人白细胞介素-2受体(IL-2R)酶联免疫分析
白细胞介素2的调节作用及其应用
白细胞介素・2的调节及应用摘要:白细胞介素-2是淋巴淋巳细胞受抗原刺激后所分泌的具有免疫调节作用的淋已因子。
白细胞介素-2除能在体外维持T淋巴细胞长期増殖与分化外,还具有増强自然杀伤细胞的杀伤活性及增进B细胞分化与增喳的能力,和诱导淋巴因于激活的杀伤细(LAK)产生等重要生物学作用。
研究发觉,白细胞介素-2在抗肿瘤、抗毒素、免疫调节及感染性疾病的医泊等方面具有重要作用。
关键词:细胞因于;白细胞介素-2;免疫;前言:1976年,Morgan D A等在鼠脾淋巴细胞培育上清液中发觉了鼠白细胞介素-2,因其可増进和维持T淋巴细胞的生长,故被称为刑巴细胞生长因于(TCGF), 1979年在日内瓦免疫学会上被命名为白细胞介素-2。
1979年,Wastson第一次取得纯化的小鼠白细胞介素-2, 1983年Tail iguchi 等第一次成功地克隆了人白细胞介素-2cDNA o自此以后,大鼠、猪、牛尊动物的白细胞介素-2墓因接踵被克隆,迄今为止至少巳克隆了30多种动物的白细胞介素-2 基因。
白细胞介素-2是免疫细胞产生的细胞因于。
此刻就白细胞介素-2的组织结构尺其研究进展迸行了简单总结。
1白细胞介素・2的蛋白结构和理化性质白细胞介素-2是一种具有普遍生物活性的细胞因于,由位于第4号染色体上的单个墓因编码的一种单链多肽分于,主要由激活的CD4+T淋已细胞分泌,分于质長为ku o静息的T淋已细胞既不能台成也不能分泌白细胞介素-2,但在适当的抗原和共刺激因于联台刺激或暴露多克隆配基情形下可诱导这两种功能。
在体内白细胞介素主要由活化的T型辅助淋E(Thi)细胞分泌,等电点(P】)为〜,有3个半胱氨酸残基(Cys),别离位于第58,105,125位。
因此,翻译后修饰还包括Thr 位点的糖基化和在第58位与第105位残墓形成二硫键。
二硫键对其活性的维持具有重要的作用,而Thr糖基化对于其活性没有彫响,因此重组的白细胞介素-2通常将125位游商的半胱氨酸残基突变成丝氨酸或丙氨酸,如此就有利于重组蛋白产生正确的二蔬键。
重组人白细胞介素—2制备工艺的研究
重组人白细胞介素—2制备工艺的研究白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)是一种由T细胞分泌的免疫调节因子,对细胞免疫和体液免疫调控起着重要作用。
由于其广泛的生物活性和临床应用价值,人白细胞介素-2的制备工艺研究一直备受关注。
人白细胞介素-2可以通过多种方法进行制备,其中最常用的方法是采用重组DNA技术。
该方法首先需要在合适的表达载体中克隆人白细胞介素-2的基因,将其转染至适当的宿主细胞中,通过大规模培养和纯化过程得到目标产物。
重组人白细胞介素-2的制备工艺主要包括以下几个步骤:1.基因克隆:将人白细胞介素-2基因放入适合的表达载体中。
载体通常是质粒,具有能够稳定细胞内基因组的特性。
该载体还包含了启动子、终止子等序列,以调控基因的表达。
2.转染:将已构建好的表达载体转染至宿主细胞中。
常用的宿主细胞包括大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞等。
3.培养:经过转染的宿主细胞在适当的培养条件下进行大规模培养。
培养基中会加入适当的抗生素,以筛选出含有重组基因的细胞群。
4.表达:通过培养过程中的细胞生长和代谢活性,使重组基因在细胞内被转录和翻译成蛋白质。
这样,大量的重组人白细胞介素-2就会被产生出来。
5.纯化:将培养基中的细胞分离出来,通过离心、滤过等操作得到细胞上清液。
然后利用离子交换、凝胶过滤、亲和层析等方法进行层析纯化,去除杂质,得到纯净的重组人白细胞介素-2。
重组人白细胞介素-2的制备工艺需要考虑多个因素。
首先,合适的宿主细胞选择对产量和纯度影响很大。
常用的宿主细胞是大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞,每种细胞系统有其优势和限制。
其次,可以通过优化培养条件来提高人白细胞介素-2的表达水平,如调节培养基成分、温度和pH等。
此外,纯化过程的选择和优化也是影响产品质量的重要因素。
目前,人白细胞介素-2的制备工艺已经相对成熟,并且在临床上得到了广泛的应用。
重组人白细胞介素-2的制备工艺研究不断进步,将为更好地利用白细胞介素-2的免疫调节作用,提供更好的疾病治疗手段和提高临床疗效。
IL-2白细胞介素2医学免疫学
用于自身免疫性疾病的治疗1
• IL-2对免疫反应的影响:它作为一种信号介 质把信号从激活的CIM+T细胞传递给调节性T 细胞,并控制免疫反应,限制潜在的破坏性免 疫副作用。随后,IL-2促进其他抗原异性 CD4+T细胞增殖发育,并发挥其免疫功能 • lL-2与T细胞凋亡:成熟的的α β T淋巴 细胞经抗原激活后可能发生细胞凋亡。细胞凋 亡可以一步导致胸腺细胞和成熟T淋巴细胞克 隆的缺失
展望
