医学实验技术用到的试剂配制方法

核酸提取与纯化试剂配方

核酸提取与纯化试剂配方一、细胞裂解液细胞裂解液是核酸提取与纯化的关键试剂之一，其主要成分包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。

2.蛋白酶抑制剂：如PMSF等，用于抑制蛋白酶活性，保护核酸不被降解。

3.去垢剂：如SDS等，用于破坏细胞膜和细胞器，使核酸从细胞中释放出来。

二、洗涤液洗涤液主要用于去除杂质和蛋白质，提高核酸的纯度。

其成分主要包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。

2.无水乙醇：用于去除盐离子和其他有机杂质。

3.去垢剂：如SDS等，用于破坏蛋白质结构，使其易于去除。

三、平衡液平衡液主要用于调节溶液的离子浓度和pH值，以便进行后续的纯化操作。

其成分主要包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。

2.盐离子：如KCl、NaCl等，用于调节溶液的离子浓度。

四、洗脱液洗脱液主要用于从纯化柱上洗脱核酸，其成分主要包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。

2.洗脱液添加剂：如甲醇、异丙醇等，用于提高洗脱效率。

五、储存液储存液主要用于储存纯化后的核酸，其成分主要包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。

2.防腐剂：如叠氮化钠等，用于抑制微生物生长。

3.其他添加剂：如抗坏血酸、抗氧化剂等，用于提高核酸的稳定性和抗氧化能力。

在制备和使用核酸提取与纯化试剂时，需注意以下几点：1.应选择高质量的试剂和原料，以保证试剂的质量和稳定性。

2.应按照规定的操作步骤进行试剂配制和使用，以保证实验结果的准确性和可靠性。

3.应注意试剂的储存和使用期限，避免过期或变质试剂的使用。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种，下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方：一、试剂的配方1. Tris缓冲液：- 3 M Tris-Cl，pH 7.4（准备方法：将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2.NaCl溶液：-5MNaCl（准备方法：将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）3.验血试剂：-4%NaOH溶液（准备方法：将40gNaOH溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-5%CuSO4溶液（准备方法：将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-2%K4[Fe(CN)6]溶液（准备方法：将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）4.PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）：-10×PBS缓冲液（准备方法：将80gNaCl，2gKCl，11.5gNa2HPO4，2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L。

pH值可以调节至7.4左右）5. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）：- 10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0（准备方法：将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中，然后加入0.37 g EDTA，使用HCl调节pH值至8.0，并将溶液体积加至1 L）二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液：- 50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1% Triton X-100，pH 7.4（准备方法：将6.05 g Tris，5.8 g NaCl，0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2. Tris-Borate缓冲液（TBE缓冲液）：- 89 mM Tris，89 mM boric acid，2 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将10.81 g Tris，5.49 g boric acid，3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）3. Tris-Glycine缓冲液：- 25 mM Tris，192 mM glycine，0.1% SDS，pH 8.3（准备方法：将3.03 g Tris，14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）4. Tris-Acetate缓冲液（TAE缓冲液）：- 40 mM Tris，20 mM acetic acid，1 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将4.84 g Tris，1.86 g acetic acid，0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）5. Phosphate缓冲液：- 100 mM sodium phosphate，pH 7.0（准备方法：根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0，并将溶液体积加至1 L）以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方，并不是全部。

ELISA试剂配制及实验流程

ELISA试剂配制及实验流程ELISA(酶联免疫吸附实验)是一种常用的免疫学实验技术，用于检测抗体或抗原的存在与浓度。

ELISA试剂是ELISA实验中的关键组成部分，正确配制试剂和正确的实验流程对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。

