9章 维生素类药物的分析

则不需校正，用A325计算：
E
1% 1cm
= A325/（C× L）
效价 IU/g = 标示量%= E
1% 1cm
E
1% 1cm
×F
Hale Waihona Puke (F=1830)W 平均 ×1830× × 100% 标示量
E
1% = 1cm
A328 / (C× L)
IU/g = 1900×E1cm
1%
F=1900 求维生素A醋酸酯占标示量的百分含量： W 平均 1% 标示量%= E1cm ×1900× × 100% 标示量
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2、如果λmax 在326-329nm之间，但Ai/A328比值与规 定比值的差超过±0.02 ，需按校正公式计算A328的校正值： A328(校正) = 3.52 ×（2A328－A316－A340），再按效价及含 量公式计算。 是否需用校正值计算，应根据不同情况而定： 是否需用校正值计算，应根据不同情况而定：
A328(校正) − A328 A328
×100%
1、该值在-3%~+3%，仍然用 328计算； 、该值在 ，仍然用A 计算； 2、该值在 、该值在-15%~-3%，则需用 328（校正）计算。 ，则需用A （校正）计算。 3、若该值<-15%，或>+3%，则要用第二法计算； 、若该值< ， ，则要用第二法计算； 4、若λmax 不在326-329nm之间，也要用第二法计算 、 也要用第二法计算
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测定法： 测定法： 中国药典收载有： 第一法（直接测定法，适用于纯度高的维生素A醋酸酯）
将维生素A溶于环己烷，在规定的5个波长处测定吸光度，计算吸 光度比值（A/A328）
波长nm 300 316 328 340 360
测得A A0 A1 A2 A3 A4
药典规定比值 0.555 0.907 1.000 0.811 0.299
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波长选择： 波长选择：一点为维生素A的最大吸收波长(λ1)，另两点在 λ1两侧各 选一点(λ2和λ3) 第一法(等波长差法)：使λ3 -λ1= λ1- λ2。 第一法 ChP规定，测定维生素A醋酸酯时(溶剂：环己烷) ， λ1=328nm, λ2=316nm, λ3=340nm, ∆λ=12nm 第二法(等吸收比法)：使Aλ2 = Aλ3 = 6/7 Aλ1。 第二法 ChP规定，测定维生素A醇时(溶剂：异丙醇)， λ1=325nm, λ2=310nm, λ3=334nm
结构中有多个不饱和键，易被氧或氧化剂氧化，易被紫外光 裂解，尤其在加热和金属离子存在时，更易氧化变质。生成无生 物活性的环氧化合物、VA醛或VA酸； 对酸不稳定，遇Lewis酸或无水HCl乙醇液，发生脱水反应， 生成去水VA，活性仅为VA的0.4%； VA醋酸酯比VA稳定，临床上一般将VA醋酸酯或VA棕榈酸酯 溶于植物油中应用
维生素A醋酸酯 维生素A醋酸酯 溶剂 环己烷 异丙醇 λmax(nm) 327.5 325
1% E1cm
维生素A醇 维生素A醇 λmax 326.5 325
1% E1cm
换算因子 1900 1830
换算因子 1900 1830
1530 1699
1755 1820
杂质的吸收： 杂质的吸收： VA2、VA3、氧化产物(环氧化物、VA醛、VA酸)，多 种异构体，VA光照产生的无活性的聚合物鲸醇，合成过程中的中间 体等，均在310~340nm有吸收，对VA的测定造成干扰。
醇（VA1，VC） VA1，VC） VE） 酯（VE） 叶酸,烟酸） 酸（叶酸,烟酸） 酰胺（烟酰胺） 酰胺（烟酰胺） VB6） 酚（VB6） 醛酮（VK1） 醛酮（VK1）
分 类
结构
溶解度
脂溶性（A,D,E,K等） 脂溶性（ 等 水溶性（ 叶酸， 水溶性（B1,B2,C,叶酸， 叶酸 烟酸等） 烟酸等）
IU/g = 1900×E
1% 1cm
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F=1900 求维生素A醋酸酯占标示量的百分含量： W 平均 1% 标示量%= E1cm ×1900× × 100% 标示量
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第二法（皂化法，维生素A醇）
不能用第一法的样品采用第二法测定。 测定：取供试品(维生素A酯)→皂化→提取→ 滤过 测定 → 浓缩→ 干燥→维生素A醇→制成异丙醇溶液，在 规定波长(300, 310,325,334nm)测定吸光度, λmax 应为 325nm。 方法：精密称取一定量供试品，加KOH-EtOH溶液 后煮沸回流，得到的皂化液再经乙醚提取、洗涤、滤 过、浓缩、干燥等处理，最后，用异丙醇溶解残渣并 稀释成第1ml含VA为9~15 IU(国际单位)的溶液，在 300, 310,325,334nm波长处测定吸收度, 并确定最大 吸收波长(λmax 应为325nm)。
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无醇三氯甲烷：取三氯甲烷500ml，用水洗涤3次，每次50ml，分
