酶联免疫吸附技术分析及其在食品安全检测中的应用
无损检测技术在食品检测中的应用分析
建材发展导 向 ２ ０ １ ３ 年 ３月
【 文章编号 】 １ ６ ７ ２ — １ ６ ７ ５ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ３ ３ ３ — ０ ２
确度。
１ ． １ ． １ 简 介
近 红外光是指介于可见光和 中红外光之间的电磁波， 波长范
围是 ７ ０ ０ ２ ５ ０ ０ ｎ ｍ， 一般有机物在该 区的近 红外光谱吸收主要是 含氢基团 （ Ｏ Ｈ， Ｃ Ｈ， Ｎ Ｈ， Ｓ Ｈ， ｐ Ｈ ） 等 的倍频和合频吸收。由于分子 的倍频和合频吸收强度较弱 ， 因此样 品的近红外信 号较 弱， 这 为 样品不需要经过稀释等预处理就可 以直接 原样测定分析提供 了
波近 红外 反射法 ， 液态样 品多用短波近 红外透 射法， 而 固体既可 量） 。采用微波消解仪， 在 肉制品中加入硝酸密 闭消解 ， 消解液用 以用 反射 法 又 可 以用 透 射 法 测 定 。这 种 方 法 在 检 测 肉类 和奶 制 磷 钼 蓝 分 光 光度 法在 ６ ６ ０ ｎ ｍ 波 长 处 测 定 样 品 中磷 的含 量 。 品中得到应用 ，国外 已有人 成功利用近红外光纤探针实现 了在 微波还应用于有机分析中的样 品预处理 即微波辅助萃取。 如 加热过程 中检测猪 肉的水 分变化 ，为 肉类工业有效合理控制 加 测 定 动 物 性 食 品 中氯 霉 素 残 留 量 就 可 用 微 波 辅 助 萃 取 气 质 联 用 工过程提供 了一条有效的新途径 。 仪 。该检测方法 的回收率 为 ７ ６ ． ２ ～ ９ ４ ． ７ ％，相对标准偏差 为 ６ ． １ ～ 它也可作为一种非破坏性方法用来测定花生中的油含量， 能 ８ ． ６ ％， 最低检 测浓 度为 Ｏ ． １ ｇ ／ ｋ ｇ 。 获得与索 氏提取法相近 的结果 。 在水果、 蔬菜检测中 Ｎ Ｉ Ｒ实现 了
酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用
针 对 上 述 问 题， 可 以 从 以 下 几 个 方面进行有效改善。首先是改变制备 抗体的方法，结合待测物实际特性， 合理利用各种学科知识，融合立体化 学、计算机模拟和组合化学等方法， 建立科学的评价模型，提高筛选工作 的准确性和筛选效率。其次，提升克 隆抗体亲和性，分析多种检测对象。 在合成抗原时，可以通过控制条件， 将所有合成抗原体共同针对同一种类 型抗体，能够在一次实验中检验出多 种物质，避免出现假阳性与交叉反应 等问题。在实际检测中，为了避免发 生假阳性等问题，可以将一些明胶类 物质和牛血清蛋白添加到包被液当中， 同时提前将吐温 -20 添加到洗涤液内， 能够有效预防检测中因为非特异性吸 附造成的不良影响，提升检测灵敏度。
2 酶联免疫吸附试验的具体应 用问题和解决措施
2.1 酶联免疫吸附检测的主要问题
ELISA 检测的方法拥有较高的灵敏
度，无需进行反复处理，此外还拥有 检测成本低、操作便捷、特异性强等 特点，因此广泛应用于食品安全检测 当中。但是因为技术方面的限制，在 检测过程中还存在一定问题，比如制 备抗体困难，在选择试剂的过程中拥 有较高的要求，不能对多种物质进行 同时检测，对化学性质不稳以及低分 子量物质进行分析时存在一定的困难， 在对物质结构检测过程中容易出现交 叉反应等。 2.2 解决对策
Technology 科技 分析与检测
酶联免疫吸附法及其在食品分析中的应用
实验方法
2、包被：将抗原溶液加入到聚苯乙烯板孔中，使其充分干燥。这样可以使得 后续加入的特异性抗体与抗原结合。
实验方法
3、封闭：向包被后的孔中加入封闭液，以阻断未结合的位点，避免非特异性 吸附。
结论
结论
本次演示介绍了酶联免疫吸附法在食品微生物检测中的应用。该方法具有特 异性强、灵敏度高、操作简便、测定速度快等优点，能够有效地检测出食品中的 目标微生物，缩短检测周期，提高检测效率。然而，该方法也存在一些不足之处， 如可能出现假阳性或假阴性结果以及成本较高等问题。随着科学技术的发展和自 动化技术的不断进步，相信酶联免疫吸附法在食品微生物检测中的应用将会得到 更加广泛的应用和推广。
原理
原理
酶联免疫吸附技术的原理基于抗原-抗体反应。抗原是指能够引发免疫反应的 物质，而抗体则是免疫系统针对特定抗原产生的蛋白质。在ELISA技术中，待测 样品中的抗原首先与特异性抗体结合，形成抗原-抗体复合物。然后将复合物固 定在固体支撑物上，并加入酶标记的二抗，与固定化的抗原-抗体复合物结合， 形成酶-抗原-抗体复合物。最后加入底物，酶催化底物反应产生颜色变化，通过 颜色深浅判断待测样品中抗原的含量。
酶联免疫吸附法及其在食品 分析中的应用
01 引言
03 实验方法
目录
02 原理 04 参考内容源自引言引言酶联免疫吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种 基于抗原-抗体反应的灵敏度高的免疫分析方法。在食品分析领域，ELISA作为一 种重要的检测手段，可用于食品质量检测、食品数量检测以及食品成分分析等多 个方面。本次演示将详细介绍ELISA的原理、实验方法及其在食品分析中的应用， 并通过实际案例分析该方法与传统方法的比较优势和不足。
酶联免疫吸附技术及其在食品安全检测中的应用
酶联 免 疫 吸 附 分 析 （ｎｙ ｅ ｌ ｋｄｉ ｍ ｎ ｓｒｅｔ ｅ ｚｍ —ｉ ｅ ｕ ｏｏｂｎ ｎ ｍ
Ｓ ｉｎ ｅａ ｄＴ ｃ ｎ ｌｇ Ｎ ｎｉｇＡｇｉｕｔｒｌ ｉｅｓｔ ， ｎｉｇ２ ０ ９ Ｊａ ｇ ｕ Ｃｈｎ ． ． ｎ ｚ ｏ ｏｙｅ ｈ ｏｏ ｙ ｃｅ ｃ ｎ ｅｈ ｏｏｙ， ａ ｊ ｒ ｌ ａ ｖ ｒｉ Ｎａｊ １ ０ ５， ｉｎ ｓ ， ｉａ ３ Ｙａ ｇ ｈ ｕＰ ｌｔｃ ｎ ｌｇ ｎ ｃ ｕ Ｕｎ ｙ ｎ
业职业技术学 院 ， 江苏 扬 州 ２ ５ ２ ） ２ １７
