溶磷细菌筛选及对复垦土壤磷素有效性的评价
沾化冬枣根际解无机磷细菌的分离、鉴定及其在土壤中溶磷效果的研究
，
（ １ ． Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｌ ｉ ｆ ｅ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ， Ｂ ｉ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｂ ｉ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ ２ ５ ６ ６ ０ ３ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ． Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
华 北 农 学 报 ・２ ０ １ ３， ２ ８（ ３）： ２ ０ ４ — ２ ０ ９
沾 化 冬 枣 根 际解 无机 磷 细 菌 的分 离 、 鉴 定及 其在 土壤 中溶磷 效 果 的研 究
， 郝 雅 丽 ， 刘 南 南
２ ５ ６ ６ ０ ３ ） （ １ ． 滨州学院 生命科学系 ， 山东 滨 州 ２ ５ ６ ６ ０ ３ ； ２ ． 山 东 省 黄 河 三角 洲 野 生 植 物 资 源 开 发 利 用 工 程 技 术 研 究 中心 ， 山东 滨 州 ２ ５ ６ ６ ０ ３； ３ ． 滨 州 市 食 品 安 全重 点 实 验 室 ， 山东 滨 州
Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｃｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ Ｗｉ ｌ ｄ Ｐ ｌ ａ ｎ ｔ Ｒｅ ｓ ｏ ｕｒ ｃ ｅ ｓ Ｄｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｎ ｄ Ａｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｙｅ ｌ ｌ ｏ ｗ Ｒｉ ｖ ｅ ｒ Ｄｅ ｌ ｔ ａ，
验， 以 及 促 进 土 壤 中有 效 磷 含 量 增 加 等 一 系 列 研 究 。结 果 显 示 ， 本 试 验 从 沾 化 冬 枣 根 际 土 壤 中分 离 出 １株 耐 盐 高 效
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定随着农业生产的不断发展，土壤中的养分供应问题逐渐凸显出来。
磷和钾是土壤中必不可少的元素，对植物的生长发育具有重要的影响。
由于土壤中无机磷和钾的含量有限，很大一部分呈结合态，无法直接被植物吸收利用，需要通过微生物的参与，转化为植物可利用的形态。
溶磷和解钾微生物是一类能够有效分解土壤中有机磷和结合态钾的微生物，对于提高农作物的吸收利用率具有重要的意义。
分离筛选与鉴定这些菌株可以为农业生产提供一种新的途径，用于改善土壤肥力，并减少化肥的使用。
分离筛选这些溶磷解钾菌的关键是寻找适合生长的培养基。
常用的培养基有PDA、LB 和液体MS等。
从农田土壤中采集土壤样品，并将样品带回实验室进行处理。
将土壤样品稀释后接种在已经准备好的培养基上，将培养皿密封后放置在适当的温度和湿度下培养。
在合适的时间内，从培养皿中观察出现菌落的样品，进行进一步的分析与鉴定。
鉴定这些菌株的关键是通过形态学、生理生化以及分子生物学等多种手段进行分析。
通过形态学的方法，可以观察菌落的形态、色素的产生以及孢子的形态等特征。
然后，通过生理生化的方法，可以测试菌株对不同物质的利用能力，如磷酸盐的水解能力和钾离子的溶解能力。
通过分子生物学的方法，可以利用PCR技术扩增16S rRNA基因，并进行测序分析，以确定溶磷解钾菌的亲缘关系。
通过以上的分离筛选和鉴定工作，可以得到一株具有较好解磷和溶钾能力的菌株。
之后，可以进一步对其进行大规模培养和应用试验，以验证其在农业生产中的作用。
通过利用这些菌株，可以提高土壤肥力，减少农药的使用，改善农作物的产量和品质，为可持续农业的发展做出贡献。
《土壤中的解磷微生物研究文献综述4200字》
土壤中的解磷微生物研究文献综述目录土壤中的解磷微生物研究文献综述 (1)1.1 前言 (1)1.2 土壤中的磷 (2)1.2.1 土壤中的磷的存在形式及动态变化 (2)1.2.2 我国磷肥的应用现状 (2)1.3 解磷微生物的研究概况 (2)1.3.1 微生物在磷素循环中的作用 (2)1.3.2 解磷微生物的的种类 (3)1.3.3 解磷微生物的解磷机制 (3)1.3.4 解磷菌肥研究现状 (4)1.3.5 矿区土壤中解磷细菌研究现状 (4)参考文献 (4)1.1 前言磷是生物生长发育的必需元素之一，动物和微生物可通过捕食或分解代谢来补充，而植物体内的磷元素主要来自植物根部对土壤中可溶性磷元素的吸收。
其含量的多少直接影响植物的生根、幵花、固氮以及光合作用等生命活动[1]。
土壤中的磷素有95%以上以难溶性盐的形式存在。
由于具有溶解度极低、不易被吸收的特性，导致我国一半以上的耕地存在着土壤或植物的缺磷现象。
磷素的缺乏常会导致作物的生长发育受限，目前国家主要采取增施化学磷肥[2]等措施。
磷肥的不合理施用造成了磷矿资源过量开采[3,4]、环境污染[5,6]以及当季磷肥利用率较低等一些列的问题。
至今磷仍然是我国农业生产中重要的限制因素之一，因此研究更加高效无害的新型磷肥，提高磷肥使用效率，是提高我国乃至全球农业发展虐待解决的问题之一。
目前为止，多种解磷微生物已经在农业生产中得到了应用，但仍旧存在着菌株定殖能力较弱，溶磷效果不佳等问题。
由于土壤中磷素成分多样复杂，因此筛选具有多重解磷能力且对恶劣生态环境适应性较强的微生物，仍是解磷菌肥开发的一项重要的基础性工作[7]。
