临床基因扩增实验室的管理和质量保证22页PPT
临床基因扩增检验的质量保证
室间质评
参与室间质评活动，提高检验结果的互认性和可 比性。
质控数据管理
建立质控数据管理系统，对质控数据进行收集、 分析、反馈和改进。
04
质量保证的实施策略ຫໍສະໝຸດ 建立质量管理体系制定质量方针和目标
明确质量管理的方向和目标，为检验工作提供指导。
组织架构与职责分工
定期进行内部审核和外部认证
本机构定期进行内部审核，以确保质量管理体系 的有效运行。同时，积极参加外部认证，以获得 国际认可的质量保证体系。
其他机构的质量保证经验分享
强化人员培训和考核
其他机构强调在临床基因扩增检验中，应加强人员培训和考核，提高检验人员的专业水平 和操作技能。
建立多层次的质控体系
为确保检验结果的准确性，一些机构采取多层次的质控体系，包括室内质控和室间质评等 措施。
指导治疗
基因扩增检验的结果有助于医生制定 个性化的治疗方案，提高治疗效果。
质量保证的必要性
确保结果准确性
质量保证措施能够确保基因扩增 检验结果的准确性和可靠性，避
免误诊和漏诊。
提高患者安全
质量保证有助于降低因检验误差导 致的不必要的治疗或误诊的风险， 保障患者安全。
提升医疗机构声誉
实施质量保证措施能够提高医疗机 构在基因扩增检验方面的专业性和 可靠性，提升其声誉和患者信任度。
02
临床基因扩增检验的过程
样本采集与处理
样本采集
采集的样本应具有代表性，能够 真实反映患者情况。
样本处理
采集后的样本应尽快进行处理， 避免污染和降解。
核酸提取与纯化
核酸提取
从样本中提取出核酸是基因扩增检验 的前提。
临床基因扩增检验实验室质量管理守则
精心整理目录实验室公正性说明修订页第一章质量方针分子生物实验室组织结构图分子生物实验室设置平面图第二章管理程序文件程序管理文件编码目录JS-LJ-SMP0000-000实验室内务管理程序JS-LJ-SMP0001-000实验室人员配置及培训程序JS-LJ-SMP0002-000实验室质量控制管理程序JS-LJ-SMP0003-000仪器设备管理程序JS-LJ-SMP0004-000临床标本的管理程序JS-LJ-SMP0005-000实验室生物防护与安全管理程序JS-LJ-SMP0006-000实验室文件、记录的管理程序JS-LJ-SMP0007-000实验耗材购买、验收、储放程序JS-LJ-SMP0008-000抱怨处理程序JS-LJ-SMP0009-000仪器设备校准程序JS-LJ-SMP0010-000头验至检测结果报告程序JS-LJ-SMP0011-000检验过程中发生故障时的应急处理程序JS-LJ-SMP0012-000实验室清洁消毒程序JS-LJ-SMP0013-000文件修改程序JS-LJ-SMP0014-000肿瘤分子检测实验室标准操作规程文件编JS-LJ-SOPOOOO-OOO 码目录室间质量评价标准操作规程 主要仪器使用、维护、校准操作规程 实验室废弃物处理程序石蜡包埋组织DNA 提取标准操作规程 JS-LJ-SOPOOOI-OOO 石蜡包埋组织样本RNA 提取标准操作规程 JS-LJ-SOP0002-000 血液DNA 提取标准操作规程口腔拭子/唾液DNA 提取标准操作规程 组织DNA 提取标准操作规程 组织RNA 提取标准操作规程 JS-LJ-SOP0003-000 JS-LJ-SOP0004-000 JS-LJ-SOP0005-000 JS-LJ-SOP0006-000 反转录标准操作流程JS-LJ-SOP0007-000 基因mRN 表达检测标准操作规程EGFRS 因突变Q-PCR 标准操作规程 KRAS 基因突变Q-PCF 标准操作规程 BRAFS 因突变Q-PCF 标准操作规程 PDGFR 基因突变Q-PCF 标准操作规程叶酸基因多态性Q-PCF 标准操作规程 基因SNPQ-PC 标准操作规程 .1p19qL0H 标准操作规程 MGM 甲基化标准操作规程样本脱包、分类、编号、登录、发放标准操作 规程临床标本采集、验收、拒收标准操作规程 临床标本保存标准操作规程 试剂质检标准操作规程JS-LJ-SOP0008-000 JS-LJ-SOP0009-000 JS-LJ-SOP0010-000 JS-LJ-SOP0011-000JS-LJ-SOP0012-000 JS-LJ-SOP0013-000 JS-LJ-SOP0014-000 JS-LJ-SOP0015-000 JS-LJ-SOP0016-000 JS-LJ-SOP0017-000 JS-LJ-SOP0018-000 JS-LJ-SOP0019-000 JS-LJ-SOP0020-000实验结果有效性判断标准操作规程 JS-LJ-SOP0021-000 室内质量控制标准操作规程JS-LJ-SOP0022-000 JS-LJ-SOP0023-000 JS-LJ-SOP0024-000JS-LJ-SOP0025-000申请单必须信息肿瘤个体化检测样本采集注意事项叶酸基因检测样本采集注意事项检测报告标准操作规程修订页修订序号修订的章节条款简要修订内容批准人批准日期r j)JS-LJ-SOP0026-000JS-LJ-SOP0027-000JS-LJ-SOP0028-000JS-LJ-SOP0029-000第一章质量方针质量方针题目：质量方针起草：日期：审核：日期：编号：JS-LJ-ZLC0001-000 批准：日期：颁发部门：技术部生效日期：分发部门：技术部临床基因扩增检验实验室是严格按照卫生部、山东省临床基因扩增实验室规范I I \ 、化、标准化要求进行管理与操作，我中心的质量方针为：公正、科学、准确、高效我们的检验工作必须做到：行为公正一任何情况下，不被各种利益所驱动，客观公正、独立诚实地开展检验工作。