摘 要 ： 要 综 述 酶 联 免 疫 吸 附技 术及 其 在 农 药残 留 、 品 中违 法添 加 的非 食 用物 质 、 品 中生 物 毒 素 、 品 中病 原 主 食 食 食
微 生物 、 转基 因食 品 等 食 品 检 测 中的 应 用 ， 根 据 当前研 究 现 状进 行 了展 望 。 并
专 题 论 述
霞黠研究与开发
Ｆ ｏ ｓ ａ ｃ ｄＤｅ ｅｏ ｍ ｅ ｔ ｏ ｄ Ｒｅｅ ｒ ｈＡｎ ｖ ｌ Ｄ ｎ
２１ ０ １年 １ 月
第 ３ ２卷第 １ 期
ｉ ７ ＝＝ ５ Ｉ
酶联免疫吸 附技术 及其在食 品安全 检测 中的应 用
张 占军 。 富 花 王
（． １扬州环境资源职业技术学 院 ， 江苏 扬州 ２ ５ Байду номын сангаас ；． ２ １７ ２ 南京农业大 学 食 品科技学院 ， 江苏 南京 ２ ０９ ；． １０ ５ ３ 扬州工
酶联免疫法在食品卫生检测中的应用
快、效率高、特异性强等诸多优点，现已被广泛应用于食品行业中的食品药物残留检测、食品微生物检测、食品毒素检测及转基因食品检测。
酶联免疫吸附法在食品农药残留检测中的应用
食品农药残留是指农药使用后残留于食品原材料中，导致食品成品含有微量的农药原体及其相关降解物的总称。
对于食品药物残留的检测方法，我国应用较多的是气相色谱技术及其联用技术、高效液相色谱技术及其联用技术，但是这两种方法检测相关设备价格形态观察来检测食品中具有危害性的微生物，或利用化学反应通过测定食品微生物相关代谢产物来对食品中微生物进行检测。
应用显微镜技术检测食品微生物需要观察微生物菌落，不仅导致检测周期较长，还经常会碰到不同微生物但菌落形态却极其相似，导致无法对食品微生物进行定性。
利用酶联免疫技术检测食品中的微生物，相比传统的检测技术表现出诸多优点，酶联免疫技术检测周期短、
特异性强等，使酶联免疫技术在食品微生物检测领域具有较大的发展空间。
食品检测中酶联免疫吸附试验的应用
食品检测中酶联免疫吸附试验的应用作者：梁玉博来源：《现代食品》 2018年第7期梁玉博（信阳市食品安全监督所，河南信阳464000）摘要：在社会发展的过程中，食品安全问题不断恶化，其对整个社会的运行也产生了越来越大的影响。
这种情况下，食品不良残留物质的有效检测就变得非常重要。
酶联免疫吸附试验主要是通过免疫荧光、组织化学的有效结合，然后综合分析抗原抗体反应后的高度特异性、酶高度催化情况，从而实现对食品成分的有效检测。
本文根据食品检测中酶联免疫吸附试验应用情况，对整体食品安全问题检测问题进行了简单的分析。
关键词：食品检测；酶联免疫吸附试验；应用中图分类号：TS207.3作者简介：梁玉博（1988—），女，食品安全监督员；专业方向为食品安全。
酶联免疫吸附试验是基于免疫酶特点的免疫测定方法，其在使用过程中具有敏感度高、方便快捷、准确度高等优良特点。
在单克隆抗体技术发展过程中，免疫试剂盒测试技术逐渐呈现了商业化的特点。
食品问题不仅与人体健康息息相关，而且对国计民生具有一定的影响，受到了政府及相关专业人士的极大关注。
因此，酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用具有非常重要的意义。
1 酶联免疫吸附试验检测流程1.1 样品预处理酶联免疫吸附试验在检测过程中，一般需要一定的样品预处理。
预处理可能会在不同程度上破坏食品的内部结构，为了避免过程分析物质提取出现问题，可采用100%的水、甲醇、丁醇混合物物质，按75∶25∶5的比例提取物质。
在特殊情况下，也可以采用超临界萃取技术利用液相甲醇改性过的二氧化碳，结合三元混合溶剂的应用，最大程度地降低酶联免疫吸附试验前期分析物质处理的损失。
1.2 抗原合成及抗体选择在小分子物质检测过程中，由于其自身缺乏免疫抗原的特点，需要应用免疫原性载体蛋白。
对于半抗原改性环节，可综合考虑偶联比、位点、偶联剂等因素，选择相应的偶联载体蛋白结合位点，然后在相应催化剂的作用下合成完全抗体。
而在抗体选择环节可根据具体检测项目，结合效价、稳定性、交叉反应等因素，确定相应的抗体偶合物。
酶联免疫吸附技术分析及其在食品检测中的应用
酶联免疫吸附技术分析及其在食品检测中的应用随着我国社会经济的飞速发展和人们生活水平的提高，食品安全问题日益成为人们关注的热点，对酶联免疫吸附技术进行分析和相应的技术探究，与人们的健康息息相关。
文章通过详细阐述食品安全检测技术的发展状况和必要性，从食品安全检测过程中极易出现的通病着手分析，并提出相应的解决对策，以期为相关从业人员提供借鉴。
标签：酶联免疫吸附技术；食品检测；技术操作近些年来，食品安全问题成为了社会大众普遍关注的焦点问题。
为了满足人们对健康饮食的急切需求，寻找能够快速准确检测食品的方法和创新发展食品检测技术对保障食品安全至关重要，尤其是要迅速发展酶联免疫吸附技术。
作者通过对酶联免疫吸附技术的运用现状进行分析探究，不仅有利于保障食品安全问题，推动食品安全检测技术的发展，还有利于为社会成员构建合理科学的饮食结构，提高人们对食品安全问题的重视，促进社会朝着正确的方向健康发展。
1 有关酶联免疫吸附技术的概述1.1 酶联免疫吸附技术的基础原理酶联免疫吸附技术是指利用酶的高效催化作用和抗原抗体反应的高度特异性相结合发展而建立的一种食品检测免疫分析技术。
酶联免疫吸附法的英文简称是ELISA，多运用于食物中生物毒素、重金属、病原微生物等食品的检测。
[1]酶联免疫吸附技术的原理是指将某种固相载体和具有免疫活性的抗原体相结合，加入特异性酶标记的抗原体和受检样品进行化学反应形成复合物，在终止化学反应时对比被结合的酶标和待测样品中抗原体的量，再对其他相关物质进行洗涤，加入酶所催化反应的底物，形成有色产物，最后对有色产物进行定量分析，从而达到检测食物中某种物质的目的。
[2]然而，对于不具有免疫性的且相对分子质量都较低的物质，需要先将其与大分子蛋白质相结合，形成具有免疫原性的完整抗原体，再运用酶联免疫吸附技术进行食品检测。
1.2 酶联免疫吸附的技术分类根据酶联免疫吸附技术的反应途径，将其分为间接法测抗体技术、竞争法测抗原技术和双抗体夹心法测抗原技术。
酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用探析
Yao Liwei, Zhou Mingjie (Luohe Vocational College of Food, Luohe 462000, China)
摘 要：随着国民教育水平的提高，我国消费者对食品安全的要求也越来越高。食品安全的检测成为研究 的一个重点方向。本文通过对酶联免疫吸附试验的产生和在食品安全具体方面的检测进行阐述，为酶联免疫吸 附试验在食品检测上更广泛的应用指明方向，使酶联免疫吸附试验能更有效地保障食品安全。
分析检测 Analysis -1434/ts.2020.17.060
酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用探析
Application of Enzyme Linked Immunosorbent Assay in Food Detection
作者简介：姚利伟（1990—），女，本科，助理实验师；研究方向为食品营养检测。 192 / 现代食品 XIANDAISHIPIN
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3 酶联免疫吸附试验与食品检测
3.1 对有机毒害物质的检测 由于近几十年来酶联免疫吸附实验逐步成熟，检
关键词：酶联免疫吸附试验；食品安全；推广应用；保障 Abstract：With the improvement of national education level, Chinese consumers have higher and higher requirements for food safety. The detection of food safety has become an important research direction. In this paper, the emergence of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and its detection in specific aspects of food safety were described, which pointed out the direction for the wider application of enzyme-linked immunosorbent test in food detection, so that the enzyme-linked immunosorbent test can more effectively protect food safety. Key words：Enzyme linked immunosorbent assay; Food safety; Popularization and application; Guarantee 中图分类号：R155.5
酶联免疫技术在食品检测中的应用
品检 测中的进一步应用提供参考。
关 键 词 ： 物技 术 ； 联 免 疫 （ ＬＳ ； 品检 测 生 酶 Ｅ ＩＡ）食
随着食品工业的发展 ，传统分析方法 已远不能满足食品检测的要 测定方法 ，用该法检测动物尿样 、脏器或饲料等样品，检测范围为 ５ ｌ１ ０ ｇ 表明该法灵敏度高、 ６ Ｌ／ ９ ｍｌ 特异性强。王黎丽嘴 建立三 求。 人们需要灵敏度高 、 ｌ强 、 陕捷的检测方法 ， 特异 生 简便 而生物技术的 １．Ｌｇｍ～ ． ｎ／ ， ＬＳ 发展使这一要求成为可能。 根据近年来国内外 的研究进展 ， 本文将对酶 聚氰 胺直 接 和间接 竞争 Ｅ ＩＡ检 测方法 ，线 性检 测 范 围分 别 为 ０ ５ １ ｇ ．～０ ／ ０ Ｌ和 ０ Ｍ ０ ０ ｇＬ ． ０ ／。 １ 联免疫测定技术在食品检测中的应用做一简单的介绍。 ２ ，食品中过敏原的检测。对于鱼类的过敏反应是严重的食物过 ．４ １ １基本 原理 严重者能引起窒息死亡。 为此世界上很多 国家的食品机构 酶免疫方法和其它免疫技术一样 ，都是以抗体和抗原的特异性结 敏反应之一 ， ２０ 年 Ｆｅｔ ｅ 合为基础的 ， 其差别在于酶免疫方法 以酶或者辅酶标记抗原或者抗体 ， 要求在预包装食 品的标签上强制实施鱼类成分标识。 ０ ７ ，ａｓ 等 ＬＳ 该方法成功地检测出了多种鱼 用酶促反应 的放大作用来显示初级免疫学反应 ，使检测水平接近放射 喂 出用夹心 Ｅ ＩＡ法检测鱼类过敏源， 免疫测定法 。酶免疫测定法可分为非均相免疫测定法和均相免疫测定 类。 检测限为每千克食物中含鱼小清蛋白 ０ ｌ ， ． ｍｇ相当于每千克食物中 Ｏ ｇ 降低对鱼类 法， 非均相法又有固相法和液相法之分。实践中， 常用的是非均相酶固 ５ｍ 鱼 肉。这种结果 已经足以控制食品中的鱼蛋白含量 ， 相免疫测定法即 Ｅ ＩＡ法 ， ＬＳ 该法将抗原或抗体结合到固相载体表面， 将 过敏消费者发生过敏反应的风险。 抗原或抗体相关物质与酶交联成酶结合物，一方面保持了与相应抗原 ２ 食品中生理活性物质的检测。食品中常含有一些生理活性物 ． ２ 由于食品成分十分复杂 ， 研究人员一直在寻找快速 、 准确 的检测 出 或抗体结合 的免疫特 性， 另一方面还具有酶活ｌ 当酶结合物同相应 的 质 ， 生。 生物质的方法 。 乳铁蛋 白是一种铁结合糖蛋 白， 具有多种生理活 抗原或抗体结合后 ， 则形成酶标抗原抗体复合物 ， 复合物上的酶遇到相 这些活ｌ 噜 ＬＳ 最小检出量 应底物时 ， 可以催化产物水解、 氧化或还原 ， 从而产生有色物质。 根据有 性。张英华 应用 Ｅ ＩＡ检测牛初乳中乳铁蛋白的含量 ， 为 ０ ｎ／ ， ．ｇ ５ ｍＬ 与通常采用 的电泳法和免疫扩散法相 比， 具有快速、 准确 ， 色物质的有无及其浓度 ，即可间接推断被检样品中有无相应抗原或抗 体存在， 数量多少 ， 从而达到定性和定量测定的 目的０ １ 。 