_红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的机制研究
红景天苷联合HGF对脐血间充质干细胞向肝样细胞分化的诱导作用观察
摘要 ： 目的
用 。方法
观察红景天苷联合肝细胞生长因子 （ Ｇ ） 导脐血 间充质干细 胞（ Ｃ ） Ｈ Ｆ诱 ＭＳ ｓ 向肝样 细胞分 化的作
将第 ５代脐血 ＭＳ ｓ Ｃ 随机分成 ４组 ， Ａ组不处理 ， Ｂ组分别加入 ５ Ｂ ） １ （ ２ 、０ （ １ 、０ Ｂ ）２ ｍｏ／ （ ３ 的红景 ＬＬ Ｂ ）
（ ｉ ｔ ｆ ｌ ｔ ｏ ｉ ｌｆＳ ｏｈ ｗ Ｕ ｉ ｒ ｔ， ｕｈ ｕ２ ５ ０ ， ． ． ｈｎ ） １Ｆｒ ｆ ｉ ｅ Ｈ ｓ ｔ ｏｃｏ ｎ ｅ ｉ Ｓｚ ｏ １０ ２ Ｐ Ｒ Ｃ ｉ ｓＡ ｏ ｄ ｐ ａ ｏ ｉ ｖ ｓｙ ａ
Ａ ｓ ａｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｖｓｇｔ ｔｅｆ ｓ ｉｔ ｏ ｅｉ ｕｔ ｎｏ ｅｅｃｙ ａ ｓ ｍ ｃｌ ｅｉ ｄｆ ｍ ｈ ｍａ ｂｔ ｃ ： ｊｃｉ ｏｉ ｅｔ ａ ａｉ ｌｙ ｆｈ ｄ ｃ ｏ ｆ ｓｎ ｈｍ ｔ ｅ ｓ ｒ ｅ ｏ ｕ ｎ ｒ ｖ ｎ ｉ ｅ ｈ ｅ ｂ ｉ ｔ ｎ ｉ ｍ ｌ ｅ ｌｄ ｖ ｒ
山东 医药 ２ １ 第 ５ 第 ３ ０２年 ２卷 ４期
红景 天 苷联 合 Ｈ Ｆ对 脐 间充 质 干 细胞 Ｇ 向肝 样 细胞 分 化 的诱 导 作 用 观察
黄 伟 。 钱海 鑫 苗宗宁 张学 光 ， ，
（ １苏州大 学附属第 一 医院 ， 苏苏 州 ２５０ ； 江 １０ ２２无锡 市第三人 民 医院 ； 苏州大 学） ３
ｂ ｏ ｄ ｄ ｒｖ ｄ ｍｅ ｅ ｃ ｙ ｌｓｅ ｃ ｌ ｅ ｅ ｓ ｐ ｒｔ ｄ ｉ ｔ ｕ ｒ ｕ ｓａ ｄ ｉｄ ｃ ｄ ｗ ｔ ｉ ｅｅ ｔ ｏ ｔｎ ｓｏ ｌ ｒ ｓｄ ｎ ｌ ｏ — ｅ ｅ ｓ ｎ ｈ ｍａ ｔ ｍ ｅｌ ｗ ｒ ｅ ｅ ａｅ ｏｆ ｒｇ ｏ ｐ ｎ ｕ ｅ ｉ ｄ ｆ ｒ ｎ ｎ ｅ ｔ ｆ ａ ｉ ｏ ｉｅ ａ ｄ ｉ ｓ ｎ ｏ ｎ ｈ ｃ ｓ ｄ
红景天苷药理作用及机制
红景天苷药理作用及机制刘志会【摘要】红景天系蔷薇目景天科红景天属多年生草本或亚灌木野生植物，红景天苷是红景天最有效的活性成分之一，不仅有抗疲劳、抗衰老、免疫调节、清除自由基、增强记忆改、善睡眠等药理作用，还可以起到保护心脏，抵抗辐射对人体的伤害，保护保护造血系统的药理作用。
本文综述了近年来国内外对红景天苷对心、脑、肾、肝、神经、皮肤的作用其和药理方面的研究，以其为红景天苷的进一步开发、利用提供参考。
【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2016(028)002【总页数】3页(P67-69)【关键词】红景天苷;作用机制;药理作用【作者】刘志会【作者单位】天津市宝坻区药品检验所，天津 301800【正文语种】中文【中图分类】R285红景天(Rhodiola L)系蔷薇目景天科红景天属多年生草本或亚灌木野生植物，因其花、根、茎之浸液均成红色而得名。
红景天苷(salidroside)是从中药红景天中提取的一种苯乙醇类化合物，是红景天最有效的活性成分之一，近年来对红景天苷的作用机制及药理作用方面等研究有了较快的发展，本文就红景天苷对心、脑、肾、肝、神经、皮肤的作用进行综述，为红景天苷的进一步开发利用提供参考。
1.1 心脏缺血-再灌注损伤的保护高元峰等[1]取大鼠离体心脏，依照灌流兔左心房肌细胞分离模型(langendoff)，通过实时测定：左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室舒张压(LVDP)、左心室收缩压最大变化速率(+dP/dtmax )、左心室舒张压最大下降速率(-dP/dtmin)及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量和一氧化氮合酶(NOS)活力证实，红景天苷可能通过抑制氧化应激，扩大冠状动脉，从而增加心肌灌流量，对离体心脏缺血-再灌注提供保护作用。
颜天华等[2]研究表明，红天苷能显著改善急性血瘀模型大鼠的血液流变学，对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤有一定的保护作用。
1.2 心肌缺血的保护孔智红等[3]通过实验表明：红景天苷通过降低血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)水平与血浆中丙二醛(MDA)含量和增加超氧化物岐化酶(SOD)活性，对实验性心肌缺血损伤具有显著的保护作用。
体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的研究进展
32中西医结合心血管病杂志Cardiovascular Disease Journal of integrated traditionalChinese and Western Medicine2017 年 9月 C 第 5 卷第 27 期Sep. C 2017 V ol. 5 No. 27体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的研究进展杜佳蕾，张曦元，万 娜，葛 斌，李 璐*（长春中医药大学，吉林长春 130117）【摘要】骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）是一类多潜能细胞，在适当的条件下，能够通过诱导分化成为神经干细胞，在治疗神经系统方面的疾病具有良好的临床应用前景。
本文对BMSCs体外分离培养方法、诱导方法及治疗神经系统疾病的临床应用进行了综述。
【关键词】骨髓间充质干细胞；分离培养；诱导分化；临床应用；神经干细胞【中图分类号】R617 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-6681.2017.27.32.02间充质干细胞（MSCs）具有自我复制能力属于多潜能细胞，主要存在于骨髓、脂肪、脐带、粘膜、肌肉、肺、肝、骨骼、胎盘、胰腺等，它在适宜条件下经过诱导可以向骨、脂肪、软骨等多种组织细胞分化。
而BMSCs属于间充质干细胞中的一种，因其自身具有取材对机体的损伤小，容易在体外进行分离、培养和扩增，回植体内后不会发生免疫排斥反应等特点而备受关注。
本文将从BMSCs 的分离培养、诱导BMSCs向神经干细胞分化的方法以及BMSCs对神经系统疾病治疗这三个方面加以介绍。
1骨髓间充质干细胞的的分离与培养将体外培养的BMSCs放置于倒置相差显微镜下观察，可以看到大多数的细胞呈梭形、纺锤形，少数形态表现为多角形，细胞核比较大，相邻的细胞之间有缝隙进行连接。
随着对BMSCs研究的不断深入，现在研究建立的用于分离提取BMSCs的方法有很多，比如贴壁细胞分离培养法、密度梯度离心法还有免疫磁珠法、流式细胞仪法等，但是其不同的培养方法所取得的效果不同。
红景天苷现代药理研究进展
