合成天麻素中两种微量成分的薄层色谱分析
HPLC测定天麻素的含量和有关物质
第35 卷第4 期西南民族大学学报·自然科学版Jun. 2009 Journal of Southwest University for Nationalities⋅Natural Science Edition文章编号: 1003-2843(2009)04-0781-04HPLC 测定天麻素的含量和有关物质李婧(西南民族大学化学与环境保护工程学院, 四川成都610041)摘要: 目的建立测定天麻素原料药中天麻素的含量及有关物质的高效液相色谱法. 方法采用Hypersil C18 色谱柱, 甲醇-0.01moL·L-1 磷酸二氢钠(8:92, 磷酸调节pH 至 4.0±0.1)为流动相, 检测波长为220nm, 流速 1.0 mL·min-1. 结果天麻素在 2.5～40.0 μg·mL-1 范围内, 峰面积与其浓度线性关系良好(r＝0.9999), 高、中、低 3 种浓度的平均加样回收率为99.7％～100.3%, RSD 为0.44％～0.82% , 有关物质的限量为 1.0%. 结论本法准确、简便、快速, 适用于天麻素原料药的质量控制.关键词: 天麻素; 含量测定; 有关物质; 高效液相色谱法中图分类号: R284.1 文献标识码: A天麻素(Gastrodin, C13H18O7)化学名为4一羟甲基苯一B—D一吡喃葡萄糖苷, 是名贵药材天麻的有效单体, 主要用于治疗神经衰弱、神经衰弱综合征及血管神经性头痛等症, 亦可治疗脑外伤性综合征、眩晕症如美尼尔病、药性眩晕、外伤性眩晕等[1]. 目前国内外学者对该药的药理作用、不同制剂的质量控制等方面进行了较深入的研究[2, 6]. 本文建立了天麻素原料药含量测定及有关物质检查的RP-HPLC法, 该法简便、快速、准确, 适用于天麻素的质量控制.1 仪器与试药日本岛津LC-10A 高效液相色谱仪, SPD-10Avp 型紫外检测器, Sage DataSystem 色谱工作站; 天麻素原料药由浙江诚意药业有限公司提供(批号：2005-0902, 2004-0409, 2005-0906); 天麻素对照品(供含量测定用)由中国药品生物制品检定所提色供(批号：807-200304); 水为重蒸馏水; 甲醇为色谱醇; 其它试剂均为分析纯.2 色谱条件与系统适用性试验色谱柱为Hypersil C18 柱(250 mm×4.6 mm, 10 μm); 流动相为甲醇-0.01 moL·L-1 磷酸二氢钠(8:92, 磷酸调节pH 至4.0±0.1); 流速为1.0 mL·min-1; 检测波长为220 nm; 柱温为30℃. 理论板数按天麻素峰计算应不低于3000.3 含量测定3.1 测定法精密称取本品适量, 加流动相制成每1mL 中含10 μg 的溶液, 作为供试品溶液; 另取天麻素对照品适量, 加流动相制成每1 mL 中含10 μg 的溶液, 作为对照品溶液; 取供试品和对照品溶液各20 μL 注入液相色谱仪, 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算天麻素的含量.收稿日期：2009-04-07作者简介：李婧(1985-), 女, 西南民族大学化学与环境保护工程学院助理实验师.782 西南民族大学学报·自然科学版第35 卷3.2 分析方法验证3.2.1 专属性考察“3.1 项下”的供试品溶液、对照品溶液及空白流动相色谱图见图1. 流动相在天麻素峰处无干扰, 天麻素峰与相邻杂质峰的分离度符合要求.图1 天麻素HPLC 测定色谱图fig1 Chromatograms of GastrodinA 样品溶液(sammple solution);B 对照品溶液(reference substance solution);C 空白流动相(mobile phase)1 天麻素(Gastrodin)3.2.2 线性关系及线性范围精密称取天麻素对照品适量, 用流动相制成每1mL 中含2.5、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0 μg 的溶液, 分别精密吸取20 μL 注入色谱仪, 记录色谱图. 以天麻素峰面积Y 对浓度X 进行线性回归, 回归方程为：Y=18702x+583.45, r = 0.9999 (n=6), 天麻素浓度与峰面积在2.5～40.0 μg·mL-1 范围内线性关系良好.3.2.3 精密度试验精密称取天麻素对照品适量, 用流动相制成含天麻素5.0、10.0、30.0 μg·mL-1 的溶液, 分别精密吸取20 μL 注入色谱仪, 重复进样5 次. 各浓度峰面积的RSD 分别为1.1%、0.35%、0.63%(n=5), 方法的进样精密度良好.3.2.4 重复性试验取同一批样品(批号：2005-0902), 按3.1 项下平行制备6 份, 测得平均含量为99.5%, RSD 为 1.05% (n=6), 方法的重复性良好.3.2.5 回收试验在已知含量(约10 μg·mL-1)供试品溶液中, 分别加入一定量的天麻素对照品, 配成高、中、低3 种浓度溶液(18.1、20.4、22.2 μg·mL-1), 按3.1 项下试验, 测得平均回收率分别为99.7％、100.1％及100.3 ％, RSD 分别为0.44％、0.46％及0.82％(n＝3).3.2.6 供试品溶液稳定性考察按3.1 项下制备供试品溶液(批号：2005-0902), 置室温下于不同时间(1、2、3、4、6、8h)分别进样20 μL, 峰面积的RSD 为0.82%, 供试品溶液在8 小时内基本稳定.3.3 样品含量测定照3.1 项下方法对取3 批天麻素样品进行测定. 结果见表 1.4 有关物质检查4.1 测定法精密称取本品适量, 加流动相制成每1mL 中含0.5 mg 的溶液, 作为供试品溶液; 精密量取1 mL, 置100 mL 量瓶中, 加流动相稀释至刻度, 摇匀, 作为对照溶液. 取对照溶液20 μL 注入色谱仪, 调节检测灵敏度, 使主成分峰高约为记录仪满量程的20-25％; 再取供试品溶液20 μL 注入色谱仪, 记录色谱图至主成分峰保留时间的 2 倍. 供试品溶液色谱图中各杂质峰面积总和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0%).4.2 分析方法验证第4 期4.2.1 专属性考察为了考察该法能否有效检测出本品在生产及贮存过程中可能产生的降解产物, 根据药物结构特点及贮存条件, 进行以下破坏性试验.酸解试验：取本品5 mg, 加4mL 0.1 mol·L-1 盐酸, 室温放置2h 后, 用0.1 mol·L-1 氢氧化钠中和至中性, 加流动相至10 mL, 照 4.1 项下试验, 在 5.408、5.833、12.592 min 处出现多个杂质峰, 与主成分能达到基线分离.碱解试验：取本品5 mg, 加4mL 0.1 mol·L-1 氢氧化钠溶解, 室温放置2 小时, 用稀盐酸中和至中性, 加流动相至10 mL, 照 4.1 项下试验, 在.833、5.425min 有杂质峰, 它们均与主成分能达到基线分离.高温试验：取本品 5 mg, 在60︒C 下放置10 天, 照 4.1 项下试验, 在12.658 min 有杂质峰, 与主成分能达到基线分离.强光照射试验：取本品5 mg, 在强光(照射度为4500±500LX)下照射10 天. 照 4.1 项下试验. 在4.133、13.117 min 时出现杂质峰, 与主成分能达到基线分离.高湿度试验取本品5 mg, 在湿度为95%的环境下放置10 天, 照4.1 项下试验, 在5.0、6.8 min 处出现杂质峰, 与主成分能达到基线分离.该法能有效检测出各破坏性试验产生的降解物, 且降解产物峰均能与主成分峰达到基线分离, 所建方法的专属性较好.4.2.2 检测限精密称取天麻素对照品适量, 用流动相制成每1mL 中含1.0 μg 的溶液, 精密吸取5 μL 注入液相色谱仪, 此时信噪比约等于3, 检测限为5 ng.4.2.3 对照溶液进样精密度按4.1 项下平行制备每1mL 中含5 μg 的对照溶液5 份, 分别进样20 μL, 以对照溶液主峰面积进行进样精密度考察, 结果RSD 为0.65％.4.2.4 重复性试验精密称取本品适量, 按4.1 项下平行制备每1ml 中含0.5 mg 的供试品溶液6 份, 分别进样20 μL, 以杂质含量进行方法的精密度考察, 结果RSD 为3.06％.4.3 有关物质测定结果用4.1 项下方法, 对3 批样品进行有关物质检查, 结果见表1.批号(Lot No.)表1 3 批样品测定结果(n＝3)Tab 1 results of 3 batches(n＝3)含量％(content)有关物质％(related substances)2004-0409 99.36 0.092005-0902 100.5 0.082005-0906 100.1 0.085 讨论精密称取天麻素对照品适量, 用流动相制成每1ml 中含天麻素10 mg 的溶液, 进行紫外扫描(200～400nm), 在220±1nm 及268±1nm 波长处有最大吸收, 其中在220±1nm 处吸收较强, 通过HPLC 分析发现, 220nm 波长处能检测的杂质峰个数较多, 杂质峰面积最大, 且主峰也有较强吸收, 因此采用220nm 作为本品有关物质测定波长.笔者对流动相进行不同比例、盐浓度和pH 值进行考察, 当流动相为[甲醇-0.01mol/L 磷酸二氢钠(8:92, 磷酸调节pH 至 4.0±0.1)]时, 主峰保留时间合适, 柱效较高, 主峰与相邻杂质峰分离度符合要求, 且能检查到较多的杂质峰. 因此, 最终确定：以甲醇-0.01mol/L 磷酸二氢钠(8:92, 磷酸调节pH 至4.0±0.1)为本品有关物质检查及含量测定的流动相.784 西南民族大学学报·自然科学版第35 卷参考文献：[1] 何晶. 天麻素的药理作用及临床应用[J]. 天津药学, 2006, 18(5): 62-63.[2] 熊佐章, 莫文电, 黄淑彰. HPLC 法测定天麻片中天麻素的含量[J]. 广西中医药, 2002, 25(4): 30-31.[3] 周娟, 宽恩礼, 刘福堂. 天麻中天麻素含量的测定方法[J]. 实用医药杂志, 2002, 19(9): 713-714.[4] 刘学起, 刘伟, 姜潇. 高效液相色谱法测定天麻素注射液的含量及有关物质[J]. 中国药业, 2007, 16(2): 32-33.[5] 刘中华, 胡海涛, 冯改丰, 等. 天麻素对Aβ25-35诱导的AIZhimer病细胞模型的保护作用[J]. 四川大学学报, 2005, 36(4): 53.[6] XIANG X, Y AN YL , XIAO DB. Protective effects of gastrodin on hypoxia-induced toxicity in primary cultures of rat corticalneurons[J]. Planta medica, 2007, 73(7): 650-654.Determination of Gastrodin and related substances in Gastrodin by HPLCLI Jing(School of Chemistry & Environmental Protection Engineering, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, P.R.C.)Abstract: Objective: To establish an RP-HPLC for determination of Gastrodin and related substances in Gastrodin. Method: Gastrodin and related substances are determinated on HPLC instrument fixed with a Hypersil C18 column (250mm×4.6mm,10 μm) with UV detection at 220nm, and the mobile phase consists of phosphoric buffer( 0.01moL·L-1 NaH2PO4) and methyl alcohol (98:2, adjusted to pH4.0±0.1 with phosphoric acid), the flow rate is 1.0 ml·min-1. Result: The calibration curve is linear (r = 0.9999) within the range of 2.5～40.0 g·mL-1 for Gastrodin, the average recovery rate is from 99.7% to 100.3% for three different levels of the amount of Gastrodin, RSD is from 0.44% to 0.82%. The limit of related substances is 1.0%. Conclusion: This method is simple, quick, accurate and effective for testing related compounds in Gastrodin and for its contentsdetermination. This method is suitable for the quality control for Gastrodin.Key words: Gastrodin; related substance; content determination; H PLC。
