三种常见型号PCR扩增仪的临床应用评价
四种常见PCR仪的区别及运用-科邦实验室-2020.6.24
四种常见PCR仪的区别及运用PCR扩增仪(俗称PCR仪)PCR:PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
PCR仪实际就是一个温控设备,能在95℃,55℃,72℃之间很好地进行温度控制。
PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪,是利用PCR(Polymerase chain reaction,聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备,被广泛运用于医学、生物学实验室中,例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制以及亲子鉴定等。
根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR 仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。
1). 普通PCR仪(2万以下,赛默飞、伯乐、大龙,艾本德)一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪,也叫普通PCR仪。
如果要做不同的退火温度需要多次运行。
主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。
该仪器主要应用于科学研究、教学、医学临床、检验检疫等机构。
如:启步BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II ,ABI 2720型2). 梯度PCR仪(2万-8万,赛默飞、伯乐、大龙,艾本德)一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度,通常有12种温度梯度)的PCR仪称作梯度PCR仪。
因为被扩增的不同DNA片段,其最适退火温度是不同的,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR 扩增,就可以筛选出表达量高的最适退火温度,进行有效的扩增。
用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。
PCR技术在临床检验中的应用
PCR技术在临床检验中的应用聚合酶链反应又叫DNA扩增技术。
进入到21世纪以来,在标本中,分析研究与鉴定检测特定的体外基因扩增技术重要方法就是PCR技術。
近些年以来,这项技术在许多研究领域以及临床的应用中都发挥着重要作用;同时PCR技术在遗传病诊断与传染病病原体鉴定以及癌基因治疗等众多方面均有十分重大的贡献。
本文主要是对PCR技术在临床检验中的应用进行分析和探讨。
标签:PCR技术;临床检验;应用1 PCR技术的概述PCR技术的基本原理是在扩增区域的两端,用两条互补的双链DNA模板引物,利用DNA聚合酶,引物会引发互补的DNA链。
在这个过程中,一条引物所引发的DNA链可以合成另外一条新的DNA链,循环反复多次以后,导致这两条引物之间的DNA大量复制[1]。
PCR技术的循环反应主要是由变性和退火以及延伸这三个基本步骤组成的循环。
PCR技术在基层疾病检测中的应用,是当今社会较为常见的。
对于肝炎病毒、肠道病毒、呼吸道系统感染、性病病原体等检测,PCR技术的敏感度精确度要比传统方法高。
2 PCR 技术在临床检验中的应用2.1PCR技术在传染性疾病检测中的应用目前我国典型的消化系统感染性疾病包括肝炎、胃炎等。
引发肝炎的病原体主要为乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等。
使用PCR法对血清中的乙肝病毒进行检测的优势主要体现在早期诊断,并且在酶标试剂无法检测的情况下,PCR可以检出,大大缩短窗口前,使得患者能够得到早期诊断和治疗[2]。
2.2 PCR技术在肿瘤方面的应用现阶段,肿瘤的发病分子机制还不是完全的清楚。
PCR技术在肿瘤相关基因和肿瘤病毒病因以及肿瘤相关抑癌基因的研究方面,都已经得到了非常好的成果。
根据相关的资料表明,鼻咽癌与Burkitt 淋巴瘤以及EB病毒是有关系的;泌尿道肿瘤与食管肿瘤等以及人乳头瘤病毒是有关系的[3];原发性肝癌和乙型肝炎病毒是有关联的。
通过癌基因或者基因变化的检测,人体癌的演变时,可以以肿瘤作为标志物直接应用在临床检测。
基因扩增技术在临床诊断中的应用研究
基因扩增技术在临床诊断中的应用研究基因扩增技术是生物分子学中一种重要的技术手段,它可以在短时间内扩增特定的DNA序列,从而使该DNA序列得到快速分析和检测。
基因扩增技术常用的方法有PCR(聚合酶链式反应)和LAMP(环介导等温扩增)。
在临床医学中,基因扩增技术被广泛应用于病原体、肿瘤、遗传性疾病等方面的检测与诊断。
本文将从PCR、LAMP两种技术的原理、优缺点和应用举例等方面对基因扩增技术在临床诊断中的应用研究进行探讨。