本研究以辽宁省大连市某水镁矿尾矿表层土壤中筛选出的兼具溶磷效果和环境适应能力强的细菌菌株为研究对象，探讨了其对钙磷、铝磷、铁磷以及有机磷等四种不同类型难溶性磷的降解性能，为今后开发和利用解磷菌肥提供参考依据，对节约磷矿资源，缓解相关的面源污染等问题具有重要的现实意义。
农田土壤中磷素有效性及影响因素_王永壮
Abstract： Soil phosphorus （ P） availability directly determines cropland productivity． Based on the long-term fertilization experiments in different climatic zones of China，this paper summarized the P content，its availability，and the factors affecting the P transformation in China cropland soils． The total and available P contents in different types of China cropland soils were 0． 31 －1． 72 g·kg－1 and 0． 1－228． 8 mg·kg－1 ，respectively． Soil parent material，soil physical and chemical prosperities，and fertilization practices were the main factors affecting the soil P availability． It was suggested that more attentions should be paid on the mixed application of organic manure and chemical fertilizers to improve the P availability of cropland soils and on the potential environmental impacts of this fertilization．
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定一株具有溶磷解钾功能的细菌对于农业生产具有重要意义。
溶磷解钾菌可以促进土壤中的固定磷和铵态氮溶解，提高土壤中的磷和钾素的有效性，从而增强作物对磷和钾的吸收利用能力，促进植物生长和发育，提高作物产量。
对具有溶磷解钾功能的细菌进行分离筛选与鉴定，具有十分重要的意义。
本文将介绍一种分离筛选一株溶磷解钾菌的方法以及对其的鉴定过程。
分离筛选一株溶磷解钾菌需要制备携氧试验的培养基。
携氧试验的培养基成分包括：葡萄糖1g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.25g、酵母提取物1g、硫酸铵1g、硫酸铁(FeSO4)0.05g、硫代硫酸钠0.5g、石英砂10g、琼脂15g、蒸馏水1000mL。
以上材料按比例混合均匀后，装入试管或蒸煮瓶中，压紧无菌煤炉棉塞后于121℃高压蒸汽灭菌，即可使用。
接着，从不同土壤样品中取样，分别于1g土样中分离出来的溶磷解钾菌。
将土样加入适量生理盐水中，制备土样悬浊液。
然后，将悬浊液在40℃下震荡振动1h，接着利用稀释平板法将液体均匀地平铺在含有携氧试验培养基的琼脂平板上，放置于30℃恒温培养箱中孵育3-5d。
在孵育期间，从分离得到的溶磷解钾菌中挑选溶磷解铵类磷酸盐(Pi)菌株。
特别地，溶磷强度不低于0.3mmol/L的菌株被认定为溶磷阳性菌，溶铵效率不低于20%的菌株被认定为解铵效率阳性菌。
接下来，对分离得到的溶磷解钾菌进行生理生化特性鉴定。
通过形态学特征观察，包括菌落形态、细胞形态、颜色、透明度等，来初步鉴定菌株。
然后利用生化试剂盒对细菌进行生化鉴定，如氧化酶试验、嫌氧发酵试验、尿素酶试验等。
还可以利用16S rRNA序列鉴定技术对细菌进行鉴定，即将菌株的DNA提取出来，进行PCR扩增和测序，最后通过与GenBank数据库比对，来鉴定出菌株的属种信息。
同时还可以通过质谱技术（MALDI-TOF MS）鉴定菌株。
对已经分离筛选和鉴定出的溶磷解钾菌株进行进一步的功能评价。
解磷真菌分离鉴定及其溶磷能力分析
现代农业科技2024年第4期动物科学·生物技术解磷真菌分离鉴定及其溶磷能力分析姜焕焕张嘉敏梁云燕范宇清何洪活（肇庆学院生命科学学院，广东肇庆526061）摘要解磷菌能够溶解土壤中的难溶性磷或不溶性磷，在促进土壤养分循环和植物生长方面起着重要作用，是生物肥料中重要的微生物资源。
本研究采用稀释涂布平板法筛选得到5株解磷真菌（菌株SZ1、SZ2、GZ1、GZ2、HZ1），对菌株进行分子生物学鉴定，并利用液体摇瓶法测量菌株对磷酸三钙的溶磷能力。
结果表明，菌株SZ1、SZ2、GZ1、GZ2、HZ1的溶磷能力存在一定的差异，其中菌株SZ1、GZ2、HZ1的可溶性磷含量分别为58.30、2.69、8.65mg/L，菌株SZ2和GZ1没有溶解磷酸三钙的能力；菌株SZ1、SZ2、GZ1、GZ2、HZ1分别为香港史努基菌（Hongkongmyces snookiorum）、杂色曲霉（Aspergillus versicolor）、香港史努基菌（Hongkongmyces snookiorum）、棘孢木霉（Trichoderma asperellum）、林尼曼菌（Linnemannia exigua）。
关键词根际土壤；解磷真菌；分子生物学鉴定；溶磷能力中图分类号S154.3文献标识码A文章编号1007-5739（2024）04-0170-03DOI：10.3969/j.issn.1007-5739.2024.04.041开放科学（资源服务）标识码（OSID）：磷是植物生长发育所需的矿物质元素之一，但土壤中的难溶性磷占比高达95%，能被植物直接吸收利用的磷占比不足5%[1]。
据相关报道，全世界范围内缺磷耕地占比约为43%，我国缺磷耕地比例约为74%[2]。
