生物一轮对点训练：28-2 植物组织培养 b Word版含解析
高三生物一轮复习 专题2 细胞工程精品练习 新人教版选修3
高三生物一轮复习专题2 细胞工程精品练习新人教版选修3一、选择题1．下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是( )A．培养基中添加蔗糖的目主要的是提供营养B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因和染色体数均相同解析：采用绿色开花植物的生殖器官部位如花药进行培养获得的愈伤组织的基因只有体细胞的一半。
答案：D2．利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。
下列相关叙述正确的是( )A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B．体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C．将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法不一定能诊断出SARS病毒感染者解析：经过特定抗原刺激后的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体为单克隆抗体。
在细胞融合过程中，可产生三种类型的杂交细胞，要进行筛选；利用抗原—抗体反应可以诊断出病毒感染者。
答案：C3．如下图为“白菜－甘蓝”杂种植株的培育过程。
下列说法正确的是( )A．图示“白菜－甘蓝”植株不能结籽B．愈伤组织的代谢类型是自养需氧型C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程D．“白菜－甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果解析：白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交后培育的“白菜－甘蓝”杂种植株中2个染色体组来自白菜，2个染色体组来自甘蓝，因此“白菜－甘蓝”属于异源四倍体，是可育的，能结籽；愈伤组织不能进行光合作用产生有机物，因此愈伤组织的代谢类型是异养需氧型；上述过程包括去壁、原生质体融合、植物组织培养等过程，其结果是形成“白菜－甘蓝”幼苗，并未发育到性成熟个体，因此整个过程中有有丝分裂和细胞分化，没有减数分裂过程；对个体来说，任何性状都是基因选择性表达的结果。
生物一轮对点训练：28-2植物组织培养a打印版
本资源的初衷,是希望通过网络分享,能够为广阔读者提供更好的效劳,为您水平的提高提供坚强的动力和保证 .内容由一线名师原创,立意新,图片精,是非常强的一手资料 .[考法综述]本考点主要考查植物组织培养的过程,特别是生长素和细胞分裂素在植物组织培养过程中的作用,多数省份以一道非选择题的形式出现,难度一般不大.命题法植物组织培养的过程分析如图甲是植物组织培养过程示意图,图乙是植物激素对愈伤组织分化影响的示意图.据图答复以下问题.(1)植物组织培养的原理是植物细胞具有___________________ .(2)在A过程中,为了有利于嫩枝组织细胞启动细胞分裂形成愈伤组织,常常需要在配制好的培养基中添加________ .嫩枝组织细胞接种后2～5天时,假设发现其边缘局部污染,原因可能是_______ .(3)在过程B中,假设愈伤组织没有形成根,但分化出了芽,其原因可能是____________；假设要获得更多的愈伤组织,培养基中两种激素的含量应该是________________________________ .(4)切取经光照一段时间后的幼苗芽尖处的组织块,消毒后,接种到诱导再分化的培养基中培养,该培养基中两种植物激素浓度相同.从理论上分析,分化的结果是________；原因是________________ .答案(1)全能性(2)植物激素嫩枝组织细胞消毒不彻底(3)培养基中生长素较少,细胞分裂素较多细胞分裂素的量中等,生长素较少(4)生根培养基中细胞分裂素与生长素的浓度相等,而经光照后的幼苗芽尖处组织块含较多生长素,因此组织块处的细胞分裂素相对较少,生长素相对较多,故诱导生根解析(1)植物细胞具有全能性,这是植物组织培养的理论根底.(2)植物组织培养过程中,启动细胞分裂和愈伤组织的分化都离不开植物激素,植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、诱导脱分化和再分化的关键性激素.培养的嫩枝组织细胞边缘发生局部污染,可能是因为嫩枝组织细胞消毒不彻底.(3)、(4)从图乙可知,植物激素的种类及其浓度配比都会影响愈伤组织分化的方向,具体结合图示和题干信息答复即可.【解题法】生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用的判断方法(1)有生长素存在,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势.。
2020届高考生物一轮对点训练：31-2 生态工程 b Word版含解析
1．为治理某废弃采石场的生态环境，对其进行了公园化建设。
(1)对其进行整理和覆土，并选择适生植物进行人工造林，不同恢复时期的植物物种数如下图所示。
t0→t1，植物残体及凋落物中的有机物被生态系统中的________转化为无机物，使土壤条件得到改善；同时由于人工林土壤中存在________，导致群落中植物物种数增加；t1→t3，人工林抵抗力稳定性的变化是________；群落中植物物种数逐渐增加，物种之间________加剧。
(2)通过人工林建设和园林景观构建，既改善了生态环境，又可提高社会和经济效益，这主要体现了生态工程的________原理。
答案(1)分解者种子或繁殖体增强竞争(2)整体性(系统论)解析本题考查生物与环境的相关知识。
(1)将植物残体等有机物分解为无机物的是分解者；人工林在改造之前，土壤中存在其他植物的种子或繁殖体，群落中的物种数很快增加；随着物种数增加，营养结构也越来越复杂，人工林的抵抗力稳定性增强，而物种之间对阳光、水、无机盐等资源的竞争也越来越剧烈。
(2)进行生态工程建设时，不但要考虑到自然生态系统的规律，还要考虑到经济和社会等系统的影响力，这体现的是生态工程的整体性原理。
2．污水处理厂的污泥富含有机质和无机成分，可用作肥料，但其多环芳烃(PAHs)等有机污染物含量通常较高，施入土壤会带来二次污染。
生物质炭是由作物废弃秸秆等炭化而成。
将污泥、含7%生物质炭的污泥均堆放一段时间后用于盆栽实验，研究它们对黑麦草生长及PAHs迁移的影响，结果见下表。
胞________加强，________合成增加，从而促进根系对土壤养分的吸收。
