基因工程高考题

生物基因工程高考真题
1、【来源】 2020年高考真题江苏卷第33题8分
如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如下图（以EcoRⅠ酶切为例）：
请据图回答问题：
(1) 步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种酶，它通过识别特定
的切割特定位点。

(2) 步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′−羟基与5′−磷酸间形
成；PCR循环中，升温到95∘C是为了获得；Taq DNA聚合酶的作用是催化。

(3) 若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须
是（从引物①②③④中选择，填编号）。

(4) 对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。

下列DNA单链序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是（）
A. 5′−AACTATGCG⋯⋯⋯AGCCCTT−3′
B. 5′−AATTCCATG⋯⋯⋯CTGAATT−3′
C. 5′−GCAATGCGT⋯⋯⋯TCGGGAA−3′
D. 5′−TTGATACGC⋯⋯⋯CGAGTAC−3′
1 、【答案】 (1) 限制性核酸内切（或限制）;核苷酸序列;
(2) ;DNA单链;以DNA为模板的DNA链的延伸;
(3) ②④;
(4) B;
【解析】 (1) 步骤Ⅰ中的EcoRⅠ酶是一种限制性核酸内切酶，简称限制酶；EcoRⅠ酶能够识别并
切割双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。

(2) 步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化DNA分子每一条链中特定部位的两个核苷酸之间形成磷酸二酯键；PCR循环中，升温到95∘C是为了断开DNA两条链间的氢键，得到DNA单链；Taq DNA聚合酶
是一种热稳定性高的DNA聚合酶，其作用是催化以DNA为模板的DNA链的延伸。

(3) 引物是根据目的基因的一段核苷酸序列合成的，且与模板DNA链根据碱基互补配对合成，引物的3′端和DNA模板链的5′端根据碱基互补配对原则连接，由题目中已知序列5′−
AACTAT⋯⋯−，对应的引物为3′−TTGATA⋯⋯−即④选项，由题目中另一段已知序列5′−AGAGGC⋯⋯−，对应的引物为3′−TCTCCG⋯⋯−即②选项。

(4) 对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列，由于片段F的两端是经EcoRⅠ酶切割核
苷酸序列−GAATTC−得到的，因而其5′端的序列必定是5′−AATTC−，其3′端的序列是
−GAATT−3′，经分析B项符合。

【标注】。