不同炮制方法对天麻素含量的影响_秦俊哲
LU T u- lin, M A X in- fe,i SU D an, Y IN Fang- zhou, W ANG Q iao-han ( N an jing U n iversity o f T rad itiona l Chinese M ed ic ine, N anjing 210046, Ch ina) Abstrac t O bjectiv e: T o study a best stir-bake w ith v inegar techno logy on F ructus Schisandra Chinensis1 M ethods: The orthogonal test w as emp loyed to de tect the effects o f the three facto rs inc lud ing the mo isten ing tim e, parboil tim e and the quantity o f v ineg ar w ith the indexes Sch izandro l A and Schisandr in B1 O rthogona l table L9 ( 3) 4 and the var iance analysis w ere choo sen in the expe rim en t to optim ize a stir-bake w ith v ineg ar techno logy on F ructus Schisandra ch inensis1 R esults and Conclusion: T he best produc ing techno logy are as fo llow s: w ith 100 K g F ructus Sch isandra Ch inensis add ing 20% v inegar, m o isten ing fo r 115 h, parbo iling 5 h, des iccating tho rough ly1 K ey word s V inegar Fructus Schisandra Chinensis; Stir-bake techno logy; Schizandro lA; Schisandr in B
高效液相色谱法测定天麻素胶囊的含量
药物与临床·49·高效液相色谱法测定天麻素胶囊的含量鲍艳荣昆药集团股份有限公司 云南 昆明 650100【摘要】目的：本文提出天麻素胶囊含量测定的HPLC 分析方法,并对分析方法的有效性做了初步的论证。
方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.1%磷酸-乙腈（97：3）为流动相，检测波长为220nm ，柱温25℃，理论塔板数按天麻素峰计算应不低于5000，结果天麻素在20～100μg/ml 范围内有良好的线性关系（r=1.0000)。
回归方程为：Y=18.289X-1.1714；平均加样回收率为99.39%(n=9)。
结论：该法简便、快速、准确，可作为测定天麻素胶囊的含量,该法对实际生产具有较好的指导意义，为质量标准的提升奠定了良好的基础。
【关键词】天麻素胶囊；高效液相色谱法；含量测定Content Determination of Gastrodin Capsule by HPLCBao YanrongKunming Pharmaceutical Corp,YunNan KunMing 650100[Abstract] Objective : is article proposes an HPLC analytical method for the content of gastrodin capsule and demonstrates the e ciency of this method. Methods:: e bulking substance is octadecyl silane for the bonded silica, using 0.1% phosphate - acetonitrile (97:3) as mobile phase and wave length at 220nm. e column temperature is 25℃. Calculated as the gastrodin peak the theoretical plate number should not be less than 5000. Results: e linear relation was good in the range of 20～100μg/ml （r =1.0000) and the regression equation is Y=18.289X-1.1714， e average recovery is 99.39% (n=9). Conclusions: is method is simple, rapid and accurate and can be used for the content determination of gastrodin capsule. e method has a good guiding signi cance for practical production ， laying a good foundation for the improvement of quality standards.[Key words]Gastrodin Capsule HPLC Content Determination1.前言天麻素胶囊具有镇静，安眠，镇痛作用，用于神经衰弱，神经衰弱综合症及血管神经性头痛，如偏头痛，三叉神经痛，枕大神经痛，眩晕，椎基底动脉供血不足等。
26911929_HPLC_法测定天麻素片中天麻素的含量及含量均匀度
㊀基金项目:２０２０年山东省药品质量风险监测项目㊀作者简介:王磊ꎬ男ꎬ博士研究生ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:药物质量控制ꎬＥ－ｍａｉｌ:６４９６０２７０＠ｑｑ.ｃｏｍ㊀通信作者:杨蕊ꎬ女ꎬ博士研究生ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:临床药学ꎬＴｅｌ:０５３１－８９２６８３５２ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｙｘｙｙｒ＠１６３.ｃｏｍＨＰＬＣ法测定天麻素片中天麻素的含量及含量均匀度王磊１ꎬ刘群１ꎬ肖云娜１ꎬ赵凯丽１ꎬ王佳茜１ꎬ李建朋１ꎬ李颖颖１ꎬ杨蕊２(１.烟台市食品药品检验检测中心ꎬ山东烟台２６４０００ꎻ２.山东第一医科大学第一附属医院ꎬ山东济南２５００１４)摘要:目的㊀建立高效液相色谱(ＨＰＬＣ)法测定天麻素片中天麻素的含量及含量均匀度ꎮ方法㊀ＴｈｅｒｍｏＢＤＳＣ１８(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)色谱柱ꎬ０.１％磷酸溶液－乙腈(９７ʒ３)为流动相ꎬ检测波长为２２０ｎｍꎬ柱温２５ħꎬ流速１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎮ结果㊀天麻素线性范围为０.４９７~２４.８３μｇ ｍＬ－１(ｒ＝１.００００)ꎬ平均回收率为１００.２％ꎬＲＳＤ＝１.０５％(ｎ＝９)ꎮ天麻素含量测定结果分别为９４.９％㊁９６.４％㊁９６.３％ꎻ３批天麻素片样品的Ａ＋２.２Ｓ均小于１５.０ꎮ结论㊀该方法可用于天麻素片中天麻素的含量测定和含量均匀度检查ꎮ关键词:高效液相色谱法ꎻ天麻素片ꎻ天麻素ꎻ含量ꎻ含量均匀度中图分类号:Ｒ９２７.２㊀文献标识码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２２)０４－０２３０－００３ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２２.０４.００５ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｕｎｉｆｏｒｍｉｔｙｏｆｇａｓｔｒｏｄｉｎｉｎＧａｓｔｒｏｄｉｎＴａｂｌｅｔｓｂｙＨＰＬＣＷＡＮＧＬｅｉ１ꎬＬＩＵＱｕｎ１ꎬＸＩＡＯＹｕｎｎａ１ꎬＺＨＡＯＫａｉｌｉ１ꎬＷＡＮＧＪｉａｘｉ１ꎬＬＩＪｉａｎｐｅｎｇ１ꎬＬＩＹｉｎｇｙｉｎｇ１ꎬＹＡＮＧＲｕｉ２(１.ＹａｎｔａｉＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒꎬＹａｎｔａｉ２６４０００ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＦｉｒｓｔＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＪｉｎａｎ２５００１４ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎｇｔｈｅｇａｓｔｒｏｄｉｎｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｕｎｉｆｏｒｍｉｔｙｏｆｇａｓｔｒｏｄｉｎｉｎＧａｓｔｒｏｄｉｎＴａｂｌｅｔｓｂｙＨＰＬＣ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀ＴｈｅｔｅｓｔｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｉｎＴｈｅｒｍｏＢＤＳＣ１８ｃｏｌｕｍｎ(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)ｍａｉｎｔａｉｎｅｄａｔ２５ħｗｉｔｈｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｏｆ０.１％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄｓｏｌｕｔｉｏｎ－ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ(９７ʒ３)ａｔａｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１.０ｍＬ ｍｉｎ－１.ＴｈｅＧａｓｔｒｏｄｉｎＴａｂｌｅｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄａｔ２２０ｎｍ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ｔｈｅｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｓｏｆｇａｓｔｒｏｄｉｎｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０.４９７~２４.８３μｇ ｍＬ－１(ｒ＝１.００００)ｓｈｏｗｅｄｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙｗｉｔｈａｎａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆ１００.２％(ＲＳＤ＝１.０５％ꎬｎ＝９).Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｇａｓｔｒｏｄｉｎｗｅｒｅ９４.９％ꎬ９６.４％ａｎｄ９６.３％.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＡ＋２.２Ｓｏｆｔｈｒｅｅｂａｔｃｈｅｓｗｅｒｅａｌｌｌｅｓｓｔｈａｎ１５.