药敏试验及CLSI标准更新_马筱玲
细菌药物敏感性试验及标准化0课件
细菌药物敏感性试验及标准化0
5．链阳性素（streptogranin） RP59500是一种由两个半合成的链阳性菌素组 成，即由链阳性菌素B（喹奴普宁，quinupristim） 和链阳性菌素A（达福普宁，dalfopristim）以30： 70比例组成的化合物，可治疗各种耐药菌所引起 的重症感染，包括MRSA菌血症、肠球菌性菌血 症，不良反应少，可作为万古霉素的替代药物， 用于治疗不能耐受万古霉素治疗的病人。
程
冷却至50摄氏度左右调节pH至7.2-7.4 （加添加剂）
制板，厚度为4mm，水平
冷却至室温使用或储存
注意事项： 1、全程无菌操作 2、湿度控制
3、胸腺嘧啶核苷或胸腺嘧啶的影响
4、培养基用水
5、质控
细菌药物敏感性试验及标准化0
培养基
Mueller-Hinton琼脂培养基（非苛氧菌） HTM培养基：其组成成分如下：M-H琼脂粉；15µɡ/ml牛羟基血红素；
头孢噻肟（ cefotaxime）对肠杆菌科细菌的作 用优于其他第三代品种，对酶稳定，毒性低；但在 体内代谢，抗菌作用减弱，严重感染用药量需高； 此外，对绿脓作用较差。
细菌药物敏感性试验及标准化0
头孢他啶（ceftazidime）是头孢菌素中对 绿脓杆菌作用最优的品种，对不动杆菌属、葡 萄糖不发酵革兰阴性杆菌也有一定作用；毒性 低，几无肾毒性；对β-内酰胺酶稳定；对免疫 功能不全者感染具有良好疗效。
细菌药物敏感性试验及标准化0
克拉维酸（clavulanic acid）和舒巴坦 （sulbactam）他唑巴坦三种β-内酰胺类的抑制 剂，与青霉素或头孢菌素类联合应用时，可保 护β-内酰胺类药物不被酶破坏，扩大临床应用 适应症。
CLSI M S 第 版 主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读张雅薇? ? 王辉（通讯作者）北京大学人民医院检验科此文发表在《中华检验医学杂志》2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC 折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
美国CLSI抗菌药物敏感试验操作标准(2010年版)部分变更内容
高考作文写作评价方法介绍高考是每个学生的重要里程碑，而作文是其中一项重要的考核内容。
作文的评价方法对于学生的写作水平的提升至关重要。
本文将介绍高考作文写作评价的几种常见方法。
1. 主题表达能力评价主题表达能力是作文的核心，评价主题表达能力主要从以下几个方面考量：是否明确准确地表达了作文的中心思想；是否围绕主题进行展开，避免偏离主题；是否对主题进行深入的分析与探讨。
2. 文章结构评价文章结构是作文的基础，评价文章结构主要从以下几个方面考量：是否有明确的开头、中间和结尾；是否合理地安排了段落的起承转合；是否采用合适的连接词和过渡句，使文章结构紧密有序。
3. 语言表达评价语言表达是作文的外在形式，评价语言表达主要从以下几个方面考量：是否用词准确、丰富并具备个性；是否运用得当的修辞手法，提升文章的艺术性；是否运用正确的语法和标点，使文章流畅易读。
4. 逻辑思维评价逻辑思维是作文的思维方式，评价逻辑思维主要从以下几个方面考量：是否呈现出良好的逻辑推理能力；是否运用恰当的举例和比喻，使文章更具说服力；是否具备思考问题的全面性和深入性。
5. 观点立意评价观点立意是作文的思想深度，评价观点立意主要从以下几个方面考量：立意是否独到，是否具有思想性和见解；观点是否合理，是否能够支撑与证明；是否有深度挖掘问题的能力。
6. 内容广度评价内容广度是作文的考查范围，评价内容广度主要从以下几个方面考量：是否能够充分涵盖作文所要求的内容；不同层面、不同角度是否能够得到充分表达；是否有合适的实例和论据进行支持。
7. 文章触动评价文章触动是作文的感染力，评价文章触动主要从以下几个方面考量：是否能够引起读者的共鸣和思考；是否具备感人的情感表达与真实的人物描写；是否能够通过文字传递出作者的情感与态度。
综上所述，高考作文的评价方法涉及主题表达能力、文章结构、语言表达、逻辑思维、观点立意、内容广度以及文章触动等多个方面。
通过对这些方面的综合评价，能够客观准确地评判学生的作文水平，为他们提供针对性的指导和改进。
clsi药敏试验标准2023中文版
CLSI药敏试验标准2023中文版随着医学和生物技术的不断发展，CLSI药敏试验标准一直是临床检验领域中的重要指南。
而随着2023年版的中文版药敏试验标准的发布，对于临床实验室和医护人员来说，这意味着有了更多便捷和权威的参考文献，有助于提高实验室的药敏试验质量和准确性。
在新的标准中，我们首先要了解的是CLSI药敏试验标准的含义和基本原则。
在整个流程中，从标本的采集和处理，到试验的操作和结果的解释，都需要严格遵守这些标准。
这包括对于药敏试验中所使用的培养基、药物浓度、试验操作方法等方面的规范。
在实际操作中，我们需要了解标准中所规定的各种试验方法和技术。