(2)由表可知，施用含生物质炭的污泥__________________，从而促进黑麦草生长；污泥的施用使土壤和黑麦草的PAHs含量________，但生物质炭的输入__________________，从而降低PAHs 污染的风险。
由此可见，生物质炭有望用作污泥改良剂，促进污泥的推广应用。
步步高生物大一轮2023电子版答案
步步高生物大一轮2023电子版答案一、单项选择题Ⅰ：每小题1分，在每小题列出的四个选项中，只有一项符合题目要求1、建立细胞学说的科学家是施莱登和A、施旺B、沃森C、达尔文D、克里克2、以下没有细胞壁的是A、大肠杆菌B、酵母菌C、红细胞D、根尖细胞3、蛋白质的基本组成单位是A、碱基B、氨基酸C、甘油D、核苷酸4、分泌蛋白合成后加工、修饰及包装的场所是A、液泡B、核糖体C、高尔基体D、溶酶体5、呼吸作用产生的主要能量物质是A、ATPB、CO2C、O2D、葡萄糖6、有关细胞分化的叙述，正确的是A、仅发生在动物细胞B、仅发生在胚胎发育早期C、发生了染色体结构的变异D、导致细胞在形态、结构和功能上产生差异7、在田间发现的异常高秆植株，最可能是由下列哪种植物激素变化引起的A、赤霉素B、乙烯C、脱落酸D、细胞分裂素8、路边的小草一般不会引起人们特别的关注，但它却有一定的价值。
从保护生物多样性的角度来看，路边小草的价值不包括A、防止水土流失B、为植食性动物提供食物C、可能有药用价值D、释放有毒物质，导致害虫灭绝9、蜘蛛根据蛛网的振动来判断猎物的大小和方位。
蛛网振动属于A、物理信息B、化学信息C、行为信息D、营养信息10、某兴趣小组探究了不同浓度的NAA对插条生根的影响，结果见下表。
用于农业生产实践，应选用的NAA浓度（mg/L）范围是A、0~200B、200~400C、400~600D、600~80011、森林中生长着乔木、灌木和草本植物，形成了群落的垂直结构。
这种分层现象主要与下列哪一因素有关A、温度B、湿度C、土壤D、光照强度12、小王分别从以下四种土壤环境取样探究土壤动物丰富度。
推测土壤动物丰富度最高的样品来自A、菜园地B、荒山黄土地C、建筑工地D、动运场的沙池13、图1是一个陆地生态系统食物网的示意图，据图判断正确的是A、蝗虫是次级消费者B、鸟和田鼠具有相同的营养级C、该食物网共有2条食物莲D、若蛇的数量大量减少，田鼠的数量也随之大量减少14、某草原上长期生活着兔、狐和狼，形成了一个相对稳定的生态系统，各类生物所含的能量如下表。
2024年新高考版生物1_28-专题二十八 实验与探究 (2)
蝗虫精母细胞
死细胞
低温诱导植物 细胞染色体数 目的变化
洋葱根尖分生 区组织细胞
死细胞
❻ 染色体 存在状态
❼ 甲紫溶液 或醋酸洋红
液
观察:先低倍 镜,再高倍镜
染色体形态、 位置和数目
染色体数目
注:需用显微镜观察的还有“脂肪的检测和观察”“探究培养液中酵母 菌种群数量的变化”。
易混易错 (1)在“观察细胞的有丝分裂”或“低温诱导染色体数目加倍”的实验 中,应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞(长方形的细胞可能是根尖的 伸长区或成熟区的细胞,没有分裂能力)。(2)“观察细胞的减数分裂”实 验中,所选的材料可以是动物的精巢或植物的雄蕊,而不宜选用动物的卵 巢或植物的雌蕊(一般雄配子的数量远远多于雌配子,更容易观察到减数 分裂过程中的细胞)。
考点训练(请判断下列说法是否正确)
1.绿叶中色素的提取和分离实验中,观察指标是滤纸条上色素带的颜 色、次序和宽窄。 ( ) 2.检测生物组织中的还原糖实验过程中,在待测液中先加NaOH溶液,再加 CuSO4溶液。 ( ) 3.NaOH与CuSO4配合使用在还原糖和蛋白质检测实验中作用不同。 () 4.用洋葱鳞片叶提取和分离叶绿体中的色素。 ( ) 5.纸层析法分离叶绿体色素时,以多种有机溶剂的混合物作为层析液。
①若视野中细胞成单行(考虑直径),看到的细胞数目:m÷(400÷100)=m/4。
②若视野中细胞均匀分布(考虑面积),看到的细胞数目:m÷(400÷100)2= m/16。
3)放大倍数越大,目镜(无螺纹)越短,物镜(有螺纹)越长,物镜的镜头与玻 片的距离越近,视野越暗,观察到的细胞数量越少、体积越大。
考点三 调查类实验 一、调查类实验的一般操作流程
二、教材中常见实验
高考生物专题练习植物的组织培养技术(含解析)
高考生物专题练习植物的组织培养技术（含解析）一、单项选择题1.以下有关植物组织培育的表达，正确的选项是〔〕A.愈伤组织是一团有特定结构和功用的薄壁细胞B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后失掉动摇遗传的植株C.植物耐盐突变体可经过添加过量NaCl的培育基培育挑选而取得D.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等区分包装可制成人工种子2.某初等植物体细胞内假定有6条染色体，它们是AaBbDd，那么，一个花粉管中的两个精子中的染色体是〔〕A.ABD和abdB.AbD和abdC.AaB和BbdD.Abd和Abd3.在月季花药培育中资料消毒主要有以下几步，顺序正确的选项是() ①将花蕾在酒精中浸泡约30s②放入氯化汞液中2～4 min③无菌水清洗，然后用吸水纸吸干花蕾外表的水分④用无菌水冲洗3～5次A.①②③④B.①③②④C.③①④②D.②③①④4.以下关于植物组织培育的表达，错误的选项是〔〕A.培育基中添加蔗糖的目的是提供营养和调理浸透压B.培育基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C.离体器官或组织的细胞经过脱分化构成愈伤组织D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培育取得的愈伤组织基因型相反5.月季花药培育时的花粉粒最好时期是〔〕A.四分体时期B.单核居中期C.单核靠边期D.二核或三核花粉粒6.以下对花药接种的说法，正确的选项是〔〕A.接种时要彻底去除花丝B.接种时要把花药刺破以释放外面的花粉C.每瓶接种花药不要太多，10～20个即可D.接种后要给予一定的光照7.以下图表示植物组织培育进程。
