GPC-HPLC大米中吡虫啉残留量测定-仪器谱

GPC-HPLC大米中吡虫啉残留量测定
莱伯泰科
1、前言
吡虫啉是烟碱类超高效杀虫剂，具有广谱、高效、低毒、低残留，害虫不易产生抗性，对人、畜、植物和天敌安全等特点，并有触杀、胃毒和内吸等多重作用。

害虫接触药剂后，中枢神经正常传导受阻，使其麻痹死亡。

产品速效性好，残留期长达25天左右。

药效和温度呈正相关，温度高，杀虫效果好。

主要用于防治刺吸式口器害虫。

本文建立了GPC-HPLC测定大米中吡虫啉残留量的检测方法。

试样中残留的吡虫啉用乙腈提取后，用配有紫外检测器的液相色谱检测，回收率稳定。

2、实验部分
2.1仪器与试剂
仪器：AutoClean全自动凝胶净化系统（北京莱伯泰科仪器有限公司，美国）；凝胶净化柱Bio-Beads S-X3，200~400目（北京莱伯泰科仪器有限公司，美国）；LC600二元高压梯度高效液相色谱（北京莱伯泰科仪器有限公司，北京）；Multivap-8平行浓缩仪（北京莱伯泰科仪器有限公司，北京）；ET氮吹仪（北京莱伯泰科仪器有限公司，北京）
试剂：水（屈臣氏的纯净水）；乙腈（色谱纯）；乙酸乙酯（分析纯）；环己烷（分析纯）；吡虫啉标准品，纯度98.5%。

2.2样品处理
2.2.1样品制备：取大米样品约100g用粉碎机粉碎过20目筛，装入洁净的容器。

2.2.2提取：称取粉碎后的大米粉10g（精确到0.01g），放入250mL锥形瓶中，加入15mL 水，静置20min,加入50ml乙腈，高速匀浆2min,用滤纸过滤，收集于装有5g氯化钠100ml 具塞玻璃瓶中，盖上塞子，剧烈振荡2min，静置10min使乙腈和水相分层。

2.2.3净化：移取20ml乙腈提取液收集于200ml平底浓缩杯中，55℃水浴浓缩至近干，用乙酸乙酯+环己烷（1+1）10ml溶解，取2ml上凝胶净化仪过GPC净化，用乙酸乙酯+环己烷（1+1）淋洗，淋洗流速为5.0mL/min，收集相应时段的淋洗液于60ml玻璃瓶中，用ET 氮吹，温度设置55℃浓缩至干，吸取2ml液相色谱流动相充分溶解，过0.45μm滤膜，供液相色谱分析。

2.3凝胶净化系统净化
采用AutoClean 全自动凝胶净化系统净化，紫外检测器270nm 检测，收集时段为14min~18min 。

图1是吡虫啉标样过GPC 谱图和大米试样加吡虫啉标过GPC 谱图对照。

图1吡虫啉的标样和试样加标过GPC 谱图
2.2.4
4仪器条件2.4.1液相色谱条件
色谱柱：Labtech C18（250mm ×4.6mm ，5μm ）流速：1.0mL/min 紫外检测波长：270nm 进样量：20μL 柱温：20℃流动相：乙腈/水
体积比4：6
3结果和讨论
3.1吡虫啉的HPLC 色谱图
将0.4μg/mL 的吡虫啉进HPLC 得到色谱图见图2。

20130806-bcl-hs--1(00007,16;46;35)20130802-b-001(00001,10;38;19)
-20
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
mV 2468101214161820m in
14min
18min
试样加标吡虫啉0.4mg/kg
吡虫啉0.4mg/kg
bc l-b-0.4-2(00001,20130808 13;24;21)
-0.80
0.8
1.6
2.4
3.2
4
4.8
5.6
6.4
7.2
m V
0.8 1.6 2.4 3.24 4.8 5.6 6.47.28m 图2吡虫啉的标准品色谱图
3.2重复性
取吡虫啉标样0.4μg/mL 进样，5次重复性标准偏差为1.0%。