比如对于不同类型的细菌，我们应该采用何种方法进行药敏试验？对于不同类型的药物，又应该采用怎样的浓度和操作方法？这些都是在实验过程中需要考虑和遵循的问题。
在新的标准中，也会对一些常见问题和困扰进行详细的说明和分析。
比如对于一些难以培养或者多重耐药的细菌，我们该如何进行药敏试验？又或者对于一些药物的混合使用，应该采用何种方法进行分析和判断？这些都是实验室中常见的难题，新的标准将会给出更为明确和实用的指导。
除了对于试验方法和技术的规范外，新的标准中也会对实验室管理和质控方面进行更为全面的要求。
在实验室内部，我们需要建立怎样的质控体系来保证试验结果的准确性和可靠性？当出现异常结果时，又该如何进行排除和处理？这些都是在实验室管理中需要深入思考和规范的问题。
新的CLSI药敏试验标准2023中文版将会为临床实验室带来更为全面和权威的参考依据。
在实际操作中，我们需要严格按照标准的要求进行操作，提高操作的标准化和规范化。
也需要不断学习和掌握新的信息和技术，以适应医学发展的需求和挑战。
在我看来，CLSI药敏试验标准的更新和发布，不仅是对临床实验室的一种规范和指导，也是对医学发展的一种促进。
只有不断地学习和更新，我们才能更好地应对临床工作中的各种挑战和问题，更好地服务于患者的健康和生命。
CLSI新、旧判读标准对大肠埃希氏菌药敏结果的影响
收 集本 院 ２ ０ １ １年 １ １ 月至 ２ ０ １ ３年 ６月住 院及 门诊 感染 患者送 检标 本 中分离 出 的大肠埃 希 氏菌 １ ２ ２
株， 纸 片扩散 法测定 菌株 对头 孢他 啶 （ Ｃ ＡＺ ） 、 头孢 噻 肟 （ Ｃ Ｔｘ） 的敏 感性 ， 美 国临床 实 验 室标 准 化 研 究所（ Ｃ Ｌ Ｓ Ｉ ） 表型 确证试 验 确定 产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌ ｓ 菌株 ， 根 据药 物敏 感性 结 果 对产 超 广 谱 Ｊ ３ 一 内 酰胺 酶 （ Ｅ Ｓ — Ｂ Ｌ ｓ ） 菌 株和 非产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌ ｓ菌株在 Ｓ １ ９和 ￥ ２ ０新 旧折 点下 Ｃ ＡＺ 、 Ｃ ＴＸ的敏感 性 以及 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌ ｓ阳性菌 株
ｔ ｈ ｅ ｏｌ ｄ ａ ｎ ｄ ｎ ｅ ｗ ｓ ｔ ａ ｎｄ ａ ｒ ｄｓ ，ａ ｎｄ ｍｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ａ ｎｄ ａ ｒ ｄ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ａ ｓ ｏ ｎａ ｂ ｌ ｅ ａ ｄ ｍｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏｎ ｏ ｆ ｔ ｈｅ ｕｓ ｅ ｏ ｆ ａ ｎｔ ｉ ｂｉ —
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｎ Ｅｓ ｃ ｈ ｅ ｒ ｉ ｃ ｈ ｉ ａ ｃ ｏ ｌ ｉ ｄ ｒ ｕ ｇ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ａ ｃ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ
增 加 了头孢 他 啶等治 疗临床 产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌ ｓ 菌株 所致 感染 的用 药机会 。
关键 词 ： 头孢 菌 素 ；超广谱 ８ 一 内酰 胺酶 （ Ｅ Ｓ Ｂ Ｌ ｓ ） ； Ｃ Ｉ Ｓ Ｉ ； 药敏 折点 中 图分类 号 ： Ｒ ４ ４ ６ ． ５ 文 献标识 码 ： Ａ ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ６ — ５ ５ ７ １ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ３ ． ０ １ １
clsi-m100-s20_2010抗菌药物敏感性试验解释标准(中文)
目 录 表
20 10 年 1 月
M1 0 0 - S 20
目录（续前）