人们对IL-2的研究已经有30多年的历史了, 但IL-2仍然是目前研究最多的细胞因子之一,它 在免疫系统中的作用还有待于继续研究。IL-2能 有效增强免疫能力,提高机体免疫水平,广泛的 生物学作用使其在临床上具有较大的应用价值。 随着不断的研究开发,IL-2的应用必定还会得到 进一步发展。
产生
• CD4阳性或CD8阳性细胞T细胞: 有丝分裂原刺激亚群可产 生IL-2,同种异体抗原主要刺激CD4阳性T细胞产生IL-2。 PBMC、脾脏、淋巴结和扁桃体中的T细胞刺激产生IL-2 • T细胞肿瘤细胞系或白血病细胞系:人和动物某些T细胞白 血病细胞系或肿瘤细胞在有丝分裂原、钙离子载体(如 A23187)或PMA刺激下可产生高水平的IL-2. • T淋巴细胞杂交瘤:T淋巴细胞杂交瘤123,FS6-1 4.13,HT-24A等在ConA刺激下产生IL-2 • 应用基因工程技术制备:1983年Taniguchi等 从ConA刺激的jurkat白血病T细胞中克隆成功I L-2cDNA,并在大肠杆菌中得到高水平的表达。
医学免疫学PBL
--IL-2
(PPT制作:momo)
病例
• 45 岁男性, 因黑色素瘤转移至肺和右心房而接 受IL-2 和大剂量顺铂实验性治疗。除了常见的IL-2 毒性反应外, 在第一疗程后很快出现膝关节疼痛和肿 胀外周血WBez3700 又10 . / L , 血沉7om m / 小时。因怀疑是IL 一2 相关性菌血症而开始静脉 万古霉素治疗。发热消退后停用抗生素, 并用消炎痛 治疗持续的关节疼痛。膝关节积液完全消失, 但在应 用第二疗程大剂量IL 一2 后很快复发。A N A I : 160, 核仁型( 治疗前阴性) , RF ( 一),H L A 一D R 4 ,D R 7 ,n Qw Z , D Qw Z和n Q3 阳性1 5 年前曾因关节病变诊为浪e it o r综合征。
白细胞介素(IL-2)检测及临床意义
白细胞介素(IL-2)检测及临床意义
一、概述
白细胞介素-2 (IL-2)又称T细胞生长因子。
主要由T细胞产生。
是在淋巴细胞增殖分化过程中重要的细胞生长因子,生理作用有刺激T细胞生长、诱导细胞毒作用和对B细胞的生长及分化均有一定的促进作用等
二、检测方法
IL-2主要检测方法为生物素亲合素系统的双抗体夹心ELISA 法。
三、临床意义
1、IL-2可提高人体对病毒、细菌、真菌和原虫等感染的免疫应答,促进细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、自然杀伤细胞(NK 细胞)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK 细胞)和肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)增殖,并使其杀伤活性增强,进而清除体内肿瘤细胞和病毒感染细胞等。
2、IL-2 还可以增加抗体和干扰素 (IFN)等细胞因子的分泌,在机体免疫应答中具有非常重要的作用,是一种免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤和提高机体免疫功能等作用。
3、IL-2的表达异常与临床多种疾病有密切关系,尽管外周血、尿液中IL-2 水平,或激活淋巴细胞上清液中IL-2水平的异常没有疾病特异性,但是可作为相关疾病的辅助诊断、预后及疗效观察提供可靠数据。
4、IL-2升高:肿瘤、心血管病、肝病等疾病时均可使 IL-2 水平升高,在器官移植后早期排斥反应时也出现IL-2表达升高。
5、IL-2降低:在多种原发性免疫缺陷病和继发性免疫缺陷病时均可伴有 IL-2 水平降低,如 SLE、麻风和艾滋病等。
人Human白细胞介素2IL2ELISA检测试剂盒利用方式
人(Human) 白细胞介素-2(IL-2)ELISA 检测试剂盒利用方式用途:人IL-2 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各类体液中的IL-2 。
本试剂盒能够检测天然和重组的IL-2 。
本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。
实验原理:人IL-2 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-2 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将IL-2 和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再通过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中IL-2 的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