传统农业主要通过施用磷肥增加土壤中的有效磷含量，但过量施用磷肥导致磷被进一步固定在土壤中，造成土壤退化、重金属累积、水体富营养化等问题[3]。
随着人们环境保护意识的增强和农业可持续发展战略的实施，开发利用土壤微生物并将其制成微生物肥料用于提高土壤中的有效磷含量成为农业生产研究热点。
1株无机磷细菌筛选及溶磷能力的测定
０ ． ８ ％的生理盐水洗脱 ， 并且 于 ４ Ｏ℃活化 ４ ８ ｈ后 ， 再 把溶磷 细菌稀 释涂 布于平板上 ， ４ ０℃培养 ５ ｄ ， 每天定 时测量溶磷 圈 直径与 菌落直 径 ， 计 算两者 比值 ， 初步定 性该 菌溶磷 能力大 小。（ ２ ） 液态 摇瓶 有 效磷 法 ： 取 １ ｍ Ｌ溶 磷 细菌 菌悬 液 （ 约 １ ０ 。 个／ ｍＬ ） ， 分别 接人 到含 Ｃ ａ ３ （ Ｐ Ｏ ） ： 和磷矿粉 的 １ ０ ０ｍ Ｌ液 态发酵培养基 中， ４ ０℃ １ ６ ０ ｒ ／ ａ ｒ ｉ ｎ下连续培养 ７ ｄ 。定时将发
酵液经 １ ０ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ 离心 １ ０ ｍ ｉ ｎ ， 取上清 液测定 有效磷 的含
壤中接种 溶磷 菌 ， 能够显著改善作物的磷 素营养 ， 提高作物的 产量 ｊ 。因此 ， 开 展溶磷 微生 物 的筛选 ， 深 挖土 壤 内部磷 资 源潜 力 ， 可大大减少磷肥施 入量 ， 减少污染 ， 有利于农业 的高
１ ． ２ ． ４ 测定方法 １ ． ２ ． ５ 数据分析 ｌ ８进行统计分析。
２ 结果 与分 析
１ ． １ ． １ 菌种来源 １ ． １ ． ２ 培 养基
释放 返 回土壤 溶 液 中， 能 够担 当此 任务 的只有 溶磷 微生 物 （ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ａ ｔ ｅ—ｓ ｏ ｌ ｕ ｂ ｉ ｌ ｉ ｚ ｉ ｎ ｇ ｍ ｉ ｃ ｒ ｏ ｏ ｒ ｇ ａ ｎ ｉ ｓ ｍｓ ， Ｐ Ｓ Ｍｓ ） ， 溶磷 微 生 物
能将 难溶性磷 酸盐 转化为 植物 可吸 收利用 的形 态 。向土
透明圈。有则 挑取 有 透 明圈 的菌 落 ， 进一 步 划线 分 离 至纯 培养 。 １ ． ２ ． ２ 形态特征 记 录平板菌落形态特征和镜检特征。
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定引言溶磷解钾菌是一类能够利用有机磷和无机磷、溶解磷酸盐和解钾的微生物。
它们在土壤营养元素的循环中起着重要的作用，不仅可以提高土壤中磷和钾的有效性，也有利于植物的吸收利用。
对于这类细菌的分离筛选和鉴定具有重要意义。
一、溶磷解钾菌的分离筛选1.1 样品采集我们需要通过采集不同土壤样品来寻找可能存在溶磷解钾菌的环境。
可以选择农田、森林、草原等不同类型的土壤样品。
还可以通过不同植物根系附近的土壤来采集样品。
这样获取的样品中可能存在多样化的微生物资源。
1.2 分离培养将采集到的土壤样品进行稀释并分装到不同培养基中，添加适当的磷、钾源以及生长因子，利用稀释平板法将土壤样品中的微生物分离出来。
待菌落出现后，再进行单菌落分离，最终得到纯培养的单一微生物。
1.3 溶磷解钾菌的筛选通过溶磷解钾菌的生理特性，我们可以利用含有无机磷盐和钾盐的培养基来筛选出具有溶磷解钾功能的菌株。
分离出的微生物在溶解磷酸盐和解钾作用上表现出显著的特异性时，则可认定其为溶磷解钾菌。
1.4 筛选结果经过上述步骤，我们可以获得多个可能具有溶磷解钾功能的菌株。
在鉴定这些菌株前，还需要进一步加以鉴定验证，以确保结果的准确性。
2.1 形态学特征将分离出的菌落进行鉴定，首先需要进行形态学特征的观察。
包括菌落形态、细胞形态、颜色、大小、孢子、芽孢等特征。
根据这些特征可以初步判断该菌属于哪一类细菌。
2.2 生理生化特征接着，我们需要对细菌进行生理生化特性的检测。
比如对其生长温度、耐盐性、碱酸度、氧气需求等特性进行测试。
还可以对其代谢产物进行分析，判断其对溶磷解钾的能力。
2.3 分子生物学鉴定根据现代分子生物学的技术手段，可以利用PCR扩增细菌的16S rRNA基因序列，并根据序列比对，进行系统发育关系分析，确定细菌的分类地位。
这是鉴定细菌的一种较为准确和有效的方法。
2.4 鉴定结果经过以上步骤的鉴定，我们可以确定出一株真正具有溶磷解钾功能的细菌。
1株溶磷细菌的筛选及其溶磷物质分析
1株溶磷细菌的筛选及其溶磷物质分析张淑红【摘要】为了获得高效溶磷菌并了解其溶磷机制,从生活垃圾堆积地采集土样,筛选出10株对卵磷脂和磷酸钙均有溶解能力的菌株,通过液体摇瓶复筛,得到1株高效兼溶磷酸钙和卵磷脂的溶磷菌LY8,培养6d后2种难溶磷发酵液中水溶性磷质量浓度分别达到647.8 mg/L和26.6 mg/L.结合生理生化特征和16S rDNA序列分析,初步鉴定其为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium).在不同难溶性磷源条件下LY8分泌的主要溶磷物质不同,对于无机难溶磷磷酸钙,LY8菌株分泌的主要溶磷物质是有机酸,其次是磷酸酶;而对于有机难溶磷卵磷脂,LY8菌株分泌的主要溶磷物质是磷酸酶,且其分泌的有机酸、蛋白质和多糖可能也具有一定的溶磷效果.【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2014(043)008【总页数】4页(P64-67)【关键词】溶磷菌;磷酸钙;卵磷脂;溶磷物质;巨大芽孢杆菌【作者】张淑红【作者单位】唐山师范学院生命科学系,河北唐山063000【正文语种】中文【中图分类】S154.39溶磷菌在转化土壤难溶磷、提高磷肥利用率、促进作物生长方面都具有显著作用，而不同溶磷菌对不同形态难溶磷的溶解能力存在差异[1-3]。
溶解难溶性磷酸盐的细菌主要有芽孢杆菌(Bacillus)、假单胞菌(Pseudomonas)、克雷伯氏菌(Klebsiella)、节杆菌(Arthrobacter)、沙雷氏菌(Serratia)、肠杆菌(Enterobacter)和伯克霍尔德氏菌(Burkholderia)等，溶磷量最高可达643.2 mg/L；而溶解有机磷的细菌主要有芽孢杆菌(Bacillus)，溶磷量达到26.5 mg/L[4]。
