改良番红O-固绿软骨染色液

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番红O染色

番红O固绿染色液
货号M025
原理:
番红(也称作番红O或基本红2)是个用在组织学和细胞学的生物染色剂。

番红在一些染色的实验计划表中用作复染剂，将所有的细胞核染成红色。

这在革兰氏染色和内孢子染色都
试剂盒组成:
操作流程：
1. 石蜡切片脱蜡至水，自来水冲洗3min;
2. (取等量的A液B液混合，即为铁苏木素溶液。

现用现配，用多少配多少，用后丢弃。

混合后的染色液为紫黑色，染色能力强，并不易褪色。

但不易久存，24小时后失去染色能力。

)铁苏木精染色3min;自来水冲洗3min;
3. 盐酸酒精溶液分化3-5Sec；自来水冲洗3min。

4. 入固绿染色液中染色8min；
5. 在1％的醋酸中快速分化3Sec；
6. 速洗1min;
7. 入番红O染色液中染色3min（最多）
8. 95％酒精冲洗浮色；
9. 100%酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封固。

结果：
细胞核呈黑色，细胞浆、软骨下骨区呈绿色，粘蛋白、软骨及钙化软骨、肥大细胞颗粒呈橙色/红色。

染色注意事项:
1.标本固定尽可能用多聚甲醛固定.脱钙后一定要流水冲洗过夜后再脱水包埋.否则番红不
易着色.
2.如果染色不理想可以考虑在细胞核染色后用饱和苦味酸水溶液处理30min,水洗后再入
固绿染色液染色.
3.番红O固绿染色液分化很关键,步骤5、6时要快；步骤8速度要快，否则红色褪色。

四川植物类黄酮测检测试剂盒介绍

四川植物类黄酮测检测试剂盒介绍以下是四川植物类黄酮测检测试剂盒介绍：（1）常规染色液：苏木素伊红（HE）染色液、苏木素伊红混合染色液（一步法）、Harris苏木素、Gill苏木素、Delafield苏木素、Carazzi 苏木素、Core苏木素、伊红染色液（进口水溶）；（2）结蹄组织和肌纤维染色：网状纤维染色液、Masson三色染色液、Pollak三色染色液、天狼星红染色液、Van Gieson染色液、弹力纤维染色液（Gomori醛品红法）、Russell改良Movat五色套染染色液、肌纤维染色液；（3）微生物染色：吉姆萨染色液、瑞氏-吉姆萨复合染色液、抗酸染色液、革兰氏染色液、标准鲁哥氏染色液（Lugol's碘液,1%）、Lugol's 碘液（5%,无菌）、鞭毛染色液、布氏杆菌染色液、幽门螺旋杆菌染色液、麻风杆菌染色液、乙型肝炎病毒染色液、病毒包涵体染色液（亚甲蓝伊红法）、石碳酸复红染色液、改良苯酚品红染色液、螺旋体染色液、异染颗粒染色液、乳酸酚棉蓝染色液、乳酚油、甘油-孔雀绿染色液、甘油-亚甲蓝染色液、印度墨汁、吕氏碱性美蓝染色液、亚甲基蓝染色液；（4）病理沉着物和色素染色：普鲁士蓝染色液、Masson-Fontana 黑色素染色液、脂褐素染色液、钙盐染色液、尿酸盐染色液、茜素红S染色液；（5）碳水化合物染色：糖原PAS染色液、AB-PAS染色液、黏液卡红染色液、黏液HID-AB染色液、Alcian阿利新蓝染色液（pH2.5）、黏蛋白染色液、淀粉样物质染色液、纤维素染色液；（6）神经组织染色：Luxol Fast Blue髓鞘染色液、改良Bielschowsky 神经染色液、尼氏染色液（焦油紫法）、核仁组成区嗜银蛋白染色液（AgNOR Stain）；（7）脂类和核酸类染色：油红O染色液、苏丹黑B染色液、甲基绿-派络宁染色液；（8）酶类染色：碱性磷酸酶染色液、酸性磷酸酶染色液、乙酰胆碱酯酶染色液、α-乙酸萘酚酯酶染色液（α-NAE法）、葡萄糖-6-磷酸酶染色液、ATPase染色液（钙钴法）、琥珀酸脱氢酶染色液、乳酸脱氢酶染色液（四唑盐法）、过氧化物酶染色液；（9）骨类染色：改良番红O-固绿软骨染色液、Goldner三色染色液；（10）植物染色：醋酸洋红染色液、花粉活力染色液（TTC法）、GUS染色液、亚历山大染色液；（11）细胞染色：巴氏染色液、迪夫染色液、台盼蓝染色液、中性红染色液、网织红细胞染色液、詹纳斯绿B染色液、线粒体染色液、甲苯胺蓝染色液、红细胞/白细胞/血小板/精子计数稀释液、精子活体染色液、精子形态学染色液、DAPI染色液、Heinz小体染色液、基底膜六胺银染色液、碱性蛋白染色液；（12）染色其他：硫堇染色液、脱氧胆酸钠溶液、溶液（1%）、酸性乙醇分化液（1%）等；（13）指示剂：刚果红指示剂、溴酚蓝指示剂、酚酞指示剂、绿-甲基红指示剂等。