一、ELISA试剂的配制1. 背景缓冲液（Coat buffer）：该缓冲液用于包被酶标板上的抗原或抗体，并且用于洗涤步骤中的洗板缓冲液。

配制方法：将10 mL Tris缓冲液（100 mM，pH 9.6）加入0.15 g NaCl，搅拌溶解，最后加入一滴Tween-20或其他润湿剂。

2. 试样稀释液（Sample buffer）：该缓冲液用于稀释试样，使其适应ELISA实验的测量范围。

配制方法：根据试样的含量和要求进行合适的稀释，一般可选择PBS （含0.05% Tween-20) 来稀释。

3. 标准品（Standard）：该物质用于建立标准曲线，以根据样品的读数来确定样品中目标物的浓度。

配制方法：首先通过相关实验确定标准品的初始浓度，使用稀释液进行逐步的2倍稀释，以获得不同浓度的标准溶液。

4. 酶标抗体（Enzyme labeled antibody）：该抗体与目标物结合，可与酶底物发生反应产生荧光或颜色。

配制方法：根据抗体的浓度和信号放大的要求，将抗体稀释在稀释液中。

5. 底物液（Substrate solution）：在酶底物的作用下产生颜色，用于测定目标物的浓度。

配制方法：根据酶底物的要求和实验条件，按照相应的方法配制底物液。

二、ELISA实验流程1.包被抗原或抗体：加入适量的抗原或抗体至酶标板孔中，在4°C 下静置一夜或在37°C下孵育数小时，使其吸附到酶标板表面。

吸附后，将酶标板孔洗涤干净以去除未结合的物质。

2.阻断：将阻断液加入酶标板孔中，避免非特异性结合，阻断剂一般为牛血清蛋白、鱼胶蛋白等。

孵育一段时间后，洗涤酶标板孔以去除阻断液。

第三节、试剂的配制与使用

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(二)、酶、辅酶酶和辅酶作为生物试剂，现已广泛应用于工农业生产、科学研究和卫生事业的各个领域。在生物化学检验中，酶作为分析试剂具有专一性高、反应条件温和、催化反应速度快、无毒害等优点。酶作为分析试剂，能测定标本中用一般化学方法难于检测的物质。酶分析方法至今已建立了二百多种。可测定一百多种临床生化检验项目，商品试剂盒亦有五、六十种之多。在分子生物学技术中，限制性核酸内切酶、聚合酶、DNA连接酶等工具酶的发现和应用，使人类重组DNA、探究基因的愿望得以实现，为基因工程这样一门创造性科学提供了有效的工具。酶是一种生物催化剂，其活性受许多因素的影响；要长期保存而不失去活性是比较困难的。通常，结晶干燥的固体酶制剂比液态酶易于保存，酶试剂最好用深色瓶盛装，置干燥器内，再将干燥器放人低温冰箱，这样能做到低温、干燥、避光的保存要求。
离心机的种类很多，按其转速的不同，分普通离心机 (<6000rom)、高速离心机 (6000~25000rpm)和超高速离心机(<30000rpm)。
四、实验试剂的配制和使用
(一)、试剂配制的一般原则
1．生物化学检验实验室配制试剂用水均应用蒸馏水或去离子水。 2．根据实验要求选用不同规格的试剂，一般情况下大多选用AR级，一般溶液如无特殊要求，可选用CP级试剂。 3．正确合理的选用衡器和量器。配制标准液或缓冲液称重应选用1 ／10 000的分析天平。量器应选用一等容量瓶和吸管。一般试剂如显色剂、终止剂等无特殊要求的，则选用粗天平和量筒即可。 4．试剂开瓶后，如不能一次用完，应及时予以封闭保存，特别是易吸潮试剂。对见光易变质的试剂，外面要用黑纸包裹。 5．称量或量取试剂用的器皿，取试剂用的药勺均应洁净干燥。试剂一经取出(特别是液体试剂)，不得放回原瓶，以免影响试剂纯度。 6．配制好的试剂，应贴标签，写上试剂名称、浓度、配制日期。

