Wntβ-catenin信号通路在肿瘤EMT现象中的作用研究进展

国际泌尿系统杂志２００８年３月第２８卷第２期ＩｎｔｅｍａｔｉｏｎａｌＪｏｕｍａｌｏｆｕｒｏｌｏｇｙａｎｄＮｅｐｈｍｌｏｇ）ｒ，Ｍａｒ２００８，ＶｏＩ．２８Ｎ０．２Ｗｎｔ／ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ信号通路在肿瘤ＥＭＴ现象中的作用研究进展４赵佳晖”综述姜永光罗勇审校【摘要】ｗ。

ｔ信号通路在胚胎发育和肿瘤的发生及转移中起着重要的作用，近年来研究发现，骣ｈ信号传导通路同肿瘤转移早期的ＥＭＴ现象密切相关，ｗｎｔ信号转导途径可直接或问接影响ＥＭＴ相关蛋白和ＥＭＴ的诱发因素，本文对Ｗｎｔ信号通路在肿瘤ＥＭＴ发生诱导中的作用进行综述。

【关键词】肿瘤；信号传递［中图分类号］Ｒ７３［文献标识码］Ａ［文章编号］１００ｌ＿４５９４（２００８１０２国１９０—０５ｗｎｔ信号通路在调控胚胎发育，决定细胞命运以及肿瘤细胞的发生和转移方面起着重要作用。

Ｗｎｔ信号途径的关键蛋白Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ与多种细胞因子及转录因子之间存在着错综复杂的联系。

Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ／Ｔｃｆ复合物激活的靶基因包括编码其他细胞信号转导蛋白的基因和多种控制细胞命运的转录因子基因，这些靶基因的表达还与肿瘤转移早期ＥＭＴ（ｅｐｉｔｈｅｌｉａＩ—ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ）现象之间存在着密切的联系。

因此，本文将重点对ｗｎｔ信号通路中主要成员可能参与肿瘤细胞转移早期ＥＭＴ现象的研究进展进行综述。

ｌＷｎｔ信号途径的组成及信号通路１．１典型Ｗｎ∥Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ信号通路典型的ｗｎＬ／Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ信号通路由细胞外的Ｗｎｔ蛋白、膜受体Ｆｒｉｚｚｌｅｄ、胞浆内的Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ以及下游的靶基因组成。

其中ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ在典型ｗｎ∥Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ信号通路中起关键作用，其在胞浆中的浓度直接影响着ｗｎｔ信号通路的开放或是关闭。

在胞外无ｗｎｔ信号的条件下，以ＧｓＫ３８／ＡＰｃ／·综述·Ａｘｉｎ为主的破坏复合物可以磷酸化Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的氨基端。

Ｎ端磷酸化的Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ能够被含有Ｆ—Ｂ０ｘ结构域的Ｂ—ＴｒｃＰ（Ｓｌｉｍｂ）识别，并且特异地结合在磷酸化的氨基酸位点上，导致Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的泛素化，进一步被蛋白酶降解破坏。

当胞外ｗｎｔ蛋白增加时，Ｗｎｔ与膜受体Ｆｒｉｚｚｌｅｄ结合，Ｆｒｉｚｚｌｅｄ蛋白为Ｇ蛋白偶联受体，与胞外的Ｗｎｔ结合后，可以激活Ｄｓｈ／Ｄｖｌ蛋白，进而抑制ＧＳＫ３Ｂ／ＡＰＣ／Ａｘｉｎ复合物对Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的磷酸化，保护其不被降解，因此导致细胞内的Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ增多，增多的Ｂ—ｅａｔｅｎｉｎ进入细胞核，与转录因子Ｔｃｆ／Ｌｅｆ结合，引起ｅ—Ｍｙｃ、ＣｙｃｌｉｎＤ１、ｓｕｒｖｉｖｉｎ等靶基因的转录。