可同时检查几十个甚至几百个样品的优 点。朱慧莉“ Ｉ 等用 Ｅ ＩＡ检测 ＬＳ 在实际应用中 Ｅ ＩＡ技术主要有直接法 、 ＬＳ 间接法 、 双抗体夹心法 、 免疫球蛋 白。免疫球蛋白是一类具有抗体’．． 能与相应抗原发生特 活ｆ 且 直接竞争法 、间接竞争法 、捕获包被法 、Ｂ — ＬＳ Ａ Ｓ Ｅ ＩＡ法 、Ｃ — ＬＳ 异性结合的球蛋 白，也是人类体液的一种免疫因子 ，能杀死细菌和病 Ｐ Ｒ Ｅ ＩＡ 法、 Ａ蛋白酶联法 、 免疫吸附法和组织印迹法等几种类型目 斑 。 毒， 增强机体的防御能力。近年来 ， 研究人员将 １ 用作食品添加剂生产 ｇ ２在食品检测中的应用 保健食品， 如婴儿配方奶粉 、 乳珍等。常规的蛋 白质分析方法无法检测 ２１ ．食品中有毒有害物质的检测。 ｌ 的含 量和 潘 ， 用 Ｅ ＩＡ可 以成功 的解决 这个 问题 。 ｇ 应 ＬＳ ２１ 食品中微生物的检测。目前传统的微生物学方法仍然是食 品 ．１ ． ２ 转基因食品的检测。随着转基因食品的不断普及 ， ． ３ 越来越多的 检测中常用的方法 ， 但存在操作繁琐 、 工作量大等缺点。对大部分微生 国家要求对转基因产品实行标签制度 ，这就对对转基因食品的检测提 物来说， 用传统方法检测至少需要 ４ ５ ～ ｄ的时间， 有些致病微生物甚至 出了更高的要求。转基 因食品或使用转基因原料的食品检测除了 Ｐ Ｒ Ｃ 无法进行人工培养。而使 用Ｅ ＩＡ方法 ， ＬＳ 比常规培养法要提前 ３ ４ 技术直接检测转基因外 ，还能用 Ｅ ＩＡ法检测某些特定的转基因表达 ～ ｄ出 ＬＳ 结果， 不需要特殊试验设备 ， 肉眼即可观察结果 ， 且样品易保存。沙门氏 蛋 白， 以分析食品的原料是否来 自 转基因生物。 菌是引起细菌性食物 中毒的主要致病菌之一 ，田银芳 １等应用直接 ３ １ 白卫滨等Ⅱ以美 国 、 阿根廷 、 巴西转基 因大豆等为材料 ， 建立 了 Ｅ ＩＡ方法对 ３ ０ ＬＳ ５ 份奶样进行沙门氏菌的检测， 与常规方法相比， 该法 Ｅ ＩＡ法定量检测抗草甘膦转基因大豆 Ｃ ４ Ｐ Ｓ Ｓ蛋白的方法 ， ＬＳ ＰＥ －Ｐ 成功 的敏感 胜和特异 ｌ分别为 １０ 生 ０％和 ９ ． 所需检测时间仅为 ２ ３ 。 ９ ％， ７ ～ ｄ 检测出不同转基因大豆中 Ｃ ４ Ｐ Ｓ Ｓ蛋白的含量， ＰＥ —Ｐ 从而为抗草甘膦转 ２． ．２食品中毒素的检测。目前发现能引起人中毒的霉菌代谢产物 基因大豆中 Ｃ ４ Ｐ Ｐ 蛋 白的定量检测提供了有效的手段。 １ ＰＥ ＳＳ 至少有 １０种以上 ， 的产毒性真菌有曲霉菌属 、 ５ 常见 青霉菌属 、 镰刀菌 ３发 展趋 势及展 望 属等 ， 中最常见且研究最多的是黄曲霉毒素 、 曲霉毒素等。Ｂａ — 其 赭 ｉ ｎ 酶联免疫吸附技术具有检测快速 、 、 专一 灵敏的牦 将在食品检测 ｃｒｉ Ｅ ＩＡ检测牛奶 中黄曲霉毒素 Ａ Ｔ 的残留量 ， ａ ｉ ＬＳ ｄ￣ Ｆ Ｍ１ 结果表明， 当 分析方面将得到广泛应用。食品中所研究的大小分子物质都可能直接 黄曲霉毒素 Ａ Ｔ 浓度大于 ３ ｐ ｔ ，ＬＳ Ｆ Ｍ１ ０ ｐ 时 Ｅ ＩＡ比高效液相色谱 的精确 或间接地成为抗原 ，因此基本可以实现用 Ｅ ＩＡ方法对食品中的各种 ＬＳ 度和 准确度 要 高 。 物质进行检测 ， 从而对各种病毒害物质进行控制， 保证食品安全。 ２ ．食品中残留药物的检测 。药物残留是指药物使用后残存于食 ．３ １ 参考文献 品原料与半成品食品及成品中的微量药物原体 、 有毒代谢物 、 降解物以 『蒲健 ， １ ］ 冯晓红 ．ＬＳ 酶 联免 疫吸 附测定 法 简介ｌ 肉类研 究 ，０ ２２ ： Ｅ ＩＡ Ｊ Ｉ ２０（） 及杂质 的总称。 食品中残留的药物 、 抗生素等不仅直接危害到消费者 的 ４１ ４２ － ． 健康 ， 而且也影响我国的农副产品出口。 这一问题已引起人们的高度重 ［水小溪， ２ Ｊ 蔡乐， 赵宝华．ＬＳ Ｅ ＩＡ技术在食品安全检测 中的应用【 生命科 Ｊ １ ． 视。 传统的分析方法不仅需要昂贵的仪器设备 ， 且操作烦琐对药物中毒 学仪器，０ ８６ １ ） １５ ． ２ ０ ，（０ ： — ３ ５ 事件不能 陕速做出诊断。 ［田银芳 ， ３ 】 王翌明．ＬＳ Ｅ ＩＡ方法与国标法在检测鲜奶中沙 门氏茵的比较 自 １８ 年 以来 ，ＬＳ ９３ Ｅ ＩＡ成为许多国际权威分析机构 （ Ａ ＡＣ 分 研究 中国乳品工业，９ ８３ — ３ 如 Ｏ ） １９ ：２ ３ ． 析残留农药 的首选方法。Ｅ ＩＡ技术已广泛用于有机磷类 、 ＬＳ 有机氯类 、 Ｂｉｎ ａ ｄ ． ｔｒ ｎ ｔｏ ｏ ｆ ｔｘｎ ａ ｃ ｒｉ Ｄｅｅ ｍｉ ａｉｎ ｆ ａ ａｏ ｉ Ｍ．ｅ ｉ ｅ ｎ ｍｉｋａ ｃ ｍｐａ ａ ｌ ｒ ｓｄｕ ｓ ｉ ｌ： ｏ ｒ— 除虫菊酯 、 磺胺类等农药残留的检测。董玉华等睬 用间接竞争酶联免 ｒｖ ａ ｓ ｓ ｍｅ ｔｏ Ｉ Ａ ａ ｄ Ｌ —ＨＰＬＣ ｔｏ ｓ ｎ ｕ ｔｉ ｉ ｎ ｉｅ ｓｅ ｓ ｎ ｆＥＬ Ｓ ｎ ＡＣ ｍｅ ｈ ｄ ． ｄ ｓｒ Ａｌ Ｉ ｅ ｍｅ — 疫吸附分析方法 ，来测定海水样 品和海洋贝类中的有机氯农药滴滴涕 ｔ ｉ１９ ，６３ １ ：７ — ７ ． ａ ，９７ ３（６ ）８ ０ ８ ６ ｒ 及其主要代谢产物的含量。张婧等 在前期建立溴氰菊酯间接竞争 ｆ 玉华， 酶联免疫吸附方法分析海水和贝类中的滴滴涕及代谢物 ５ 懂 等． Ｅ ＩＡ检测方法的基础上 ，成功研制组装出溴氰菊酯残 留检测 Ｅ ＩＡ Ｉ． ＬＳ ＬＳ Ｊ水产科学 ，０７４ ：２ — ３ Ｊ ２ ０ （ ） ９ ２． ２ 试剂盒 ， 基本满足了溴氰菊酯残留检测的需要 。 ｆ张婧 ， 溴氰 菊酯残留检 测 Ｅ ＩＡ试剂盒的研 制【北京农学院学 ６ ］ 等． ＬＳ Ｊ １ ． 近几年 ，瘦肉精（ “ 盐酸克伦特罗 ）、 ” 三聚氰胺引起 的食物中毒每每 报 ，０ ９４ ：７ ３． ２ ０ （ ）２ — ０ 见诸报端。陈继明等吼 黄永科等的研究基础上建立了克伦特罗 Ｅ ＩＡ ｛ 芏 ＬＳ 陈继明， 黄士新 ， 周辉 ， 等冲 国兽 医科技，０ １３ （） （ ２０ ，１６ ： 下转 ６ ８页 ）