一、PCR技术在临床诊断中的应用PCR技术是一种经典的基因扩增技术,具有高灵敏度、高特异性、高复现性等特点。
在临床上,PCR技术被广泛应用于病原体检测、遗传性疾病诊断、肿瘤检测等方面。
1. 病原体检测PCR技术在病原体检测中的应用主要包括病毒、细菌和寄生虫等方面。
例如,针对新冠病毒的PCR检测已经成为COVID-19诊断的主要手段之一。
此外,PCR技术还被广泛应用于肝炎病毒、艾滋病病毒等病原体的检测与诊断。
2. 遗传性疾病诊断PCR技术在遗传性疾病诊断方面的应用主要是基于其对多态性位点的分析。
例如,在亲子鉴定、人类基因组计划的单核苷酸多态性位点的研究中,PCR技术被广泛应用。
同时,PCR技术还可以用于分析与遗传性疾病相关的基因突变。
3. 肿瘤检测PCR技术在肿瘤检测中的应用主要是基于其对特定肿瘤标志物的检测。
例如,用PCR技术扩增和检测甲胎蛋白等肿瘤标志物,可以判断患者是否患有某些肿瘤。
二、LAMP技术在临床诊断中的应用LAMP技术是一种新兴的基因扩增技术,具有等温性、高灵敏度、高特异性等特点。
在临床上,LAMP技术被广泛应用于病原体检测、肿瘤检测、慢性病诊断等方面。
1. 病原体检测LAMP技术在病原体检测方面的应用主要是基于其对核酸序列的扩增和检测。
与PCR技术相比,LAMP技术具有更高的灵敏度和特异性,可以在更短的时间内完成扩增和检测。
例如,在日本脑炎病毒等病原体的检测中,LAMP技术已经被证明具有较高的诊断准确性。
常见荧光定量PCR仪汇总
常见荧光定量PCR仪汇总常见的荧光定量PCR仪(Fluorescence Quantitative PCR Instrument)主要有以下几种:1. Applied Biosystems 7500 Fast System:该系统是ABI公司旗下产品之一,具有优秀的性能和稳定性。
其特点包括快速准确的PCR结果、高通量PCR样品处理能力以及灵活的试剂和探针选择。
该系统可应用于基因表达分析、SNP检测、病毒定量等多个领域。
2. Bio-Rad CFX96 Touch System:这个PCR仪是Bio-Rad公司的产品之一,具有高精度的温控技术和可靠的荧光检测系统。
它支持多种共轭染料和探针,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、蛋白质分析和病毒检测等多个应用领域。
3. Roche LightCycler 480 System:这是一款高通量的PCR仪,可同时处理多达384个孔的样品,适用于高通量基因表达分析和蛋白质研究。
该系统具有高分辨率荧光检测和精确的温度控制能力,可提供更准确和一致的PCR结果。
4. Thermo Fisher QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System:该PCR仪具有灵活多样的探针和染料选择,可以满足不同的研究需求。
它具有宽广的检测动态范围和高灵敏度,适用于基因表达分析、SNP分型和病毒定量等多个应用领域。
5. Qiagen Rotor-Gene Q:这是一款高通量PCR仪,可同时处理多达72个样品。
它具有快速高效的PCR扩增速度和精确的荧光检测能力,适用于基因表达分析、基因突变检测和染色体融合分析等多个研究领域。
6. Stratagene Mx3000P/QPCR System:这是Agilent Technologies旗下的产品,具有高精度和稳定性的特点。
它支持多种探针和染料,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、非编码RNA研究和表观遗传学研究等多个领域。
pcr仪四大国产品牌
pcr仪四大国产品牌PCR(聚合酶链反应)是一种用于扩增DNA片段的技术,被广泛应用于基因组学、医学研究、遗传学等领域。
在PCR实验中,PCR仪是必不可少的实验设备。
PCR仪的质量和性能直接关系到PCR实验结果的准确性和可靠性。
本文将介绍PCR仪领域四大国产品牌的特点和优势。
一、美国品牌 - Thermo Fisher Scientific作为全球领先的生命科学和诊断企业,Thermo Fisher Scientific在PCR仪领域拥有丰富的经验和出色的产品线。
该品牌的PCR仪以高精度、高效性和可靠性著称。
Thermo Fisher Scientific的PCR仪具有以下特点和优势:1. 温度控制精确度高:采用先进的PID温度控制技术,温度控制范围广,可满足不同实验需求。
2. 快速升温和降温速度:独特的热电堆技术和高效散热系统,使PCR反应快速达到所需温度。
3. 多样化的模块化设计:可根据实验需求选择不同的模块,如标配模块、大容量模块等,方便灵活。
4. 应用广泛:适用于标准PCR、实时荧光PCR、定量PCR等多种PCR实验。
二、德国品牌 - EppendorfEppendorf是一家全球领先的实验室仪器和消耗品供应商,其PCR仪产品以出色的品质和性能而闻名。