据图剖析以下表达正确的选项是〔〕A.②试管的培育基中含有植物生长调理剂，不含有无机物B.③试管中的细胞能停止减数分裂C.调理④培育基中植物生长调理剂的比例可诱导发生不同的植物器官D.⑤植株根尖细胞的全能性比①植株根尖细胞的强8.接种和培育花药时应留意的事项全对的一组是() ①不损伤花药②彻底去除花丝③幼小植株构成后需求光照④花药开裂释放出的幼小植株会区分发育成单倍体，无需分开A.①②③B.①②④C.②③④D.①③④9.下面对月季花药离体培育发生花粉植株的表达错误的选项是()A.花药经脱分化后有利于根的分化还是芽的分化,主要取决于培育基中激素的运用顺序及浓度配比B.普通来说选用单核期的花粉可提高诱导出花粉植株的成功率C.确定花粉能否处于适宜的发育期,常用醋酸洋红对花粉的细胞核停止染色D.胚状体和愈伤组织都具有胚芽、胚轴和胚根等结构10.以下关于植物组织培育的表达，正确的有〔〕①培育对象只能是细胞②目的一定是为了失掉植株③培育进程需求某些植物激素④单倍体育种用到了植物组织培育技术⑤植物组织培育的全进程需求照光A.①②B.①②③C.③④D.①②③④⑤二、填空题11.某兴味小组尝试应用组织培育技术，培育胡萝卜素含量较高的植株．回答以下效果：〔1〕植物组织培育所用的培育基需求用高压蒸汽停止________处置．胡萝卜韧皮部细胞在适当培育基中构成愈伤组织的进程为________．经过调理培育基中两种植物激素的比例来调控愈伤组织的生根和长芽，构成新的植株．这两种激素区分是________．〔2〕萃取胡萝卜素时，萃取的效率主要取决于________的性质和用量，其中常用的无机溶剂是________〔填乙醇、丙酮或石油醚〕．萃取液可用________法稀释，失掉的胡萝卜素粗品可用________法停止鉴定．12.月季因花样艳丽、芬芳诱人而被称为花中皇后，可用植物组织培育技术快速繁衍而用于消费．请回答以下效果：〔1〕植物组织培育的实验操作流程是：制备MS固体培育基、________、接种、培育、移栽、栽培．该实验能成功培育出植株的实际依据是________〔2〕在配置培育基时，需求依据各种母液的________，计算用量．将分装好的培育基停止________灭菌．〔3〕如图为培育基中蔗糖浓度对月季叶愈伤组织诱导率的影响．①蔗糖浓度为________，最有利于愈伤组织的构成，缘由是________②外植体构成愈伤组织的进程称为________，将愈伤组织继续停止培育．生长素和细胞分裂素________〔填运用顺序〕，提高分化频率，有利于重新分化成根或芽．③蔗糖浓度为90g/L时，无愈伤组织构成的缘由最能够是________13.月季花绚丽多彩，深受人们的喜欢．将月季的花药经过无菌操作接入培育基中，在一定的条件下就可以诱导构成试管幼苗．请回答相关效果．〔1〕组织培育所用的培育基称为________培育基，从物理性质看属于________培育基．〔2〕月季花药培育发生的植株叫做________．培育时选材十分重要，普通来说，在________期花药培育的成功率最高．为了选择该期的花药，通常选择________的花蕾．〔3〕从培育进程看，花粉植株的发生普通有两个途径：一种是花粉经过胚状体阶段发育成植株，一种是在培育基上先构成________，再诱导分化成植株．这两种途径之间没有相对的界限，其影响要素是________ ．〔4〕某兴味小组尝试用水蒸气蒸馏法从月季花瓣中提取芬芳油．取得油水混合物后参与NaCl 的目的是________14.以下是用花粉培育植株的相关效果，请回答：〔1〕经过花药培育发生单倍体植株普通有两种途径：一种是花粉经过阶段发育为植株，另一种是在诱导培育基上先构成________，再将其诱导分化成植株．这两种途径主要取决于培育基中________的种类及浓度配比．〔2〕花粉植株的培育〔如月季花药培育〕包括资料的选取、资料的消毒、接种和培育等进程．资料的选取可先对花粉粒运用停止染色，然后经过镜检来确定其中的花粉能否处于适宜的发育期________〔3〕花粉的构成阅历了四分体时期、等阶段．该〝四分体〞与减数分裂进程中的四分体不同，是指由一个花粉母细胞经过减数分裂发生的连在一同的4个细胞．月季花药培育时的花粉粒最好是________〔4〕资料消毒主要有以下几步：①将花蕾在酒精中浸泡约30s②放入氯化汞液中2～4min③无菌水清洗，然后用吸水纸吸干花蕾外表的水分④用无菌水冲洗3～5次正确的顺序是________．〔5〕某同窗在停止组织培育进程中，发现只分裂而不分化出芽和根，能够缘由是________．三、实验探求题15.在植物组织培育进程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。
高考生物一轮复习(课前准备+课堂巩固+课后练习)植物组织培养技术及学案 鲁科版
学案55 植物组织培养技术及DNA 和蛋白质技术 考纲要求 1.植物组织培养技术的应用。
2.DNA 的粗提取与鉴定。
一、植物组织培养 1．脱分化：由________的植物组织或细胞产生______的过程。
2．愈伤组织：细胞排列________而无规则，是一种____________的呈____________的________。
3．再分化：脱分化产生的____________继续培养，重新分化出________和________等器官的过程。
4．植物组织培养的理论基础：植物细胞的________。
5．基本过程：离体的植物组织――→脱分化____________――→再分化________→________→移栽成活二、DNA 的粗提取与鉴定1．提取原理：(1)利用DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的________中溶解度不同进行分离。
在2 mol/L 的该溶液中________溶解而________析出，在0.14 mol/L 溶液中________溶解而________析出。
(2)DNA 不溶于酒精，而________等杂质分子溶于酒精。
2．鉴定原理：在沸水浴条件下，DNA 遇________试剂会被染成________。
三、多聚酶链式反应扩增DNA 片段1．PCR 技术的原理：利用了________原理。
通过控制________来控制DNA 双链的解聚和结合。
2．PCR 反应的条件：一定的________，DNA 模板，分别与两条模板链相结合的两种________，四种__________，耐热的________，同时控制______使DNA 复制在体外反复进行。
想一想 细胞内DNA 复制与细胞外DNA 复制必需的酶是什么酶？四、血红蛋白的提取和分离1．分离方法——________法和电泳法。
2．纯度鉴定——一般用____________________方法对血红蛋白进行纯度鉴定。
探究点一 植物的组织培养 菊花茎的组织培养 月季的花药培养理论依据 细胞的______基本过程 脱分化、再分化影响因素 选材、营养、____、pH 、温度、光照等材料选取 未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 通常选择完全未开放的____光照状况 每日用日光灯照 12h 开始____光照，幼小植株形成后____光照操作流程 制备MS 固体培养基→______消毒→接种→____→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种和培养→____和诱导→移栽→栽培选育结果 ____植株 ______植株如下表，请补充完整。
(完整版)植物组织培养试题及答案总结
《绪论》复习题及参考答案一、填空：★1、根据培养的材料，植物组织培养分：愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养、悬浮培养等类型。