结果见表1和图3。

表1吡虫啉标准品的重复性
bc l-b-0.4-1(00005,20130808 16;20;01)bc l-b-0.4-2(00001,20130808 13;24;21)
bc l-b-0.4-3(00002,20130808 15;48;40)bc l-b-0.4-4(00003,20130808 15;58;50)bc l-b-0.4-5(00004,20130808 16;08;03)
-0.80
0.8
1.6
2.4
3.2
4
4.8
5.6
6.4
7.2
m V
0.8 1.6 2.4 3.24 4.8 5.6 6.47.28m in
图3吡虫啉的重叠图
3.3标样、大米样品的空白样和加标样的色谱图
吡虫啉标样（0.4μg/mL ）
第一次第二次第三次第四次第五次RSD%
峰面积
33263533135321593291733250 1.0
吡虫啉标准样品0.4μg/mL
将大米样品和加标样经过提取、净化，加标量为0.02m g/kg ，后进HPLC 得到标样色谱图4、空白色谱图5、空白加标样图6和综合叠加图7。

b c -b -0.02-1(00001,201308081324;21)
-0.10
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
m V
0.8 1.6 2.4 3.24 4.8 5.6 6.47.28m in
图4标样色谱图(0.02mg/kg)
b c l --G P C -1+1(000102013080817;08;22)
-0.1
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
m V
0.8 1.6 2.4 3.24 4.8 5.6 6.47.28m in
图5大米样品空白色谱图
bc l-0.02-G P C-1+1(00010,20130808 17;08;22)
-0.10
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
m V
0.8 1.6 2.4 3.24 4.8 5.6 6.47.28m in
图6大米样品空白加标的色谱图
吡虫啉标样(0.02mg/kg)
大米样品空白
大米样品空白加标(0.04mg/kg)
bc l-b-0.02-1(00001,20130808 13;24;21)
bc l- 0.02- G P C-1+1(00010,20130808 17;08;22)
bc l- - G P C-1+1(00010,20130808 17;08;22)
-0.10
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
m V
0.8 1.6 2.4 3.24 4.8 5.6 6.47.28m in
图7综合叠加图
备注：紫色谱图为大米提取液空白；黑色谱图为标样；蓝色谱图为大米提取液加标。

3.4大米样品过GPC 净化的回收率及RSD
加标样品（加标浓度0.4mg /kg ）经提取、SPE 净化处理，并用HPLC 分析，计算加标回收率及相对标准偏差，大米试样5次加标吡虫啉平均回收率均在108%，RSD 小于10%，详见5次加标回收率谱图图8和表2。

bc l-j b-0.4-G P C-4(00007,20130808 14;38;59)bc l-j b-0.4-G P C-5(00008,20130808 14;47;47)bc l-j b-0.4-G P C-1(00008,20130808 14;47;47)bc l-j b-0.4-G P C-2(00005,20130808 14;16;04)bc l-j b-0.4-G P C-3(00006,20130808 14;23;52)
-0.80
0.8
1.6
2.4
3.2
4
4.8
5.6
6.4
7.2
m V
0.8 1.6 2.4 3.24 4.8 5.6 6.47.28m in
图8大米试样5次加标回收率谱图叠加图
标样空白
空白加标
表2大米中加标过GPC 吡虫啉的回收率及RSD(n =5)
4、结论
本文采用AutoClean 全自动凝胶净化系统（北京莱伯泰科仪器有限公司，美国）；凝胶净化柱Bio-Beads S-X3,200~400目（北京莱伯泰科仪器有限公司，美国）；LC600二元高压梯度高效液相色谱（北京莱伯泰科仪器有限公司，北京）；Multivap-8平行浓缩仪（北京莱伯泰科仪器有限公司，北京）；ET 氮吹仪（北京莱伯泰科仪器有限公司，北京；测定大米试样中吡虫啉加标回收率为108%，五组重复性RSD 为0.6%。

实验结果表明，经上述仪器及设备，吡虫啉重现性及回收率好，本方法准确可靠，操作方便。

撰稿人：张珑
峰面积A
回收率平均回收率RSD
标准样品32819100%回收样-135778109%回收样-235840109%回收样-3回收样-43549735189108%107%108%0.6%
回收样-5
35600
108%
附注：
Multivap-8
平行浓缩仪
AutoClean 全自动凝胶净化系统。