猪布鲁菌S2 omp10基因缺失株的构建及特性
10株猪圆环病毒2型(PCV2)河南株全基因组的克隆与序列分析 2
收稿日期:2008 12 30基金项目:国家科技支撑计划资助项目(2006BAK02A21/3);国家 863 计划资助项目(2007AA100606) 作者简介:彭志锋(1982 ),男,在读硕士。
*通讯作者,E mail:w chu anq@s oh 同为第1作者10株猪圆环病毒2型(PCV2)河南株全基因组的克隆与序列分析陈 陆 ,彭志锋 ,杨 霞,陈圆圆,王宏魁,孙彦婷,郑鹿平,王川庆* (河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002)摘要:为了解猪圆环病毒2型(PCV 2)河南株的起源及遗传变异,从河南省不同临床表现的病猪中克隆了10株PCV2的全基因组,并对其进行了序列测定及分析。
结果表明,河南株之间以及与中国其他地区P CV 2流行株之间同源性均很高;河南株均处于欧洲分支中,提示P CV 2河南株可能起源于欧洲株;河南省不同年份的PCV2中确实存在一定的基因差异,但PCV2全基因组从总体上来说遗传进化相对稳定;河南省猪群中与PCV 相关的疾病不是由PCV 2变异毒株引起的。
关键词:猪圆环病毒2型;全基因组克隆;序列分析中图分类号:S852.65 文献标识码:A 文章编号:1005 4545(2010)02 0166 08Sequence analysis of complete genome of ten porcine circovirus type 2strains in Henan provinceCH EN Lu ,PENG Zhi feng ,YAN G Xia,CH EN Yuan yuan,WANG H ong kui,SU N Yan ting,ZH ENG Lu ping,WANG Chuan qing *(College of A nimal H usbandr y and Veterinary ,H enan Agr icultur al Univ ersity ,Zhengz hou 450002,China)Abstract :T o under stand the g enetic hetero geneity and the or ig in o f PCV2strains in Henan pr ovine,co mplete ge nomes of 10P CV2str ains w ere cloned and analysed fr om the swines with va rio us clinical manifestatio n in H enan pr ov ince.T he result indicated that the PCV 2str ains in H enan wr e clo sely relat ed t o each ot her ,but also t o P CV2st rains fro m other ar eas o f China.T he PCV2strains in Henan w ere included in the Eur ope cluster.It w ould be con clued that the P CV2strains in H enan may o rig inate fr om Euro pe P CV2.A lthough minor g enetic differ ences among PCV2str ains in different years,the g eno me o f P CV2str ains in H enan pr ov ince exhibit ed a quite stable g enetic hom o geneity.T he porcine cir covirus asso ciated disease in H enan pr ov ince is mo st likely not due to the emerg ence of a new genoty pe o f PCV 2.Key words :po rcine circov ir us ty pe 2(PCV 2);co mplete genome clo ning ;sequence analy sis J oint f ir st author s ;*Cor r es p ond ing autho r ,E mail :wchuanq @猪圆环病毒(PVC )是小的无囊膜单链环状DNA 病毒,属于圆环病毒科圆环病毒属[1]。
布鲁氏菌S2 WboA基因缺失株的构建及免疫效果
本文由探生科技技术人员提供，如果您想了解更多关于抗体的信息，可以访问Fantibody 全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家查找相关资料,希望对您有帮助！布鲁氏菌S2 WboA 基因缺失株的构建及免疫效果摘要：【目的】WboA 基因编码光滑型布鲁氏菌脂多糖（LPS ）O －侧链合成必须的糖基转移酶，该基因的缺失或破坏会影响布鲁氏菌光滑型表型的形成。
本研究拟构建WboA 基因缺失的重组粗糙型布鲁氏菌，以使布鲁氏菌弱毒疫苗与野毒株布鲁氏菌感染相区分。
【方法】以猪源光滑型布鲁氏菌S2株为研究对象，通过同源重组将氯霉素抗性基因（Cm r ）完全替代S2株的WboA 基因，获得重组粗糙型布鲁氏菌rS2-WboA 株。
【结果】rS2-WboA 株在适宜的培养基（TSA ）上传50代后仍保持对氯霉素的抗性。
用1×107 CFU rS2-WboA 免疫Balb/c 小鼠和豚鼠，1个月后均能通过平板凝集试验检测到粗糙型抗体。