三种染色方法观察骨骺损伤后骨桥形成过程的组织形态学特征

三种染色方法观察骨骺损伤后骨桥形成过程的组织形态学特征潘源城;张信照;陈顺有【摘要】背景:国内外的研究表明,多种染色法联合应用有利于探究骨与软骨组织疾病的形态学表现.目前对于多种染色法探究骨骺损伤后骨桥形成过程的组织形态学表现研究较少.目的:通过苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色、Masson染色3种染色方法观察骨骺损伤后骨桥形成过程的组织形态表现.方法:SD大鼠40只由福建中医药大学实验动物中心提供,实验方案经福建中医药大学动物实验伦理委员会批准.随机将40只SD大鼠分为2组:对照组不做处理;模型组建立胫骨近端骨骺损伤模型.分别于造模后1,7,28 d拍摄X射线片和7,28 d行MRI扫描;于造模后1,7,14,28 d麻醉大鼠后取胫骨损伤区组织,行苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色、Masson染色,观察术后不同时间点生长板损伤区的组织形态表现.结果与结论:①X射线片显示:造模后1 d,胫骨干骺端骨骺损伤,软骨膜周围生长板间隙增宽;第7天,骨骺损伤处骨膜反应明显;第28天,骨膜反应消失,干骺端与生长板间隙关系基本恢复正常;MRI显示:造模后第28天MRI T2WI示骺板模糊,并可见一黑色线条形低信号影,提示骨桥形成;②造模后第1天,3种染色均可显示入侵的血管,Masson染色更为清晰;第7天:苏木精-伊红染色较番红固绿染色及Masson染色显示了损伤区软骨细胞的形态变化更加明显;第14天,番红O-固绿染色生长板与骨桥对比鲜明,Masson染色可观察到骨桥内尚未骨化的纤维血管组织;第28天,苏木精-伊红染色软骨细胞的周期性形态变化较明显,番红O-固绿染色骨桥和生长板形态分明,可清晰的表现损伤区生长板的压缩性改变;③结果说明,3种染色方法的联合应用能够全面、客观地探究骨骺损伤后骨桥形成过程的组织形态学表现.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2019(023)023【总页数】5页(P3649-3653)【关键词】染色方法;骨骺损伤;骨桥;骨膜;组织学;苏木精-伊红染色;翻红O-固绿染色;Masson染色【作者】潘源城;张信照;陈顺有【作者单位】厦门大学附属福州第二医院小儿骨科,福建省福州市 350007;厦门大学附属福州第二医院小儿骨科,福建省福州市 350007;厦门大学附属福州第二医院小儿骨科,福建省福州市 350007【正文语种】中文【中图分类】R446;R3180 引言 Introduction生长板是长骨内最薄弱的区域，也是最容易受损的区域，损伤的生长板常被骨组织修复而导致肢体的骨生长障碍和成角畸形[1-2]。

MMP-9和VEGF在膝关节骨性关节炎软骨中的表达及意义

膝关节骨性关节炎是一个进行性慢性退变性病理改变的过程，骨关节炎最早且最容易出现的发病部位在关节软骨[1]。

正常情况下关节软骨细胞与细胞外基质的合成与降解处于一个动态平衡状态，当这种状态调控失衡后，软骨细胞外基质被破坏[2]。

基质金属蛋白酶-9（matrix me-talloproteinase-9，MMP-9）是降解细胞外基质的主要蛋白酶，当受MMP-9降解作用的影响，软骨细胞外基质可被进行性降解而破坏，进而参与膝关节骨关节炎的病理改变[3]。

此外，当关节软骨出现退变时，软骨、骨与软骨接合处以及关节滑膜组织中血管分布显著增加。

而血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor ，VEGF ）可特异性与血管内皮细胞结合，由此改善血管通透性，以促进血管内皮细胞增生，使新生血管形成。

研究显示，其也可能参加了膝关节骨性关节炎中关节软骨及软骨细胞外基质病理改变的过程[4]。

本研究选取膝关节骨性关节炎行人工关节置换术中截骨去除的软骨组织作为研究对象，通过免疫组化检测软骨组织的MMP-9、VEGF 的表达，探讨MMP-9、VEGF 在膝骨关节炎中的表达及意义。

1材料与方法1.1研究对象及分组选取2018年10月—2020年1月宁夏医科大学总医院膝关节骨关节炎患者行人工全膝关节置换术35例，作为观察组，其中男性11例，女性24例，年龄63~78岁，平均年龄（67.2±0.5）岁；膝关节外伤患者行关节镜手术治疗13例，作为对照组，其中男性10例，女性3例，年龄19~55岁，平均年龄（32.5±0.5）岁。

