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《植保研究法》课程教学大纲
一、课程基本信息
课程代码：0300046
课程名称：植保研究法
英文名称：Plant Protection Research Method
课程类别：专业必修课
学时：54
学分：2.0
适用对象：植保专业
考核方式：为考试科目，为了全面客观地反映学生本课程的学习水平，在考核上既要重视理论知识的考核，还要加强实际能力的考核。

二者评分的比例可采用考试成绩占70%,平时成绩占30%来计算得分。

成绩评定：优秀、良好、中等、及格、不及格五个等级。

先修课程：植物病理学、农业微生物学、普通昆虫学、农业昆虫学、昆虫生态学等。

二、课程简介
本课程共54学时，讲授15学时，实验15学时，包括植物病害标本的制作; 菌体的染色方法;植物病原真菌和细菌的常规接种方法及抱子的测定；昆虫标本的采集和处理；观察昆虫的设备及其使用；昆虫形态特征的描述和绘图，昆虫的饲养；昆虫学重要文献及其检索等部分。

植保研究法是系统阐述植保研究方法的一门应用学科，以理论知识的学习为基础，并通过实验环节加以实践动手能力的培养。

它的研究目的在于调动学生学习植保研究课程的积极性，培养学生认真操作、仔细观察、实事求是的科研精神。

三、课程性质与教学目的
本大纲是根据植保专业（本科）教学计划的要求及培养目标而制定的。

本门课程是植保专业必修课程之一。

通过通过课程的讲授，要求学生较系统地学习和较全面地掌握植保研究的原理与常用方法，培养学生实事求是的科学态度和热爱专业的思想
四、教学内容及要求
第一章植物病原真菌玻片标本的制作（6学时）
（一）目的与要求
通过学习，掌握植物病原真菌玻片标本的制作方法。

（二）教学内容
1、临时制片法
主要供临时鉴定用，浮载剂通常用清水，用水不会改变抱子的体积，适用于抱子的测计，描绘及摄影等。

缺点是易干，不能做标本保存用。

此外也有用乳酚油，标本可保存几天或更久一些。

乳酚油和棉兰是真菌学上的标准浮载剂，有些分隔很难看清真菌抱子，染色后可以看得很清楚。

如果要较久保存标本，等水分蒸干后，用中性树脂胶封盖玻片边缘。

2、半永久制片法
（1）封藏剂配法及其使用：
1）沙尔氏液——甘油封藏法（也称双层玻片封盖法）
沙尔氏液配法：2%醋酸钾水溶液300毫升
甘油120毫升
95%酒精180毫升
混合以上即可。

2）乳酚油封藏法：
乳酸10毫升苯酚（加热融化）10毫升
甘油20毫升蒸馅水10毫升
混合以上配方即可。

配成的封藏剂应放在棕色瓶或暗处，如果需要染色，可在100ml乳酚油中加入1ml棉兰水溶液。

3）乙烯醋胶封藏法：
聚乙烯醇（Polyvinyl alcohol简称PVA）粉末2克
丙醇5毫升
95酒精2毫升
甘油5毫升
乳酸5毫升
蒸馅水20毫升
将以上的药剂混和后，在水溶锅上加热，搅拌至溶液变清为止。

4）聚乙烯毗咯烷酮（Polvinyipyrrolidone简称PVP）封藏法：
PVP 10克蒸馅水20毫升甘油0.3毫升
混合后配成封藏液。

C2）封固剂
1）加拿大胶（现称中性树胶）、光学树脂、可溶于二甲苯、二氯六环、叔丁醇和氯
仿。

通常用二甲苯作溶媒，浓度以玻棒一端形成小滴滴下，不生成丝状物为佳, 不用时放在暗处。

2）达马树胶：能溶于二甲苯、松节油、氯仿和醇溶解25克达马树胶于250 毫升二甲苯或氯仿中过滤，蒸发到100毫升即可。

3、永久制片法。

（1）将徒手切片移于染色皿中进行固定染色、脱水、透明，然后移于载玻片上, 直接用中性树胶封固。

（2）石蜡切片法是将材料浸渍和包埋在石蜡中，连同石蜡一起用轮转式切片机进行切片。

石蜡切片法制作病害玻片标本，由于切片较薄，又能连续切片，制成的玻片标本可以较清楚观察和研究病原菌如何侵入寄主，侵入后和寄主的相互关系以及寄主的反应及病原菌的结构等。