1×1011 CFU rS2-WboA 菌攻毒Balb/c 小鼠后，不会引起死亡，并且能抵抗200 CFU 强毒M28的攻击。
小鼠试验显示了rS2-WboA 与原始株S2相似的保护性和更高的安全性，其保护性也略高于另一重组株rS2-WbkC 。
【结论】WboA 可作为构建重组粗糙型布鲁氏菌疫苗株缺失的靶基因。
关键词：布鲁氏菌；WboA 基因；免疫性Construction of a WboA -Deficient Brucella suis S2 Strainand Its Immune EffectDING Jia-bo, CHENG Jun-sheng, MU Wei, MAO Kai-rong, ZHANG Er-li, JIANG Y u-wen(China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081)Abstract:【Objective 】 WboA gene encodes a glycosyl transferase, an enzyme essential for the synthesis of O antigen. Disruption of the WboA gene in smooth B . abortus and B . melitensis results in rough, attenuated mutants which fail to produce the O polysaccharide (O antigen). In this study, whether the wboA gene disruption is responsible for the rough phenotype of B. suis 2 strain (S2) was explored. 【Method 】Chloramphenicol resistance gene （Cm r ）was cloned into the genomic DNA of S2 by homologousrecombination with knocking out the WboA gene, and the recombinant rS2-WboA was obtained. 【Result 】 rS2-WboA was conversed into rough-phenotype from smooth-phenotype. The recombinant kept the ability to chloramphenicol resistance after 50 passages in tryptic soy agar (TSA) free of chloramphenicol. 1×107 CFU rS2-WboA could induce specific rough antiserum in mice or guinea pigs, which could be detected by aggregation tests. No mice were died after inoculation of 1×1011 CFU rS2-WboA. Afterwards, the rS2-WboA immunized mice could resist the challenge of 200 CFU virulent M28. Mice tests showed rS2-WboA offered similar protection to S2 strain, but more safe than S2. Its protective effect was a little better than the other recombinant strain rS2-WbkC. In view of these results, rS2-WboA is a promising candidate for vaccine strain.【Conclution 】 WboA is a prospective candidate as a gene deletion target for brucella recombination.Key words: Brucellosis; WboA gene; Immune effect0 引言【研究意义】布鲁氏菌病（布病）是由布鲁氏菌（Brucella ）引起的以流产和发热为特征的人兽共患病。
带有氯霉素抗性基因标记的重组布氏杆菌S2的构建及其生物学特性
@EEEFEF@!@FEEE@FFE!FEFEF!F @FFFFE!@@F@EE!@!!E!@EE!@!@ !!!F!@FE@!@F!@!@F!EF@!F!@@E F@!!F@E!F@@@@F!!EEEE!EE!@F @FFFFE!@@!FF!F!@@@!F!!FE!E ,,,-,*-.*,-**.,,*.,***-*,,.
毛开荣等：带有氯霉素抗性基因标记的重组布氏杆菌 6I 的构建及其生物学特性 Q D 微生物学报 （IKKH） （P） LH 表!
!"#$% & ’()*%( =>#?@& <>#?@& =>#?@I <#?@I =@*( )*%+
NHN
用于扩增不同基因片断的 "#$ ห้องสมุดไป่ตู้物序列
!3% +).%+ /55/+).% ./ .3% ;<= /2 >#?@ 0%1% <%+.()A%1BC*% +).%+ !"# ! $"% O! !"& ! !’( ! $"% O! 6"$! =("0*%1. 0%1%(".%-D#5 M:L &IPH NKK
’
’%!