０.Ｃｏｎ￣ｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＴｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓａｐｐｌｉｃａｂｌｅｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｕｎｉｆｏｒｍｉｔｙｏｆｇａｓｔｒｏｄｉｎｉｎＧａｓｔｒｏｄｉｎＴａｂ￣ｌｅｔｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＨＰＬＣꎻＧａｓｔｒｏｄｉｎＴａｂｌｅｔｓꎻＧａｓｔｒｏｄｉｎꎻＣｏｎｔｅｎｔꎻＣｏｎｔｅｎｔｕｎｉｆｏｒｍｉｔｙ㊀㊀天麻素(ｇａｓｔｒｏｄｉｎ)分子式为Ｃ１３Ｈ１８Ｏ７ꎬ又名天麻苷ꎬ即４－羟甲基苯－β－Ｄ－吡喃葡萄糖苷ꎬ结构式见图１ꎬ于１９７９年首次从天麻中提取分离ꎬ因其植物提取法消耗工作量大ꎬ成本较高ꎬ现在各大药企主要用化学合成法制备天麻素原料ꎮ天麻素在国家药品标准收录为中枢神经系统药物[１]ꎬ有抗惊厥㊁抗癫痫[２]㊁镇静催眠[３]㊁镇痛抗炎[４]㊁心血管保护[５]等作用ꎮ天麻素片临床用于神经衰弱㊁头痛㊁偏头痛等症ꎮ根据原国家食品药品监督管理局数据库检索结果ꎬ目前国内批准上市的天图１㊀天麻素结构式麻素片剂有２５ｍｇ㊁５０ｍｇ㊁０.１ｇ(以天麻素计)㊁０.２ｇ(以天麻素计)４种规格ꎬ主要采用铝塑泡罩包装ꎮ不同企业的制备工艺不同ꎬ具体工艺参数也存在差异ꎮ目前ꎬ我国天麻素片主要执行«国家药品标准»ꎬ标准编号为ＷＳ１－ＸＧ－０２１－２００１ꎬ«美国药典»«英国药典»«日本药局方»«欧洲药典»均未收载天麻素与相关制剂标准ꎬ后三者仅收载了天麻ꎮ天麻素片现行标准[１]采用紫外分光光度法测定天麻素含量ꎬ无法区分待测成分与其他杂质在测定波长处的共同响应ꎬ方法专属性不强ꎮ本文建立了一种高效液相色谱法ꎬ方法专属性好ꎬ简便准确ꎬ仪器精密度高ꎬ适用于天麻素片中天麻素的含量测定和含量均匀度检查ꎮ我国现有天麻素片批准文号４０个ꎬ现行标准[１]中无２５ｍｇ规格的含量均匀度项目ꎬ无法监测该药品质量的均一性ꎮ根据相关规定[７]ꎬ本文对收集到的２５ｍｇ的天麻素片进行了含量均匀度考察ꎬ为天麻素片的质量控制提供依据ꎮ１㊀仪器与材料１.１㊀仪器㊀ＸＰＲ２０５ＤＲ电子天平(上海梅特勒－托利多仪器有限公司)ꎻ２０４０Ｃ高效液相色谱仪(日本Ｓｈｉｍａｄｚｕ公司)ꎻＭｉｌｌ－Ｑ纯水机(法国默克公司)ꎮ１.２㊀药品与试剂㊀３批天麻素片(规格２５ｍｇꎬ批号:２０２００１０１㊁２０１９０５０６㊁２０２００３０４)均来自云南某生产企业ꎻ天麻素对照品(ＮＩＦＤＣꎬ９６.７％ꎬ批号:１１０８０７－２０１８０９)ꎻ液相色谱级乙腈ꎬ其他试剂均为分析纯级ꎮ２㊀方法与结果２.１㊀色谱条件㊀ＴｈｅｒｍｏＢＤＳＣ１８(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)色谱柱ꎻ乙腈－０.１％Ｈ３ＰＯ４溶液(３ʒ９７)为流动相ꎻ流速:１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎻ检测波长为２２０ｎｍꎻ柱温:２５ħꎻ进样１０μＬꎮ２.２㊀溶液的制备２.２.１㊀供试品溶液㊀取天麻素片２０片ꎬ精密称定ꎬ精密称取本品细粉(约０.０２８ｇꎬ相当于含天麻素约５ｍｇ)ꎬ置１００ｍＬ量瓶中ꎬ加水约７０ｍＬꎬ超声使溶解ꎬ并稀释至刻度ꎬ摇匀ꎬ用中速滤纸过滤ꎬ将续滤液用０.４５μｍ有机系微孔滤膜滤过ꎬ即得ꎮ２.２.２㊀对照品溶液㊀将１０.２７ｍｇ天麻素对照品置２００ｍＬ量瓶中ꎬ加入约１３０ｍＬ水ꎬ超声使溶解ꎬ并稀释至刻度ꎬ摇匀ꎬ用中速滤纸过滤ꎬ将续滤液用０.４５μｍ有机系微孔滤膜滤过ꎬ即得ꎮ２.２.３㊀阴性对照溶液㊀按该企业天麻素片工艺处方ꎬ取除天麻素以外的其他辅料ꎬ按 ２.２.１ 项下方法ꎬ从 精密称取本品细粉 开始ꎬ依法制得本溶液ꎮ２.３㊀专属性试验㊀取上述３种溶液ꎬ照 ２.１ 项下方法测定ꎬ结果见图１ꎮ在天麻素峰处未见其他杂质干扰ꎬ说明测定方法专属性较好ꎮ图２ ＨＰＬＣ色谱图２.４㊀线性关系试验㊀精密量取对照品溶液１.０㊁２.０㊁５.０㊁１０.０㊁２０.０㊁５０.０ｍＬꎬ分别置１００ｍＬ量瓶中ꎬ加水稀释至刻度ꎬ制得系列线性溶液ꎬ分别按 ２.１ 项下方法重复测定２次ꎮ以天麻素浓度(Ｘꎬμｇ ｍＬ－１)为横坐标㊁峰面积(Ｙ)为纵坐标ꎬ得线性回归方程:Ｙ＝３６１２８.６８Ｘ－３２０８.７４ꎬｒ＝１.００００ꎮ结果显示ꎬ此方法中天麻素在０.４９７~２４.８３μｇ ｍＬ－１浓度范围内线性良好ꎮ２.５㊀精密度试验㊀取 ２.２.２ 项下对照品溶液ꎬ按 ２.１ 项下色谱条件ꎬ连续进样６次ꎬ计算得６针天麻素峰面积的ＲＳＤ＝０.０６％ꎬ仪器精密度良好ꎮ２.６㊀稳定性试验㊀按 ２.１ 项下色谱条件ꎬ在０㊁２㊁４㊁６㊁８㊁１２㊁２４ｈ时分别对同一供试品溶液进样分析ꎬ７针的峰面积ＲＳＤ＝０.８％ꎮ表明供试品溶液在２４ｈ内稳定ꎬ能够满足测定需要ꎮ２.７㊀重复性试验㊀取同一批号天麻素片ꎬ照 ２.２.１ 项下方法制备６份供试品溶液ꎬ按 ２.１ 项下色谱条件分析ꎬ测得该批次天麻素片含天麻素１７.８％ꎬＲＳＤ＝０.０５％ꎬ该方法重复性良好ꎮ２.８㊀回收率试验㊀取９份 ２.７ 项下所用天麻素片细粉０.０１４ｇꎬ分别置于１００ｍＬ容量瓶中ꎬ每３份分别加入天麻素对照品溶液(４.８１５ｍｇ ｍＬ－１)０.４００㊁０.５００㊁０.６００ｍＬꎬ照 ２.２.１ 项下方法ꎬ自 加入约７０ｍＬ水 开始ꎬ制备溶液ꎬ按 ２.１ 项下色谱条件测定ꎬ结果见表１ꎮ表１㊀回收率试验结果取样量/ｍｇ样品量/ｍｇ加入量/ｍｇ测得量/ｍｇ回收率(％)平均回收率(％)ＲＳＤ(％)１３.０８２.３５４１.９２６４.２８８１００.４２１３.２０２.３７６１.９２６４.２９３９９.５３１３.２４２.３８３１.９２６４.２９１９９.０７１３.２７２.３８８２.４０８４.８４４１０１.９９１２.９８２.３３７２.４０８４.７６５１００.８３１００.２１.０５１３.００２.３４２２.４０８４.７１９９８.７１１３.３０２.３９５２.８８９５.３１９１０１.２１１３.２８２.３９１２.８８９５.２９５１００.５２１３.２９２.３９３２.８８９５.２７６９９.７９２.９㊀方法耐用性㊀本试验考察了ＤａｉｓｏＣａｐｃｅｌｌＰＡＤＣ１８㊁ＷａｔｅｒｓＸｂｒｉｄｇｅＣ１８㊁ＴｈｅｒｍｏＢＤＳＨｙｐｅｒｓｉｌＣ１８㊁ＳｅｐａｘＧＰＣ１８４种不同色谱柱对系统适应性的影响ꎬ结果显示ꎬ采用４种不同厂家㊁不同填料㊁不同柱长的Ｃ１８色谱柱ꎬ虽然保留时间㊁峰面积响应有所不同ꎬ但峰形良好㊁分离度均大于２.０ꎬ均能满足待测物的分析要求ꎮ表明该方法耐用性良好ꎮ２.１０㊀样品含量测定㊀取样品(批号:２０１８０９０４㊁２０１９０５０６㊁２０２００３０４)ꎬ照 ２.２ 项下方法制备溶液ꎬ按 ２.１ 项下方法测定标示含量ꎬ测得结果分别为９４.９％㊁９６.４％㊁９６.３％ꎮ２.１１㊀样品含量均匀度测定㊀本文中收集到的３批天麻素片均为２５ｍｇ规格ꎬ为保证该药品质量的均一性ꎬ根据相关规定[６]ꎬ对３批样品进行了含量均匀度考察ꎮ取３个批号的样品各１０片ꎬ分别置于５０ｍＬ量瓶中ꎬ照 ２.２ 项下方法制备溶液ꎬ测定结果见表２ꎮ结果均符合规定ꎮ表２㊀样品含量均匀度测定结果批号ＸＳＡ＋２.２Ｓ２０１８０９０４９３.５２３.４０１４.０２０１９０５０６９５.１３３.５２１２.６２０２００３０４９４.９０３.１５１２.０３ 讨论３.１㊀检测波长的选择㊀经ＨＰＬＣ－ＰＤＡ全波长扫描ꎬ天麻素的λｍａｘ＝２２０ｎｍꎬ选定２２０ｎｍ作为检测波长ꎮ３.２㊀结果与意义㊀天麻素杂质Ⅰ为天麻素氧化降解的标志性杂质ꎬ天麻素片中通常含有天麻素杂质Ⅰ等化合物ꎬ在现行标准中所采用的２２０ｎｍ的测定波长处亦有相当强度的紫外吸收ꎬ使得现行测定方法专属性不强ꎬ建议改用高效液相色谱法进行分析ꎮ近年已有文献[７－８]显示ꎬ高效液相色谱法测定天麻素含量多采用乙腈－水组合ꎬ其中添加少量酸ꎬ经试验比较ꎬ本方法采用的流动相条件下天麻素出峰快ꎬ色谱行为好ꎮ本文对采集到的３批样品进行了含量均匀度测定ꎬ结果均符合规定ꎬ但数值较大ꎬ接近１５.０的规定限度ꎬ提示存在关注本品质量均一性的需要ꎮ因此ꎬ本文建议增设２５ｍｇ规格的天麻素片含量均匀度项目ꎬ以对天麻素片产品质量进行更好的控制ꎮ参考文献:[１]㊀国家药典委员会.国家药品标准 化学药品地标升国标第十六册[Ｓ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２００３. [２]张涛.天麻提取物(天麻素)抗惊厥及神经保护作用的研究[Ｄ].济南:山东中医药大学ꎬ２００７.[３]顾雅君ꎬ张瑞英ꎬ温秀荣ꎬ等.天麻的化学成分和药理作用[Ｊ].食药用菌ꎬ２０１４ꎬ２２(２):８４－８５.[４]龚其海ꎬ石京山ꎬ杨丹莉ꎬ等.天麻素在中枢神经系统的药理作用及其机制[Ｊ].中国新药与临床杂志ꎬ２０１１ꎬ３０(３):１７６－１７９.[５]王正荣ꎬ罗红淋ꎬ肖静ꎬ等.天麻素对动脉血管顺应性以及血流动力学的影响[Ｊ].生物医学工程学杂志ꎬ１９９４ꎬ１１(３):１９７－２０１.[６]国家药典委员会.中华人民共和国药典２０２０年版(二部)[Ｓ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２０２０:１３７. [７]王颖ꎬ许蕾.高效液相色谱法测定强力定眩片中天麻素的含量[Ｊ].药物生物技术ꎬ２０１８ꎬ２５(３):２４２－２４５. [８]薛朝金ꎬ文平ꎬ向丽霞.高效液相色谱法测定奢香天麻酒中天麻素的含量[Ｊ].北方药学ꎬ２０１８ꎬ１５(５):４－５.。
HPLC测定天麻配方颗粒中天麻素和对羟基苯甲醇的含量
HPLC测定天麻配方颗粒中天麻素和对羟基苯甲醇的含量相继芬;邓辰辰;刘圆;韩蕾;徐桂红;萧伟【摘要】目的:建立天麻配方颗粒中天麻素和对羟基苯甲醇含量测定方法,为其质量控制提供可靠依据.方法:采用高效液相色谱法,Welch Ultimate LP-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸(4:96)为流动相,检测波长为220 nm,流速为0.8 mL·min-1,柱温为30℃.结果:天麻素在49.31～986.2μg·mL-1范围内呈良好线性(r=0.9996),加样回收率平均值为102.68％,RSD值为1.66％;对羟基苯甲醇在7.589～151.78μg·mL-1范围内呈良好线性(r=0.9996),加样回收率平均值为97.88％,RSD值为1.96％.结论:该方法精密度、重复性和分离效果好,分析快速、准确,适用于对天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的定性、定量研究.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2018(020)011【总页数】4页(P1440-1443)【关键词】天麻配方颗粒;天麻素;对羟基苯甲醇;高效液相色谱法【作者】相继芬;邓辰辰;刘圆;韩蕾;徐桂红;萧伟【作者单位】江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港 222001;中药提取精制新技术重点研究室,江苏连云港 222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港 222001;中药提取精制新技术重点研究室,江苏连云港 222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港 222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港 222001;中药提取精制新技术重点研究室,江苏连云港 222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港 222001;中药提取精制新技术重点研究室,江苏连云港 222001【正文语种】中文天麻具有息风止痉、平抑肝阳等功能，用于小儿惊风、癲痫抽搐等[1]，是中国的传统中药，名贵药材[2]。
高效液相色谱法测定天麻素片中天麻素的研究
[作者简介] 田随安(1966-),男,主管技师,主要从事食品卫生理化检验工作。
【化学测定方法】高效液相色谱法测定天麻素片中天麻素的研究田随安,张向兵(河南省疾病预防控制中心,郑州 450016)[摘要] 目的:建立用HP LC法测定天麻素片中天麻素含量的方法。
方法:样品经过处理后,用乙腈、磷酸水洗脱,用二级管阵列检测器的高效液相色谱仪测定。
采用ODS C18分离;流动相为乙腈-水-磷酸(5+95+0105);流量1100m l/m in;提取波长:220n m。
结果:该方法检出限为415ng,相对标准偏差为4154%,回收率为9111%～9616%。