溶磷菌溶磷机制各不相同，大部分溶磷菌以分泌物溶磷，其胞外分泌物中含有多种溶磷物质，近年来的研究主要集中在有机酸和磷酸酶方面[5-7]。
研究表明，大部分溶磷微生物的胞外分泌物中含有大量有机酸，所以一致认为有机酸是主要的溶磷物质[8-10]；另外微生物生长繁殖过程中，分泌出酸性磷酸酶和碱性磷酸酶，这些磷酸酶能够不断地将环境中的有机磷转化为无机磷[11]。
解磷菌的分离、筛选、鉴定及解磷能力研究
解磷菌的分离、筛选、鉴定及解磷能力研究上官亦卿;常帆;吕睿;齐凡;贾凤安;王艳;丁浩【摘要】为开发高效微生物解磷肥,利用解磷菌选择培养基(蒙吉娜卵磷脂培养基)从陕西省西安市周至县猕猴桃园农田土壤中分离出11株解磷菌,通过纯化培养,筛选出1株高效解磷菌JYP9.利用16S rDNA基因序列分析方法对该菌株的分类信息进行鉴定,鉴定结果表明该菌株为假单胞菌(Pseudomonas extremori-entalis).并用解磷圈法和液体摇瓶培养法,分别以卵磷脂为惟一磷源,确定了该菌株的最适培养温度为26℃、最适转速为200 r/min、最适起始pH为7和最适起始接种量为2％.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2019(058)001【总页数】6页(P30-34,38)【关键词】解磷菌;筛选;鉴定;最适条件【作者】上官亦卿;常帆;吕睿;齐凡;贾凤安;王艳;丁浩【作者单位】陕西省科学院,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省科学院,西安710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043;陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心,西安 710043【正文语种】中文【中图分类】S154.39磷是植物生长所需的一种主要营养元素，但植物对土壤中的磷元素利用率很低，严重影响着植物的生长[1]。
有机磷是土壤磷的重要组成部分，一般占土壤全磷的20%～50%，其中植酸磷占有机磷的10%～50%[2]，是土壤有机磷的主要存在形式。
解磷菌能将植物难以吸收利用的难溶性或不溶性磷转化为可利用的形态，提高土壤中磷素的利用效率，减少化学肥料的施用，降低农业投入成本。
因此，对土壤环境进行微生物修复是提高作物产量、解决土壤速效磷缺乏的重要途径之一[3，4]。
一株高效解磷细菌的筛选、鉴定及其溶磷能力的研究
属 ( Ｃｌｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ )、 埃 希 氏 菌 属 ( Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ )
等[９ － １１] ꎮ 利用解磷微生物活化土壤难溶性磷因具有
９５％ 以上的磷为无效形式ꎬ 土壤有效磷的缺乏是限
高效、 环保ꎬ 且与土壤亲和等特点越来越受到人们
量 ２％ ꎬ 在该条件下菌株 Ｐ１ 溶解磷酸三钙的量为 ４４３ １１ ｍｇ / Ｌꎮ 试验还发现菌株 Ｐ１ 的溶磷量与培养液的 ｐＨ 值呈
极显著负相关性ꎮ
关键词: 根瘤菌ꎻ 解磷菌ꎻ 溶磷能力ꎻ 微生物肥料
中图分类号: Ｑ９３９ １ 文献标识码: Ａ 文章编号: １６７３ － ６２５７ (２０１７) ０３ － ０１３６ － ０６
溶菌肉汤培养基 (ＬＢ): 胰蛋白胨 １０ ｇꎬ 酵母浸
够将难溶性的磷酸盐如磷矿粉转化为水溶性磷ꎬ 提
高土壤中的可溶性磷含量ꎬ 从而改善植物 磷 素 营
养ꎬ 提高作物产量ꎬ 降低土壤磷素污染风险 [５ － ６] ꎮ
目前已报道的具有解磷能力的微生物包括细菌、 真
收稿日期: ２０１６ － ０３ － ２９ꎻ 最后修订日期: ２０１６ － ０５ － ２２
基金项目: 武汉市农科院集成创新项目 ( ｃｘｔｄ２０１５０５) ꎮ
摘 要: 从武汉市黄陂区长期种植的蔬菜大棚作物根际分离筛选出多株解磷细菌ꎬ 经过多次筛选纯化获得一株性
状稳定的高效解磷细菌 Ｐ１ꎮ 根据生理生化特征和 １６Ｓ ｒＤＮＡ 序列分析ꎬ 鉴定菌株 Ｐ１ 为根瘤菌属 ( Ｅｎｓｉｆｅｒ) ꎮ 研究
了不同发酵条件对 Ｐ１ 菌株解磷能力的影响ꎬ 确定了菌株 Ｐ１ 的最佳培养条件为发酵时间 ７ ｄ、 初始 ｐＨ 值 ８、 接种
磷尾矿表层土壤解磷菌的筛选及鉴定
磷尾矿表层土壤解磷菌的筛选及鉴定以磷尾矿表层土壤解磷菌的筛选及鉴定为标题磷尾矿是一种由矿石加工过程中产生的固体废弃物，它含有大量的磷，对环境造成潜在的污染风险。
为了解决磷尾矿的环境问题，许多研究致力于开发高效的磷尾矿治理方法。
其中一种方法是利用微生物，特别是解磷菌，来降低磷尾矿的环境风险。
本文将介绍磷尾矿表层土壤解磷菌的筛选及鉴定方法。
磷尾矿表层土壤是指位于磷尾矿表面的一层土壤，其与磷尾矿之间的相互作用对磷的迁移和转化起着重要作用。
为了筛选出具有高效解磷能力的菌株，首先需要采集磷尾矿表层土壤样品。
样品的采集要遵循科学规范，避免污染和样品损失。
采集后的土壤样品需要在实验室中进行处理。
处理土壤样品的第一步是制备培养基。
培养基的制备需要考虑到解磷菌的生长需求，通常包括碳源、氮源、磷源和微量元素等。
常用的培养基有PDA培养基、液体培养基等。
制备好的培养基需经过高温高压灭菌处理，以防止杂菌的污染。
接下来是土壤样品的处理和菌株的筛选。
将土壤样品进行稀释，制备成一系列不同浓度的悬浮液。
然后将这些悬浮液分别接种到含有固体培养基的培养皿中。
在培养过程中，可以通过观察培养皿的菌落形态和颜色等特征来初步筛选具有解磷能力的菌株。
初步筛选后，需要对菌株进行鉴定。
常用的鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性分析和分子生物学鉴定等。