石蜡切片法须经固定、冲洗、脱水、透明、渗蜡、包埋、切片、去蜡、染色、封固等。

（三）实践环节与课后练习
动手配置封藏剂、封固剂及制作临时玻片和半永久玻片。

（四）教学方法与手段
以课堂讲授和实验并重的教学方法，利用图片、实物等在课堂上讲解演示, 实验课注重学生的动手制作。

第二章植物病原真菌蜡叶及瓶浸标本的制作（6学时）
（一）目的与要求
通过学习，掌握植物病原真菌蜡叶标本及瓶浸标本的制作方法。

（二）教学内容
1、植物病原真菌蜡叶标本的制作
茎和叶可压在吸水的标本纸中，用标本夹夹紧，日晒任其干燥。

标本干燥愈快，愈能保持原有的色泽。

夏季的温度和湿度高，标本容易发霉变色，标本纸的更换要勤。

通常前三四天每天换纸一二次，以后每二三天换一次，至完全干燥为止。

春秋两季则可减少换纸次数。

每次换纸时，将标本加以整理，经过初步干燥后，标本变软而容易铺展。

有些植物标本，由于水分过高或者是酶的活动，在压制过程中很容易变色。

烟草、甘薯、蚕豆、马铃薯的茎叶，都是比较难于保存的，在制作时要特别注意，必要时应采用其他保存方法。

为了加快干燥，有些标本可以夹在吸水纸中用熨斗烫，使它快速干燥而保持原来的色泽。

制备好以后，取牛皮纸折成纸套，纸套的大小根据标本的大小决定。

标本与标本有
关的资料如相片、切片和原始文献都能放在纸套中，然后贴在标本纸上。

属于同一属的或者属于同一寄主的标本，可以归在一个厚纸夹中。

这对于标本的寻找与整理都是比较方便的，但保藏所占的位置比较大，而且经常从标本夹中抽取标本，容易损坏。

2、植物病原真菌瓶浸标本的制作
腐烂的水果、肉质子囊菌和担子菌的子实体等，可以用浸渍法保存。

浸渍液种类很多，有纯属防腐性的，也有专为保持标本原来色泽的。

（1）防腐浸渍液
防腐浸渍液只有防腐作用，不能保持原色，成分如下：
福尔马林50ml
酒精（95%）300ml
水2000ml 配方可以简化，单用5%的福尔马林或70%的酒精溶液，后者适用于保存多肉子囊菌和鬼笔目的子实体。

（2）防腐漂白浸渍液
亚硫酸（饱和溶液）500ml
酒精（95%）500ml
水4000ml 甘蓝黑腐病的病叶在这种浸渍液中保存和漂白后，感染的叶脉仍呈黑褐色，病原细菌侵入寄主的途径看得更加清楚。

（3）保存绿色的浸渍液
1、醋酸铜浸渍液
将醋酸铜结晶逐渐加在50%的醋酸溶液中，到不再溶解为止，原液用水稀释三、四倍使用。

稀释度因标本颜色的深浅而不同，颜色浅的用较稀的溶液，深的就用较浓的溶液。

标本放在煮沸的稀释液中，继续加热，标本的绿色开始褪去，经3〜4min,待绿色恢复后，将标本取出，用清水漂净，保存于5%福尔马林溶液中，或压制成干燥标本。

保色的原理大致是铜离子与叶绿素中镁离子的置换作用，因此醋酸铜浸渍液重复使用后，其中铜离子的量逐渐减少，使用太久会丧失其保色能力。

重复使用后失效的浸渍液，补加适量的醋酸铜，可恢复其保色作用。

这种方法的保色能力好，但不适用于不能煮的标本。

2、硫酸铜亚硫酸浸渍液
标本在硫酸铜溶液中浸6〜24h,取出用清水漂洗数小时，然后保存在亚硫酸溶液
中。

这种方法适用于保存叶片、棉铃和葡萄等绿色标本，但应注意密封瓶口。

3、瓦查浸渍液
亚硫酸（饱和溶液）142ml 五水硫酸铜lg
酒精（95%）142ml 乙酰水杨酸1.5g
福尔马林3ml 水（加适量水使最后容量为）1000ml
丁子香油1ml
将标本在浸渍液中浸3〜5d,达到所需要的绿色，然后保存于以上浸渍液中，但不加
硫酸铜。