ｃ—Ｍｙｃ、ＣｙｃｌｉｎＤｌ等均为原癌基因，被激活后可以转化为癌基因，刺激细胞增值，引起肿瘤发生㈨］。

１．２平面细胞极性通路此通路的功能是激活ＪＮＫ并指导非对称细胞骨架形成及细胞形态的协同极化。

这一通路依赖于ｗｎｔ受体的激活，不依赖于Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ。

在果蝇中通过遗传分析证实平面细胞极性通路除了ＤＦｚｄｌ和１５ＮｏｖｉｃｋＡＣ．Ｉ五ｐａｒｏｓｃｏｐｉｃａｎｄｐａｒｔｉａｌｎｅｐｈｒｅｃｆｏｍｙ．ｃｌｉｎＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００４，ｌＯ，６３２２—６３２７．１６ＭｏｉｎｚａｄｅｈＡ，ＧｉｌｌＩｓ，ＦｉｎｅｌｌｉＡ，ｅＩａ１．Ｌａｐａｍｓｃｏｐｉｃｐａｒｔｉａｌｐｈｒｅｃｔｏｍｙ：３一ｙｅａｒｆｏｌｌｏｗｕｐ．ＪＵｒＤｌ，２００６，１７５，４５９—４６２．１７Ｈ８９ａｒｔｙＮＪ，ＧｉｌｊｌＳ，ＫａｏｕｋＪｌＩ，ｅｔａ１．Ｒｅｎａｌ。

ｒｙｏａｂｌａｔｉｏｎ：５ｙｅａｒ＋基金项目：北京时间自然科学基金（编５０７２０１９）＊ｔ作者单位：１０００２９北京，首都医科大学附属北京安贞医院泌尿外科ｃｏＩｎｅｓ．ＪＵｍｌ，２００６，１７５：３５１．１８０’ＭａＵｅｙＲＬ，ＢｅｒｇｅｒＡＤ，ＫａｎｏｆｓｋｙＪＡ，ｅｔａ１．Ａｍａｔｃｈｅｄ—ｃｏｈｔ）ｒｔｃｏｎｌｐａｒｉｓｏｎｏｆｌａｐａｍｓｃｏｐｉｃｃｒｙｏａｂｉａｔｉｏｎａｎｄｌａｐａｒｏｓｃｏｐｉｏｐａｒｔｉａｌｐｈｒｅｃｔｏｍｙｆｏｒｔｒｅａｔｉｎｇｒｅｎａｌｍａｓｓｅｓ．ＢＪｕＩｎｔ，２００７，９９：３９５—３９８．（收稿日期：２００ｒ７ＪＤ７～１６）万方数据国际泌尿系统杂志２００８年３月第２８卷第２期ＩｎｔｅｍａｔｉｏｎａｌＪｏｕｍａｌｏｆｕｒｏｌｏｇｙａｎｄＮｅｐｈｍ】ｏｇｙ，Ｍａｒ２００８，Ｖ０１．２８Ｎ０．２１９ｌＤｓｈ以外，可能的组成成分还有小的ＧＴＰ酶ＤｒｈｏＡ、Ｄｍｋ、ＪＮＫ、肌球蛋白Ⅱ、肌球蛋白ⅦＡ等，这一功能为平面细胞极性通路与细胞骨架的联系提供了证据‘３Ｉ。

１．３ｗｎ∥Ｃａ２＋通路ｗｎｔ５可以激活磷脂酶ｃ（ＰＬＣ），ＰＬｃ溶解膜上的肌醇磷脂产生ＩＰ３和ＤＡＧ、ＩＰ３和ＤＡＧ进一步激活钙信号途径，引起细胞内Ｃａ２＋水平升高，Ｃａ２＋水平升高可引起多种效应，包括激活ＰＫｃ、Ａｃ等，引起特定基因的转录，对细胞的分裂和增殖有重要的意义‘４｜。