形态学观察是通过显微镜观察菌落形态、细胞形态和芽孢形态等特征来鉴定菌株。
生理生化特性分析包括利用不同的生化试剂对菌株进行反应，比如碳源利用试验、氮源利用试验等。
分子生物学鉴定是通过提取菌株的DNA，利用PCR扩增和测序技术来鉴定菌株的亲缘关系。
通过以上的筛选和鉴定方法，可以得到具有高效解磷能力的菌株。
这些菌株可以应用于磷尾矿治理中，通过与磷尾矿表层土壤的相互作用来降低磷的迁移和转化，减少磷的环境风险。
此外，这些菌株还可以用于生物修复等其他领域。
总结起来，磷尾矿表层土壤解磷菌的筛选及鉴定是一项重要的研究工作。
真菌的溶磷实验报告
一、实验目的本实验旨在研究真菌对土壤中难溶性磷的溶解能力，并探讨不同真菌菌株的溶磷特性，为提高土壤磷素利用率、促进植物生长提供理论依据。
二、实验材料与方法1. 实验材料- 真菌菌株：从土壤中分离得到的5株真菌菌株，分别标记为A、B、C、D、E。
- 培养基：PDA培养基、土壤浸提液培养基。
- 试剂：钼锑抗显色剂、硫酸铜、硫酸、无水乙醇、磷酸二氢钾等。
2. 实验方法（1）溶磷实验① 将5株真菌菌株分别接种于PDA培养基上，在恒温培养箱中培养至菌丝生长旺盛。
② 将菌丝刮下，用无菌水洗涤，制成菌悬液。
③ 将菌悬液接种于土壤浸提液培养基中，在恒温培养箱中培养一定时间。
④ 每隔一定时间，取一定量的培养液，加入钼锑抗显色剂，测定其磷含量。
（2）溶磷特性分析① 分析不同菌株的溶磷能力，比较其溶磷速率和溶磷量。
② 分析不同菌株的溶磷特性，如最适pH值、最适温度、最适碳源等。
三、实验结果与分析1. 溶磷能力分析实验结果显示，5株真菌菌株的溶磷能力存在差异。
其中，菌株A的溶磷能力最强，其次是菌株B和C。
菌株D和E的溶磷能力相对较弱。
2. 溶磷特性分析（1）最适pH值：实验结果表明，5株真菌菌株的最适pH值在5.0-6.0之间，说明真菌对酸性土壤具有一定的适应性。
（2）最适温度：实验结果表明，5株真菌菌株的最适温度在25-30℃之间，说明真菌在较高温度下具有较强的溶磷能力。
（3）最适碳源：实验结果表明，5株真菌菌株的最适碳源为葡萄糖和果糖，说明真菌对碳源的需求较高。
四、结论1. 从土壤中分离得到的5株真菌菌株均具有一定的溶磷能力，其中菌株A的溶磷能力最强。
2. 真菌的溶磷能力受pH值、温度、碳源等因素的影响，通过优化培养条件，可以提高真菌的溶磷能力。
3. 真菌溶磷技术有望应用于农业生产，提高土壤磷素利用率，促进植物生长。
五、讨论1. 真菌溶磷机制：目前，关于真菌溶磷的机制尚不完全清楚。
研究表明，真菌可能通过产生有机酸、络合剂等物质，降低土壤中难溶性磷的溶解度，从而提高土壤磷素利用率。
溶磷细菌固氮细菌生理生化指标具体步骤0
溶磷细菌固氮细菌生理生化指标具体步骤0溶磷细菌和固氮细菌是两种重要的土壤微生物，它们对于土壤养分循环和植物生长有着重要的影响。
了解溶磷细菌和固氮细菌的生理生化指标可以帮助我们更好地了解它们的生物学特性和功能。
下面是溶磷细菌和固氮细菌生理生化指标的具体步骤：1.样品收集：选择合适的土壤样品，并确保样品的新鲜性。
可根据需要选择不同的采集点，并采用土壤钻具等工具进行采集。
为了避免污染，最好使用无菌采集工具，并在采集前将其灭菌处理。
2.样品处理：将采集到的土壤样品进行处理，以提取出微生物。
通常的方法是通过稀释法，将土壤样品与缓冲液混合，然后进行振荡或摇动，以将微生物悬浮在溶液中。
接下来，可以通过离心等方式将微生物分离出来。
3.溶磷细菌的指标检测：a.磷酸酶活性测定：磷酸酶活性是溶磷细菌的一个重要生理指标，可以用来评估溶磷细菌的磷酸解除能力。
该指标的测定通常采用对应底物的颜色变化法或显色法进行。
可以利用安替比色法、菲伯酚法等方法进行测定。
b.磷酸溶解效率测试：该测试是评估溶磷细菌对有机磷的解磷效果的一种方法。
通过添加已知浓度的有机磷底物（如麦芽糖磷酸酯）到培养基中，培养一定时间后，使用测定溶磷细菌解磷效果的指标，如测定溶解磷的浓度等。
4.固氮细菌的指标检测：a.固氮活性测定：固氮活性是评估固氮细菌固氮效率的一个重要指标。
可以使用铋的还原能力测定法或乘敌氧化电位法来测定固氮活性。
这些方法基于固氮细菌通过将N2还原为NH4+来固定氮气的能力。
b.还氮效率的测定：此方法评估固氮细菌在特定条件下固氮的效果。
通常通过添加已知浓度的^15N标记物，然后通过质谱仪等设备测定NH4+、NO3-等形式的^15N，从而确定固氮效率。
以上是溶磷细菌和固氮细菌生理生化指标的具体步骤。
通过这些指标的测定，我们可以更好地了解溶磷细菌和固氮细菌的功能和特性，对于土壤健康管理和农业生产具有重要的意义。
利用高效溶磷菌钝化修复铅污染土壤效果及其影响因素研究
利用高效溶磷菌钝化修复铅污染土壤效果及其影响因素研究张学庆;田夏;曹胜伟【摘要】Bioremediation research of Pb-contaminated soil was studied by the P-solubilizing characteristic of phosphate solubilizing bacteria , The effect of the fermentation liquid added amount and total phosphorus content of soil on the soil bioremediation was studied .The mechanism of lead immobilization was studied preliminary by deter-mining the content of olsen-p, NH4 NO3 extractable Pb and pH , combined with the results of X ray diffraction analy-ses.When the added content of target bacterial fermentative solution reached 150 mL/kg, the target bacteria