这种溶液适用于保存叶片和果实的绿色，也能保存梨和苹果等的黄色。

（4）保存黄色和桔红色标本的浸渍液
亚硫酸溶液适用于保存含叶黄素和胡萝卜素的果实如杏、梨、柿、黄苹果、柑桔或红辣椒等。

叶黄素和胡萝卜素是在细胞的色粒中，不溶解于水，可以用这种方法保存。

亚硫酸有漂白作用，浓度太高会使果皮褪色，浓度过低防腐力不够，所以浓度的选择要经过反复实践确定。

如果防腐能力不够，有时可加少量酒精；果实浸渍后如发生崩裂，可加少量甘油。

（5）保存红色的浸渍液
红色因大都是水溶性的花青素，所以难以保存。

瓦查的红色浸渍液比较好，能固定红色。

硝酸亚钻15g 福尔马林25ml
氯化锡10g 水2000ml
可用于保存草莓、辣椒、马铃薯以及其他组织的红色。

标本洗净后，在浸渍液中浸2
周，然后在以下浸渍液中保存。

福尔马林10ml 亚硫酸（饱和溶液）30〜50ml
酒精（95%）10m 水1000ml
（6）保存真菌色素的浸渍液
1、硫酸锌福尔马林浸渍液
硫酸锌25g 福尔马林10ml 水1000ml
2、醋酸汞冰醋酸浸渍液
醋酸汞10g
冰醋酸 5 ml
水1000ml
3、醋酸铅浸渍液
中性醋酸铅10g冰醋酸10ml
酒精（95%）1000ml 醋酸汞1g
（三）、实践环节与课后练习
通过实验室操作，掌握腊叶和瓶浸这两种基本的真菌标本制作方法。

（四）、教学方法与手段
以课堂讲授和实验并重的教学方法，利用图片、实物等在课堂上讲解演示，注重学生动手能力的培养，加强理论与实践相结合。

第三章植物病原细菌菌体的染色（6学时）
（一）目的与要求
通过学习病原细菌鞭毛的染色方法，掌握鞭毛染色法的相关步骤并能独立进行操作。

（二）教学内容
植物病原细菌的染色，除去革兰氏染色外，最重要的是鞭毛染色。

鞭毛的有无、数目和着生部位是重要的分类和鉴定形状。

一种植物病原细菌，经过革兰氏染色和鞭毛染色，大致已经可以确定它的属。

细菌的鞭毛很细，一般光学显微镜看不清，鞭毛上沉积了染剂后才能看到，这是所有鞭毛染色法的依据。

由于染剂也可以在载玻片上沉积，所以要用非常清洁的载玻片。

染剂处理的时间很重要，处理时间太短，鞭毛上没有足够的沉积物就看不清楚；处理时间太长，载玻片上的沉积物太多则影响检查。

（1）载玻片的准备
鞭毛染色要用新的或没有损伤的载玻片，先在浓铭酸洗涤液中浸24h,清水洗过后用
蒸馅水洗，再用95%的酒精中浸过后，将玻片通过火焰几次，到载玻片边缘的火焰呈桔
黄色为止。

通过火焰的载玻片，放在多层吸水纸上任其冷却；为了减少破损，最好是放
在加热的金属板上，使它渐渐冷却。

洗净的载玻片也可以浸在盛有95%酒精的扁平染色
皿中，使用前再通过火焰烧去酒精，检验是否洁净的标准是在载玻片上加1滴蒸馅水，
如果水滴很快而且均匀地扩散开来，表示载玻片是清洁适用的。

（2）细菌悬浮液的配制
配制细菌悬浮液时要注意菌龄，最好是用在斜面上培养18〜24h的，但生长较慢
的细菌（如黄单胞杆菌属），可用适当延长到36〜48h的。

染色前，菌种每隔一二天移
植一次，必要时可连续进行几次，以增强细菌的活性。

配制的时候，在培养斜面上加灭
菌水3〜5ml,静置一定时间，细菌就散开而形成悬浮液。

放置的时间一般是5〜30min,产
生胶质的细菌则需要30min或更久一些。

放置时间太长, 细菌的鞭毛可能会脱落。

染色前，可先用悬滴法观察细菌是否运动。

有的植物病原细菌产生较多的胶质，可能影响其鞭毛的染色。

如采用无糖培养基培养，可以减少胶质而得到较好的效果。

（3）涂片
涂片是用微吸管或移植环取悬浮液1滴或2~3滴加在洁净的载玻片上，立即将玻片直立，使菌液流下，玻片上即遗留一条或两三条细菌悬浮液膜。

最好是从悬浮液中活动的细菌较多的上层取样。

载玻片保持直立使菌液干燥，鞭毛染色的玻片都不通过火焰固定直接染色。

（4）染色
1、赖夫生染色法染剂有两种配方：
配方1单宁酸10g 氯化钠5g 酸性品红4g
取以上混合物1.9g,溶解在33ml的95%酒精中，加蒸馅水使最后容量为100ml。

