显微镜技术和显微镜
显微镜的发展史流程
显微镜的发展史流程一、早期简单显微镜显微镜的历史可以追溯到公元前一世纪,当时人们使用简单的放大镜来观察细小的物体。
这些早期的显微镜主要是使用单片或双片放大镜来放大物体的图像。
它们的功能非常有限,但为后来的显微镜技术奠定了基础。
二、光学显微镜诞生随着光学的发展,人们开始利用透镜组合来制造更复杂的光学显微镜。
1608年,荷兰眼镜制造商汉斯·利伯在两片透镜之间放置了一个可调节距离的管筒,从而发明了第一台实用的光学显微镜。
这种显微镜可以放大物体数十倍,使得科学家们能够观察到肉眼无法看到的微观世界。
三、显微镜技术革新17世纪和18世纪,显微镜技术得到了进一步的革新。
透镜的制作工艺不断改进,使得显微镜的放大倍数不断提高。
同时,科学家们开始利用染色技术来改善显微镜的观察效果,使得细胞等微观结构更加清晰可见。
四、电子显微镜发明20世纪初,电子显微镜的发明为显微镜技术带来了革命性的突破。
电子显微镜利用电子束代替光束来照射样品,从而实现了更高的放大倍数和更高的分辨率。
这使得科学家们能够观察到更加细微的结构和分子层面的现象。
五、超分辨率显微镜随着科学技术的进步,超分辨率显微镜技术的出现使得显微镜的分辨率进一步提高。
超分辨率显微镜利用特殊的光学原理和技术手段,突破了传统光学显微镜的分辨率极限,使得科学家们能够观察到更加精细的细胞结构和分子动态。
六、数字显微镜发展近年来,数字显微镜的快速发展为显微镜技术带来了新的变革。
数字显微镜将光学显微镜与计算机技术相结合,实现了图像的数字化处理和存储。
这使得科学家们能够更加方便地对观察结果进行分析和共享,同时也提高了显微镜的观测效率和精度。
七、纳米显微镜技术纳米显微镜技术是近年来兴起的一种新型显微镜技术,它利用特殊的纳米探针或纳米光源来观察纳米尺度的微观结构。
这种技术能够实现对单个分子或纳米颗粒的精确观测和操控,为纳米科学和纳米技术的发展提供了强有力的支持。
八、未来显微镜展望随着科学技术的不断进步,未来显微镜技术将继续迎来新的突破和发展。
显微镜的原理及显微镜的调焦方法
光学显微镜:利用可见光和光学透镜成像,可观察微小物体 电子显微镜:利用电子束和电磁透镜成像,可观察更微小的物体 扫描隧道显微镜:利用量子力学原理,可观察原子和分子结构 原子力显微镜:利用原子力感知样品表面形貌
PART TWO
定义:粗调焦也称为大致调焦,是显微镜使用过程中的初步调整步骤,目的是使 被观察物体大致清晰地呈现在视野中。
操作方法:转动粗调焦旋钮,使载物台快速升降,使被观察物体快速接近物镜, 直到被观察物体出现在视野中。
注意事项:在粗调焦过程中,应避免过度用力或快速转动旋钮,以免损坏显微镜 或影响观察效果。
目的:粗调焦完成后,可以进一步使用微调焦进行精确调整,以达到最佳观察效 果。
微调焦的概念:通过微小的调节,使显微镜的焦平面与被观察物表面保持一致的过程。
汇报人:XX
调焦过程中要避免过度用力, 以免损坏显微镜
调焦完成后,应该先轻轻转 动目镜,确保清晰度
将显微镜放置在稳定的平面上,确保稳定性和安全性。 打开显微镜的电源,确保显微镜正常工作。 旋转调焦旋钮,调整显微镜的焦距,直到观察到清晰的图像。 如有需要,可以使用其他附件如光源或摄像机等,以获得更好的观察效果。
微调焦的步骤:先粗调焦,使被观察物大致清晰,然后进行微调焦,使被观察物完全清晰。
微调焦的原理:通过旋转显微镜上的微调旋钮,改变显微镜物镜与被观察物之间的距离,从 而改变焦距,实现微调焦。
微调焦的作用:使被观察物更加清晰,提高观察的准确性和精度。
调焦时应该先粗调焦,然后 再细调焦
调焦前确保显微镜已经稳定 地放置在桌面上
XX,a click to unlimited possibilities
汇报人:XX
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显微镜技术资料
一、光学显微镜的工作原理 二、光学显微镜的基本结构 三、光学显微镜的性能参数 四、像差和色差 五、光学显微镜的不足之处
一、光学显微镜的工作原理
显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统。把 焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜(object lens),而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜 (ocular lens)。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第 一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级 放大, 得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距 离处。
2.分辨率的极限: 0.2m (可见光照明)
3.景深的极限: 0.1m (要求金相准备)
4.不能分析化学成分
第二节 光学显微镜的分类及其应用
一、双目生物显微镜 二、荧光显微镜 三、倒置显微镜 四、体视显微镜 五、暗场显微镜 六、偏光显微镜 七、激光扫描共聚焦显微镜
一、双 目 生 物 显 微 镜
NA=nsinβ
低数值孔径 干物镜
较高数值孔径 干物镜
油
油
最高数值孔径 油浸物镜
(三) 分 辨 率
• 分辨率:显微镜的最重要参数,能够区 分开两个质点的最小距离。
0.61λ D= N•sinα/2
D:分 辨 率 λ :光波的波长 N:介质折射率 α :物镜镜口角
N与D成反比 ,λ与D成正比
提高显微镜分辨率的方法
纳米颗粒的合成与表征技术
纳米颗粒的合成与表征技术引言:纳米颗粒是具有纳米级尺寸的微小颗粒,其具有独特的物理、化学和生物学性质,因此在材料科学、化学工程、医学和生物技术等领域有着广泛的应用前景。
纳米颗粒的合成与表征技术是研究和制备纳米颗粒的关键步骤,它们不仅能够帮助我们理解纳米颗粒的性能,还可以指导我们开发出具有特定功能和性质的纳米材料。
本文将详细介绍纳米颗粒的合成和表征技术,以及它们在不同领域的应用。
一、纳米颗粒的合成技术:1. 凝胶法合成:凝胶法合成是一种常见且简单的纳米颗粒制备方法。
它通过溶液中溶胶的凝聚形成纳米颗粒。