2F. 淋病奈瑟菌….........................................................................................................................….............78 2G. 肺炎链球菌………………….........……………….........................................................................…...82 2H-1.β-溶血群链球菌…………………………...................................................................……………..…86 2H-2. 草绿色群链球菌……………………….............................................................……....................….90 2I. 霍乱孤菌.........................................................….………………......................…...…............................93 2J. 脑膜炎奈瑟菌..................................................................……...........……………...…...........................94 2K 炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、鼻疽伯克霍尔德菌、类鼻疽伯克霍尔德菌/、土拉弗朗西斯菌和 布鲁氏菌.........................................................................................................................................................98 表3. 非苛养菌质控标准菌株纸片扩散法抗微生物药物敏感试验抑菌环直径的质控允许范围 （使用不加血或其他补充物的Mueller-Hinton 培养基） ....................................................................101 表3A. 纸片扩散法——苛养菌质控菌株抑菌圈直径（mm）质控允许范围..........................................103 表 3B. 纸片扩散法—质控频率参考指南...................................................................................................105 表 3C. 纸片扩散法质控缺陷解决指南......................................................................................................107 表 4. 非苛养菌 MIC 药敏试验质控——非苛养菌质控标准菌株的质控允许范围（ μg/mL），使用不 加血或其他补充物的 Mueller-Hinton 培养基（如果如果使用 Mueller-Hinton 肉汤，需要调整钙离子浓 度）...............................................................................................................................................................109 表 4E. MIC 试验——质控频率参考指南...................................................................................................111 表 4F. MIC 药敏试验质控缺陷解决指南...................................................................................................112 表 5. 制备抗微生物药物储存液的溶剂和稀释液.....................................................................................116 表 5A. 制备以活性单位表达的抗微生物药物的贮存液..........................................................................119 附录A. 关于药敏试验结果查证及细菌鉴定结果确认的建议.................................................................121 附录B.药敏试验所用质控标准菌株...........................................................................................................123
药敏试验中的抗菌药物的选择和CLSI的重要改变
