特异切割苹果锈果类病毒的核酶基因的克隆和转录物的体外活性测定

梨树组织中的苹果锈果类病毒原位RT-PCR检测

关键词梨树，果锈果类病毒，Ｄ苹ｃＮＡ探针，原位Ｒ —ＣＴＰＲ
ＤｅｅｔｏｆｐｌｃｒＳｉｒｉａｙｉｉｕＲＴ— ＣＲｔｃｉｎｏＡｐｅＳａｋｎＶｉｏｄｉＰｅｒｂｓｔｎｎＰ
ＺｈｏＹｉＮｉｉｎｉａｎｇｕＪａｘｎ
新思路、技术、方法新新
ＮｏｅｉｋｎｖｌＴｈｎｉｇ＆Ｔｅｈｏｏｙｃｎｌｇ
梨树组织中的苹果锈果类病毒原位Ｒ —ＣＴＰＲ检测
赵英牛建新
石河子大学农学院园艺系，河子，３０３石８２０通讯作者，１５１３ｃｒ￣ｘ０＠６．ｎｏ
ＶｒｉＳＶ）ａｅｅｎａｌｅｅｐｃｆａｆｒｒｏｄｆｒｎｅｒａｌ．ｈＶｅｉｃｉｄｏＳｄｈｖｅｂｍｐｉｄｙｎｅｉｃｉｏｐｉｍｉｅｅｔａｓｍｐｅＴｅＳｄｓｃｉｆｂｏｓｉｐｒｍｅｆｒｐｓＡＳｐｆｉ
ＡｂｓｒｃＴｏａＡｓｉｏａｅｉｈｔｄｄｅｉｎｄｂｙｏｒｅｖｓＳｅｉｌａｍｅｔｆｐｌｃｒＳｎｔａｔｔｌＲＮｗａｓｌｔｄｕｓｎｇｔｅｍｅｈｏｓｇｅｕｓｌｅ．ｐｃａｇｎｓｏＡｐｅＳａｋｉｒｆ
维普资讯
分子植物育种，０８，６卷，４期，８２８８页２０年第第第１— １
Ｍｏｅｕａｌｎｅｄｎ，０８Ｖｏ．，．，１ — １ｌｃｌｒａｔＰＢｒｅｉｇ２０，１Ｎｏ４８２８８６

新疆梨树上苹果锈果类病毒的检测与全序列分析

Ｔｈｅｎｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｉｒｐｔｉｏｎ — ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＲＴ— ＰＣＲ）．【Ｒｅｓｕｌｔ】
关键词：梨树；苹果锈果类病毒（ＡＳＳＶｄ）；检测；序列分析
中图分类号：￥４３６．６１２．１
文献标识码：４３３０（２０１３）０１ — ００９４— ０６
ＤｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄＳｅｑｕｅｎｃｅＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅＡｐｐｌｅＳｃａｒ
ｌｏｗｍｏｌｅｃｕｌｒａｗｅｉｇｈｔＲＮＡｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｔｅｎｄｅｒｌｅａｖｅｓａｎｄｓｈｏｏｔｓｏｆｐｒｅｃｏｃｉｏｕｓｐｅｒａｔｒｅｅｓｗｈｉｃｈｗｅｒｅ
ｃｏｌｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍＮｏ．２２３Ｆａｒｍｉｎｇ＆ＨｅｒｄｉｎｇＲｅｇｉｍｅｎｔｉｎＨｅｊｉｎｇＣｏｕｎｔｙ．Ｘｉ￣ｉａｎｇＵｙｇｕｒＡｕｔｏｎｏｍｏｕｓＲｅｇｉｏｎ．
ＲＮＡ阳性信号主要位于叶片叶肉组织的细胞核内。【结论】通过序列分析比对，各寄主上的ＡＳＳＶｄ分离物核