Eppendorf的PCR仪具有以下特点和优势:1. 优化的温度控制系统:采用高精度PT1000传感器和独立热电堆技术,可实现卓越的温度控制稳定性。
2. 简洁易用的操作界面:智能化的操作界面,用户可以轻松设置PCR反应参数和监控实验进展。
3. 低能耗设计:独特的节能模式和温度控制技术,降低了耗电量,节约实验成本。
4. 高品质材料和加工工艺:严格选材和工艺要求,保证PCR仪的稳定性和耐用性。
三、日本品牌 - Takara BioTakara Bio是一家专注于生物医学研究和医药领域的公司,其PCR仪产品以高品质和创新性能而著称。
Takara Bio的PCR仪具有以下特点和优势:1. 优化的热传导技术:采用特殊的导热材料和散热结构,实现快速均匀的温度变化,提高PCR反应的准确性。
PCR检测的临床应用
[临床应用]检验科基因诊断室近日引进了德国罗氏的全自动荧光定量分析仪(Lighter Cycler),并在近期内申请国家标准的PCR室。
由于PCR技术具有高灵敏度、高特异性、快速简便及直接检测致病病原体或异常基因等特点,成为基因诊断在临床应用最为广泛的技术之一。
在90年代,PCR技术在我国临床诊断曾得到广泛应用,但由于PCR产品生产产家的良莠不齐,PCR技术本身的特点对于实验条件提出特殊的要求,造成各种假阴性或假阳性结果,反而给临床诊断带来困难和错误。
目前荧光PCR的兴起以及标准试验室的认证为PCR的应用显示出更为光明的前景。
一、早期诊断:免疫学诊断主要是抗原抗体反应,应用于临床通常在体内产生抗体以后,许多病原体的抗体产生存在较长的“窗口期”,不利于对疾病的早期诊断;而PCR方法直接检测病原体的DNA/RNA,能大大缩短“窗口期”。
以HCV为例,免疫学检测的“窗口期”平均长达70天,而荧光PCR可将“窗口期”缩短59天,显然有利于疾病的早期诊断。
二、药物疗效观察:对原体的药物治疗中,免疫学指标的变化通常比较滞后出现,且受个体差异影响较大,从而对临床判断难以及时提供直接证据;而荧光定量PCR检测可直接反映病原体滴度是否受药物治疗发生变化,从而为药物疗效观察提供直接依据,以供治疗方案参考;同时药物治疗中可能引起的基因变异等情况更依赖核酸检测提供直接证据。
三、病情判断和预后评价:评估受侵器官或组织的炎症发生程度以及是否发生病变;长时间机体病毒高水平的患者尤其是慢性病患者往往预后不好。
因此对病原体的定量PCR检测对病情和预后评估均有参考意义。
四、加快疾病的诊断:许多病原体到目前为止仍旧依靠传统的细菌培养作为诊断手段,操作繁琐费时。
以结核杆菌为例,传统培养法需要1-2个月,而荧光PCR可将检测时间缩短至半天,能更及时地为临床提供诊断依据。
五、疾病的发病监控:许多病原体可以感染人体后整合入细胞内成为整合型,而一旦机体免疫力下降等又重新进入活动期并引致发病,临床上希望通过检测病原体基因的数量变化并结合临床表现找出其活动以及是否引起发病的规律,荧光定量PCR可以为此提供直接证据。
PCR仪不同分类的对比
PCR仪不同分类的对比PCR(聚合酶链反应)是一种用于扩增DNA(脱氧核糖核酸)的技术。
PCR仪是 PCR 实验中不可或缺的设备。
PCR 仪种类繁多,根据不同的特点和实验需求,可以将 PCR 仪分为以下几类。
1. 常规 PCR 仪常规PCR 仪是最早的PCR 仪,其主要特点是功率稍小,不适用于大规模扩增。
其定温功能常常采用两步式升温,程控温度区间为4-99°C,最高可达100°C。
常规 PCR 仪最常见的是使用96孔板,但也有少量供应48孔、384孔板的型号。
常规 PCR 仪适用于小规模试验和学术研究,其优点是设备简单,价格便宜,维修方便。
不过,由于功率小,不能满足高通量的扩增。
2. 实时 PCR 仪实时 PCR 仪是常规 PCR 仪的升级版,是目前应用最广泛的 PCR 仪型号。
与常规PCR 仪相比,实时PCR 仪功率大、扩增速度快,精确度高,适用于高通量扩增。
实时 PCR 仪不仅可以监测反应进行,还可以在反应进行中以定量方式测定扩增物的量和浓度。
其工作原理是在反应进行中,通过测量荧光信号来测定扩增产物的量。
在定量PCR(qPCR)实验中,荧光群体的荧光强度与样品中目标分子的浓度成正比,荧光信号可实时在反应过程中收集,并使用软件来分析和研究反应的结果。
实时 PCR 仪可分为相对定量和绝对定量两种:相对定量是以对照样本中的目标分子浓度作为基准,与待检样本中的目标分子浓度比较,用来研究基因在不同组织、不同阶段或不同环境下的表达量差异;绝对定量是基于标准曲线法,利用标准品进行定量,得出目标分子的精确浓度。
3. 数字 PCR 仪数字 PCR 仪是一种新型 PCR 仪,它采用了数字化技术,可以更加准确地定量扩增产物。
数字 PCR 仪工作原理是将反应混合液分散到微型液滴中,每个微滴只有一个扩增产物分子。
之后在 PCR 反应中,每个微滴中的分子会自行扩增成百万甚至亿级别的扩增产物,通过计数液滴个数及所含扩增产物的分子数,就可以得出目标分子在样品中的绝对量。
各款荧光定量PCR仪的性能比较