结果
重组穿梭质粒的酶切鉴定 将筛选获得的包含 @*( 基因和 >#?@ 基因上下 游同 源 臂 的 穿 梭 质 粒 5@*(A>#?@A&AI 用 !"# !、 结果均于预期 $"% O!、 !"& !、 !’( !进行酶切鉴定， 一致。 ’%’ 重组效率 感受态细菌菌落计数， 浓度为 L \ &K&K 个菌 D*R； : 0 5@*( A>#?@A&AI 质粒转化 8K R 6I 感受态细菌 HI3 " " 后， 最终从氯霉素 !6E 平板上获得 &M 个菌落， 不考虑 因电击死亡的细菌， 重组率约为 & \ &K G M 。 ’%& 重组菌的 "#$ 鉴定 从生长出的 &M 个菌落中， 随机挑取 8 个菌落提 以= 和 为引物的 ’@< 产 取其基因组 XYE， < （Z#?4） （Z#?4）
猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析
摘
要 ： 链球 菌溶 血素 （ Ｌ 是 较早 确 定的猪链 球 菌毒 力 因子 之 一 ， 有 细胞毒 性 ， 猪 链球 菌 致病 猪 Ｓ Ｙ） 具 在
粒 ｐ Ｅ ４ ：ｃｔ Ｓｙ 根 据 Ｎ Ｂ 上 猪 链 球 菌 ２型 Ｓ Ｔ Ｓ ：ａ— ｌ ： Ａ Ｃ Ｉ
Ｐ／ １ ７标 准 株 的 基 因 （ Ｃ ０ ２ ２ ． ） 的 Ｓｙ序 列 Ｎ 一１ ９ ５ １ 中 ｌ （ ２ ８ Ｏ —２ ２ １ ） 计 引 物 （ １ 。Ｐ Ｒ 反 应 条 １ ５ ９ ２１ ６ ８ ４ 设 表 ） Ｃ 件 及体 系 ：Ｏ １ ×ｂ ｆｅ Ｌ １ ｕｆｒ３“ ， ０ｍｍｏ／ ＮＴＰ １ ０ ｌＬ ｄ ． ／ 上 游 引 物 １ ０ｕ 下 游 引 物 １ ０／ ｔｍｐａｅ ， Ｌ， ． Ｌ， ． ， ｅ ｌｔ Ｌ，
猪链 球菌 ２型 （ ｔ ｐｏｏ ｃｓ ｕｓ２ Ｓ ） 猪 Ｓ ｒ ｔｃｃｕ ｉ ，Ｓ ２ 是 ｅ ｓ 链球 菌各 个血 清 型 中毒 力 最 强 、 行 最 广 泛 的血 清 流
防医学 重点 实 验 室 保 存 ； 心 浸 出液 培养 基 （ ｒｉ 脑 Ｂ ａｎ
ｈ ａ ｔｉｆ ｓｏ ｅ ｒ ｎ ｕ ｉｎ，ＢＨ Ｉ ， ｙ ｔ ｎ ） Ｔｒ ｐ ｏ ｅ和 Ｙｅ ｓ ｘ ｒ ｃ ｉｎ ａ ｔｅ ｔａ ｔ ｏ
动 物 医 学 进 展 。０ ２ ３ （ ） ２ — ６ ２ １ ，３ ５ ： ２２
Ｐｒ ｇｒ ｓ ｎ Ｖｅ ｅ ｉ ｒ ｅ ｉ ｉ ｏ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎａ ｙ Ｍ ｄ ｃｎｅ
猪 链 球 菌 ２型 溶 血 素 基 因缺 失株 构 建及 其 生 物 学 特 性 分 析
布鲁氏菌病检测和防治方法研究
布鲁氏菌是一类革兰氏阴性的短小杆菌，家畜中猪、羊、牛对其最易感，可引起母畜传染性流产。
人类主要通过接触带菌动物或食用病畜及其相关乳制品而造成感染，布鲁氏菌病(以下简称布病)是世界范围内严重危害公共卫生安全的人兽共患传染病之一。
目前世界上有170多个国家和地区存在布病流行，每年约有50万的病例，因布病造成的经济损失高达约30亿美元。
近年来，我国家畜养殖量逐年上升，布病的流行范围逐步扩大，对我国家畜养殖业和人类健康形成较大威胁。
本文结合2006-2017年我国《兽医公报》公布的畜间布病疫情数据，对我国布病流行现状和研究进展展开讨论，分析布病流行趋势，以期为及时调整布病防控政策，掌握布病分布特征提供参考。
由于布病危害较大，因此感染早期的快速诊断及鉴定对于降低损失意义重大。
目前，临床上的布鲁氏菌检测主要是病原分离，但该方法耗时耗力，且不能做到早期迅速诊断。
近几年，随着分子生物学的迅速发展，特别是生物信息学、微生物基因组学的发展，以多重PCR、荧光定量PCR检测方法和基因检测技术为主的布病检测技术，以其操作简单迅速、高效稳定、易于操作等众多优点，成为近些年疫病检测的研究热点。
此外，各类疫苗的研制以及临床中西药物的联合使用，更为布病的有效防控开辟了新的途径。
1、流行状况我国畜间布病基本经历了20世纪50--70年代的流行期、80--90年代的基本控制期以及2000年以后的反弹上升期、2010年以后的流行期4个阶段。
目前，我国动物布病发病数量较多的省份有内蒙古、新疆、陕西、黑龙江和山西等，其中以内蒙古最为严重。