平安性1.此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性,但没有实验室可完全保证此血制品可不能传染肝炎、AIDS或其它传染病,依据本地的平安条例处置本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。
2.幸免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
3.实验中不要吃喝、抽烟或利用化妆品。
4.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书贮存,利用前恢复到室温。
稀稀事后的标准品应抛弃,不可保留。
2.实验中不用的板条应当即放回包装袋中,密封保留,以避免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前利用。
4.利用一次性的吸头以避免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,幸免利用带金属部份的加样器。
5.利用干净的塑料容器配置洗涤液。
利用前充分混匀试剂盒里的各类成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反映孔中吸水。
7.底物A应挥发,幸免长时刻打开盖子。
底物B对光灵敏,幸免长时刻暴露于光下。
白细胞介素-2的研究进展
白细胞介素-2的研究进展细胞因子是由多种细胞分泌的小分子蛋白的总称,具有调节细胞生长、免疫应答和参与炎症反应等多种生物学功能,而白细胞介素-2(IL-2)即是其中一种。
1976年Morgan等在小鼠脾细胞上清液中首次发现有一种能促进和维持T细胞体外生长的因子,并称其为T细胞生长因子(TCGF),1979年被正式命名为IL-2.随后有关IL-2的应用研究取得了突飞猛进的发展。
1.白细胞介素-2及其受体1.1白细胞介素-2结构天然hIL-2在体内主要由活化的I型辅助淋巴细胞(THl细胞)分泌,除此之外,B细胞、NK细胞及单核-巨噬细胞亦能产生IL-2。
IL-2为分子量约为15.5kDa的糖蛋白,pI在6.6~8.2。
成熟的IL-2分子由153个氨基酸肽链N端剪掉20个氨基酸残基的信号肽后剩下的133个氨基酸残基组成,它与其它的细胞因子在序列上无同源性。
翻译后加工的过程还包括第三位Thr位点的糖基化和二硫键的形成。
蛋白链中有三个半胱氨酸残基(Cys),位于第58、105和125位。
58位和105位半胱氨酸残基结合形成二硫键,使肽链折叠,125位半胱氨酸残基游离。
研究者发现将125位游离的半胱氨酸残基突变为丝氨酸或丙氨酸时,仍具有生物活性,且不会与第58位半胱氨酸残基形成错误二硫键,增加了IL-2的稳定性,同时也消除了由第125半胱氨酸残基造成的二聚体,但是这样新型IL-2容易产生抗体,这是一大不足之处。
IL-2肽链折叠后才呈现活性,直链是无活性的,正确的二硫键对于IL-2活性的保持是必需的,但糖基化却与活性无关。
IL-2的二级结构有4个α螺旋区和一对β反平行折叠,各螺旋相互折叠使IL形成球状蛋白分子。
磁共振 (NMR)确定IL-2的四个α螺旋,分别为A、1l-29.B、53-73,C、81-97,D、116-131。
对IL-2的α螺旋结构研究结果说明α螺旋的破坏对其生物活性必定有影响。
另外,IL-2与其受体结合需要酸性基团(Asp),而较长的疏水侧链基团则妨碍这种结合,使其活性降低,甚至完全丧失。
人白细胞介素2(IL-2)说明书
人白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T40pg/ml-1200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2(IL-2)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素2(IL-2)水平。
用纯化的人白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的白细胞介素2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2(IL-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素2(IL-2)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
白细胞介素-2(IL-2)的应用研究
白细胞介素-2(IL-2)的应用研究加州大学圣克鲁斯分校化学和生物化学助理教授Nikolaos Sgourakis说:“在不同情况下,IL-2可以起到促进或是抑制免疫反应的作用。
我们利用了详细的生物物理方法来研究它是如何做到的。
”在免疫应答中,IL-2作为生长因子刺激T细胞扩增。
不同类型的T细胞扮演着不同的角色,IL-2既可以刺激效应T细胞,也可以刺激调节性T细胞,后者可以在威胁消失后控制免疫系统。
白细胞介素2 (IL-2)是15 kDa的糖蛋白,在人类中,由位于4号染色体q26–28 区域的单基因编码。
