三种提取蓝猪耳总DNA方法的比较
提取dna的方法及原理
提取dna的方法及原理提取DNA的方法及原理DNA提取是生物学和遗传学研究中的一项基础操作，它是获取DNA样本的过程。
DNA提取的方法有很多种，下面将介绍几种常用的DNA提取方法及其原理。
1. 高盐法高盐法是一种简单且常用的DNA提取方法。
其原理是利用高盐溶液中DNA与其他细胞组分（如蛋白质）之间的亲和性差异。
在高盐环境下，DNA更容易溶解而不与蛋白质结合，从而实现DNA的提取。
具体步骤包括细胞破碎、加入高盐溶液、离心分离DNA和去除蛋白质等。
2. 酚/氯仿法酚/氯仿法是一种经典的DNA提取方法。
其原理是利用酚和氯仿两种溶剂的密度差异，将DNA从细胞中分离出来。
具体步骤包括细胞破碎、加入酚/氯仿混合液、离心分离DNA和去除蛋白质等。
3. 硅胶柱法硅胶柱法是一种高纯度DNA提取方法。
其原理是利用硅胶柱上的硅胶颗粒与DNA之间的亲和性差异。
DNA样本在经过一系列处理后，通过硅胶柱，DNA能够与硅胶颗粒结合，而杂质则被洗脱。
最后，通过洗脱DNA，即可获得高纯度的DNA。
硅胶柱法的优点是提取纯度高、操作简单，适用于分子生物学研究和临床诊断。
4. 磁珠法磁珠法是一种高效、快速的DNA提取方法。
其原理是利用带有亲和基团的磁珠与DNA之间的亲和性，实现DNA的选择性吸附和洗脱。
具体步骤包括磁珠悬浮液制备、样本加入、磁珠与DNA结合、磁珠分离、洗脱DNA等。
除了上述常用的DNA提取方法外，还有其他一些特殊的DNA提取方法，如酶解法、离心法、凝胶切割法等。
这些方法在不同的实验和应用中具有各自的特点和优势。
总结起来，DNA提取的方法多种多样，选择适合的方法取决于实验目的、样本类型和实验条件等。
无论采用哪种方法，都需要严格控制实验操作，以确保提取到高质量的DNA样本。
DNA提取的成功与否直接影响到后续的实验结果，因此在进行DNA提取时，需要注意样本的保存、细胞破碎的方式、溶解液的选择等因素，以获得可靠且高纯度的DNA。
DNA的提取方法
DNA的提取方法DNA提取是在分子生物学研究和临床诊断中非常重要的步骤。
DNA提取的目的是获取足够纯净的DNA样本，以供后续实验和分析使用。
这篇文章将介绍几种常用的DNA提取方法。
1.高盐法：高盐法是最常用的DNA提取方法之一、它通过加入高盐浓度的缓冲液来破坏细胞膜并释放DNA。
首先，待提取的细胞或组织样本被收集并转移到离心管中。
接下来，加入裂解缓冲液，通常含有高浓度的盐并对抗离子泵，从而使细胞膜破裂并释放DNA。
裂解后，使用酒精或酚/氯仿萃取法来分离DNA与其他细胞组分。
最后，通过旋转沉淀法或乙醇沉淀法从溶液中提取DNA。
2.CTAB法：CTAB法是一种适用于植物和真菌等高纤维、低DNA含量的样品提取方法。
CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）作为一种阴离子表面活性剂，可以结合在DNA和脂质上，并形成沉淀，从而使DNA分离出来。
首先，样本被粉碎并浸泡在CTAB缓冲液中，含有CTAB、盐和EDTA等。
接下来，DNA与其他细胞组分一起沉淀，通过聚乙二醇进行沉淀，并通过离心分离。
然后，洗涤DNA沉淀并通过乙醇沉淀法或旋转沉淀法提取DNA。
3.柱式纯化法：柱式纯化法是一种用于高质量DNA提取和纯化的流程。
该方法基于DNA与硅胶膜吸附和洗脱的原理。
首先，细胞或组织样品经过裂解后，溶液经过去蛋白酶和去RNA酶处理。
然后，将样品通过柱子，DNA与硅胶膜相互作用，并形成强烈的结合，同时其他细胞组分被清除。
接着，使用洗涤缓冲液去除杂质，最后使用低盐缓冲液来释放DNA。
这种方法可以提供高纯度的DNA样本，适用于大规模DNA提取和高通量分子生物学实验。
4.磁珠法：磁珠法是一种基于磁性珠子的DNA提取方法。
该方法使用特定大小和表面修饰的磁性珠子将DNA选择性地吸附到表面上。
首先，待提取的细胞或组织样本被裂解，并加入磁珠和DNA结合缓冲液。
接下来，通过磁力将磁珠与DNA结合物分离出来，并洗涤去除杂质。
最后，通过低盐缓冲液将DNA释放出来并收集。
DNA提取
几种DNA提取方法的优缺点比较文章来源：洛阳吉恩特生物科技有限公司自然界中无论是植物、动物还是病毒，DNA作为大部分生物的遗传物质，在遗传中起着不可替代的作用，为了研究生物的基因，就需要将DNA从细胞中提取出来，这个过程有很多方法可以实现，目前比较常用的有苯酚氯仿抽提法、离心柱法和磁珠法，吉恩特实验室就这三种提取方法进行了梳理和比较，总结出各方法的优缺点供广大科研工作者参考。
1.苯酚氯仿抽提法苯酚氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂，反复抽提，使蛋白质变性，SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解，在蛋白酶KEDTA的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子，变性降解核蛋白，使DNA从核蛋白中游离出来。
