普鲁士蓝染色液说明书(核固红法)

合集下载

普鲁士蓝染色-核固红法

-2-
咨询邮箱：bestbio@
电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
使用方法：使用前试剂 A1 和 A2 等量混合均匀，即为 Perls 染色试剂 A。现配现用。
石蜡切片： 1、常规脱蜡至水。 2、蒸馏水洗 1 分钟。 3、试剂 A 染色 15-40 分钟。 4、蒸馏水充分冲洗 2-5 分钟。 5、核固红试剂 B 淡染细胞核 5-10 分钟。 6、水冲洗。 7、常规脱水透明。 8、中性树胶封片。
贝博 Perls 普鲁士蓝染色试剂盒常用于显示局部组织内的各种出血性病变。在判断含铁血黄素沉积时，用 Perls 染色可以得到证实，可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。本试剂盒稳定性好，可以长期保存，应用范围广。
本试剂盒复染液采用最经典最常用的核固红复染液。
试剂盒以外自备试剂和仪器 ● 10%中性福尔马林
普鲁士蓝染色试剂盒
（Perls 染色）（核固红法）
货号：BB-44371
试剂盒储存条件：室温避光保存。
试剂盒组成：
产品组份规格
试剂 A1：Perls 试剂 A1 试剂 A2：Perls 试剂 A2 试剂 B：核固红试剂 B
使用说0ml*2 25 ml 25 ml 50 ml 1
● 纯水
● 4%多聚甲醛
● 乙醇
使用方法：
使用注意事项： ● 脱蜡要干净。 ● 组织固定采用 10%中性福尔马林。 ● 试剂 A 临用前配制，现配现用，不可提前配制。 ● 整个操作过程采用的容器要干净，避免采用金属铁制品。 ● 实验过程中用到的水为纯水或双蒸水，包括清晰容器玻片等。 ● 避免使用酸性固定剂。 ● 染色时间应根据样本情况调整。

普鲁士蓝染色步骤

普鲁士蓝染色步骤
普鲁士蓝染色的步骤包括：
1. 切片：将待染色的组织切成3~5微米的薄片。

2. 烤片：将切片放入烤片机中，在70℃下烤制30分钟。

3. 捞片：将烤好的切片放入水浴锅中，温度设置为49℃，浸泡20秒后取出。

4. 脱蜡、复水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中脱蜡，然后放入无水乙醇、75%乙醇、蒸馏水中复水。

5. 染色：将切片放入普鲁士蓝染色工作液中，完全覆盖组织，室温染色1小时。

染色后，用自来水冲洗切片，去除多余的染料。

6. 复染：将切片放入普鲁士蓝染液C中，室温染色3~5分钟。

染色后，用自来水冲洗至切片流水无色。

7. 脱水封片：将切片经3次无水乙醇脱水，每次5分钟，再经二甲苯透明5分钟，然后以中性树胶封片。

以上是普鲁士蓝染色的基本步骤，每一步都需要仔细操作以保证染色效果。

阿尔新蓝染液(固核红)(pH2.5)使用说明书

在正常血管壁上产生一定数量的非硫酸化酸性粘液但在间皮瘤中出现过量的非硫酸化酸性粘液在动脉粥样硬化损伤早期会增加
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
htpp://
阿尔新蓝染液（固核红）(pH2.5)
阿尔新蓝染液（Alcian Blue staining solution）
阿尔新蓝染液可对酸性粘液和乙酸粘蛋白进行染色。在正常血管壁上产生一定数量的非
2)对于冰冻切片
PBS 漂洗 2 min。
Hale Waihona Puke 3)对于培养细胞用 4%多聚甲醛固定 10 min 以上；PBS 洗涤 2×2 min。
2. 阿尔新蓝染液
对于上述处理好的样品
1) 将切片置于阿尔新蓝染液(pH2.5)中 30min；
2) 流动的自来水冲洗 2min，蒸馏水漂洗；
3) 用核固红染液复染 5min；
温馨提示
为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。
储存温度
避光储存于室温。
包装清单
货号
品名
包装
HCY128A
阿尔新蓝染液(pH2.5)
100mL
HCY128B
核固红染液
100mL
说明书
1份
1
4) 流动的自来水冲洗 1min，蒸馏水漂洗；
5) 脱水、透明后，用树脂封片剂封片。
结果
粘蛋白类染为亮蓝；核染为红色。
注意事项
1. 需自备 4%多聚甲醛、梯度乙醇、二甲苯，中性树胶或其它封片剂。
2. 进一步鉴定酸性粘蛋白，需要使用其他 pH 值的染液。
3．第一次使用本试剂盒时建议先取 1~2 个样品做预实验。
硫酸化酸性粘液，但在间皮瘤中出现过量的非硫酸化酸性粘液，在动脉粥样硬化损伤早期会