MIC (µg/ml) 抑菌环直径 (mm)
利耐唑胺不敏感的金黄色葡萄球菌比较罕见 0.05% (7 / 15,280)
CLSI agenda book June 2009.
耐药机制已经被鉴定 – rRNA突变以及cfr-介导耐药(这些可被质粒介导)
Mendes et al. 2008. Antimicrob Agents Chemother. 52:2244.
葡萄球菌属
MRS菌种的结果报告原则 ：除了有抗 MRSA活性的新型头孢菌素外，其他β内 酰胺类药物的结果均需报告为耐药或不 报告 mecA阴性的MRSA该怎么办呢？
– 按上述MRS菌种的结果报告原则
葡萄球菌修订建议… 万古霉素MIC=µg/ml 时应被送往参考实验室进一步证实
S. aureus金黄色葡萄球菌
≤1
≤1 ≤1 ≤4 ≤4
2
2 2 8 8
≥4
≥4 ≥4 ≥16 ≥16
肠杆菌科修订…折点（ MIC µg/ml ）
抗生素 头孢唑啉 头孢噻肟 头孢唑肟 头孢曲松 头孢他啶 氨曲南
M100-S19
耐药 ≤14 ≤14 ≤14 ≤13 ≤14 ≤15 中介 15-17 15-22 15-19 14-20 15-17 16-21 敏感 ≥18 ≥23 ≥20 ≥21 ≥18 ≥22 耐药 没有 ≤22 ≤21 ≤19 ≤17 ≤17
CLSI 对ESBL检测的建议
目的
病人治疗 进行ESBL筛选和确证实验 把头孢菌素，青霉素，氨曲 南 “S”结果改成“R” 医院感染控制 进行ESBL筛选和确证实验 把头孢菌素，青霉素，氨曲 南 “S”结果改成“R”
如果使用 旧折点
是 是 是 是
新折点
抗菌药物敏感性试验及2010CLSI
哪些需要做MIC
肺炎链球菌 苯唑西林纸片法直径≤19mm,需 要明确受试菌对青霉素的敏感性，必须做青 霉素的E-试验
革兰阳性球菌 万古霉素不敏感时（中介或 耐药），必须做万古霉素的E-试验确认受试 菌对万古霉素的敏感性（包括替考拉宁、利 奈唑胺等）
草绿色链球菌 对青霉素、氨苄西林 纸片法药敏结果不可靠，必须做上述 两药的E-test
镜下才能观察到的细小菌落应忽略
正确阅读抑菌圈内的“霾”现象
变形杆菌(迁移生长)以及磺胺类药物的纸片法药敏 注 意要读完全抑制的抑菌圈，对“霾”生长不予理会
克林霉素对葡萄球菌的抑菌圈内如有薄雾状菌苔应报告 细菌对克林霉素耐药,不管其是否显示 “D”抑菌圈
需在透射光（Transmitted light）下阅读万古霉素、 利奈唑胺和苯唑西林的抑菌圈，遇不敏感的结果需用稀 释法测定MIC法确证
E-Test
细菌报告应注意的问题
有无细菌：苛养菌、难培养细菌 正常菌群/病原菌:病史、病人体征、感染部位 药敏结果报告：耐药菌株的提示或修改
正确阅读纸片法结果
完全抑制的抑菌圈直径，包括纸片的直 径
不反光的黑色背景、反射光下阅读结果 抑菌圈的界限应该是以肉眼观察没有明
显的可见细菌生长区域 在抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大
2010CLSI主要更新内容
主要格式的更新 关于药敏质控的更新（新增Doripenem等质控范围） 关于药敏试验操作的更新 脆弱拟杆菌的累积药敏报告 术语表的更新（新的抗生素亚组-抗MRSA活性的头孢菌素）
肠杆菌科新旧折点(MIC
ug/l）
Agent
头孢唑 啉 头孢噻 肟 头孢唑 肟 头孢曲 松 头孢他 啶 氨曲南
100% 80%
CLSI药敏试验标准CarbaNP试验更新
2016-01-12 CLSI
美国临床与实验室标准化协会（Cli ni cal a nd Laboratory Sta ndards In stitute, CLS）于2015年引入Carba NP试验，用于检测肠杆菌科、铜绿假单胞菌和不动菌属细 菌中碳青霉烯酶的表型确证试验。 该试验采用比色法，目前主要用于流行病学研 究或感染控制。研究表明，Carba NP试验在检测KPC NDM、VIM、IMP、SPM和SME型碳青霉烯酶方面具有较好的敏感性（＞90%）和特异性（＞90%）。
0.5%酚红溶液
1）称量1.25g粉红粉末
1年或不超过各成分保质期
2）加入250ml实验室试剂级纯水
3）混合，室温保存
4）使用前混匀
0.1 N氢氧化钠溶
1）将20ml 1N NaOH加入180ml实验室试
1年或不超过各成分保质期
液
剂级纯水中
2）室温保存
Carba NP试剂A
1）取25-50ml烧杯，将2ml0.5%酚红溶液
2.结果解释:
管a溶液A（作为内质控）
管“：溶液B
结果解释
红色或红-橙色
红色或红-橙色
阴性，非碳青霉烯酶产
生株
红色或红-橙色
浅橙色、深黄色或黄色
阳性，碳青霉烯酶产生
株
2周或不超过各成分保质期
溶液
加入到16.6ml实验室试剂级纯水中
（溶液应为红色或橙色，其他
2）加入180出10mM硫酸锌溶液
颜色均不可使用）
3）以0.1N NaOH溶液（若pH值太高以10%
HCl溶液）调整pH值为7.8 ±0.1
4）4-8C小瓶保存，避免长时间光照
Carba NP试剂B