酶联免疫吸附技术分析及其在食品安全检测中的应用
●Ｉ
酶联 免 疫 吸 附 技 术 分 析 及 其 在 食 品安 全 检 测 中的 应 用
何 啸 峰
（ 梅 州 市质 量计 量 监督 检 测所 广 东 省梅 州市 ５ １ ４ ０ ０ ０ ） ［ 摘 要］ 酶联 免疫 吸 附技 术是 一种 对免 疫 系统 的分 析 方法 ， 这 种 方法 操作 简 单 、 针对 性 强 、 快速 有效 ， 常用 在对 食 品的 安全 检测 中 。 文 章介 绍 了酶联 免 疫 吸 附技术 的 工作原 理 和具 体应 用类 型 ， 并分 析 了酶联 免疫 吸 附技术 在食 品安 全检 测 中的应 用 现状和 发展 前景 。 ［ 关键 词］ 酶 联免 疫 吸 附技术 ； 食品安 全 检测 ； 应用 分析 中图分 类号 ： Ｆ ７ ６ ８ ． ２ 文 献标 识码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ９ — ９ １ ４ Ｘ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ６ — ０ ２ ５ １ — ０ １
性， 而对 熟食 的 肉制 品就 需要对 热 稳定 的肌 肉抗原 进行 检测 。 运 用Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ技术
为 准确 的 效果［ １ 】 。 在 以上 的反 应体 系 中 ， 酶 促反 应只 需要 进行 一 次 ， 而抗原 一 抗 体 的免疫 反 应则 可 以进行 一 次或数 次 。
１ ． ２ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法 的应 用分 类
现代 社会 中 的食 品安 全 问题一直 是人 们最 为关 注的话题 。 近年 来 ， 有关食 品的质 量安 全 问题 层 出不穷 ， 严 重 影响 了人们 的身体 健康 和国 家的 兴旺发 达 ， 恶 性食 品污 染 的案件 越来越 多 ， 有许 多 的消费者 因此 食物 中毒 甚至 死亡 。 酶联 免 疫吸 附技 术兴 起于 ２ ０ 世纪 ７ Ｏ 年代 ， 经过 技术 的不 断成 熟 ， 逐渐成 为 了食 品农 药 残 留、 重金 属污 染 、 食 品添 加剂等 检 测的 主要 应用 方法 。 １ ． 酶 联 免疫 吸附 技术 简介 １ ． １ 酶联 免疫 吸附技 术 的工作 原理 酶 联免 疫 吸 附分 析 技术 （ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ — ｌ ｉ ｎ ｋ ｅ ｄ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ｓ ｏ ｒ ｂ ｅ ｎ ｔ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ， 简 称 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 又称 为酶 标法 。 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ是一种 检测性 技 术 ， 能把具 有高 效催 化作 用的酶 与 抗原 、 抗 体 的特异 性反 应有机 地结 合起 来 ， 这 种 技术对 抗原 和抗体 都有 检测
酶联免疫吸附反应的技术进展及应用
ELISA的基本原理是利用抗原-抗体反应的特异性，将特异性抗体或抗原固相 化在固体表面上，再与待测样本中的相应抗原或抗体发生特异性结合，加入酶标 记的二抗，最后通过底物显色反应，定量或定性分析待测样本中的抗原或抗体。
随着生物技术的不断发展，ELISA技术也在不断进步。在抗体方面，越来越 多的重组抗体和基因工程抗体被应用于ELISA中，这些抗体的制备过程更加简单， 纯度和特异性更高。在标记技术方面，酶标记物的选择更加多样化，如碱性磷酸 酶、β-半乳糖苷酶、辣根过氧化物酶等，以满足不同检测需求。同时，一些新 型的检测系统，如微孔板、磁性颗粒和纳米材料等被引入到ELISA中，使得检测 更加灵敏、快速和自动化。
6、洗涤：清洗，去除未结合的酶标记抗体或抗原。
7、显色：加入底物溶液，酶催化底物生成有色产物，根据颜色深浅判断抗 原或抗体的浓度。
8、终止反应：加入终止液，停止酶催化反应。
9、读数：在酶标仪上读取各孔的光密度值，根据标准曲线计算抗原或抗体 的浓度。
三、ELISA酶联免疫吸附试验原 理
ELISA酶联免疫吸附试验基于抗原抗体反应的特异性。抗原和抗体分别固定 在固相载体和酶标记物上，当两者相遇时，发生特异性结合。通过洗涤步骤去除 未结合的成分，仅留下结合在固相载体上的抗原-抗体复合物。然后加入酶标记 的抗体或抗原，进一步与复合物中的抗原或抗体结合。最后加入底物溶液，酶催 化底物生成有色产物，根据颜色深浅判断抗原或抗体的浓度。
酶联免疫吸附反应的技术进展及应 用
酶联免疫吸附反应（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一 种基于抗原-抗体反应的经典免疫分析方法。在过去的几十年里，ELISA技术取得 了显著的技术进展，使其在生物医学、环境保护、食品检测等领域中的应用越来 越广泛。本次演示将介绍ELISA的技术进展及其在不同领域中的应用情况，并通 过案例分析探讨其优缺点和发展趋势。
酶联免疫吸附法在食品检验中的应用
酶联免疫吸附法在食品检验中的应用作者：高原刘国清段丽红来源：《维吾尔医药》2013年第07期摘要：酶联免疫吸附技术（ELISA）是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合的一种免疫分析方法，具有操作简便、快速、有效、特异性强等特点，能批量检测食品中的药物残留、病原微生物以及转基因食品等。