红景天苷现代药理研究进展张丽楠;李屹;刘永琦;杨磊【摘要】红景天(Rhodiola)为景天科红景天属多年生草本或亚灌木植物,是珍稀药用植物之一,被誉为“高原人参”.目前常用的景天科红景天属植物有:高山红景天(R.hodiola Sachalinensis.A.Bor)或大花红景天(R.hodiola crenulata H Ohba).全世界共有90多种红景天属植物,我国有73种,主产区西藏有32种.红景天苷(相对分子质量300.3,结构式见图1),是从藏药红景天提取出来的一种苯乙醇类化合物,是红景天的主要有效成分.近年来研究证明红景天苷具有保护心脑血管系统、调节免疫系统、防辐射、抗疲劳、抗肿瘤等多种药理作用,现综述如下.【期刊名称】《临床荟萃》【年(卷),期】2011(026)021【总页数】3页(P1931-1933)【关键词】红景天;药理作用;神经免疫调节;抗肿瘤药【作者】张丽楠;李屹;刘永琦;杨磊【作者单位】甘肃中医学院2009级硕士研究生,甘肃兰州730000;甘肃中医学院2009级硕士研究生,甘肃兰州730000;甘肃中医学院重点实验室,甘肃兰州730000;甘肃省肿瘤医院呼吸科,甘肃兰州730000【正文语种】中文【中图分类】R285.6红景天（Rhodiola）为景天科红景天属多年生草本或亚灌木植物，是珍稀药用植物之一，被誉为“高原人参”。
目前常用的景天科红景天属植物有：高山红景天（R.hodiola Sachalinensis.A.Bor）或大花红景天（R.hodiola crenulata H Ohba）。
全世界共有90多种红景天属植物，我国有73种，主产区西藏有32种。
红景天苷（相对分子质量300.3，结构式见图1），是从藏药红景天提取出来的一种苯乙醇类化合物，是红景天的主要有效成分。
近年来研究证明红景天苷具有保护心脑血管系统、调节免疫系统、防辐射、抗疲劳、抗肿瘤等多种药理作用，现综述如下。
红景天苷对Aβ1-40诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制
【ＫＥＹＷ ＯＲＤＳ】 Ａｐ１．４ｏ； Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’Ｓ ｄｉｓｅａｓｅ； ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ； ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｆｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＡＴＰ）
基金项 目：国家 自然科学基金（８１５０３６２６）；上海市卫生和计划生育委 员会青年基金（２０１５４０２５４） 通信作者 ：陈川 ，电子信箱 ：ｃｈ９４５３＠１２６．ＣＯＵｌ
老 年医学与保 健 ２０１７年第 ２３卷第 ３期 Ｇｅｒｉａｔｒ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，２０１７，ＡＰ，一柏诱导 ＰＣ１ ２细胞 损伤 的保护作用及机制
黄 旭娇 ，邢 三丽 ， 陈川 ，郁志 华 ，陈 久林
上海市 中医老年医学研究所 ，上海 中医药大学，上海 ２０００３１
ｍｕｎｏｆ ｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｗ ｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ ｉｎｈａｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｄｅｃｒｅ ａ ｓｅ ｏｆ ＰＣ １２ ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｉｎｄｕｃｅｄ
ｂｙ Ａｐｌ＿加 ＜０．０５）ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＡＴＰ ＜０．Ｏ１）； ｔｈ ｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ ｕｐ．ｒｅｇｕｌａｔｅ ｄ ｔｈ ｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＰＧＣ．１ｅｔ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｅｌｕｓｉｏａｓ Ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ ｍ ａ ｙ ｉｎｈｉｂｉｔ ＡＢｌｍ－ｉｎｄｕｃｅ ｄ ＰＣ１２ ｃｅｌｌｓ ｉｎｊｕｒｙ ｂｙ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ｔ ｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＰＧＣ－ｌａ，ａｎ ｅｎｅｒｇｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｒｅｌａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ， ａｎｄ ｉｎ－
红景天苷的药理作用研究进展
红景天苷的药理作用研究进展Advances on the pharmacology of the study of Salidroside摘要：当前，研究者们对红景天苷的药理作用的研究仍然处于不断地研究阶段。
近年来，得益于分析技术的进步以及研究思路的开拓和国内外先进仪器的使用,对红景天苷药理作用的研究也愈发细化，同时也取得了一些举世瞩目的成果。
本文综述了红景天苷的一些已经取得的药理作用研究概况，并简单的介绍了其在人们生活中可能会用到的各种情况。
关键词:红景天苷药理作用进展前言：景天科红景天属植物在我国种类多、分布广、资源丰富, 是具有特殊适应性的植物，为珍稀药用植物之一，被誉为“高原人参”[1]；其安全性、有效性、及适应原性作用愈来愈被人们所重视。
红景天( Rho diola) 具有多种药理作用, 发挥其作用的主要有效成份是其中的苯基烷类化合物如红景天苷( Salidroside) 及其苷元酪醇、酪萨维等。
红景天苷及其苷元酪醇是存在于红景天属、越桔属、杜鹃花属、女贞属等植物中的天然抗氧化剂。
红景天苷通过提高细胞的抗氧化能力，清除活性氧，调控炎性细胞因子表达和抑制炎症介质合成，从而产生抗炎作用和防止癌变的发生。
红景天苷能上调几种细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子表达，减少细胞周期蛋白依赖激酶Cdc2 和细胞周期蛋白B1 表达，使癌细胞周期滞留在G2期，抑制癌细胞生长；红景天苷对非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫均有提高作用，也能对抗免疫抑制剂对骨髓造血功能的抑制[2]，等等。
目前以红景天为主要原料的中成药已成为许多药厂的主要产品, 此外还有红景天酒、红景天饮料、红景天茶、红景天保健食品、红景天系列化妆品等新型产品的开发应用,红景天在医药工业和食品工业方面具有广泛的开发前景。
近年来研究证明红景天苷具有抗疲劳、抗衰老、免疫调节，清除自由基，增强记忆，改善睡眠等多种药理作用[3]，现综述如下。
1 对心脑血管系统的保护1.1对心血管的保护作用1.1.1 抗心肌缺血作用红景天苷对心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。
红景天苷对神经退行性疾病保护作用的实验研究进展
•518•中国中医药科技2021年5月第28卷第3期May2021Vol.28No.3•综述•红景天昔对神经退行性疾病保护作用的实验研究进展胡月，张庆镐，曾常茜(大连大学医学院•辽宁大连116622)红景天昔(salidroside,Sal)是从景天科植物红景天中提取的主要活性成分，具有抑制炎症、改善认知功能、抗疲劳、抗毒素、抗氧化、减少自由基和抑制神经元凋亡的作用。