而DNA易溶于水，却不溶于有机溶剂。
蛋白质分子表面带有亲水基团，也容易进行水合作用，并在表面形成一层水化层，使蛋白质分子能顺利地进入到水溶液中形成稳定的胶体溶液。
当有机溶液存在时，蛋白质的这种胶体稳定性遭到破坏，变性沉淀。
离心后有机溶剂在试管底层(有机相)，DNA存在于上层水相中，蛋白质则沉淀于两相之间。
利用萃取原理，根据蛋白核酸溶于不同的试剂层，将枪头伸入不同液层内抽取所需的成分，经多次洗涤后获得纯化核酸。
该方法的缺点是由于使用了苯酚、氯仿等试剂，毒性较大，长时间操作对人员健康有较大影响，而且核酸的回收率较低，损失量较大，由于操作体系大，不同实验人员操作重复性差，不利于保护RNA，很难进行微量化的操作。
优点是采用了实验室常见的试剂和药品，做起来成本比较低廉。
2.离心柱法吉恩特生物离心柱法主要原理是将对核酸有吸附作用的官能基团固定在离心柱模上，通过加入不同的裂解试剂、洗涤试剂并反复离心，以达到核酸与杂质分离的目的，获得纯化的核酸。
离心柱法DNA提取它的优点是比传统的酚氯法提取的纯度高，有利于RNA保护，而且能进行微量操作，以其低廉的价格和相对便捷的操作，渐逐取代了传统DNA提取方法，被高校科研所等市场普遍接受。
法医实验室几种常用DNA提取方法及比较
法医实验室几种常用DNA提取方法及比较(一)Chelex100法原理：Chelex100是一种螯合树脂，由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成，含有成对的亚氨基二乙酸盐离子，起着螯合基团作用，对多价金属离子有极强亲和力。
在低离子强度、碱性及100℃煮沸条件下，可以使细胞膜裂解，并使与DNA结合的蛋白质变性，DNA游离。
检材基质中一般含有大量金属离子，在低离子强度及加热条件下，金属离子可以辅助脱氧核糖核酸酶降解DNA，也可以抑制PCR反应，所以在提取DNA时，加入Chelex100，螯合了金属离子，防止了DNA降解，提高了PCR扩增成功率。
方法：剪取适量血斑、精斑、汗斑、鼻涕斑、指甲、毛根、软组织等等生物检材，置于0.5ml离心管内，加入适量纯水，室温浸泡，13,000rpm离心5min，上清丢弃，管底留约20μl左右液体及检材基质，加入100-200μl 5%Chelex100(有时需加适量PK)56℃15min至数10小时不等，100℃8min，13,000rpm离心5mim，上清备用。
评述：1、Chelex100法已经成为DNA提取的基本方法，Chelex100法是万能的。
目前，我们一切纯化方法都在Chelex100法的基础上进行，Chelex100法又不是万能的。
2、Chelex100法提取前的检材清洗非常重要，因为现场检材往往均较脏，脏东西可以抑制PCR反应，所以往往不止清洗一次，清洗检材时可能损失部分DNA。
所以应平衡清洗抑制剂与损失DNA之间的关系。
特别强调清洗时应“把根留住”，很多情况下已知样本DNA检验失败的原因是把根没有留住。
DNA检验时还有另外一句名言：“一个萝卜一个坑”，防止混乱检材。
肝素抑制PCR反应，血红素抑制PCR反应，所以长时的浸泡、多次清洗往往可能洗除肝素及血红素。
在已知样本多次无检验结果疑为肝素抗凝的情况下，多洗是检验成功所必须的。
血红素对普通Taq酶的抑制作用是明显的，而目前mtDNA 扩增一般用普通Taq酶，所以同一样品除进行STR检验外尚需进行mtDNA检测时，尽量去除干净血红素，显得尤为重要。
dna分离纯化方法及原理
dna分离纯化方法及原理
1. 酚-氯仿抽提法：这是一种传统的 DNA 提取方法。
原理是利用酚和氯仿的混合物来溶解细胞膜和蛋白质，使 DNA 与其他细胞成分分离开来。
然后通过离心和有机溶剂的萃取，将 DNA 从混合物中提取出来。
2. 硅胶柱层析法：该方法基于 DNA 与硅胶柱子之间的吸附和解吸作用。
将待提取的样本加载到硅胶柱上，通过柱子的吸附作用，使 DNA 与其他杂质分离开来。
然后用适当的洗脱缓冲液将 DNA 从柱子上洗脱下来。
3. 磁珠法：这是一种利用磁性颗粒结合 DNA 的方法。
将磁珠与样本混合，使 DNA 与磁珠结合。
通过外部磁场的作用，可以将磁珠与结合的 DNA 分离开来，从而实现 DNA 的纯化。
4. 质粒抽提法：这种方法适用于提取质粒 DNA。
通过碱处理破坏细菌细胞壁和细胞膜，使质粒 DNA 从细菌细胞中释放出来。
然后通过离心和沉淀等步骤，将质粒 DNA 与其他杂质分离开来。
5. 超声波法：利用超声波的能量，将细胞破碎，使 DNA 释放到溶液中。
然后通过离心和沉淀等步骤，将 DNA 与其他杂质分离开来。
这些方法的原理基于不同的物理、化学或生物学原理，旨在从复杂的生物样本中选择性地分离和纯化 DNA。
选择合适的方法取决于样本类型、纯度要求和实验目的等因素。