２上皮细胞间质转化态上皮细胞在特定的生理和病理情况下，向问充质转分化，同时伴随有细胞形态与相关基因的改变，这个过程称之为ＥＭＴ。

ＥＭＴ发生于多种生理和病理过程，如胚胎发育、伤口愈合、某些慢性疾病（如肾脏纤维化）、肿瘤转移级联反应的早期阶段等。

ＥＭＴ现象具有共同的细胞学机制，如上皮属性蛋白（主要为Ｅ一钙黏素，Ｋｅｒａｔｉｎ一８）表达下调，使细胞问失去黏附作用，问质属性蛋白（如Ｎ—ｃａｄｈｅｒｉｎ，纤维结合蛋白，弹性蛋白）表达上升，细胞骨架改变，形态转变为纺锤形纤维细胞态，同时获得强大的迁移与运动能力，同时细胞形态发生改变”ｏ。

研究表明，ＥＭＴ现象是大部分肿瘤转移早期的必经阶段，肿瘤细胞逐渐丢失上皮细胞的部分特征，同时获得间质细胞的某些特殊属性，游走能力极大提高、与周边或远处问质组织的“亲和性”显著增强，进而导致肿瘤细胞的扩散和转移∞ｏ。

３ＥＭＴ与Ｗｎｔ研究发现ｏ７Ｉ，ｗｎｔ信号通路与多种诱发肿瘤ＥＭＴ现象的细胞因子和转录因子密切相关，下面将围绕这些关键蛋白对ＥＭＴ与Ｗｎｔ通路之间的关系作一阐述。

３．１钙黏素钙黏素是ＥＭＴ的一项重要指标，它是一类ｃａ２＋依赖性的同亲性跨膜粘附受体，在发育过程中，参与细胞、细胞粘附、识别及细胞分选。

钙黏素的编码基因被认为是抑癌基因，它的表达或功能的缺陷与肿瘤进展密切相关。

典型的钙黏素包括Ｅ一钙黏素、Ｎ一钙黏素和Ｐ一钙黏素，与癌转移相关的主要是Ｅ一钙黏素。

Ｅ一钙黏素存在于各种黏合连接处，介导上皮细胞问的黏合。

其胞内区可以和Ｂ～ｃａｔｅ—ｎｉｎ相连，８一ｅａｔｅｎｉｎ又经ｏ【一ｃａｔｅｎｉｎ介导和细胞骨架蛋白质（微丝和中间纤微体系）相互作用，从而形成上皮细胞之间稳定的细胞粘合连接口１。

Ｅ—ｃａｄ－ｈｅｒｉｎ／Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ复合体在维持正常上皮形态和细胞粘附中起重要作用，而Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ是整个复合体功能的主要调控分子。

生长因子可以通过Ｂ—ｃａｔｅ—ｎｉｎ的磷酸化和去磷酸化来调节Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ／Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ复合物的功能。

ＥＧＦＲ的胞浆部分和Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的核心区域（哪区域）紧密结合，当ＥＧＦＲ和ＥＧＦ结合后，ＥＧＦＲ自身发生酪氨酸残基磷酸化并磷酸化Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的酪氨酸残基，降低Ｅ—ｃａ小ｈｅｒｉｎ／Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ复合物的稳定性，使Ｅ—ｅａｄｈｅ血介导的黏附功能下降，导致肿瘤细胞问连接松散，细胞间粘附减弱，迁移能力增加进而有利于肿瘤浸润、转移‘９Ｉ。

３．２ＴＧＦ一８ＴＧＦ—Ｂ属于寡二聚体多肽生长因子家族，该家族成员还包括骨形态蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）和活化素（ａｃｔｅｖｉｎ）等。

目前研究证实ＴＧＦ—Ｂｌ可以通过以下途径使肿瘤细胞获得多种不同的ＥＭＴ特性口０’１１］。

①激活ＲｈｏＧＴＰａｓｅ家族，促进细胞骨架的重建和细胞的运动。

②激活ＩＬＫ，ＩＬＫ能够直接磷酸化ＧＳＫ一３并抑制其活性，进而激活转录复合体Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ／Ｔｃｆ以及转录因子ＡＰ一１，使细胞黏附功能下降，迁移和浸润能力提高。