普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理

普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理
首先，普鲁士蓝是一种阳离子染料，可以与阴离子物质发生结合。

它的颜色为深蓝色，对于电镜染色或组织切片的染色非常适用。

其次，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理与铁离子的还原反应有关。

普鲁士蓝染色试剂盒中包含了还原剂和氧化剂。

还原剂将铁离子还原为两价的铁离子，而氧化剂将两价的铁离子氧化为三价的铁离子。

铁离子在试剂盒中的相互转变过程中，会和普鲁士蓝结合形成普鲁士蓝染料。

这种染料具有很强的颜色稳定性和耐光性。

在实际的染色过程中，首先需要准备待染物样本，通常是细胞切片或组织切片。

然后将待染物样本浸入染色试剂盒中，使其充分浸透。

接着，将样本置于特定条件下进行染色反应。

染色反应的条件通常包括温度、反应时间以及试剂盒中存在的其他化学物质的浓度等。

染色反应进行的时间越长，染色的深度越深。

染色反应进行的温度越高，染色的速度越快。

普鲁士蓝染色试剂盒中的其他化学物质对染色反应的影响也非常重要。

例如，存在过量的铁离子会抑制染色反应的进行，而存在过量的氧化剂会使染色淡化。

最后，染色完成后，需要通过温和洗涤、脱水和固定来清洁和稳定染色结果。

这样可以去除多余的染色物质，使染色结果更加清晰和稳定。

总而言之，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理主要涉及阳离子染料的结合特性，以及铁离子的还原和氧化反应。

这种染色方法适用于电镜染色和组织切片的染色研究中，具有简单、快速、稳定等优点。

阿利新蓝染色液配制及使用方法

北京华越洋生物提供QQ1733351176标准阿利新蓝染色液CAS：75881-23-1分子式：C56H68N16S4Cl4Cu产品简介:阿利新蓝（Alcian）又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。

这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。

阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。

该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。

阿利新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明，普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。

如含羧基和硫酸根的酸性黏液物质的羧基和硫酸根形成不溶性复合物，即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色。

pH值为2.5时组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，是带有羧基的组织（如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白）染色。

pH值为1.0时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织（如硫酸黏液物质）染色。

中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白）不能与阿利新蓝反应。

操作步骤（仅供参考）：1、二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。

2、入阿利新蓝酸化液浸泡3min。

3、入阿利新蓝染色液染色30min。

4、流水冲洗5min。

5、入核固红染色液复染5-10min。

6、流水冲洗1min。

北京华越洋生物提供QQ17333511767、梯度乙醇脱水，二甲苯透明。

8、中性树胶封片。

染色结果：注意事项：1、固定液采用10%中性福尔马林。

2、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低( pH=1)的阿利新蓝，即调pH值为1.0。

染色程序和孵育时间与pH值为2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产地：国产提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

核固红染色液(0.2%)

Leagene。

com 北京雷根生物技术有限公司
核固红染色液(0.2%)
简介：
核固红(Nuclear fast red)又称细胞核坚牢红，分子式为C14H8NNaO7S，分子量为357.27，微红至深棕色粉末，溶于乙醇和水。

核固红染色液(0.2%)是由核固红、氧化剂组成，常用于细胞核染色。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。

2、一般复染细胞核时间控制在5～10min。

染色结果：细胞核呈不同程度的红色。

相关：编号
名称
DC0096 Storage Nuclear fast red stain(0.2%)100ml RT 避光使用说明书1份
编号名称
DA0059 甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)
DA0072 中性红染色液(1%)
DE0001 碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法)
DG0005 糖原PAS染色液
DH0006 苏木素伊红(HE)染色液
PS0013 RIPA裂解液(强)
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。