在 DNA 分离纯化过程中，还需要注意操作规范、防止污染，并进行质量控制和检测，以确保获得高质量的 DNA 用于后续的分析和实验。
常见的dna提取方法及优缺点
常见的DNA提取方法及优缺点1. 概述DNA提取是分子生物学和遗传学研究中的一个重要步骤。
通过提取DNA，可以进一步研究细胞或生物个体的基因组组成和遗传信息。
本文将介绍三种常见的DNA提取方法，并分析它们的优缺点。
2. 酚-氯仿法（Phenol-Chloroform Extraction）酚-氯仿法是DNA提取的传统方法之一。
其主要步骤包括细胞或组织的裂解、DNA与酚-氯仿混合、离心分离DNA上层水相、以异丙醇沉淀DNA等。
优点•能够提取高质量的DNA，适用于进一步的分子生物学实验和定量分析。
•可以从各种生物样品（如细胞、组织、血液等）中提取DNA。
•提取的DNA可以长期保存，并可用于构建DNA文库。
•操作复杂，需要多个步骤和化学试剂。
•酚-氯仿是一种有毒物质，对操作人员和环境有一定的危害。
•提取时间较长，通常需要几小时。
3. 硅胶柱法（Silica Membrane DNA Extraction）硅胶柱法是一种快速和高效的DNA提取方法，使用了硅胶膜作为DNA的吸附载体。
其主要步骤包括裂解细胞或组织、与硅胶柱上的硅胶膜相互作用、洗脱纯化DNA等。
优点•提供高品质和高纯度的DNA，适用于PCR、测序等高灵敏度实验。
•操作简便，减少了操作步骤和所需的化学试剂。
•提取时间短，通常只需要几十分钟。
•对于某些样品，如血液、组织较多的样品，硅胶柱法可能会出现DNA吸附容量不足的问题。
•需要购买硅胶柱等专业设备和试剂。
4. 盐溶液法（Salt Precipitation）盐溶液法是一种简单和经济的DNA提取方法，利用高盐溶液沉淀DNA。
其主要步骤包括细胞或组织裂解、加入盐溶液、离心沉淀DNA、洗脱纯化DNA等。
优点•操作简单，只需要少量的化学试剂和设备。
•节约时间，通常只需要30分钟左右。
•适用于小规模和初级实验室。
缺点•提取的DNA质量和纯度较低，不适用于一些高灵敏度的实验。
•不适用于样品量较大的情况，容易出现沉淀量不足的问题。
动物明胶中3种DNA提取方法的比较研究
1 材料与方法
111 材 料 11111 实验样品
方法 2 (蛋白沉淀法) :称取的样品种类和数量同 方法 1 ,并加入到 115 mL 离心管中 ,在管中加入 1 mL 自配的 核 酸 裂 解 液 , 置 65 ℃恒 温 箱 中 温 育 20 min ,在 65 ℃条件下加入 600μL 自配的蛋白沉淀液 , 室温下 12 000 r/ min 离心 10 min ,小心转移上清液至 一新 115 mL 离心管中 ,再加入 018 倍体积的异丙醇 混匀 ,室温放置 2 h 左右 ,12 000 r/ min 离心 10 min , 弃上清液 ,加入 600μL 70 %乙醇洗涤 1 次 ,12 000 r/ min 离心 5 min ,弃上清液 。DNA 溶于 10 μL 水中 , 合并 10 管 DNA 溶液 , - 20 ℃保存 ,备用 。
但目前对动物明胶的来源检测却缺乏相应的检 测手段 。国内对动物胶的检测 ,多集中在对鹿胶 、龟 胶和阿胶的真伪鉴别上 。韩继武等[1 ] 采用理化显色 反应 ,利用不同浓度凝胶的凝胶温度检测鉴别真伪鹿 角胶 ;山东阿胶集团和海洋大学[2 ]利用分子标记技术 检测阿胶原料 ———驴皮的真伪 ,以此确定阿胶的真 伪 ;最近有关于用 SDS 不连续电泳检测鹿胶 、龟胶和 阿胶的报道[3 ] ,通过电泳谱带来区分 3 种不同的胶 , 但该方法对样品处理的要求较高 ,否则难以得到较准 确的结果 。
皮 、牛皮和牛骨的明胶 DNA ,并利用分光光度计对提 取的 DNA 进行 DNA 浓度和纯度测定 。
DNA提取实验对比
DNA提取是一项经常要做的实验，下面我们就总结了四种dna提取方法并做详细说明和比较。
一.浓盐法提取dna：A. 利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA 位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.B. 也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.C.以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。
在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.二.阴离子去污剂法提取dna：用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA三.苯酚抽提法提取dna：苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。
蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。