can survive in the soil;when the soil total phosphorus reached 1 g/kg, the content of NH4 NO3 extractable Pb reduced to 4 mg/kg and the content of olsen-p increased to 19 mg/kg;the analysis of lead speciation indicated that a shift from the exchangeable fractions and carbonate bound lead to residual lead .The results the of XRD analysis showed that the pyromorphite ( Pb5 ( PO4 ) 3 Cl) was the main product of residual lead , which is one of the most stable com-pounds of Pb in soil .%利用高效溶磷菌的溶磷特性对受铅污染土壤展开修复研究，研究了菌液添加量与土壤全磷含量对重度污染土壤修复效果的影响。
溶磷微生物肥料之特性及效益
溶磷微生物肥料之特性及效益土壤磷素与植物的关系植物在土壤中吸收量最多的三大养分元素即为氮、磷、钾，称为肥料三要素，磷素在植物营养中扮演相当重要的角色，它与植物能量生化反应有关，许多的酵素(酶)代谢中需依赖磷酸化作用，加上磷素是生物体遗传物质核酸之组成成份，与细胞分裂及分生组织之发育有非常重要的关系，是植物生长及生殖不可缺少的大量元素之一。
土壤的主要营养元素中，磷素与氮素的行为差异甚大，氮素在土壤之移动或流失容易发生，而磷素在土壤中最不易移动，因此其移动或流失则较不容易发生。
了解磷素在土壤中的形态及行为，有助于正确的施用磷肥及溶磷菌，使磷肥发挥最高的效果。
一般土壤不施磷肥，作物会缺乏磷素，尤其是需肥量高的作物，更易显现缺乏症狀。
缺乏磷素的症状依作物而有不同，有的作物容易从产生茎或叶上的紫红色来判断，但有的从外表不容易诊断，需要利用植体分析诊断及土壤分析诊断。
作物缺乏磷素之症狀为植株根及茎短小，禾本科作物之叶基或干枯的叶会有红色素出现。
如果发现一年生短期作物有缺磷现象时，再去矫正已稍嫌迟了。
果树缺乏磷素将严重影响开花结果及果实的育与甜度之品质，磷素对马铃薯的块茎或其他作物的块根生产量也扮演甚为重要的角色。
土壤中磷肥的状态及利用磷素是植物营养的大量需求元素之一，土壤中磷素存在形态，包括无机态及有机态，无机态的磷常与土壤中的钙、铁、铝结合沉积，呈不易溶解型,如磷酸钙、磷酸铁、磷酸铝等，不易被植物吸收利用，需经微生物或有机酸的作用，才能溶解釋放出來供给植物利用；有机态磷則存在于含有许多磷酸键的有机化合物上，如磷酯、植酸钙镁(phytins)及核酸等等，都來自生物体.因此土壤若含高量有机质，就有丰富的有机态磷，在正常土壤中的有机态磷，需经酵素(酶)分解才可供应植物吸收利用磷肥。
土壤中的无机态磷以结合型式存在愈多，植物可利用的有效性磷就愈少，因此磷肥在每期作物生产中常需要施用，否則产量或品质就受到影响。
磷肥被植物利用率甚低，100元之磷肥被作物吸收最多常見不超过20元，其余的80元磷肥几乎都被土壤所固定结合而累积，又因磷素在土壤中的移动较差，不易被水流失。
溶磷菌论文
溶磷菌对难溶性磷酸盐溶解作用的研究现状戴柳琴(桂林理工大学环境科学与工程学院，桂林，541004)摘要：难溶性磷酸盐的有效利用对提高农业产量能起到非常重要的作用，溶磷菌能够起到使难溶性磷酸盐转化为有效性磷酸，能够被植物吸收利用。
本文阐述了溶磷菌的三种溶磷机理，不同溶磷菌的溶解能力，以及对溶磷菌溶解性的研究展望。
关键字：溶磷菌；难溶性磷酸盐；溶解引言磷是植物必需的营养元素之一。
我国土壤中的总磷量相当可观，但95%以上的磷以稳定的铝硅酸盐和磷灰石等无效形式存在(陈延伟等，1960)，植物很难直接利用。
我国有74%的耕地土壤缺磷[1]，因此绝大多数农作物及林木都要追施磷肥。
目前主要施用的速效磷肥生产成本高、能耗大，施入的磷肥当年利用率仅为10%~25%(张宝贵等，1998)，一部分磷肥随雨水流入江河湖泊，造成水体的富营养化，引起水质污染(李发云等，1997)；另一部分磷与土壤中的Ca2+、Fe2+、Fe3+、Al3+等结合，形成难溶性磷酸盐(赵小蓉等，2001)，植物无法吸收利用。
近年来国内外大量研究证明，土壤中存在许多溶磷微生物，能够将土壤中难以被植物直接吸收利用的磷转化为植物可吸收利用的形态，从而提高作物产量[2~4]。
微生物对土壤磷的转化和有效性影响很大，其本身有无毒无害、不污染环境、成本低、节约能源等特点，应用生物技术提高土壤养分的有效性和化肥的利用率，具有重要的理论价值和实践意义(陆文静等，1999)。
长期以来，人们十分关注土壤难溶性磷的生物有效化，试图利用微生物的溶磷作用来活化土壤磷素，达到减少磷肥施用的目的。
然而，多年的实践结果表明，溶磷微生物的实际应用效果并不理想，很多菌株在实验室条件下表现出明显溶磷能力，一旦应用到农田则溶磷效果不明显。
其原因可能是多方面的，菌株在自然条件下缺乏竞争力，难以大量繁殖可能是重要原因之一，菌株的溶磷功能退化可能是另一重要因素，对溶磷微生物的溶磷机理认识不清限制了溶磷菌的广泛应用。
土壤中解磷细菌的分离与初步鉴定
JIANGXI AGRICULTURAL UNIVERSITY本科毕业论文（设计）题目：土壤中解磷细菌的分离与初步鉴定学院：生物科学与工程学院姓名：学号：专业：生物工程年级：指导教师：职称：二0一一年五月摘要目的：通过分离、筛选与纯化，从土壤中筛选出具有解磷能力的菌株。
方法：根据解磷圈大小判断其解磷能力。
从桔子、柚子、石榴3种不同植物根系土壤中分离出降解无机磷的解磷菌，通过平板法进行初筛，根据水解圈直径和菌落直径比值大小筛选到水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株,连续纯培养五代，选择遗传稳定的解磷菌,进一步通过液体摇瓶培养复筛，最后筛选出分解无机磷能力较强且能稳定遗传的菌株。