Lillie二价铁染色液

Lillie 二价铁染色液简介：含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素。

当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

Perls 普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内，主要显示三价铁盐。

在极少数情况下，铁存在于其还原态的亚铁之中，Lillie 法是显示二价铁的很好地的方法，其特异性较好。

组成：自备材料：1、系列乙醇2、蒸馏水操作步骤(仅供参考)：1、组织固定于中性福尔马林或其他碱性固定液，常规脱水包埋。

2、切片厚度，常规脱蜡至水。

3、蒸馏水水洗。

4、切片入Lillie stain (见注意事项4)，浸染。

5、蒸馏水充分冲洗。

6、入核固红染色液，淡染细胞核。

7、蒸馏水冲洗。

8、常规脱水透明，中性树胶封固染色结果：编号名称DJ0004 2×50mlStorage 试剂(A)A1:Lillie 二价铁A 液 25ml RT A2:Lillie 二价铁B 液25mlRT临用前，取A1、A2混合即为Lillie stain ，不宜提前配制。

试剂(B): 核固红染色液 50mlRT 避光使用说明书1份二价铁深藤氏蓝细胞核、其他组织红色阴性对照(可选)：取相同对照切片脱蜡至水。

结果为阴性。

注意事项：1、该染色法适用于石蜡切片、冰冻切片和树脂切片，切片脱蜡应尽量干净。

2、组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。

避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

3、整个操作过程中容器要干净，避免用金属铁制品，洗切片和容器时以蒸馏水为宜，因普通水内含铁质。

4、Lillie stain染色时，应根据样本情况调整着色时间。

甲基蓝水溶液(Methyl blue,1%)

甲基蓝水溶液(Methyl blue,1%)简介：甲基蓝(Methyl blue)又称棉蓝，分子量为799.8，常被用作生物染色剂，用于动物组织学中原生动物活体、细菌、神经细胞的染色。

组成：编号DZ0019 Storage名称Methyl blue Stain(1%) 100ml RT 避光使用说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、样品处理①对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5～10min。

更换新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10min。

无水乙醇5min。

90%乙醇2min。

70%乙醇2min。

蒸馏水2min。

②对于冰冻切片：蒸馏水2min。

③对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10min以上。

(或采用如下步骤：每25cm2加入PBS/甲醇溶液5ml，静置2min，弃液。

加入新鲜甲醇5ml，静置10min，弃液。

)蒸馏水洗涤2min。

换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。

2、美蓝染色①Methyl blue Stain(1%)染色(可以根据染色结果和要求调整时间)。

②用蒸馏水或自来水充分洗涤，进行观察和拍照。

染色结果：组织或细胞蓝色注意事项：1、第一次使用本试剂时建议先取1～2个样品做预实验。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。

相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DJ0001 普鲁士蓝染色液(核固红法)DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液DZ0037 印度墨汁NR0003 Lezol(总RNA提取试剂)PS0013 RIPA裂解液(强)TO1013丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)。

铁染色_精品文档

红细胞内外铁粒染色一、原理：骨髓细胞外铁及有核红细胞中铁粒与亚铁氰化钾作用后，呈普鲁士兰阳性反应。

二、试剂：1、4%低铁氰化钾25ml（低铁氰化钾1g+蒸馏水25ml配成4%低铁氰化钾）2、4%HCL 25ml。

（+蒸馏水 ml即4％HCL）染色时1、2液混合即可。

3、1%核固红(核固红配制时，用5%硫酸铝溶解)25g硫酸铝+500 ml蒸馏水即5%硫酸铝,1g核固红+100ml5%硫酸铝即1%核固红.三、方法：1、干燥血片或骨髓片，用福尔马林37℃薰蒸固定5分钟水洗(蒸馏水)2、入4%低铁氰化钾盐酸混合液37℃(先预热20分钟)，置入血片或骨髓片40分钟水洗待干3、入1%核固红复染15~20分钟，水洗待干。

(蒸馏水)四、结果判定：铁粒幼细胞：胞质内出现兰色颗粒的幼红细胞。

环铁粒幼细胞：幼红细胞质内的兰色颗粒在6个以上，并围绕于核周排列成环形者。

铁粒红细胞：含有兰色铁颗粒的红细胞。

红细胞外铁：根据铁量的多少以“0”—“++++”表示，正常人一般为“+”—“++”（观察骨髓小粒）“0”：无铁粒可见“+”：有少数铁粒或偶见到铁小珠“++”：有铁粒小珠和少数小块“+++”：有很多的铁粒小珠和少数铁小块“++++”：有很多的铁粒、小珠并有小块红细胞内铁：计数100个有核红细胞，以含铁粒红细胞百分数报告。