利用两种方法检测苹果锈果类病毒

维普资讯
抠物镰
・
第３卷第４２Ｏ）４期（Ｏ８
１２３・
ＰＬＡＮＴＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮＶｏ１３４Ｎｏ．（００．４２８）
利用两种方
苹果锈果类病毒
８２０）３０３
赵英，牛建新
类病毒（ｉｉ）是一种最小的具有侵染性的致病ｖｏｒｄ
病原，由２７７是４￣３５核苷酸组成的单链、共价闭合环
型、斑型和绿点型［。感病的梨树大多数表现为隐环９］性，数为畸形果。该病在我国甘肃、少山西、南、河山东等地发生较多，主要表现在金冠、冠、秦富士等品种
ｔｔｔＤＮＡｏｂａｅｉｉｅａｐｃｆｃｈｈａｈｅｃｐｒｅｗｓｓｎｓｔｖｎｄｓｅｉｉ，ｙｂｒｄｉｉｇｏｎｙｗｉｈｈｔａＮＡｒｍＳＳＶｄｉｅｔｄｓｏｔｉｚｎｌｔｔｅｏｔｌＲｆｏＡｎｆｃｅｈｏｓ，
ＲＮＡ杂交。
关键词Ｒ — Ｃ地高辛标记探针；ＡＳＴＰＲ；ＳＶｄ检测中图分类号Ｓ４６６１１；３．１３．１．９Ｓ４２４
ＤｅｅｔｏｆＡｐｐｌｃｒｓｉｉｏｄｕｉｇｔｅｈｄｔｃｉｎｏｅｓａｋｎｖｒｉｓｎｗｏｍｔｏｓ
ｐｅｆｕｔｃｉｋｅｖｒｉ（ｌｒｉｒｎｌｉｏｄＡＦＣ）ａｄＡｐｐｅｄｍｐｅｆｕｔｖｒｉ（ＶｄｎｌｉｌｒｉｉｏｄＡＤＦＶｄ．）

苹果中乙烯响应转录因子基因的克隆及序列分析

苹果中乙烯响应转录因子基因的克隆及序列分析蔡玉迎1，宫钰1，王娟2，于立帅2，陈广艳2，成妮妮1（1.临沂大学生命科学学院，山东临沂 276005；2.临沂大学农林学院，山东临沂 276005）摘要：乙烯响应因子(AP2/ERF)转录因子家族是植物中广泛存在的一类转录因子，它们对植物的生长发育、次生代谢过程和植物的抗胁迫能力具有重要的调控作用。

通过对苹果中响应乙烯的转录因子(ERF)家族进行分析，选择具有代表性的转录因子基因进行设计引物。

以苹果果皮为试验材料，从中分离出响应乙烯的转录因子1、2、3、5的基因，并对其进行序列比对分析，发现这4个基因序列差别较大，但具有很保守的共同序列，初步确定其功能上有一定的相关性。

关键词：AP2/ERF；苹果；转录因子；乙烯疾病、高温、干旱、盐碱等环境胁迫对植物的生长发育、器官形成等过程具有不利的影响。

研究发现，当植物在生长过程中被环境胁迫刺激后，就会激活植物中含有的气体激素信号途径，像植物激素脱落酸、赤霉素、细胞分裂素、乙烯等，它们在植物体内的含量虽然不高，但却在植物的生长发育和环境适应中起着至关重要的作用[1,2]。

近年来，随着测序技术的发展和研究的深入，许多物种的基因组已经完成测序，例如拟南芥等模式生物，在基因组序列测定中发现了大量的转录因子编码基因，如AP2/ERF是植物中特有的转录因子，属于超家族因子，参与花[3]、果实[4]和种子发育[5]等植物生长发育的多种生物学过程，在植物抵抗干旱[2]、高盐[6]、低温[1]等非生物胁迫和真菌、细菌、病原体等生物胁迫方面有重要作用[7,8]，是目前研究的热点之一。