凝胶法合成适用于合成各种金属、金属氧化物和半导体材料的纳米颗粒。
它的优点是制备过程简单、成本低廉,并且能够制备出尺寸均一性较好的纳米颗粒。
2. 气相法合成:气相法合成是一种在气相条件下制备纳米颗粒的方法。
它主要通过热蒸发或化学反应形成纳米颗粒。
气相法合成适用于制备非晶态材料、合金材料和复合材料的纳米颗粒。
它具有制备过程可控性好、能够制备高纯度纳米颗粒的优点。
3. 水相法合成:水相法合成是一种在水相条件下制备纳米颗粒的方法。
它主要通过化学反应在溶液中生长纳米颗粒。
水相法合成被广泛应用于制备金属、金属氧化物和碳基材料的纳米颗粒。
它的优点是制备过程环境友好、纳米颗粒尺寸可调控性好。
二、纳米颗粒的表征技术:1. 显微镜技术:显微镜技术是观察和测量纳米颗粒形貌和尺寸的常用方法。
光学显微镜可以观察颗粒的形状和分布情况,扫描电子显微镜可以获得更高分辨率的表面形貌和尺寸信息,透射电子显微镜可以观察纳米颗粒的内部结构。
2. X射线衍射技术:X射线衍射技术可以获得纳米颗粒的晶体结构信息。
通过分析衍射图谱,可以确定纳米颗粒的晶胞参数、晶粒尺寸和晶体结构。
X射线衍射技术广泛应用于纳米颗粒的结构表征和纳米材料的相变研究。
3. 红外光谱技术:红外光谱技术可以分析纳米颗粒的化学组成和表面活性基团。
通过测量红外光谱图谱,可以确定纳米颗粒所含有的官能团、化学键和杂质成分,进而揭示纳米颗粒的化学特性和表面性质。
显微镜使用与显微摄影技术
显微镜使用与显微摄影技术显微镜是一种科学研究与现实生活中常见的实验仪器,它能够使我们看到肉眼无法观察到的微小物体。
显微镜广泛应用于生物学、医学、材料科学等领域的研究与实践中。
显微镜的主要原理是通过将光线聚焦在物体上,利用透镜或反射镜来放大物体的细节。
根据光线的聚焦方式,可以将显微镜分为光学显微镜和电子显微镜两大类。
光学显微镜是使用光学透镜来聚焦光线的显微镜。
它主要有简单显微镜、复合显微镜和倒置显微镜等不同类型。
其中,复合显微镜是最常见的一种,它具有放大倍率高、可观察活体样本等优点。
光学显微镜适用于透明样品,如细胞、组织等。
在显微摄影中,光学显微镜可以通过将相机与显微镜相连,将显微观察的图像记录下来。
这种显微摄影技术可以帮助研究人员更好地观察和分析样品,还可以用于教学、科普等领域。
电子显微镜则是使用束缚电子来取代光线聚焦的显微镜。
电子显微镜具有更高的放大倍率和更高的分辨率,可用于观察更小、更细微的结构。
电子显微镜主要有透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)两类。
TEM适用于观察极小的结构,如原子、分子等,它可以产生高分辨率、高对比度的影像。
而SEM则适用于观察表面形貌,它可以提供强大的深度感和三维效果。
电子显微镜通常用于材料科学、纳米技术、病理学等领域的研究。
在显微摄影技术中,如何准确地记录显微观察的图像是一个重要的问题。
一种常用的方法是通过将相机与显微镜相连,通过中间透镜或接口镜将显微观察的图像传输到相机中。
在拍摄时,需要调整焦距、光线亮度、曝光时间等参数,以获得清晰、明亮的图像。
此外,还有一些专门的显微摄影设备,如显微摄影机、数码显微摄影仪等,可以直接与显微镜连接,并通过电脑或存储卡保存图像。
显微摄影技术在科学研究和实践中有广泛的应用。
在生物学研究中,显微摄影技术可以用于观察细胞分裂、蛋白质结构、组织构成等。
在医学领域,显微摄影技术可以帮助医生诊断疾病,如肿瘤细胞、细菌感染等。
在材料科学中,显微摄影技术可以用于研究材料的微观结构和性质。
显微镜技术在生物学研究中的应用与发展
显微镜技术在生物学研究中的应用与发展近年来,随着科学技术的飞速发展,显微镜技术越来越被广泛应用于生物学研究中。
其高分辨率、高灵敏度、高精确度的特点使其成为生物学领域中不可或缺的重要工具。
一、显微镜技术概述显微镜技术是通过各种光学性质对细胞或组织进行观察和分析的一种重要技术。
主要有普通显微镜、共聚焦显微镜、荧光显微镜、电子显微镜等多种类型。
其中最常用的是荧光显微镜和电子显微镜。
荧光显微镜是利用特殊的荧光染料或基因标记在生物样品中生成荧光信号,从而使生物分子的位置和形态可以在显微镜下观察到。
相比于传统的荧光显微镜,共聚焦显微镜可以仅在光感应区域形成荧光,从而提高了分辨率和信噪比。
电子显微镜则是通过利用电磁透镜对电子束进行聚焦,将其照射到生物样品上,观察到被电子束激发出的大量电子反射或传输信号来获得图像。
相比于荧光显微镜,电子显微镜其分辨率更高,可以观察到更细小的生物分子。
二、显微镜技术在细胞学中的应用显微镜技术在细胞学中的应用非常广泛。
通过显微镜观察可以对细胞的结构和功能进行详细的分析和研究。
1. 研究生物分子的行为和与其他分子的相互作用,比如蛋白质与DNA的相互作用等。
2. 研究代谢的过程,分析化学物质在细胞中的扩散和转移过程。
3. 研究细胞结构和功能,可以了解细胞器、细胞骨架等细胞结构的分布和构造、以及细胞的发育和运动机制等。
三、显微镜技术在病理学中的应用显微镜技术在病理学中也是非常重要的。
通过观察和研究病变的细胞和组织的形态学特征,可以更好地了解疾病的机制和诊断方法。
1. 研究肿瘤细胞的形态和组成:通过显微镜观察可以对肿瘤的形态和构成进行分析,从而判断病变类型和病变级别,以及制定针对性的治疗方案。
2. 研究传染病的病理学特征:通过显微镜观察可以对病原体和感染位置进行病变的细微特征进行分析,不仅有利于疾病的诊断,也对疾病的治疗起到重要作用。
四、显微镜技术的发展趋势随着科学技术的不断发展,显微镜技术也在不断地创新和发展,未来的趋势主要有以下几个方面。
光学显微镜和电子显微镜技术比较分析
光学显微镜和电子显微镜技术比较分析光学显微镜和电子显微镜是两种常见的显微镜技术。
它们都是现代科技发展中不可或缺的成果,并在科学研究、医学、制造业等众多领域中得到广泛应用。
本文将对这两种技术进行比较分析,探讨它们各自的优缺点及适用范围。
一、光学显微镜光学显微镜是指利用可见光线对样品进行放大观察的显微镜。
它的特点是操作简单、结构轻巧、成本低廉,适用于对生物细胞、组织、液体等进行观察和分析。
光学显微镜通过透射和反射两种方式进行观察。
优点:1.分辨率高,能够放大细胞、组织等细小物质,观察到一些不同形态和特征的细胞和组织结构。