它是免疫系统中的一类信号分子,调控对具有免疫功能的白血球(白细胞,通常是淋巴细胞)的活性。
IL-2 是机体对微生物感染的天然应答,区别外来和自身抗原。
(图源:百度百科)重组IL-2蛋白,货号:PRP100274;IL-2抗体,货号:ABP51612;白介素-2 ELISA定量试剂盒,货号:KET7006;IL-2试剂盒,货号:KET9002IL-2应用研究由于IL-2能诱导和增强细胞毒活性,应用IL-2治疗某些疾病、特别是对肿瘤治疗的研究得到了广泛开展,单独使用IL-2或与LAK细胞等(详见链接第四章)联合使用治疗肿瘤取得了一定的疗效;还可望用于病毒感染、免疫缺陷病及自身免疫病的治疗。
但IL-2的副作用也日益引起人们的注意:IL-2可引起发热、呕吐等一般症状,还可导致水盐代谢紊乱和肾、肝、心、肺等功能异常;最常见、最严重的是毛细血管渗漏综合征,使患者不得不中止治疗。
IL-2的副作用常与IL-2的剂量及用药时间呈相关,停止用药后症状多迅速减轻或消失。
IL-2引起副作用的机制是多方面的,但主要是间接性的,即IL-2诱导产生的某些因子或杀伤性细胞起着重要作用;现已知LAK细胞可通过溶解血管内组织而导致多种副作用。
给予适当药物(如吲哚美辛、哌替啶、对乙酰基氨酚等)、采取联合用药、改进给药方式(如少量多次短时间输注)和给药途径(如改全身用药为肿瘤局部用药)等将有效地减轻不良反应。
白细胞介素-2调节免疫耐受在自身免疫病中的研究进展
•综述.白细胞介素-2调节免疫耐受在自身免疫病中的研究进展刘亚婷张升校李军霞白细胞介素"IL)-2是第一个被分子克隆的细胞因子,最初被称为“T细胞生长因子”。
大量研究显示,IL-2通过T细胞自分泌作用促进效应T细胞(effector T cell,Teff)的生成。
直到1993年,上述观点才受到挑战,人们发现,敲除小鼠IL-2编码基因会导致严重的淋巴细胞增殖和自身免疫,与预期的免疫缺陷相反,这表明低剂量IL-2(LdIL-2)主要作用于调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)并维持其活性而不是产生效应T细胞和记忆T细胞,从而发挥免疫调节作用,且不良反应较小。
很可能成为自身免疫病的有效治疗方法,本文主要对LdIL-2在临床上自身免疫病中的应用做简要概述。
1IL-2和IL-2RIL-2在多机制作用下主要由次级淋巴器官中的CD48T 细胞产生,少部分由CDS^T细胞、自然杀伤(NK)细胞和自然杀伤T(NKT(细胞产生,在一定条件下,活化的树突状细胞(DCs(和肥大细胞也可少量合成IL-2E。
近年来对IL-2/IL-2受体(IL-2R)生物学的广泛研究揭示了其通过影响Treg细胞功能和存活来调节免疫耐受的关键作用。
IL-2受体由3个不同的亚基组成,即a(CD25),"(CD122)和#(#c)链,CD122和#链组成低亲和力二聚体IL-2R主要表达于CD88记忆T细胞和NK细胞,CD25、CD122和#链组成高亲和力三聚体IL-2R 主要表达FOXP3+CD4+CD25+Treg细胞和活化T细胞。
CD122和#c是IL-2R的信号转导成分,经几种细胞内途径包括蛋白酪氨酸激酶/信号转导与转录因子(JAK STAT)途径,磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K-AKT)途径和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径进行信号转导。
CD25似乎不参与信号传递,而是起到增加信号的亲和力的作用2IL-2对免疫反应的影响2.1IL-2和Treg细胞:Treg表达CD4、CD25和叉状头转录因子P3(FOXP3),对于抑制自身反应性T细胞和增强外周耐受至关重要,根据其来源不同可分为两种不同的Treg群体:胸腺来源的Treg细胞(tTregs)和外周幼稚CD48T细胞来源的Treg细胞(pTregs)。
银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达
银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达目的:探讨银屑病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌白细胞介素2(IL-2)、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平及意义。
方法:选取32例银屑病患者和15例正常人,分别作为病例组和对照组,分离培养其外周血PBMC,并用植物血凝素(PHA)诱导,酶联免疫吸附法(ELISA)检测诱导前后PBMC分泌IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的水平。