酸度调节到pH5.0.
配方2 单宁酸3%的水溶液加0.2%苯酚
氯化钠 1.5%的水溶液
酸性品红1.2%的95%酒精（pH5.0.）溶液
将相等容量的三种溶液，在使用前一天混合。

这两种配方的染剂在冰箱内都可以贮放几个星期，特别是配方2可以贮放更久。

染色步骤如下：
%1在洁净的载玻片上，用尖的蜡笔划4个1.3cmx2.0cm的长方形小格；
%1培养斜面上加蒸馅水，在室温下细菌扩散而形成浑浊的悬浮液；
%1将载玻片斜放，用移植环在每小格的顶端加1滴悬浮液，悬浮液就向下流。

流下的悬浮液，立即用纸吸去，将载玻片在空气中干燥；
氯化铝氯化锌
溶液2
酸性品红
酒精（95%）0.3g
10ml
苯酚（结晶）
蒸馅水
5g
95m
l
%1第一个小格中加5滴染剂，经过5s、10s、15s后，分别在第二、三、四三个小格中加滴染剂；
%1仔细观察染剂中很细沉淀物的产生，当第一和第二小格已经产生沉淀时，立即用水将载玻片上的染剂洗去，否则载玻片上沉积物的量会增多；
%1载玻片任其在室温下干燥（不用吸水纸吸），干燥后直接用油镜检视。

染色好的标本，细菌和鞭毛都染成红色，背景无色，载玻片上一般都有少量染剂沉积物，但不影响观察。

染色时间的长短很重要，这是由载玻片上形成沉淀物的时间决定的。

观察沉淀产生的最好办法，是将载玻片放在黑纸撒谎那个，用光束照射染剂。

当开始产生沉淀时，染剂的边缘先出现铁锈色的云雾状物；当整个染剂都出现雾状物时，立即用水将载玻片上的染液洗去。

载玻片上分为4小格, 以便掌握染色的时间。

有了经验以后，就不一定要这样做。

当然，载玻片上用蜡笔划一方格，加染剂时还可以防止它的外流。

2、西萨-基尔染色法
有些不易染色的细菌鞭毛，如产生胶质较多的植物病原细菌以及鞭毛很细的容易脱落的细菌，常用这种方法染色。

媒染剂
单宁酸
酸性品红
酒精（60%） 40ml
研钵中盛酒精10ml,加入以上各种成分，研细后加入多余的酒精。

使用时用水稀释1-4倍，染色时过滤，滤液直接滴在涂片上。

染液：苯酚品红
溶液1
溶液1和2分别配好后混合。

染色步骤如下：
%1用微吸管在斜放的载玻片上端加2-3滴细菌悬浮液，使其流到载玻片的下端，多余的菌液用纸吸去，载玻片任其在空气中干燥；
%1染媒剂过滤后滴在载玻片上，处理时间约为5min,染媒剂的质量和处理时间的长短是成功的关键，染媒剂最好是新鲜配制的；
%1染媒剂用水洗去；
%1苯酚品红染剂处理5min,不加温；
%1水洗，在空气中干燥后镜检。

3、柯达卡溶液染色法
载玻片不需洗涤的非常干净，但要用干净的纱布擦净，同时，染色过程中也不需要水洗。

方法是先配成两种溶液。

一是染媒剂：将10ml 5%的石炭酸、2g单宁酸与10ml硫酸铝钾的饱和水溶液混合；二是染剂：即结晶紫的乙醇饱和溶液（约每100ml乙醇，12g结晶紫）。

染色时将10份染媒剂与1份染剂混合使用。

在洁净的载玻片上加水1滴，用移植环从培养的细菌菌落边缘挑取少许细菌加在水中，然后加盖玻片，使载玻片和盖玻片之间有一薄层菌液，盖玻片的三边用蜡封好，将两滴以上染媒剂和染剂的混合溶液加在盖玻片第四边的边缘，稍微碰到边缘即可。