本研究已取得患者与患者家属的知情同意且获得宁夏医科大学总医院科研伦理委员会批准。

1.2标本收集及处理观察组取术中关节成形截除的股骨髁软骨，对照组取因损伤脱落需要清理的股骨髁软骨。

观MMP-9和VEGF 在膝关节骨性关节炎软骨中的表达及意义陈德胜1，张学森2，张晨3，宋国瑞3，刘子歌3，郭凤英4，李燕4（1.宁夏医科大学总医院骨一科，银川750004；2.吴忠市人民医院骨二科，吴忠751100；3.宁夏医科大学临床医学院，银川750004；4.宁夏医科大学基础医学院，银川750004）文章编号：1674-6309（2020）07-0678-05·论著·收稿日期：2020-02-14项目基金：国家自然科学基金（81760405；81760395；81560364）；宁夏自然科学基金重点项目（2018AAC02013）；宁夏医科大学校级课题重点项目（XZ2018014）作者简介：陈德胜（1972-），男，广东人，医学博士，教授，主任医师，硕士研究生导师，研究方向：人工关节临床与基础研究。

番红染色原理

番红染色原理
番红(也称作番红O或基本红2或藏红T)是个用在组织学和细胞学的生物染色剂。

番红在一些染色的实验计划表中用作复染剂，将所有的细胞核染成红色。

这在革兰氏染色和内孢子染色都是典型的复染剂。

它也可以被用来检测软骨、黏蛋白和肥大细胞的颗粒。

番红是从藏红花柱头中提取的一种天然染色剂，为橙红色粉末。

是植物组织学实验中最常用的染色剂之一。

可溶解于水和乙醇。

通常配成1%水溶液染植物的木质部，也可以按照以下配方配成苯胺番红液对组织进行块染：番红5g，95%乙醇50mL，苯胺20mL，蒸馏水450mL。

番红能够对植物的木质化、栓质化和角质化部分进行染色，对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。

染色时间一般为2~24hrs，常与固绿等进行合作染色。

番红固绿染色(骨组织)染色步骤

番红固绿染色(骨组织)染色步骤下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢!而且本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you!In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!骨组织的染色是在病理学中常见的一种技术，用于观察骨组织的微观结构和染色表现，从而帮助医生做出诊断和治疗方案。

豆腐果苷对关节失稳模型骨关节炎的作用及机制

网络出版时间：２０２３－０７－２５１１：２３：４４　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０７２４．１３４２．０２０◇抗炎免疫药理学◇豆腐果苷对关节失稳模型骨关节炎的作用及机制刘格格１，刘　冉１，邱本峰１，何雪臖１，陈信言１，黄蕴哲１，贾元威２，ＳｈｉｚｈａｎｇＬＩＮＧ２，３，沈　杰２（皖南医学院１．研究生院，２．第一附属医院（弋矶山医院），３．神经系统疾病转化医学研究中心，神经外科学系，安徽芜湖　２４１００１）收稿日期：２０２３－０２－１０，修回日期：２０２３－０４－１１基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１５０３２３６）；弋矶山医院引进人才科研基金资助项目（ＮｏＹＲ２０１９１３，ＹＲ２０２０１５）；皖南医学院弋矶山医院科研能力“高峰”培育计划（ＮｏＧＦ２０１９Ｊ０５，ＧＦ２０１９Ｊ０６）；皖南医学院弋矶山医院科技创新团队“攀峰”培育计划（ＮｏＫＰＦ２０１９０１６）作者简介：刘格格（１９９７－），女，硕士生，研究方向：临床药理学，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｇｅｇｅ２８０２５２＠１６３．ｃｏｍ；沈　杰（１９７７－），男，博士，研究员，研究方向：临床药理学，通信作者，Ｅｍａｉｌ：ｊｉｅ＿ｓｈｅｎ２３＠ａｌｉｙｕｎ．ｃｏｍ；ＳｈｉｚｈａｎｇＬＩＮＧ（１９６７－），男，博士，教授，通信作者，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｎｇｓｚ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２１００２２文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０８－１４５７－０７中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ２８５５；Ｒ３２２７２；Ｒ６８４３；Ｒ９１６４摘要：目的　研究豆腐果苷对关节失稳模型骨关节炎（ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＯＡ）的治疗作用，探讨豆腐果苷治疗ＯＡ的作用机制。