各款荧光定量PCR仪的性能比较本人从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作,用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪,如ABI5700,ABI7700,ABI7000,ABI7300,ABI7500,MJ opticon,MJ opticon2,bio-rad I Cycler,LightCycler1.5,roter-gene3000,Stratagene Mx3000P,line—gene等等。
这种仪器各有各的特点,但都存在不足之处。
ABI公司的荧光定量PCR仪产品比较多,成系列,但目前而言ABI5700和ABI7700不能实时在线地检测荧光,因而已经退出历史舞台,尤其是ABI7700,不但很贵,而且采用苹果机电脑,使用很不方便。
ABI7000目前也已经淘汰,我用的这台仪器老出问题,曲线极不光滑,但同样的反应体系在国产机杭州博日line-gene上曲线非常好,在ABI7500上曲线也很光滑,所以,本人估计是ABI7000设计上有不足之处.而且卤钨灯特别容易坏,在南方,我们实验室平均5个月换一个,配件容易坏,后续使用成本就会高一些。
现在市场上的ABI7300就是ABI7000的简单升级版,硬件设计上几乎没有改变,只是换过几个性能更好的配件,软件有所升级。
另外我个人感觉ABI7900(ABI公司第二代产品)有些华而不实,价格应该是所有荧光定量PCR仪中最贵的,硬件上跟ABI7700差不了太多,但性能指标还不如ABI7500(ABI公司第三代产品),硬件设计上也不如ABI7500合理。
所以这个型号的仪器,谁买了,用的时候会不呼上当.ABI7500是ABI公司最成功的产品,各方面性能都不错,虽然加热模块还是有一些边缘效应,但使用中央的孔位效果可以得到保证,在96孔板使用中间的48个孔位,结果都能得到保证。
总的来说,ABI公司在荧光定量领域上还是做出很多贡献的,其仪器在科研上还是可以用的,但由于硬件设计上的缺陷,需要额外的ROX染料进行校正,并且占用了一个检测通道。
常见临床PCR扩增仪器品牌,收藏!
常见临床PCR扩增仪器品牌,收藏!
分⼦⽣物学的快速发展,使分⼦诊断技术进⼊常规临床实验室的应⽤技术,荧光PCR平台、芯⽚平台、测序平台、质谱平台等越来越多的分⼦诊断实验项⽬应⽤于临床,覆盖疾病的早期诊断、疗效评估、药物选择、优⽣优育等各个领域,不同的分⼦诊断检测平台具有不同的特点、使⽤范围不同,但⼤多分⼦诊断项⽬均需要进⾏PCR的反应过程,本⽂为⼤家梳理了已在国内上市的国产和进⼝临床基因扩增仪器的清单。
聚合酶链式反应(PCR)是20世纪80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术,其具有特异、敏感、产率⾼、简便、快速、重复性好、易⾃动化等突出优点。
常规PCR是PCR反应的最基本类型,能给出定性结果,并且需要PCR结束后的DNA检测或观察步骤(杂交、电泳等)。
如下表1-12号PCR扩增仪,⼤多只能进⾏PCR的标准扩增过程⽆法直接报告结果,需要借助杂交、电泳或者测序等⽅式来进⾏结果的判定,因此此类仪器多属于⼆类医疗器械管理,⽽荧光定量PCR仪等归属于国家三类医疗器械管理范围。
荧光定量PCR仪器⽬前市场上以宏⽯SLAN、雅睿、达安、天隆、博⽇、卡尤迪、安杰思等为主流设备,市场上⼤部分的荧光PCR检测试剂多基于上述平台开发⽽成,此外优思达、博奥、博晖等品牌为全封闭型的仪器,搭载⾃有的检验项⽬占据⼀定的市场份额。
以下为不完全统计数据:
进⼝PCR设备多以其稳定性、重复性好⽽⼴受操作⼈员的喜爱,其中以罗⽒LightCycler 480、ABI7500、ABI7300、CFX96以及GeneXpert等系统的市场占有率最⾼,是进⼝PCR仪器的热门品牌。
以下是不完全统计数据:。
临床pcr临床应用
临床pcr临床应用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是一种能够在体外扩增DNA的方法,已经成为生物医学领域中不可或缺的技术手段之一。
PCR技术的应用范围非常广泛,其中临床PCR应用更是备受关注。
本文将重点介绍临床PCR技术的应用情况和发展趋势。
一、临床PCR技术在疾病诊断中的应用1.感染性疾病的检测临床PCR技术可以快速、准确地检测各种病原体,包括病毒、细菌、真菌等,对于感染性疾病的诊断具有重要意义。
比如,PCR技术在乙肝病毒、艾滋病病毒、流感病毒等病原体的检测中发挥着不可替代的作用,有助于及时采取相应的治疗措施。
2.遗传性疾病的筛查临床PCR技术在遗传性疾病的筛查和诊断中也有着广泛的应用。
通过PCR技术可以对某些遗传性疾病的致病基因进行检测,帮助医生做出准确的诊断,为患者提供个体化的治疗方案。
3.肿瘤的早期诊断和预后评估临床PCR技术在肿瘤的早期诊断和预后评估中扮演着重要角色。
通过检测肿瘤相关标记物的PCR扩增产物,可以帮助医生及早发现肿瘤的存在,评估肿瘤的恶性程度,并根据检测结果选择最合适的治疗方案。
二、临床PCR技术在个体化治疗中的应用1.药物敏感性检测临床PCR技术可以帮助医生快速筛查患者对某些药物的敏感性,从而避免不必要的药物治疗和药物不良反应。