结果：从桔子根际土壤中分离降解出了三株透明圈明显的解磷菌，筛选出两株水解圈直径(D)与菌落直径(d)比值较大的解磷菌，1号菌株水解圈直径(D)／菌落直径(d)为2.625，2号菌株水解圈直径(D)／菌落直径(d)为2.44，经过五代培养，将稳定性最好的菌株进行液体摇瓶培养7天，然后进行解磷能力测定，测得结果是菌株1号水溶性磷含量为31.13mg ∕L，菌株2号水溶性磷含量为25.43mg∕L，具有较强解磷能力。
结论：通过菌落形态观察以及水溶性磷含量的测定结果可鉴定菌株为无机磷解磷细菌。
关键词：果树根际土壤，解磷菌，无机磷，分离，鉴定AbstractObjective: the separation, purification, from screening and soil were XieLin ability with the strain. Methods: according to the size XieLin circle XieLin judge its ability. From orange, grapefruit, pomegranate 3 kinds of different plant roots isolated soil degradation of inorganic phosphorus XieLin bacteria, through the flat screen, according to early method of hydrolysis circle diameter and colonies diameter ratio size screening to hydrolysis circle diameter and the ratio of larger diameter strains colony, continuous pure cultivate generation, choose the genetic stability XieLin bacteria, further through the liquid wave flask culture after screen, finally selected decomposition inorganic phosphorus ability stronger and can stable genetic strain. Results: from orange rhizospheric soil degradation out isolated transparent circle obvious reason XieLin bacterium, two strains were hydrolyzed circle diameter (D) and colonies diameter (D) XieLin bacterium, the ratio of larger diameter strains hydrolysis circle 1 (D) / colonies diameter (D) for 2.625, 2 strains hydrolysis circle diameter (D) / colonies diameter (D) for 2.44, after five dynasties, the best training for liquid stability strains flask culture seven days, wave XieLin ability and determination of measurement results is,water-soluble phosphorus strains 1 for 31.13 mg/L, water-soluble phosphorus strains 2 for 25.43 mg/L XieLin ability, strong. Conclusion: through the colony morphology observation and the measured results of water-soluble phosphorus can be identified for inorganic phosphorus XieLin strains of bacteria.Keywords:Fruit trees rhizosphere, XieLin bacteria, inorganic phosphorus, separation, appraisal目录绪论 (1)1 材料与方法 (1)1.1 供试材料 (1)1.1.1 菌株 (1)1.1.2 培养基 (1)1.1.3 主要仪器设备及药品试剂 (2)1.2方法 (2)1.2.1 解磷细菌的生物富集 (2)1.2.2 菌株初筛 (2)1.2.3 解磷细菌的鉴定形态学鉴定 (2)1. 2. 4 解磷细菌解磷能力的测定. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32 结果与讨论 (3)2.1 菌株初筛结果 (3)2.2 解磷菌形态鉴定结果............................... 错误!未定义书签。
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第一作者：乔志伟，博士研究生，副教授，主要研究方向复垦区土壤磷素高效利用．Ｅｍａｉｌ：７０４７２５６４６＠ｑｑ．ｃｏｍ 基金项目：贵州省科技厅和安顺市人民政府与安顺学院三方联合基金项目（黔科合 ＬＨ 字（２０１６７２８０号））；贵州省普通高等学校科技拔尖人才
项目（黔教合 ＫＹ字（２０１７）０９１）；安顺学院博士科研启动项目（ａｓｕｂｓｊｊ２０１６０１）． 收稿日期：２０１８０５３０；修回日期：２０１８１１０７