2.操作简单,不需要复杂的样品处理过程,使用方便。
3.成本低廉,适用于普及教育、导览等场合使用。
缺点:1.放大倍数限制,最高放大倍数大约为1000倍,不能观察到更细小的物质。
2.对样品类型敏感,光学显微镜主要适用于非透明物质的观察,对于透明的物质如水和玻璃等,观察时会受到干扰。
3.成像受限,能够观察到的深度较浅,不能够对样品内部结构进行观察。
二、电子显微镜电子显微镜是一种利用高能电子束对样品进行放大观察的显微镜。
它具有极高的分辨率,适用于对细小物质如细胞、分子和原子的微观结构进行观察和分析。
优点:1.分辨率极高,可以放大物质至100万倍以上,能够观察到细胞和分子的微观结构。
2.高精度成像,高能电子束可以穿透物质进行成像,更好的解决了透明物体的成像问题。
3.广泛应用,适用于各种不同类型的样品,例如生物、材料科学、纳米技术等领域。
缺点:1.设备昂贵,需要极高的技术和设备成本。
2.对样品要求较高,样品需要进行复杂的处理和制备,否则会影响成像效果。
3.操作难度大,需要经过长时间的培训和训练,才能熟练操作。
三、比较从优缺点分析可以看出,光学显微镜和电子显微镜在不同的领域具有各自的优势。
光学显微镜广泛应用于微生物学、生物学、医学等领域,对于细胞、组织等进行观察和分析非常合适。
而电子显微镜则适用于各种研究需要高分辨率的领域,如材料科学、纳米技术等。
生命科学中各种光学方法
生命科学中各种光学方法
生命科学中应用了多种光学方法,以下是其中的一些:
1. 光学显微镜:这是最常见的一种光学方法,用于观察细胞和组织的结构和形态。
通过这种技术,科学家可以观察细胞器的形态和分布,以及细胞之间的相互作用。
2. 荧光显微镜:荧光显微镜利用荧光染料或荧光探针标记样本,然后通过特定波长的光激发这些荧光物质,使其发出荧光。
通过观察荧光的分布和强度,可以研究生物分子的定位和动态变化。
3. 共聚焦显微镜:共聚焦显微镜采用激光作为光源,通过聚焦到样本的特定深度并逐层扫描,获得高分辨率的三维图像。
这种方法可以用于观察活细胞或组织的动态过程。
4. 光学活体成像:光学活体成像技术利用特定波长的光穿透生物组织,并检测组织内部的荧光信号。
通过这种技术,可以在不破坏组织的情况下观察生物分子的定位和动态变化。
5. 光学干涉仪:光学干涉仪利用光的干涉原理测量微小位移和形变。
在生物学领域,它可以用于测量细胞和组织的机械性能,如硬度、弹性和粘弹性等。
6. 光学散射仪:光学散射仪利用光的散射原理测量颗粒或组织的粒径和形状。
在生物学领域,它可以用于测量细胞、蛋白质和其他生物分子的结构和形态。
这些光学方法在生命科学研究中发挥了重要作用,有助于深入了解生命活动的机制和生物分子的功能。
第二章--微生物的纯培养和显微技术
第二节 显微镜和显微技术
一、显微镜的种类及其原理 二、显微观察样品的制备 三、显微镜下的微生物
几个基本概念:
一、显微镜的种类及原理
1.普通光学显微镜(复式显微镜)
机械装置: 镜座、支架、载物台、调焦螺旋等 光学系统: 物镜、目镜、聚光镜等
使用油镜时加镜油的目的: (1)增加照明亮度 (2)增加显微镜的分辨率
细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线 照射后可激发荧光;另有一些物质本身虽 不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗 体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧 光显微镜就是对这类物质进行定性和定量 研究的工具之一
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荧 光 显 微 镜 观 察
5、 透射电子显微镜(transmission electron microscope, TEM)
原理:用一束电子作为它的能源,电子的波长很短,能够 检测极细微的物体,如病毒和分子。
应用:通过细胞超薄切片,观察细胞内部的详细结构如细 胞膜、细胞核等。(可放大几万倍)
6、 扫描电子显微镜(scanning electron microscope, SEM)
原理:类似于电视或电传真照片。即利用电子“探针”,在 样品表面进行“扫描”,激发样品表面放出二次电子,二次电子由 探测器收集,并转变为光信号。
光学显微镜
光学理论依据
德国理学家Ernst Abbe,在19世纪70年代建立的 在Abbe的公式中,两物体之间的最小可分辨距 离被称为最小距离(d)
最小距离=0.5/nsin= 0.5/NA
分辨率(R) ∝ 1/d
分辨率(最小可分辨距离)=0.5λ∕ n sinθ = λ∕2NA
波长与分辨率
高压蒸汽灭菌锅
2、接种操作
接种工具: 白金or镍铬合金接种针/环
细胞和组织的观察的实验原理
细胞和组织的观察的实验原理
细胞和组织的观察实验的原理基于以下几个方面:
1. 显微镜技术:实验中常用光学显微镜或电子显微镜观察细胞和组织的结构。
光学显微镜利用透镜系统放大样本的影像,电子显微镜则利用电子束代替光束,通过电磁透镜系统实现更高的放大倍数和更好的分辨率。
2. 组织制备与染色:为了更好地观察细胞和组织结构,实验中通常需要对样本进行染色和制片。
组织制备包括固定、去水和包埋等步骤,以保持样本的形态和结构。
染色则可以利用染料选择性地染色细胞和组织的不同成分,如细胞核、蛋白质或细胞器。
3. 细胞和组织的特异性标记:为了观察特定细胞类型或组织结构,实验中常使用特异性标记方法。
例如,可以利用特异性抗体和荧光探针实现对特定蛋白质、核酸或细胞器的标记,从而通过荧光显微镜观察其分布和相互关系。
4. 分析和图片记录:观察实验中,研究人员需要通过合适的图像捕获设备记录所得到的显微图像。
这些图像将用于进一步分析和描述细胞和组织的特征。
显微镜技术和显微镜在临床检验中的应用
1.光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物形成放大影像的精密光学仪器,由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。