2011年，内蒙古的动物布病发病数达到117 623例，占全国动物发病总数的94.08%，是我国布病流行最为严重的地区，防控形势十分严峻。
从2006-2017年农业部《兽医公报》公布的相关数据(表1)可知，2011年我国畜间病例数达到了高峰，发病动物数量超过10万头(只)。
2012年后，无论人间还是畜间，虽然患病省份数量仍维持在较高水平，但畜间病例数呈现下降趋势。
猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析
猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析吴炜;张晓燕;唐宇龙;方丽华;方维焕【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2012(033)005【摘要】猪链球菌溶血素(SLY)是较早确定的猪链球菌毒力因子之一,具有细胞毒性,在猪链球菌致病过程中发挥重要作用.利用同源重组技术成功构建了猪链球菌2型(SS2)sly基因缺失的突变株SS2-△sly,缺失株的体外溶血活性消失,对小鼠脑血管内皮细胞的细胞毒性显著低于亲本菌株(P＜0.01),但不影响猪链球菌2型在巨噬细胞中的存活.该菌株可以用于研究SS2溶血素在感染细胞中的作用机制.【总页数】5页(P22-26)【作者】吴炜;张晓燕;唐宇龙;方丽华;方维焕【作者单位】浙江大学动物预防医学研究所,浙江省动物预防医学重点实验室,浙江杭州310058;浙江大学动物预防医学研究所,浙江省动物预防医学重点实验室,浙江杭州310058;浙江大学动物预防医学研究所,浙江省动物预防医学重点实验室,浙江杭州310058;浙江大学动物预防医学研究所,浙江省动物预防医学重点实验室,浙江杭州310058;浙江大学动物预防医学研究所,浙江省动物预防医学重点实验室,浙江杭州310058【正文语种】中文【中图分类】S852.611【相关文献】1.猪链球菌2型溶血素基因缺失菌株的构建及生物学特性的研究 [J], 王雅;张安定;李冉;胡攀;刘成;陈焕春;金梅林2.禽多杀性巴氏杆菌C48-3株hexABC基因缺失株的构建及其生物学特性分析[J], 吾鲁木汗·那孜尔别克;张宇凤;龚凤娟;恩特马克·布拉提白3.单增李斯特菌溶血素S llsB基因缺失株的构建及部分生物学特性研究 [J], 尹华;任静静;王欣雨;蒋建军4.鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因缺失株平衡致死系统的构建及生物学特性分析[J], 张明亮; 孙长江; 顾敬敏; 崔子寅; 韩文瑜5.禽致病性大肠杆菌clpV2基因缺失株的构建及生物学特性分析 [J], 钟昊然;王培莉;郭佳;王亨;朱国强;李建基;崔璐莹;董俊升;孟霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
布鲁菌基因缺失疫苗侯选株研究进展
动物医学进展,2020,41(3):110-113Progress in Veterinary Medicine布鲁菌基因缺失疫苗侯选株研究进展冯生，刘宝山，陈泽良，沈国顺*(沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁沈阳110866)摘要：布鲁菌病是由布鲁菌引起的人兽共患传染病，接种疫苗是预防和控制该病最有效的方法之一。
目前国内外使用的疫苗主要是减毒活疫苗，这种活疫苗具有一定的毒力，但不能区分野毒感染与疫苗免疫产生的抗体，会干扰该病的检疫，国内外许多研究者致力于基因缺失标记疫苗。
论文综述了近年来布鲁菌基因缺失疫苗株的研究及应用概况，以加深对布鲁菌病新型疫苗的认识。
关键词：布鲁菌；疫苗；抗体；基因缺失；标记中图分类号：S852.614文献标识码：A文章编号=1007-5038(2020)03-0110-04布鲁菌病(Brucellosis)简称布病，是由布鲁菌(Brucella)感染后引起的一种人兽共患传染病。
布鲁菌是一种革兰阴性菌，对外界环境耐受力较弱，不形成芽胞。
布鲁菌主要分为6个种，分别为羊种、牛种、猪种、绵羊附睾种、林鼠种及犬种。
其中羊种、牛种和猪种较为常见。
布鲁菌致病力较强，携带有多种毒力因子，能通过伤口，黏膜等进行传播，可感染绝大多数哺乳动物和人⑴。