正常人一般铁粒幼红细胞占40%，以I、II型为主，无环形铁粒幼红细胞。

“+”仅含1个铁颗粒“++”含2-5个铁颗粒“+++”含6-9个铁颗粒“++++”含10个以上铁颗粒五、临床意义：1.鉴别缺铁性与非缺铁性贫血：缺铁性贫血时，细胞外铁消失，铁粒幼红细胞减少，平均为3%，因此铁染色可作为诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的重要方法。

2.诊断铁粒幼红细胞性贫血：铁粒幼细胞性贫血时，细胞外铁显著增多（++++），其所含铁颗粒的数目也较多，颗粒也粗大。

因此本染色可作为诊断铁粒幼细胞性贫血的重要方法。

出现较多的环形铁粒幼细胞，可占幼红细胞的15%以上。

普鲁士蓝测定法-定义说明解析

普鲁士蓝测定法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分:普鲁士蓝测定法是一种常用的分析化学方法，用于测定溶液中的亚铁离子（Fe2+）的浓度。

该方法以其简单、快速和准确的特点而被广泛应用于环境监测、化学分析和生物科学研究等领域。

在普鲁士蓝测定法中，普鲁士蓝（Prussian Blue）作为指示剂，通过与亚铁离子形成可见光谱的深蓝色沉淀来进行浓度的测定。

普鲁士蓝是一种由亚铁离子和氰酸根离子所组成的无机化合物，其具有较高的稳定性和灵敏度。

本文旨在全面介绍普鲁士蓝测定法的原理、步骤和应用，并对其进行评价和展望。

首先，我们将详细阐述普鲁士蓝测定法的原理，包括指示剂的选择和反应机理。

随后，我们将介绍该方法的具体步骤，包括样品的处理和浓度计算等。

最后，我们将探讨普鲁士蓝测定法在不同领域的应用，例如环境水质监测和医学诊断等。

通过对该方法的全面分析和综合评价，我们可以更好地了解普鲁士蓝测定法的优势和局限性，并为未来的研究提供一些建议和展望。

综上所述，本文将对普鲁士蓝测定法进行深入的探讨和总结，旨在为读者提供一个关于该方法的全面介绍，并推动其在实际应用中的进一步发展和运用。

1.2 文章结构文章结构部分的内容可以描述普鲁士蓝测定法长文的整体框架和各个部分的内容摘要。

文章结构如下：1. 引言：本部分介绍普鲁士蓝测定法的概述，包括其基本原理、步骤和应用范围。

同时，描述文章的结构和各个部分的内容概要。

2. 正文：2.1 普鲁士蓝测定法的原理：该部分详细解释普鲁士蓝测定法的基本原理，包括反应机理和主要的化学反应过程。

同时，探讨普鲁士蓝与待测物质之间的关系和相互作用。

2.2 普鲁士蓝测定法的步骤：本节介绍普鲁士蓝测定法的具体操作步骤，包括实验所需试剂和仪器设备，以及每个步骤详细的操作流程。

同时，说明每个步骤的目的和原理，并提供实验中可能遇到的注意事项。

2.3 普鲁士蓝测定法的应用：该部分列举普鲁士蓝测定法在不同领域中的应用案例，包括环境分析、化学分析和生物医学研究等。

阿利新蓝染色液配制及使用方法

这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。

阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。

该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。

阿利新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明，普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。

pH值为1.0时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织（如硫酸黏液物质）染色。

中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白）不能与阿利新蓝反应。

操作步骤（仅供参考）：1、二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。

2、入阿利新蓝酸化液浸泡3min。

3、入阿利新蓝染色液染色30min。

4、流水冲洗5min。

5、入核固红染色液复染5-10min。

6、流水冲洗1min。

北京华越洋生物提供QQ17333511767、梯度乙醇脱水，二甲苯透明。

8、中性树胶封片。

染色结果：注意事项：1、固定液采用10%中性福尔马林。

2、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低( pH=1)的阿利新蓝，即调pH值为1.0。

染色程序和孵育时间与pH值为2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产地：国产提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