2、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。
3、1902年，Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说，1934年，White出版了《植物组织培养手册》从而使植物组织培养为一门新兴学科。
二、名词解释：★1、植物组织培养(plant tissue culture)：是指通过无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
由于培养材料已脱离了母体，又称为植物离体培养（Plant culture in vitro）。
2、脱分化（dedifferentiation）：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。
3、再分化（redifferentiation）：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官，这一过程称为植物细胞的再分化。
★4、外植体(explant)：由活体（in vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。
包括各种器官、组织、细胞或原生质体等★5、愈伤组织(callus)：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞，多在植物体切面上产生。
三、问答题：1、简述植物组织培养的理论依据？植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。
★2、植物组织培养有哪些特点？（1）培养条件可以人为控制（2）生长周期短，繁殖率高：（3）管理方便，利于工厂化生产和自动化控制：★3、植物组织培养的分类？（1）根据培养对象不同：组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养等；（2）根据培养物培养过程：初代培养、继代培养；（3）根据培养基的物理状态：固体培养、液体培养。
人教版高中生物选修1基础过关+对点训练：专题3 植物的组织培养技术(2课题) Word版含解析
人教版高中生物选修1基础过关+对点训练专题3 植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养理一理判一判1.未离体的植物组织或细胞也能表达全能性。
(×)2．由外植体发育成愈伤组织的过程既有脱分化，也有细胞分裂。
(√)3．脱分化过程不需要植物激素，植物激素只有在再分化过程中发挥作用。
(×)4．由于植物细胞都具有全能性，所以菊花的组织培养实验中选材不会影响实验的结果。
(×)5．不同植物材料在组织培养过程中需要的条件都一样。
(×) 6．无论脱分化还是再分化过程中均要提供光照。
(×)7．制备好的MS培养基用于植物组织培养时，大都需要加入植物激素。
(√)8．生长素与细胞分裂素的比例不同时，可使愈伤组织朝不同方向分化。
(√)悟一悟1.在适宜的外界条件下，植物的体细胞培养比生殖细胞的培养更容易。
2．一般来说，离体后的植物细胞的全能性在一定条件下可充分实现。
3．离体后的动物细胞的全能性受限制，但其细胞核的全能性可借助卵细胞的细胞质体现出来。
4．愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞，细胞具有旺盛的分裂能力，这些细胞中无中央大液泡。
5．影响植物组织培养的因素：(1)材料的选择；(2)MS培养基的配制；(3)培养基中添加植物激素的浓度、用量比例和使用的先后顺序；(4)外植体的消毒、接种和培养；(5)试管苗的移栽和幼苗的栽培；(6)培养过程中的温度、pH和光照等环境条件。
6．植物组织培养过程中的无菌技术包括培养环境、培养基、培养器械的消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒，对培养材料进行表面消毒时，一方面要考虑药剂的消毒效果；另一方面要考虑植物材料的耐受能力。
不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。
感悟体会：练一练1.下列有关植物组织培养过程中愈伤组织的说法，错误的是( )A．愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B．愈伤组织经过脱分化过程可形成根或芽C．培养基中生长素和细胞分裂素的比值不同，愈伤组织分化的结果不同D．愈伤组织的细胞中，能发生碱基互补配对的细胞器是线粒体和核糖体解析：离体植物器官、组织或细胞(外植体)脱分化形成愈伤组织，A项正确；愈伤组织再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体，B 项错误；生长素和细胞分裂素能促进细胞分裂分化，在再分化过程中，生长素高，促进根的分化，细胞分裂素比例高，促进芽的分化，C 项正确；在愈伤组织细胞中，含有DNA 的细胞器线粒体，能够进行复制和转录，所以能发生碱基互补配对；核糖体是合成蛋白质的场所，所以也发生tRNA 和mRNA 的碱基互补配对，D 项正确。
高考生物总复习试卷：人教版高中生物选修一《植物的组织培养技术》专题练习含答案分析
选修一专题 31．紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。
用植物组织培养技术能够在生物反响器中经过培养紫草细胞生产紫草素。
以下图记录了生物反响器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。
(1)在生产前，需先加入紫草细胞作为反响器中的“种子”。
这些“种子”是应用组织培养技术，将紫草叶肉细胞经过______________而获取的。
这项技术的理论基础是______________。
b5E2RGbCAP(2)从图中能够看出：反响器中紫草细胞的生长体现________________ 规律；影响紫草素产量的要素是p1EanqFDPw________ 和________。
(3)在培养过程中，要不停通入无菌空气并进行搅拌的目的是________和 ________。
分析：由于紫草素是从大批培养的紫草愈伤组织细胞中提取的，因此生产前一定要加入离体的紫草细胞进行脱分化培养，以获取大批的紫草愈伤组织细胞，这一过程利用了植物细胞的全能性。
从图中能够看出反响器中紫草细胞的数目呈“ S”型增加，原由是开始生长较慢，要经过适应期，而后进入生长较快的对数期，随细胞数目的增加，食品、空间等生活条件成为限制要素，此时进入稳固期，细胞的数目相对稳固。