光学系统由物镜和目镜组成,其核心是物镜和目镜中的两组透镜,其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像,再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。
2.荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。
3.相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。
4.暗视野显微镜:是利用特殊的聚光镜使照明光线斜射而不能直接进入物镜,形成暗视野,那些经过标本散射的光线才能进入物镜放大,在黑暗的背景中呈现标本明亮的轮廓的显微镜。
5.偏光显微镜:是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光)的晶态、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。
6.激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。
其物镜和聚光镜互相共焦点,使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像,而焦面以外的漫射光不参加成像,改变焦平面,可获得细胞或原标本不同层次的图像,从而得到样品的三维结构图像。
7.倒置显微镜:当观测活体标本时,需要把照明系统放在载物台及标本之上,而把物镜组放在载物台器皿下进行放大成像的显微镜,又称生物培养显微镜。
8.紫外光显微镜:使用紫外光源进行照明的显微镜。
9.电子显微镜:简称电镜,是利用波长很短的电子束作为照明光源,通过电子流对细胞样品的透射或反射及电磁透镜的多级放大而在荧光屏上成像的大型精密仪器。
10.透射电子显微镜:简称透射电镜,是利用电子枪发出的高速电子束照射超薄的生物样品,收集透射电子流经电磁透镜的多级放大后成像的仪器。
11.扫描电子显微镜:简称扫描电镜,是一种主要用于观察组织细胞表面或细胞内断面的电镜。
其工作原理是从电子枪发出的电子束经电磁聚光镜汇聚成极细的电子探针,并在细胞样品表面逐点扫描,收集样品表面产生的二次电子再经转换、放大,最终在荧光屏同步扫描成像。
显微镜分类及显微镜发展史显微镜分光学显微镜和电子显微镜
显微镜分类及显微镜发展史显微镜分光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜它是在1590年由荷兰的杨森父子所首创。
现在的光学显微镜可把物体放大1500倍,分辨的最小极限达0.2微米。
光学显微镜的种类很多,除一般的外,主要有暗视野显微镜一种具有暗视野聚光镜,从而使照明的光束不从中央部分射入,而从四周射向标本的显微镜.荧光显微镜以紫外线为光源,使被照射的物体发出荧光的显微镜。
电子显微镜它是在1931年在德国柏林由克诺尔和哈罗斯卡首先装配完成的。
这种显微镜用高速电子束代替光束。
由于电子流的波长比光波短得多,所以电子显微镜的放大倍数可达80万倍,分辨的最小极限达0.2纳米。
1963年开始使用的扫描电子显微镜更可使人看到物体表面的微小结构。
虎克时代的显微镜扫描隧道显微镜扫描隧道显微镜亦称为“扫描穿隧式显微镜”、“隧道扫描显微镜”,是一种利用量子理论中的隧道效应探测物质表面结构的仪器。
它于1981年由格尔德·宾宁(G.Binning)及海因里希·罗雷尔(H.Rohrer)在IBM位于瑞士苏黎世的苏黎世实验室发明,两位发明者因此与恩斯特·鲁斯卡分享了1986年诺贝尔物理学奖。
它作为一种扫描探针显微术工具,扫描隧道显微镜可以让科学家观察和定位单个原子,它具有比它的同类原子力显微镜更加高的分辨率。
此外,扫描隧道显微镜在低温下(4K)可以利用探针尖端精确操纵原子,因此它在纳米科技既是重要的测量工具又是加工工具。
STM使人类第一次能够实时地观察单个原子在物质表面的排列状态和与表面电子行为有关的物化性质,在表面科学、材料科学、生命科学等领域的研究中有着重大的意义和广泛的应用前景,被国际科学界公认为20世纪80年代世界十大科技成就之一。
仪器的历史早在公元前一世纪,人们就已发现通过球形透明物体去观察微小物体时,可以使其放大成像。
后来逐渐对球形玻璃表面能使物体放大成像的规律有了认识。
1590年,荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。
显微镜 实验技术 培训
显微镜实验技术培训一、显微镜的基本原理显微镜是一种常用的实验工具,用于观察微小物体的细节。
显微镜的基本原理是利用光学透镜的放大效果来放大被观察物体的图像。
显微镜通常由物镜、目镜、光源和调焦装置等组成。
物镜负责放大物体图像,目镜则负责放大物镜成像后的图像,光源提供光线,调焦装置用于调节物镜和目镜的位置,以获得清晰的图像。
二、显微镜的使用方法1. 准备工作:首先要将显微镜放在平整的桌面上,并确保显微镜处于稳定的状态。
然后使用净化棉或镜头纸轻轻擦拭物镜和目镜的镜片,保持镜片的清洁。
2. 调焦调节:先用调焦装置将物镜调至最低位置,然后将目镜向上移动,直到一个清晰的图像出现。
接下来,使用调焦装置缓慢调节物镜和目镜的位置,使图像更加清晰。
3. 放置样本:将待观察的样本放在玻片上,再将玻片放在物镜下方的样本台上。
注意要调整样本的位置,使其位于物镜下方的光线路径上。
4. 观察样本:通过目镜观察样本,可以使用目镜上的调焦装置来调节焦距,以获得更清晰的图像。
同时,可以通过旋转物镜转盘来使用不同倍数的物镜,从而放大样本的图像。
三、常见的显微镜实验技术1. 直接观察法:将待观察的样本放在显微镜下,通过调节焦距和放大倍数来观察样本的细节结构。
2. 显微摄影:利用显微镜配备的摄像设备,将观察到的样本图像通过连接线或无线传输到计算机或其他显示设备上,实现对样本图像的记录和分析。
3. 染色技术:通过给样本施加染色剂,使样本的不同组织和结构部分呈现出不同的颜色,从而更清晰地观察和分析样本。
4. 荧光显微镜技术:利用荧光染料对样本进行标记,通过荧光显微镜观察样本,可以获得荧光信号的分布情况,从而研究样本的结构和功能。
5. 相差显微镜技术:通过调节相差光的相位差,使样本的透明度和形态差异得以突出,从而观察到更细微的细胞结构和运动。
总结:显微镜实验技术是生物学、医学、材料科学等领域常用的实验手段。