2、紫外分光光度法(BP) 紫外分光光度法(BP) 在无水乙醇中326nm处有最大吸收。在盐酸催化下加热， 在无水乙醇中326nm处有最大吸收。在盐酸催化下加热， 产生去水维生素A(VA 产生去水维生素A(VA3)，双键数目增多，最大吸收红移， 且在348、367、389nm出现三个吸收峰，且在332nm处 且在348、367、389nm出现三个吸收峰，且在332nm处 有较低的吸收峰或拐点。
一、结构与性质： 结构与性质：
CH3 CH3 CH3 CH2OR CH3 CH3
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
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CH3
CH3
CH3 CH2OR
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
CH3 CH3
结构特点：具有共轭多烯醇侧链的环己烯，有多种异构体 结构特点 (化学性质相似，光谱特性和生物效价不同)； 见教材表9-2
第九章 维生素类药物的分析
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维生素是维持人类正常代谢机能所必需的一类 活性物质。已知绝大多数维生素是酶的辅基或 辅酶的组成成分，在体内维生素以辅酶或辅基 的形式参与各种酶促反应。人类自身不能合成 维生素，一般从食物中摄取的维生素足以维持 所需。
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维生素类药物种类很多。理化性质和生理作用各不相同。 维生素类药物种类很多。理化性质和生理作用各不相同。
实际测得比值 A0/ A2 A1/ A2 A2/ A2 A3/ A2 A4/ A2
两个比值的差值
判断两个比值的差值是否超过 判断两个比值的差值是否超过 ± 0.02 两个比值的差值
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两个概念： 效价：每克供试品中所含维生素A的国际单位数(IU/g) 效价 维A的含量以生物效价即国际单位来表示
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CH3
CH3
CH3 CH2OR
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
CH3 CH3
结构特点：具有共轭多烯醇侧链的环己烯，有多种异构体 结构特点 (化学性质相似，光谱特性和生物效价不同)； 性质： 性质 脂溶性； 在水中不溶，乙醇中微溶，三氯甲烷、乙醚、环己烷、 石油醚中任意混溶
1% 换算因子：单位 E1cm 值所相当的效价。
1% E1cm 维生素A醋酸酯：F=1900
F=
效价(IU/g)
维生素A醇：F=1830
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数据处理 1、如果λmax 在326-329nm之间，且Ai/A328比 值与规定比值的差未超过±0.02 ，可直接按下式计算：
1% 求效价：IU/g= E1cm ×F
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A328(校正) − A328
λmax 在326-329nm之间：
A328
×100%
用第二法
A328（校正） -3%
不校正 0 +3%
用第二法
-15%
若λmax 不在326-329nm之间，也要用第二法计算 也要用第二法计算
1% 求效价：IU/g= E1cm ×F 1% E1cm= A328 / (C× L)
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CH3
CH3
CH3 CH2OR
性质： 性质 溶解性 脂溶性维生素，在水中不溶，乙醇中微溶，三氯甲烷、 乙醚、环己烷、石油醚中任意混溶 不稳定性：
CH3 CH3
有强紫外吸收：共轭多烯醇的侧链，在325-328nm有最大 吸收，可用于鉴别和含量测定)； 与三氯化锑呈色。 2010-12-24
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中国药典中收载的VA是人工 合成的VA1醋酸酯结晶加精制 植物油制成的油溶液
四、含量测定：紫外分光光度法(三点校正法) 含量测定：紫外分光光度法(三点校正法)
三点校正法的建立： 三点校正法的建立：维生素A在325~328nm有最大吸收，但由于维生 素A原料中有多种杂质(多种异构体，氧化降解产物(VA2、VA3、环氧化 物、VA醛、VA酸等)，合成中间体，副产物等)，制剂中还有稀释用油， 它们在维生素A的最大吸收波长附近(310-340nm)也有吸收，干扰测定。 为消除杂质或稀释用油的影响，用三点校正法 三点校正法测定含量，即在三个波 三点校正法 长处测得吸光度后，在规定的条件下以校正公式进行校正，再进行计 算，这样可消除无关吸收的干扰，求得VA的真实含量 测定原理： 测定原理 本法是在三个波长处测得吸光度，根据校正公式计算吸收度A校正值 三点校正法”。其原理基于以下两点： 后，再计算含量，故称为“三点校正法 三点校正法 1.杂质的无关吸收在310-340nm波长范围内几乎呈一直线，且随波长 增大吸光度下降。 2.物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸收曲线上，各波 长处的吸光度是VA与杂质吸收度的代数和，因而吸收曲线也是二者 吸收的叠加。