临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
理想的PCR实验室设置A
产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
空气流向
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
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理想的PCR实验室设置B
产物分析区
核酸提取用离心管质检的基本方面 带滤心吸头的质检主要是滤心的密封性
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项目检测、结果判断、解释和报告 SOP
标本进入实验程序后的操作编号方式 根据所用试剂盒确定的详细操作流程 仪器编程及文件名的编写规则 结果判读的流程和规则 结果分析解释的流程 结果报告流程
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空气流向++
门
门
扩增和产 物分析区 空气流向++
其他实验室
试剂准备 区
空气流向
其他实验室
其他实验室
空气流向
走廊
走廊
其他实验室
空气流向+
其他实验室
标本制备 区
其他实验室
其他实验室
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临床基因扩增实验室设置的一般原则
各区独立
注意风向 “十六字口诀”
因地制宜 方便工作
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产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
传递窗
传递窗
传递窗
空气流向
空气流向
空气流向
空气流向
缓冲间
缓冲间
临床基因扩增实验ppt课件
精选ppt课件
13
试剂管理制度
• 实验室应根据工作需要定期提交试剂申请单，做
到及时盘存清点。
• 所有试剂做到来源渠道正规，质量保证。 • 实验室应对试剂库存定期检查，不得用过期变质
的试剂。
• 试剂保存应严格按照规定存放，确保有效期内能
有效地使用，杜绝浪费。
• 试剂外借一律须经实验室负责人同意，剧毒试剂
精选ppt课件
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第三节：临床基因扩增实验室 操作指导书（SOP）
精选ppt课件
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• 各种仪器设备的标准操作维护程序
（PCR扩增仪、离心机、干式恒温器、生物安全柜、移液器、 冰箱、可移动紫外线消毒车等。）
• 各种仪器设备标准校准程序 • （温度计、移液器、PCR扩增仪等） • PCR标本唯一标识编号规则（120525B05） • 临床标本的采集及处理的标准操作程序 • 各种病原体扩增荧光检测标准操作程序 • 室内质量控制、室间质评标准操作程序
精选ppt课件
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空白管对照的种类
• 反应液空白管对照 • 试剂空白管（在整个实验过程中开口放置
于核酸提取的操作台面区域内30—60分钟， 然后进行扩增在反应液空白管为阴性的情 况下如果出现阳性提示可能出现实验室污 染。）
精选ppt课件
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扩增产物分析
• 通过标准曲线对未知模板进行定量分析 • 1。根据试剂盒的要求先确定基本的基线和域值。 • 2.初步分析未知模板的定量结果，根据当时曲线
• 人员的培训 • 规范操作
精选ppt课件
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分析中的质量控制
• 核酸提取 • 1.标本制备最好在生物安全柜内进行，可防止标本气溶胶
的扩散。
• 2.在实验操作过程中要经常更换手套，因为手套的污染很
临床基因扩增检验操作规范培训课件
1. 血清/血浆等— -70℃ 2. 用于DNA测定的已纯化核酸样本— 4℃ 3. 用于RNA测定的已纯化核酸样本— -80℃ 4. 用乙醇沉淀的核酸样本— -20℃ 5. GITC处理的RNA标本在室温可保存7天
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
在巢式PCR测定中，第二次加样必 须在本区内进行。
可降低本区的气压以避免气溶胶从 本区漏出。
如有加样则应在超净台内进行。 打开反应管前快速离心数秒。
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（四）扩增产物分析区
功能： 扩增片段的测定。
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二、各阶段操作要求