结论:该方法简便、快速、灵敏度高,有良好的稳定性和重现性,适用天麻素片中天麻素含量的测定。
[关键词] 高效液相色谱法;天麻素[中图分类号] O65717+2 [文献标识码] A [文章编号] 1004-8685(2010)03-0493-02A m ethod of HPLC to detem i n e concen t of ga strod i n i n ga strod i n t abletTI AN Sui2an,ZHAN G X iang2bing(Henan Center for D isease Contr ol and Preventi on,Zhengzhou450016,China)[Abstract] O bjecti ve:To set up a method of HP LC t o dete m ine the concent of gastr odin in gastr odin tablets1M ethods:Sa mp les after extracti on were detected by HP LC1The sep rati on was carried out on a C18colu mn1Methanol-water-H3P O4(5+95+0105) were used res pectively as mobile phases in analyzing gastr odin1The fl ow rate was110m l/m in1The decetive wavelength was set at 220n m1Results:The RSD of this method was4154%for gastr odin1Detecti on li m it of this method was415ng1The recoveries range of this method was9111%～9616%1Conclusi on:Thismethod is si m p le,rap id and accurate and can be used t o deter m ine gastr o2 din in gastr odin tablets1[Key words] HP LC;Gastr odin 天麻素(Gastr odin),为中药天麻的一种有效成分,其化学名称为4-羟基苯-β-D吡喃葡萄糖苷。
高效液相色谱法测定天麻药材中天麻苷及天麻苷元含量
高效液相色谱法测定天麻药材中天麻苷及天麻苷元含量摘要】目的：建立高效液相色谱法测定天麻药材中天麻苷及天麻苷元含量。
方法：采用色谱柱为Spursil C18-EP（250mmX4.6mm），以甲醇-0.1%磷酸水（5:95）为流动相，检测波长为220nm，流速1mL/min，柱温为40℃。
结果：采用该色谱，能将天麻苷和天麻苷元进行有效分离，天麻苷和天麻苷元呈良好线性，准确性和重复性均良好。
结论：利用高效液相色谱法测定天麻药材中天麻苷及天麻苷元含量，结果较为准确、可靠，是测量天麻药材质量的好办法。
【关键词】高效液相色谱法；天麻药材；天麻苷；天麻苷元【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）27-0307-02天麻是兰科植物天麻的干燥根茎，又名为赤箭、明天麻、木浦、定风草根等，天麻属于名贵中药，与琼珍灵芝合用能有效治疗头痛失眠[1]。
其根茎可治疗肢体麻木、头晕目眩、小儿惊风等。
服用天麻后可能导致的不良反应有：头晕、胸闷、恶心、皮肤瘙痒等，有部分还会出现全身浮肿以及脱发[2]。
天麻的有效成分为天麻苷以及天麻苷元，常见的测量方法有薄层扫描法、紫外分光光度法、高效液相色谱法[3]。
本文针对高效液相色谱法对天麻药材中的天麻苷以及天麻苷元的测定进行分析，现在汇报如下。
1.仪器与试药1.1 仪器Agilent 1260高效液相色谱仪，由安捷伦科技有限公司生产。
Spursil C18-EP色谱柱，美国迪马公司生产。
AT系列溶剂过滤器、AS3120型超声清洗仪，成都华丰科技有限公司生产。
MS105/0.01mg电子天平，德国赛多利斯公司生产。
CP225D型十万分之一电子天平，徐州安迪太医学仪器设备有限公司生产。
202-2型电热恒温干燥箱，厦门优迈科有限公司生产。
1.2 试药天麻素，中国食药鉴定研究所。
天麻苷元对照品，纯度为99%；甲醇，色谱纯，天津大茂化学试剂厂。
磷酸，分析纯，天津四友试剂公司。
加味天麻胶囊中天麻素的含量测定
加味天麻胶囊中天麻素的含量测定周立，王凌，王敏，叶娉，贾俊成都中医药大学，四川成都（610075）E-mail:zuzututu@摘要:目的 建立测定加味天麻胶囊中天麻素含量的方法。
方法 采用Diamonsil TM色谱柱为C18色谱柱(150×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液（3：97）,检测波长为220nm。
结果 天麻素峰与其他杂质峰分离良好,在0.2166～2.166μg范围内线性关系良好（r =0.9996），平均回收率为97.92% , RSD = 1.25%（n=6）。
结论 此方法操作简便、准确性好,可作为加味天麻胶囊的质量控制方法。
关键词 加味天麻胶囊；天麻素；含量测定加味天麻胶囊是由天麻等十五味中药组成，具有强筋骨，祛风湿，舒筋通络，活血止痛的功效，临床用于风中经络引起的风湿痹痛，肢体拘挛，手足麻木，腰腿酸痛等症。
加味天麻胶囊收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第二册质量标准较简单,无含量测定项[1]。
为此,采用HPLC法对加味天麻胶囊中天麻素进行含量测定,为加味天麻胶囊提供了质量控制方法。
1.仪器、试药仪器：Agilent 1100高效液相色谱仪(Agilent公司)；塞多利斯BP211S型电子分析天平（1/10万）。
试药：天麻素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110807—200205，供含量测定用）; 加味天麻胶囊（市售，批号为050601，050602，050603）；乙腈为色谱纯；水为超纯水；其他试剂为分析纯。
2.方法与结果2.1 色谱条件 色谱条件色谱柱为DiamonsilTM C18色谱柱(150×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液（3：97）；流速：1.0ml/min；检测波长220nm；柱温：30.0℃；进样量10μl (图1) 。
t/min图1 天麻素对照品（A）、加味天麻胶囊样品（B）、阴性样品（C）色谱图2.2 样品溶液的制备2.2.1 供试品溶液的制备取本品内容物2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声提取40分钟，放冷再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液20ml，水浴蒸干，残渣加适量70%甲醇溶解，上中性氧化铝柱（100～200目，5g，内径1.2cm，干法装柱），用50ml70%甲醇洗脱，收集洗脱液，水浴浓缩至近干，残渣加流动相溶解，转移至5ml量瓶中，并用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
天麻素、天麻多糖药理作用研究进展
天麻素、天麻多糖药理作用研究进展一、内容概览天麻素的药理作用：包括对中枢神经系统的抑制作用、对心血管系统的保护作用、对免疫系统的调节作用等。
天麻素与天麻多糖的协同作用：探讨两者联合应用时的药理效果及其可能的机制。
天麻素和天麻多糖的应用前景：展望今后的研究方向及在天麻产业化中的应用。
通过本文的阐述，旨在为天麻素和天麻多糖的进一步研究和开发提供理论依据。
1. 天麻的药用历史与药材来源天麻，又名赤箭、独摇精等，为兰科植物天麻的干燥块茎，具有悠久的药用历史。
早在二千多年前的《神农本草经》中便有记载，将其列为上品，并描述了其主要功效和应用特点。
天麻的药用历史可以追溯到我国汉代，当时主要用于治疗肝风、头痛、眩晕等症状。
《本草纲目》对其药用价值进行了详细阐述，并给出了具体的用药方法。
在明清时期，天麻的应用范围不断扩大，不仅用于治疗头痛、眩晕等症状，还广泛应用于痹症、瘫痪等疾病的治疗。
天麻的药材来源为兰科植物天麻的干燥块茎，主要产于四川、云南、陕西、湖北等地。
根据产地不同，有不同的品种和品质。
以云南为主产地的“云天麻”，个大、肥厚、色黄白、半透明、质坚实、气味浓香为佳品。
其他产地如陕西、四川的天麻则以条肥、色暗、体重、质地坚实、有紫红色斑点者为佳。
天麻的主要成分为天麻素、天麻多糖、氨基酸、微量元素等。
天麻素是天麻的主要活性成分之一，具有镇静、抗惊厥等多种药理作用。
天麻多糖则具有增强免疫力、抗氧化等作用。
这些成分的共同作用使得天麻在治疗多种疾病方面具有显著疗效。
随着现代药理学研究的深入，天麻的药理作用得到了进一步明确。
大量研究表明，天麻在治疗头痛、眩晕、帕金森病、癫痫、面瘫等疾病方面均表现出良好的疗效。
天麻还具有延缓衰老、改善学习记忆等作用。
天麻作为一种具有广泛应用历史的中药材，在药用领域发挥着重要作用。
通过对天麻的药理作用及其机制的深入研究，可以为临床应用提供科学依据，并推动天麻产业的进一步发展。
2. 天麻素及天麻多糖的发现与研究天麻，一种在中国有着悠久应用历史的中药材，因具有独特的镇静和止痛效果而被广泛应用。
高效液相色谱法测定天麻素注射液含量及有关物质
高效液相色谱法测定天麻素注射液含量及有关物质李述智【摘要】建立了高效液相色谱法测定天麻素注射液的含量及有关物质。
色谱柱为依利特ODS C18柱（250 mm ×4.6 mm，5μm）；以水-乙腈-磷酸（97.4：2.5：0.1）为流动相；检测波长为220 nm，流速为1.0 mL/min。
结果表明：天麻素含量浓度在0.004～0.40 mg/min范围内与峰面积具有良好的线性关系（ r2＝0.9999），平均回收率为100.24％， RSD为0.13％。
该方法灵敏，精密度高，结果准确可靠，可用于天麻素注射液的质量控制。
%The HPLC method for determination of gastrodin injection and its related substances was established.The method was performed with C18 (250 ×4.6 mm, 5 μm) as the column.The mobile phase was consisted of water -acetonitrile-phosphoric acid (97.4:2.5:0.1) with a flow rate at 0.1 ml/min.The detection wavelength was 220 nm.The calibration cure of grastrodin was linear in the concentration range of 0.004 ~0.40 mg/mL ( r2 =0.9999 ).The average recovery rate was 100.24%and RDS was 0.13%.This method was sensitive , accurate and specific , which can be used for the quality control of the products.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2014(000)015【总页数】4页(P158-161)【关键词】高效液相色谱法;天麻素注射液;含量测定;有关物质【作者】李述智【作者单位】海南中化联合制药工业股份有限公司，海南海口 570216【正文语种】中文【中图分类】O65天麻素注射液(Gastrodin Injection)为天麻素的灭菌水溶液，有效成分为天麻素，其化学结构为4－羟甲基苯甲醇－β－D 吡喃葡萄糖苷半水合物。
一种化学合成天麻素的方法[发明专利]
![一种化学合成天麻素的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/b022686276232f60ddccda38376baf1ffc4fe32e.png)