在这个期间紫草细胞要产生大批的次级代谢产物——紫草素，因此说紫草素产量的高低与紫草愈伤组织细胞的数目和生长久相关。
DXDiTa9E3d答案： (1) 脱分化 (或脱分化形成愈伤组织)细胞的全能性(2)“ S”型增加细胞数目细胞所处的生长久(3)保证氧气供给充分使细胞与培养液充分接触RTCrpUDGiT2．如下图，图Ⅰ为植物组织培养流程图，图Ⅱ为植物组织培养过程的部分表示图，请据图回答：(1)植物组织培养依照的原理是________________________________________________________________________ 。
碑碎市碰碗学校高考生物一轮复习 2 植物细胞工程练习(含解析)
感碍州碑碎市碰碗学校植物细胞工程※考点一植物细胞工程的基本技术1.(预测题)请回答下列有关植物组织培养的问题：(1)植物组织培养过程中的脱分化就是让已经分化的细胞经过诱导后，失去其特有的_________而转变成未分化细胞的过程。
愈伤组织再分化出幼根和芽的实质是_____________________。
(2)在胡萝卜的组织培养过程中，将胡萝卜组织块接种到培养基上的操作需要在超净工作台上进行，其目的是避免_______的污染；胡萝卜组织块形成愈伤组织的过程是在_______(填“避光”或“适宜光照”)条件下进行的。
(3)植物组织培养过程所依据的生物学原理是_______________________。
植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的_______，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。
(4)利用植物组织培养技术培育无病毒植株，选材时一般选取________________。
利用植物组织培养技术可以制造出人工种子，即以植物组织培养得到的_______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。
【解析】(1)脱分化就是让已经分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构与功能而转变成未分化细胞的过程。
细胞分化的实质是基因的选择性表达。
(2)植物组织培养过程中要保持无菌条件，以避免微生物的污染。
胡萝卜组织块形成愈伤组织的过程是在避光条件下进行的。
(3)植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性。
植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。
(4)植物分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，所以一般选取茎尖或根尖培育无病毒植株。
人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。
答案：(1)结构与功能基因的选择性表达(2)微生物避光(3)植物细胞的全能性遗传特性(4)茎尖或根尖胚状体2.(2020·福州模拟)蓝莓中富含的花青素能有效地改善视力，下面为科学家利用植物组织培养的方法，大量培养蓝莓具体流程的文字图解。
2024-2025植物组织培养高考题汇编(含详解)
1.（2024广东卷）（16分）铁皮石斛是我国珍贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培育技术培育铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的试验流程如下：在固体培育基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培育时间的改变如图17所示，请回答下列问题：⑴选用新生养分芽为外植体的缘由是，诱导外植体形成PLBs的过程称。
⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在，，。
⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。
若采纳液体培育，推想添加适量的ABA可提高生物碱产量。
同学们拟开展探究试验验证该推想，在设计试验方案是探讨了以下问题：①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白比照组，3次重复。
因ABA受热易分解，故肯定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培育基后按比例加入。
②试验进程和取样：试验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。
如初始（第0天）数据已知，试验过程中还需测定的样品数为。
③依所测定数据确定相宜的ABA浓度和培育时间：当某3个样品（重复样）的时，其对应的ABA浓度为相宜浓度，对应的培育时间是相宜培育时间。
【答案】（1）细胞分化程度低，简单诱导形成PLBs（2分）；细胞的脱分化（2分）（2）生长起始快（2分），快速生长时间较长（2分）；PLBs产量较高（2分）；（3）①灭菌、冷却（2分）；②75（2分）；③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大（3分）【解析】（1）新生养分芽分裂实力强，全能性简单表达；依据题干可知，PLBs类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。
（2）据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，缘由可能是光照有利于细胞增殖、叶绿体的形成和进行光合作用制造有机物。
（3）①由于ABA受热易分解，所以各种液体培育基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA ②依据题干可知，试验50天完成，每10天取样，须要取样5次，4个ABA处理组，1个空白比照组，3次重复，因此每次取样须要记录15个样品中的数据，共须要测定样品数75 ③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的平均值最大时，所对应的ABA浓度和时间为最适。
高考生物一轮复习 考点训练 植物组织培养与植物体细胞杂交
2013高考生物一轮复习考点训练植物组织培养与植物体细胞杂交一、选择题1．(2010·江苏南通一模)下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体的叙述，不正确的是( )。