家畜感染后主要引起繁殖障碍，母畜表现流产、死胎、木乃伊胎，公畜表现睾丸肿大。
人感染后可引起发热、肌肉酸痛.关节胀痛等⑵。
我国自建国以来便实施了布病防控措施，但近年来该病的发生呈上升趋势⑷，不仅制约畜牧业的发展，而且威胁人类的健康。
免疫接种是目前防控布鲁菌病的一项重要措施。
布鲁菌是一种胞内寄生菌，免疫方式以细胞免疫为主。
由于灭活苗无法有效刺激机体产生细胞免疫，因此目前国内外使用的布鲁菌病疫苗主要为弱毒活疫苗，如A19、S2、Rev.l、M5等。
这些疫苗虽然对该病的防控起到了一定的积极作用，但仍然存在一定的缺陷。
如疫苗株的残余毒力仍可导致怀孕母畜流产，也会威胁实验室人员或养殖工作人员的健康。
一株布鲁氏菌S2疫苗株ArsR基因缺失菌株、其构建方法及应用[发明专利]
![一株布鲁氏菌S2疫苗株ArsR基因缺失菌株、其构建方法及应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/35ac00f6c5da50e2534d7fe7.png)
专利名称：一株布鲁氏菌S2疫苗株ArsR基因缺失菌株、其构建方法及应用
专利类型：发明专利
发明人：王爱华,支飞杰,周栋,靳亚平,李俊玫,张广冻,田璐璐申请号：CN201910805058.6
申请日：20190829
公开号：CN110484484A
公开日：
20191122
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一株布鲁氏菌S2疫苗株ArsR基因缺失菌株，所述菌株为敲除ArsR基因的布鲁氏菌S2疫苗株，可用于制备布鲁氏菌减毒疫苗。
布鲁氏菌S2疫苗株ArsR基因缺失菌株的获得为探究布鲁氏菌致病机制及区分自然感染和人工免疫的特性奠定基础，对预防和控制布病具有重要的意义。
申请人：西北农林科技大学
地址：712100 陕西省西安市杨凌示范区邰城路3号
国籍：CN
代理机构：北京彭丽芳知识产权代理有限公司
代理人：彭丽芳
更多信息请下载全文后查看。
猪布鲁氏菌病的诊断与防治
猪布鲁氏菌病的诊断与防治作者：谭柳波来源：《兽医导刊》 2018年第10期布鲁氏菌病是由布鲁氏菌感染而引发的急性或慢性传染病。
布鲁氏菌在自然界广泛存在，且人畜共患，生猪尤为易感。
一旦生猪染上该病，则会出现公畜睾丸炎、母畜不孕等症状，影响生猪养殖效益。
为此，有必要加强对该病的诊断与防治研究。
一、流行病学猪布鲁氏菌病属于人畜共患的传染病，该病是由致病菌布鲁氏菌感染所致。
在猪养殖业中，猪型布鲁氏菌与羊型布鲁氏菌对生猪均具有致病作用。
该病主要传染源除了患畜以外，还包括隐性带菌猪和流产猪，处于妊娠期的母猪感染该病后流产出的胎儿、胎水、胎衣、分泌物以及受感染的种公猪的精液中也会携带致病菌。
排出的致病菌会污染圈舍、饲草、饮食用具、产房等，易感猪群一经破损皮肤接触、采食或者配种，则很容易感染。
在实际养殖过程中，5月龄以下的幼猪对该病具有一定的抵抗力，因而易感性较低，而随着生猪日龄的增长，易感性则随之提高。
二、临床症状该病的主要临床症状为母畜流产，且多发生于母畜怀孕的第二或者第三个月，少数情况也有在母畜妊娠期的第二周或者第三周即发生流产。
早期流产的情况，因胎儿或者胎衣时常被母猪吃掉，因而不容易被发现。
一般情况下，因感染布鲁氏菌病所导致的流产情况，流产前的症状表现不明显，流出的胎儿大多为死胎，且出现胎衣不下的情况较少，但少部分也会发生且同时伴随出现子宫炎的情况，影响其后续的发情、配种。
该病在新感染的猪场中发生流产的情况较多，发生在某地一个新的养猪场中，共有母猪 1 300 头，发生该疫情后母猪的流产率达29%。
公猪感染的主要临床症状为睾丸炎和副睾丸炎，急性型发病情况较急，睾丸肿大，局部热痛，同时伴有其他全身性症状。
慢性型症状主要为睾丸逐渐萎缩、硬化，性欲减退乃至丧失，公猪失去配种能力。
在某场育有20 头公猪的养殖场中，曾发生过11 头公猪出现睾丸炎的情况。
此外，临床上，感染猪布鲁氏菌病的症状还包括关节炎，在母畜或者公畜身上都有出现过，且多为后肢关节，少部分会发生在脊柱关节，患处关节疼痛、肿大，囊内液体充盈，进而引发病畜关节僵硬或出现跛行等情况。
布鲁菌缺失疫苗株M5-△znuA和M5-△bp26-△znuA的构建及毒力和免疫原性的评估