它们对植物的生长发育、次生代谢过程和植物的抗胁迫能力具有重要的调控作用。

乙烯作为一种激素能促进植物的成熟，乙烯响应因子在生长发育、器官形成、抗病虫害以及对胁迫环境的响应等方面具有重要作用[9,10]。

近年来，乙烯的研究已经延伸到下游转录因子的调控机制，转录因子在植物的次生代谢过程中参与多步反应，因而也具有重要的调控作用。

苹果锈果类病毒山东栖霞分离物的分子鉴定及序列分析

ＡＳＳＶｄ序列（７９）比，研究所得到的ＡＳＸ１６６相本ＳＶｄ序列变异较小，对比较保守。相
关键词
苹果锈果粪病毒；检测；序列分析
文献标识码：ＡＤＩ１．９９ｊｉｒ０２ —１４．０１０．１Ｏ：０３６／．ｓＬ５９５２２１．２０９ｓ
ＴｈｅｅｔｏｅｕｔｅｏｓｒｔｄｔａｏｈｏｈｗｏｓｍｐｅｒｎｅｔｄｗｉＳｅｄｔｃｉｎｒｓｌｄｍｎｔａｅｈｔｂｔｆｔｅｔａｓｌｓｗｅｅｉｆｃｅｔＡＳＶｄｈ．Ａｆｅｈｗｏｉｏａｅｔｒｔｅｔｓｌｔｓ
中图分类号ａｔｏｎｅｕｅｅａａｌｓｓｏｈｅＡｐｐｌｃｋｉｌｃａｄｎｔｆｃｉｎａｄｓｑｎｃｎｙｉｆｔｅｓａｒｓｎ
ｖｒｉｓｌｔｄｆｏ０ｉｉｎＳａｄｎｒｖｎｅｉｏｄｉｏａｅｒｍｘａｉｈｎｏｇＰｏｉｃ
ＡｂｔａｔＴｗｏｓｍｐｅ，ｃｌｃｅｒｍｘａｉｈｎｏｇＰｏｉｃ，ｗｅｅｄｔｃｅｏｐｅｓａｋｎｖｒｉｓｒｃａｌｓｏｌｔｄｆｏＱｉｉｎＳａｄｎｒｖｎｅｅｒｅｅｔｄｆｒＡｐｌｅｒｓｉｉｏｄ
（．Ｃｌｇｆｇｏｏｎｉｔｈｏｏｙ，Ｃｉｇｉｕｔｒｌｎｖｒｉ，Ｂｉｎ１０９，Ｃｉａ；１ｏｌｅｏＡｒｎｍｙａｄＢｏｅｎｌｅｃｇｈｎＡｒｌａｉｅｓｔｅｉｇ０１３ｈｎａｃｕＵｙｊ２ｔｔＫｅａｏａｏｙｆｒｉｌｇｌｎｓａｅｎｎｅｔｅｔ，Ｉｓｉｔｏｌｎｒｔｔｎ，Ｃｉｅｅａｅｆ．ＳａｅｙＬｂｒｔｒｏｏｏｙｏＰａｔｅｓｓｄＩｓｃＰｓＢｆＤｉａｓｎｔｕｅｆＰａｔｏｅｉｔＰｃｏｈｎｓＡｃｄｍｙｏＡｒｕｔｒｌｃｅｃｓｅｉｇ１０９，Ｃｉａ３ｉｉＤｖｌｐｎｕｅｕｏｒｉＩｕｔｇｉｌａｉｎｅ，Ｂｉｎ０１３ｈｎ；．ＱｘａｅｅｏｍｅｔｒａｆＦｕｔｎｓｙ，Ｑｘａ２５０，Ｃｉ）ｃｕＳｊＢｄｒｉｉ６３０ｈｎａ

利用内标为基础的苹果锈果类病毒RT-PCR检测技术

，ＬＩＮａｎ，ＷＡＮＧＹａｄｉ，ＷＡＮＧＸｕｅｊｉｎｇ，ＹＡＮＧＪｉｎｆｅｎｇ，ＨＵＴｏｎｇｌｅ，
ＷＡＮＧＳｈｕｔｏｎｇ，ＷＡＮＧＹａｎａｎ，ＣＡＯＫｅｑｉａｎｇ
第３２卷第１期
２０１７年３月
河
北
林
果
研
究
Ｖｏ１．３２ＮＯ．１
Ｍａｒ．２０１７
ＨＥＢＥＩＪＯＵＲＮＡＬＯＦＦＯＲＥＳＴＲＹＡＮＤＯＲＣＨＡＲＤＲＥＳＥＡＲＣＨ
文章编号：１００７—４９６１（２０１７）０１— ００５１— ０６
（ＡＳＳＶｄ），ａＲＴ— ＰＣＲａｓｓａｙｂａｓｅｄｏｎｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄ．ＴｈｅｔｏｔａｌＲＮＡｗｉｔｈｈｉｇｈｑｕａｌｉｔｙｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｄｉｓｅａｓｅｄａｐｐｌｅｂｒａｎｃｈ．ＴｈｅｐｒｉｍｅｒｓｏｆＡＳＳＶｄａｎｄａｐｐｌｅｍｉ — ｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｇｅｎｅｈａｄ５ｗｅｒｅａｄｄｅｄｔｏｔｈｅａｓｓａｙａｎｄｔｈｅＲＴ— ＰＣＲｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗａｓｏｐｔｉ — ｍｉｚｅｄ．Ｉｎｆｒｕｉｔｃｏｌｏｒｉｎｇｐｅｒｉｏｄ。ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｄｅｔｅｃｔｉｏｎｔｉｓｓｕｅｗａｓａｌｓｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅｔｏｔａ１