方法　通过切除大鼠膝关节内侧半月板的方法（ｍｅｄｉａｌｍｅｎｉｓｃｅｃｔｏｍｙ，ＭＭｘ）建立ＯＡ大鼠模型。

改良番红 O-固绿软骨染色液说明书

试剂(B): 酸性乙醇分化液
100ml/50ml
RT
1份
1年
试剂(C): 固绿染色液
100ml/50ml
RT
1份
1年
试剂(D): Safranin O Stain
100ml/50ml
RT
1份
1年
试剂(E): 乙酸溶液100ml/50ml NhomakorabeaRT
1份
1年
自备材料：
1、10%福尔马林固定液 2、脱钙液 3、蒸馏水 4、系列乙醇
操作步骤(仅供参考)： 1、标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片，常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水。 2、入新鲜配制的 Weigert 染液染色 3～5min。 3、酸性乙醇分化液分化 15s，蒸馏水洗 1min。 4、入固绿染色液浸染 1.5～3min，蒸馏水洗 1min。 5、入 Safranin O Stain 内浸染 2～5min，蒸馏水洗 1min。 6、用乙酸溶液洗涤切片 1～2min，以便去除残留的固绿，蒸馏水洗 1min。 7、分别用 95%乙醇、无水乙醇脱水。 8、二甲苯或脱蜡透明液透明，光学树脂封固。
改良番红 O-固绿软骨染色液说明书
本产品仅供体外研究使用，不得用于临床诊断
产品简介：软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨，软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨，软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红 O 法等。
改良番红 O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红 O 结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。番红 O 是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合，番红 O 着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布；当软骨受到损伤时软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红 O 淡染或不着色，通过图像分析软件可对番红 O 染色的软骨基质进行定量分析，固绿与胶原纤维结合，不宜褪色，番红 O固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。该试剂仅适用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

番红O快绿染色

1、0.02%固绿溶液：固绿0.02g，蒸馏水100ml2、0.1%番红O溶液：番红0.1g，蒸馏水100ml3、1%盐酸酒精分化液：弄HCI1份，95%乙醇99份染色1、石蜡切片脱蜡至水2、苏木精染细胞核1-3min，显微镜观察染色情况决定染色时间长短3、自来水充分洗涤，去除残留苏木精。

4、1%盐酸酒精分化15-30s，分化时间视颜色深浅而定。

5、自来水充分洗涤，去除残留染液。

6、0.02%固绿水溶液染色3min，固绿为一种酸性染料，呈碱性细胞质或细胞外基质呈绿色7、1%冰醋酸洗涤切片，去除残留固绿8、0.1%番红O染色3min，番红是一种碱性染料，呈酸性细胞质或细胞外基质呈橙黄/红色。

9、95%乙醇侵洗，洗去残留番红10、95%乙醇、无水乙醇脱水、二甲苯透明，中性树胶封片。

1、石蜡切片脱蜡至水2、Weigert氏苏木素染色3分钟3、1%盐酸酒精分化4、水洗5、0.2%固绿水溶液内染色5分钟6、水洗7、0.1%番红O水溶液内染色1-2分钟8、水洗9、0.1%醋酸水溶液分化10、水洗11、95%乙醇、无水乙醇脱水、二甲苯透明，中性树胶封片。

Solutions and Reagents:Weigert's Iron Hematoxylin Solution:Stock Solution A:Hematoxylin ----------------------------- 1 g95% Alcohol ----------------------------- 100 mlStock Solution B:29% Ferric chloride in water ----------- 4 mlDistilled water -------------------------- 95 mlHydrochloric acid, concentrated ---- 1mlWeigert's Iron Hematoxylin Working Solution:Mix equal parts of stock solution A and B. This working solution is stable for about 4 weeks.0.05% Fast Green (FCF) Solution:Fast green, FCF, C.I. 42053 ------------- 0.5 gDistilled water ---------------------------- 1000 ml1% Acetic Acid Solution:Acetic acid, glacial ------------------------- 1 mlDistilled water ------------------------------ 99 ml0.1% Safranin O Solution:Safranin O, C.I. 50240 -------------------- 0.1 gDistilled water ----------------------------- 100 mlProcedure:1. Deparaffinize and hydrate slides to distilled water.2. Stain with Weigert’s iron hematoxylin working solution for 10minutes.3. Wash in running tap water for 10 minutes.4. Stain with fast green (FCF) solution for 5 minutes.5. Rinse quickly with 1% acetic acid solution for no more than 10 –15seconds.6. Stain in 0.1% safranin O solution for 5 minutes.7. Dehydrate and clear with 95% ethyl alcohol, absolute ethyl alcohol,and xylene, using 2 changes each, 2 minutes each.8. Mount using resinous medium.。