由于毛细的作用，混合染液渗入细菌即被染色。

由于染媒剂和染剂的作用一次完成，Imin后即可镜检，可用照明的相差显微镜检查。

培养细菌用营养适应的培养基，最好不加碳水化合物。

菌龄一般以18-24h为宜，培养温度也很重要。

（三）实践环节与课后练习
通过实验室操作，掌握细菌鞭毛的染色方法。

（四）教学方法与手段
以课堂讲授和实验并重的教学方法，利用图片、实物等在课堂上讲解演示，加强学生的动手能力，注重理论与实践相结合。

第四章植物病原物的接种（6学时）
接种试验是植物病害研究最重要的工作。

（一）目的与要求
通过把分离到的病原菌接种到植物上，诱发致病，加深对病原物传染，侵染等概念的理解，同时掌握几种常用的接种方法，为进行致病性测定等方面的研究打下基础。

（二）教学内容
第一节植物病原真菌的接种方法
植物病害的人工接种方法，是根据病害的传染方式和侵入途径设计的。

植物病害种类很多，其传染方式和侵入途径不完全相同，其接种方式也不同。

因此，就有不同的接种方法。

现将不同传染类型的真菌病害的一般接种方法简介如下：
1、种子传染病害的接种：
（1）拌种法：用病菌的抱子拌种是黑粉菌常用的接种方法，如小麦腥黑穗病和秆黑粉病即可用厚垣抱子拌种。

