苯巴比妥钠的健康危险度评价

苯巴比妥钠的健康危险度评价
一、急性毒性试验设计
5-乙基－5 －苯基-2,4,6(1H,3H,5H)- 嘧啶三酮一钠盐按干燥品计算，C12H11N2NaO3不得少于98.5%。

为白色结晶性颗粒或粉末；无臭，味苦；有引湿性。

在水中极易溶解，在乙醇中溶解，在氯仿或乙醚中几乎不溶。

1、实验动物
正式试验动物随机区组分组：各25只，雌雄各5组，每组各5只小鼠，组内体重差小于10%，组间均数小于5%；采用分层抽样：小鼠按0.5—1g为组段分组观察时，雌雄分开喂养。

2、染毒途径
试验动物小鼠接触受试物方式为经口灌胃。

每只小鼠按0.25ml/10g的剂量进行灌胃
3、染毒期限
实验前全体动物隔夜禁食16h，不限制饮水。

密切注意观察2h，看是否有急性毒性发作，记录动物中毒症状及死亡情况，解剖观察死亡小鼠的内脏情况。

2h后常规饮食，连续观察7 天，每日定时观察记录。

4、剂量分组
探讨外来化学物急性毒性应首先测定半数致死量，先做预试验。

通过查阅文
献，找出苯巴比妥钠的近似毒性资料，以此预期毒性中值作为苯巴比妥钠的中间剂量组，在上下各1~2个剂量组做预实验。

初起组距用计量间的4倍差，即以㏒4来划分各组剂量。

以毒性化学物急性经口LD50体重的中间剂量，组距取对数值（㏒2=0.3）,上下各推两个剂量组
5、观察指标
试验期间和试验结束，全面观察动物死亡情况，动物体重，中毒反应症状，病理性检查
6、结果分析
化学毒物经口染毒的方法是卫生毒理学中重要的基本技术之一，经口急性毒性试验是研究化学毒物的基本实验，在短期内可以获得许多有用的信息。

二、致突变作用及评价
1、实验动物
设阴性和阳性对照组，7-12周的小鼠，体重在18-20g之间，随机分为四组，每组10只，雌雄各半，
2、染毒途径
试验动物小鼠接触受试物方式为经口灌胃。

3、染毒期限
每天染毒一次，第五天处死，
4、剂量分组
首先测定半数致死量，先做预试验，后取苯巴比妥钠的1/5,1/10,1/20 LD50剂量，
即50mg/kg，25 mg/kg,5 mg/kg
5、观察指标
取骨髓，涂片，固定，染色。

每鼠计数1000个PCE的微核出现率。

6、结果分析
当经适当的统计学分析，处理组微核率显著高于阴性对照组，并呈现剂量－反应关系时，可认为受试物对该试验动物的骨髓细胞有致染色体损伤的作用。

三、致畸作用及评价
1、实验动物
选择一批发育良好的初成年雄鼠和雌鼠，按比例同笼交配。

当雌鼠阴道口有阴栓或在阴道粘液中检出精子时，便可确定雌鼠受孕的确切日期。

然后将受孕雌鼠，以每组10只分成各试验组，同时另设对照组
2、染毒途径
试验动物小鼠接触受试物方式为经口灌胃。

3、染毒期限
于胚胎发育的器官形成期（大鼠为受孕第6-15日，小鼠为受孕第5-14日）给以受试物。

于自然分娩前1-2日，剖腹取出子宫内胎仔
4、剂量分组
以亚急性试验中的最大无作用剂量为高剂量，以高剂量的1/30为低剂量。

5、观察指标
主要检查外观畸形、内脏畸形和骨骼畸形三个方面：①外观畸形。

将胎仔从子宫取出，逐个称重、测定身长和尾长，评价其发育情况。

然后仔细检查是否出现畸形，包括头面部和脑、眼、鼻、耳、颌、唇的畸形，四肢和趾的畸形，躯干和尾部的畸形等（见图）。

②内脏畸形。

将检查过外观的同一窝胎鼠的2/3置于鲍音(Bouin)液中，使组织固定，以检查内脏畸形;其余1/3经茜素红染色后检查骨骼畸形。

将在鲍音液中固定的胎仔标本，用刀片进行各种切面检查，并与对照组进行比较，分别检查腭和舌部畸形，眼、鼻和脑部畸形，胸腹部内脏器官的位置、大小和形状异常等。

③骨骼畸形。

把经过乙醇固定的胎仔，除去内脏（或同时剥去皮肤），转浸入1%的氢氧化钾溶液中,使肌肉和软组织完全透明，骨骼清晰可见。

再用茜素红溶液将骨骼染成红玫瑰色。

然后用放大镜或解剖显微镜依次观察头颅骨、椎骨、肋骨、尾骨和肢骨，记录有无缺损、增减、溶合、骨化迟缓等异常。

6、结果分析
致畸作用具有较显著的种属差异，对动物有致畸作用的物质，不一定对人类有致畸作用。

但致畸作用毕竟是化学物质毒性的一种表现，因此，凡对动物有致畸作用的物质，一般应尽量使其不与人特别是孕妇接触。

四、致癌作用及评价
1、实验动物
选用刚离乳的大鼠，每组50只的大鼠雌雄各半
2、染毒途径
试验动物小鼠接触受试物方式为经口灌胃，掺入饲料中的受试物最高浓度不超过5% 3、染毒期限
大鼠持续观察两年
4、剂量分组
找出苯巴比妥钠的近似致癌资料，以此预期致癌中值作为铅的中间剂量组，在上下各1~2
个剂量组做预实验。

初起组距用计量间的1/2倍差，即以(1/2)的n次方倍来划分各组剂量。

铅的近似已知致癌化学物经口：200ug/g体重，以此苯巴比妥钠的中间剂量，组距取(1/2)的n次方倍上下各推两个剂量组，再次求出正式试验的剂量组距(ί)值;
5、观察指标
（1）一般观察：每天观察试验动物的一般状况和毒性反应，每周称一次体重并记录。

（2）肿瘤发生情况：记录每一个肉眼可见及课触及的肿瘤出现的时间，部位，大小，外形，发展状况和死亡时间。

（3）病理检查：试验过程及结束死亡的动物均应进行系统尸检和组织病理学检查，对于各出现肿瘤的器官应注意观察癌前病变。

6、结果分析
分析指标有肿瘤发生率、肿瘤潜伏期和肿瘤多发性
肿瘤发生率（﹪）=（试验结束后，患瘤动物总数在有效动物总数中所占的百分率）*100%。