软骨细胞特殊染色技术的比较与应用

软骨细胞特殊染色技术的比较与应用于斐;曾晖;于红燕;雷鸣;袁昊;肖德明【摘要】Objective To compare the advantages and values of several special staining methods of chondrocytes . Methods Twelve 7-day old healthy C57BL/6J mice were killed to obtain the cartilage tissue of the knee joint in order to isolate the chondrycytes .Type II collagen was used to assess the chondrocytes .Then the chondrocyte climbing slices were prepared.The materials were fixed, and HE staining, Safranin O-fast green staining, SA-β-gal staining and immunohistochemical staining of Type II collagen were performed and compared .Results HE staining showed clear morphology of the chondrocytes .The cell nuclei were stained blue and the cytoplasm was pink .Safranin O-fast green staining showed that the nuclei were pink and the cytoplasm green .SA-β-gal staining showed that the aging cells were green while the young cells werecolorless .Immunohistochemical staining of type II collagen showed the distribution of type II collagen and they were stained brown while the cell nuclei were blue .Conclusions HE staining and safranin O-fast green staining can provide more information than the other staining techniques .SA-β-gal staining is useful in the analysis of aging chondrocytes .Immunohistochemical of type II collagen can be used to study type II collagen .%目的：探讨多种特殊染色技术在软骨细胞中的染色规律及其应用价值。

钌红染色液

北京雷根生物技术有限公司
钌红染色液
简介：
钌红(Ruthenium Red)分子式为 Ru3O2Cl6.14(NH3)，CAS 号为 11103-72-3，分子量为 786.35，外观为红色晶体，可用做电压敏感的钙离子通道抑制剂。Leagene 钌红染色
液在植物病虫害组织切品染色中，可将宿主植物组织中菌丝体和孢子染成红色。本试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
有效期： 12 个月有效。
相关：
编号 DB0082 DG0005 DH0006 DJ0001 DM0002 PW0053 TO1013
名称改良番红 O-固绿软骨染色液糖原 PAS 染色液苏木素伊红(HE)染色液普鲁士蓝染色液(核固红法) 姬姆萨染色液(1:9) Western 抗体洗脱液(碱性) 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)
组成：
名称钌红染色液使用说明书
编号 DM0201 Storage
10ml RT 避光 1分
操作步骤(仅供参考)：
1、制备好的切片入钌红染色液中，浸染 1-3min。 2、对于较难染色的样本，应适当延长染色时间。
染色结果：
菌丝体和孢子ຫໍສະໝຸດ 红色注意事项：1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

番红O-固绿染色在关节组织学应用的改进

９９９９５６．
本研究采用了一种改良的免疫细胞化学方法，在树脂包即埋的切片上进行增殖和凋亡相关蛋白的定位表达，通过原位并末端标记法检测凋亡细胞。此免疫细胞化学方法的采用最初是
现这些蛋白的阳性表达。因此，着切片的厚度和抗原种类的随
ｔｅａｉｉ—ｉｔｅｈｉｕ［］Ｈｉｏｈｍ，１９，７（）ｈｖｎｂｏｉｔｃｎｑｅＪ．ｓｅｅＪ９５２３：ｄｎｔ
２４２９００．
ｐｒｘｄｒａｃｈｏｉｏｉｍｙｒｘｄｎｔｍｍｕｏｙｏｈｍｉｌｅｏｉｅｏｌｏｌｓｄｕｈｄｏｅＯｈｅｉｃｉｎｃｔｃｅｃａ
ｄｔｃｏｆｒｗｈｈｒｎｎｒｌｔｆｒｓｕｆａｉ］ｅｔｎｏｏｔｏｍｏｅｄｐｏａｉａｅｍｉｍｘｔｎＥ．ＪｅｉｇａｃｎｔｏｉｏＪ
结构。
３讨论
方法的优点是明显的，是对某些抗原的表达还有一定的局限但
性，要进一步的研究。需
参考文献
ＫｅｌｎｂｒｅＥ，ＤｉｒｎｅｇｅＭ，ＶｉｉｒｌｅｅｇｒｉｅｂｒｒｒｌｇｅＷ，ｅａ．Ｔｈｌｔ１ｅ
ＨｉｔｃｅＣｙｏｈｍ，１７，７９：２０１９．ｓｏｈｍｔｃｅ９９２（）１９ —２２ＶｉａｄｌＳ，Ｌｏｂｒｒ，ＳｎｈｅｍａｄｅｏＭａｃｚＰ，ｅ１Ａｎｅｓｅｈｄｆｒｔａ．ａｙｍｔｏｏｔｅｒｍｏａｏｆＥｐｎｒｓｎｆｏｓｍｉｈｎｓｃｉｎ．Ａｐｌａｉｆｈｅｖｏｅｉｒｍｅ — ｉｅｔｓｔｏｐｉｔｃｏｎｏ

A-PRF促进兔膝关节骨软骨损伤愈合的观察

A-PRF促进兔膝关节骨软骨损伤愈合的观察朱泽宇;吕成奇;刘旭凌;陈昱璐;邹德荣;陆家瑜【期刊名称】《上海交通大学学报(医学版)》【年(卷),期】2024(44)1【摘要】目的·探讨改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin,A-PRF)在骨软骨再生中的作用。