离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA 。
此时DNA是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。
此法的特点是使提取的DNA保持天然状态四.水抽提法提取dna:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ，80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.。
dna提取方法
dna提取方法
DNA提取是分离和纯化细胞内的DNA分子的过程。
以下是常用的DNA提取方法：
1. 经典的酚-氯仿提取法：将细胞裂解并溶于酚-氯仿溶液中，通过离心分离DNA上清液和蛋白质/ RNA/酚相，然后分别用异丙醇沉淀和洗涤 DNA，最后用缓冲液溶解 DNA。
2. 盐溶解法：将细胞裂解并使用盐水缓冲溶解 DNA，然后离心去除蛋白质和碎细胞碎片。
最后，通过异丙醇沉淀 DNA，洗涤和溶解 DNA。
3. 磁珠法：利用表面修饰的磁珠、离心和磁场来分离和纯化DNA。
磁珠上会吸附 DNA，然后用缓冲液洗涤和溶解 DNA。
4. 硅胶柱法：利用硅胶膜在碱性条件下与 DNA 结合，然后用缓冲液洗涤和溶解 DNA。
5. 腐蚀酶法：通过腐蚀细胞壁和细胞膜来释放细胞内 DNA，然后离心去除细胞渣。
最后，通过异丙醇沉淀 DNA，洗涤并溶解 DNA。
这些方法都可以从不同来源（如细菌、动植物组织和血液）中提取 DNA，以便分析、克隆或测序。
提取的 DNA 可用于分子生物学研究、犯罪鉴定、基因组学研究等各种应用。
三种血液基因组DNA提取方法的比较研究_李芳芳
DNA 纯度以 A260 / A280 的值确定，同时测定提取 DNA 的浓度。 1. 4. 2 琼脂糖凝胶电泳检测： 配制 1% 的琼脂糖凝 胶，取 5 μL DNA 样品，120 V 电泳 30 min，凝胶成像 系统分析电泳结果并成像，对提取 DNA 进行完整性 检测。 1. 4. 3 PCＲ 反应检测： 对 3 种方法提取的 DNA 进 行 PCＲ 扩增。从文献中选取一个豚鼠的微卫星位 点，上下游引物信 息 见 表 1［9］。PCＲ 反 应 条 件 为： 94℃ 预变性 5 min； 94℃ 变性 30 s，50℃ 退火 30 s， 72℃ 延伸 30 s，35 个循环； 最后 72℃ 延伸 10 min。 取 5 μL 产物，用 2% 的琼脂糖凝胶电泳检测。
摘要： 目的 比较采用 3 种不同 DNA 提取方法提取豚鼠血液基因组 DNA 之间的差异。方法 分别用新鲜抗凝血 NaI 手提法、血凝块手提法和试剂盒 DNA 提取法提取 20 只豚鼠血液基因组 DNA，用分光光度计测定、琼脂糖凝胶 电泳、PCＲ 扩增等方法对提取的 DNA 片段的完整性、浓度、纯度和用于 PCＲ 扩增的效果等方面进行比较研究。结 果 新鲜抗凝血 NaI 手提法提取的 DNA 完整性、浓度和纯度均为最高； 血凝块法提取的 DNA 浓度和抗凝血提取的 DNA 浓度接近但纯度最低，有一定程度的断裂和降解； 试剂盒法提取的 DNA 浓度最低，纯度和完整性处于中间，但 三种方法提取的 DNA 都可用于 PCＲ 扩增反应。结论 3 种方法都可以提取基因组 DNA 并且所提取的 DNA 均能 满足后续 PCＲ 扩增实验的要求，但每种方法各有利弊，可根据具体的条件选择适宜的方法。 关键词： DNA 提取； 基因组 DNA； 血凝块； PCＲ 中图分类号： Q3 － 3 文献标识码： A 文章编号： 1006 － 6179（ 2014） 05-0028-05
总dna提取的方法
总dna提取的方法
总DNA提取法是一种从细胞或组织中提取总DNA的方法。
下面列举了几种常用的总DNA提取方法：
1. 高盐法：该方法使用含有高浓度盐的提取缓冲液，通过离心将细胞膜和蛋白质沉淀，然后使用酒精沉淀DNA。
2. CTAB法：该方法使用聚合物CTAB（正十六烷基三甲基溴化铵）来沉淀DNA，然后使用酒精沉淀纯化。
3. CTAB-SDS法：该方法结合了CTAB和SDS（十二烷基硫酸钠），通过聚合物的沉淀作用来沉淀DNA。
4. 氯仿提取法：该方法使用氯仿来去除脂质和蛋白质，然后使用酒精沉淀纯化。
5. 酚/氯仿提取法：该方法使用酚和氯仿来提取DNA，通过酚的分配和氯仿的去脂作用。
6. 硅胶膜柱法：该方法使用硅胶膜柱来吸附DNA，然后通过洗涤和洗脱得到纯化的DNA。
这些方法的选择取决于样品类型、DNA纯化的目的以及实验室的设备和资源等
因素。
植物和动物的核酸dna和rna提取方法
植物和动物的核酸dna和rna提取方法DNA和RNA提取是生物学研究中重要的实验步骤之一。
植物和动物的DNA提取方法具有一定的区别，主要取决于细胞壁、细胞膜和细胞核的特性。
下面将介绍植物和动物核酸提取的常见方法。