本文主要阐述了酶联免疫吸附法在食品安全检测中的应用。
关键词：酶联免疫吸附技术（ELISA）、食品安全、检测食品安全问题是全球关注的焦点，它直接影响人类健康和经济发展，几年前的苏丹红事件、啤酒甲醛风波、人造蜂蜜事件、乃至今年的三鹿奶粉事件都给人们敲响了食品安全的警钟。
如何快速、有效检测食品中的毒害残留，保证食品的安全供应是食品检验中的一个重点。
酶联免疫吸附技术（ELISA）是在免疫荧光和放射免疫分析技术基础上形成的，将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合的一种免疫分析方法。
该方法操作简便、快速、有效、特异性强，能广泛用于临床标本、药物残留、转基因食品以及病原微生物检测等多个领域。
本文主要概述了酶联免疫吸附法在食品安全检测中的研究及应用前景。
1、酶联免疫吸附法概述1.1 原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
1.2分类目前ELISA检测方法的分类仍没有统一的定论，在这些测定方法中都有三个必要的试剂：（1）固相的抗菌素原或抗体，即"免疫吸附剂"（immunosorbent）；（2）酶标记的抗原或抗体，称为"结合物"（conjugate）；（3）酶反应的底物。
酶联免疫技术在食品安全检测中的应用
酶联免疫技术在食品安全检测中的应用摘要：文章介绍了酶联免疫技术（elisa）的原理和方法，从生物毒素、药物残留、致病微生物、重金属污染和食品的品质等方面评述了其在食品安全检测中的应用。
并对其在食品安全检测中的广阔应用前景进行了展望。
关键词：酶联免疫；食品安全；检测1 引言食品安全（food safety）问题一直是关系到人体健康和国家长治久安的重大问题。
然而，当下的食品安全问题非常严峻，不仅是我国甚至全世界的食源性疾病、恶性食品污染案件都不断上升。
其中有的病例不多，但病死率高、社会影响大，如猪肉中的瘦肉精（盐酸克伦特罗）残留；有的引起众多消费者急性发病乃至死亡，如肠出血性大肠杆菌o157：h7食物中毒。
1971年engvall[1]和perlmann发表了酶联免疫吸附剂定量测定igg的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。
elisa方法由于其操作程序简便且检验结果灵敏行的特点，已经广泛应用于食品农、兽药残留、重金属污染、生物毒素、食品添加剂检测等诸多方面。
2 elisa技术在食品安全性检测中的应用现状2.1 食品中生物毒素检测真菌毒素（mycotoxin）是真菌产生的次级代谢产物，其中的有一些对人类危害较大，它们一般同时具有毒性强和污染频率高的特点，其中毒性最大、致癌能力最强的是黄曲霉毒素（af）。
afbl具有强致癌性和强免疫抑制性。
即使在含量极低时仍具有很大的毒性。
自1977年抗黄曲霉素b1的单克隆问世以来，几乎所有重要真菌毒素（如黄曲霉毒素、伏马毒素、赭曲毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯酮、展青霉素等）的elisa检测方法均已建立。
江涛对黄曲霉毒素b+g标准品的最低检出浓度为0.13ng/ml，对样品的最低检出量为1.50μg/kg。
校正曲线的线性范围为0.26～20.00ng/ml。
2.2 植物性食品农药残留检测农药残留在食品安全问题上也十分严峻。
酶联免疫检测方法在食品安全检测中的应用
酶联免疫检测方法在食品安全检测中的应用酶联免疫检测方法（ELISA）是一种有效的检测食品中有毒有害物质的方法。
随着人们对食品安全的关注度越来越高，这种方法在食品生产和检测中得到了广泛应用。
本文将介绍ELISA在食品安全检测中的应用及其优势。
一、ELISA的工作原理ELISA是一种免疫学诊断方法，是基于抗体和抗原相互作用的原理。
在ELISA检测中，首先将待检测样品加入到已知抗体覆盖的微孔板中，然后将颜色剂添加到孔中，若该样品中含有抗原，则抗原将与固定于孔底抗体发生结合反应，此时颜色剂也会与抗原发生反应而显色。
如果样品中不含有抗原，则不会出现颜色反应。
通过检测样品颜色的变化来判断有无目标物质的存在。
二、ELISA在食品安全检测中的应用1.了解食品中养殖用药物残留：ELISA可以有效检测食品中养殖用药物的残留量，如磺胺类药物、青霉素类药物等。
检测结果准确、灵敏，同时，ELISA的检测时间较短，可以在很短时间内得到结果。
2.检测食品中的过敏原：ELISA可以检测食品中的过敏原，如鸡蛋白、花生、牛奶、大豆等。
这些物质可能导致许多人的过敏反应，而ELISA可以在短时间内非常准确地检测出这些物质。
3.检测食品中的致病菌：ELISA可以检测食品中的致病菌，如沙门氏菌、变形菌等。
这些细菌在食品中生长繁殖，会对人体健康造成较大影响。
ELISA可以在很短时间内检测出食品中是否含有这些致病菌，从而及时采取措施。
4.检测食品中的有毒有害物质：ELISA可以检测食品中的有毒有害物质，如黄曲霉毒素、三聚氰胺等。
这些物质可能对人体健康造成严重威胁。
使用ELISA可以有效地检测出这些物质，以保障人们的健康。
三、ELISA在食品检测中的优势1.快速性：ELISA检测速度快，可以在短时间内完成检测。
2.高灵敏度：ELISA具有较高的灵敏度，可以检测出极小量的物质。
3.高准确度：ELISA检测结果准确、可靠。
4.经济性：ELISA的检测试剂盒价格不高，同时操作简单，不需要复杂的仪器和设备。
酶联免疫分析技术在食品检验中的应用
１ 应 用 领 域
１ １ 食 品 中农 药残 留 的检 测 ．
自 １８ ９ ３年 以来 ， Ｌ Ｓ 成 为许 多 国际权威 分 析机构 （ ＡＯＡ 分 析残 留农 药 的首 选方 法 ． Ｅ ＩＡ 如 Ｃ） 有些 发达 国