通过合理使用显微镜,我们可以观察到微观世界中的细节,了解物体的结构和特性。
细胞学说用到的科学方法
细胞学说用到的科学方法细胞学是一门研究生物体最基本单位,细胞的学科。
为了深入理解细胞的结构和功能,细胞学家使用了多种科学方法来研究细胞。
下面将介绍几种常见的细胞学研究方法。
1.显微镜技术:显微镜技术是细胞学中最基本的工具之一、通过使用显微镜,细胞学家可以观察和研究细胞的结构、形态和功能。
传统的光学显微镜可以观察到细胞的大致形态和结构,但其分辨率有限。
为了观察更小的细胞结构,如细胞器或分子细胞结构,需要使用电子显微镜。
电子显微镜可以提供更高的分辨率,以纳米尺度观察细胞结构。
2.细胞培养:细胞培养是通过将细胞放置在合适的培养基中,提供适宜的生长条件,从而使细胞继续生长和繁殖的技术。
通过细胞培养,细胞学家可以对细胞进行实验,探究细胞的生长、分化、增殖和死亡等过程。
细胞培养也可以用来研究细胞对外界刺激的响应,如细胞对药物、毒物或环境因素的反应。
3.分离和纯化:为了研究特定类型的细胞或细胞组分,细胞学家需要将它们从混合物中分离出来,并纯化到足够纯度。
分离和纯化技术可根据细胞的大小、形态、密度、色素或表面标记来实现。
常用的分离方法包括离心、渗滤、梯度离心、免疫分离等。
分离和纯化技术为研究细胞提供了纯净的实验样品,减少了其他因素对研究结果的干扰。
4.光谱分析:光谱分析是通过测量细胞发射或吸收特定波长的光信号来研究细胞组分和代谢过程的方法。
细胞组分和代谢产物可以通过发射光谱或吸收光谱进行定性和定量分析。
光谱分析可用于研究蛋白质、核酸、荧光染料等。
5.分子生物学技术:分子生物学技术是研究细胞内分子组分和基因表达的重要工具。
这些技术包括PCR、酶切、克隆、基因测序、原位杂交、蛋白质电泳等。
分子生物学技术可以用于研究细胞的基因组、转录组和蛋白质组,分析基因的表达水平、蛋白质的结构和功能。
6.生物化学分析:生物化学分析可以揭示细胞中的生化过程和代谢途径。
通过生化分析技术,如蛋白质酶解、酶活性测定、代谢物测定等,可以确定细胞中存在的物质类型和浓度,揭示细胞内化学反应的过程。
从光学显微镜到电子显微镜的技术进展
从光学显微镜到电子显微镜的技术进展前言自古以来,人类就一直在探索周围世界的精细结构。
对于微小尺度的探测,显微镜无疑是人类最基本的研究工具之一。
从最早的光学显微镜到现代的电子显微镜,显微镜技术的不断进步已经彻底改变了人类观察和研究微观世界的方式。
本文将介绍从光学显微镜到电子显微镜的技术进展。
光学显微镜光学显微镜不仅是显微镜技术的开端,也是最早被广泛应用于科学研究和工业制造的显微镜。
它利用透镜对被观察物体的光线进行折射、缩小和成像,从而让我们能看到肉眼无法观察到的细小结构。
尽管光学显微镜的原理相对简单,但是通过对透镜的优化和改进,它仍然被广泛应用于许多领域,例如材料科学、生物学和医学等。
例如,在材料科学中,我们可以使用光学显微镜来观察材料的显微组织和微观结构,并研究材料的机械性能和化学性能等。
在生物学和医学中,光学显微镜也被广泛应用于细胞学、病理学和生物学研究等领域。
然而,由于光学显微镜受到物理光学的限制,它无法观察到尺度在几百纳米以下的微观结构。
这就需要更先进的技术,来突破这个物理限制。
扫描电子显微镜电子显微镜是一种能够观察到纳米级别细小结构的显微镜。
它的原理是利用电子对物体的反射、透射、散射等特性来获得被观察物体的显微图像。
其中,扫描电子显微镜(SEM)是最常用和广泛应用的电子显微镜之一。
与光学显微镜不同,SEM 采用电子束而不是光束来扫描物体表面。
电子束进入扫描电子显微镜后,会产生大量的次级电子和反射电子。
这些电子被探测器捕获和转换成信号,从而产生物体的显微图像。
相比光学显微镜,SEM 具有更高的分辨率和更强的深度,能够观察和研究更小、更细的物体结构。
因此,SEM 被广泛应用于自然科学和生命科学领域,在材料研究、化学研究、生物学研究和医学领域等方面都有很重要的应用价值。
透射电子显微镜与 SEM 相比,透射电子显微镜(TEM)通过透射电子通过物体来得到物体的影像。
透射电镜采用的电子束是比 SEM 更细微的束,并具有更高的分辨率和更强的深度,能够观察到细胞和单个分子级别结构。
显微镜技术在细胞生物学中的应用
显微镜技术在细胞生物学中的应用细胞是组成生命体的基本单位,一直以来,对细胞的研究是生物学的重要分支之一。
而显微镜技术的发展则为细胞研究提供了强有力的工具,它不仅能拓宽细胞研究的视野,还能清晰地观察到微小的细胞结构和细胞内的生物分子。
本文就来探讨一下显微镜技术在细胞生物学中的应用。
一、光学显微镜光学显微镜是最常见的显微镜类型,它可通过光学透镜将光线聚焦到样品上,从而使样品呈现在观察者的视野中。
在细胞生物学中,光学显微镜广泛应用于观察活体细胞及组织的活动过程、细胞形态的变化和细胞器的位置等。
同时,光学显微镜还可以实现单细胞分离、光刻塑形和显微操纵等技术,这对于微操作和单细胞研究具有重要意义。
二、电子显微镜电子显微镜是一种基于电子束的显微镜,其具有高分辨率和高清晰度的特点,可以清晰观察到细胞和细胞器的详细结构。
电子显微镜技术因其高分辨率、良好的成像效果和大样品深度等特点,在细胞生物学研究领域得到广泛应用。
例如,电子显微镜可以观察到蛋白质组装和分子-细胞相互作用,对于深入研究细胞生物学过程具有重大的作用。
三、荧光显微镜荧光显微镜是通过使用荧光染料来标记生物分子或细胞器,以便于在细胞中所处位置的可视化。
荧光显微镜除了可以成像三维结构和表面形态外,也能够可视化分子的局域化和动态过程。
它的分辨率和能够同时成像多个所需标记的数目都不断提高,可以对单分子和单分子-单细胞相互作用进行非常灵敏和精确的测量。
四、原子力显微镜原子力显微镜(atomic force microscope, AFM)是通过扫描细胞物质表面的方式来观察细胞的物理性质,如力学性质、化学性质等。
与其他显微镜不同的是,AFM不需要染色样品,可以直接观察样品的表面形态和细小的分子结构。
在细胞生物学上的应用中,AFM主要用于研究细胞表面形态和分子结构,还可以检测病毒和细胞膜的结构等。
显微镜技术的不断发展,为细胞生物学的进一步研究提供了前所未有的机会。
从光学显微镜到原子力显微镜,各种显微镜技术都提供了独特的、可视化的视角。