植物DNA提取方法：1. CTAB法：首先，将植物样本研磨成细胞浆状，加入含有CTAB（阳离子表面活性剂）和EDTA（螯合剂）的提取缓冲液，破坏细胞壁和细胞膜，溶解蛋白质。
然后，使用高盐方法分离蛋白质和DNA，通过加入异丙醇或乙醇沉淀DNA，最后用纯化试剂将DNA纯化。
2. 硅胶基提取法（硅胶柱法）：将植物样本研磨并加入提取缓冲液，离心去除残渣，将混合物通过硅胶柱，硅胶柱能够与DNA结合并去除杂质，然后使用洗涤缓冲液去除有机溶液和杂质，最后用洗涤缓冲液洗脱DNA。
3. 酚、氯仿、异戊醇提取法：将植物样本研磨成细胞浆状，加入提取缓冲液，混合液中加入等体积的酚和氯仿，形成两相体系，离心分离上清液和有机相。
将DNA从有机相中转移到水相中，然后用等体积的异戊醇沉淀DNA，并用洗涤缓冲液清洗、纯化DNA。
动物DNA提取方法：1. 乙酸盐法：将动物组织样本研磨成细胞浆状，加入含有乙酸和SDS（阴离子表面活性剂）的提取缓冲液，细胞膜和细胞核破裂，并溶解蛋白质。
然后，使用乙酸盐和异丙醇沉淀DNA，并用洗涤缓冲液清洗、纯化DNA。
2. 蛋白酶K法：将动物样本切碎，加入含有蛋白酶K和提取缓冲液，蛋白酶K 可降解不溶性蛋白质。
然后，使用酒精沉淀法沉淀DNA，最后用洗涤缓冲液清洗、纯化DNA。
3. 商用提取试剂盒：市场上有多种商用动物DNA提取试剂盒，使用操作简单快捷。
通常，样本经过细胞破碎、蛋白质沉淀、DNA吸附、洗脱等步骤，最终得到高质量的DNA。
RNA提取方法：RNA提取方法除了需要破坏细胞壁和细胞膜外，还需要迅速采取措施以避免RNA降解。
常用的RNA提取方法包括：1. 酚胺法：将样本研磨成细胞浆状，加入含有酚和胺的提取缓冲液，迅速破坏细胞膜和细胞核，并溶解蛋白质。
常见提取总DNARNA的方法与注意事项
常见提取总DNARNA的方法与注意事项提取总DNA和总RNA是分子生物学实验中常见的步骤之一、这些提取方法非常重要，因为它们为后续的分子生物学实验提供了所需的DNA和RNA样品。
下面是一些常见的总DNA和总RNA提取方法以及需要注意的事项。
常见的总DNA提取方法：1. 酚/氯仿提取法（Phenol/Chloroform Extraction）：这是一种经典的总DNA提取方法。
简言之，样品首先通过细胞壁的破碎，并使用蛋白酶和溶液进行蛋白酶消化，然后通过酚酊提取DNA，接着使用氯仿酊沉淀DNA。
注意事项：此方法需要小心使用酚和氯仿，因为它们是有毒的。
同时，操作过程中要注意避免DNA污染，并保持无菌环境。
2. 盐提取法（Salt Precipitation）：这是一种简单且经济高效的总DNA提取方法。
在此方法中，样品首先通过细胞壁的破碎，并且添加了表面活性剂SDS和蛋白酶，然后通过添加高盐浓度的溶液，使DNA沉淀。
最后，使用乙醇洗涤和溶解DNA。
注意事项：在此方法中，需要注意加入足够的高盐浓度缓冲溶液，以确保DNA的完全沉淀。
此外，尽量避免使用SDS和蛋白酶过量，以免残留物干扰后续试验。
3. 硅胶修复法（Silica Method）：这是一种常见且高纯度的总DNA提取方法。
首先，样品通过细胞壁的破裂，然后将DNA结合到硅胶膜上。
接着，通过洗涤步骤去除杂质，最后使用洗脱缓冲液去除DNA。
注意事项：在进行硅胶修复时，要避免DNA的过度结合，以免影响后续的DNA洗涤和洗脱。
此外，使用高质量的硅胶膜可以提高DNA的纯度。
常见的总RNA提取方法：1. 酚/氯仿提取法（Phenol/Chloroform Extraction）：这种方法不仅适用于总DNA提取，也适用于总RNA提取。
与总DNA提取类似，总RNA样品也先通过细胞壁破裂，并使用酚酊和氯仿酊消除蛋白质和残余的DNA，最后通过洗涤步骤提取RNA。
注意事项：和总DNA提取相似，酚和氯仿也是有毒的，操作时要小心。
多种.植物总DNA提取方法及详细步骤
植物总DNA提取一、常用方法改良CTAB法（改良自精编分子生物学实验指南，原蓝猪耳实验方案，拟采用）植物基因工程，王关林，2002 SDS法（植物基因工程，王关林，2002）高盐低pH值法（邹喻萍，植物学报，1994）材料预处理：从野外采集的新鲜叶片若比较衰老，运回后可放在4℃的黑暗中饥饿1～2d，以消耗淀粉和其他多糖。
材料预处理：从野外采集的新鲜叶片若比较衰老，运回后可放在4℃的黑暗中饥饿1～2d，以消耗淀粉和其他多糖。
材料预处理：从野外采集的新鲜叶片若比较衰老，运回后可放在4℃的黑暗中饥饿1～2d，以消耗淀粉和其他多糖。
材料预处理：从野外采集的新鲜叶片若比较衰老，运回后可放在4℃的黑暗中饥饿1～2d，以消耗淀粉和其他多糖。
试剂：(1)2-巯基乙醇（2-ME）(2)CTAB抽提液(3)CTAB/ NaCl溶液(4)24：1（V/V）氯仿/异戊醇(5)CTAB沉淀液(6)高盐TE缓冲液(7)70％乙醇(8)TE缓冲液试剂：(1)2×CTAB提取缓冲液试剂：(1)提取缓冲液：100mmol/LTris·Cl（pH8.0）、50mmol/LEDTA（pH8.0）、500 mmol/LNaCl、10 mmol/L 2-巯基乙醇（2-ME）(2)10% SDS(3)5mol/L KAC试剂：(3)提取缓冲液：100mmol/LNaAC（pH 4.8）、50 mmol/LEDTA（pH 8.0）、500 mmol/LNaCl、1.4％SDS，此种介质刚好为pH 5.5。