美国CLSI抗菌药物敏感试验操作标准(2010年版)部分变更内容
ｅ ｈ ｎ ｏ ｍａ ｉ ｎ ｌ ｕ ｐ ｅ ｎｔ ｔ Ｉ ｆ ｒ ｔ ａ Ｓ ｐ ｌ ｍｅ ．ＣＬ ｄ ｃ ｍｅ ｔ ｏ ＳＩ ｏ ｕ ｎ Ｍ １ ０ Ｓ２ ０－ ０
ｂｌ ｙｏ ｆ ｕ ｕ ｎ ｉｉｏ ｓｉ ｈ ｌ ｉ —ａｖｓｏ ｏ ｐ ｉｔ ｆｅｆ ｘ ｐ ｍｐ ｉｈｂｔ ｒ ｎ ｔ ｅ ｃｉ ｃ— ｉｉｎ ｆｒａ — ｉ ｌ ｎ
［ ］ Ｖｉｅ ｏ ９ ｖｉ ｓＭ，Ｐ ｒｕ ａ Ｉ ｅｔｎ ｏ ｒ Ｒ，ｅ ａ．Ｉｏ ｉｚ — ｒ ｏｔｇｌ ，Ｂ ｔｅｃ ｕｔ ｌ １ ｓｎａｉ ｉ ｄｎ
２ ０ ０ ７，５ ６） ２ ７— １ ６ ． ９（ ：１ ４ ２ ０
ｂｒｕｏｉ ｂ ｅｌ ｉ ｅｅｓ ｒｎ ｃｉｔ ｎＰ Ｒ［ ］ ｅｃｌｓ ｙｒａ—ｍｅｒｖ ｒｅｔａ ｓｒ ｉ Ｃ Ｊ ．Ｍ ｉ ｏ ｓ ｔ ｐｏ ｃ ｂ ｒ
Ｄｒ ｇ Ｒｅ ｉｔ ２ ８ ４（ ）：７— １ ． ｕ ｓｓ ，００ ，１ １ １
２ ０ ０ ８，３１ ３） １ ８—２ ８ （ ９ ０ ．
ｇｉ ｔ ｅ ｓｌ ｈ ｌ ｎ ｅ Ｊ ．Ｖ ｃ ｎ ，２ ０ ， ４ ３ ａ ｓ ａｒ ｏ ｃａ ｅｇ ￣ ］ ａｃ ｅ ０ ６ ２ （ ７—３ ） ｎ ｏ ｌ ｉ ９：
６３ ０ ～ ６ ５ ． ４ ３ ０
［６ Ｌ ｍｏ ｓａ ａＯ，Ｂ ｓｉ １］ ｏ ｖｋ ｙ ｏ ｔ ｎＫ Ａ．Ｐ ａｔａ ａｐｉ ｔ ｎ ｎ ａｉ ａ ｒｃｉ ｌ ｐ ｌ ａｉ ｓａｄｆ ｓ ｃ ｃ ｏ ｅ —
制方 面 。
改 了头 孢 唑林 、 头孢 噻肟 、 头孢 唑 肟 、 孢 曲松 、 头 头孢
2008年CLSI药敏试验标准的主要改变
草绿色链球菌 青霉素和氨苄西林 (仅稀释法) 头孢吡肟 、头孢噻肟 、头孢曲松 、万古霉 素
C组 U组
头孢噻肟 、头孢曲松 、氯霉素
氯霉素 、利奈唑胺 、左氧氟沙星 、氧氟沙
星 、达托霉素 3 、奎奴普丁2达福普汀
洛曼沙星或氧氟沙星 、诺氟沙星 、磺胺 、
四环素
氯霉素 、克林霉素 、红霉素 、利奈唑胺
述菌株的青霉素 MIC ≤0 . 12 mg/ L 或抑菌圈 ≥29 mm 者应 可采用头孢硝噻吩法测试β内酰胺酶 。β内酰胺酶阳性者 对青霉素 、氨基苄2、羧苄2、呋脲苄青霉素耐药 。
(2) 推荐头孢西丁稀释法检测甲氧西林耐药菌 ( MR2 SA 、MRCNS) ,除纸片扩散法外 ,增加头孢西丁微量稀释法 。 头孢西丁的 MIC ≥8 mg/ L 为甲氧西林耐药 ; ≤4 mg/ L 为甲 氧西林敏感 。该方法和标准仅适用于金葡菌和路登葡萄球 菌 。如 mec A 基因阳性的菌株应该报告为甲氧西林或苯唑西 林耐药 ,其他β内酰胺类抗生素也应报告耐药 。由于非 mecA 基因介导的苯唑西林耐药机制罕见 ,故 mec A 基因阴性但苯 唑西林 MIC ≥4 mg/ L 的菌株也应报告对苯唑西林耐药 。
达 托 霉 素 3 、达托霉素 3 多烯环素
黏菌素 3 、 多黏菌素 3
480
中国感染与化疗杂志 2008 年 11 月 20 日第 8 卷第 6 期 Chin J Infect Chemot her , November1 2008 , Vol1 8 , No1 6
表 2 2008 年 CL SI 新增加药敏试验的品种
5 . 苯唑西林 、利奈唑胺和万古霉素对葡萄球菌的药敏试 验需培养至 24 h ,且需在光源之上阅读结果 。只要有 1 个或 以上的菌落生长以及任何可见的薄霾菌苔生长均应视作对 上述抗菌药物耐药 。遇不敏感株需要重新鉴定菌种 ,并用稀 释法进行药敏试验 。
抗菌药物敏感性试验及2010CLSI
有无细菌：苛养菌、难培养细菌
药敏结果报告：耐药菌株的提示或修改
正确阅读纸片法结果
完全抑制的抑菌圈直径，包括纸片的直径 Evaluation only. 不反光的黑色背景、反射光下阅读结果 Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. 抑菌圈的界限应该是以肉眼观察没有明显的 Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 可见细菌生长区域
在抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大镜下 才能观察到的细小菌落应忽略
正确阅读抑菌圈内的“霾”现象
变形杆菌(迁移生长)以及磺胺类药物的纸片法药敏 注意要读完 Evaluation only. 全抑制的抑菌圈，对“霾”生长不予理会
Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. 克林霉素对葡萄球菌的抑菌圈内如有薄雾状菌苔应报告细菌对 Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 克林霉素耐药 ,不管其是否显示 “D”抑菌圈
对于三个青霉素的判断标准我们都应该解 释和报告吗？
青霉素判断标准
脑膜炎
解释/报告？
•Evaluation 是的，脑脊液标本 only.
Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Aspose Pty Ltd. 非脑膜炎 Copyright•2004-2011 是的，其他的标本，因为我们通常不
正确的药敏试验及报 告非常重要！
如何进行药物敏感性试验？
纸片扩散法
Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. 稀释法 2004-2011 Aspose Pty Ltd. – Copyright 试管稀释法（肉汤稀释法
金黄色葡萄球菌耐药性研究进展安徽省立医院马筱玲
*mecA = gold standard 47
courtesy of Swenson and Tenover
Sensitivity/Specificity
Tests for mecA-mediated Resistant CoNS
Sensitivity:
OX MIC = OX DD = CX DD = PBP2a = mecA* 99% 99% 98% 100%
MRSA SCCmec基因盒研究
抗菌药物
氨苄西林 头孢唑啉
环丙沙星 氯霉素 红霉素 克林霉素
苯唑西林 呋喃妥因 青霉素G 利福平
四环素
甲氧苄啶/磺 胺甲噁唑
万古霉素
庆大霉素 左氧氟沙星
MSSA 耐药率（%）
68.1* 4.2* 0.0* 9.8* 62.2* 24.4* 0.0* 2.2 93.3 0.0* 26.9* 15.1*
葡萄球菌耐药性研究进展 及药敏试验的临床应用
安徽省立医院检验科 马筱玲
概述
金黄色葡萄球菌在自然界广泛分布 金黄色葡萄球菌是医院感染重要的致病菌 对环境抵抗力强，容易产生耐药性
金葡菌主要耐药类型和耐药机制
耐青霉素金黄色葡萄球菌：产生β－内 酰胺酶，水解青霉素中有效基团。 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌：获得Mec 基因，编码产生PBP2a，亲和力降低 耐万古霉素金黄色葡萄球菌：获得耐药
头孢西丁 纸片法是..
首选 用于检测 mecA介导的耐药 作为苯唑西林的 “替代物” (report oxacillin
NOT cefoxitin) 对 S. lugdunensis 只用头孢西丁(不用 oxacillin
disk)
金葡菌：与苯唑西林纸片扩散法相当
2016年CLSI-M100S(第26版)主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新容解读雅薇王辉（通讯作者）大学人民医院检验科此文发表在《中华检验医学杂志》2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。
抗菌药物敏感性试验执行标准解读
抗菌药物敏感性试验执行标准解读马筱玲【摘要】抗菌药物敏感性试验(药敏试验)在个体化治疗和经验治疗方面具有重要作用.规范药敏试验操作方法,减少试验误差,为临床提供准确的检验报告非常重要.目前我国多数临床实验室根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)的“抗菌药物敏感性试验执行标准”进行药敏试验.本文对该标准中的重点内容进行解读,以便检验界同道能更好地理解和应用.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2012(030)010【总页数】3页(P776-778)【关键词】抗菌药物敏感性试验;标准;方法;报告【作者】马筱玲【作者单位】安徽医科大学附属省立医院检验科,合肥230001【正文语种】中文【中图分类】R446.5;Q93-3抗菌药物敏感性试验(以下简称药敏试验)结果可以帮助临床医师针对特定的感染选择合适的抗菌药物，实现个体化治疗。
此外，综合某地区的药敏试验结果，也可以了解该地区主要分离菌的耐药状况，为临床经验用药提供参考［1］。
因此，规范药敏试验操作方法，减少试验误差，为临床提供准确的药敏报告非常重要。
本文对药敏试验执行标准［2-4］中的重点内容进行解读。
1.1 开展药敏试验的前提条件从细菌的种属特征不能准确推测其对某类抗菌药物的敏感性时，或细菌对抗菌药物的敏感性容易改变时，必需做药敏试验。
如肠杆菌科细菌对β-内酰胺类药物的敏感性是不确定的，需要做药敏试验;反之，肠杆菌科细菌对万古霉素天然耐药，其敏感性是确定的，则不需要做药敏试验。
某些细菌对治疗用的抗菌药物最初是敏感的，但在治疗过程中容易转变为耐药，如肠杆菌属、枸橼酸杆菌属和沙雷菌属细菌感染使用三代头孢菌素治疗时，葡萄球菌感染使用喹诺酮、万古霉素治疗时，铜绿假单胞菌感染使用各类抗菌药物治疗时，均应在治疗3～4 d后，对来自身体相同感染部位重新分离的细菌做药敏试验。