方法是每100g种子用0.5g厚垣抱子接种后播种。

（2）浸种法：抱子悬浮液浸种也是常用的方法。

浸种时抽气减压，可以使抱子渗入种子内部，从而提高接种效率。

在人工培养基上不易产生抱子的病原菌，可以用拌碎的菌丝悬浮液浸种。

如棉花炭疽病可以用人工培养的菌种制成抱子悬浮液浸泡种子。

（3）花期接种法：适用于花期侵入的病原菌，如小麦赤霉病等。

将赤霉病的分生抱子或子囊抱子悬浮液，用注射器注入花器内，又如小麦和大麦散黑穗病，将花外移或内秽用针刺后，然后将干抱子放入橡皮球内，喷入花里。

2、土壤传染病害的接种：
（1）土壤接种法：将病菌在接种前或播种时拌在土壤中。

如水稻纹枯病菌，可将菌核拌入灭菌的土中，然后播种。

在所有病害接种试验中，与土壤结合的问题最为复杂。

主要原因是病菌易受土壤物理、化学及生物学性质的影响。

（2）蘸根接种法：将幼苗的根部稍加损伤，然后将受伤的根部蘸上抱子或菌丝悬浮液。

这种方法使病菌能与根部直接接触，受土壤微生物的影响较小。

同时，根部有损伤，病菌也易侵入，效果比土壤接种法好，常用于枯萎病等的接种。

3、气流和雨水传播病害的接种：
（1）喷雾法：将抱子（或菌丝）悬浮液喷洒在寄主表面，病菌可以从气孔、伤口或表皮直接侵入。

叶背气孔数目一般比叶正面的多，对于从气孔侵入的病菌，则应用细土或金刚砂磨擦叶面，使叶表稍损伤；叶面有蜡质的，接种时可以用湿布将蜡质层擦去。

如稻瘟病，具体方法：
a取稻瘟病菌的纯培养，用无菌水配成抱子悬浮液，使悬浮液中的抱子在显微镜的低倍视野中有10〜20个左右，然后将此液装入小喷雾器中。

b取培育的水稻苗两盆（无病菌），一株喷泡子悬浮液，注意叶片两面都要喷湿。

另一株洒清水，作为对照。

c将上述水稻苗放在同样的恒温恒湿箱中培养,24小时后取出，置于温室内，
进行正常管理。

逐日观察症状记载发病情况。

（2）喷粉法：是将一定量的干抱子与滑石粉混匀后，放在小喷粉器中喷撒在植物表面的接种方法。

滑石粉的量一般是抱子量的10倍左右。

如白粉菌和锈菌等的接种。

(3)涂抹法：如接种锈菌，由于寄主植物表面和锈菌抱子都不易沾湿，不宜用喷雾法接种。

涂抹法是先用手指沾水磨擦叶片，去掉蜡质层，使表面有一薄层水膜，然后将抱
子涂抹在上面的接种法。

喷雾、喷粉和涂抹接种后的植物，必须保湿约24小时左右，使病菌抱子能萌发侵入。

(4)注射法：是将病菌抱子悬浮液用注射器注入寄主生长点或幼嫩部分的接种法。

用这样方法接种麦类锈菌及玉米瘤黑粉菌的效果很好。

(5)针刺法：是指用灭菌的针刺伤寄主组织，然后将病菌接种在伤口内或用灭菌的针蘸菌刺伤寄主组织的接种法。

此法用于伤口侵入的病菌，如块茎、果实、块根等的腐烂
病菌。

第二节植物病原细菌的接种方法
各种植物细菌病害的接种方法不同，同一细菌病害也可以用不同的方法进行人工接种，一般应选择接种效率高和发病重的方法。

1.喷雾接种法：
对于从气孔和各种孔口侵入造成叶斑类型的细菌可采用此法，先配制成所需菌量的细菌悬浮液。

(1)普通喷雾法：采用玻璃雾器进行，菌量约高于ixl06ml
(2)高压喷雾法：采用雾化器进行，压力在1.5kg/m2,菌量一般不超过5xio6mL
2.刺伤接种法：
主要用于伤口侵入，腐烂类型病害，效果好，但也适用于萎^等类型的细菌病害。

(1)单针刺接种法：用普通的解剖针，先经火焰消毒后蘸取菌液刺伤。

(2)毛笔针接种：将针插在毛笔中间，接种时毛笔先蘸取菌液，可连续接种，在针
刺同时细菌则从伤口进入叶片组织内。

(3)多针刺接法：将许多针固定在橡皮或软木塞上，蘸取细菌悬浮液接种。

3.切伤接种法：
(1)伤根接种：
对致维管束病害，苗期病害的病原细菌可采用此法，先用剪刀切断根部，后放在
细菌悬浮液中浸泡，然后再进行种植，待后观察。

（2）剪叶接种：
是近年来白叶枯病原菌接种常用方法，将经过灭菌的解剖剪刀在细菌悬浮
液中蘸取菌液，即用来剪去接种叶片，细菌随即从伤口侵入叶片组织内，剪去的叶片长度约为全叶的1/10左右，剪刀每蘸取一次菌液可剪1~3张叶片。

4,摩擦接种法：
对叶斑等类型病害可采用此法造成微小伤口，便于细菌的侵入。

在叶片上
撒上少量金刚砂（600网眼），然后用纱布蘸取细菌悬浮液（菌量约为io,/ml）
在表面轻轻摩接种。

（三）、实践环节与课后练习
通过实践，掌握真菌和细菌常规的接种方法。

（四）、教学方法与手段
以课堂讲授和实验并重的教学方法，利用图片、实物等在课堂上讲解演示，注重实践过程中存在的问题，加强学生理论与实践相结合的能力。

第五章病原真菌抱子的大小及数目的测定和描绘（6学时）
（一）目的与要求
通过学习显微镜计测的方法，掌握病原真菌抱子大小的测定，并掌握常见的真菌抱子的描绘方法；通过学习血球计数法，掌握病原真菌抱子数目的测定。

（二）教学内容
第一节显微镜计测和显微描绘
显微镜检查时，往往要计测抱子、菌丝体、子实体以及其他观察到的物体等的大小；有时还要在显微镜下描绘所观察的对象，如病原真菌的形态和寄主的改变等。

通过计测和描绘，将观察的结果用数字或图来表示，有利于比较和鉴别。

（1）显微计测的方法
显微计测的方法很多：
1、接目测微尺计测法
接目测微尺是有刻度的圆玻璃，上边每一格所代表的距离因显微镜放大倍数和镜筒的长短而不同，所以要用镜台测微尺准定后才能用来计测。

镜台测微尺是一玻片，中间有一圆圈，圈中央刻有一尺，长度是1mm,分为10大格或100 小格，故每小格为0.01mm或lOptm,准定接目测微尺的步骤如下：
a将显微镜筒放在160mm处，或调节到固定的长度
b将接目测微尺放在接目镜内，由镜头向下看，上面的格纹看得很清楚
c将镜台测微尺放在镜台上
d先用低倍镜观察，当镜台测微尺的任何两条线与接目测微尺的任何两条线吻。