人纤维蛋白原配置方法

人纤维蛋白原配置方法1.实验室准备：-纯净水：用于制备溶液的纯净水，最好是经过反渗透处理的水或者高纯度的去离子水。

- PBS缓冲液：磷酸盐缓冲液（phosphate-buffered saline），用于制备纤维蛋白原溶液和洗涤细胞或材料。

2.纤维蛋白原的制备：-根据需要的浓度，按照纤维蛋白原的包装上的说明书，将适量的纤维蛋白原粉末称取放入干燥的试管或容器中。

- 添加适量的PBS缓冲液进行溶解。

通常，根据需要的浓度和工作容量的不同，纤维蛋白原的溶解浓度会有所区别。

例如，用于涂覆细胞培养板或培养皿的浓度一般为10 μg/ml；用于浸泡细胞载体（如凝胶）的浓度一般为100 μg/ml。

在溶解过程中，可以用像麦芽糖或牛血清蛋白（BSA）等载体蛋白质（carrier protein）进行稀释和保护。

-离心纤维蛋白原溶液，以去除不溶解的颗粒。

3.纤维蛋白原的保存：-将制备好的纤维蛋白原溶液通过过滤器（如0.22μm的滤膜）过滤，以去除可能的细菌、真菌或其他污染物。

-将过滤后的溶液分装到干净的冻存管中，尽量避免氧气接触。

-使用低温冷冻器或液氮存储纤维蛋白原的冷冻样品。

4.纤维蛋白原的使用：-取出冷冻的纤维蛋白原样品，并迅速解冻。

-在准备细胞培养的材料上使用纤维蛋白原涂层。

将解冻后的纤维蛋白原溶液均匀涂覆于细胞培养板、培养皿或其他载体上。

可以使用吸管或移液器轻轻摇动溶液，使其充分覆盖整个表面。

-将涂层后的材料在室温下或冰箱中静置一段时间，以使纤维蛋白原牢固粘附在表面上。

具体的时间因工作要求而有所不同，一般需要30分钟到2小时。

-去除多余的纤维蛋白原溶液。

小心地从涂有纤维蛋白原溶液的材料上倒出多余的溶液，并用PBS缓冲液轻轻洗涤1-2次以去除残留的纤维蛋白原。

-使用涂有纤维蛋白原的材料进行细胞培养、细胞黏附迁移实验或其他相关研究。

需要注意的是，在配置纤维蛋白原溶液和进行纤维蛋白原涂层的过程中，应尽量避免纤维蛋白原的过度稀释和暴露在环境中。

医学实验技术操作作业指导书

医学实验技术操作作业指导书一、实验室安全须知1. 实验室入口处需佩戴实验服、口罩和手套，并确保服装整洁。

2. 切勿在实验室内进食、饮水或吸烟。

3. 遵循实验室内规定的紧急疏散路线和安全出口，确保熟悉火灾和紧急救援的相关事项。

4. 操作前，确保室内的化学药品储存顺序和标签是否清晰可见。

5. 操作时，注意保持实验台整洁，避免杂物堆积。

二、实验器材准备1. 确认所需实验器材是否完整并处于良好状态。

2. 准备所需的试剂和溶液，并按照指定浓度配制。

3. 实验前检查实验仪器和设备的工作状态，确保正常运行。

三、实验步骤1. 实验前进行充分的个人卫生，洗净双手并佩戴手套。

2. 取出所需试剂，并按照实验要求称取或滴取所需量。

3. 开始实验前，先阅读相关实验操作指南，确保操作顺序和步骤的正确性。

4. 按照操作步骤，依次进行实验操作，注意实验时间和温度。

5. 操作期间，保持注意力集中，避免走神或转移注意力。

6. 注意观察实验结果，及时记录数据或变化，并按照实验要求进行分析和解释。

7. 实验完成后，及时清理实验台和器材，将废弃物物品按照规定进行分类和处理。

四、实验安全注意事项1. 禁止单独操作需要两人以上合作或需要特殊设备时的实验项目。

2. 实验过程中如遇特殊情况或意外事故，应立即向导师或实验室负责人报告。

3. 实验结束后，注意关闭仪器设备电源，归位实验工具和器材，保持实验室整洁。

4. 实验结束后，注意检查并关闭所有实验用的液体和气体阀门，确保安全。

五、实验结果记录和分析1. 实验结束后，仔细整理和整合实验记录，保证数据清晰准确。

2. 对于实验结果进行合理分析和解释，提出可能的原因和优化方案。

3. 绘制实验数据曲线、图表或统计表格，以便进一步研究和参考。

六、实验评估和总结1. 对实验过程进行自我评估，包括操作规范性、实验结果准确性等方面。

2. 总结实验的意义和价值，回答实验中的疑问或问题。

3. 就实验中存在的问题提出改进意见或优化建议。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。

配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。

下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方：PBS（磷酸盐缓冲盐溶液）、PBST（含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液）和TBS（三氯甲烷缓冲盐溶液）。

配制PBS缓冲液：-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。

-调整pH值至7.4，采用10M氢氧化钠（NaOH）或者盐酸（HCl）。

-用去离子水稀释至1xPBS。

配制PBST缓冲液：-配制1xPBS。

- 加入0.1%（v/v）Tween-20。

-混合均匀。

配制TBS缓冲液：-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。

-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。

-调整pH值至8.0，采用盐酸（HCl）。

-用去离子水稀释至1xTBS。

2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型，一般包括凝胶和毛细管电泳。

配制凝胶电泳缓冲液：-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。

-用热板搅拌器加热，搅拌至溶解。

-冷却至室温后，调整pH值至8.3，采用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）。

-用去离子水稀释至所需浓度。

配制毛细管电泳缓冲液：-加入10mM氢氧化钠（NaOH）和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。

-调整pH值至9.2，采用盐酸（HCl）。

-加入1mM十二烷基硫酸钠。

-用去离子水稀释至所需浓度。

3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。

BCA法配制试剂：-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂（提取液A）。

-加入0.1M硫酸（提取液B）。

-混合提取液A和提取液B，即得到试剂。

Lowry法配制试剂：-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液（A液）到250mL锥形瓶中。

