实验4-血清甘油三酯含量测定
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实验26
血清甘油三酯含量测定
Assay of Triglyceride content
生物化学与分子生物学系 陈园园
实验目的
掌握血清甘油三酯化学法测定的 基本原理及主要技术方法
了解血清甘油三酯含量测定的 正常值与临床意义
实验原理
皂化
+
KOH
60-70℃ 20min
3
+
甘油三酯
钾皂
甘油
氧化
HIO4 2
实验结果
Lambert-Beer 定律
标准管法
A1 ——
=
c1 ——
源自文库
=
m1 ——
（终体积相同时）
A2 c2 m2
样品TG浓度 = ——AA—样标—品准——品—×—m—标—准品— V样品
mg/ml
—A样—品— × 1mg/ml ×0.2ml = —A—标准—品—————————
0.2ml
mg/ml —摩—尔—质—量—g/m—o—l (8—85—)
加入异丙醇、皂化试剂，充分混匀，65℃水浴5min 注意：吸上层液时，务必当心，绝对不可吸入下层液体 （分光光度计预热）
氧化显色 加入氧化试剂，充分混匀后，
加入乙酰丙酮和氨的混合液，摇匀，65℃水浴15min
比色 取出试管，流水/室温冷却，测420nm的吸光度
分光光度计的使用
样品池 拉杆，0-4档
波长 读数
毛面 光面
1. 打开电源，调节旋钮至需要的波长，预热20~30min 2. 1档（空白管），T模式调100%，显示“Blank”、 “100” 3. 拉杆拉至1.5档，T模式调0%，显示“0.00” 4. 换到A模式，拉至2、3、4档，读取各个样品的吸光度
比色杯的使用
1、分清光面、毛面。手应接触毛面，光从光面通过 2、用溶液润洗2-3次，装至2/3至4/5体积 3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面
甘油
甲醛
显色
+
NH4+
甲醛
乙酰丙酮
3,5-二乙酰-1,4二氢-2,6 二甲基吡啶 （黄色带荧光）
实验步骤
抽提
取3（或4）只小试管，依次加入蒸馏水、标准液、样品，
抽提剂及硫酸，边加边摇，用力振摇10min，静置10min分层 注意：试管必须干燥
皂化
吸取上层液体0.5ml，加入对应的3 （或4）只大试管中，
临床应用
血脂：血甘油三酯、血胆固醇
餐后甘油三酯会增高，检查时一定要空腹抽血 饮酒可引起血清甘油三酯浓度急性、短暂性升高，
抽血前几天禁止饮酒 正常人血清甘油三酯水平有随年龄增高的趋势 血清甘油三酯水平升高多见于糖尿病、肾病综合征、
急性胰腺炎、原发性高甘油三酯血症及 动脉粥样硬化等
×1000
mmol/L
国际单位
正常参考值为0.30~1.7mmol/L
注意事项
抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上层液， 吸取上层液时不能吸入下层液；
选用小试管时试管口径不能太细；
试管使用时必须要干燥；
实验完成后，试管和比色杯必须用皂粉洗干净， 不能有油污，将水甩干，倒置晾干； 枪头必须清洗干净，甩干
血清甘油三酯含量测定
Assay of Triglyceride content
生物化学与分子生物学系 陈园园
实验目的
掌握血清甘油三酯化学法测定的 基本原理及主要技术方法
了解血清甘油三酯含量测定的 正常值与临床意义
实验原理
皂化
+
KOH
60-70℃ 20min
3
+
甘油三酯
钾皂
甘油
氧化
HIO4 2
实验结果
Lambert-Beer 定律
标准管法
A1 ——
=
c1 ——
源自文库
=
m1 ——
（终体积相同时）
A2 c2 m2
样品TG浓度 = ——AA—样标—品准——品—×—m—标—准品— V样品
mg/ml
—A样—品— × 1mg/ml ×0.2ml = —A—标准—品—————————
0.2ml
mg/ml —摩—尔—质—量—g/m—o—l (8—85—)
加入异丙醇、皂化试剂，充分混匀，65℃水浴5min 注意：吸上层液时，务必当心，绝对不可吸入下层液体 （分光光度计预热）
氧化显色 加入氧化试剂，充分混匀后，
加入乙酰丙酮和氨的混合液，摇匀，65℃水浴15min
比色 取出试管，流水/室温冷却，测420nm的吸光度
分光光度计的使用
样品池 拉杆，0-4档
波长 读数
毛面 光面
1. 打开电源，调节旋钮至需要的波长，预热20~30min 2. 1档（空白管），T模式调100%，显示“Blank”、 “100” 3. 拉杆拉至1.5档，T模式调0%，显示“0.00” 4. 换到A模式，拉至2、3、4档，读取各个样品的吸光度
比色杯的使用
1、分清光面、毛面。手应接触毛面，光从光面通过 2、用溶液润洗2-3次，装至2/3至4/5体积 3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面
甘油
甲醛
显色
+
NH4+
甲醛
乙酰丙酮
3,5-二乙酰-1,4二氢-2,6 二甲基吡啶 （黄色带荧光）
实验步骤
抽提
取3（或4）只小试管，依次加入蒸馏水、标准液、样品，
抽提剂及硫酸，边加边摇，用力振摇10min，静置10min分层 注意：试管必须干燥
皂化
吸取上层液体0.5ml，加入对应的3 （或4）只大试管中，
临床应用
血脂：血甘油三酯、血胆固醇
餐后甘油三酯会增高，检查时一定要空腹抽血 饮酒可引起血清甘油三酯浓度急性、短暂性升高，
抽血前几天禁止饮酒 正常人血清甘油三酯水平有随年龄增高的趋势 血清甘油三酯水平升高多见于糖尿病、肾病综合征、
急性胰腺炎、原发性高甘油三酯血症及 动脉粥样硬化等
×1000
mmol/L
国际单位
正常参考值为0.30~1.7mmol/L
注意事项
抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上层液， 吸取上层液时不能吸入下层液；
选用小试管时试管口径不能太细；
试管使用时必须要干燥；
实验完成后，试管和比色杯必须用皂粉洗干净， 不能有油污，将水甩干，倒置晾干； 枪头必须清洗干净，甩干