普鲁士蓝实验报告

一、实验目的1. 了解普鲁士蓝染色的原理和操作步骤。

2. 掌握利用普鲁士蓝染色观察组织中铁元素分布的方法。

3. 提高实验操作技能，培养严谨的科学态度。

二、实验原理普鲁士蓝是一种亚铁氰化铁，具有较强的亲和力，可以与组织中的铁元素结合形成蓝黑色沉淀。

在酸性条件下，切片内的高铁盐与亚铁氰化钾反应生成亚铁氰化铁，进而与组织中的铁元素结合，形成蓝黑色沉淀。

通过显微镜观察，可以观察到组织中铁元素的分布情况。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 人肝组织切片- 亚铁氰化钾- 氯化铁- 核固红染液- 固定液- 20倍样本体积的固定液- 石蜡切片- 冰冻切片- 显微镜2. 实验仪器：- 烧杯- 移液器- 离心机- 显微镜- 显微摄影仪四、实验步骤1. 样本准备：- 将人肝组织切片置于20倍样本体积的固定液中固定24小时以上，常温运输。

- 固定时间不宜过长，以免组织结构变形，切勿冷冻结冰。

- 石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。

2. 染色：- 将固定好的切片置于烧杯中，加入适量的亚铁氰化钾溶液，在室温下进行染色。

- 染色时间约为30分钟。

3. 核固红染色：- 将染色好的切片用蒸馏水冲洗干净。

- 加入核固红染液，室温下进行染色。

- 染色时间约为10分钟。

4. 脱水封片：- 将染色好的切片用无水乙醇进行脱水处理。

- 最后用中性树胶封片。

5. 显微镜观察：- 将封片后的切片置于显微镜载物台上，使用显微镜观察。

- 观察组织中铁元素的分布情况，记录观察结果。

五、结果与分析1. 铁元素、含铁血黄素呈蓝色，细胞核呈红色。

2. 在显微镜下观察，可见肝组织内存在蓝色颗粒，为铁元素、含铁血黄素的沉积。

3. 铁元素主要分布在肝细胞内的线粒体、溶酶体等细胞器中。

六、讨论1. 普鲁士蓝染色是一种简单、快速、灵敏的染色方法，可用于观察组织中铁元素的分布。

2. 实验过程中，固定时间的控制对组织结构的影响较大，应严格按照实验要求进行固定。

3. 染色过程中，亚铁氰化钾和氯化铁的浓度、染色时间等因素会影响染色效果，应进行优化。

蓝色荧光细胞核染色分析试剂盒产品说明书(中文版)

蓝色荧光细胞核染色分析试剂盒产品说明书（中文版）主要用途蓝色荧光细胞核染色分析试剂是一种旨在通过使用荧光染料DAPI与细胞核DNA特异性结合，并发出荧光检测信号，用于分析和观察细胞核形态或DNA含量以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种细胞核（动物、人体、植物、昆虫等）的观察。

产品即到即用，性能稳定，荧光清晰。

技术背景作为细胞DNA染色剂之一的4,6-二咪基－4-联苯基吲哚（4,6-diamidino-2-phenylindole；DAPI）特异性地与DNA双螺旋的凹槽部分发生相互作用，从而与DNA的双链紧密结合。

结合后产生的荧光基团的吸收峰是358nm而散射峰是461nm，正好是UV（紫外光）的激发波长356nm，使得DAPI成为一种常用的荧光检测信号，并作为双重染色或重叠染色的主要染色剂之一。