1.2 注意鉴别感染菌、污染菌和定植菌仅针对明确引起患者感染的病原菌进行药敏试验，污染菌或定植菌不做药敏试验。
CLSI抗菌药物敏感试验执行标准2007版更新要点
CLSI抗菌药物敏感试验执行标准2007版更新要点
夏晓华;张伟民
【期刊名称】《浙江检验医学》
【年(卷),期】2007(000)002
【总页数】3页(P12-14)
【作者】夏晓华;张伟民
【作者单位】浙江省临床检验中心
【正文语种】中文
【中图分类】R446.5
【相关文献】
1.2006年CLSI/NCCLS药敏标准的更新(CLSI/NCCLS M100-S16代替M100-S15) [J], 李雅军;张斌;王华
2.EUCAST和CLSI微量稀释法检测曲霉体外药物敏感试验差异比较 [J], 张明;陈菲;孙文逵;吴婷;颜文杰;苏欣;施毅
3.美国CLSI抗菌药物敏感试验操作标准(2010年版)部分变更内容 [J], 杨沙沙;王喜仁;韩杰
4.2006年版CLSI/NCCLS有关抗生素敏感试验操作标准的更新要点 [J], 倪芳;童明庆
5.NCCLS抗菌药物敏感性试验执行标准第14版信息增刊更新内容介绍 [J], 孙长贵;成军
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2020 年版 clsi 药敏结果判定标准
2020 年版 CLSI 药敏结果判定标准随着医学技术的不断进步，药敏测试在临床诊断和治疗中扮演着越来越重要的角色。
CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）是一个致力于推动医疗实验室标准化的国际组织，他们发布的药敏结果判定标准对于准确判断微生物对抗生素的敏感性至关重要。
今年发布的 2020 年版 CLSI 药敏结果判定标准给我们带来了哪些新的认识和看法呢？本文将从浅入深，全面评估并撰写这一主题。
1. 药敏结果判定标准的基础概念在深入讨论 2020 年版 CLSI 药敏结果判定标准之前，我们有必要对药敏测试的基础概念进行一定的介绍。
药敏测试是指通过实验室测试，确定细菌或真菌对抗生素等药物的敏感性。
而药敏结果判定标准则是根据测试结果来判断微生物对药物的反应。
在这个过程中，很多因素都需要考虑，包括抗生素的类型、浓度、微生物的种类等等。
2. 2020 年版 CLSI 药敏结果判定标准的重大变化2020 年版 CLSI 药敏结果判定标准相较于之前的版本有哪些重大变化呢？可以看到这一版标准对一些传统认知进行了修正和更新。
例如对某些药物的最小抑菌浓度（MIC）判定标准进行了修改，对某些细菌的抗药性评价标准进行了重新界定。
这些变化是基于对临床数据和相关研究的深入分析和总结，为临床治疗提供了更准确的药敏结果判定。
3. 基于 2020 年版 CLSI 药敏结果判定标准的临床应用对于临床医生来说，掌握最新版的药敏结果判定标准以及了解其实际应用非常重要。
通过临床案例的共享和病例分析，我们可以清晰地看到 2020 年版 CLSI 药敏结果判定标准对于临床诊断和治疗的实际影响。
在某些疑难病例中，新版标准的应用能够帮助医生更准确地选择合适的抗生素，有效地控制感染的进展。
4. 个人观点和理解作为一名文章写手，我对 2020 年版 CLSI 药敏结果判定标准持有积极的态度。
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• 研究体内药物浓度与药物抗菌效果关系—— 药效动力学(PD)
体外试验与体内情况有什么不同？
体外： 药物浓度 固定不变
Cmax
AUC
T1/2 β
体内： 药物浓度 随时间改变
细菌MIC位于什么水平临床治疗有效？
体外试验与体内情况的关联（PK/PD参数）
浓度
Cmax/MIC
Cmax Cmax / MIC
AUC/MIC T>MIC
AUC / MIC
AUC
MIC
MIC
T> MIC
时间
各类抗菌药物PK/PD参数
浓度依赖性
对致病菌的杀菌作用 取决于峰浓度
时间依赖性
与时间有关，但抗菌活性持 续时间较长
抗菌作用与 同细菌接触时间密切相关
时间依赖且 PAE或T1/2较长
氨基糖苷类、氟喹诺酮类、 酮内酯类、两性霉素B、 daptomycin、甲硝唑
Cmax/MIC >10
多数β -内酰胺类、 林可霉素类
恶唑烷酮类、氟胞嘧啶
T>MIC
>50%
链阳霉素、四环素、 碳青霉烯类、糖肽类、 大环内酯类、唑类抗真菌药
AUC/MIC >125
药敏试验中抗菌药物的选择
• 自1998年以来卫生部将CLSI制定的药敏标 准定为我国的部颁标准。依照（CLSI）所 制定的药敏试验执行标准作为选药指南
CLSI—the Clinical and Laboratory Sdandards Instituste