A．给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞B．B细胞与骨髓瘤细胞混合培养，是为了获得融合细胞C．杂交瘤细胞进行体外培养，是为了获得单克隆抗体D．杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎解析杂交瘤细胞的培养有体内培养和体外培养，其目的都是为获得单克隆抗体，不是获得产生单克隆抗体的胚胎。
答案 D2．(2012·佛山质检)用小鼠制备单克隆抗体可用于人类疾病的诊断和治疗，关于单克隆抗体的叙述错误的是( )。
A．由杂交瘤细胞分泌B．具有特异性强、灵敏度高的特点C．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”D．用于疾病治疗时人体不会产生任何免疫排斥命题立意本题考查单克隆抗体的制备过程、特点及综合分析问题的能力，难度中等。
解析单克隆抗体可通过杂交瘤细胞产生，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、产量高、纯度高等特点；单克隆抗体能特异性识别抗原，与抗癌药物结合后制成的“生物导弹”能特异性识别并杀死癌细胞；利用单克隆抗体治疗人类疾病时也会发生免疫排斥。
答案 D3．(2011·广东湛江一模，1)红江橙种植几年后往往容易积累病毒导致品种退化。
在生产上可采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量水平。
这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的( )。
A．有丝分裂和分化B．染色体变化和细胞全能性C．减数分裂和配子的形成D．DNA的复制和表达解析茎尖分生组织离体培养过程是体细胞分裂和分化过程，分裂和分化都必然涉及DNA的复制与表达，当然也有染色体的变化。
组织培养的理论基础是细胞全能性。
唯独不涉及减数分裂和配子的形成。
答案 C4．(2012·江门模拟)植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不相符的是( )。
高考生物一轮复习 植物的组织培养技术限时集训(含解析)新人教版
限时集训(四十四) 植物的组织培养技术(限时30分钟满分60分)非选择题(共60分)1．(15分)下图是用胡萝卜根细胞进行组织培养的某些过程示意图。
请据图回答：(1)把组织培养的过程按正确顺序排列________(以字母表示)。
(2)实验前试管和培养基应经________处理。
(3)培养基中除加入各种营养物质外，还应加入______、________等植物激素。
(4)图D上的细胞团是________。
(5)从理论上讲，植物细胞有形成再生植株的可能性，这是____________________的表现。
2．(15分)下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：(1)选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用________期的花粉可提高成功率。
选择花粉时，一般要通过________来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是________ 。
(2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中___________。
(3)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度的________薄壁细胞。
胚状体与________发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。
(4)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。
①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾，⑤实验操作者的双手，⑥三角锥形瓶。
________(填编号)需要灭菌， ________(填编号)需要消毒。
(5)试管苗移栽到土壤前，通常要进行壮苗处理，应如何壮苗？________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
高中生物必修课-----植物的组织培养技术知识讲解及巩固练习题(含答案解析)
高中生物必修课-----植物的组织培养技术知识讲解及巩固练习题（含答案解析）【学习目标】1、指导植物组织培养技术的基本原理和基本技术。
2、掌握植物培养过程中使用的无菌技术（重点）。
3、掌握植物知识培养的基本过程及操作。
4、说出被子植物花粉发育的过程及花药例题培养产生花粉植株的两种途径。
5、说出花药离体培养的因素，学习话要例题培养的基本技术。
【要点梳理】要点一、植物组织培养的基础知识【高清课堂：植物的组织培养技术高清未发布课题1：基础知识】1、植物组织培养的基本过程：离体的植物器官、组织或细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织。
愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化（去分化）。
脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。
再分化形成的试管苗移栽到地里，可以发育成完整的植物体。
植物组织培养的过程可以简要归纳为：离体的植物器官、组织或细胞（外植体）愈伤组织根、芽—→植物体。
2、植物组织培养的理论基础：细胞的全能性要点诠释：细胞的全能性与植物组织培养间的关系①细胞的全能性是植物组织培养的理论基础。
植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。
植物细胞只有脱离了植物体，在一定的外部因素作用下，经过细胞分裂形成愈伤组织，才能表现出全能性，由愈伤组织发育、分化出新的植物体。
②高度分化的植物细胞仍具有全能性的原因是所有体细胞均来自受精卵的有丝分裂，均有和受精卵相同的一整套遗传信息。
③植物体的组织、器官的形成，是基因选择性表达的结果，其细胞的全能性受到限制，在离体状态下，其全能性才容易得以表达，表达的过程须经过脱分化和再分化。
④容易进行营养繁殖的植物细胞，其全能性容易表达，易进行植物组织培养。
要点二、影响植物组织培养的因素1、无机营养（1）大量元素：除碳（C）、氢（H）、氧（O）外，还有氮（N）、磷（P）、钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）、硫（S）等元素。
生物一轮对点训练：30-2动物细胞工程b打印版