核酸内切酶和核算外切酶的名词解释

核酸内切酶和核酸外切酶是生物学领域中常见的两种酶类，它们在DNA和RNA分子的修复、重组和剪切等生物学过程中起着重要作用。

本篇文章将对这两种酶的名词解释进行详细介绍，包括定义、功能、特点、应用等方面的内容，以便读者更好地理解这两种关键酶的作用机制和意义。

一、核酸内切酶的定义和功能1. 核酸内切酶是一类能够在核酸分子中切割特定的磷酸二酯键的酶，其作用是将核酸分子切割成两个或多个片段，并广泛参与DNA和RNA的修复、复制和重组等生物学过程。

2. 核酸内切酶可识别核酸分子中特定的核酸序列，并在该序列特定的位置上将其切割成两个相对应的片段，从而实现对核酸分子的精确修饰和分解。

3. 核酸内切酶在细胞分裂、DNA修复和RNA剪切等生物学过程中发挥着重要作用，是维持细胞遗传信息稳定性和正常功能的关键因素。

二、核酸外切酶的定义和功能1. 核酸外切酶是一类能够在核酸分子中切割磷酸二酯键的酶，其作用是在核酸分子的末端位置对核酸链进行切割，从而在DNA和RNA分子的修复、降解和重组等生物学过程中发挥着重要作用。

2. 核酸外切酶通常通过识别特定的核酸序列或结构，在核酸分子的末端位置将其切割成两个或多个片段，促进DNA和RNA分子的进一步修复和降解。

3. 核酸外切酶在细胞的免疫防御、DNA降解和RNA后修饰等生物学过程中发挥着重要作用，对维持细胞内核酸分子稳定性和功能性具有重要意义。

三、核酸内切酶和核酸外切酶的应用1. 核酸内切酶和核酸外切酶在分子生物学研究中广泛应用，包括DNA 和RNA的分子克隆、限制性酶切图谱分析、基因组定位、DNA指纹分析、基因突变检测等方面，成为分子生物学实验的重要工具。

2. 核酸内切酶和核酸外切酶在基因工程和基因编辑技术中发挥着关键作用，如CRISPR/Cas9基因编辑技术就利用了核酸内切酶的特定识别和切割能力，实现对目标基因的精准编辑和修饰。

3. 核酸内切酶和核酸外切酶的应用不仅局限于科研领域，在医学诊断、药物研发和生物工业生产等领域也具有重要意义，为相关领域的发展和进步提供了有力支持。

CRISPR-Cas12b的反式切割活性研究及其介导的核酸检测技术开发

CRISPR-Cas12b的反式切割活性研究及其介导的核酸检测技术开发CRISPR-Cas12b（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats-Cas12b）是一种新近发现的CRISPR系统，具有潜在的基因编辑和核酸检测应用。