产品内容清理液（Reagent A）毫升固定液（Reagent B）毫升扩张液（Reagent C）毫升染色液（Reagent D）毫升抗淬灭剂（Reagent E）毫升产品说明书1份保存方式保存固定液（Reagent B）、染色液（Reagent D）和抗淬灭剂（Reagent E）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent D）和抗淬灭剂（Reagent E）避免光照；有效保证6月用户自备微型台式离心机：用于悬浮细胞的操作盖玻片：用于染色后封片荧光显微镜：用于观察细胞核DNA染色实验步骤一、贴壁细胞染色1．准备1个细胞培养24孔板的待测细胞，每孔铺满率达70％（注意：可以使用载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和其它培养孔板，见注意事项6）2．小心抽掉细胞培养液3．小心加入xx微升清理液（Reagent A）4．小心抽掉清理液（Reagent A）5．小心沿着孔壁加入xx微升－20℃预冷的固定液（Reagent B），覆盖培养孔表面6．在4℃冰箱里孵育6分钟7．小心抽掉固定液（Reagent B）8．小心沿着孔壁加入xx微升清理液（Reagent A），覆盖培养孔表面9．在室温下孵育5分钟10．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A）11．小心加入xx微升通透液（Reagent C），覆盖培养孔表面12．在室温下孵育5分钟13．小心抽掉xx微升通透液（Reagent C）14．小心加入xx微升清理液（Reagent A），覆盖培养孔表面15．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A），空气中晾干（注意：由此步骤开始，用户可以进行抗体荧光染色或其它荧光染色）16．小心加入xx微升染色液（Reagent D），覆盖培养孔表面17．室温下孵育10分钟，避免光照18．小心抽掉xx微升染色液（Reagent D）19．小心加入xx微升清理液（Reagent A），覆盖培养孔表面20．即刻在倒置荧光显微镜下进行观察：激发波长350nm，散发波长460nm（细胞核呈现蓝色）二、悬浮细胞染色1．将悬浮细胞（1 X 106细胞）移入到1.5毫升离心管2．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）3．小心抽掉上清液4．小心加入xx微升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群5．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）6．小心抽掉清理液（Reagent A）7．轻轻指弹，松动细胞颗粒群8．一滴一滴加入xx微升－20℃预冷的固定液（Reagent B），混匀细胞颗粒群9．在4℃冰箱里孵育6分钟10．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）11．小心抽掉固定液（Reagent B）12．小心加入xx微升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群13．在室温下孵育5分钟14．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）15．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A）16．小心加入xx微升通透液（Reagent C），混匀细胞颗粒群17．在室温下孵育5分钟18．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）19．小心抽掉xx微升通透液（Reagent C）20．小心加入xx微升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群21．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）22．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A）（注意：由此步骤开始，用户可以进行抗体荧光染色或其它荧光染色）23．小心加入xx微升染色液（Reagent D），混匀细胞颗粒群24．室温下孵育10分钟，避免光照25．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）26．小心抽掉xx微升染色液（Reagent D）27．小心加入xx微升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群28．放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）29．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A）30．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A），混匀细胞颗粒群31．移出5微升到载玻片上，放上盖玻片32．即刻在荧光显微镜下进行观察：激发波长350nm，散发波长460nm（细胞核呈现蓝色）三、载玻片染色1．准备1个细胞载玻片2．小心加上xx微升清理液（Reagent A）3．小心抽掉清理液（Reagent A）4．小心加上xx微升－20℃预冷的固定液（Reagent B），覆盖载玻片表面5．在4℃冰箱里孵育6分钟6．小心抽掉固定液（Reagent B）7．小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖载玻片表面8．在室温下孵育5分钟9．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A）10．小心加上xx微升通透液（Reagent C），覆盖载玻片表面11．在室温下孵育5分钟12．小心抽掉xx微升通透液（Reagent C）13．小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖载玻片表面14．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A），空气中晾干15．重复实验步骤13至14一次（注意：由此步骤开始，用户可以进行抗体荧光染色或其它荧光染色）16．小心加上xx微升染色液（Reagent D），覆盖载玻片表面17．室温下孵育10分钟，避免光照18．小心抽掉xx微升染色液（Reagent D）19．小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖载玻片表面20．小心抽掉xx微升清理液（Reagent A）21．小心加上xx微升抗淬灭液（Reagent E）22．盖上盖玻片23．即刻在荧光显微镜下进行观察：激发波长350nm，散发波长460nm（细胞核呈现蓝色）注意事项1．本产品为100次（4个24孔培养板）和200次（载玻片）操作规格2．本产品友好使用于双重染色或重叠染色3．染色液（Reagent D）为半通透性染料4．操作时须戴手套5．操作时，避免污染母液6．本产品适合各种规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和各种培养孔板，须相应调整试剂溶液：7．本产品可用于悬浮细胞或细胞脱离处理后染色8．本公司提供系列细胞核染色分析试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定荧光清晰。

普鲁士蓝染色液说明书(核固红法)

仅供科研使用版本号：170312普鲁士蓝染色液(核固红法)【产品组成】Component SBJ-0471S2×50mlSBJ-0471M2×100mlStore at试剂(A):Perls stain A1: Perls stain A 25ml 50ml 室温A2: Perls stain B 25ml 50ml 室温临用前，取A1、A2等量混合即为Perlsstain，不宜提前配制。