生活中光学应用及原理
生活中光学应用及原理光学是研究光的传播、反射、折射、干涉、衍射和吸收等现象的科学。
在生活中,光学应用广泛,从日常生活用品到科学仪器,都离不开光学原理。
以下是一些常见的光学应用及其原理。
1. 照相机及相机镜头照相机和相机镜头是光学应用的典型例子。
相机镜头通过改变光线的路径和聚焦来形成清晰的图像。
镜头中的透镜把光线聚焦在感光芯片上,使图像变得锐利。
凹透镜和凸透镜可以通过调整其位置改变聚焦距离,从而使物体清晰地显现在感光芯片上。
2. 显微镜显微镜是一种通过放大物体的细节以观察微观结构的仪器。
显微镜使用了光的折射和放大原理。
在显微镜中,光通过物体时会被物体折射,然后进入镜头放大物体的图像。
通过调整镜头的位置和放大倍数,可以得到更高分辨率的图像。
3. 望远镜望远镜用于观察远距离的物体,如天体。
光学望远镜的工作原理基于折射和放大原理。
望远镜使用了两个镜头,一个目镜和一个物镜。
物镜聚焦入射的光线,形成一个实像,然后目镜放大这个实像,使其可见。
通过调整镜头的位置和放大倍数,可以得到更清晰和详细的图像。
4. 光纤通信光纤通信是一种利用光传输信息的技术。
它的工作原理是通过将信息转化为光信号并通过光纤进行传输。
光纤内部有一个光反射的核心,可以将光信号沿着光纤进行传输。
光的折射和反射特性使得信号能够在光纤中传播数百甚至数千公里,而且信号的质量几乎不会有损耗。
5. 激光激光是一种以非常高强度和高纯度的单色光束为特征的光学器件。
激光的工作原理是通过光子的受激辐射来放大和产生一束高度集中的光。
激光通常通过将光束聚焦为一束非常窄的光线,并且能够以高速传输数据或进行精确的切割和定位等应用。
6. 光学显微镜光学显微镜是一种用于观察小于0.1毫米尺度的微小结构的仪器。
在显微镜中,样本反射或透过光并经过物镜组聚焦,形成一个放大的实像。
通过调整目镜的位置和放大倍数,可以得到更清晰和详细的图像。
光学显微镜广泛用于生物学、医学、材料科学等领域的研究。
光学显微镜和电子显微镜技术
光学显微镜和电子显微镜技术显微镜作为一种重要的科学工具,已经在许多领域中发挥了关键作用。
其中,光学显微镜和电子显微镜是最为常见和主要的两种显微镜技术。
它们各自具有独特的优势和应用范围,本文将重点介绍这两种显微镜技术及其在科学研究中的应用。
一、光学显微镜光学显微镜是一种通过透射光来观察样品的显微镜技术。
它的核心部件是物镜、目镜和光源。
物镜位于样品底部,用于产生并放大样品图像;目镜位于物镜上方,用于进一步放大并观察样品图像;光源则提供照明光线以照亮样品。
光学显微镜的工作原理基于物质对光的折射、散射和吸收等现象。
当光线照射到样品上时,不同的物质会对光产生不同的相互作用,从而形成有关样品内部结构和性质的信息。
光学显微镜可以通过调整物镜和目镜的焦距以及光源的强度,来获取清晰的样品图像。
光学显微镜广泛应用于生物学、医学、材料科学等领域。
在生物学中,光学显微镜常用于观察细胞结构和功能,研究生物分子的相互作用。
在医学中,光学显微镜可用于检测组织病理变化、识别病原微生物等。
在材料科学中,光学显微镜可以帮助研究材料的微观结构、晶体缺陷等。
二、电子显微镜电子显微镜是一种利用电子束来观察样品的显微镜技术。
相比光学显微镜,电子显微镜具有更高的分辨率和放大倍数,可以观察到更加微小的结构。
电子显微镜主要有两种类型:透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)。
透射电子显微镜在样品上方投射电子束,通过样品的透射电子来获取图像;扫描电子显微镜则通过扫描样品表面产生的二次电子或反射电子来获取图像。
电子显微镜的工作原理基于电子与物质的相互作用。
由于电子具有较小的波长和较高的能量,电子束可以穿透或散射物质,从而提供关于样品更多细节和原子尺度的信息。
电子显微镜广泛应用于材料科学、纳米科学和生物科学等领域。
在材料科学中,电子显微镜可用于研究材料的晶体结构、晶格缺陷、纳米颗粒等。
在纳米科学中,电子显微镜可以用来观察和操控纳米结构和纳米器件。
现代显微镜技术介绍
现代显微镜技术介绍
现代显微镜技术是一种利用光学原理和电子技术来观察微观物质的方法。
它具有高分辨率、高放大倍数和高灵敏度的特点,可以帮助科学家和研究人员研究和观察微观世界中的细胞、组织和物质结构。
下面是一些常见的现代显微镜技术:
1. 光学显微镜:光学显微镜是一种利用可见光来观察样品的显微镜。
它通过光学透镜和物镜可以放大样品,并通过眼镜或摄像机来观察样品。
现代光学显微镜可以达到亚微米的分辨率,并且可以使用多种不同的染色和标记技术来增强样品的对比度。
2. 电子显微镜:电子显微镜是一种利用电子束来观察样品的显微镜。
它通过将电子束聚焦在样品上,并测量从样品反射或透射的电子来观察样品。
电子显微镜可以达到亚纳米级的分辨率,可以用来观察原子和分子级别的结构。
3. 扫描显微镜:扫描显微镜是一种在样品表面扫描电子束,并测量反射或透射的电子以生成样品图像的显微镜。
它可以提供高分辨率和三维的样品表面拓扑信息,并广泛应用于材料科学、生物学和纳米技术等领域。
4. 荧光显微镜:荧光显微镜是一种利用荧光分子或标记物质发射荧光光子来观察样品的显微镜。
它可以通过选择性激发样品中的特定荧光染料或标记物质来增强样品的对比度,并且可以实现单细胞或单分子级别的检测和定位。
5. 皮层显微镜:皮层显微镜是一种通过光学和计算机技术来观
察样品内部结构的显微镜。
它可以利用不同的光学特性,如折射率、吸收率和散射率,来生成样品的三维结构图像,并实现虚拟切片和全息成像等功能。
总之,现代显微镜技术的发展为科学研究和实验提供了强大工具,可以帮助我们更好地了解和研究微观世界。
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(二) 数 值 孔 径
NA=nsinβ
油 低数值孔径 干物镜 较高数值孔径 干物镜
油
最高数值孔径 油浸物镜
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(三) 分 辨 率
• 分辨率:显微镜的最重要参数,能够区 分开两个质点的最小距离。 D:分 辨 率 λ :光波的波长 N:介质折射率 α :物镜镜口角
D=
0.61λ N•sinα/2
透镜的色差