近期文献报道，红景天昔对阿尔兹海默病、帕金森病、亨丁顿舞蹈症、癫痫、缺血性脑卒中等神经退行性疾病具有保护作用。
本文将红景天昔对神经退行性疾病保护作用的实验研究综述如下,为红景天昔对神经退行性疾病的作用及机制的深入研究奠定基础。
1阿尔兹海默病阿尔兹海默病(AD)是一种以严重记忆丧失和行为障碍为临床表现的渐进性中枢神经退行性疾病。
AD的病理学特点为细胞外P-淀粉样肽(AR)积聚形成老年斑,细胞内超磷酸化的tau蛋白组成神经纤维缠结(NFT),导致神经元丢失和脑萎缩[5-6]o此外,AD的发生与氧化应激、神经炎症、突触丢失、胆碱能缺失等也密切相关一刃。
Zhang B等〔闷用邙诱导转基因果蝇AD模型,发现喂食红景天昔可改善果蝇寿命、活动能力和认知障碍,还可降低Ap水平及A|3在脑中的沉积，减轻AR对原代神经元的毒性。
Liao ZL等M用Apl-40诱导AD小鼠嗜锯细胞瘤12(PC-12)细胞模型，研究发现红景天昔能有效改善Ap诱导的PC-12细胞固缩和氧化应激以及线粒体膜电位降低所致的细胞凋亡,表明红景天昔可以通过抑制Ap积累保护PC-12细胞。
Zhang B等陀」以tau转基因果蝇品系为研究对象，研究发现红景天昔可使果蝇蕈形体中空泡减少、磷酸化GSK-3p(P-GSK-3p)蛋白表达水平增高、p-tau蛋白表达水平降低，表明红景天昔可以减轻tau转基因果蝇的神经变性,抑制神经元丢失,而且这种神经保护作用可能与红景天昔上调转基因果蝇中的p-GSK-3p蛋白表达和下调p-tau蛋白表达有关。
信号转导是细胞通讯的基本概念,强调信号的接收与接收后信号转换的方式(途径)和结果
信号转导-是细胞通讯的基本概念，强调信号的接收与接收后信号转换的方式(途径)和结果信号转导-是细胞通讯的基本概念，强调信号的接收与接收后信号转换的方式(途径)和结果，包括配体与受体结合、第二信使的产生及其后的级联反应等，即信号的识别、转移与转换。
学术术语来源——红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化中的Ca2+/CaM信号通路文章亮点：研究红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化时，Ca2+/CaM信号通路在红景天苷生物学信号传导中的作用及机制，发现红景天苷生物学信号传导的基本特征，探索低毒、高效的中药单体作为干细胞诱导剂的新途径和反应规律。
关键词：干细胞；骨髓干细胞；红景天苷；骨髓间充质干细胞；Ca2+/CaM信号通路；神经细胞；国家自然科学基金主题词：骨髓；间质干细胞；红景天属；神经元；钙信号摘要背景：课题组前期研究表明，红景天苷能诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向分化，Ca2+信号是实现其生物学信号传导的重要途径之一目的：探讨Ca2+/CaM 信号通路在红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化中的作用及机制。
方法：实验分为空白对照组和红景天苷诱导组，红景天苷诱导组将不同质量浓度红景天苷(5，10，20，50，100 mg/L)作用骨髓间充质干细胞24 h和100 mg/L 红景天苷作用骨髓间充质干细胞12，24，48，72 h。
采用Western blot方法分别检测红景天苷诱导骨髓间充质干细胞后神经标志分子MAP2和Ca2+/CaM信号通路中关键蛋白CaM、CaMKⅡ的表达水平。
另外实验设阻断剂组，分别加Ca2+信号通路特异性阻断剂：500 µmol/L EGTA (细胞外Ca2+螯合剂)、1 mmol/L Nifedipine (L型Ca2+通道阻断剂)、10 mmol/L LY294002 (PI3K抑制剂)分别作用细胞30 min后，再加入100 mg/L红景天苷作用细胞24 h，采用Western blot方法检测阻断Ca2+/CaM信号通路后NSE、CaM的表达情况。
红景天苷的医学研究应用
红景天苷的医学研究应用摘要：红景天苷是提取于红景天苷根茎部的生物活性成分，不仅能够调节中枢神经系统：提升注意力，抗疲劳，提高细胞对外部有害因素的非特异性抵抗力，调节免疫力，保护心率失常及血压造成的心血管系统损伤，通过清除氧自由基抵抗氧化应激等。
有证据表明，红景天苷还能抑制恶性肝脏肿瘤的侵蚀性和转移力。
本文旨在通过收集和综合关于红景天苷的基础医学及临床应用相关研究，探讨红景天苷医学应用潜力。
关键词：红景天苷；药理作用；医学应用引言：红景天为多年生草本植物，具有极强的环境适应能力和生命力[1]。
国内应用红景天很早，在《四部医典》和《本草纲目》均有记载，研究证明红景天苷有抗疲劳[2]、抗衰老[3]、免疫调节[4]、清除自由基[5]等多种药理作用。
在国外，俄罗斯以及东欧一直被广泛应用于增强体质，抗疲劳[2]。
同时，还用于抑郁症[6]，贫血[7]，以及神经系统疾病的治疗。
红景天苷对中枢神经系统的影响红景天苷的药理研究始于1965年。
其对中枢神经系统的作用是通过其调节去甲肾上腺素[10]，多巴胺[9]，血清素的水平来实现。
中低剂量的红景天苷能够刺激大脑活动，其机制是由于中低剂量能够刺激神经递质（去甲肾上腺素和多巴胺）的分泌释放，并增加血脑屏障对多巴胺和五羟色胺的通透性。
大剂量的红景天苷则具有镇静的效果，其机制是由于大量释放的神经递质如去甲肾上腺素，多巴胺和五羟色胺会激活大脑皮层的边缘系统，从而起到对大脑活动刺激的抑制作用[8]。
同时，红景天苷能够抑制乙酰胆碱的活性，改善神经功能。
一项包含对412名神经衰弱患者的临床实验研究发现，给予患者50mg红景天苷，每天三次的治疗，4个月后进行生理学实验评估发现，参与研究的128名患者（17-55岁）中，64%的患者疲劳，烦躁，头痛以及其他营养方面的症状得到改善[12]。
一项涉及56名健康青年医生的双盲实验，在夜间值班期间，给予170mg红景天苷治疗，然后通过评估和测试大脑工作能力发现，与对照组相比，使用红景天苷使年轻医生的疲劳指数，思考能力，短时记忆，注意力以及视觉和听觉的反应速度均得到了改善，从而提升了工作效率[13]。
骨髓间充质干细胞的研究进展
骨髓间充质干细胞的研究进展作者：闫德祺等来源：《中国当代医药》2013年第24期[摘要] 骨髓间充质干细胞（BMSCs）是骨髓基质中存在的非造血系的成体干细胞，具有多向分化潜能，已成为国内外基础医学和临床医学研究的热点。
本文简要介绍了BMSCs的概念提出、生物学特性、培养、鉴定，并根据近年来国内外包括应用中药进行的诱导分化、组织工程、基因治疗、再生医学等相关研究及临床应用前景作一综述。
[关键词] 骨髓间充质干细胞；诱导分化；组织工程；中药[中图分类号] R392.12 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）08（c）-0025-03早在1867年，世界著名病理学家Cohneim发现了骨髓中非造血系的干细胞，发现这类干细胞能够产生愈合伤口的成纤维细胞，后来Caplan[1]称之为间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs），因为这类细胞除骨髓外，还广泛分布于脂肪、外周血、脐血、羊水、胎盘、胎肺、胎肾、牙髓、肌腱、滑膜、骨骼肌等不同的组织中，可定向分化为造血细胞以外的神经胶质细胞、肌细胞、腱细胞、成软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、平滑肌细胞等多种细胞，支持造血，对造血干细胞有扩增作用，具有贴壁生长、高度可塑、免疫调节的性质，在体外易分离和扩增，还易于外源基因的转入和表达[1-2]。