③激活ｓｎａ丑／ｓｌｕｇ锌指转录因子，ｓｎａ∥ｓｌｕｇ和Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ的启动子结合，抑制上皮细胞标记蛋白Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达。

此外，ＴＧＦ—Ｂ与受体结合，活化的ＴＧＦ—ｐ受体能够特异地识别和磷酸化Ｓｍａｄ蛋白家庭成员ｓｍａｄ２和ｓｍａｄ３，Ｒ—Ｓｍａｄｓ又与其伴侣分子ｓｍａｄ４结合，形成有功能的转录复合体，Ｒ—Ｓｍａｄｓ与ｓｍａｄ４进入核内，引起靶基因的转录。

李伟等¨引报道，Ｓｍａｄ３、Ｓｍａｄ４可以与ＬＥＦ—ｌ和ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ结合，促进两信号间相互作用。

在前列腺癌Ｐｃ一３细胞中，ｗｎｔ信号激活ＴＧＦ—Ｂ信号，同时ＴＧＦ—ｐ信号激活Ｐｃ一３细胞中的ｗｎｔ信号。

Ｍｅｄｉｃｉ等¨３。

报道，ｓｎａｉｌ和ＬＥＦ—ｌ转录因子的相互作用是ＴＧＦ—Ｂｌ诱导ＥＭＴ的必须因素，ｓｍａｄ信号刺激ｐ—ｃａｔｅ—ｎｉｎ／ＬＥＦ一１复合体的形成，诱导ＥＭＴ。

３．３内皮素内皮素（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ一１，ＥＴ一１）是一种主要由血管内皮细胞产生的肽类物质，不仅具有强大的血万方数据国际泌尿系统杂志２００８年３月第２８卷第２期ＩｎｔｅｍａｔｉｏｎａｌＪｏｕｍａｌｏｆｕｍｌｏｇｙａｎｄＮｅｐｈｒｏｌｏｇ）Ｔ，Ｍａｒ２００８，Ｖ０１．２８Ｎ０．２管收缩功能，而且还有一些重要的生理学作用，如组织分化、细胞增殖及激素分泌等。

近年来的研究发现内皮素还参与体内多种肿瘤的生长过程，如前列腺癌、宫颈癌、乳腺癌等，其生物学效应的实现可能与促有丝分裂、抑制凋亡、诱导肿瘤生长过程中的血管生成、原癌基因的激活等有关。

晚期前列腺癌患者骨转移、成骨作用及疼痛等均与其有关。

人类ＥＴ二一１的启动子中含有Ｔｃｆ结合位点（ＴＢＥ），Ｔｃｆ与ＴＢＥ结合，直接激活ＥＴ一１的启动子，诱导ＥＴ一１的转录。

运用ｓｉＲＮＡ干扰Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ／Ｔｃｆ，可以显著降低ＥＴ一１的表达。

ｓｕｎ等报道¨４。

，在前列腺癌细胞中，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ／Ｔｃｆ一４促进ＥＴ—ｌ的表达，同时内皮素一ｌ通过磷脂酰肌醇（一３）激酶依赖途径激发Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ／Ｔｃｆ一４，二者形成了一个正反馈，引起前列腺癌细胞的增殖和转移。

在人类实体肿瘤中，ＥＴ一１／ＥＴＡＲ可以激活ＩＬＫ，ＩＬＫ进一步磷酸化ＧＳＫ３Ｂ，磷酸化的ＧＳＫ３Ｂ活性降低，不能磷酸化ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ和Ｓｎａｉｌ，使胞浆内Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ和ｓｎａｉｌ的浓度升高，进而引发一系列生物学效应，包括癌细胞Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ表达下降，ＭＭＰｓ表达上升，细胞形态发生改变，侵袭能力增强，从而诱发癌细胞的ＥＭＴ现象，这个现象已在卵巢癌中得到了证实¨５｜。