布鲁菌缺失疫苗株M5-△znuA和M5-△bp26-△znuA的构建及毒力和免疫原性的评估刘翠翠;马思思;王佳莹;吴云燕;易琳;赵明秋;陈金顶【期刊名称】《华南农业大学学报》【年(卷),期】2015(036)005【摘要】[目的]利用分子生物学技术,通过同源重组的方法构建了新型的羊种布鲁菌Brucella melitensis减毒活疫苗株,为布鲁菌的防治提供新的选择.[方法]以羊种布鲁菌减毒活疫苗M5株及缺失bp26基因的M5-△bp26缺失突变株为亲本株,利用电击转化法,将含有znuA基因上下游同源臂的自杀质粒转入到亲本株中,通过同源重组敲除znuA基因.对构建的新型基因缺失株进行生物学特性及毒力的鉴定与分析.[结果和结论]PCR及核苷酸序列测序结果表明,羊种布鲁菌减毒活疫苗znuA 单基因缺失株和bp26、znuA双基因缺失株均构建成功,分别将其命名为M5-△znuA和M5-△bp26-△znuA.与亲本株相比,2种缺失突变株的生物学特性没有显著性差异;体外连续传至20代后,菌落PCR和核苷酸测序结果显示M5-△znuA和M5-△bp26-△znuA株具有良好的遗传稳定性.小鼠脾脏质量和脾脏菌落数表明,M5-△bp26-△znuA双基因缺失株毒力最弱,单基因缺失株M5-△znuA和M5-△bp26次之.血清中抗体水平的监测显示,znuA基因的缺失对布鲁菌减毒活疫苗诱导机体体液免疫的能力没有影响.获得了免疫原性保持良好而毒力减弱的羊种布鲁菌减毒活疫苗基因突变株M5-△znuA和M5-△bp26-△znuA.【总页数】8页(P18-25)【作者】刘翠翠;马思思;王佳莹;吴云燕;易琳;赵明秋;陈金顶【作者单位】华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642【正文语种】中文【中图分类】S852.614【相关文献】1.猪霍乱沙门菌疫苗株 C500毒力致弱的主要原因是 rpoS基因的缺失 [J], 徐黎娟;李求春;刘杰;胡亚辰;陶明新;谢晓蕾;耿士忠;焦新安2.伪狂犬病病毒主要毒力基因缺失后的免疫原性研究 [J], 阳爱国;郭万柱;徐志文;石谦;宋振辉3.omp25c基因对马耳他布鲁菌疫苗株M5的毒力及免疫保护性的影响 [J], 曲勍;于雅琴;陈泽良;王玉飞;乔凤;钟志军;徐杰;杜昕颖;汪舟佳;赵瑾;黄留玉4.布鲁氏菌分子标记、毒力基因缺失株YZ-2生物学特性及免疫原性研究 [J], 张付贤;李晓艳;杨艳玲;张辉;郎需龙;唐婕;王兴龙5.布鲁氏菌分子标记、毒力缺失疫苗株△S19-2的构建 [J], 闫广谋;王兴龙;任林柱;刘锴;高建勇;王学理;张辉;李晓燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
羊种布鲁氏菌Omp10基因的克隆及原核表达
羊种布鲁氏菌Ｏｍｐ１０基因的克隆及原核表达徐开莲，朱华培，赵天靖，贾晓晓，郭莳雨，庞峰，焦寒伟，成鹰，杜丽，史巧芸，荣辉，张珈宁，王凤阳（海南大学农学院，海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室，海口市动物基因工程重点实验室，海南海口 ５７０２２８）摘要：根据ＧｅｎＢａｎｋ公布的羊布鲁氏菌（Ｂ．ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ）Ｍ５－９０株外膜蛋白（ｏｕｔｅｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｏｍｐ）基因序列，设计１对引物，以其全基因组为模板，采用ＰＣＲ技术对其进行扩增，得到３８１ｂｐ的目的片段，连接入ｐＭＤ２０－Ｔ载体，转化Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α感受态细胞；测序正确后，构建ｐＥＴ－２８ａ－Ｏｍｐ１０原核表达质粒，再将该质粒转化入Ｅ．ｃｏｌｉ ＢＬ２１（ＤＥ３），ＩＰＴＧ诱导表达融合蛋白Ｈｉｓ－Ｏｍｐ１０，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ进行分析。
结果表明，成功构建了含Ｏｍｐ１０基因的原核表达载体，并在Ｅ．ｃｏｌｉ ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达了Ｏｍｐ１０基因，诱导得到的融合蛋白经鉴定与目的蛋白大小一致，证明Ｏｍｐ１０得到成功表达。