试剂(B):核固红染色液50ml 100ml 室温，避光【保存条件】4℃,避光,6个月【产品概述】含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素。

Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内。

普鲁士蓝染色用于显示局部组织内的各种出血性病变，常见于吞噬细胞内，可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。

该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广，可以进行复染。

该染色液的复染液采用核固红，是最经典、最常用的复染液。

【使用方法】(一)石蜡切片染色：1、组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。

2、切片厚度4μm，常规脱蜡至水。

3、蒸馏水水洗。

4、切片入Perls stain浸染。

5、蒸馏水充分冲洗。

6、入核固红染色液淡染细胞核。

7、自来水冲洗。

8、常规脱水透明，中性树胶封固(二)冰冻切片染色：1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗。

2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，时间可以相应缩短。

(三)细胞染色：1、4%多聚甲醛固定10～20min。

2、自来水冲洗2次，每次2min。

3、蒸馏水冲洗2次，每次2min。

4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。

【染色结果】含铁血黄素或三价铁蓝色细胞核、其他组织红色【注意事项】1、切片脱蜡应尽量干净。

普鲁士蓝染色试剂盒（增强型）说明书

普鲁士蓝染色试剂盒（增强型）货号：G1428规格：4×2ml （试用装）/4×10ml/4×20ml 保存：-20℃，避光，有效期6个月产品组成：试剂名称4×2ml 4×10ml 4×20ml 保存试剂(A):Perls 染色工作液试剂(A1):Perls A 液1ml5ml 10ml RT,避光试剂(A2):PerlsB 液1ml 5ml 10ml RT 临用前按照1：1混匀即为Perls 染色工作液。

试剂(B)：孵育工作液试剂(B1):孵育浓缩液0.2ml 1ml 2×1ml 4℃，避光试剂(B2):孵育稀释液 1.8ml 9ml 18ml RT临用前按照1：9混匀即为孵育工作液。

试剂(C)：增强工作液试剂(C1):增强A 液 1.9ml 9.5ml 19ml -20℃，避光试剂(C2):增强B 液0.1ml0.5ml1ml4℃，避光临用前按照19：1的比例混匀即为增强工作液。

试剂(D):复染液2ml 10ml 20ml RT,避光产品说明：Perl's 铁染色法是检测细胞和组织中非血红素铁的常用组织化学方法之一，通过形成蓝色的普鲁士蓝沉淀检测骨髓及肝、脾、肾等组织细胞中的铁离子，然而，对于含铁不丰富的器官，如脑组织，运用此法常常由于蓝色沉淀形成过少而无效。

普鲁士蓝染色试剂盒（增强型）利用级联放大的原理对阳性信号进行了放大显示，适用于含铁较不丰富或铁沉积较少的组织铁染色。

自备材料：恒温箱或水浴锅、湿盒、1*PBS 、蒸馏水操作步骤:(仅供参考)1、组织石蜡包埋切成3-7um 的切片2、切片常规脱蜡复水。

试剂盒从冰箱取出复温20min 至室温（25-30℃），湿盒注水置于37℃恒温箱预热20min 。

3、按照1：1的比例配置Perls 染色工作液，滴加到切片上至完全覆盖组织，置于湿盒内37℃孵育20min 。

4、取出切片，蒸馏水轻轻冲洗三次，每次10s ，按照1：9配置孵育工作液。

植物组织铁染色液

植物组织铁染色液简介：Perls 普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)是一种古老而又敏感的显示铁的染色方法，其染色原理在于亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物。

Leagene 植物组织铁染色液是在常规组织切片的Perls 染色基础上再配合水合氯醛透明液的化学透明作用，使得植物材料能从整体上简单、快速的显示铁的分布情况。

该试剂仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。

组成：自备材料：1、种子、胚芽或者其他组织2、刀片3、去离子水或蒸馏水4、光学显微镜操作步骤(仅供参考)：1、用锋利的刀片和解剖针，将胚从种子中解剖出来，去离子水稍洗。