ＱＩＡＯＺｈｉｗｅｉ１，ＴＥＮＧＦｅｉｌｏｎｇ２，ＳＨＡＯ Ｘｉａｏｇｕｉ１
（１．ＣｏｌｌｅｇｅＲｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＡｎｓｈｕｎＣｏｌｌｅｇｅ，Ａｎｓｈｕｎ５６１０００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＡｎｓｈｕｎＣｏｌｌｅｇｅ，Ａｎｓｈｕｎ５６１０００，Ｃｈｉｎａ）
１４０
甘肃农业大学学报
２０１９年
狆狊犲狌犱狅犿狅狀犪狊．Ｗ１，Ｗ３，Ｗ４ａｎｄ Ｗ７ ｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇｃａｐａｃｉｔｙｉｎｒｅｃｌａｉｍｅｄ ｓｏｉｌ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｓｅｌｅｃｔｅｄ４ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａｓｔｒａｉｎｓｃｏｕｌｄｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｃｏｎ ｔｅｎｔｏｆａｖａｉｌａｂｌｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ，ｒｅｄｕｃｅｐＨａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｒｅｃｌａｉｍｅｄｓｏｉｌ．Ａｎｄｔｈｅａｖａｉｌａ ｂｌｅｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｃｏｎｔｅｎｔｗａｓｂｅｔｗｅｅｎ０．３０ｔｏ３．７２ｍｇ／ｋｇ，ｐＨｖａｌｕｅｗａｓｒｅｄｕｃｅｄｂｙ０．０３ｔｏ０．０９ｕｎｉｔｓ，ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｌｋａｌｉｎｅａｎｄａｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ９．６８ｔｏ３４．２２ｍｇ／ｋｇａｎｄ０．２１ｔｏ４７．６６ｍｇ／ｋｇ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＰｈｏｓｐｈａｔｅｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａｃｏｕｌｄｎｏｔｏｎｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆＣａ２Ｐ，Ｃａ８Ｐ，ＦｅＰａｎｄ ＡｌＰ，ｂｕｔａｌｓｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＣａ１０Ｐ．ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＣＫ，４ｓｔｒａｉｎｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｃｏｎ ｔｅｎｔｓｏｆＣａ２Ｐ，Ｃａ８Ｐ，ＦｅＰａｎｄＡｌＰｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ４．７％ ｔｏ３３．８％，１１．１％ ｔｏ２６．０％，５．３％ ｔｏ２４．１％ ａｎｄ ４．８％ｔｏ３０．０％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＣａ１０Ｐｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ１２．９％ ｔｏ１４．９％．Ｂｕｔｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｏｎｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇＯＰｗａｓｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ】Ｔｈｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａｐｌａｙｅｄａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｉｍｐｒｏｖｉｎｇｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙｉｎｒｅｃｌａｉｍｅｄｓｏｉｌ．
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关键词：溶磷细菌；复垦土壤；无机磷形态；磷酸酶 中图分类号：Ｓ１５４．３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００３４３１５（２０１９）０２０１３９０８ 犇犗犐：１０．１３４３２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｇｓａｕ．２０１９．０２．０１９
犛犮狉犲犲狀犻狀犵犪狀犱犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀狅犳狆犺狅狊狆犺狅狉狌狊狊狅犾狌犫犻犾犻狕犻狀犵犫犪犮狋犲狉犻犪 犳狅狉犻犿狆狉狅狏犻狀犵狆犺狅狊狆犺狅狉狌狊犪狏犪犻犾犪犫犻犾犻狋狔犻狀狉犲犮犾犪犻犿犲犱狊狅犻 农 业 大 学 学 报 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＧＡＮＳＵ ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
第 ５４卷 双月刊
溶磷细菌筛选及对复垦土壤磷素有效性的评价
乔志伟１，腾飞龙２，邵晓贵１
（１．安顺学院资源环境与工程学院，贵州 安顺 ５６１０００；２．安顺学院农学院，贵州 安顺 ５６１０００）