结果:①病例组PBMC培养上清液中IL-2水平在PHA刺激前低于对照组(P<0.05),刺激后则明显低于对照组(P<0.01);②sIL-2R水平在刺激前与对照组间无显著性差异(P>0.05),刺激后明显高于对照组(P<0.01);③TNF水平在刺激前高于对照组(P<0.05),刺激后显著高于对照组(P<0.01);④IL-6水平在刺激前明显高于对照组(P<0.05),刺激后虽稍高于对照组,但无统计学意义(P>0.05);⑤sIL-2R和TNF-α的水平与银屑病面积和严重程度指数(PASI)均呈显著正相关(r分别为0.53、0.68),IL-2的水平与PASI呈显著负相关(r=-0.46,P<0.05);⑥IL-6的水平与PASI不相关(r=0.30,P>0.05)。
结论:IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α在银屑病的发病过程中发挥一定的作用。
[Abstract] Objective: To investigate the levels of IL-2、sIL-2R、IL-6 and TNF-α secreted from peripheral blood monouclear cells (PBMC) in the patients with psoriasis, and approach their significances. Methods: Selected 32 psoriasis patients as psoriasis group and 15 normal person as control, whose PBMC were cultured and induced by polyhydroxyalkanoate (PHA) in vitro. The levels of IL-2, sIL-2R, IL-6 and TNF-α were measured with sandwich ELISA in medium. Results: ①The spontaneous level of IL-2 in medium of psoriasis group was lower than that of the control (P<0.05), while it was significantly lower than that of the control (P<0.01)after being induced by PHA. ②The spontaneous level of sIL-2R of psoriasis group had no difference compared with that of the control (P>0.05), while the induced level of sIL-2R in psoriasis group was significantly higher than that of the control (P <0.01). ③The spontaneous level of TNF-α in psoriasis group was higher than that of the control (P<0.05), and the induced level of TNF-α in psoriasis group became significantly higher than that of the control (P<0.01). ④The spontaneous levels of IL-6 in psoriasis group was significantly higher than that of the control (P<0.05), the induced level of IL-6 in psoriasis group was higher than that of the control , but there was no statistic significance(P>0.05). ⑤The analysis of correlation showed that the levels of sIL-2R (r=0.53)and TNF-α(r=0.68)were both correlated with PASI positively; IL-2 had negative correlation with PASI (r=-0.46, P<0.05), and IL-6 had no correlation with PASI (r=0.30, P>0.05), Conclusion: IL-2, sIL-2R,IL-6 and TNF-α are all involved in the pathogenesis of psoriasis.[Key words] Psoriasis; Interleukin; Tumor necrosis factor alpha近年来的研究表明免疫功能调节异常在银屑病的发病中起着十分重要的作用,尤其是细胞因子导致的细胞免疫功能异常倍受关注。