(10)申请公布号 CN 102977161 A(43)申请公布日 2013.03.20C N 102977161 A*CN102977161A*(21)申请号 201210548092.8(22)申请日 2012.12.17C07H 15/203(2006.01)C07H 1/00(2006.01)(71)申请人青岛农业大学地址266109 山东省青岛市城阳区长城路700号青岛农业大学化学与药学院(72)发明人李玉文 马翠丽(54)发明名称一种化学合成天麻素的方法(57)摘要本发明公开了一种天麻素的化学合成方法，其步骤为：分子筛存在下，由路易斯酸催化五乙酰-b-D-葡萄糖和对甲酚在有机溶剂中进行糖苷化反应生成4-甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷，然后4-甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷与N-卤代丁二酰亚胺在引发剂的作用下得到4-卤甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷，随后4-卤甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷与冰醋酸和叔胺的混合溶液反应得到4-乙酰氧基甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷，最后4-乙酰氧基甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷在碱性条件下脱去乙酰基保护基得到天麻素。
本发明方法与传统方法相比，原料易得，反应时间短，各步反应产物均可通过重结晶制备，制备工艺简单，更适合于工业化生产天麻素。
(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书9页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 9 页1/1页1.一种化学合成天麻素的方法，其步骤如下：1）在分子筛存在下，由路易斯酸催化五乙酰-b-D-葡萄糖和对甲酚在有机溶剂中，于10-30 ℃下进行糖苷化反应0.5-5.0小时，生成4-甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷，五乙酰-b-D-葡萄糖的摩尔浓度为0.1-1.0M, 对甲酚和五乙酰-b-D-葡萄糖的摩尔比为1.0-4.0，分子筛用量为五乙酰-b-D-葡萄糖重量的0.5-3.0倍，路易斯酸和五乙酰-b-D-葡萄糖的摩尔比为0.5-3.0，所说的路易斯酸是三氟化硼乙醚或四氯化锡；2）将步骤1）得到的4-甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷与N-卤代丁二酰亚胺在引发剂的作用下在有机溶剂中，于40-110℃下进行自由基取代反应得到4-卤代甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷；3）将步骤2）得到的4-卤代甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷与冰醋酸和叔胺的混合溶液，在60-120℃下反应得到4-乙酰氧基甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷；4）将步骤3）得到的4-乙-酰氧基甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷加入到NaOCH 3的甲醇溶液中，4-乙-酰氧基甲基苯基-2,3,4,6-O -四乙酰基-b-D-吡喃葡萄糖苷的摩尔浓度为0.05-0.5M ，室温下反应至少5小时，脱去乙酰基得到天麻素。
天麻及其制剂中天麻素含量测定方法研究概述
天麻及其制剂中天麻素含量测定方法研究概述96?ChineseJourna1ofinformationonTCMApr.2006Vo1.13No.4天麻及其制剂中天麻素含量测定方法研究概述苏健,王宝琴,马腾,韩敏彩.(1.中国药品生物制品检定所,北京100050:2.河北省食品药品监督管理局,河北石家庄050051;3.石家庄神威药业股份有限公司,河北石家庄051430)关键词:天麻;天麻素;含量测定;综述中图分类号:R284.1文献标识码:D文章编号:1005.5304(2006)04—0096.03天麻为兰科植物天麻GastrodiaelataB1.的干燥块茎.0.2mol/L硫酸铵(5:95),流速:1mL/min,检测波长270nm.镇脑宁胶囊,天鸽口服液,益脑宁颗粒,天麻蜂王浆,头痛供试品溶液的制各:精密吸取天鸽口服液5mL置l0mL容量定口服液,天麻杜仲胶囊等传统中成药与新药中均以天麻为瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得.测得天鸽口服液中天麻素主药天麻中主要含有天麻素(Gastrodin),对羟基苄醇(P一含量为0.66～0.77mg/mL,回收率为98.4%phdroxybenzyalcoho1),对羟基苯甲醛(P-hydroxybenzaldehyde),王氏等测定了天麻及益脑灵颗粒中的天麻素含量.采香荚兰醇(Vinillylalcoho1),香荚兰醛(V ani11ine)等用色谱柱:YWG—C.,流动相:甲醇一水(3:97),流速:1mL/min,有效成分,天麻素为其主要有效成分之一.天麻具有平肝熄风检测波长:221llm.天麻供试品溶液的制备:精密称取天麻止痉等功能,用于头痛眩晕,肢体麻木,IJ,JL惊风,癫痫抽搐,粉2.0g,置索氏提取器中,加40mL甲醇浸泡1h后,再加甲破伤风等20世纪50年代以来,我国医药工作者对天麻的化醇l0IIILJ,80℃水浴上提取1h,放冷,提取液转入100m【.容量学成分和药理作用做了系统的研究,金氏等和胡氏等分瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,精取50mL,回收至干,用甲醇5IIlL别报道了天麻的抗惊厥作用,镇静催眠作用,镇痛作用,促溶解,即得.益脑灵颗粒供试品溶液的制备:称取本品4.0g,智抗衰老作用,对心血管系统的作用(对心肌细胞搏动频率加置100mL具塞三角瓶中,精加无水乙醇一异丙醇(1:1)溶液快作用,对血管抗缺血缺氧作用),抗炎,增加机体免疫作用,50mL,称重,超声波提取2次,滤过,精取续溶液25mL,蒸干,抗放射作用等.《中国药典》(一部)2005版规定,天麻中天麻残渣加80%甲醇使溶解,并上样于中性氧化铝柱,干法装柱,用素含量不得少于0.20%,文献报道其含量低的为0.0032%,含80%甲醇洗脱,洗脱液蒸干,用流动相5IIlL溶解,即得.测得含量高的可达1.112%.笔者现将天麻及其制剂中天麻素的含量量:天麻中天麻素的含量为0.15%~0.46%,益脑灵颗粒中天麻测定方法综述如下.素含量为0.148~0.167mg/g.益脑灵颗粒回收率为98.22%.1高效液相色谱法彭氏等采用色谱柱YWG—cm流动相:甲醇一水一磷酸高效液相色谱法具有较灵敏,准确,快速和用量少的优(11.9:88:O.1),检测波长:222nm,流速;1.OmL/min.供点.苏氏等采用色谱柱:YWG—CI8,流动相:0.05mol/L磷酸试品溶液的制备:精密称定补脑胶囊内容物0.5g,用甲醇超二氢钠一乙腈(97:3),用磷酸调节pH=3~4,检测波长:222nm,声波提取,制法与文献[8]基本相同.测得补脑胶囊中天麻素流速:1.2mL/min.供试品溶液的制备:精密称取镇脑宁胶含量为1.66～2.688mg/粒,回收率为99.2%.囊内容物6g,置索氏提取器内,用乙醚回流提取至无色,弃掉刘氏等对天麻超微粉碎和普通粉碎进行了对比实验,乙醚,将滤纸筒内容物挥干,放入250mL锥形瓶内,加水60mL,采用色谱柱YWG-CI8,流动相:甲醇一磷酸盐溶液(0.1mo]/L置沸水浴上回流提取,取出,放冷,加95%乙醇100mL,充分搅磷酸二氢钾溶液加0.1mol/L磷酸氢二钠溶液等量混合)一水拌,放置15min,抽滤,滤液蒸干,加水1OmL使溶解,用水饱(1.5:3:955),检测波长:270nm.供试品溶液的制备:分和的正丁醇(20,20,20mL)萃取,用10mL25%浓氨洗涤,弃别称取天麻超微粉和普通粉0.5g,分别置10mL容量瓶中,加掉浓氨液,分取正丁醇液蒸干,用10mL70%乙醇溶解,通过活甲醇5mL,超声波提取2次,定容滤过,即得.测定天麻素含性碳一中性氧化铝柱(0.1:1),用50mL70%乙醇洗脱,洗脱液量:普通粉为0.185%~0.206%,超微粉为0.358%~0.380%.蒸干,用2mL甲醇溶解后,用0.45pm微孔滤膜过滤,即得.'赵氏等"采用色谱柱:ShimpackCLCODS,流动相:乙进样1OL,以外标法计算,结果镇脑宁胶囊中含天麻素腈一0.03mol/L磷酸(3.5:96.5),检测波长:220nm,流速:0.0032%(n-4),加样回收率为98.8%.1.0mL/min.供试品溶液的制各:精取金脑金口服液1.0mL,朴氏等采用的色谱条件与文献[5]基本一致.供试品溶直接加在中性氧化铝柱上洗脱,制法与文献[8]基本一致.进样液的制各:取天麻水煎剂适量,用甲醇提取后,先用石油醚萃20L,测得金脑金口服液中天麻素含量13.33~13.56mg/mL,取,除掉脂溶性成分,继而用正丁醇萃取可溶性天麻素及其它回收率为99.22%.极性较大部分,通过大孔吸附树脂柱分离纯化,排除其它水溶罗氏等"采用色谱柱YWG—C流动相:水,测定波长为性成分的干扰.测得天麻素含量为65.77mg/L,加样加收率220nm,脑血舒通丸提取方法用甲醇超声波提取.测得脑血舒为99.8%.通丸中天麻素含量为0.2%～0.24%,回收率为101.5%.吴氏等采用色谱柱:shimpackCLCODS,流动相:甲醇一王氏等m采用色谱柱:Phen0珊enexPRODIGYODS,流动2006年4月第13卷第4期中国中医药信息杂志?97?相:甲醇～水一冰醋酸(2:97:1),检测波长:225nm.样品熄风通脉颗粒剂用甲醇超声波提取.测得熄风通脉颗粒剂中天麻素含量0.207%~0.235%,回收率98.7%.高氏等"采用色谱柱:shim-packCLCODS,流动相:甲醇磷酸盐溶液(含磷酸二氢钾和磷酸氢二钠各0.1mol/L)～水(1.5:3:95.5),检测波长:260nm.供试品溶液的制备:①药典法:精取天麻饮片粉末0.5g,置10mL量瓶中,精密加入甲醇5mL,超声波处理30min,静止24h,振摇后再超声15min,取上清液即得;②部颁法:第1次超声波处理1h,第2次超声波处理2h,其它方法相同.测得含量:药典法天麻素含量为0.0782%～0.228%,部颁法天麻素含量为0.123%～0.265%.程氏"以天麻素含量为指标考察天麻的质量.采用色谱柱YWG-80填料,检测波长为270nm,流动相:氯仿一异辛烷一甲醇(7:4:2),测得天麻素含量为0.14%~0.97%,回收率为105.1%.另用反相高效液相色谱法测定天麻素及苷元的含量,采用色谱柱Lichrosorb—kp一8填充料,流动相:25%甲醇一水,测得天麻素含量0.1618%~0.7634%.文献[17]采用色谱柱:自装Lichros—orbrp-8反相柱,流动相:25%甲醇水(含0.O1mol/LKaHPO);正相法流动相:氧仿一异辛烷一甲醇(6: 7:1.5),用甲醇回流提取,测得天麻素含量:反相法0.59%～0.80%,正相法0.43%～l_12%.阮氏等"采用色谱柱:PartiSilODS,流动相:甲醇一水(9:1),检测波长:225nm.供试品溶液的制备:取天麻样品50g,置索氏提取器中,加甲醇回流提取,提取液浓缩,用200mL 水混悬,水液用乙醚,正丁醇相继萃取,弃掉乙醚液,正丁醇提取液减压蒸干.正丁醇提取物用甲醇溶解,通过Sep-pakRp一18(waters)预柱,反复用甲醇清洗预柱,合并滤液,转移至5mL容量瓶内,配成1～4mg/mL浓度的样品.测得天麻素含量0.042%~1.658%,回收率在94%～104%之间.吴氏等与叶氏等均采用C18色谱柱,流动相采用乙腈一水(3:97)或(5:95),检测波长均在220~225nm之间.供试品溶液的制备:吴氏等采用天麻粉末,用乙醇回流提取;叶氏等采用天菊脑胺胶囊内容物,用甲醇超声波提取.文献[19]测定l2省天麻中天麻素含量为0.34%～1.145%,文献[20]测得天菊脑胺1O批样品天麻素含量为0.11～O.24mg/粒,回收率均在97%~98%之间.谢氏等"采用色谱柱shim-packCLC-CN,流动相:乙腈一水(10:90),检测波长270Jim.供试品溶液的制备:精密量取天眩清注射液适量,用流动相配成0.5g/L,即得又取天麻素片及胶囊适量,研细,精密称定,加流动相超声波提取.测得天麻素含量标示量98.64%101.41%之间,天眩清注射液中天麻素含量1O1%～102%,加样回收率天麻素片为99.40%. 莫氏等采用NovapaKC反相柱,流动相,检测波长与文献[21]基本一致.