(4) 2.5mol/L KAc（pH 4.8）操作：(1)称取样品0.2g，去除表面的DNA污染，置于研钵中与液氮共研成细粉。
(2)将冻粉转入2ml离心管中，立即加入1000µl（980＋20）预热至65℃的CTAB抽提操作：(1)2ml离心管中加入1ml提取缓冲液，65℃预热。
(2)取0.2g新鲜幼嫩叶片，于液氮中迅速研磨成粉。
提取dna的方法
提取dna的方法提取DNA的方法。
DNA提取是分子生物学实验中的重要步骤，它是分析DNA序列、进行PCR扩增、测序等实验的基础。
本文将介绍几种常用的DNA提取方法，希望能为您的实验提供帮助。
首先，我们来介绍常用的有机溶剂法提取DNA的方法。
这种方法的基本原理是利用有机溶剂（如酚-氯仿）与细胞裂解液中的蛋白质和核酸形成两相体系，从而将DNA分离出来。
具体操作步骤包括，细胞裂解、蛋白质沉淀、DNA沉淀、洗涤和溶解。
有机溶剂法提取DNA的优点是操作简单、成本低廉，适用于大批量样品的提取。
但缺点是提取效率较低，且可能造成DNA的降解。
其次，我们介绍硅胶柱法提取DNA的方法。
硅胶柱法利用硅胶膜上的硅基团与DNA间的亲和作用，将DNA从细胞裂解液中吸附到硅胶膜上，再经过洗涤和洗脱步骤，最终得到纯净的DNA。
硅胶柱法提取DNA的优点是提取效率高、纯度好，适用于测序、酶切等需要高质量DNA的实验。
但缺点是操作繁琐、耗时较长，且成本较高。
最后，我们介绍磁珠法提取DNA的方法。
磁珠法利用表面修饰的磁珠与DNA间的亲和作用，将DNA特异性地吸附到磁珠上，然后利用磁场将磁珠与其他杂质分离，最终得到纯净的DNA。
磁珠法提取DNA的优点是操作简便、提取效率高、适用于自动化操作，且可以高通量提取多个样品的DNA。
但缺点是对磁珠的选择和操作技巧要求较高，且成本较高。
综上所述，有机溶剂法、硅胶柱法和磁珠法是常用的DNA提取方法，它们各有优缺点，可以根据实验的需要选择合适的方法。
在进行DNA提取实验时，需要注意细胞裂解条件、溶解温度、洗涤步骤等操作细节，以确保提取到高质量的DNA。
希望本文能为您在实验中提取DNA提供一些帮助，祝您实验顺利！。
猪精液提取蓝耳病病毒核酸的方法比较
2019年第5期李巍:猪精液提取蓝耳病病毒核酸的方法比较41猪精液提取蓝耳病病毒核酸的方法比较李巍蔦赵景利2,孙华武2,苍真伟1,王承功I,陈明非I,高佰华彳(1•大连市现代农业生产发展服务中心，辽宁大连116037；2.辽宁省大连市长海县动物卫生监督所，辽宁长海1165003.辽宁春兴畜牧兽医服务中心，辽宁沈阳110001)摘要：为筛选从猪精液中提取微量蓝耳病病毒(PRRS V)核酸的有效方法，将蓝耳病(变异株)弱毒苗稀释成不同滴度(TCID50/mL)的病毒液，与健康猪常温精液混合作用。
分别用Trizol法、磁珠法、离心柱法提取含毒精液中的病毒RNA,用荧光RT-PCR试验检测病毒RNA,结果表明，当精液中病毒滴度高于0.1TCID50/mL时，3种病毒RNA提取方法均可检出。
离心柱法对猪精液中PRRSV核酸提取灵敏度最高，可检出0.01TCID50/mL滴度的病毒，稳定性好。
关键词：蓝耳病；猪精液；含毒精液;病毒RNA；提取中图分类号：S858.28文献标识码：B文章编号：1672-9692(2019)05-0041-04 Comparison of Extraction Methods for PRRSV RNA from Boar SemenLi Wei\Zhao Jingli2,Sun Huawu2,Cang Zhenwei1,Wang Chenggong1,Chen Mingfei1,Gao Baihua3(1.Dalian Production and Development Service Center for Modern Agriculture,Liaoning Dalian116037:2.Dalian Center for Animal Disease Prevention and Control,Liaoning Dalian116037;3.Liaoning Chunxing Animal Husbandry and Veterinary Service Center,Liaoning Shenyang110001)Abstract:In order to Screening effective methods for extracting trace porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)RNA from boar