本文介绍了CRISPR-Cas12b的反式切割活性研究，以及它在核酸检测技术开发方面的应用前景。

首先，我们来了解一下CRISPR-Cas12b的基本原理。

CRISPR-Cas12b系统由Cas12b蛋白和一系列CRISPR RNAs （crRNAs）组成。

当细菌感染病毒时，细菌通过将病毒DNA的一小段序列整合到自己的基因组中，形成了CRISPR区域。

CRISPR区域包含一系列重复序列和间隔序列，间隔序列中会保存病毒DNA的片段。

在感染再次发生时，细菌会通过转录和加工这些间隔序列，产生一系列的crRNAs。

这些crRNAs可以与Cas12b蛋白结合，导致Cas12b蛋白活化。

在反式切割活性研究方面，科学家们发现Cas12b蛋白具有与之前研究的Cas9蛋白类似的反式切割活性。

具体而言，Cas12b蛋白与相应的crRNA一起，在其间隔序列保存的病毒DNA片段上发挥作用。

Cas12b会识别并与目标DNA序列中的底链结合，然后切割底链和顶链，从而导致目标DNA的双链断裂。

这一切割活性对于基因组编辑和核酸标记具有重要的意义。

基于CRISPR-Cas12b的反式切割活性，科学家们开始探索其在核酸检测技术开发中的应用。

通过引入特定的RNA片段，Cas12b可以识别和切割靶标DNA，并产生特定的光信号。

这一原理可以用于快速、准确地检测某些疾病相关基因的突变。

研究人员还进一步改进了这一技术，使其能够实现多重靶向检测，提高检测的灵敏度和特异性。

此外，由于Cas12b蛋白对于底链的松弛结合和底链切割及释放有较高的选择性，其被广泛应用于单分子检测和阈值增强策略的开发。

侵染‘舞美’苹果的苹果锈果类病毒检测与全序列分析

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苹果锈果类病毒RT_PCR检测体系的建立

ＲNA 模板 3 μL，特异性引物（ 20 pmol / μL） 1 μL，
1. 5 总ＲNA 浓度、纯度及完整性检测
DEPC 水 2 μL，轻轻混匀，离心数秒，70 ℃ 变性 10
使用紫外分光光度计测定总ＲNA 的浓度及纯度。 min，迅速冰上冷却 2 min 后，依次加入 5×M－MLV 缓
1 材料与方法
1. 1 供试材料用于ＲT－PCＲ体系建立及优化的材料为 2014 年
5—7 月采自河北农业大学苹果试验园显症的苹果幼嫩
本文于 2015－04－11 收到，2015－05－08 收到修改稿。 * 国家苹果现代产业技术体系（ CAＲS － 28）；河北省高等学校科学技术研究项目（ YQ2014023）；河北省青年拔尖人才计划。王亚南、曹克强为通讯作者，电话：（ 0312） 7528145
180 V / cm，时间 16 min。
参考李玲等［14］的方法，取 100 mg 植物组织，液 1. 6 mL 提取试剂进行提取，最后加入 20
（ 1） cDNA 合成在预冷的 Microtube 管中加入
μL DEPC 水充分溶解ＲNA，－70 ℃ 保存备用。
以上述 PCＲ条件为基础，体系的优化分别按照 cDNA 模板用量（ 3. 0、 2. 0、 1. 0、 0. 5、 0. 25、 0. 1 μL）、正反向引物（ 20 pmol / μL）用量（ 2. 0、1. 5、 1. 0、0. 5、0. 25、0. 1 μL）进行逐一优化；程序的优化包括退火温度（ 70. 0、68. 9、67. 1、64. 4、60. 9、 58. 5、56. 4、55. 0 ℃ ）和循环次数（ 20、 25、 30、 35、40、45）的优化。 1. 7 序列测定与电泳分析