• M02-A11纸片扩散法（2012） • M07-A09 稀释法（2012） • M11-A07厌氧菌稀释法（2007）
• M100-S23每年更新一次
– 药敏测定方法 – 与方法相对应的判断标准折点 – 专家系统（天然耐药、获得性耐药） – 质控指南
是由于某些细菌/抗菌药物组合，尚不存 在或罕见耐药菌株。如金黄色葡萄球菌， 肺炎链球菌对利奈唑烷，万古霉素出现耐 药 –应证实细菌鉴定和药敏试验结果 –保藏菌株 –递交到参考实验室证实其结果
药敏试验结果报告
• 处方注释报告
严重的肠球菌感染如：心内膜炎，通常需要氨
苄西林、青霉素或万古霉素（敏感株）加上一种 氨基糖甙类联合治疗，除非证实对庆大和链霉素 高水平耐药
流感嗜血杆菌
药敏试验结果的报告
• 特殊情况下的药敏试验及结果报告
• 特殊细菌
• 特殊情况下的药敏试验及结果报告
• 特殊部位
• 对分离于脑脊液中的细菌，下列抗菌药物 不作为选择药物进行常规报告，因为用这 些药物治疗某些细菌引起的脑脊液感染可 能无效，这些药物包括：
仅通过口服途径给药的
Ⅰ和Ⅱ代头孢菌素(头孢呋辛钠除外)
– 温度：35℃ ±2 ℃ – 气体：空气， 5%CO2（ 溶血性链球菌、
肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等） – 时间： 16-18小时，20-24小时
药敏试验最低限度的质控建议
纸片扩散法 与MIC法质控 菌株不同
药敏试验结果判读
• 必须使用推荐的体外药敏试验方法 • 根据CLSI所公布的最新判断标准进行
需用最大剂量静脉给 药治疗（如肾功能正 常成人每4h静脉给 药至少300万单位
药敏试验结果的报告
• 报告方式
– 药敏试验结果以敏感、中介和耐药表示 – 有些细菌对某种抗菌药物没有或罕见有耐
药菌株，如β-溶血性链球菌对万古霉素， 当这些细菌检测的MIC高于敏感临界值或 抑菌圈直径小于敏感临界值时，则应报告 为非敏感。出现这种情况应证实细菌鉴定 和药敏试验结果，随后将菌株保存并递交 到参考实验室。
– 进一步阐明
• 非肠杆菌科细菌—新增 • 葡萄球菌—新增 • 肠球菌—新增
• M100-S23 page 176-179
药敏试验及 CLSI标准更新
安徽省立医院检验科 马筱玲
药敏试验一般知识
药敏试验
• 药敏试验定义：使用体外方法测定抗菌药 物抑制病原微生物生长的效力。
• 主要目的：预测体内抗菌效果 • 评价参数：MIC(最低抑菌浓度) ——在体
外能够抑制细菌生长的最低抗菌药物浓度。
抗菌药物在体内的情况
• 不同给药方式，药物浓度不同（药物的吸收） • 不同组织，药物浓度不同（药物的分布） • 不同时间，药物浓度不同（药物的清除）
克林霉素
大环内酯类
四环素类
氟喹诺酮类
特殊情况下的药敏试验及结果报告
特殊部位
下列药物一般不适宜治疗尿道感染： – 阿齐霉素 – 氯霉素 – 克拉霉素 – 克林霉素 – 红霉素
CLSI M100-S17 (M2-DD, M7-MIC) 37
药敏试验结果报告
• 罕见耐药菌株的处理和报告 • 如果解释标准中仅给出“S”的标准，那
结果判断 • 解释标准取决于特定的给药方案和感
染部位（必须与临床医师交流）
肺炎链球菌对青霉素敏感性
肺炎链球菌对青霉素敏感性
青霉素注射剂 （非脑膜炎）
青霉素注射剂 （非脑膜炎）
口服青霉素
敏感 中介 耐药 注释
≤2 ≤0.06 ≤0.06
4
≥8
-
≥0.12
0.12-1 ≥2
S:肾功能正常成人每 4h静脉给药至少200 万单位，每天至少 1200万单位
• 链球菌属： 5%脱纤维羊血（马血、兔血） MH琼脂
• 淋病奈瑟球菌：GC培养基＋1％特定的生 长添加剂
• 脑膜炎奈瑟菌： 5%脱纤维绵羊血
药敏试验条件
• 菌悬液制备
– 肠杆菌科、假单胞菌属、不动杆菌属等： 生长法或直接菌落悬液法
– 葡萄球菌属、肠球菌属、苛氧菌：直接 菌落悬液法
药敏试验条件
• 孵育（温度、气体、时间）
• M100每年修订，M02,M07每三年更新一次
近年来CLSI重要的变化
• 增加天然耐药 • 判断折点（更新、删除） • 检测方法改变 • 增加新的抗菌药物 • 删除某些药物 • 增加给药方案来自2011年增加天然耐药附表
2013细菌的固有耐药附录B
• 肠杆菌科表格
– 删除了克氏枸橼酸杆菌对阿莫西林/克拉维酸、 氨苄西林/苏巴坦R
– 针对每一菌群所选择的药物具有确切临床疗效 （天然耐药不做药敏试验）
– 测定的药物具有可靠的体外试验方法和结果 – 测定药物具有代表性或指示性。 – CLSI推荐药物的取舍可根据本单位抗菌药物种
类确定
药敏试验条件（如葡萄球菌）
药敏试验条件
• 肠杆菌科细菌、非发酵菌、葡萄球菌、肠 球菌属等：Mueller-Hinton（MH）琼脂