semen,the attenuated vaccine of PRRSV(mutant strain)was diluted into different titers(TCID50/mL)and added to fresh semen samples of healthy boars.Trizol,magnetic bead and spin column method were respectively used to extract virus RNA from semen containing PRRSV and virus RNA was detected by Fluorescent RT-PCR.The results showed that virus RNA could be detected by using al1three extraction methods when the titers of virus in semen was higher than0.1TCIDgo/mL.Spin column method for extracting PRRSV RNA from boar se-men has the highest sensitivity,and the virus titers of0.01TCIDgo/mL can be detected with good stability.Key words:Porcine reproductive and respiratory syndrome;Boar semen;Semen containing PRRSV; Virus RNA;Extract猪蓝耳病(PRRS)是一种高度接触性传染病，呈地方流行性，妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感，持续性感染是本病的重要特征。
猪毛干部位基因组DNA的三种提取方法比较
猪毛干部位基因组DNA的三种提取方法比较苏一;边连全;宣之兴【摘要】通过比较三种猪毛干基因组DNA提取方法,改进了提取猪毛干基因组DNA的技术方法.将DNA提取物进行琼脂糖凝胶电泳、紫外可见分光光度计及PCR扩增分析,结果表明,在毛干中能成功提取到基因组DNA,其浓度和纯度足以满足分子生物学技术试验的要求,该技术还可以减少对动物的伤害,在样品不易获得的濒危动物研究中尤为适用.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2010(049)010【总页数】4页(P2337-2340)【关键词】毛干;基因组DNA;DNA提取【作者】苏一;边连全;宣之兴【作者单位】沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳,110866;沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳,110866;沈阳农业大学生物科学技术学院,沈阳,110866【正文语种】中文【中图分类】Q954.539%Q78随着分子生物学的飞速发展，以DNA为基础的动物遗传学研究日渐成熟。
而进行遗传学研究首先需要获取含有动物完整基因组DNA的组织材料。
较容易获得而且最常用的材料有动物的血液、耳尖、尾尖或趾尖等样品，采集这些组织虽不至于导致动物死亡，但对动物均会或多或少地造成身体伤害，尤其是对于一些濒临灭绝的珍稀保护动物更不适用。
此外，这些组织样品采样过程较繁琐，往往需多人合作才能完成。
而剪取动物毛发则相对简便，并且对动物几乎不会造成伤害。
另外，毛发更便于长期保存和长途运输，不需要冷藏，也不需要特殊处理。
毛发由毛根和毛干组成，主要成分为角蛋白，仅含有微量的DNA，整根毛发中绝大部分DNA均集中在毛根部位，利用毛根提取DNA的方法在国内外均有报道。
杨胜林等［1］通过从不同数量的猪毛中提取的DNA进行质量比较分析，找出了适合于做分子标记试验所需的猪毛样本数量。
Di Martino等［2］采用剪除毛干、保留毛囊的方法预处理毛发，可以减少角蛋白污染，提高DNA提取物的浓度和纯度。
毛干是毛发露出皮肤的部分，相对于毛囊，其DNA含量更少，几乎所有成分都是角蛋白，但作为动物组织，毛干具有细胞结构，如果提取方法得当仍可以获得一定量的DNA。
猪耳组织DNA的快速提取
猪耳组织DNA的快速提取
Kunhareang S;晋大鹏
【期刊名称】《中国畜牧兽医》
【年(卷),期】2010(0)6
【摘要】采用一步法提取的猪基因组DNA,可直接用于PCR扩增、单链构象多态性(SSCP)分析及测序。
操作步骤为:采取新鲜猪耳组织2～10mg,蛋白酶K消化,55℃1h,滤纸过滤消化产物。
取孔径为1.2mm的滤纸(含有足量的DNA)作为模板进行PCR扩增。
结果表明,提取的基因组DNA质量较高,PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和SSCP分析后可见清晰的条带,可进一步用于克隆测序。