酶切鉴定

心缓冲液及其他器皿中所带的聚丙烯酰胺凝胶上的核酸样品经啡啶溴红染色聚丙烯酰胺凝胶上的核酸样品经啡啶溴红染在紫外光照射下发出的荧光很弱在紫外光照射下发出的荧光很弱所以浓度很低的核酸样品不能用此法检测出直接在抽提的质粒直接在抽提的质粒dna管中加入酶切体系
质粒DNA的酶切鉴定质粒DNA的酶切鉴定 DNA
Ampr
f1 ori LacZ pGEMmA1-5R (3204 bp)
D: Identify positive clone
3204 bp 3015 bp 189 bp
T7
189 bp
Spe I EcoR I Not I Pst I Sac I
pGEM-xy1
Construction of pGEM-xy1
B: Primer of PCR:
PAP 5' GACCACGCGTATCGATGTCGAC mA5 5' GGCCAGGAGATTGAACTCAAG
Mouse cells X-gene cDNA PAP
189 bp mA5
C: The product of PCR
189 bp Ligation
Apa I Sph I Nco I Not I EcoRI
实验原理限制性内切酶是DNA操作过程中所使用的基操作过程中所使用的基限制性内切酶是本工具。其特异性地结合于一段特殊本工具。其特异性地结合于一段特殊DNA序列之序列之内或其附近的特异位点上，并在此切割双链内或其附近的特异位点上，并在此切割双链DNA。。分子克隆中常用的为II类限制酶，分子克隆中常用的为类限制酶，其识别位点长类限制酶度为4、或个核苷酸的反向重复序列个核苷酸的反向重复序列。度为、5或6个核苷酸的反向重复序列。限制酶的切割点因酶而异，有些产生带平端的片段，的切割点因酶而异，有些产生带平端的DNA片段，片段而另一些产生带有粘性末端的DNA。。而另一些产生带有粘性末端的

应用RT-PCR和斑点杂交法检测新疆梨树上的苹果锈果类病毒

应用RT-PCR和斑点杂交法检测新疆梨树上的苹果锈果类病
毒
赵英;牛建新
【期刊名称】《果树学报》
【年(卷),期】2007(24)6
【摘要】利用自行设计的方法分离提取总RNA,通过一对特异引物,分别扩增出不同梨树品种上苹果锈果类病毒的特异片段,通过对库尔勒香梨品种上获得的特异片段回收、克隆和测序。

结果表明,该片段长250bp,与已发表的AF421195同源性为99%,在此基础上利用克隆的ASSVd质粒,通过RT-PCR合成了生物素标记的cDNA探针,利用该探针对梨样品进行了斑点杂交检测,取得了很好的检测效果。

进一步证明该反应体系能很好地用于梨树苹果锈果类病毒的RT-PCR检测。

【总页数】4页(P761-764)
【关键词】梨树;新疆;苹果锈果类病毒;RT—PCR;cDNA探针;测序
【作者】赵英;牛建新
【作者单位】石河子大学农学院园艺系
【正文语种】中文
【中图分类】S661.2
【相关文献】
1.新疆苹果树上苹果锈果类病毒(ASSVd)的检测与全序列分析 [J], 孙晓霞;王钰婷;牛建新
2.新疆梨树上苹果锈果类病毒的检测与全序列分析 [J], 王钰婷;金珠;董芳园;和世玉;张莉;牛建新
3.利用内标为基础的苹果锈果类病毒RT-PCR检测技术 [J], 吕运霞;李楠;王亚迪;王雪静;杨金凤;胡同乐;王树桐;王亚南;曹克强
4.新疆桃树上苹果锈果类病毒(ASSVd)的检测与全序列分析 [J], 赵英;牛建新
5.梨树组织中的苹果锈果类病毒原位RT-PCR检测 [J], 赵英;牛建新
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

侵染‘舞美’苹果的苹果锈果类病毒检测与全序列分析

侵染‘舞美’苹果的苹果锈果类病毒检测与全序列分析刘洪玉;孙子豪;李保华;王彩霞【摘要】2017年9月,在山东胶州调查苹果病毒病时发现‘舞美’果实表现出明显的花脸症状,取发病树体芽组织嫁接于健康‘富士’苹果幼树上,采用RT-PCR技术对其是否含有苹果锈果类病毒进行了检测,并利用DNAMAN、MEGA 5.1等软件对其全序列进行了分析.结果表明,显症‘舞美’果实、发病树体枝条及嫁接‘富士’枝条中均可检测出ASSVd,无症状‘舞美’果实和相应树体枝条中均未检测到ASSVd.‘舞美’分离物基因组主流序列为333 nt(登录号MG745387),与GenBank中已报道的ASSVd序列一致性为92％～99％.序列多重比对及系统进化树分析发现,该分离物的末端保守区和中央保守区与ASSVd参考序列一致,且与不同来源的ASSVd分离物亲缘关系较近.这是首次在‘舞美’苹果上发现和鉴定出苹果锈果类病毒.【期刊名称】《植物保护》【年(卷),期】2019(045)004【总页数】4页(P176-179)【关键词】苹果锈果类病毒;‘舞美’;RT-PCR;序列分析【作者】刘洪玉;孙子豪;李保华;王彩霞【作者单位】青岛农业大学植物医学学院,山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109;青岛农业大学植物医学学院,山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109;青岛农业大学植物医学学院,山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109;青岛农业大学植物医学学院,山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109【正文语种】中文【中图分类】S432.1苹果锈果病在辽宁[1]、新疆[2]、山东[3]、河北[4]等苹果主产区均有发生,近年来呈不断蔓延趋势,已成为制约我国苹果产业健康发展的主要限制因子。