测定分析前的标本采集处理、测 定中的核酸提取、扩增和产物分析以 及测定后的结果报告等。
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（一）标本的采集
临床标本包括EDTA或枸橼酸钠抗凝全血或骨髓、 血清或血浆、痰、脑脊液、尿及分泌物等。
EDTA和枸橼酸盐是首选的抗凝剂。不能使用肝素 抗凝，因肝素是Taq酶的强抑制剂。
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一、临床基因扩增检验实验室的 规范化设置及其各室的功能
二、各阶段操作要求 三、PCR污染与对策 四、因操作欠规范导致的问题分析
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一、临床基因扩增检验实验室的 规范化设置及其各室的功能
玻璃器皿在使用前应高压处理，250°烘烤4小时 以上可使RNA酶永久性失活。
临床基因扩增检验的质量保证PPT97
扩增仪孔间温度的重复性和均一性 的检测方法
一是使用一种热电偶探针、微伏转换器和自动图示 记录仪组成扩增加热模块孔内温度监测记录系统， 当孔间温度变异超出1℃时，其可测出来。
具体做法是将装有TE缓冲液并上加石蜡油的扩增反 应管放置于扩增仪各孔中，热电偶探针透过扩增反 应管盖插至缓冲液中，然后按程序进行一个常规的 PCR扩增，加热模块如为96孔，则至少要测定12孔 不同位置孔内的温度，在整个扩增过程中，可移动 热电偶探针至上述不同孔中监测温度，但每一孔内 温度监测至少要有一个扩增周期。
一般核酸提取试剂促使靶核酸从细胞内释 出的原理
核酸的分离纯化 靶核酸提取的质量 临床标本及核酸提取中可能存在的抑制和
干扰物质 核酸样本制备及扩增检测的质控 产物检测的质控
•45
一般核酸提取试剂促使靶核酸 从细胞内释出的原理
靶核酸可以与宿主细胞整合，核内游离 及胞浆内各种构形存在于细胞内，如测 定的是病原微生物,则靶核酸存在于细菌 、病毒、原虫或真菌细胞内，如果上述 细胞破裂,则靶核酸亦可存在于细胞外。
□有 □有 □有 □有 □有
□使用后用10%次氯酸钠溶液消毒， 再用70%乙醇清洁 □紫外照射
□使用后用10%次氯酸钠溶液消毒， 再用70%乙醇清洁
□遵循单一工作流向
•38 □紫外照射
理想的试剂和操作方法
试剂盒的质检 定量测定的精密度是测定组成步骤的
变异和的平方根(SD)= 上式中SDa、SDb、SDc是步骤a、b、c 等（例如试剂准备、标本采集、核酸 提取、扩增和产物检测等）的标准差 ；
临床基因扩增检验的质 量保证PPT97
2020年5月24日星期日
定义
质量保证(Quality Assurance,QA) 为一产品或 服务满足特定质量要求提供充分可信性所必要的有
临床基因扩增实验
泰兴市第二人民医院检验科 赵建平
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1
实验室管理
• 管理应该目标明确，减少不确定性和不必要的损失，通过
预先设立的标准对工作进行及时的修改或者纠正。以求最 快最好地达到预期的目的
• 各实验室的管理包括各种规章制度、各种分析仪器的校准、
维护、保养，检验项目的标准操作程序（SOP）、工作流 程、生物安全、标本的采集、标识、保存、运送、验收、 检测结果的记录、检验人员的准入和培训以及临床和患者 等方面的抱怨、紧急防范措施等等。
• 易燃易爆试剂应分开存放，远离火源和电源。
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标本采集、验收、保存制度
• 采集的容器 • 采集的量 • 如果是抗凝血抗凝剂的种类（不可使用肝素抗凝） • 送检的时间（一般两小时内） • 如果容器破裂或者抗凝血的抗凝剂成分不对，标本的病人
姓名性别等于检验单不符等其他原因，可拒收表格。在拒 收标本上登记，同时填写不合格标本处置单，并随同申请 单返送相应的科室，必要时电话告知相关科室医生或护士。
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2
第一节 临床基因扩增实验室的设置
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3
实验室设置原则
• 目的：确保基因扩增实验室的质量和检验结果的
准确性
• 原则：各区独立 注意风向 因地制宜 方便工作 • 功能区的设置：
1.试剂准备区 2.模板制备区 3.扩增区 （产物分析区）
注：各区必须要有明确的标识。
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工作流向
•
试剂准备区
•
•
模板制备区
•
•
扩增区（产物分析区）
•
。 注：各区之间应有传递窗，用于传递实验过程中的物品
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5
• 各功能区内设置相应的仪器和设备 • 模板制备区设生物安全柜 • 各功能区内的任何物品不可移至其他功能区 • 原则：
临床基因扩增检验实验室管理PPT课件
• 由县级卫生行政部门责令其限期改正.并可 处以5000元以下罚款.情节严重的,吊销其<医疗 机构执业许可证>.并予以公告.