本文在此基础上对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）的研究及其应用作一综述，以期开拓新的研究领域和临床应用。
1 改良性的BMSCs分离培养和鉴定方面的研究体外培养的小鼠及人的BMSCs形态学特征主要表现为梭形、纺锤形，少数为多角形。
BMSCs的体外分离方法有四类：贴壁培养法、密度梯度离心法、流式细胞术和免疫磁珠分离法。
贴壁培养法更换培养液去除造血系细胞后还残留有单核细胞、淋巴细胞贴壁生长，需要严格控制胰蛋白酶的剂量和消化时间，连续培养才能清除并得到相对的纯化[3]。
红景天苷在制备Parkin蛋白激动剂药物中的应用[发明专利]
![红景天苷在制备Parkin蛋白激动剂药物中的应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/83e99304ef06eff9aef8941ea76e58fafab04532.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810939560.1(22)申请日 2018.08.17(71)申请人 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院地址 325027 浙江省温州市鹿城区学院西路109号(72)发明人 张小磊 章增杰 丁远哲 王向阳 (74)专利代理机构 苏州彰尚知识产权代理事务所(普通合伙) 32336代理人 潘剑(51)Int.Cl.A61K 31/7032(2006.01)A61P 25/28(2006.01)A61P 19/08(2006.01)A61P 21/00(2006.01)(54)发明名称红景天苷在制备Parkin蛋白激动剂药物中的应用(57)摘要本发明具体公开了一种红景天苷的新用途，红景天苷在制备Parkin蛋白激动剂药物中的应用。
红景天苷作为Parkin蛋白激动剂，通过促进parkin蛋白的表达，促进线粒体自噬以及线粒体稳态，抑制细胞凋亡，从而可用于治疗神经退行性疾病以及骨骼肌肉系统退行性疾病。
权利要求书1页 说明书6页 附图3页CN 108743597 A 2018.11.06C N 108743597A1.红景天苷或其衍生物在制备Parkin蛋白激动剂药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物为治疗退行性疾病的药物。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述退行性疾病为神经退行性疾病或骨骼肌肉系统退行性疾病。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：红景天苷或其衍生物通过促进parkin蛋白的表达，促进线粒体自噬以及线粒体稳态，抑制细胞凋亡，从而用于治疗神经退行性疾病以及骨骼肌肉系统退行性疾病。
5.一种Parkin蛋白激动剂药物，其特征在于：含有治疗有效量的红景天苷或其衍生物。
6.根据权利要求5所述的Parkin蛋白激动剂药物，其特征在于：所述药物中红景天苷或其衍生物的含量为10-1000μM。
红景天苷抑制破骨细胞分化和极化的初步研究
细胞与分子生物学红景天苷抑制破骨细胞分化和极化的初步研究易清清1，梁鹏晨2，孙苗苗2，杨荣3，梁冬雨1，沙爽4，常庆1△摘要：目的探究红景天苷抑制破骨细胞分化和极化的作用。
方法体外培养RAW264.7细胞，加入可溶性核因子κB受体活化因子配体（sRANKL）连续培养5d诱导为破骨细胞。
设置对照组（培养基不含红景天苷）和实验组（培养基中红景天苷剂量分别为15、30、60mg/L），通过TRAP染色对比诱导分化结果，通过鬼笔环肽染色和茜素红染色观察破骨细胞F-Actin环形成和破骨细胞钙化情况，通过qPCR检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、非受体酪氨酸激酶（c-Src）、组织蛋白酶K（CK）、整合素β3（Integrinβ3）mRNA表达水平，Western blot检测MMP-9和c-Src蛋白表达水平。
结果与对照组相比，各实验组TRAP染色阳性细胞数显著减少，F-Actin环形成减少，而破骨细胞茜素红染色显著加深，钙化加重（均P＜0.05），且随着红景天苷剂量的升高，变化更加明显。
与对照组相比，30和60mg/L SAL组MMP-9、c-Src、CK mRNA表达水平均降低，同时各实验组MMP-9及c-Src蛋白表达水平显著降低。
结论红景天苷对破骨细胞的分化、极化和骨吸收有一定的抑制作用，其作用机制可能与下调MMP-9和c-Src表达有关。
关键词：红景天属；破骨细胞；细胞分化；红景天苷；细胞极化；骨吸收中图分类号：R285.5文献标志码：A DOI：10.11958/20212038A preliminary study of the inhibitory effect of salidroside on differentiation andpolarization of osteoclastsYI Qingqing1,LIANG Pengchen2,SUN Miaomiao2,YANG Rong3,LIANG Dongyu1,SHA Shuang4,CHANG Qing1△1Clinical Research Center,Jiading District Central Hospital Affiliated to Shanghai University of Medicine&Health Sciences, Shanghai201800,China;2Graduate School,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine;3Department of Pathology,Jiading District Central Hospital Affiliated to Shanghai University of Medicine&Health Sciences;4Shanghai Key Laboratory for Molecular Imaging,Shanghai University of Medicine&Health Sciences△Corresponding Author E-mail:*********************Abstract:Objective To investigate the inhibitory effect of salidroside(SAL)on osteoclast differentiation and polarization.Methods RAW264.7cells were cultured in vitro and induced into osteoclasts by adding solvable receptor activator of nuclear factor kappa B ligand(sRANKL)for5days.The control group(culture medium without SAL)and the experimental group(culture medium with SAL in dosage of15,30,60mg/L respectively)were set.The results of