IL2RG变异致重症联合免疫缺陷病的临床表现和基因分析
・242・J Shasi Med Univ,Feb.2020,Vb52No2IL2RG变异致重症联合免疫缺陷病的临床表现和基因分析王高伟,刘磊,肖梦君,谢振华,刘菁,李东晓,罗淑颖,张耀东,王美烨*(郑州大学附属儿童医院,河南省儿童医院,郑州儿童医院,河南省儿童遗传代谢性疾病重点实验室,郑州450053;*通讯作者,E-m/R100574555@)关键词:重症联合免疫缺陷;IL2RG;变异中图分类号:R728.2文献标志码:B文章编号:167-66112941)94-92/7-98DOI:19.7753/j.issu4067-663.292142.921重症联合免疫缺陷病(severa cambioed immuoa-hebcienca,SCIN)是联合免疫缺陷病中最严重的类型,由多个基因缺陷引起。
研究发现SCIN的发生至少与以下基因相关:3L2RG、ARTEMIS、RAG1、RAG2、P DA、CD45、1MK3和S7R20,其中由白细胞介素-2受体共同Y链(intedeukin2receytvo subunit gamma,JZ2RG)基因变异引起的X-连锁重症联合免疫缺陷(X-XCIN)占52%-65%20。
X-XCIN患者免疫系统常表现为T细胞(CD3+)、NK细胞(CD1+/ CD56+)缺失或显著减少,B细胞(CD19+)数量正常或增加,但功能异常,从而导致免疫球蛋白产生异常20。
S2RG编码的ILCR y链是ILC、ILC、ILC、ILC、、LC5、、LC1等多种细胞因子受体共有的功能组成单位,即共有链,是联系细胞膜表面细胞因子结合区域与下游细胞信号转导分子之间的纽带。
在X-XCIN的临床诊断中,T-B+NK-这种临床表现是由ILC、ILC、、LC5、ILC1四种细胞因子的缺失所致,1LC、、LC5两种细胞因子是T和NK细胞生长所必需的,ILC和IL-21两种细胞因子的信号转导紊乱会导致内在的B细胞缺陷十40o ILC在T细胞的 发育中具有不可缺少的作用,其诱导的信号缺陷是X-XCIN中T淋巴细胞减少的主要原因20。
新型冠状病毒肺炎患者血清白细胞介素2R测定及其评价
—766 —[10] Yu T,Ma P, Wu D,et al. Functions and mechanisms of microR-NA-31 in human cancers[J]. Biomed Pharmacother, 2018,108 :1162.[11] Xi S, Yang M, Tao Y , et al. Cigarette smoke induces C/EBP-b-mediated activation of miR-31 in normal human respiratory epi thelia and lung cancer cells[J]. PLoS One,2010,5(10) :el 3764.Chin J Lab Diagn , May , 2020, Vol 24, No. 5口 2]Yan HJ , Ma J Y , Wang L, et al. Expression and Significance ofCirculating MicroRNA-31 in Lung Cancer Patients]J]. Med SciMonit,2015,21 :722.(收稿日期:2019-01-17)文章编号:1007-4287(2020)05 — 0766-03新型冠状病毒肺炎患者血清白细胞介素2R 测定及其评价王 晨I,林风武I,王 岩I,辛 华I,谭 娟2,王振兴1,孙宏斌I ,许哲男"(1.吉林大学中日联谊医院胸外科,吉林长春130033;2.华中科技大学同济医院,湖北武汉430100)摘要:目的检测新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者血清白细胞介素-2受体(IL-2R)的含量,探讨其临床意义。
方法 用放射免疫法检测了 47例COVID-19患者血清IL-2R 含量,并与正常对照组作比较分析,又将COVID-19患者按新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第六版)分为普通、重症及危重型,并进行相互比对。
白细胞介素-2受体及其功能研究进展
白细胞介素-2受体及其功能研究进展
王健;王瑜;叶松
【期刊名称】《中国现代医学杂志》
【年(卷),期】2006(16)2
【摘要】白细胞介素-2(IL-2)是一种多功能细胞因子,通过相应细胞表面的受体发
挥多种生物学作用.白细胞介素-2受体(IL-2R)是一种重要的免疫信号传递分子,由α、β、γ三条链组成,分别可形高、中、低亲和度的受体,主要表达于T细胞表面,主要
通过STAT途径、MAp激酶途径(丝裂原活化蛋白激酶途径,或Ras/MAPK途径)、PI-3激酶途径(磷酸肌醇3激酶途径)诱导T细胞活化,参与宿主抗病毒、抗细菌等
免疫反应.