该试验为布鲁氏菌病的进一步研究奠定基础。
关键词：布鲁氏菌；Ｏｍｐ１０基因；原核表达；克隆中图分类号：Ｒ３７８．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７１－７２３６（２０１４）１２－０１２２－０４ 布鲁氏菌（Ｂ．ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ）病是由细胞内兼性布鲁氏菌引起的，是世界范围内常见的人畜共患病，能引起家畜流产及人的热性疾病（Ｓｍｉｔｈ等，２０１３）。
世界上１７０多个国家和地区有人、畜布鲁氏菌病的存在和流行（Ｒａｊｅｓｈ，２００３）。
布鲁氏菌属为微小革兰氏阴性，无荚膜、鞭毛、芽孢及天然质粒的三层膜结构的多形性球杆菌，其外膜与肽聚糖层紧密结合成细胞壁，含有脂多糖、蛋白质和磷脂（Ｓｈｏｈｒｅｈ等，２００２）。
外膜的蛋白质称为外膜蛋白（ｏｕｔｅｒ ｍｅｍ－ｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ，Ｏｍｐｓ）。
2型猪链球菌pnp基因缺失株与回补株的构建及其生物学特性的研究
2型猪链球菌pnp基因缺失株与回补株的构建及其生物学特性的研究杨文琳;许秋;周龙玉;林龙华;柴霁芸;马彩萍;侯杰;祝瑶;张万江【期刊名称】《中国预防兽医学报》【年(卷),期】2024(46)3【摘要】为研究2型猪链球菌(SS2) pnp基因的生物学功能,本研究通过基因无痕操作技术构建SS2 05ZYH33pnp基因缺失株Δpnp以及回补株CΔpnp,经PCR和测序鉴定结果表明,正确构建了pnp基因无痕缺失株和回补株。
将05ZYH33、Δpnp以及CΔpnp分别在不同温度(28℃、37℃、42℃)培养后测定OD_(600nm)值,绘制各菌株的生长曲线;利用革兰氏染色后经镜检及透射电镜观察各菌株的形态结构;通过滴定微孔平板结晶紫法检测各菌株的生物被膜形成能力;采用接触法分析各菌株的溶血特性;于含不同抗生素的THB平板上培养各菌株,分析各菌株的药物敏感性;于氧化条件与酸性条件下培养各菌株,通过统计存活率评价各菌株的氧化耐受与酸耐受能力。
结果显示,缺失株的生长速率明显低于野生株和回补株,且在冷应激条件下的生存能力下降;与野生株和回补株相比,缺失株细胞壁肽聚糖层的结构更加松散、溶血能力下降、生物被膜形成能力下降、对不同类型抗生素的敏感性增强、抗氧化与抗酸能力均下降。
上述结果表明pnp基因是SS2的一个重要调节因子,参与调节细菌对外界环境变化的适应能力。
本研究为科学防控猪链球菌病以及研发新型抗菌药物奠定基础。
【总页数】8页(P221-228)【作者】杨文琳;许秋;周龙玉;林龙华;柴霁芸;马彩萍;侯杰;祝瑶;张万江【作者单位】中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室/动物细菌病创新团队;新疆农业大学动物医学学院【正文语种】中文【中图分类】S852.61【相关文献】1.猪链球菌2型中国强毒株05ZYH33ofs基因敲除突变株构建及其生物学特性研究2.猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析3.牙龈卟啉单胞菌clpP基因缺失株和回补株的构建和鉴定4.2型猪链球菌cps2D基因敲除株的构建及其基本生物学特性的研究5.肠炎沙门氏菌鸡源株ompR基因缺失株的构建及生物学特性与亲本株的比较因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
wbkD基因缺失影响猪种布鲁菌LPS合成能力和毒力
wbkD基因缺失影响猪种布鲁菌LPS合成能力和毒力王鑫;刘郁夫;孙佳丽;冯宇;彭小薇;陈瑞爱;丁家波【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2022(30)5【摘要】wbkD基因在布鲁菌中编码一种糖基转移酶,参与合成布鲁菌LPS的O 侧链。
为探究wbkD基因与布鲁菌LPS合成和毒力之间的关系,本研究利用同源重组技术构建猪种布鲁菌wbkD基因缺失株。