本资源的初衷,是希望通过网络分享,能够为广阔读者提供更好的效劳,为您水平的提高提供坚强的动力和保证 .内容由一线名师原创,立意新,图片精,是非常强的一手资料 .1．科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反响器生产人凝血因子Ⅸ医用蛋白,其技术路线如图：(1)由过程①获得的A为________________________________ .(2)在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核,目的是______________ .受体应选用________期卵母细胞.(3)进行胚胎移植时,代孕母羊对移入子宫的重组胚胎根本上不发生________ ,这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能.(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆,理论上可获得无限个转基因绵羊,这是因为______________________________ .答案(1)含目的基因的表达载体(2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞MⅡ中期(3)免疫排斥反响(4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养解析(1)依据图示,①为表达载体构建过程,A为含有目的基因的表达载体.(2)在核移植前,去掉受体卵母细胞核的目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞；受体细胞应选用减Ⅱ中期的卵母细胞.(3)在胚胎移植时,代孕母羊对移入子宫的重组胚胎根本不发生免疫排斥反响,这为重组胚胎的存活提供了可能.(4)由于整合有目的基因的成纤维细胞可以进行传代培养,故理论上可获得无限个转基因绵羊.2．某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z) ,每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反响的血清最|||大稀释倍数) ,结果如以以下图所示.假设要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条) ,并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例参加试管中,再参加聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞.答复以下问题：(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需到达16000以上,那么小鼠最|||少需要经过________次免疫后才能有符合要求的.到达要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最|||适合用于制备B淋巴细胞的是________小鼠,理由是______________________ .(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有____________________________________ ,体系中出现多种类型细胞的原因是_________________________ .(3)杂交瘤细胞中有________个细胞核,染色体数目最|||多是________条.(4)未融合的B淋巴细胞经屡次传代培养后都不能存活,原因是_________________________________________________________ .答案(1)4Y Y小鼠的血清抗体效价最|||高(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的,且融合率达不到100%(3)1100(4)不能无限增殖解析此题考查动物单克隆抗体技术的原理及应用.(1)由图看出,到第4次免疫时,Y和Z的血清抗体效价已到达要求,即16000以上,而前3次免疫后,3只小鼠的血清抗体效价均未到达要求.从第3次开始,Y小鼠的血清抗体效价最|||高,所以Y小鼠最|||适合用于制备B淋巴细胞.(2)仅考虑细胞之间的两两融合.该融合体系中有5种类型的细胞：2种未融合型(B淋巴细胞、骨髓瘤细胞) ,3种融合型(B淋巴细胞＋B淋巴细胞、骨髓瘤细胞＋骨髓瘤细胞、B淋巴细胞＋骨髓瘤细胞) ,由此可看出细胞融合具有随机性.(3)杂交瘤细胞是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的,有1个细胞核,核内染色体数为40＋60＝100 .(4)B淋巴细胞不能无限增殖,所以经屡次传代培养后都不能存活.3．人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV ,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图答复：(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有___________ .(2)假设要分析杂交瘤细胞中染色体,可通过______________等过程制成装片,然后在显微镜下观察.杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是________________ ,在HAT培养基上存活的细胞可能包括________(填以下序号) .①无抗体分泌的细胞②抗HPV抗体的分泌细胞③其他无关抗体的分泌细胞(3)对于抗体检测呈________性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最|||常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3～10个/mL ,每孔参加细胞稀释液__________mL[0.1/(1/10)] ,使每个孔内不多于一个细胞,到达单克隆培养的目的.(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是______________________________________ .(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中别离出了无限增殖调控基因(prG) ,该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路.除此题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路_____________________ .