inducing differentiation were compared by TRAP staining.F-Actin ring formation and osteoclast calcification were compared by phalloidin staining and alizarin red staining.Real time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(qPCR)was used to detect expression levels of MMP-9,c-Src,CK and Integrinβ3.The expression levels of MMP-9 and c-Src proteins were detected by Western blot assay.Results Compared with the control group,the number of TRAP positive cells,and F-Actin ring formation were significantly reduced in each experimental group.The calcification of osteoclasts and the alizarin red staining of osteoclasts were significantly deepened,indicating the the increased calcification (P＜0.05).Compared with the control group,the expression levels of MMP-9,CK and c-Src mRNA decreased in the30and 60mg/L SAL groups,and the expression levels of MMP-9and c-Src protein decreased significantly in each group.Conclusion Salidroside can inhibit the differentiation,polarization and bone resorption of osteoclasts,and its mechanism may be related to the down-regulation of MMP-9and c-Src expression.Key words:rhodiola;osteoclasts;cell differentiation;salidroside;cell polarization;bone resorption基金项目：上海市嘉定区卫健委重点项目（2020-ZD-03）；上海市嘉定区自然科学基金资助项目（JDKW-2020-0013）作者单位：1上海健康医学院附属嘉定区中心医院中心实验室（邮编201800）；2上海中医药大学研究生院；3上海健康医学院附属嘉定区中心医院病理科；4上海健康医学院分子影像中心作者简介：易清清（1988），女，主管技师，主要从事中药与医学生物材料研究。
红景天苷体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化及其分子机制
红景天苷体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化及其分子机制红景天苷体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化及其分子机制摘要：干细胞是一类有着自我更新和多向分化潜能的细胞，广泛应用于组织工程和再生医学领域。
本研究旨在探究红景天苷在体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞髓样细胞发展为神经细胞的作用机制。
实验结果显示，红景天苷能够促进骨髓间充质干细胞增殖和神经分化，并且通过转录因子的调控和信号途径的激活参与这一过程。
这一研究对于深入了解细胞发育和神经分化机制具有重要意义，并为干细胞研究以及神经修复治疗提供了新思路。
关键词：红景天苷；骨髓间充质干细胞；神经细胞；分化；分子机制引言：干细胞是一类特殊的细胞，具有自我更新和多向分化潜能，能够分化成各种细胞类型，引起广泛的关注。
骨髓间充质干细胞是一种重要的干细胞种类，具有良好的增殖能力和多向分化潜能，可用于组织再生和修复等领域。
因此，研究干细胞的分化机制对于促进组织工程和再生医学的发展具有重要意义。
红景天苷是红景天草药中的有效成分，已被证实具有多种生物活性。
研究发现红景天苷具有促进神经细胞分化的潜能，但其作用机制尚未完全阐明。
因此，本研究旨在探究红景天苷在体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的分子机制。
材料与方法：1. 实验动物：使用小鼠骨髓作为实验动物。
2. 细胞培养：将小鼠骨髓间充质细胞分离，并进行培养。
3. 实验组设：将小鼠骨髓间充质细胞分为红景天苷处理组和对照组。
4. 细胞分化检测：利用免疫荧光染色和实时荧光定量PCR技术检测细胞分化情况。
5. 分子机制探究：通过Western blot和实时荧光定量PCR技术检测关键转录因子和信号途径的表达。
结果与讨论：实验结果显示，红景天苷处理组的骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的速度明显加快，且分化效率较对照组显著提高。
进一步的实验发现，红景天苷显著促进了神经分化相关基因的表达，如神经元特异性标志物β-III-tubulin和神经营养因子BDNF的表达。
红景天苷调控AMPK
ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｎＡＤｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＴｈｉｒｔｙｍａｌｅＣ５７ＢＬ／６Ｊｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ：（ｉ）ｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，（ｉｉ）ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，（ｉｉｉ）Ｄｏｎｅｐｅ ｚｉｌ（１０ｍｇ·ｋｇ－１，ｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ）ｇｒｏｕｐ，（ｉｖ）４ａｌｏｗｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（２０ｍｇ·ｋｇ－１）ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ（ｖ）４ａｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（４０ｍｇ·ｋｇ－１）ｇｒｏｕｐ．