切口处的流血;
-颅骨固定:用镊子将皮下脂肪组织清除,并用耳朵固定外耳道,使头部固定不动;
-颅顶暴露:用手术刀切开头顶部的软组织,暴露出颅骨;
-颅骨钻孔:用骨钻在颅骨上钻孔,暴露出大脑表面;
-大脑MCAO制备:通过闭塞中大脑动脉,在制备模型时选择合适的手术方式,如栓塞、结扎、局部损伤等;
-术后恢复:将小鼠放在恒温箱中恢复体温,严密监测小鼠的生命体征,并进行必要的治疗。

6.实验前后注意事项
-实验室卫生:保持实验室清洁,避免交叉感染;
-动物饲养:合理饲养小鼠,提供充足的食物和水,保证动物的生理状态良好;
-合理控制样本数量:根据实验需要和统计学原则,控制实验组和对照组的样本数量;
-术后观察:在手术后的一段时间内,密切观察小鼠的行为和健康状况,及时监测并处理可能出现的问题。

小鼠MCAO模型的制备过程需要熟练的实验技术和丰富的动物操作经验。

通过良好的手术操作和实验管理,可以获得高质量、可重复的实验结果,为中风研究提供有力的支持。

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