•
• 十八. 违反下列条款也要处理
• 超范围开展项目 试剂不合格
• 无室内质控
无室间质评
• 弄虚作假
科研项目收费
• 无证上岗
仪器无校准
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•
第四章
附则
• 十九. 采供血机构参照本办法执行
必须经国家药品监督管理局批准的临床检 验试剂
• 五.质量监督管理 • 部,省.自治区.直辖市临床检验中心负责
对所辖行政区域内临床基因扩增检验实验 室的质量监督管理工作
.
6
•
第二章 实验室设置和验收
• 六. 设置标准和验收程序 • • 设置标准
• <临床基因扩增检验实验室基本设置 标准>(见附件)
•
.
2
•
第一章
总则
• 一,目的
• 规范临床基因扩增检验实验室管理
• 保证临床基因扩增检验实验室质量
• 保证临床诊断,治疗的科学性,合理性
• 二.临床基因扩增检验的种类
• 基本原理是扩增检测DNA,RNA（cDNA）为 方法的检测技术
• 放大靶核酸
• 聚合酶链反应(PCR)
• 连接酶链反应(LCR)
.
•
临床基因扩增检验实验室必须做室
• 内质控
•
临床基因扩增检验实验室必须参加
• 部中心组织的室间质评
.
13
• 十四. 部中心按照<管理办法>和<工作规
• 范>协调,组织省检验中心监测临床基因 扩增检验实验室的检验质量.结果报省卫 生厅,并抄送被检单位.
临床基因扩增检验的质量保证PPT课件教材讲义
对临床标本中可能存在的 抑制/干扰物的质控措施
质控措施： 采用内质控 （internal control, IC）（通 常称为内标）的方法
内标有两种,即竞争性的和非竞 争性的内标。
内标设置的必要性？
标本收集
标本采集时间对扩增检测结果的影响 标本采集部位的准备 标本的类型和采集量 采样质量的评价 采样及运输容器 标本采集中的防污染
标本采集时间对扩增检测结果 的影响
在疾病发展过程中，标本采集过早或 过晚都可能会给出假阴性结果。
标本采集部位的准备
标本采集部位的清洁消毒可去掉 污染的微生物或其它杂物,但应适 度,过度清洁消毒有可能会去掉或 破坏靶微生物,故标本采集部位的 准备应由训练有素的人员进行。
扩增仪孔间温度的重复性和均一性 的检测方法
第二种方法并非直接测定孔内温度，而是 通过扩增功能来间接获知孔间的均一性， 即将加有一已知的含一定浓度的阳性质控 样本的扩增反应管置于扩增仪各孔中按常 规进行扩增检测，观察结果的一致性程度， 如果有某一个或几个孔结果有问题，则应 确定这一个或几个孔是否会重复性地得到 假阴性结果，如果是，则表明相应孔的热 传导有损坏。
定义
室 间 质 量 评 价 （ External Quality Assessment, EQA） 为客观比较一实验室的测定结果与靶值的差异， 由外单位机构，采取一定的办法，连续、客观地评价 实验室的结果，发现误差并校正结果，使各实验室之 间的结果具有可比性。这是对实验室操作和实验方法 的回顾性评价，而不是用来决定在实时的测定结果的 可接受性。当EQA用来为执业许可或实验室认证的目 的而评价实验室操作时，常描述为实验室能力比对检 验（Proficiency testing, PT）。在以前的文献中， EQA常描述室间质量控制。
临床基因扩增检验实验设置与质量管理18页PPT
ENDபைடு நூலகம்
临床基因扩增检验实验设置与质量管
理
21、没有人陪你走一辈子，所以你要 适应孤 独，没 有人会 帮你一 辈子， 所以你 要奋斗 一生。 22、当眼泪流尽的时候，留下的应该 是坚强 。 23、要改变命运，首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之 首，因 为这种 德性保 证了所 有其余 的德性 。--温 斯顿． 丘吉尔 。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的 ，它只 是让人 们的脚 放上一 段时间 ，以便 让别一 只脚能 够再往 上登。
16、业余生活要有意义，不要越轨。——华盛顿 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。——罗素·贝克 18、最大的挑战和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。——马云 19、自己活着，就是为了使别人过得更美好。——雷锋 20、要掌握书，莫被书掌握；要为生而读，莫为读而生。——布尔沃