答案(1)动物细胞培养、动物细胞融合(2)解离、漂洗、染色和制片染色体数目加倍①②③(3)阳0.1(4)小鼠形成的抗体对人体来说是抗原,存在着排异反响(5)通过基因工程向浆细胞中导入prG；利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中(答对其一即可)解析(2)利用显微镜观察有丝分裂过程中的染色体,需先制作临时装片；杂交瘤细胞中含有浆细胞和骨髓瘤细胞的染色体,所以比普通淋巴细胞的染色体数目多一倍；在HAT培养基上生存的细胞均为杂交细胞,这些杂交细胞中有分泌HPV抗体的细胞,有分泌其他抗体的细胞,也有不能分泌抗体的细胞.(3)抗体检验呈阳性,说明该杂交瘤细胞可产生所需抗体；为保证每个小孔不多于一个细胞,根据浓度可推断参加细胞稀释液的量：设参加细胞稀释液的最|||大量是X ,那么10个/mL×X＝1个,X＝0.1 mL .(4)小鼠形成抗体与人体抗体不同,故在人体内可引起免疫反响,所以上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体.(5)根据所给信息可知,还可通过转基因技术或核移植技术获得既能大量增殖,又能产生特定抗体的杂交细胞.。
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1．为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。
请回答下列问题：
(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为________。
(2)在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示。
细胞干重在12 d后下降的原因有______________________；培养液中蔗糖的作用是________________、________________。
(3)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。
二倍体愈伤组织细胞经________处理，会产生染色体加倍的细胞。
为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常用纤维素酶和________酶解离愈伤组织。
若愈伤组织细胞(2n)经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是_______________________________、________________________________________________。
(4)为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似。
下列说法正确的有________(填序号)。
①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋
②必须在光照条件下培养
③培养过程中需通空气
④固定化后植物细胞生长会变慢
答案(1)脱分化(2)蔗糖浓度下降，pH降低提供能源调节
渗透压(3)秋水仙素(低温)果胶经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期(4)①③④解析(1)外植体经脱分化可形成愈伤组织。
(2)分析坐标曲线图，可见培养液中的蔗糖浓度已降至较低，pH 也由6降为4，因此使得细胞生命活动受阻，细胞干重减小。
培养液中的蔗糖可为培养的细胞提供能源，又可调节培养液的渗透压。
(3)二倍体愈伤组织经秋水仙素、低温等人工诱导处理，可产生染色体数目加倍的细胞。
植物细胞之间除纤维素外，还存在果胶层，因此可利用纤维素酶和果胶酶解离愈伤组织。
愈伤组织细胞(2n)经人工诱导后，细胞中染色体数目加倍成4n，染色体数为4n的细胞进行有丝分裂，处于有丝分裂后期的细胞中含有8n条染色体；若加倍到4n的细胞经诱导后继续加倍形成染色体数为8n的细胞，这样的细胞再进行有丝分裂，在中期时会看到染色体数为8n的细胞。
(4)通过愈伤组织获得次级代谢产物时，需选择生长旺盛的细胞，由于植物细胞进行有氧呼吸，培养过程需通入空气。
愈伤组织细胞没有叶绿体，不进行光合作用，不需光照。
植物细胞固定化后，与外界环境的物质交换能力降低，生长变慢。
2．某年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。
(1)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是________法。
(2)橘皮精油的提取若采取水蒸气蒸馏法，会出现原料________和有效成分________等问题。
(3)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，通常选取________作材料进行植物组织培养大量繁殖无病毒植株。
若用花药进行离体培养，则选择花粉发育至________期的花药培养成功率最高。
确定花粉发育时期最常用的方法有________法，某些植物的花粉不易着色，需采用________法。
(4)影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有
________。
在进行植物组织培养时需保证细胞处于离体状态，原因是_____________________________________________________。
答案(1)压榨
(2)焦糊水解
(3)茎尖或芽尖单核醋酸洋红焙花青—铬矾
(4)生长素和细胞分裂素在柑橘个体发育过程中，不同细胞中遗传信息执行情况不同，细胞分化形成不同的组织和器官解析(1)(2)水中蒸馏的方法对于有些原料不适用，如柑橘，这是因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题，因此柑橘芳香油制备一般采用压榨法。
(3)一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。
选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎，选择单核期以后的花药接种，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难。
确定花粉发育时期最常用的方法有醋酸洋红法，某些植物的花粉不易着色，需采用焙花青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
(4)植物组织培养时最关键的激素是生长素和细胞分裂素；在进行植物组织培养时需保证细胞处于离体状态，原因是在柑橘个体发育过程中，不同细胞中遗传信息执行情况不同，细胞分化形成不同的组织和器官。