【总页数】6页(P241-245,249)
【作者】王健;王瑜;叶松
【作者单位】安徽理工大学医学院,安徽,淮南,232001;安徽理工大学医学院,安徽,淮南,232001;安徽理工大学医学院,安徽,淮南,232001
【正文语种】中文
【中图分类】R392.11
【相关文献】
1.脓毒症患者超声心动图功能指标与白细胞介素-6、白细胞介素-10、肌钙蛋白T、可溶性晚期糖基化终末产物受体的关系 [J], 蔡莉芬;封丽琴;董建霞;张建集;郑欢伟;李力
2.白癜风患者可溶性白细胞介素-2受体、免疫功能及甲状腺功能的紊乱情况研究[J], 刘影;沈景刚;刘倩;张学玲;孙大鹏
3.白细胞介素6及其受体结构与功能关系研究进展 [J], 宋伦
4.慢性肾功能不全患者血清白细胞介素6和可溶性白细胞介素6受体检测及临床意义 [J], 戴勇;齐晖;黄瑞芳;王沙燕;彭保;李德萍
5.白细胞介素-1受体辅助蛋白在神经精神疾病发病中作用的研究进展 [J], 程培培;杜亚松
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
白介素—2及其受体与急性髓细胞白血病
白介素—2及其受体与急性髓细胞白血病
羊裔明
【期刊名称】《国外医学:输血及血液学分册》
【年(卷),期】1996(019)001
【摘要】白介素-2(IL-2)活化的T淋巴细胞有IL-2受体(IL-2R)表达,除NK细胞外,休止期的T淋巴细胞无IL-2R表达,近年来的研究发现,急性髓细胞白血病(AML)细胞有IL-2R的表达,本文就AML细胞IL-2R表达、IL-2对这些细胞的影响及其在AML治疗中的应用等作一综述。
【总页数】3页(P8-10)
【作者】羊裔明
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R733.710.2
【相关文献】
1.儿童急性白血病患儿骨髓细胞中血管内皮生长因子及其受体的表达 [J], 陈勇
2.南方汉族急性髓细胞白血病患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因的研究 [J], 何柳媚;甄建新;徐筠娉;邓志辉
3.急性髓细胞白血病患儿骨髓单个核细胞中自分泌运动因子受体表达的检测 [J], 王颖超;刘满菊;冯磊;马丽娜;王春美;殷楚云
4.低剂量白介素-2联合化疗维持治疗老年急性髓细胞白血病 [J], 杨晨敏;沈杨;李
军民;沈志祥
5.白细胞介素-3受体α在急性髓性白血病原代骨髓细胞中 [J], 胡浩然;梁勇;付蓉;王国锦;王化泉;邢莉民;瞿文;关晶;吴玉红;刘鸿;宋嘉;任悦;刘惠;王晓明;王珺;李丽娟;阮二宝;邵宗鸿
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
老年肺结核患者血清可溶性白细胞介素2受体测定的临床意义
老年肺结核患者血清可溶性白细胞介素2受体测定的临床意
义
蔡后荣
【期刊名称】《临床荟萃》
【年(卷),期】1996(011)016
【摘要】老年人易患肿瘤、感染及自身免疫疾病,一般认为与衰老时机体免疫功能低下,特别是细胞免疫功能降低有关,白细胞介素2和白细胞介素2受体(IL—2,IL—2R)体系在衰老中的作用颇引人注目。
可溶性白细胞介素2受体(sIL—2R)是IL—2Rα链经酶水解脱落成份之一,sIL—2R水平反映淋巴细胞激活程度,也可反映细胞免疫功能状态。
本文应用夹心法ELASA对老年肺结核患者血清sIL—2R进行了研究,并对其临床意义进行讨论。
【总页数】2页(P765-766)
【作者】蔡后荣
【作者单位】南京市鼓楼医院呼吸内科
【正文语种】中文
【中图分类】R521.03
【相关文献】
1.甲状腺疾病患者血清可溶性白细胞介素2受体测定的临床意义 [J], 王德全;王宜民
2.肺结核患者血清可溶性白细胞介素2受体测定及临床意义的探讨 [J], 张玉风;佟
玉阳
3.癫痫患者血清可溶性白细胞介素2受体测定及临床意义 [J], 高鹏
4.膀胱癌患者血清中可溶性白细胞介素2受体的测定及临床意义 [J], 王立忠;严友农;夏松青;姜力
5.原发性肝癌患者血清可溶性白细胞介素2受体水平测定的临床意义 [J], 莫钦国; 梁安民
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
急性白血病患者血清白细胞介素-2受体表达的临床意义
急性白血病患者血清白细胞介素-2受体表达的临床意义
邵剑峰;钟永根;刘忠民;封蔚莹;傅佳萍
【期刊名称】《实用医学杂志》
【年(卷),期】2006(022)019
【摘要】目的:观察血清白细胞介素-2受体(IL-2R)在急性白血病(AL)患者中的表达及其临床意义.方法:采用化学发光免疫分析法测定30例正常对照者和39例AL患者治疗前后的血清IL-2R水平.结果:AL患者治疗前IL-2R水平高于正常对照组(P<0.05);且与外周血白细胞、骨髓幼稚细胞百分数无直线相关关系;白血病患者治疗后IL-2R水平较治疗前降低(P<0.05).结论:血清IL-2R的测定在AL的治疗监测中有较好的应用价值.