通过PCR技术检测患者的药物代谢基因型,可以为个体化用药提供依据。
2.靶向治疗的指导对于一些特定类型的肿瘤,如HER2阳性乳腺癌等,临床PCR技术可以帮助医生确定靶向治疗的指导方向。
通过检测肿瘤细胞的突变情况,为患者选择最有效的靶向药物,并监测治疗效果,提高治疗的精准度和有效性。
三、临床PCR技术在预防医学中的应用1.疫苗研究和监测临床PCR技术可以用于疫苗研究和疫苗接种效果的监测。
通过PCR技术检测疫苗接种后人体免疫应答的情况,评估疫苗的有效性和安全性,为疫苗的研发和推广提供科学依据。
2.传染病的疫情监测在传染病的疫情监测中,临床PCR技术可以帮助医生快速、准确地检测患者体内的病原核酸,掌握疫情的传播趋势和变化规律,及时采取控制措施,有效防止疫情的扩散。
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍分子生物学领域是现代生命科学的重要分支之一,它研究的是生物分子层面的生命过程,旨在深入揭示生命的本质和机制。
而在分子生物学研究中,实验室仪器则是不可或缺的工具,它们不仅可以帮助研究者进行实验操作,还能够提高实验结果的可靠性和精度。
本文将为大家介绍分子生物学领域常用的实验室仪器。
一、PCR扩增仪PCR(聚合酶链式反应)扩增技术是分子生物学领域中最常用的实验技术之一,是通过对核酸单链进行不断反复的扩增,从而获得足够多的样品用于后续的实验研究。
PCR扩增仪是一种能够精确控制温度并产生稳定温度的设备,它可以通过快速升温和降温的方式对PCR反应的反应体系进行加热和冷却,以满足PCR反应各个步骤所需的不同温度条件。
根据不同的实验需求,PCR扩增仪通常有单块、双块和四块等不同规格型号。
二、电泳仪电泳是一个常见的探测和分离生物分子的方法,尤其在DNA和RNA分子的研究中应用广泛。
电泳仪则是进行电泳实验的设备。
电泳仪根据不同的实验需求、对样品大小和数量的要求,可以选择垂直电泳仪、平板电泳仪、毛细管电泳仪、聚丙烯酰胺凝胶等不同类型的电泳仪。
其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是目前应用最广泛的电泳仪之一,它可以以高效、稳定和可重复的方式对生物分子进行分离、检测和纯化。
三、荧光定量PCR仪荧光定量PCR(实时PCR)技术是PCR技术的一种延伸,它通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化动态监测扩增产物的累积情况,从而实时定量测定PCR反应产物的含量。
荧光定量PCR仪是荧光定量PCR技术实验的核心设备,它通过荧光信号的强度或增长速率来定量PCR反应物质的含量。
荧光定量PCR仪可根据实验数量和复杂程度的不同分为单通道和多通道两种类型。
四、显微镜生物显微镜是分子生物学领域中经常使用的设备,它主要用于观察、研究和记录细胞和组织样品的结构和形态特征,以及细胞间和分子间的相互作用和动态过程。
在生物领域中广泛应用多种类型的显微镜如荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜等。
pcr扩增仪的原理特点应用论文
PCR扩增仪的原理特点应用论文引言PCR(Polymerase Chain Reaction)扩增技术是一种基于酶的体外DNA合成技术,是分子生物学领域中最重要的实验方法之一。
PCR扩增仪作为PCR技术的关键设备,在分子生物学和遗传学研究中发挥着重要作用。
本文将介绍PCR扩增仪的原理、特点和应用。
PCR扩增仪的原理PCR扩增仪基于聚合酶链式反应原理实现DNA的体外扩增。
聚合酶链式反应是一种无需模板DNA的体外复制方法,能够通过酶的作用,扩增特定的DNA序列。
PCR扩增仪主要包括以下三个步骤: 1. 变性(Denaturation):将DNA模板加热至高温,使双链DNA解链成单链; 2. 退火(Annealing):降低温度,使引物与模板DNA的单链进行互补结合; 3. 延伸(Extension):在合适的温度下,聚合酶作用下,引物在模板DNA上延伸合成新的DNA链。
通过不断重复这三个步骤,可以在短时间内扩增特定DNA序列。
PCR扩增仪通过精确控制温度和时间,实现PCR扩增反应的自动化、高效化。
PCR扩增仪的特点PCR扩增仪具有以下特点: - 精确控制温度:PCR扩增仪能够精确控制反应体系的温度,在不同步骤之间快速切换,满足PCR反应的温度要求。
- 可编程控制:PCR扩增仪通常配备可编程控制器,用户可以根据需要设置不同的温度和时间参数,满足不同扩增反应的要求。
- 高温均匀性:PCR扩增仪内部采用特殊的加热系统和温度传感器,能够实现高温均匀性,确保PCR反应的稳定性和可靠性。
- 自动化操作:PCR扩增仪具有自动化的操作功能,可以自动完成变性、退火、延伸等步骤,无需手动干预,提高实验效率。
- 安全性:PCR扩增仪在设计上考虑了安全因素,如过高温度时的自动停止功能,防止设备和实验物品损坏。