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透镜的轴向色差(A)和垂轴色差(B)
A
B
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五、光学显微镜的不足之处
1、放大倍数的极限: 2000 2、分辨率的极限: 0.2m (可见光照明) 3、景深的极限: 0.1m (要求金相准备) 4、不能分析化学成分
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第二节 光学显微镜的分类及其应用
用它可研究荧光物质在组织和细胞内的分布。
为防止紫外线进入物镜,可以采用暗视场照明。
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二、荧 光 显 微 镜
荧光(Fluorescence):
细胞中的某些物质(如叶绿素)经紫外线照 射后能发出可见光线,称为荧光。
自发荧光:由细胞本身存在的物质经紫外线 照射后发出的荧光。 诱发荧光:一些细胞成分本身经紫外线照射 后不发荧光,但用荧光染料(酸性品红、甲基绿、 吖叮橙等荧光色素)进行活体染色或固定后切片 染色,就能在荧光镜下看见荧光,这种荧光叫诱 发荧光。
如果离光轴越远处放大率越大,则像 的外部线段将比中间线段长,结果形成了枕 形畸变,这种畸变称为正畸变。
反之则形成边缘放大率小而近轴放大 率大的桶形畸变,称为负畸变 。
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透镜的畸变
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(二)、 色 差
色差(chromatic aberration )是一种由白光或 复色光经透镜成像时,会因各种色光存在着光程 差而造成颜色不同、位置不重合、大小不一致的 不同成像效果,从而造成像和物的较大失真。
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七、偏 光 显 微 镜
偏光显微镜是在一般显微镜的基础上 增添了使普通光转变成线偏振光和检测偏振 光的装置或观察干涉图样的特殊透镜。即光 源前有偏振片(起偏器),使进入显微镜的
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(二) 数 值 孔 径
数值孔径(numerical aperture)又叫镜 口率,是物体与物镜间媒质的折射率n与物 镜孔径角的一半(β)正弦值的乘积,通常缩 写为NA,即 NA=nsinβ
显微镜的数值孔径与其放大率成正比, 与分辨率、景深成反比,它的平方与图像 亮度成正比。
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七、偏 光 显 微 镜
偏光显微镜是利用光的偏振特性,对具有双折 射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光) 的晶体、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪 器。 利用它可以清楚地观察到纤维丝、纺锤体、胶 原、染色体、卵巢、骨骼、毛发、活细胞的结晶或 液晶态的内含物、神经纤维、肌肉纤维、植物纤维 等的细微结构,从而可以分析细胞、组织的变化过 程。
离处。
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光学显微镜的工作原理图
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二、光学显微镜的基本结构
① 机械部分:镜座、 镜柱、镜臂、镜筒、调焦装
置、载物台(物镜转换器)
② 光学部分:目镜、 物镜、反光镜、聚光镜 放大倍数: 目镜的放大倍数×物镜的
放大倍数
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三、光学显微镜的性能参数
(一) 放大率
(二)数值孔径
(三)分辨率 (四)视野 (五) 景深与焦长 (六)镜像亮度和清晰度 (七)工作距离
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暗 视 野 照 明 方 式
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六、紫 外 光 显 微 镜
使用紫外光源可以明显提高显微镜的分辨 率,对于生物样品使用紫外光照明还具有独 特的效果。生物细胞中的原生质对可见光几 乎是不吸收的,而蛋白质和核酸等生物大分 子对紫外光具有特殊的吸收作用。因此,可 以使用紫外光显微镜(ultraviolet microscope)研究单个细胞的组成与变化情 况。
可通过相位板的环形区,其它的偏折光在
物镜的后焦面上产生了一个与通过相位板
的环形区的光不同的1/4λ的光程差。两组 光在平面上成像。
◈ ⊃
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■
三、相 衬 显 微 镜
如相板的环形区使直射光超前1/4λ,加上开始
直射光超前的1/4λ,直射光共超前1/2 λ,直射光和
偏折光叠加形成的合成波振幅减少,产生暗反差。 如相板的环形区使直射光滞后1/4λ,加上开始 直射光超前的1/4λ,两者相抵直射光不发生变化, 直射光和偏折光无相位变化,形成的合成波振幅增
活细胞和未染色的标本由于光的波长 和振幅不发生变化,人眼看不到,但其相 位有变化,因此利用光的干涉和衍射效应 把透过标本不同区域的光波光程差转变成 振幅差,使细胞内各种结构之间呈现清晰 可见的明暗对比。
◈ ⊃
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◄
■
三、相 衬 显 微 镜
相衬显微镜比普通光学显微镜多了2个 部件:
在聚光器上增加一个环形光阑;
光轴上的点光源所发出的光 锥入射到透镜的球折射面时,由 于通过透镜边缘的光线不满足近 轴光线的条件,因此不能和通过 近轴曲面的光线会聚成一个理想 的亮点,而是形成一个中间亮边 缘逐渐模糊的弥散斑,这就是透 镜的球面像差,简称为球差。 球差可以通过设置光阑而减 小。