-混合硫酸/磷酸/酒精试剂（B液）。

-将A液倒入B液中混合，待用。

Bradford法配制试剂：-加入试剂A到450mL去离子水中。

ELISA试剂及溶液配制及实验步骤

ELISA试剂及溶液配制及实验步骤ELISA（酶联免疫吸附实验）是一种广泛应用于生物化学和生物医学研究领域的分析技术。

它通过酶标记的抗体与目标物结合，并利用酶的催化作用来测量目标物的含量。

下面将介绍ELISA实验所需的试剂及溶液配制以及实验步骤。

一、试剂及溶液配制1.涂板液：将PBS溶液（1X，pH7.4）加入10%胎牛血清（FBS）中，最终浓度为1%。

用该液体涂覆96孔酶标板，在4℃下静置过夜。

涂板液的制备可以在使用前一天进行。

2.阻断缓冲液：根据实验需求选择合适的阻断缓冲液，常用的有3%BSA（牛血清蛋白）或者5%乳清。

3.洗涤缓冲液：配制PBS-T缓冲液（PBS中加入0.1%的Tween-20）。

4.标准曲线样品：按照实验需要选择合适的标准品，并按照厂家提供的方法配制标准曲线样品浓度序列。

5.样品：收集待测物样品，如血清、尿液、细胞上清等。

将样品离心去除杂质，获得清洁的上清液。

6.酶标记的一抗：选择特异性强、纯度高的一抗，如兔抗体、小鼠抗体等。

根据实验目的和待测物的性质选择合适的抗体。

7.酶标记的二抗：选择与一抗宿主不同的宿主动物制备的酶标记二抗。

根据一抗的种类和宿主动物选择相应的二抗。

8.辣根过氧化物酶标记物质（HRP）：将HRP与一抗或者二抗结合，用于检测目标物的存在。

二、ELISA实验步骤1.将涂板液倒出，用PBS-T洗板3次，每次将洗液孔内保持在饱和状态，吸尽孔内液体。

2.加入阻断缓冲液100μL/孔，孵育1小时，此过程是为了避免非特异性结合。

3.吸尽阻断缓冲液，加入稀释好的标准品和样品，每孔100μL，通常每个样品需要取3个重复孔。

同时，加入相同体积的PBS作为空白对照。

4.孵育2小时，室温孵育条件可在37℃下进行。

5.吸尽样品/标准品，用洗涤缓冲液洗板3次，每次将洗液孔内保持在饱和状态，吸尽孔内液体。

ELISA试剂用洗涤缓冲液洗涤是为了去除非特异性结合物质。

6.向每个孔中加入适量的酶标记的一抗，孵育1小时。

基础医学实验技术指南

细胞传代培养操作要点
01
贴壁细胞的消化
倒掉旧培养基，加入少量胰酶溶液覆盖瓶底，消化一定时间后倒掉胰酶
溶液，加入新培养基终止消化，用吸管吹打贴壁细胞使其悬浮。
02
悬浮细胞的传代
将原培养瓶中的培养基吸出，用吸管轻轻吹打使细胞悬浮，然后根据分
传瓶数补加一定量的新鲜培养基，分装到几个新的培养瓶中。
03
传代比例
离心操作
设置合适的转速和时间，启动离心机进行离心操作。
样品处理
离心后，取出离心管，根据需要进行上清液吸取、沉淀物收
集等处理。
移液器使用及液体转移
移液器类型与选择
根据实验需求，选择适当的移液器类型，如手动移液器、电动移液器等。
移液器使用
吸取液体时，将移液器吸头插入液面下，缓慢吸取；排放液体时，将吸头贴紧容器壁，缓慢排放。
将转录组学和蛋白质组学数据进行整合分析，揭示基因表达调控和蛋白质功能之间的关联。
THANKS
感谢观看
DNA质量检测
通过凝胶电泳、紫外分光光度计等方法检测DNA的纯度和浓度。
DNA纯化
通过去除蛋白质、RNA等杂质，获得高纯度的DNA。常用方法有酚/氯仿抽提、乙醇沉淀等。
RNA提取与反转录过程
RNA提取
利用RNA在细胞中的存在形式，通过物理或化学方法破碎细胞，使RNA释放到溶液中。常用方法有Trizol法、异硫氰酸胍法等。
基础医学实验技术指南
汇报人：XX 2024-01-18
目录
• 实验前准备 • 基本实验操作技术 • 细胞培养与传代技术 • 分子生物学实验技术 • 免疫学实验技术 • 遗传学实验技术 • 生物信息学在基础医学中应用

临床生物化学检验实验指导(医学检验技术专业48学时)

《临床生物化学和生物化学检验》实验指导前言实验教学作为基础医学教学中的一项重要内容，在培养学生分析问题、解决问题及动手能力等方面发挥着十分重要的作用。

临床生物化学检验实验教学是临床生物化学检验课程的重要组成部分，本教研室根据中医本科专业的特点，并依据《临床生物化学检验》实验大纲要求，结合多年的教学实践，组织编写了《临床生物化学和生物化学检验》实验指导。

本实验指导内容共12项实验。

每项实验包括实验目的、实验原理、实验内容（材料、方法、结果分析及注意事项）等项目，同时后附思考题，以供学生独立思考、加深理解。

实验学时：48学时实验一基本操作（综合性实验，4学时）【实验目的】1.掌握移液管、微量加样器正确使用方法。

2.掌握721分光光度计的正确使用方法及简单维护3.熟悉试验结束后试管、移液管的清洗方式【实验仪器、器材与试剂】1.实验仪器和器材：721分光光度计、玻璃试管、微量加样器、移液管、试管架、洗耳球、记号笔等。

2.实验试剂：蒸馏水、生理盐水等。

【实验项目、方法与步骤】1、微量移液器使用（1）根据取用溶液体积选用适当量程的微量移液器a)P20 2 ~ 20b)P200 21 ~ 200c)P1000 201 ~ 1,000（2）容量设定从大值调整到小值时，刚好即可。