【总页数】2页(P2252-2253)
【作者】邵剑峰;钟永根;刘忠民;封蔚莹;傅佳萍
【作者单位】312000,浙江省绍兴市人民医院血液科;312000,浙江省绍兴市人民医院血液科;312000,浙江省绍兴市人民医院血液科;312000,浙江省绍兴市人民医院血液科;312000,浙江省绍兴市人民医院血液科
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.急性白血病患者血清白细胞介素-6白细胞介素-8的变化 [J], 万鼎铭
2.急性白血病患者血清可溶性白细胞介素-2受体水平及临床意义 [J], 辛晓敏;宋晓
红;关秀茹
3.急性白血病患者血清白细胞介素2活性及其临床意义探讨 [J], 王玲;杨爱德
4.急性白血病患者血清可溶性白细胞介素6受体检测的临床意义 [J], 王东星;付卫军
5.急性白血病患者血清可溶性白细胞介素2受体测定及其临床意义 [J], 孟海涛;林茂芳;张丽娟;林修基
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
白细胞介素-2受体简介
白细胞介素-2受体简介
刘鹏翰
【期刊名称】《中国输血杂志》
【年(卷),期】1992(5)3
【摘要】白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)是包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK 细胞及单核细胞在内的造血细胞生长和分化刺激因子。
IL-2通过细胞表面的IL-2受体(IL-2 receptor,II-2R)发挥作用。
IL-2R不仅分布在靶细胞的表面,可溶性IL-2受体(soluble IL-2R,
【总页数】4页(P162-165)
【关键词】白细胞介素2;受体;基因表达
【作者】刘鹏翰
【作者单位】广西区血液中心
【正文语种】中文
【中图分类】R392
【相关文献】
1.原发中枢神经系统弥漫性大B细胞淋巴瘤患者血清细胞因子白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素2受体和肿瘤坏死因子α的水平及临床价值 [J], 邵春青;吕虹;刘志伟;张国军
2.血浆中内源性白细胞介素-1受体拮抗剂水平可影响重组人白细胞介素-1受体拮抗剂治疗脓毒症患者的效果 [J], 罗红敏;
3.白细胞介素18受体α与β真核表达载体构建及白细胞介素18受体β稳定表达细胞株的建立 [J], 陈燕;赵振东
4.溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜白细胞介素-6受体及白细胞介素-8受体的表达变化[J], 孔梅;王莺;汤艳平
5.肺结核患者可溶性白细胞介素-2受体水平、膜白细胞介素-2受体表达和T淋巴细胞亚群的研究 [J], 汪谋岳
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
IL-2Rγ研究现状
IL-2Rγ研究现状
何凤田
【期刊名称】《国外医学:免疫学分册》
【年(卷),期】1996(19)2
【摘要】IL-2受体γ链(IL-2Rγ)为细胞因子受体超家族成员,是一分子量为64KDa的膜蛋白。
它是多种细胞因子受体的功能性组成单位,参与调控淋巴细胞的分化发育和成熟、T细胞致敏以及自身免疫耐受的形成等多种免疫学功能。
IL-2Rγ基因突变可导致X染色休连锁的重症联合免疫缺陷(XSCID)等疾病。
本文深入探讨了γ链的功能机制,这将有助于多种相关疾病的诊断与治疗。
【总页数】5页(P65-69)
【关键词】白细胞介素;γ链;分子特性;X-连锁;联合免疫缺陷
【作者】何凤田
【作者单位】重庆第三军医大学免疫学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R392.12;R593.3
【相关文献】
1.血清IL-17A、IL-18、SCD25(IL-2R)早期诊断川崎病研究 [J], 宋思瑞;朱丹颖;陈丽琴;谢利剑;肖婷婷;黄敏
2.IL-2Rβ基因多态性与重症肌无力关联性研究 [J], 于小龙;梁兵;岳耀先;张栩;谢琰
臣;张贤军;谷传凯;宋敏;丁晓君
3.IL-2R和IL-7R基因多态性与特发性脱髓鞘性视神经炎的相关性的初步研究 [J], 赵燕燕;魏世辉;戴朴;袁慧君
4.食物过敏患儿临床特点及血清IL-10、IL-2R、IL-8水平研究 [J], 盛瑶;吴成;李传应
5.IL-2、IL-2Rα及IFN-γ SNPs与原因不明复发性流产的相关性研究 [J], 邓妙; 陈岳明; 张红艳; 张治芬
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
人白细胞介素-2受体(IL-2R)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T
15ng/L - 400ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-2受体(IL-2R)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-2受体(IL-2R)水平。
用纯化的人白细胞介素-2受体(IL-2R)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-2受体(IL-2R),再与HRP标记的白细胞介素-2受体(IL-2R)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素-2受体(IL-2R)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-2受体(IL-2R)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。