方法·获取新西兰兔骨髓间充质干细胞(bone-marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)和膝关节软骨细胞;通过低速离心兔心脏血液获得A-PRF。

采用光学显微镜观察A-PRF的组织学结构;ELISA法检测A-PRF中生长因子,包括血小板衍生生长因子、转化生长因子-β、胰岛素样生长因子、血管内皮生长因子、表皮生长因子和成纤维细胞生长因子的释放;采用活/死细胞双染法及MTT法检测A-PRF对兔BMSCs细胞毒性及增殖情况的影响;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测A-PRF对兔BMSCsⅡ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)基因表达的影响;使用transwell小室测定A-PRF对于兔BMSCs以及软骨细胞迁移能力的影响。

建立兔膝关节骨软骨缺损模型,将18只兔随机分为3组:A-PRF组(n=6)在缺损处植入A-PRF;A-PRF+BMSCs组(n=6)植入接种兔BMSCs的A-PRF;对照组(n=6)不进行植入操作。

术后12周处死兔,采用苏木精-伊红(H-E)、甲苯胺蓝和番红O-固绿染色进行膝关节标本的组织学观察,并根据膝关节的表面形态学与组织学情况,采用国际软骨修复协会(International Cartilage Repair Society,ICRS)评分系统进行宏观与组织学评分。

结果·A-PRF具有松散的网络结构,可以缓慢释放生长因子。

加入A-PRF后,未观察到其对兔BMSCs具有细胞毒性;在加入A-PRF后24、48和72 h,BMSCs的增殖能力均明显升高(均P<0.05),成软骨相关基因Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖,以及成骨相关基因ALP和OCN均显著上调(均P<0.05)。

大鼠膝关节软骨不同染色方法的差异

大鼠膝关节软骨不同染色方法的差异高改霞;卫小春;李凯;卫建平【摘要】背景:国内外学者对关节软骨对软骨进行了大量研究,需要用不同的染色方法对研究结果进行分析,但将多种染色方法同时应用于软骨研究及探讨染色机制的较少.目的:探讨不同染色方法对大鼠膝关节软骨染色的优缺点.方法:取正常大鼠膝关节软骨,行苏木精-伊红、番红O、阿尔辛蓝、甲苯胺蓝、番红-阿尔辛蓝、番红-固绿染色,观察软骨结构. 结果与结论:苏木精-伊红、番红O、甲苯胺蓝染色均可观察到潮线,分别为蓝色、红色和蓝色,番红O和甲苯胺蓝染色强度朝潮线方向增强,番红O染色对潮线的观察优于其他染色方法.苏木精-伊红染色关节软骨4层结构清晰,软骨细胞呈柱状排列,基质呈均匀呈嗜碱性染色.番红O染色显示4层结构层次清楚,基质深层染色最红.阿尔辛蓝染色显示,pH 1.0时软骨细胞周边部分被阿尔辛蓝强烈染色,pH 2.5时阿尔辛蓝染色较深.甲苯胺蓝染色显示组织结构层欠清,胞核染色清晰,胞浆几乎不着色,基质呈淡蓝紫色.番红-阿尔辛蓝染色显示软骨表面及基质呈不均一的红色,深层颜色较深,软骨细胞周围蓝染;番红-固绿染色显示软骨基质呈均匀的红色,软骨下骨呈绿色,软骨组织与骨组织分对比鲜明.提示上述各种方法均可观察到软骨的四层结构,但以番红O染色显示软骨各层和潮线结构最佳;苏木精-伊红染色观察软骨细胞形态变化较其他方法清楚.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2010(014)024【总页数】5页(P4385-4389)【关键词】关节软骨;染色方法;优缺点;大鼠;膝关节;软骨组织工程【作者】高改霞;卫小春;李凯;卫建平【作者单位】山西医科大学第二医院病理科,山西省太原市,030001;山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,030001;山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,030001;山西医科大学第二医院病理科,山西省太原市,030001【正文语种】中文【中图分类】R3180 引言关节软骨位于活动关节的表面，是一种高度特异的连接组织，仅有少量的细胞分布[1]。

western实验步骤与注意事项

葵花宝典致亲爱的师弟师妹：本着不希望你们来到实验面临一些束手无策的窘境，师姐在这里把自己所学和资源略写一二。

一、来到实验室，无论你喜欢不喜欢，乐不乐意，一定要把实验室的师兄师姐的名字都记住，以及实验室里有什么仪器！！！二、关于实验部分1、组织蛋白提取：方法一：（1）4℃下，先生理盐水洗，再加入蛋白提取液，剪刀剪碎，匀质器6000，循环六次，每次都拿下来冰镇，防止蛋白变性，最后14000转，20min，4℃（2）跑western之前，需测BCA，以保证每个组分上样的蛋白总质量一样（此处为定量实验，看目标蛋白的表达量，若仅仅定性则无需做BCA）注意事项：匀质器需要用的小管和玻璃球在郝荣华师姐那里，先加玻璃球一般，目测大概三四毫米高度就行（包括管底小尖尖），且溶液必须装满才振荡效果好，因此，加入细胞裂解液多，容易导致蛋白浓度低。