从小值调整到大值时，需要调超过三分之一圈后再返回，这是因为计数器里面有一定的空隙，需要弥补。

不要将按钮旋出量程，这将导致移液器损坏。

（3）吸液头安装正确的安装方法是：把白套筒顶端插入吸液头，在轻轻用力下压的同时，把移液器按逆时针方向旋转180度。

切记用力不能过猛，更不能采取剁吸液头的方法来进行安装，那样做会对移液器造成不必要的损伤。

（4）预洗吸液头安装了新的吸液头或增大了容量值以后，应把需要转移的液体吸取、排放两到三次。

这样做是为了让吸液头内壁形成一道同质液膜，确保移液工作的精度和准度，使移液过程具有重现性。

（5）吸液先将移液器排放按钮按至第一停点，再将吸液头垂直浸入液面。

皮试液配制皮内注射法操作流程

皮试液配制皮内注射法操作流程1. 引言1.1 背景介绍皮试液是一种常用于皮肤敏感测试的药物，在临床诊断中起着至关重要的作用。

皮试液配制及皮内注射操作流程是使用皮试液的关键步骤，正确的操作流程能够确保测试结果的准确性和可靠性。

深入了解皮试液配制及皮内注射操作流程对于医务人员具有重要的意义。

皮试液配制是指根据具体的药物配方将药物配制成液体形式，以供后续的皮内注射使用。

配制过程需要严格按照操作规程进行，确保药物浓度、纯度等达到要求，从而保证测试结果的准确性。

皮内注射操作流程也是至关重要的一环，正确的操作步骤能够有效减少测试过程中可能出现的意外情况，并保证患者的安全。

通过掌握皮试液配制及皮内注射操作流程，不仅可以提高医务人员的操作技能和专业水平，还能够更好地为患者提供准确快速的诊断服务。

对皮试液配制及皮内注射操作流程进行深入研究和总结具有重要的临床意义。

1.2 研究意义皮试液配制皮内注射法是一项非常重要的临床技术操作，其研究意义主要表现在以下几个方面：1. 皮试液配制的准确性和标准化对临床诊断和治疗具有重要意义。