供试品溶液制各:精密称取天麻粉0.5g与天麻胶囊2O粒,置25mL量瓶中,用甲醇1OmL超声波2次, 共浸渍24h,残渣加甲醇溶解,置25mL量瓶中即得.测得结果:天麻中含天麻素4.29～5.47mg/g,全天麻胶囊中含天麻素1.3041.616mg/粒,加样回收率98.28%.2薄层扫描法熊氏等采用0.2%CMC-Na硅胶G板,展开剂:醋酸乙酯甲醇一水(9:1:0.2),显色N-5%磷钼酸乙醇溶液,105℃烘约6min,检测波长:.-600rim,单波长线性扫描.供试品溶液的制备:取天麻杜仲胶囊20粒,精取内容物4g,于25mL容量瓶内,精加甲醇10mL摇匀,超声波1h后,静置过液,再超声波2h,取上清液即得.测得天麻素含量为0.13%--0.14%,加样回收率为96.5%.申氏等采用预制硅胶G薄层板,展开剂:氯仿甲醇一乙酸(6:2:0.15),?显色剂为10%磷钼酸乙醇溶液,105℃烘干5min.扫描条件:-540nm,=475rim.供试品溶液的制备:精密称取天芎头痛宁胶囊细粉约3.0g,置三角瓶中,加100mL乙醇回流6h,放冷,滤过,取续滤液50mL,蒸干,残渣加水饱和正丁醇25mL溶解,并转移至分液漏斗中,用正丁醇饱和的水溶液提取4次(20,20,15,15mL),合并提取液,蒸干,残渣加80%乙醇溶解,加氧化镁3g,拌匀,干燥,在氧化镁中加无水乙醇40mL,超声波25miri后,用G漏斗抽滤,再用l5mL无水乙醇洗涤数次,合并滤液和洗涤液,回收无水乙醇至干,残渣用无水乙醇定容至2mL,用外标一点法计算, 测得天麻素含量为0.0941%~0.117%,回收率为99.67%.周氏等采用0.I%CMC—Na薄层板,展开剂:氯仿一甲醇(4:1),显色剂与扫描条件与文献[24]相同.供试品溶液制备:取青山胶囊内容物0.8g,精密称定,用水饱和的正丁醇25mL溶解,并用水饱和的正丁醇萃取4次(20,10,10,5mL),合并萃取液,蒸干,残渣用无水乙醇2mL溶解,摇匀,即得.测得天麻素含量为1.877～1.942mg/g,回收率为99.00%.3二阶导数光谱法袁氏等采用二阶导数吸收光谱,测定头痛定口服液中天麻素含量.供试品溶液的制备:精密吸取头痛定口服液3mL, 置10mL量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液5mL, 置50mL量瓶中,用水稀释至刻度,即得.测得4批样品,天麻素含量为4.o9～4.87mg/mL,加样回收率为100.4%.4讨论4.1溶剂的选择天麻素为水溶性小分子,易溶于水及极性溶剂中因此,供试品溶液的制备用极性溶剂提取较多.文献[5]中因样品中含有猪脑粉,牛角粉和蛋白质,油性等物质,根据天麻素的性质,用水提醇沉法,将油性和蛋白质除去,滤过后,水和醇中保留了天麻素,再用浓氨洗涤正丁醇层,天麻素无损失,再通过中性氧化铝一活性碳定量小柱,样品得到了很好的分离和纯化.文献[12]提取溶媒的选择,实验中分别用甲醇,乙醇,水,以相同方法进行提取,结果发现水提取虽然效率高,但因天麻素易水解,且杂质峰较多,干扰分离;乙醇的提取效率仅为甲醇的1/4,而甲醇提取不仅完全,且杂质较少,易于完全分离,因此,选择甲醇为提取溶剂.4.2流动相的选择采用极性溶剂,水溶性磷酸盐水溶液和缓冲溶液作为流98?ChineseJourna1ofInformatiOffonTCMApr.2006V o1.13No.4动相的较多.文献[5]曾试用水一甲醇(90:10),磷酸盐水溶液一甲醇(9O:1O)为流动相,但峰型不理想.后用磷酸二氢钠一乙膪(97:3),磷酸调pH=3~4,峰型较好.文献[13]发现,以流动相甲醇一水一冰醋酸(2:97:1)能使样品中信号很好的分离,天麻素保留时间t,=16.5min.4.3文献方法与药典法的比较文献[8]的方法与药典法比较:①供试品溶液的制各,药典法超声静止时间长(24h),文献方法用索氏提取时间短(3h),可当日完成全部测定.②流动相与柱寿命,药典法:甲醇比例低(1.5%),柱寿命短(重复进样<20次):文献方法:甲醇比例偏高,柱寿命长(重复进样>36次).③检测波长,药典法为270nm, 吸收度低,检测灵敏度低;文献方法为221nm.吸收度强,检测灵敏度高.文献方法优于药典法,故采用之.4.4药典法与部颁法的比较文献[14]药典法与部颁法测定条件一致,但超声波提取时间不一致,结果测得天麻素的含量有显着的差异.药典法超声波处理30min,静置24h,再超声波15min部颁法第1次超声波处理lh,悌2次超声波处理2h,测得同一批样品天麻素含量,药典法为0.106%,部颁法为0.156%.可见,部颁法提取时间短,含量高,提取较完全,所以部颁法优于药典法.4.5天麻不同粉碎方法的对比文献[1O]比较天麻细胞级微粉碎和普通粉碎,用显微镜观察和HPLC法测定两者的天麻素含量及其他成分含量.天麻分别制成超微粉和普通粉,测得其天麻素含量分别为0.318%~0.35%,0.139%~0.244%.可见,超微粉比普通粉含量高得多.证明天麻经细胞级微粉碎后的超微粉,可以缩短提取时间,提高活性成分提取率.参考文献:[1]陈德昌,鲁静,王宝琴.中药化学对照品工作手册[M].北京:中国医药科技出版社,2000.[2]郑占虎,董泽宏,余靖,等.中药现代研究与应用[M].第一卷.北京:学苑出版社,1997.[3]金文姗,田德蔷.天麻药理化学研究[J].中药研究与信息.2000,2(6) 2l_[4]胡一冰,崔佳,韩笑.等.中药天麻研究[J],贵阳中医学院学报, 2001,23(4):852.[5]苏健,王宝琴.镇脑宁胶素天麻素含量的高效液相色谱法测定[J]. 中国中药杂志,1996,21(5):284-285.[61朴惠善.高效液相色谱法测定天麻中天麻素的含量[J].延边大学医学院学报,1998,21(4);234—235.[7]吴纯洁,李丹,雷佩林,等.天鸽口服液质量标准的研究[J].中成药, 1996.18(2):10—12.[8]王跃生,李计萍李淑芝,等.高效液相色谱法测定天麻及益脑灵颗粒中天麻素含量的方法学研究[J].中国中药杂志.1998,23(9):541—543.[9]彭家谋,何明三.陈利峰.补脑胶囊质量标准的研究[J].中医药学刊, 2002,50(4):432--433.[10]刘智,王丽.天麻细胞级超微粉碎和普通粉碎质量标准的对比实验研究[J].中国现代应用药学杂志,2002,19(6):474--475,[11]赵永成,罗大云.金脑金口服液质量标准研究[J].中成药.2001,23(5):336—338.[12]罗燕燕,运梅,朱青,等.HPLC测定脑血舒通丸中天麻素的含量[J]中国药学杂志,1994,29(1):684--685+[13]王英峰,张建军,茹凯,等.高效液相色谱法测定熄风通脉颗粒中天麻素含量[J].中国中药杂志,2000,25(5):282—283.[14]高国英,魏晓舒.超声波对天麻饮片含量测定的影响[J].江苏药学与临床研究,2000,8(1):61--62.[15]程式之.天麻质量标准的研究I:用HPLC以天麻素为指标考察天麻的含量[J].药物分析杂志,1984,4(6):344—347.[16]程式之,粱翠资,叶阳明.天麻质量标准的研究II:用反相高效液相色谱法测定天麻素及其甙元的含量[J].药物分析杂志,1985,5(6): 336——338.[17]程式之,郝小燕.谭宁华.HPLc法测定天麻中天麻索含量[J].贵州药讯,1985,(1):1—5.[18]阮德嬉,杨崇仁,浦湘渝,等.天麻及其近缘植物酚性成分的高效液相色谱定量分析[J].云南植物研究,1988,10(2):233—237.[19]吴春敏,陈海滨.天麻中天麻素含量测定方法的研究[J].中国中药杂志,2004,29(17):157.[2O]叶利明,卢懿,侯世样.RP—HPLc测定天菊脑胺胶囊中天麻素的含量[J].中成药,2004,26(11):965.[21]谢笑天,郑萍,徐树光,等.HPLC法测定天眩清注射液中天麻素的含量[J].中国新药杂志,2002,11(2):146.[22]莫志江,莫可元.高效液相色谱法测定天麻及全天麻胶囊中天麻素的含量[J].中国药业,2002.11(10):49.[23]熊慧林,薛捷.薄层扫描法测定天麻杜仲胶囊中天麻素的含量[J]. 中国民族民间医药杂志,1998,(32);38～39.[24]申玉华.董文慧,郑健,等.双波长薄层扫描法测定天芎头痛宁胶囊中天麻素的含量[J].中药新药与临床药理,1995,6(3):33--35.[25]周本宏.邹瑛,罗顺德,等.青山胶囊的制各与质量标准的研究[J]. 中国药师,2003,6(11);710—712.[26]袁曦,黄品芳,洪涛,等.头痛定口服液的研制[J].中成药,1996,18(5):3—5.(收稿日期:2004-08-26)(修回日期:2005-10-26,编辑:陈静)韩国开发出可同时诊断12种癌症的技术韩国科学技术院与延世大学合作研究后发现,12种癌细胞中都有一种名叫"NeoNoV o"的突变蛋白质.他们按照这一原理开发出了新的癌症诊断仪.只要用这种诊断仪检测出"NeoNoY o"突变蛋白质,便可确认癌症的存在.这种诊断仪可以诊断胃癌,肝癌,乳腺癌,胰腺癌,肾癌和肠癌等12种癌症,诊断准确率达到7O%～100%.(本刊通讯员)。
HPLC测定天麻祛风补片中天麻素、哈巴苷和梓醇的含量
收稿日期：2020-07-09作者简介：杜健磊，硕士，主管药师，E-mail:********************HPLC 测定天麻祛风补片中天麻素、哈巴苷和梓醇的含量杜健磊1, 张彦旭2,王俊苹1（1. 驻马店市中心医院 药学部，河南 驻马店 463000；2. 驻马店市第二人民医院 药学部，河南 驻马店463000）摘 要：目的 建立测定天麻祛风补片中天麻素、哈巴苷和梓醇含量的高效液相色谱（HPLC ）方法。
方法 色谱柱为Waters Spherisorb ODS-1（250 mm ×4.6 mm ，5 µm ），流动相为乙腈-0.1 %磷酸溶液（梯度洗脱），流速为1.0 ml/min ，检测波长为216 nm ，柱温为25 ℃。
结果 梓醇、天麻素和哈巴苷线性范围分别为0.996~49.8 µg/ml 、0.484~24.2 µg/ml 和0.581~29.1 µg/ml ；平均回收率分别为100.09 %，100.42 % 和100.50 %，RSD 分别为2.01 %，2.37 %和1.63 %。
结论 此方法操作简单、重复性好、检测结果准确，可用于天麻祛风补片的质量控制。
关键词：高效液相色谱；天麻祛风补片；天麻素；哈巴苷；梓醇；含量测定 中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-979X （2021）02-0153-04DOI ：10.3969/j.issn.1672-979X.2021.02.013Determination of Gastrodin, Harpagide and Catalpol in Tianma Qufengbu Tablets by HPLCDU Jian-lei 1, ZHANG Yan-xu 2, WANG Jun-ping 1(1. Pharmacy Department , Zhumadian Central Hospital , Zhumadian 463000, China ; 2. The Second People ’s Hospitalof Zhumadian City , Zhumadian 463000, China )Abstract: Objective To establish an HPLC method for the determination of gastrodin, harpagide and catalpol in Tianma Qufengbu Tablets. Methods The chromatographic column was Waters Spherisorb ODS-1 (250 mm ×4.6 mm, 5 µm), using acetonitrile-0.1 % phosphoric acid solution at a flow rate of 1.0 ml/min as mobile phase for gradient elution. The detection wavelength was 216 nm, and the column temperature was 25 ℃. Results The linear ranges of catalpol, gastrodin and harpagide were 0.996-49.8 μg/ml, 0.484-24.2 μg/ml and 0.581-29.1 μg/ml, respectively. The average recoveries were 100.09 %, 100.42 % and 100.50 %, with RSD s of 2.01 %, 2.37 % and 1.63 %, respectively. Conclusion The method is simple, repeatable and accurate, and can be used for quality control of Tianma Qufengbu Tablets.Key Words: HPLC; Tianma Qufengbu Tablets; gastrodin; harpagide; catalpol; determination天麻祛风补片具有温肾养肝、祛风止痛等功效，临床常用于治疗肝肾亏损、风湿入络所致的痹病，如头晕耳鸣、关节疼痛、腰膝痠软、畏寒肢冷、手足麻木等症的治疗[1-4]。