- 小型便携:PCR扩增仪通常具有小型便携的特点,方便携带和移动,适用于实验室和野外等不同环境。
PCR扩增仪的应用PCR扩增仪在分子生物学和遗传学研究中具有广泛的应用。
三种PCR仪的特异性及灵敏度评价
三种PCR仪的特异性及灵敏度评价曾争;刘丹;公维波;斯崇文【期刊名称】《医疗卫生装备》【年(卷),期】2006(027)010【摘要】目的:评价ABI 7000、7300和7500型PCR仪的特异性及灵敏度.方法:随机双盲对照试验,选择HBsAg、HBVDNA阳性和阴性血清各30例,其中,阳性和阴性组各选3例重复检测.结果:阳性组30例均为阳性;阴性组30例均为阴性;但HBVDNA含量在各型PCR仪检测值有一定的差异,其相关系数分别为:ABI 7000-ABI 7300为0.89;ABI 7000-ABI 7500为0.89;ABI7300-ABI 7500为0.98;而以ABI 7300型检测值较高,其次为ABI 7000型,最低为ABI 7500型,其中,在低拷贝(104copies/ml)情况下,三型PCR仪结果无显著差异(p>0.05),但在中拷贝(106copies/ml)、高拷贝(108copies/ml)情况下,三型PCR仪的结果均有显著性差异(p<0.05).结论:三型实时PCR仪间的检测值有一定的差异,提示不同型号仪器的检测值不能相互取代,因此.对于同一患者的HBVDNA定量监测及对抗病毒治疗疗效评价时,必须用同一型号的检测仪器(系统).【总页数】3页(P61-63)【作者】曾争;刘丹;公维波;斯崇文【作者单位】北京大学第一医院,北京市,100034;北京大学第一医院,北京市,100034;广州达安生物技术有限公司,广州市,510032;北京大学第一医院,北京市,100034【正文语种】中文【中图分类】TH776【相关文献】1.同一试剂在三种荧光定量PCR检测仪的应用效果及评价 [J], 王火生;李美忠;林萍2.TPPA、ELISA、RPR三种方法检测梅毒的灵敏度及特异性对比 [J], 贾伟;褚福禄;张杰;邹建文MP与FQ-PCR技术检测HBV DNA的特异性和灵敏度比较 [J], 邓正华;晏丽;黄远帅;彭瑛;温先勇4.三种溶剂特异性酯酶染色的灵敏度比较 [J], 周建中5.柑桔黄龙病常规PCR检测4对引物的特异性和灵敏度 [J], 高玉霞;卢占军;钟八莲;易龙;赖特明;刘志芳;肖珍;夏宜林因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
几种常用PCR仪的用途及介绍
几种常用PCR仪的用途及介绍普通PCR仪一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。
如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。
主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。
主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。
梯度PCR仪一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。
因为被扩增的不同的DNApian段其最适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。
主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。
在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。
正真的梯度,是每一排管都有精确的加热控温探头,2009年为止只有美国ABI公司可以做到。
其他的都是从两头的热传递来设计控温。
梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。
实时荧光定量PCR仪在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。
其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。
扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。
荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。
当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。
单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。
多通道利于做多重PCR,实现一次检测多种目的基因的功能。
实时荧光定量PCR仪主要应用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等。