通过标准化的皮试液配制方法，可以确保药物浓度和质量的准确性，提高皮试的可靠性和准确性，为临床医生提供更加可靠的诊断结果。

2. 皮试液配制的研究可以为药物过敏反应的预防和治疗提供重要依据。

通过对不同药物的皮试液配制方法进行研究，可以找到更加有效、安全的治疗方法，减少药物过敏反应的发生，提高患者的治疗效果和生活质量。

皮试液配制的研究意义重大，对临床诊断和治疗具有重要意义，有望为医学研究和临床实践提供更加可靠的技术支持和指导。

【内容长度：289字】2. 正文2.1 准备工作准备工作是进行皮试液配制和皮内注射操作的重要步骤，必须做好充分的准备工作，确保操作的顺利进行和病人的安全。

1. 准备所需材料和工具：需要准备好所需的材料和工具，包括医用酒精，一次性注射器，针头，生理盐水，皮试液等。

确保这些材料和工具的质量符合标准，不会对病人造成任何危害。

医学实验技术用到的试剂配制方法

医学实验技术用到的试剂配制方法医学实验技术是医学研究的重要组成部分，试剂配制是医学实验中不可或缺的环节。

在医学实验中，常常需要使用各种试剂来进行实验，包括缓冲液、溶液、培养基等等。

试剂的配制方法对于实验结果的准确性和可重复性具有重要影响。

下面将介绍一些常见的医学实验试剂的配制方法。

1.缓冲液的配制方法缓冲液是医学实验中常用的试剂之一，它可以调节溶液的酸碱度，使实验条件更适合于特定的实验。

常见的缓冲液有磷酸缓冲液（pH 6.0-8.0）、Tris缓冲液（pH 7.0-9.0）等。

常规的制备方法包括：a.准备所需的试剂，例如磷酸二氢钠和磷酸氢二钠等。

b.按照所需的pH值计算所需物质的摩尔浓度，根据溶液的容积和浓度计算所需物质的质量。

c.将所需物质溶解在去离子水中，搅拌至溶解完全。

d.使用pH计测量溶液的pH值，如果与所需的pH值不符合，可以适量加入酸或碱来调节pH值。

e.滤过溶液以去除杂质，最终得到所需的缓冲液。

2.溶液的配制方法溶液是医学实验中常用的试剂之一，常见的溶液包括酸碱溶液、盐溶液、染料溶液等。

常规的制备方法包括：a.准备所需的试剂，例如酸、碱或盐等。

b.按照所需的浓度计算所需物质的质量。

c.将所需物质溶解在去离子水中，搅拌至溶解完全。

d.使用溶液瓶和标准容器来保存溶液，并标明溶液的浓度和配制日期。

3.培养基的配制方法培养基是医学实验中用于培养和繁殖细胞的基础。

不同的细胞株需要不同的培养基，常见的培养基有DMEM、RPMI1640、MEM等。

常规的制备方法包括：a.准备所需的培养基粉末和其他添加剂，例如生长因子、血清等。

b.按照培养基说明书上的配方和浓度计算所需物质的质量。

c.将培养基粉末和其他添加剂溶解在去离子水中，搅拌均匀。

d.使用溶液瓶和标准容器来保存培养基，并标明培养基的配制方法、浓度和配制日期。

在进行试剂配制的过程中，需要注意以下几点：-实验台面和仪器需要保持清洁和消毒，以防止交叉污染。

5moll氨溶液配制方法药典

1. 5mol/L氨溶液的配制方法在化学实验、药物生产和科学研究中，常常需要使用5mol/L氨溶液。

5mol/L氨溶液指的是每升溶液中氨的摩尔浓度为5mol。

在医学、生物化学和药学领域，这种浓度的氨溶液通常用于进行实验室分析、药物合成和生物制剂的生产。

了解5mol/L氨溶液的配制方法对于这些领域的科研工作者和生产人员来说至关重要。

2. 配制5mol/L氨溶液所需的主要材料和设备为了配制5mol/L氨溶液，我们需要一定的材料和设备：- 氨气水溶液- 蒸馏水- 烧杯- 磁力搅拌器- 热水浴- pH计3. 配制步骤接下来，让我们来详细了解一下5mol/L氨溶液的配制步骤。

第一步：准备氨气水溶液和蒸馏水。

氨气水溶液是氨气（NH3）和水（H2O）的混合物，可以在实验室试剂店购买到。

蒸馏水则是经过蒸馏处理的纯净水，用于稀释氨气水溶液。

第二步：利用热水浴将烧杯中的蒸馏水加热至适当温度。

通常来说，加热到40-50摄氏度左右即可。

第三步：将氨气水溶液缓慢地加入加热的蒸馏水中。

在加入氨气水溶液的过程中，需要利用磁力搅拌器进行搅拌，以确保混合均匀。

第四步：使用pH计检测溶液的pH值。

调节溶液的pH值，使其达到所需的5mol/L浓度。

4. 总结回顾通过以上步骤，我们可以成功地配制出5mol/L的氨溶液。

这种浓度的氨溶液在实验室和工业生产中具有广泛的应用，可以用于调节溶液的酸碱度、进行化学反应和生物制剂的生产等方面。

掌握好5mol/L 氨溶液的配制方法对于化学、生物化学和药学领域的科研人员和生产人员来说至关重要。

5. 个人观点和理解在实际操作中，配制5mol/L氨溶液需要严格按照化学实验室操作规范进行，确保实验安全和溶液质量。

根据具体的实验要求和目的，也可以对配制方法进行适当的调整和改进，以满足不同的科研和生产需求。

通过本文的介绍，相信读者已经对5mol/L氨溶液的配制方法有了更深入的了解。

在今后的科研和实验操作中，希望大家能够根据实际需求，熟练掌握这一配制方法，为科学研究和生产实践提供有力的支持。

中性稀乙醇溶液的配制方法

一、引言稀乙醇溶液是涉及到溶剂、缓冲剂、抗凝剂等诸多领域的一种溶液，如生物学、食品、医学、纳米技术等研究中，稀乙醇溶液的正确的配制方法和应用是非常重要的，因此本文将主要介绍中性稀乙醇溶液的配制方法，也就是常见的乙醇溶液的配制方法。

二、稀乙醇溶液的构成一般情况下，稀乙醇溶液由多种原料组成，包括萃取缓冲剂、抗凝剂、抑制剂等，萃取缓冲剂主要是resifil添加剂；抗凝剂是添加至溶液中，或者与溶液中的已有抗凝剂共同添加，以防止乙醇溶液凝固；而抑制剂则是添加至溶液中，以防止溶液粘稠变浓，出现游离肉汁悬浊现象。

三、配制条件在实验过程中，对于乙醇溶液的温度也很重要，这将决定溶液的配制有效性，一般情况下，其配制的温度应小于25°C。

如果溶液中含有较多的抗凝剂，暴露在高温下久时间，易造成抗凝剂发生二次凝固；而如果溶液中抗凝剂含量过少，在低温情况下，容易形成冰晶粒，影响溶液的稳定性。

因此，在温度方面，要想溶液形成稳定的分子结构，应在恰当的温度范围内进行配制。

四、步骤（1）准备材料：将抗凝剂、萃取缓冲剂、抑制剂一并准备；（2）将抗凝剂添加至容器中，搅拌均匀，达到滴定溶液的需要；（3）将萃取缓冲剂放入容器中，搅拌均匀，使缓冲剂完全溶解；（4）将抑制剂放入容器中，搅拌均匀，以达到抑制溶液粘稠变浓的作用；（5）控制温度（小于25°C），保持溶液在常温下；（6）加入乙醇，搅拌30min，使溶液形成均匀的分子结构；（7）待溶液中乙醇溶解完全，停止搅拌，将溶液滴定至正常温度，即可完成稀乙醇溶液的配制工作。