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透镜的球差
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2.彗 差 (broom aberration)
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荧光显微镜的种类
A 透射式
B 落射式
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荧光显微镜的主要部件
透射式
落射式 • 汞灯光源 • 激发滤色镜 • 分色镜 • 吸收滤色镜
• 汞灯光源
• 激发滤色镜
• 暗场聚光镜
• 吸收滤色镜
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透射荧光显微镜的构造
吸收滤色镜
汞灯箱
暗场聚光镜 激发滤色镜
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落射荧光显微镜的构造
标本所在空间的范围。
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◄
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(五) 景 深 与 焦 长
景深(depth of field)又称焦点深度, 是指在成一幅清晰像的前提下,像平面 不变,景物沿光轴前后移动的距离称 “景深”。
景物不动,像平面沿光轴前后移动 的距离称“焦长”。
◈
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■
(六) 镜 像 亮 度 和 清 晰 度
镜像亮度即显微镜的图像亮度的简称。 高倍率工作条件下的暗场、偏光、摄影显 微镜等都需要足够的亮度,与照明及物镜
的性能参数相关。
镜像清晰度是指图像的轮廓清晰、衬 度适中的程度。
◈ ⊃
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◄
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(七) 工 作 距 离
工作距离是指从物镜前表面中心到被观察标本 间满足工作要求的距离范围,与物镜的数值孔径成
反比。
一般情况下,物镜的数值孔径赿大,其工作距 离赿小。
◈
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◄
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四、像 差 和 色 差
(一)、像差 1.球差( spheric aberration )
近光轴外的点光源发出的光束,经过透 镜中央和边缘部分后在垂直于光轴的同一成 像平面上也不能交于同一个像点。离光轴越 近的像会聚越好,亮度越大,亮点越小。于 是在成像平面上便形成一个顶端小而亮,远 离光轴方向形成逐渐增宽且亮度减弱的模糊 尾部,形如彗星,称为彗差。
◈
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■
透镜的彗差
光轴
◈ ⊃
透镜
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◄
■
3.像 散 (astigmatism)
远离光轴的物点发出的光,即使是以 细光束成像也不可能会聚于一点,而是在 像空间不同的成像面上或者成椭圆弥散斑, 或者在特殊位置形成圆形弥散斑,甚至是 形成两个垂直方向上的短亮线,这种成像 缺陷称为像散。
一般来说,透镜像散随透镜形状、光 阑位置而异,可以用正、负透镜适当组合 而消除。
N与D成反比 ,λ与D成正比
◈ ⊃
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■
提高显微镜分辨率的方法
(1)增大物镜的数值孔径 在物镜和盖玻片之间充以n 较大的油, 如香柏油n =1.52,不仅使n 增大,而且孔径 角也增大。 (2)用短波长的光照射 如紫外光显微镜,电子显微镜。
◈ ⊃
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◄
■
(四) 视 野
视野(visual field)又称视场 (field),是指通过显微镜所能看到
在物镜后焦面增加一个相板,相板上 有一个环形区,通过环形区的光比从其它 区域透过的光超前或滞后1/4λ,这样就使 通过标本不同区域光波的相位差转变为振 幅差。
◈ ⊃
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◄
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相衬显微镜照明原理
◈
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◄
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三、相 衬 显 微 镜
光通过标本致密区时发生衍射,产生
偏折光,相位和未受影响的直射光相比被
推迟了1/4λ。只有未发生偏折的的直射光
加,产生明反差。
◈
⊃
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◄
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四、倒 置 显 微 镜
倒置显微镜(Inverted Microscope)的 组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照 明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在 载物台之上,用于观察培养的活细胞,具 有相差物镜。