滤纸上的DNA 干燥后可常温保存。
该方法简单、快速,成本低,效率高,适用于大批量的基因分型,也可用于提取不同组织的基因组DNA。
【总页数】1页(P220-220)
【关键词】一步法;基因组DNA;PCR扩增
【作者】Kunhareang S;晋大鹏
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S945.19
【相关文献】
1.猪肾组织中DNA提取的研究 [J], 韩芬霞;陈春刚;王清华
2.石蜡包埋组织DNA快速提取法应用于分子病理检测价值评价 [J], 杨秀媚
3.三种提取蓝猪耳总DNA方法的比较 [J], 魏琦超;周岩;畅丽萍
4.快速提取石蜡组织中结核分枝杆菌DNA方法体系的建立及评估 [J], 彭学勤;崔园园;褚明亮
5.一种适于PCR扩增的快速提取猪基因组DNA的碱裂解法 [J], 赵金艳;刘榜;王文君;张宇;张庆德
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三种樟科植物的细胞总DNA提取
三种樟科植物的细胞总DNA提取徐虹;郑敏;章军;朱斌琳;张娆挺;袁文杰【期刊名称】《植物分类与资源学报》【年(卷),期】2004(026)004【摘要】为了从富含次生代谢物的樟科植物肉桂、锡兰肉桂、阴香中获得高质量DNA,研究和改进了CTAB法、高盐低pH法和尿素法.改进方法包括:1)在裂解液中加入2% β-巯基乙醇和5% PVP,以防止氧化褐变的发生;2)在酚:氯仿抽提前加入1.5mol/L醋酸铵冰浴处理,能降低DNA的黏性.所得DNA的质量和产量经电泳、紫外吸收A260/A280、PCR扩增和限制性内切酶酶切检测, 结果表明改进法提取的DNA质量要比常规法的好.其中改进的CTAB法获得的DNA纯度最高,能用于PCR扩增和限制性内切酶酶切,是提取这3种樟科植物总DNA的最佳方法.【总页数】7页(P451-457)【作者】徐虹;郑敏;章军;朱斌琳;张娆挺;袁文杰【作者单位】细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;厦门市药品检验所,福建,厦门,361012【正文语种】中文【中图分类】Q946【相关文献】1.三种豆科植物总DNA提取方法的比较 [J], 张继红;陶能国;张小云;雷瑶;孙永祥2.红豆杉属植物三种不同总DNA提取方法的分析比较 [J], 刘杰;高连明3.三种提取蓝猪耳总DNA方法的比较 [J], 魏琦超;周岩;畅丽萍4.模式小鼠总 DNA 三种提取方法比较 [J], 刘甦苏;左琴;周舒雅;王辰飞;贺争鸣;李保文;范昌发5.植物总DNA和核DNA提取及其纯度的研究 [J], 徐德昌;赵亚华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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蓝猪耳 又名 夏 堇 、 口仔 ， 玄 参科 蓝 猪 耳 属 （ 萼 虎 是 翼 属 ） 年生草 本植物 。 由于其 具有 生长周期 短 、 一 容易再 生 、 种 子小数量 多 、 适宜热 带气候 且具备 特殊 的裸露 胚囊 等特 点 ， 一种理想 的研究 植 物 细胞 分 化 、 胎发 育 的模 式 植 是 胚
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摘 要 ： 对 蓝 猪 耳 （ ｏ ｎ ｆｕｎ ｒＬ ） 片 中 多糖 、 针 Ｔｒ ｉ ｏ ｒｉｉ ． 叶 ｅａ ｅ 色素 等 物 质 严 重 干 扰 总 Ｄ Ａ提 取 质 量 的 问题 ， Ｎ 以蓝 猪 耳 叶 片
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第２ ７卷第 ３期 ２１ ０ ０年 ６月
生 物 学 杂 志
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物 。高质 量总 Ｄ Ａ的制备是 进 行分 子生 物学 下游 实 Ｎ
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１２ 主要药 品与试剂 ．
１２ １ 药 品 ．．
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为 试验 材 料 ， 别 采 用 高 盐低 ｐ 值 法 、Ｄ 分 Ｈ Ｓ Ｓ法 、Ｔ Ｂ法 提 取 总 Ｄ Ａ， 从 样 品 电 泳 图谱 、 度 、 率 等 方 面 对 三 种 ＣＡ Ｎ 并 纯 得 方 法进 行评 价 。 结果 表 明 ，Ｔ Ｂ 法提 取 总 Ｄ Ａ 的 产 率 较 高 、 度 最 好 ， 蓝 猪 耳 总 Ｄ Ａ提 取 的 最 佳 方 法 。 ＣＡ Ｎ 纯 是 Ｎ