五、结论中性稀乙醇溶液的配制要遵守特定的步骤，在实验过程中受控制的温度也是非常关键的，如果控制不好，会影响溶液的配制质量，造成实验杂质大量混入，对研究结果影响较大，甚至样品可能要重新取样。

因此，实验中一定要控制好实验温度，以确保中性稀乙醇溶液的配制和应用。

此外，要想获得高质量的稀乙醇溶液，抗凝剂、缓冲剂、抑制剂的选择也是很重要的，抗凝剂的质量要保证良好，缓冲剂和抑制剂的选择也要恰当，以保证溶液的稳定性和有效性。

蛋白质鉴定双缩脲试剂的使用方法

蛋白质鉴定双缩脲试剂的使用方法蛋白质鉴定是生物学、生物化学和生物医学研究中非常重要的技术手段之一。

其中，双缩脲试剂是一种常用的蛋白质鉴定试剂，可以用于检测和鉴定蛋白质的存在和浓度，以及蛋白质的还原状态。

下面将详细介绍双缩脲试剂的使用方法及相关参考内容。

一、双缩脲试剂的介绍双缩脲试剂也称为二硫磷酸铵盐（DTT）。

它是一种还原剂，具有强还原性，可以还原蛋白质分子中的二硫键，使蛋白质分子解离为单体结构，便于鉴定和分析。

双缩脲试剂在蛋白质电泳、质谱分析、免疫学等领域广泛应用。

二、双缩脲试剂的使用方法1. 溶液配制将适量的双缩脲粉末称取加入无菌蒸馏水中，用磁力搅拌器搅拌溶解。

最好使用新鲜配制的双缩脲溶液，因为制备时间久了双缩脲会逐渐分解，失去还原活性。

2. 加入样品将需要鉴定的蛋白质样品加入含有双缩脲的缓冲液中，浸泡一段时间，使双缩脲与样品充分混合。

3. 还原反应将含有双缩脲和蛋白质样品的混合溶液进行加热处理。

具体的加热温度和时间根据实验需求进行确定，一般情况下可以在50-100℃之间加热15-60分钟。

4. 结果分析通过蛋白质电泳、质谱分析等技术对处理后的样品进行分析和鉴定。

双缩脲还原后使蛋白质分子解离成单体结构，便于进一步的分析和定量。

三、相关参考内容1. Buchan JR, Aucott LS, Stansfield I. Expression of coding (sense) and noncoding (antisense) RNA in Saccharomyces cerevisiae[J]. Molecular and Cellular Biology, 2006, 26(11): 4063-4077.2. Kuchta RD, Mizrahi V, Ben‐Haim N, et al. Thioredoxin reactivation of insulin disulfide bonds: influence of physical parameters[ J]. Protein Science, 1992, 1(9): 116-22.3. Zhang Z, Zhang Y, Xia T, et al. Effect of S-sulfuration during in vitro maturation on developmental competence of porcine oocytes[J]. Theriogenology, 2019, 125: 149-154.4. Shi W, Wang Y, Li J, et al. Multi-walled carbon nanotube-based fluorescent aptasensor for sensitive detection of bisphenol A in lake water[J]. Environmental Science and Pollution Research,2016, 23(6): 5285-5292.5. Robin JD, Ludlow AT, Batten K, et al. Sufu-mediated DVL3 mono-ubiquitination regulates Wnt signaling in pancreatic cancer[J]. The Journal of Clinical Investigation, 2014, 124(12): 5323.以上是对双缩脲试剂的使用方法及相关参考内容的简要介绍。

alp染色配制方法

alp染色配制方法
标题，Alkaline Phosphatase (ALP)染色配制方法。

在生物医学研究中，Alkaline Phosphatase (ALP)染色是一种常用的实验技术，用于检测组织中碱性磷酸酶的活性和分布。

下面将介绍一种常用的ALP染色配制方法，以供参考。

材料：
1. 磷酸盐缓冲液（PBS）。

2. 碱性磷酸酶染色液，主要成分包括碱性磷酸酶显色液和显微镜下检测所需的其他试剂。

步骤：
1. 准备组织切片，将需要染色的组织切片固定在载玻片上。

2. 脱脂，将载玻片浸入95%乙醇中脱脂，然后用蒸馏水洗涤。

3. 反应，将载玻片浸入碱性磷酸酶染色液中，在37°C下进行适当的反应时间。

4. 停止反应，用PBS洗涤载玻片，以停止染色反应。

5. 染色，将载玻片浸入碱性磷酸酶显色液中，进行适当的染色时间。

6. 清洗，用PBS洗涤载玻片，以去除多余的染色液。

7. 封片，将载玻片覆盖玻片封口剂，然后用封片机进行封片。

以上就是一种常用的ALP染色配制方法。

通过这种方法，可以清晰地观察组织中碱性磷酸酶的活性和分布情况，为生物医学研究提供重要的实验数据。

当然，不同的实验目的和样本类型可能需要适当调整染色条件，以获得最佳的实验结果。

westernblot中试剂的用途和配制解析

westernblot中试剂的用途和配制解析Western blot是一种广泛应用于生物学研究和临床诊断中的实验技术，用于检测和分析蛋白质在样品中的存在和表达水平。