天麻药材高效液相色谱指纹图谱分析
天麻药材高效液相色谱指纹图谱分析发表时间：2015-04-30T10:19:24.470Z 来源：《医药前沿》2014年第35期供稿作者：赵瑞[导读] 天麻是草本植物的块茎，其味比较甘甜，具有息风和平肝的功效，是中药的一种，在我国的分布范围较为广泛。
赵瑞（六安市中医院药剂科安徽六安 237000）【摘要】目的通过对天麻药材的高效液相色谱指纹图谱进行研究，进一步对天麻的质量进行有效控制。
方法采用高效液相色谱法，以甲醇作为流动相，色谱柱的柱温保持在30℃，流速设定在1毫升每分钟，色谱柱的检测过程中波长为21纳米。
结果产地不同的天麻有着相似的成分和种类，但是不同的是其相对含量和绝对含量有所不同。
天麻样品的相关系数和夹角的余弦系数与其产地以及采收时间有着一定的联系。
结论高效液相色谱指纹图谱分析法能够为天麻药材质量的控制提供鉴别依据，值得深层次挖掘研究。
【关键词】天麻药材高效液相色谱指纹图谱分析【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）35-0027-02 天麻是草本植物的块茎，其味比较甘甜，具有息风和平肝的功效，是中药的一种，在我国的分布范围较为广泛。
随着中药现代化的发展，对其质量的控制已经成为现代化进程中的主要环节，由于中药具有整体性和多组分的特点，虽然单一指标的测定较为重要，但是还需要对其复杂化学成分中的综合性进行测定，需要通过几种成分全面评价中药的有效性和专属性。
指纹图谱分析法作为中草药提取物质量控制的有效方法被很多国家认可，在国际使用方面也有一定的成果，我们需要结合国际实践建立起具有中药特色的指纹图谱质量控制体系。
1 资料与方法1.1 一般资料在对天麻的指纹图谱进行分析的过程中需要用到的仪器有高效液相色谱仪（Agilengt 1200），包括二级管阵列紫外检测器、自动进样系统、色谱采集系统等。
使用到的试剂有甲醇、乙醇、醋酸等，还有一些试剂是分析纯，用到的水为双蒸水。
复方天麻片中天麻素含量测定方法提高研究
复方天麻片中天麻素含量测定方法提高研究郭军文;李振华【摘要】目的:建立快速高分离度液相色谱同时测定天麻素含量的方法.方法:以Doamonsil@C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),乙腈-0.05％磷酸(2:98)为流动相;进样10μL;检测波长为220nm,测定天麻素含量.结果:测定更加准确,天麻素在0.1564-3.1280μg范围内呈良好线性关系,回收率达到100.7％,RSD为0.48％.以波长220nm作为检测波长,比波长270nm测定所得天麻素峰面积大,出峰干挠小,出峰时间快.结论:本方法可在较短的时间内快速得到准确的结果,有效控制复方天麻片的质量.【期刊名称】《江西中医药》【年(卷),期】2013(000)005【总页数】3页(P60-62)【关键词】复方天麻片;天麻素;高效液相色谱法【作者】郭军文;李振华【作者单位】江西南昌桑海制药厂南昌330115;江西南昌桑海制药厂南昌330115【正文语种】中文【中图分类】R284.1复方天麻片系根据部颁中药标准第12册收载的复方天麻颗粒经剂型改革而成的中药片剂，通过改变剂型，将提供一种服用方便、安全、有效的中药安神止痛新药。
功能健脑安神。
用于失眠健忘，神经衰弱，以及高血压引起的头昏头痛［1－3］。
我厂复方天麻片品种原国家食品药品监督管理局标准(试行)中，其含量测定项下的色谱条件采用甲醇－磷酸盐溶液(0.1mol/L磷酸二氢钾溶液和0.1mol/L磷酸氢二钠等量混合)－水梯度洗脱方式，检测波长为270nm［4］;由于检测波长270nm并非天麻素的最大吸收波长，测定时所得天麻素峰面积偏小，有时还不易出峰，色谱条件不易掌握;另外，由于每次梯度洗脱耗时长达45分钟之久，不符合准确、快速、经济的原则。
为此，对原试行标准的含量测定项进行了适当的修订，以乙腈－0.05%磷酸(2∶98)为流动相，选择了天麻素的最大吸收波长220nm作为检测波长，测定所得天麻素峰面积较大，色谱分离时间也缩短至20分钟之内，方法简便迅速，分离效果好，结果准确可靠。
HPLC法测定雪峰天麻不同部位中天麻素和对羟基苯甲醇含量
HPLC法测定雪峰天麻不同部位中天麻素和对羟基苯甲醇含量黄杰华;高佳乐;邹娟;陈三春;伍贤进【摘要】为了探讨雪峰天麻不同部位中的天麻素和对羟基苯甲醇含量差异,采用高效液相色谱法进行其含量测定与分析.研究结果表明:雪峰天麻不同部位中的天麻素含量表现为块茎(2.92 mg/g)>杆(0.448 mg/g)>种子(0.263 mg/g)>叶(0.118 mg/g)>蒴果壳(未检出);其对羟基苯甲醇的含量表现为块茎(1.485 mg/g)>种子(0.123 mg/g),天麻杆、天麻叶和天麻蒴果壳中均未检出.可见,天麻素和对羟基苯甲醇在块茎中含量较高.【期刊名称】《怀化学院学报》【年(卷),期】2019(038)005【总页数】5页(P6-10)【关键词】天麻;天麻素;对羟基苯甲醇;高效液相色谱法【作者】黄杰华;高佳乐;邹娟;陈三春;伍贤进【作者单位】怀化学院生物与食品工程学院,湖南怀化 418008;怀化学院生物与食品工程学院,湖南怀化 418008;怀化学院生物与食品工程学院,湖南怀化 418008;民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室,湖南怀化 418008;湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室,湖南怀化 418008;湖南省博世康中医药有限公司,湖南怀化 418000;怀化学院生物与食品工程学院,湖南怀化 418008;民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室,湖南怀化 418008;湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室,湖南怀化 418008【正文语种】中文【中图分类】R932天麻Gastrodia elata Bl.为兰科腐生植物，有治疗偏头痛、抗抑郁、镇静催眠和抗炎等作用，属于中国的名贵药材，天麻素和对羟基苯甲醇（HBA）为天麻中的主要药用活性成分[1].Chen等[2]研究证明天麻素和HBA通过降低单胺代谢和调节细胞骨架重塑相关蛋白的表达，在大鼠体内显示出具有潜在的抗抑郁作用，可作为抑郁症的预防剂.天麻素和HBA处理可诱导GRP78的表达，对β-淀粉样蛋白诱导的细胞死亡的起保护作用[3].Lim等[4]报道对羟基苯甲醇通过对NO的下调作用实现抗血管生成、抗炎和抗伤害的作用.Luo等[5]发现HBA有改善脑缺血损伤的治疗潜力.Zhu等[6]研究表明HBA是一种潜在的抗失眠药物，其衍生物可逆转氯苯丙氨酸（PCPA）、氟马西尼和硫氨基脲（Thiothemicarbazide，TSC）引起的失眠.图1 天麻素（a）和对羟基苯甲醇（b）的结构图[1]雪峰天麻栽培于雪峰山的高山腹地，属湖南博世康中医药股份有限公司培育和驯化的品种，同时也是湖南区域特色产品[7].本研究采用高效液相色谱法（HPLC）测定了雪峰天麻的块茎、杆、叶（为退化的残留在茎上的鳞片叶）等不同部位中天麻素和对羟基苯甲醇的含量，为进一步了解天麻不同组织器官中天麻苷类含量的变化提供理论依据.1 仪器与材料高效液相色谱仪（Waters 1525泵，检测器为Waters 2489，数据处理系统为Breeze 2），色谱纯乙腈，超纯水.对照品天麻素（批号B21243）和对羟基苯甲醇（批号B20326）购自上海叶源生物科技有限公司，含量均＞98.0%.实验材料为雪峰天麻，于2017年11月，采自湖南博世康中医药有限公司的雪峰山种植基地，经培育后，取天麻的块茎、杆、叶、蒴果壳和种子共5个部位样品进行实验.2 方法与结果2.1 色谱条件参考相继芬等报道的方法[8]，色谱柱：Diamonsil C18柱（规格为250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：乙腈 -0.1%磷酸溶液（4∶96，v/v），流速为 1.0mL/min，检测波长为220 nm，柱温为30℃.天麻素和对羟基苯甲醇的保留时间分别为8.7 min和17.8 min，典型色谱图见图2.图2 标准品天麻素（1号峰）和对羟基苯甲醇（2号峰）的HPLC图2.2 对照品溶液的制备精密称取天麻素和对羟基苯甲醇（HBA）对照品，放入同一10 mL的量瓶中，用乙腈-0.1%磷酸溶液（4∶96，v/v）溶解至刻度，得到混合对照品母液（含天麻素440 μg/mL 和HBA 200 μg/mL）.精密移取混合对照品母液1.0 mL，至10 mL量瓶中，加乙腈-0.1%磷酸溶液稀释至刻度并摇匀，得到对照品溶液.2.3 供试品溶液制备将待测天麻不同部位的样品干燥至恒重，精密称取粉碎天麻样品2.5 g，至具塞锥形瓶中，加入25 mL乙腈-0.1%磷酸溶液，称定质量，40℃超声（200 W、40 kHz）30 min，冷却至室温，用乙腈-0.1%磷酸溶液补足减失的质量，取上清液1.0 mL至10 mL容量瓶中，加流动相溶液定容，用0.45 μm微孔有机滤膜滤过，取滤液.2.4 方法学考察2.4.1 线性关系、检测限（LOD）和定量限（LOQ）考察稀释对照品母液，将天麻素和HBA分别配置成不同浓度 0.22～440 μg/mL 和0.1～200 μg/mL 的溶液.进样量均为10 μL，以进样对照品浓度（x）为横坐标，峰面积为纵坐标（y），分别获得天麻素和HBA的回归方程：y=2×107x－7464.2，R2=0.9999 和y=3×107x－479.19，R2=0.9999.研究结果显示，天麻素和HBA的进样浓度分别在2.2～440μg/mL和0.1～40μg/mL之间有良好的线性关系.以信噪比（S/N）等于3和10对应的标准溶液浓度分别确定为LOD和LOQ[9，10]，结果表明，该方法对天麻素的检测限和定量限分别为0.305 μg/mL和1.525 μg/mL，对羟基苯甲醇的检测限和定量限分别为0.1 μg/mL和1 μg/mL（表 1）. 表1 天麻素和对羟基苯甲醇的线性值、检测限、定量限和回收率标准品线性值LOD（μg/mL）LOQ（μg/mL）回收率（%）回归方程 R2 线性范围（μg/mL）天麻素y=2×107x－7464.2 0.9999 2.2~440 0.305 1.525 92.7对羟基苯甲醇y=3×107x－479.19 0.9999 0.1~40 0.1 1 1082.4.2 稳定性、精密度、重复性试验取供试品溶液，分别在0、4、8、12 h时进样测定，计算各共有峰的相对峰面积的RSD，来检测供试品在12 h内的稳定性.取同一份供试品溶液，连续进样3次，计算得各共有峰的相对峰面积的RSD，表明方法的精密度.取样品粉末共3份，分别进样，计算得各共有峰的相对峰面积的RSD值，表示方法的重复性.从表2可知，RSD值均＜3%，表明该方法的稳定性、精密度和重复性均良好.2.4.3 加样回收率试验取天麻块茎3份，采用加样回收法[8]，添加对照品天麻素和HBA适量，计算回收率，结果见表1.天麻素加样平均回收率为92.8%，HBA的平均回收率为108%. 2.5 样品中的天麻素和对羟基苯甲醇含量测定分别精确称取天麻的块茎、杆、叶、蒴果壳和种子的粉碎干样品2.5 g各3份，按照上述“2.3”方法制备供试品溶液，分别进样，测定天麻素和对羟基苯甲醇的峰面积，外标法计算样品中天麻素和对羟基苯甲醇的含量，结果如表3.从表3可知，天麻素和对羟基苯甲醇主要存在于天麻的块茎中.其不同部位的天麻素含量表现为：块茎（2.92 mg/g）＞杆（0.448 mg/g）＞种子（0.263 mg/g）＞叶（0.118 mg/g）＞蒴果皮（未检出）；对羟基苯甲醇的含量表现为块茎（1.485 mg/g）＞种子（0.123 mg/g），蒴果壳、叶和杆中未检出对羟基苯甲醇.3 结论与讨论雪峰天麻块茎中的天麻素含量最高，约为2.92mg/g，其次是杆，种子和叶中含量较低，蒴果壳中未检测到天麻素；其块茎中HBA含量高达1.485 mg/g，远高于种子中的含量（0.123 mg/g），但天麻杆、叶和蒴果壳中均未检测到HBA.