家， 如美 国、 国已开 发 出商 品检测 试剂 盒应 用 于食 品 、 菜 和环境 中 的农 药残 留的检 测分 析 ． 今为 止 ， 德 蔬 迄 应
成分 以及 转基 因食 品的检测 中， 具有 很广 阔 的应用 前 景． 章较 为详 细描述 了其 在食 品分 析 中的 并 文 应用 ， 并揭 示 出在 未来 的食 品分析 检 测 中， Ｌ Ｓ 将会 成 为很 重要 的 一个 技 术手 段． Ｅ ＩＡ
【 键词】 酶联 免疫 吸附分 析法 ； 品分析 ； 测 关 食 检 【 中图分 类号】 Ｔ ２ ７ ３ 【 Ｓ０． 文献 标识 码】Ａ 【 文章 编 号】 １ ７ ～ ７ ４ ２ ０ ） ９０ ７ ３ ６ ３０ ０ （ ０ ６ ０ —０ ２０
长 期 以来 ， 物性 食 品 中的氯 霉 素 （ａ ） 留 问题 一 直备 受关 注． １ ８ 动 ｃｐ 残 自 ９ ４年 Ｃ ｍｐ ｅｌ 建 立检 测 Ｃ Ｐ ａ ｂ ｌ等 Ａ 的 Ｅ Ｉ Ａ 以来 ， ＬＳ 国外 研究 进展 较快 ， 国 内研究 相对 滞 后 ．他 们 采用 以人 工合 成 的氯 霉 素—— 牛 血清 白蛋 而 白 （ ＡＰ Ｂ Ａ） Ｃ － Ｓ 为包 被抗 原 ， Ｃ Ｐ—Ｂ Ａ 为抗 体 ， 抗 Ａ Ｓ 建立 间接 Ｅ ＩＡ 方 法 检测 Ｃ ＬＳ ＡＰ的标 准 曲线 ， 可确定 并 该法 用于 检测 Ｃ ＡＰ的最 小 限量 为 ０ １ ｇ Ｌ， ． ￣ ／ 最适检 测 范 围为 １ ０ ￣ ／ 该 标 准曲线 的建 立 为动物 性食 品 —１ ０ ｇ Ｌ．
elisa在食品检验中的应用
酶标抗原或抗体的质量直接影响到ELISA实验的 灵敏度和特异性，因此制备过程中需要严格控 制条件和纯化步骤，确保产品质量。
03
ELISA在食品检验中的应用
食品中农药残留检测
总结词
ELISA技术广泛应用于食品中农药残留的检测，通过抗体与抗原的特异性结合， 实现对农药残留的灵敏检测。
适用范围广
ELISA方法可以用于检测各种食品中 的有害物质，如蔬菜、水果、肉类、 乳制品等。
局限性
样品处理要求高
ELISA方法对样品处理的要求较高，需要去 除干扰物质，以免影响检测结果。
检测时间较长
ELISA方法的检测时间较长，需要一定的等 待时间才能获得检测结果。
成本较高
ELISA方法的成本较高，需要购买昂贵的试 剂和设备。
ELISA简介
定义
ELISA是酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）的简称，是一种基 于抗原-抗体反应的检测方法。
工作原理
将抗原或抗体与固相载体结合，使待测样本中的目标物质与固相载体上的抗原或抗体结合 ，再加入酶标记的抗体或抗原，最后通过底物显色反应，达到检测目标物质的目的。
03
未来可以通过改进ELISA方法，提高其特异性，减少假阳性或假
阴性的出现。
05
实际应用案例分析
案例一：ELISA在农药残留检测中的应用
总结词
ELISA在农药残留检测中具有高灵敏度和 特异性，能够快速准确地检测出食品中 农药残留量，保障食品安全。
VS
详细描述
ELISA技术利用抗原与抗体的特异性结合 ，通过酶标记物对信号的放大作用，实现 对食品中农药残留的定量或定性检测。该 方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好 等优点，可广泛应用于蔬菜、水果、粮食 等农产品中农药残留的检测。
酶联免疫吸附(ELISA)法在食品微生物检测中的应用
酶联免疫吸附（ELISA）法在食品微生物检测中的应用【摘要】食品微生物检测中，酶联免疫吸附（ELISA）法具有一定作用，其以显色为依据实现检测，形成了具有特殊性的分析方法。
本文主要从ELISA的原理及方法出发，分析ELISA检测法在食品细菌、真菌毒素、介导病毒检测方面的应用。
【关键词】食品微生物；检测；ELISA；应用酶联免疫吸附（ELISA）法以免疫酶技术为发展基础，将放射免疫测定法、免疫荧光法之优点结合，围绕抗体和酶复合物相结合的中心，依据显色进行检测，形成具有特殊性的试剂分析方法[1]。
目前化学分析领域中，ELISA已成为前沿课题，其作为新型免疫测定技术，具有检测成本低、反应灵敏、适用范围广、可定量、检测速度快等特点。
本文主要以ELISA的原理方法为切入，探讨食品微生物检测中ELISA的应用。
1 ELISA的原理及方法1.1原理以既不损坏抗原或抗体免疫活性又留存酶的活性为基础，使抗原或抗体与某种固相载体表面相结合，与某种酶相连接，使之成其为酶标抗原或抗体[2]。
测定时，对受检标本进行抗原或抗体的测定，使其与酶标抗原或抗体在步骤各异的情况下产生和固相载体表面抗原或抗体的反应。
通过洗涤，完成固相载体抗原或抗体相关物质的分开，将酶量（固相载体所含）与标本受检量形成比例。
酶反应相关底物加入后，在酶催化作用下，底物形成有色产物，其产物含量直接相关于标本受检量，以显色为根据，即可完成定量或定性的分析。
具有高催化频率的酶可将反应效果放大化，故可完成高敏感度的测定。
1.2方法ELISA测定方法有直接与间接之分，直接法主要在于酶标计抗体和样本（待检测）固相抗原的直接作用，底物加入后，显色；间接法主要在于固相载体带有已知抗原的依附并与样本（待检测）中抗体发生作用，再使酶标记抗抗体加入，与特异抗原抗体复合物中的抗体发生作用，予以酶底物的加入，显色。
ELISA通过改良，形成了多种方法，主要有双抗体夹心法、间接法、竞争法等等。
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１ 酶联免疫吸附技术简介
ｉ ． １酶联 免 疫吸 附技 术原 理 酶联 免疫 吸 附技术 是基 于 酶促 反应 和抗 体 、 抗 原