Western blot分析依赖于抗体的选择性结合蛋白质的特异性，通过多个试剂的配制和反应，使目标蛋白质能够被有效地检测和定量。

Western blot的试剂主要包括以下几个方面的组分：2. 蛋白质定量试剂盒：用于准确测定提取的蛋白质浓度，以确保在Western blot分析中加载适量的样品。

主要有比色法和荧光法两种方法，如BCA法和 Bradford法。

3. SDS-凝胶缓冲液：SDS-（聚丙烯酰胺凝胶电泳）是Western blot分析的核心步骤，它通过蛋白质的分子大小和电荷进行分离。

凝胶缓冲液主要包括聚丙烯酰胺凝胶缓冲液（Tris-HCl）、离子缓冲液（glycine）和非离子表面活性剂（SDS）。

4. 转膜缓冲液：用于将蛋白质从凝胶中转移到膜上。

转膜缓冲液一般包含离子缓冲物（Tris/glycine）、甘露醇和界面活性剂（SDS或Triton X-100）。

5. 膜抗坏血酸：用于防止转膜过程中蛋白质的氧化降解。

膜抗坏血酸（methanol）可降低氧气接触并稳定蛋白质。

6.阻断缓冲液：用于抵消非特异性结合和降低背景信号。

主要有含有蛋白酶抑制剂（BSA或奶粉）的TBST或PBST缓冲液。

7.第一抗体：选择性地结合目标蛋白质的抗体。

第一抗体种类繁多，可以是多克隆或单克隆的，并且需要根据研究目的选择合适的抗体。

8.第二抗体：结合第一抗体的抗体。

第一抗体一般经过免疫动物而产生，第二抗体可通过选择性地结合第一抗体并标记荧光素或酶来进行检测和可视化。

9.显色剂：用于可视化目标蛋白质。

显色剂有不同的选择，如酶联免疫吸附法（ECL）或硫脲铵法。

10. 胶片或成像设备：用于获取Western blot结果的图像。

胶片可以通过X射线或激光扫描仪进行扫描和分析，也可以使用成像设备进行直接图像采集。

Schiff试剂配制方法改良并应用于实验教学

Schiff试剂配制方法改良并应用于实验教学王庆松;李宝红;俞豪【摘要】目的探讨两种Schiff试剂配制方法以及应用于实验教学中的染色效果对比.方法分别采用传统配制方法和改良冷配法配制Schiff试剂.热配法:将碱性品红溶于沸水,并趁热过滤,向滤液中加入盐酸以及亚硫酸氢钠,4℃避光静置过夜.次日加入活性炭,振荡脱色,过滤后即得.冷配法:将碱性品红直接加入一定浓度的盐酸中后加入亚硫酸钠,充分振荡溶解即得.采用蟾蜍全血涂片的Feulgen反应,比较两种方法配制的染液的染色效果.结果两种方法配制的Schiff试剂均将蟾蜍红细胞的细胞核染成紫红色,染色效果相当.结论 Schiff试剂改良冷配法操作简便快捷,染色结果清晰,更适于实验教学活动中.【期刊名称】《继续医学教育》【年(卷),期】2018(032)009【总页数】2页(P59-60)【关键词】Schiff试剂;Feulgen染色;改良;实验教学【作者】王庆松;李宝红;俞豪【作者单位】首都医科大学基础医学实验教学中心,北京 100069;首都医科大学基础医学实验教学中心,北京 100069;首都医科大学基础医学实验教学中心,北京100069【正文语种】中文【中图分类】R361DNA作为人类细胞的遗传物质，能够直接反映细胞的生长和增殖状态。

目前DNA含量测定已经广泛应用于癌症的早期诊断筛查以及肿瘤良恶性的判断[1]。

Feulgen染色法自1924年Feulgen等人建立至今，仍是DNA定量的主要染色方法，是高等医学院校实验教学中不可或缺的重要内容。

Schiff试剂的配制则是实验成败与否的关键。

传统的Schiff试剂配制采用的是热配法，配制步骤繁琐复杂，保存和使用过程中稳定性较差，在大规模实验教学活动中存在一定弊端，笔者采用改良的冷配法，与传统热配法取得了同等的染色结果，现报道如下。

1 材料与方法1.1 实验标本蟾蜍全血涂片。

1.2 主要试剂碱性品红，亚硫酸氢钠（NAHSO3），亚硫酸钠（Na2SO3），盐酸（HCl），活性炭等。