根据《中华人民共和国药典》（2015年版一部），要求天麻样品（以干燥品计算）含天麻素和HBA的总量不得少于0.25%[11].从本研究结果可知，湖南雪峰天麻块茎中的天麻素和HBA总量达0.44%，符合《药典》要求.据相关文献报道，云南昭通的乌天麻中的天麻素和HBA总量为0.36%～0.66%，云南丽江的红天麻中的天麻素和HBA总量为0.31%～0.59%，贵州德江天麻中的两者总量为0.28%～0.42%，安徽六安的天麻中的两者总量为0.36%～1.19%，湖北宜昌的天麻中的两者总量为0.18%～1.01%，陕西汉中黄天麻中的两者总量可达0.88%，四川广元的黄天麻中的两者总量为0.36%[12-15].对比可知，2017年的湖南雪峰天麻中的天麻素和HBA总量处于中上水平，其它检测指标，如农药残留量、矿物质种类和含量、灰分和二氧化硫含量等有待研究.表2 稳定性、精密度、重复性试验考察分析物RSD（%）稳定性精密度重复性天麻素 2.7 2.6 1.7对羟基苯甲醇 1.3 2.1 2.9表3 天麻不同部位中的天麻素和对羟基苯甲醇含量（mg/g）注：nd表示未检出.块茎杆叶蒴果壳种子天麻素 2.92 0.45 0.12 nd 0.26对羟基苯甲醇 1.49 nd nd nd 0.12分析物图3 天麻不同部位中天麻苷类的HPLC图（A.块茎；B.杆；C.蒴果壳；D.叶；E.种子）湖南雪峰山天麻块茎中的天麻素和HBA含量均高于其它部位中的含量，其蒴果壳中既不含天麻素也不含HBA，说明天麻杆、叶和种子中的天麻素来源于块茎.天麻块茎中的天麻素生成是否与蜜环菌共生有关，有待后续深入研究.【相关文献】[1]邓晶晶，王传华.天麻生态型及“杂交品种”的生物学和化学特征研究进展[J].中药材，2017，40（11）：2726-2729.[2]Chen W C，Lai Y S，Lin S H，et al.Anti-depressant effects of Gastrodia elata Blume and its compounds gastrodin and 4-hydroxybenzyl alcohol，via the monoaminergic system and neuronal cytoskeletal remodeling[J].Journal ofEthnopharmacology，2016，182：190-199.[3]Geumhwa L，Hyungryong K，Sangyong H，et al.Gastrodia elata Blume and its pure compounds protect BV-2 microglial-derived cell lines against β-amyloid：The involvement of GRP78 and CHOP[J].Biological Research，2012，45（4）：403-410. [4]Lim E J，Kang H J，Jung H J，et al.Anti-angiogenic，antiinflammatory and anti-nociceptive activity of 4-hydroxybenzyl alcohol[J].Journal ofPharmacy&Pharmacology，2010，59（9）：1235-1240.[5]Luo L，Kim S W，Lee H K，et al.Anti-Zn2+-Toxicity of 4-Hydroxybenzyl Alcohol in Astrocytes and Neurons Contribute toa Robust Neuroprotective Effects in the Postischemic Brain[J].Cellular and Molecular Neurobiology，2018，38（3）：615-626. [6]Zhu H，Di Z，Qi Z，et al.4-Hydroxybenzyl alcohol derivatives and their sedative hypnotic activities[J].Rsc Advances，2018，8（35）：19539-19550.[7]申健，陈朝晖，李驰原，等.重振雪峰天麻品牌——记怀化市第三届“农商银行杯”青年创新创业大赛十强选手张中林[ER/OL]（.2016-12-22）[2019-04-28].[8]相继芬，邓辰辰，刘圆，等.HPLC测定天麻配方颗粒中天麻素和对羟基苯甲醇的含量 [J].中国现代中药，2018，20（11）：1440-1443.[9]Zou J，Wu L，He ZM，et al.Determination ofthe Main Nucleosides and Nucleobases in Natural and Cultured Ophiocordyceps xuefengensis[J].Molecules，2017（22）：1530. [10]Fu M，Wang L，Wang X，et al.Determination of the Five Main Terpenoids in Different Tissues of Wolfiporia cocos.Molecules[J].2018（23）：1839.[11]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（2015年版一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2015：54.[12]樊启猛，张旭，陈丹，等.RP-HPLC法同时测定7个产地天麻中 5 种成分[J].中成药，2017，39（04）：782-786.[13]王明霞，刘洁，陈炼明，等.HPLC-FLD法同时测定不同产地天麻中 5 个成分含量[J].药物分析杂志，2019，39（03）：502-509.[14]乔怀耀，张兴国，郭健，等.高效液相色谱法测定不同产地天麻中天麻素含量[J].时珍国医国药，2009，20（04）：921-922.[15]梁纪军，田大丰，王中彦，等.HPLC法测定不同产地天麻中天麻素的含量[J].沈阳药科大学学报，2006（01）：26-28.。
UPLC法测定略阳天麻中天麻素
UPLC法测定略阳天麻中天麻素景娴;江海;陈琛;杜欢欢;李晓东【摘要】建立了天麻中天麻素含量的超高效液相色谱紫外检测法，主要采用Waters Acqu-ity-BEH C18柱（1．7μm，50 mm ×2．5 mm），以乙腈和0．1％甲酸为流动相，流速0．3 mL／min进行梯度洗脱，乙腈洗脱浓度和时间为：3％（0 min ）—20％（3 min ）—3％（4 min ）—3％（5 min），柱温30℃，进样量5μL，检测时间5 min，二极管阵列检测器，检测波长220 nm。
该色谱分析条件下，天麻素能达到较好的基线分离，检测时间为5 min，经方法学考察可知该方法可行性高，能准确分析天麻中的天麻素，方法快速、方便、准确可行。
%The study was performed to establish the UPLC method for measurement of gastrodine con-tent in gastrodia elata, The separation column was Waters Acquity BEH C 18(1.7 μm, 50 mm ×2.5mm).A gradient elution using acetonitrile ( A)-methanoic acid ( B,0.1%) as the mobile phase was chosen .Acetoni-trile concentration gradient varied at differenttime ,that is, 3%(0 min)—20%(3 min)—3%(4 min)—3%(5min) .Chromatographic parameters included a flow rate of 0.3 mL/min, a column temperature of 30 ℃, an injection volume of 5μL, a detection time of 5 min, a wavelength of 220 nm and so on.The results obtained by UPLC showed that gastrodine could achieve good baseline separation effect under the chromato -graphic conditions .The methodology investigation indicated that this method is feasible , detecting time was re-duced to 5 min.The method can accurately analyze the gastrodine and the method is rapid , convenient , and accurate .【期刊名称】《陕西理工学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(032)005【总页数】6页(P74-79)【关键词】UPLC;天麻;天麻素;测定;略阳【作者】景娴;江海;陈琛;杜欢欢;李晓东【作者单位】陕西理工大学生物科学与工程学院，陕西汉中723000;陕西理工大学生物科学与工程学院，陕西汉中723000; 陕西理工大学中德天然产物研究所，陕西汉中723000; 陕西省陕南秦巴山区生物资源综合开发利用协同创新中心，陕西汉中723000; 陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心，陕西汉中723000;陕西理工大学生物科学与工程学院，陕西汉中723000; 陕西理工大学中德天然产物研究所，陕西汉中723000; 陕西省陕南秦巴山区生物资源综合开发利用协同创新中心，陕西汉中723000; 陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心，陕西汉中723000;陕西理工大学生物科学与工程学院，陕西汉中723000;陕西省略阳县中药材技术推广服务中心，陕西略阳724300【正文语种】中文【中图分类】O657.32;R284.1天麻(Gastrodia elata Bl.)又名赤箭、定风草、水洋芋等，属兰科(Orchidaceae)天麻属(Gastrodia)，为兰科天麻属与密环菌特殊共生的多年生草本植物，是国家三级保护物种。
天麻眩晕宁片的薄层色谱鉴别研究
天麻眩晕宁片的薄层色谱鉴别研究曹瑞;曹林林;郭东艳;柳小莉【摘要】目的建立天麻眩晕宁片的薄层色谱鉴别方法,为提高制剂的质量提供依据.方法采用薄层色谱法,对处方中制天麻、白芍、钩藤、泽泻等12味药进行鉴别.结果在供试品色谱中,与对照品或对照药材色谱相对应的位置上,显示出相同颜色的斑点,因此阴性对照无干扰.结论所建立的方法简便、灵敏、专属性强,可用于天麻眩晕宁片的质量控制.【期刊名称】《云南中医学院学报》【年(卷),期】2016(039)004【总页数】5页(P26-29,34)【关键词】天麻眩晕宁片;薄层色谱鉴别;质量控制【作者】曹瑞;曹林林;郭东艳;柳小莉【作者单位】陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046;陕西中医学院制药厂,陕西咸阳712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046【正文语种】中文【中图分类】R286.0天麻为兰科植物天麻的干燥块茎，我国常用名贵中药材之一，性辛、温、无毒，具平肝熄风、通络止痛之效，用于治疗头痛、头昏、眩晕、偏头疼、手足抽搐、小儿惊风、四肢痉挛、高血压、神经衰弱等[1]天麻为天麻眩晕宁片的主药药物之一[2]。
天麻眩晕宁合剂收载于《卫生部药品标准》[3]天麻眩晕宁片是由天麻眩晕宁合剂改剂型而来，由天麻，白芍，钩藤，泽泻，半夏（制），白术，茯苓，竹茹，川芎，甘草（炙），陈皮，生姜等十二味中药组成[4]，具有祛痰定眩，和胃止呕的功效，临床上主要用于眩晕，恶心，呕吐，舌淡，苔白滑，尤适用于美尼尔氏症[5]。
近年来有关天麻眩晕宁合剂的含量测定研究已有报道[5-6]，但是薄层色谱研究报道较少，而且原合剂的质量标准中，仅对处方中的钩藤、泽泻、干姜、天麻进行了薄层鉴别[7]，为了更有效的控制该制剂的内在质量，本实验拟在原合剂质量标准的基础上，增加白术，茯苓，半夏，竹茹，甘草等药味的薄层色谱鉴别，为提高制剂的内在质量提供依据。