该病的病原为苹果锈果类病毒Apple scar skin viroid (ASSVd),属于马铃薯纺锤块茎类病毒科Pospiviroidae苹果锈果类病毒属Apscarviroid[5]。

利用两种方法检测苹果锈果类病毒

利用两种方法检测苹果锈果类病毒
赵英;牛建新
【期刊名称】《植物保护》
【年(卷),期】2008(34)4
【摘要】以克隆ASSVd的部分序列,通过RT-PCR成功合成了地高辛标记的cDNA探针,提取苹果和梨树枝条的总RNA,用斑点杂交技术对其进行了检测试验,结果表明,探针具有很高的灵敏度和特异性.地高辛标记的cDNA探针不与阴性对照枝条RNA以及感染PBCVd、AFCVd、ADFVd枝条总RNA发生杂交,仅与感染ASSVd样品的总RNA杂交.
【总页数】7页(P132-138)
【作者】赵英;牛建新
【作者单位】石河子大学农学院园艺系,石河子,832003;石河子大学农学院园艺系,石河子,832003
【正文语种】中文
【中图分类】S436.611.19;S432.41
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核酸外切酶的作用

核酸外切酶的作用核酸外切酶是一类能够识别和切割DNA或RNA链的酶，它在细胞内起着重要的生物学功能。

核酸外切酶能够识别DNA或RNA链上特定的序列，然后切割该序列，从而产生两个或多个新的DNA或RNA片段。

核酸外切酶在细胞中起着重要的调控作用。

在DNA复制过程中，核酸外切酶能够帮助将复制过程中产生的错误或损伤的DNA片段切除，保证DNA复制的准确性和完整性。

此外，核酸外切酶还参与DNA修复、基因重组和细胞凋亡等生物学过程。

核酸外切酶的作用机制主要分为两个步骤：识别和切割。

首先，核酸外切酶通过与DNA或RNA链上的特定序列相互作用，以识别目标序列。

这种识别可以通过酶与靶序列之间的氢键、静电相互作用或特定的序列结构相互作用来实现。

一旦识别到目标序列，核酸外切酶会结合到该序列上，并形成一个酶-底物复合物。

在切割步骤中，核酸外切酶会使酶-底物复合物发生构象改变，从而使酶活性中心与靶序列发生特定的相互作用。

这种相互作用会导致酶活性中心上的催化残基发挥作用，将DNA或RNA链上的特定磷酸二酯键切割。

切割后，酶会释放产生的新的DNA或RNA片段，并重新进入下一个识别和切割循环。

核酸外切酶的活性受到多种因素的调控。

一方面，核酸外切酶的活性可以通过调节酶的表达水平来实现。

细胞可以通过上调或下调核酸外切酶基因的转录或翻译，来调节核酸外切酶的活性。

另一方面，核酸外切酶的活性还受到其他蛋白质的调控。

这些蛋白质可以与核酸外切酶相互作用，并影响其在细胞中的定位、稳定性和催化活性。

核酸外切酶的研究对于理解DNA和RNA的代谢和功能具有重要意义。

通过研究核酸外切酶的结构和功能，科学家们可以揭示核酸代谢和调控的机制，并为相关疾病的治疗提供新的思路和方法。

此外，核酸外切酶也被广泛应用于生物技术领域。

科学家们可以利用核酸外切酶的特异性识别和切割能力，对DNA或RNA进行特定的修饰、标记或改造，从而实现对基因或RNA的精确操控。

总结起来，核酸外切酶是一类重要的酶，在细胞中起着识别和切割DNA或RNA链的作用。