的免 疫反 应 的一种 检 测技 术 ， 由于每 种抗 体 、 抗 原 的 免疫 反应 具有 特异 性 ， 同时 酶 的催化 作 用效率 较 高 ， 因此 用 酶标记 相 应 的抗 体 并使 其 与 固相 载体 吸 附 的 抗体（ 抗原） 、 待测抗体（ 抗原） 发生具有 特异性 的免疫反 应， 生成 中间物质 ， 然后使 这一 物质 与酶 的底 物 发生 反应生成 有色 物质 ， 这 个有 色物质 的产量 在客观 上反 ２酶 联免 疫 吸附 技术在 食 品安 全检 测 中 的应 用 ２ ． ｉ食 品 农 药残 留检 测 映 了待测抗 体（ 抗原 ） 的量 ， 因此可作 为定性 分析 的依 据， 同时可用分 光 光度计 测 出物 质 的吸光 度值 ， 然后 蔬菜、 水果 等 的农药 残 留对 人们 的健 康产 生不 利 通过 吸光度值 可定量计 算 出抗体（ 抗原 ） 的量 。 影响， 用于 检测食 品农药 残 留的传统方 法为 高效液 相 １ ． ２酶联 免 疫吸 附技 术 分类 色谱法 ， 具有数据 可靠性 高 、 利 于定量分 析等 优点 ， 但 １ ． ２． １间接 法测抗 体 同时高 效液相 色谱 法相 应 的仪 器设备 造价 较为 昂贵 ， 实验周 期 长 ， 并且 操作 程序 繁琐 ， 对操 作人 员 的要求 固相 载体吸 附特 异性抗 原 ， 然后加入 待测物 质（ 含 抗体） ， 使二者 发生 反应形成 抗体一抗原 复合物 ， 冲洗 ， 较高 。 而酶 联免 疫 吸 附技术 的仪 器设 备 较为 简单 ， 投 然后再加入 用酶标 记的抗 抗体使之 与上述 的抗体 一 抗 资低 ， 并且 操作简 单 ， 可快速得 出结果 ， 可根据需要 进 原复合 物结合 生成抗 原～待 测抗体 一酶标记 抗体 复合 行定量 或定性分 析 ， 较为灵 活 ， 目前在 市场 上 的所有 技术 物， 再冲洗 ， 最后加入 酶的底 物 ， 如果待 测物 中含 有相 农药种 类都可 通过酶 联免 疫吸 附技术检 测 出来 ， 实 践证 应的抗 体 ， 则 通过底 物被复合 物 内的酶催 化发生 显色 开发 出 了更加 方便 快捷 的农药残 留测试 试 纸 ， 反应 ， 定为 阳性 ， 若待 测物 中不含 有 相应抗 体 则 由于 明准确 率 可 以得 到 保证 。 酶无处 附着 而被 冲洗 掉 ， 因而 无法 发生 显 色反应 ， 表 ２ ． ２食 品 中病 原微 生物检 测 中外食 品工 业 ５ １ Ｄ — ｆ Ｄ ｒ 巳 ｝ Ｆ ０ 口 ｄ Ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｔ ｒ ｒ ３ ５ ７
测中。
现 为 阴性 。
１ ． ２ ． ２双 抗 体 夹 心 法测 抗 原
用 固相 载体吸附具 有 已知特异 性 的抗 体组成 固相 抗体 ， 然后 加入 待测样 品（ 含 抗 原） ， 二者 结 合生成 抗 体一抗原 复合 物 ， 然后再 加入 酶标抗体 ， 形成抗 体一抗 原一酶标 抗体 的双抗 体 夹抗原 的复 合物 ， 然 后通过 加 入底 物 ， 与上 述方 法类 似 ， 如果 待 测物 中含 有相 应抗 原则底 物 会被 酶催 化显 色 ， 否 则底 物不 显色 ， 以此 作 为是否 存在抗 原 的定性分 析依据 ， 同时还可通 过显 色 反应颜 色 的深 浅定性 分析 抗原多 少 ， 并通过 吸光度值 可定量 计 算 出抗原 的量 。 １ ． ２ ． ３竞 争６ ｉ 测抗原 将 已知 特异 性 抗 体 与 固相 载体 结 合形 成 固相 抗 体， 加入待测样 品（ 含 抗原） 和酶 标抗原 ， 使酶 标抗原与 待测抗 原与 固相抗 体之 间的结合 形成竞 争 的局 面 ， 因 此 当待测样 品 中相 应抗 原含量越 高 ， 则其与 抗体结 合 的几率 就越高 ， 同时酶标抗 原与 固相抗 体结合 的几率 就越低 ， 表 现为加入 底物 后酶催 化显 色反应 越不易 发 生， 无 色或 浅色 定义 为 阳性 ， 反之 酶催 化 显色颜 色 越 深就 定义 为 阴性 。
关键 词 ： 酶 联 免 疫吸 附 食 品 安 全 检 测 应 用 中图分 类号 ： ＴＳ ２ ０ ７ 文献标识码 ： Ａ 文章编号： １ ６ ７ ２ ． ５ ３ ３ ６ （ ２ ０ １ ４） ０ ８ — ０ ０ ５ ７ — ０ ２
近年 来食 品安全 问题 出现的频率越 来越高 ， 如“ 苏 丹红 ” 、 “ 瘦 肉精 ” 等事件 的出现 ， 不但对 人们 的身体健 康带 来 了危害 ， 而 且还 影 响社 会 的安定 ， 随着 人们 对 食 品安 全的重视 程度 不断提 高 ， 食 品安 全检测 已经成 为 当前研 究最 热 门的领域之 一 ， 对 食 品安全检 测技术 运用 是 否得 当 关系 到食 品 的安 全 是否 能够 得 到 最大 程 度 的保 障 ， 无论 是 内销 还 是 出 口食 品 ， 都需 要做 好 食 品安 全检测 。 酶联免 疫吸 附技术（ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ －ｌ ｉ ｎ ｋ ｅ ｄ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ｓ ｏ ｒ ｂ ｅ ｎ ｔ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ， Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 是一种十分重要 的食 品 安全 检测 技术 ， 可广 泛用 于对 食 品农 药残 留、 病 原微 生物 、 生 物 毒素 、 添加剂 以及 是否 为转 基 因食 品 的检
端
— —
＋ ０ — ｝ — — — — 工 — — — 业 — — — 一 ＊
１ 中 外 食 品
分 析 检 测
酶联免疫吸附技术分析 及其在食品安全庆市质量技术监督检验检测 中Ｉ 心 黑龙江大庆 １ ６ ３ ３ １ １ ）
摘要： 本文介绍 了作为食品安全检测 主要 方法之一的酶联免疫吸 附技术 的原理及 其分类， 并讨论其在农 药残留检 测、 病原 微 生物检 测、 毒素检 测 、 肉制食 品违 法添加 剂检 测 以及 转基 因检测等 几个 方 面的实 际应 用。