Ｉｎｇｒｏｕｐｓｉｉｉｔｏｖ，３０ｍｉｎａｆｔｅｒｔｈｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ（３ｍｇ·ｋｇ－１），Ｄｏｎｅｐｅｚｉｌａｎｄ４ａｗｅｒｅｔａｋｅｎｏｒａｌｌｙｆｏｒ１０ｃｏｎｓｅｃｕｔｉｖｅｄａｙｓ，ａｎｄｔｈｅｍｅｍｏｒｙｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｓｃｏ ｐｏｌａｍｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｃｏｇｎｉｔｉｖｅｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎｍｉｃｅｗａｓｏｂ ｓｅｒｖｅｄｉｎＭｏｒｒｉｓｗａｔｅｒｍａｚｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｉｎｖｉｔｒｏ，ｔｈｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆＡβｉｎｓｏｌｕｔｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＴｈＴｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＴａｕｐｒｏｔｅｉｎｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．Ｔｈｅｋｉｎｅｔｉｃｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄ４ａｏｎａｃｅｔｙｌ ｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４ａｃｏｕｌｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡＣｈＥ，ｔｈｅａｇ ｇｒｅｇａｔｉｏｎｏｆＡβａｎｄｔｈｅｈｙｐｅｒｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｏｆＴａｕｐｒｏｔｅｉｎ，ａｎｄａｌｍｏｓｔｒｅｓｔｏｒｅｄｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｇｎｉｔｉｖｅａｂｉｌｉ ｔｙｏｆｔｈｅｄａｍａｇｅｄｍｉｃｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４ａｉｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｓａｐｏｔｅｎｔｉａｌｃａｎｄｉｄａｔｅｃｏｍｐｏｕｎｄｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｉｐｅｒｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ；ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ；ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ；ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ；ｃｏｇｎｉｔｉｖｅｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ；Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ网络出版时间：２０２３－１１－０７１１：００：５３ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３１１０６．１７２１．００２红景天苷调控ＡＭＰＫ／Ｄｒｐ１信号通路对急性脑出血大鼠的神经功能的保护机制陈瑞娟１，郑永先１，汤 旺２，关小容１（１．中南大学湘雅医学院附属海口医院，海南海口 ５７０２０８；２．中南大学湘雅二医院老年医学科，湖南长沙 ４１００００）ｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２３０４０５０文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）１１－２０６９－０７中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ２８２ ７１；Ｒ３２２ ８１；Ｒ３４５ ５７；Ｒ７４３ ３４摘要：目的 研究红景天苷（ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ，Ｓａｌ）对急性脑出血（ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ，ＩＣＨ）大鼠的神经功能保护作用及其机制。
红景天苷调控KLF4／eNOS信号抑制Hcy诱导内皮-间质转分化的作用
网络出版时间：２０２１－４－２３１１：４２：００ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２１０４２２．１４１２．０３２．ｈｔｍｌ红景天苷调控ＫＬＦ４／ｅＮＯＳ信号抑制Ｈｃｙ诱导内皮－间质转分化的作用何 丽１，２，涂梦欣１，２，黄 梅２，彭剑青１，２，姜丰１，２，沈祥春２，张彦燕１，２（贵州医科大学１．药学院临床药学教研室、２．天然药物资源优效利用重点实验室，贵州贵阳 ５５００２５）收稿日期：２０２０－１２－０３，修回日期：２０２１－０１－０８基金项目：国家自然科学基金喀斯特中心项目（ＮｏＵ１８１２４０３ ４ ４）；贵州省科学技术基金（黔科合基础２０１６［１１２８］）；贵州医科大学药学国际科技合作基地（黔科合平台人才［２０１７］５８０２）作者简介：何 丽（１９９５－），女，硕士生，研究方向：心血管药理学、中药及民族药效应物质机制，Ｅ ｍａｉｌ：８９７２１２５３０＠ｑｑ．ｃｏｍ；涂梦欣（１９９９－），女，硕士生，研究方向：天然活性物质临床基础，共同第一作者，Ｅ ｍａｉｌ：２２１３６８７２０１＠ｑｑ．ｃｏｍ；沈祥春（１９７３－），男，博士，教授，研究方向：心血管药物药理与功能天然产物化学生物学，通讯作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｓｈｅｎｘｉａｎｇｃｈｕｎ＠１２６．ｃｏｍ；张彦燕（１９８３－），女，博士，副教授，研究方向：心血管药理学，通讯作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｃｈｉｎａｚｙｙ２０１＠１６３．ｃｏｍｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０２１．０５．０１６文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２１）０５－０６８１－０６中国图书分类号：Ｒ２８２ ７１；Ｒ３２２ １２；Ｒ３２９ ２４；Ｒ３４９ ２１；Ｒ３９４ ２；Ｒ９７７ ３；Ｒ９７７ ６摘要：目的 基于ＫＬＦ４／ｅＮＯＳ信号，研究红景天苷（ｓａｌｉｄｒｏ ｓｉｄｅ，ＳＡＬ）对同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）诱导内皮细胞间质转分化（ＥｎｄＭＴ）的作用及机制。
红景天苷干预心血管系统药理研究进展
红景天苷干预心血管系统药理研究进展岳星星;谢春毅;陶晓瑜【摘要】红景天苷是中药红景天的主要有效成分。
近年研究表明，红景天苷通过抑制心肌细胞死亡、促进血管再生、改善心功能、抑制血小板聚集、促进体脂动员和胆固醇代谢等药理作用，发挥心血管系统的保护作用。
本文综述了近年来红景天苷干预心血管系统药理作用的研究进展，为进一步研究与应用提供参考。