原位PCR仪(有些品牌的PCR仪具有普通PCR、梯度PCR、原位PCR的功能,通过替换模块进行多用途开展实验工作)是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。
ABI 9700型PCR扩增仪的性能特点及参数
一、9700型PCR扩增仪的性能特点:1.直观的图形界面,最灵活的研究模式。
2.标准的0.2ml模式和可更换的样品基座提供了优异的性能和耐用性。
3.一系列可更换的样品基座包括:单槽60孔0.5ml基座和单槽0.2ml基座,以及双槽96孔基座模式。
4.9700型网络软件包可以同时控制多台机器。
二、PCR仪使用环境与工作条件:1.9700可在5℃-40℃的环境下使用,最适环境温度为15℃-30℃,严禁在低于5℃的环境下开机。
环境湿度范围为20-80%。
2.9700的电源必须电压稳定,范围在220±5V,而且接地良好(零线与地线之间的电压应当小于3V)。
9700电源插头必须使用带有地线的三线插头,电压的波动及不良的接地都会直接影响9700的使用寿命。
3.拆卸样品基座时应将仪器的电源关闭,并将电源插头拔下,拆卸要小心,以免不正确的操作损坏样品基座。
4.9700的左边、右边和底部有通风口,为保持通风口的通畅,左、右及后三面必须离开墙壁10-15cm,不要在仪器的周围堆放杂物。
产品名称产品编号产品规格原产地价格全新ABI9700型PCR扩增仪YQJH-002单槽(96孔)美国询价二手ABI9700型PCR扩增仪YQJH-001单槽(96孔)美国询价二手ABI9700型PCR扩增仪YQJH-002双槽(96孔×2)美国询价三、产品技术参数:控制精确度:±0.25℃(35℃-99.9℃)温度范围:4℃-99℃温度提示:经计算机计算的实际样品温度,精确到0.1℃升降温速度: 3.5℃/秒,55℃-95℃温度范围内静态样品基座温度均一性:±0.5℃,35℃-100℃30秒温度精确度:±0.25℃,35℃-100℃范围热盖:维持105℃温度,满足无油操作PCR扩增升降温重现性:任意温度达到时间误差小于5秒体积:长:40.6cm(16")宽:30cm(12")高:26cm(10")主机重:7.3kg,96孔样品基座重:3.2kg。
三种PCR类型及应用
三种PCR类型及应用多种PCR技术类型:1. 实时定量PCR(qPCR)实时定量PCR是一种检测PCR反应过程中的特定DNA序列的技术。
它可以实时监测PCR反应过程中的产物累积情况,通过检测DNA结合荧光染料的信号强度来定量分析起始模板的含量。
由于其高灵敏度和快速结果,实时定量PCR 被广泛应用于基因表达分析、微生物检测、病毒定量测定等领域。
2. 数字PCR数字PCR是一种基于微小级别的PCR技术,通过将PCR分成数百万份独立的反应来进行定量分析,从而实现对起始模板数的精确计数。
与传统PCR技术相比,数字PCR具有更高的灵敏度和准确性,尤其适用于低拷贝基因的检测和分析。
数字PCR广泛应用于检测稀有突变、检测微生物DNA和病毒DNA等领域。
3. 表面增强拉曼散射PCR表面增强拉曼散射PCR结合了PCR技术和拉曼光谱学,通过在PCR过程中引入金纳米颗粒来增强PCR产物的拉曼信号,从而实现对PCR产物的多重检测和分析。
表面增强拉曼散射PCR技术具有高速、高灵敏度和高特异性的特点,适用于分子生物学、生物医学和环境监测等领域。
不同类型PCR的应用:1. 实时定量PCR在基因表达分析中的应用实时定量PCR可以准确、快速地测定特定基因的表达水平,广泛应用于基因调控研究、药物筛选、疾病诊断等领域。
通过实时定量PCR技术,研究人员可以量化分析基因在细胞、组织或生物样品中的表达情况,从而深入了解基因的功能和调控机制。
2. 数字PCR在稀有基因检测中的应用数字PCR技术可以对样本中稀有基因的存在进行准确计数,适用于肿瘤标志物检测、胎儿DNA检测等需要高灵敏度和准确性的应用。
通过数字PCR技术,研究人员可以对样本中的特定基因进行精确检测,为疾病诊断和生物医学研究提供有力的支持。
3. 表面增强拉曼散射PCR在环境监测中的应用表面增强拉曼散射PCR技术可以实现对微生物DNA的可视化检测,广泛应用于环境监测和水质检测等领域。
ABI 7700、7500荧光定量PCR仪性能评价
ABI 7700、7500荧光定量PCR仪性能评价杜琼;倪滔;刘小琦;马文娅;夏奥【期刊名称】《实用医院临床杂志》【年(卷),期】2009(006)001【摘要】目的对美国ABI 7700、7500荧光定量PCR仪的主要性能指标进行评价.方法按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准,对20份标本(HBV-DNA)定量检测,评价两种仪器的精密度、准确性、线性、可比性、灵敏度等指标.结果精密度:ABI 7700批内变异系数(CV)为3.67%~5.58%,批问为4.46%~6.53%;7500批内CV为4.09%~5.61%,批间为4.73%~6.96%.准确性:与标准质控物比较,相对偏差7700为0.93%,7500为2.97%.线性:ABI 7700 r=0.999,7500 r=0.995.