方法二：（1）取冰（东边实验室，最后面有制冰机）（2）将软骨从﹣80℃冰箱取出，置于冰面上解冻（3）去细胞室的液氮罐里，取出少量液氮置于泡沫箱内，（4）转移至实验室内，取出少量，倒入研钵中，研磨（5）浆糊状，立即转入EP管中，（6）细胞裂解液，2、western blotting（1）抗体购买1. Antigen,也就是抗原名称,最好是英文全称,许多客户只说简称,要知道不同的抗体其简称有可能会一样的.有中文最好也提供一下.2. Reactivity,即反应性,也就是实验用于什么特种,是人,大鼠还是小鼠等3. Host,宿主,就是抗体来源,这个主要和二抗有关系。

一抗来源必须要和二抗搭配,且不能和样本来源相同。

比如,二抗是羊抗小鼠,一抗就要选择小鼠来源的.不少客户常常是先有二抗,再买一抗,受限制得很,其实应该先订一抗,再买二抗,毕竟一抗贵,为了将就一个100元左右的二抗,而把几千元的一抗的订购弄得很复杂,真是不划算.所以,不要为了二抗伤脑筋4. Conjugate,即缀合物或标记物,如是不是需要FITC标记,HRP标记等情况,也最好说明5. Applications,就是应用. 你买这个抗体用于做什么实验,是IHC还是WB,这点一定要说,要知道,抗体开发出来,不是什么实验都能用或都会效果好,抗体公司说明上写着能做的实验是经过验证的,没有写的不是说一定不能做,也可能可以做,但没有验证,厂家不会乱说的,也是科学，负责的态度.例如,你要是想做IHC-P,就是石蜡切处的免疫组化,如果买不到抗体明确说可以做,你要用就得冒风险,好在现在抗体厂家众多一般都找得到了（2）β-actin（内参蛋白）分子质量为43KD，因此，目标蛋白不能和内参蛋白分子质量一致，内参也叫看家基因，在组织或细胞中都会表达，且表达量在不同组织或细胞中几乎是相同的，一般有β-ACTIN，GAPDH等。

过量氟对小鼠髁突软骨损伤及自噬相关因子LC3、p62表达的影响

过量氟对小鼠髁突软骨损伤及自噬相关因子LC3、p62表达的影响郁莹;翁清清;罗银月;姚姝冉;易芳羽;张颖【期刊名称】《上海口腔医学》【年(卷),期】2024(33)2【摘要】目的:研究过量氟对小鼠髁突软骨损伤及髁突软骨中自噬相关因子的表达。

方法:将30只4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和实验组,每组15只,对照组自由饮用去离子水,实验组自由饮用含氟离子浓度为75 mg/L的去离子水,持续喂养8周。

通过改良番红O-固绿软骨染色观察髁突纤维软骨层结构变化;免疫组织化学染色检测软骨细胞外基质降解标志物基质金属蛋白酶13(Matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、Ⅱ型胶原蛋白的表达水平及自噬相关因子微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)、自噬底物蛋白p62的表达水平。

采用SPSS 22.0软件包对免疫组织化学染色半定量结果进行双因素方差分析。

结果:与对照组相比,实验组纤维软骨层变薄,软骨细胞体积变小,核变小,染色加深。

免疫组织化学染色结果显示,实验组MMP-13表达量增加,Ⅱ型胶原蛋白表达量降低;LC3表达量增加,p62表达量下降。

结论:用含氟离子浓度为75 mg/L的去离子水喂养小鼠8周,可导致髁突软骨退变,髁突软骨发生自噬。

【总页数】4页(P113-116)【作者】郁莹;翁清清;罗银月;姚姝冉;易芳羽;张颖【作者单位】复旦大学附属口腔医院;上海市颅颌面发育与疾病重点实验室;海军军医大学第一附属医院长海医院口腔科【正文语种】中文【中图分类】R780【相关文献】1.缺氧缺糖诱导心肌细胞损伤中Notch信号对HIF-α及自噬相关基因Beclin1,LC3Ⅰ,LC3Ⅱ表达的影响2.自噬相关因子LC3及Beclin1在大鼠发育性髋关节发育不良早期退变关节软骨中的表达及意义3.早期结直肠癌内镜黏膜下剥离术标本中PDCD4和自噬相关因子LC3Ⅱ、p62的表达及其意义4.微生物感染对稽留流产患者自噬相关蛋白Beclin1、LC3及P62表达水平的影响5.三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