%Salidroside is the most important bioactive component of Rhodiolae Crenulatae Radix et Rhizoma. Many recent studies have shown that salidroside plays an protective role in cardiovascular system by inhibiting myocardial cell death, promoting angiogenesis, improving heart function, inhibiting platelet aggregation, promoting body fat mobilization and cholesterol metabolism and other pharmacological effects. This article reviewed recent studies on pharmacological effects of salidroside on the cardiovascular system, providing references for the research and application of salidroside.【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2017(024)003【总页数】4页(P130-133)【关键词】红景天苷;心血管系统;药理作用;综述【作者】岳星星;谢春毅;陶晓瑜【作者单位】上海中医药大学附属上海市中西医结合医院，上海 200082;上海中医药大学附属上海市中西医结合医院，上海 200082;上海中医药大学附属上海市中西医结合医院，上海 200082【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R259.4红景天苷是中药红景天中提取的一种苯乙醇类化合物，为红景天主要有效成分[1]。
中药刺激干细胞治疗肝衰竭
中药刺激干细胞治疗肝衰竭摘要：肝衰竭是多种因素引起的严重肝脏损伤，并出现以凝血机制障碍和黄疸、肝性脑病、腹水等为主要表现的一组临床症候群。
我国主要以乙型肝炎病毒为主要因素而引起的肝衰竭。
在肝衰竭过程中，可出现在不同程度上的肝细胞坏死。
在急性或轻微的肝损伤中，肝细胞的再生主要来源于原有肝细胞完成，而在长期肝损伤中，可诱发胆管上皮细胞通过双相细胞阶段向肝细胞转化。
从而可以进行不同干细胞的转化以补充受损或完好肝细胞。
随着干细胞的深入研究, 诱导性多能干细胞较其他来源干细胞的优势更有优势。
以中医药为主要介导手段，引诱多能干细胞向肝细胞转化。
关键词：肝衰竭中药骨髓干细胞1.中医对肝衰竭的认识在中医上，根据肝衰竭的临床表现将其诊断为“黄疸”、“瘟黄”、“瘀毒”等。
巢元方著作《诸病源候论》中提出“热毒所加, 故卒然发黄, 心满气喘, 命在倾刻, 故云急黄也”；叶天士的《临证指南》明确提出“阳黄之作, 湿从热化, 瘀热在里, 胆热液泄, 与胃之浊气并存, 上不得越, 下不得泄, 薰蒸抑郁”。
由此，古代医家认为风，湿，热，毒等是该病的主要病因，且几种病因易相互夹杂，相互影响，相互深入。
近代医学家在仲景的基础上解读归纳，不断探索,对本病的病因和病机有了新的认识,认为其病机主要是湿邪伤中，损伤于脾，引发水聚，则腹胀水臌；热毒攻里,或热入血分,损伤脉络则出血，或热入水分，膀胱不利，则热不得泄。
而毛德文教授又率先提出了急性肝衰竭和亚急性肝衰竭的“毒邪病因”新学说,后又进一步发展慢加急性肝衰竭、慢性肝衰竭的“毒浊病因”新学说。
学说认为，“毒”为本病致病之因,贯穿于疾病的始终,“瘀”为病变之本,并且“毒”与“瘀”又相互影响,形成恶性循环链,最终致毒瘀胶结难解[1]。
2.刺激骨髓间充质干细胞治疗肝衰竭骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是指来源于骨髓的间充质干细胞,骨髓在增生和转化为肝细胞中被证明骨髓细胞和肝细胞存在相关性，骨髓可以生产肝细胞，骨髓干细胞也可以横向分化为肝细胞，而且这种转化即使在生理状态下也始终存在。
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红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的机制研究陈亚男1, 刘辉1*, 赵红斌2, 刘阳2, 白洁2, 朱晓娟2, 王玉1*(1. 兰州大学公共卫生学院, 甘肃兰州 730000; 2. 兰州军区兰州总医院骨科研究所, 甘肃兰州 730000)摘要: 探讨细胞外信号调节激酶 (extracellular signal-regulated kinase, ERK1/2) 和PI3K/AKT/mTOR信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs) 向神经细胞定向分化中的作用。
以小鼠BMSCs细胞系(D1细胞)为研究对象, 实验分为对照组和红景天苷诱导组。
红景天苷(5、25、50、100和200 μg·mL−1) 作用于细胞24 h和红景天苷 (100 μg·mL−1) 作用细胞0.5、1、3、6、9、12、24、48和72 h。
采用细胞免疫荧光染色方法、实时定量PCR (real-time PCR) 和Western blotting技术分别检测细胞NSE、MAP2、β-Tubulin III、NES和GFAP的阳性率和β-Tubulin III、NSE、ERK1/2和AKT的表达; PD98059和LY294002分别阻断ERK1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路后, 检测ERK1/2和NSE的表达。
结果表明, 随着红景天苷诱导时间的延长, NSE、MAP2、NES、β-Tubulin III和GFAP的阳性率明显增加, NSE和β-Tubulin III蛋白的表达显著上调(P < 0.01)。
随着红景天苷水平和作用时间的增加, ERK1/2、AKT mRNA和蛋白的表达明显上调; PD98059和LY294002分别阻断EKR1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路后, 显著抑制红景天苷促进NSE、NES和β-Tubulin III mRNA和NSE蛋白表达。
结果提示, 红景天苷通过激活ERK1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路, 促进BMSCs 向神经细胞定向分化。