2、将胚浸入新鲜配制的Perls 染色液中，染色，根据不同样本染色时间不完全相同，可根据具体实验自行调整。

3、去离子水漂洗3次，每次。

4、置于水合氯醛透明液中透明或过夜至样本完全透明为止；5、将完全透明的胚置于载玻片上，用刀片将胚薄切，盖上盖玻片，种子不要压，如果是组织切片可稍微压一下。

6、普通显微镜下观察，照相。

编号名称DP0310 2×50mlDP0310 2×100mlStorage试剂(A): Perls stain A1: Perls stain A 25ml 50ml RT A2: Perls stain B25ml50mlRT临用前，取A1、A2等量混合即为Perls stain ，不宜提前配制。

试剂(B): 水合氯醛透明液 50ml100ml RT 避光使用说明书1份染色结果：含铁血黄素或三价铁蓝色阴性对照(可选)：取相同切片或种子入5%草酸孵育2～10h，经Perls stain，其余步骤同上。

结果为阴性。

注意事项：1、整个操作过程中容器要干净，避免用金属铁制品，洗切片和容器时以蒸馏水为宜，因普通水内含铁质。

2、Perls stain不易提前配置，染色前10～15分钟配置即可达到很好的效果。

普鲁士蓝染色步骤

普鲁士蓝染色步骤
普鲁士蓝染色是一种常用的染色方法，以下是普鲁士蓝染色的步骤：
1. 准备样本：选择需要染色的组织或细胞样本，并进行固定处理，以保持其形态结构和细胞膜完整性。

2. 脱水：将样本在一系列浓度逐渐增加的乙醇溶液中脱水，通常从低浓度的乙醇（例如70%）开始，逐渐升级到较高浓度的乙醇（例如100%）。

3. 渗透：将脱水后的样本置于乙醇溶液中进行渗透处理，以便样本能够更好地与染色剂作用。

常用的渗透试剂包括丙酮和二甲苯。

4. 染色：将渗透后的样本放置于普鲁士蓝染色液中，通常是由硫酸亚铁和稀盐酸混合而成的。

样本需要在染色液中浸泡一段时间，以使普鲁士蓝与样本中的铁离子结合形成可见的蓝色沉淀。

5. 漂洗：将染色后的样本用蒸馏水冲洗，以去除多余的染色剂和盐酸残留。

6. 脱色：在经过漂洗后，可以使用酸性醇溶液脱色样本。

常用的酸性醇溶液包括酸醇溶液（一般为1%醋酸、95%乙醇和蒸馏水的混合物）或者酸性甲醇溶液（一般为1%醋酸和99%甲醇的混合物）。

脱色的时间需根据样本的含铁量进行调整。

7. 脱水：将脱色后的样本在乙醇溶液中进行脱水，与步骤2中的脱水过程类似。

8. 渗透：将脱水后的样本进行渗透处理，与步骤3相同。

9. 封片：将渗透后的样本置于合适的封片介质中，如Canada balsam或普鲁士蓝嵌片胶，然后用封片玻片封住样本。

10. 镜检：将封好的样本镜检放置于显微镜下观察，利用光学显微镜即可看到染色的效果。

以上就是普鲁士蓝染色的步骤，通过这一方法可以对含铁物质进行染色，形成蓝色沉淀，从而观察和研究样本中的铁元素分布情况。

钌红染色液

液在植物病虫害组织切品染色中，可将宿主植物组织中菌丝体和孢子染成红色。本试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
名称钌红染色液使用说明书
Байду номын сангаас
编号 DM0201 Storage
10ml RT 避光 1分
操作步骤(仅供参考)：
1、制备好的切片入钌红染色液中，浸染 1-3min。 2、对于较难染色的样本，应适当延长染色时间。
菌丝体和孢子红色编号名称db0082改良番红o固绿软骨染色液dg0005糖原pas染色液dh0006苏木素伊红he染色液dj0001普鲁士蓝染色液核固红法dm0002姬姆萨染色液1
北京雷根生物技术有限公司
钌红染色液
简介：
钌红(Ruthenium Red)分子式为 Ru3O2Cl6.14(NH3)，CAS 号为 11103-72-3，分子量为 786.35，外观为红色晶体，可用做电压敏感的钙离子通道抑制剂。Leagene 钌红染色
染色结果：
菌丝体和孢子
红色
注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 个月有效。
相关：
编号 DB0082 DG0005 DH0006 DJ0001 DM0002 PW0053 TO1013
名称改良番红 O-固绿软骨染色液糖原 PAS 染色液苏木素伊红(HE)染色液普鲁士蓝染色液(核固红法) 姬姆萨染色液(1:9) Western 抗体洗脱液(碱性) 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)