番红固绿染色方法

番红固绿染色方法
番红固绿染色方法是一种常用的染色技术，在生物医学研究和临床分
析中应用广泛。

它以番红和固绿为染料，能够有效地染色细胞核和细
胞质，使细胞结构更加清晰，便于观察和分析。

要进行番红固绿染色，首先需要制备好染液。

其中，番红染液可以使
用0.5％番红酸液、0.1％酸性酒精、0.1％苏木精和去离子水混合而成。

固绿染液可以使用0.5％固绿酸液、95％酒精、0.1％醋酸和去离子水
混合而成。

准备好的染液需要过滤，以去除其中的杂质和颗粒物。

进行染色时，首先需要取适量的细胞样本，将其固定在载玻片上。

常
用的固定剂有甲醛、乙醛、丙酮等。

固定后，将载玻片放置在番红染
液中，加热10-15分钟。

然后用去离子水洗涤，干燥后再将载玻片放
入固绿染液中，加热5-10分钟。

最后用酒精脱水和透明剂封片即可。

需要注意的是，在染色过程中要掌握好加热的时间和温度，否则会使
染色效果不理想。

此外，番红和固绿的染色时间也需要控制好，以免
过度染色或染色不足。

番红固绿染色方法具有染色效果好、操作简便、快速等优点，并且与
其他染色法相比具有更高的特异性和敏感性。

在常规的细胞学实验和
病理学诊断中，番红固绿染色方法都是不可或缺的重要技术手段。

总之，番红固绿染色方法在生物医学领域中应用广泛，它是一种简单、快速、有效的染色技术，能够帮助科研人员和临床医生更好地观察和
分析细胞和组织结构，为研究疾病的发生和治疗提供重要的帮助。

软骨染色液(甲苯胺蓝法)

北京雷根生物技术有限公司
软骨染色液(甲苯胺蓝法)
简介：
甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。

甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、常规脱钙，包埋、固定。

2、石蜡切片入二甲苯。

3、系列乙醇各，自来水洗。

4、入软骨染色液浸染。

5、自来水洗。

6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。

7、逐级乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

注意事项：
1、针对于较难着色组织的染色，浸染的时间应相应延长。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号名称 DB0057 Storage 软骨染色液(甲苯胺蓝法) 100ml RT 避光使用说明书 1份。

蕃红O在软骨研究中的组织学应用

蕃红O在软骨研究中的组织学应用软骨是一种特殊的结缔组织，再生和修复能力差，发生病变或损伤后本身不能再生。

在关节炎等疾病的研究中经常需要对关节软骨进行特殊染色以观察软骨的组织学改变。

由于软骨基质含大量阴离子基团，故多采用阳离子染料进行染色。

蕃红O被证明是一种很好的对软骨基质蛋白多糖进行组织化学定量的阳离子染料，并且切片上的染色分布始终一致[1]。

1.关节软骨的解剖学特点关节软骨为透明软骨，附着于运动关节的骨性关节面，厚度约为1-5mm,表面光滑，无血管、淋巴和神经组织分布，可减少关节活动过程中产生的磨擦和压力分布，具有支撑重量和减少磨擦的作用。

软骨细胞分泌细胞外基质，基质呈凝胶状，主要成分是蛋白多糖和水，其蛋白多糖与疏松结缔组织中的类似，也构成分子筛结构。

软骨基质具有良好的可渗透性，从软骨膜血管渗出的营养物质可抵达软骨深部。

纤维成分埋于基质中，由II型胶原蛋白聚集而成，使软骨具有韧性或弹性。

根据关节软骨的微细解剖结构和超微结构特点，依照软骨细胞和纤维的形态结构关节软骨可分4层[2]。

I层：切线层，细胞扁平，排列于表面平行，胶原含量丰富，蛋白聚糖含量少。

II 层：为中间层，该层细胞稍大，胶原纤维斜行排列，蛋白聚糖含量较多。

III层：辐射层或称深层，该层细胞大而圆，呈柱状，与表面垂直排列，蛋白聚糖含量丰富,于发育成熟的动物标本中可见到潮线结构。

IV层：钙化软骨层，与软骨下骨板相连，分隔有血管的软骨下骨和无血管的关节软骨的结构。

含有丰富的羟基磷灰石，细胞较少，胶原粗大，呈拱形走向深层。

2.蕃红O的结构特点番红O是一种阳离子染料，国外学者研究表明番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子结合，与胶原不结合[3]。

蕃红O将化学计量与多聚阴离子结合起来，表明一种染料分子与硫酸软骨素-6或硫酸角质素的每一个带电阴离子基团结合。

已经证明蛋白聚糖分子至少90％的重量由带负电荷的葡萄糖胺聚糖组成。

大多数蛋白聚糖包含有一个核心蛋白，此核心蛋白与葡萄糖胺聚糖的硫酸根部分（sGAG）共价连接。