灵敏度:ABI 7700、7500能检测到的最低HBV-DNA浓度均为1000U/ml.两种仪器的可比性:相关系数为0.994,直线回归方程为.y=1.0694x-0.1372.结论两种荧光定量PCR仪各种指标性能均良好.【总页数】2页(P63-64)【作者】杜琼;倪滔;刘小琦;马文娅;夏奥【作者单位】四川省人民医学院检验科,四川,成都,610072;泸州医学院医学检验系,四川,泸州,614000;四川省人民医学院检验科,四川,成都,610072;四川省人民医学院检验科,四川,成都,610072;四川省人民医学院检验科,四川,成都,610072【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.ABI7500 HBV-DNA检测系统性能评价 [J], 胥明勇;朱华强2.基于NP968核酸提取仪(磁珠法)的实时荧光定量PCR系统检测HBVDNA的性能评价 [J], 王建伟;孙嘉峰;黄毅3.罗氏LightCyclerNano荧光定量PCR仪性能评价 [J], 张宇;李冬;戴燕;郑为超;万海英4.ABI 7500与TL 988实时荧光PCR仪的性能评价 [J], 潘强龙;周成林;杨先知;谢国良;崔大伟5.ABI7300实时荧光定量PCR仪性能评价 [J], 程波因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
实验室pcr仪的用途
实验室pcr仪的用途实验室PCR仪(聚合酶链反应仪)是一种广泛应用于分子生物学研究的仪器,它能够在短时间内扩增出少量DNA序列,并通过PCR产物进行进一步的分析和应用。
PCR仪在分子生物学和生物医学研究中具有广泛的应用领域。
首先,PCR仪在基础生物学研究中具有重要作用。
PCR技术的发展使得科学家们能够更加深入地研究生物分子和基因的功能。
通过PCR扩增目标DNA序列,可以获得足够多的样本,从而方便进行相应的实验和分析。
例如,PCR技术可以用于鉴定和检测基因突变、研究分子遗传学、推断基因表达模式等等。
同时,PCR还可以应用于人类遗传疾病的诊断和预测,例如通过PCR扩增特定基因片段进行唐氏综合征的检测。
其次,PCR仪在医学诊断和临床实验室中也是一种重要的工具。
临床实验室通常需要对临床样本(如血液、尿液、组织等)中的病原体进行检测,以帮助医生准确诊断疾病和制定治疗方案。
PCR技术的高灵敏度和高特异性使其成为一种重要的病原体检测方法。
通过PCR扩增目标病原体的核酸序列,可以快速、准确地检测出微量病原体或病原体核酸片段,例如细菌、病毒、真菌等。
此外,PCR技术还可以应用于免疫基因检测、肿瘤基因突变的筛查等,为临床诊断提供了重要的实验依据。
此外,PCR仪还在法医学和法学研究中有重要应用。
法医学通过PCR技术对犯罪现场或其他相关样本中的DNA进行分析,以确定嫌疑人的身份或者通过DNA特征鉴定骨骸的来源等。
PCR技术在法学和公共安全领域的应用,对犯罪侦查和司法公正产生了深远的影响。
另外,PCR仪还可以在生物工程和农业科学领域发挥作用。
基因工程中,PCR 扩增被用来制备大量目的基因。
在基因克隆、基因测序、基因工程研究等领域中,PCR技术是必不可少的。
在农业科学中,PCR技术可以帮助研究员对农作物进行基因分型和基因组测序,以了解农作物的遗传特性和基因多样性,为优化农作物品种提供基础。
此外,PCR仪还用于环境监测和食品安全领域。
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1 仪 器 和方 法
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中 国 医师 杂 志
20 0 2年 8月 第 4卷 第 8期
83 9
三 种 常 见 型 号 P R扩 增 仪 的临 床应 用 评 价 C
深圳 市 盐 田 区人 民医院检 验 科 ( 东 深圳 广 588 ) 10 1 蒋 明
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11 仪 器 ・
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沉 积 中扮 演 重 要 角 色 。 本组 资 料 研 究 了 T F—t、L一1 H L 1 —C G 3I , 、 A、N、V 在慢 性 肝 病 中 的 变 化 规 律 及 其 对 肝 纤 维 化 的 诊 断 价
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聚合 酶链 式 反 应 ( C 是 由美 国 Ct 公 司 人 类 P R) eu s 遗 传 研究 室 Mu i B等 人 于 18 首 创 的一 种 体 外 li lK 95年 模 拟天 然 D A复 制 过 程 的 核 酸 扩 增 技 术 … 。此 项 技 N 术发 明 以来 , 已 广 泛 应 用 于 生 命 科 学 的 各 个 领 域 。 现 它 不 仅用 于 基 因 的分 离 、 隆和 核 酸序 列分 析 , 克 还可 用