关键词: 红景天苷; 骨髓间充质干细胞; 信号通路中图分类号: R963 文献标识码:A 文章编号: 0513-4870 (2013) 08-1247-06Salidroside via ERK1/2 and PI3K/AKT/mTOR signalpathway induces mouse bone marrow mesenchymalstem cells differentiation into neural cells CHEN Y a-nan1, LIU Hui1*, ZHAO Hong-bin2, LIU Y ang2, BAI Jie2, ZHU Xiao-juan2, WANG Yu1*(1. School of Public Health, Lanzhou University, Lanzhou 730000, China;2. Institute of Orthopaedics, Lanzhou General Hospital of PLA, Lanzhou 730000, China)Abstract: To investigate the role of the extracellular signal-regulated kinase (ERK1/2) and PI3K/AKT/ mTOR signal pathway inducing bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) differentiation into neural cells, mouse bone marrow-derived mesenchymal stem cell lines D1 cells were used as research object. And they were divided into control groups and salidroside (SD) groups. Different concentrations (5, 25, 50, 100 and 200 μg·mL−1) of SD were used and SD (100 μg·mL−1) was used to induce at different time (0.5, 1, 3, 6, 9, 12, 24, 48 and 72 h). The immunofluorescence staining chemical technology, real-time PCR and Western blotting were used to detect the positive rates of NSE, MAP2, β-Tubulin III, NES, GFAP and the expression levels of β-Tubulin III, NSE, ERK1/2, AKT. The expression of ERK1/2 and NSE was detected when the ERK1/2 and PI3K/AKT/ mTOR signal pathway was blocked by PD98059 and L Y294002. It indicated that the positive rates of NSE,收稿日期: 2013-03-04; 修回日期: 2013-04-10.基金项目: 国家自然科学基金面上项目 (81073156).*通讯作者 Tel: 86-931-8915011, Fax: 86-931-8915009, E-mail: liuhui@;Tel / Fax: 86-931-8915009, E-mail: wangyu@MAP2, β-Tubulin III, NES and GFAP were gradually enhanced with time increased. The expression level of NSE and β-Tubulin III protein were significantly higher than those in control groups (P < 0.01). The expression of ERK1/2, AKT mRNA and protein were higher with concentration and time increased. When the ERK1/2 and PI3K/AKT/mTOR signal pathway were blocked, the expression levels of NSE, NES and β-Tubulin III mRNA and NSE protein were inhibited significantly. It points out that SD can stimulate the ERK1/2 and PI3K/AKT/mTOR signal pathway to promote BMSCs differentiation into neural cells.Key words: salidroside; bone marrow mesenchymal stem cell; signal pathway神经系统疾病是人类面临的重大疾病之一, 传统的治疗方法和疗效均不够理想。
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs) 取材方便、易于体外分离和扩增, 同时还具有多向分化潜能, 是今后治疗神经系统性疾病的最有效方法之一。
前期研究表明, 红景天苷能诱导BMSCs向神经样细胞定向分化, 而且能诱导分化为多巴胺能和乙酰胆碱能神经细胞[1,2], 可能在治疗神经系统性疾病方面具有潜在的应用价值, 阐明其影响αBMSCs向神经细胞定向分化的机制, 具有重要的理论意义和应用价值。
本研究考察了红景天苷对ERK1/2和PI3K/ AKT/mTOR信号通路的作用, 探讨其促进BMSCs向神经细胞定向分化的生物学信号途径。
材料与方法药品及试剂红景天苷(salidrosides)标准品(相对分子质量300) 由中国食品药品检定研究院提供。
Trizol试剂、反转录试剂盒 (Prime Script TM reagent Kit) 及实时定量PCR试剂盒 (SYBR Premix Ex Taq TM II) 均购自大连宝生物工程有限公司。
D/F12培养基(美国Gibco公司); 胎牛血清(杭州四季青公司); BCA蛋白定量试剂盒(北京索莱宝公司); 兔抗小鼠β-Tubulin Ⅲ、NSE、MAP2、NES和GFAP单克隆抗体(英国Abcam公司); 兔抗小鼠ERK1/2和AKT单克隆抗体(美国Santa Cruz公司); PD98059和LY294002 (美国Sigma公司); 兔抗小鼠多克隆抗体β-actin (美国Bioworld公司); 辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔/山羊抗鼠IgG (北京中杉金桥生物公司); PVDF膜(美国Pierce公司)。
主要仪器CO2细胞培养箱(美国Thermo Revco公司); 蛋白垂直电泳装置和酶标仪(美国Bio- Rad公司); 实时荧光定量PCR73000system仪(美国ABI公司); 紫外分光光度计和台式高速冷冻离心机(德国Heraeus公司)。
D1细胞的培养取小鼠骨髓间充质干细胞D1 细胞系(美国A TCC公司, 序列号CRL-10915), 加入含10%胎牛血清的D/F12完全培养基中, 置37 ℃、5% CO2培养箱中培养, 每3天更换一次培养基, 连续培养待细胞80%融合后, 胰酶 (2.5 g·L−1) 消化传代培养。
D1细胞活性检测采用MTT法, 将红景天苷诱导12、24、48和72 h的细胞依次加入5 mg·mL−1 MTT 20 μL, 继续培养4 h后每孔加入DMSO 100 μL, 在微量振荡器上振荡10 min, 于酶标仪的490 nm波长处测定各孔的吸光度 (OD) 值。
每个实验组设6个复孔, 取其平均值。
D1细胞的诱导分化实验分为红景天苷诱导组和空白对照组, 80%细胞融合后, 诱导1组采用D/F12完全培养液(含100 μg·mL−1红景天苷) 分别诱导0.5、1、3、6、9、12、24、48和72 h; 诱导2组使用含5、25、50、100和200 μg·mL−1红景天苷的D/F12完全培养液, 分别诱导24 h, 对照组为D/F12完全培养液。