寡核苷酸探针制备

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寡核苷酸探针制备
寡核苷酸探针制备需要以下步骤:
1. 设计寡核苷酸序列:根据目标DNA分子的序列设计寡核苷酸探针序列,使其能够与目标序列互补配对。

2. 合成寡核苷酸探针:合成寡核苷酸探针的方法有磷酸二酯化学合成、固相合成和酶法合成等。

其中固相合成是最常用的方法,可通过商业化学公司购买。

3. 标记寡核苷酸探针:标记方法有放射性标记、化学标记和生物素标记等。

其中化学标记和生物素标记可在商业化学公司购买。

4. 纯化寡核苷酸探针:使用凝胶电泳或高效液相色谱等方法将寡核苷酸探针从杂质中纯化。

5. 确定寡核苷酸探针浓度:使用分光光度计或比色法等方法测定寡核苷酸探针的浓度。

6. 评估寡核苷酸探针的效能:使用聚合酶链式反应(PCR)或原位杂交等方法测试寡核苷酸探针的特异性和敏感性。

7. 存储寡核苷酸探针:将寡核苷酸探针保存在低温干燥的环境中,避免受到光、氧化和水解等影响。

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