通过吖啶黄凝集试验、结晶紫染色、细菌LPS银染分析比较亲本株和缺失株之间LPS合成能力的差异,并利用小鼠巨噬细胞感染试验和小鼠感染模型,分析wbkD基因缺失对细菌毒力的影响。
结果显示,wbkD基因缺失导致布鲁菌由光滑表型转变为粗糙表型,感染后48 h和72 h,ΔwbkD的细胞内存活能力显著弱于亲本株(P<0.001),小鼠感染试验进一步证实,在相同的感染剂量下,感染后1周和4周ΔwbkD在小鼠脾脏和肝脏载菌量均显著低于亲本株(P<0.001)。
wbkD基因是布鲁菌合成LPS过程中的关键基因,wbkD 基因缺失导致布鲁菌毒力致弱,本研究可为进一步筛选布病疫苗分子修饰靶点提供参考。
【总页数】7页(P1-7)【作者】王鑫;刘郁夫;孙佳丽;冯宇;彭小薇;陈瑞爱;丁家波【作者单位】中国兽医药品监察所国家/OIE布鲁氏菌病参考实验室;华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司;华南农业大学兽医学院【正文语种】中文【中图分类】S852.61【相关文献】1.布鲁菌缺失疫苗株M5-△znuA和M5-△bp26-△znuA的构建及毒力和免疫原性的评估2.羊种布氏菌043强毒株BRA0434基因缺失突变株的构建与毒力的初步评价3.omp25c基因对马耳他布鲁菌疫苗株M5的毒力及免疫保护性的影响4.猪布鲁菌S2omp10基因缺失株的构建及特性5.羊种布鲁菌16M LPS单克隆抗体制备与鉴定因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
猪布鲁氏菌病的发生与防治
猪布鲁氏菌病的发生与防治猪布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌感染引起的疾病，主要通过猪与疫源动物的接触或者摄入被感染的饲料水源等方式传播。
猪是这种病的传染源，而人类和其他动物也可能受到猪布鲁氏菌病的影响。
本文将着重介绍猪布鲁氏菌病的发生原因以及相关的防治方法。
一、猪布鲁氏菌病的发生（一）病原学特征布鲁氏菌是革兰氏阴性菌，形成小的、不易染色的菌体，菌体呈圆形或椭圆形。
（二）疫情特征1. 临床症状猪患布鲁氏菌病主要表现为退食、发热、体温波动、多汗，严重时可能出现流产、死胎、新生仔猪死亡率高等症状。
患病的猪出现全身性浸涉性损害，损害部位主要是生殖系统、淋巴系统、泌尿系统和呼吸系统等。
2. 病原学检测通过细菌培养法和分子生物学检验法可以快速准确的检测出布鲁氏菌的存在。
（三）传播途径布鲁氏菌主要通过猪与疫源动物的接触、摄入污染的饮水和饲料等途径进行传播。
布鲁氏菌还可以通过不洁的兽医器械、人为携带疾病菌隔离疫区等方式进行传播。
（一）加强养殖管理1. 严格消毒猪圈、饮水设施、饲料槽等需要定期进行消毒，消杀病原体。
定期对猪群进行健康检查，发现有布鲁氏菌病的迹象及时隔离治疗，防止疾病的传播。
（二）饲料安全措施保证饲料的卫生安全，避免因饲料受到污染引发疾病。
2. 合理饲养保证猪只摄入充足的营养，提高免疫力，降低感染的风险。
1. 加强隔离对新引进的猪群要进行隔离观察，确保没有病原体的感染。
2. 确保猪圈卫生保持猪圈的清洁卫生，避免细菌的滋生。
（四）疫苗防控1. 猪布鲁氏菌病疫苗接种猪布鲁氏菌病疫苗接种是有效预防此病的主要手段2. 接种程序一般在猪只5-7月龄接种一次，以后每年进行一次复苗。
3. 注意接种时机（五）加强监测1. 定期检测定期进行猪群的健康检查及病原学检测，发现问题及时采取措施。
2. 报告制度对发现的疫情必须按照规定进行报告，确保及时控制疫情的蔓延。
总结：猪布鲁氏菌病对猪群的生产影响较大，给养殖户带来了极大的经济损失。
猪布鲁氏菌病的发生与防治
猪布鲁氏菌病的发生与防治猪布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种猪类传染病，广泛分布于世界各地，对养猪业造成了严重的经济损失。
本文将从猪布鲁氏菌病的发生机制、传播途径以及防治措施等方面进行阐述。
猪布鲁氏菌病的发生机制是由布鲁氏菌感染引起的。
布鲁氏菌是一种革兰氏阴性细菌，能够在宿主的巴氏体内生存和复制。
猪类通过吸入感染、摄食感染和胎盘感染等多种感染途径，感染布鲁氏菌后，常常出现胎儿死亡、流产、产仔间隔延长等症状，严重影响了猪类的生产性能。
猪布鲁氏菌病的传播途径主要有接触传播、空气传播和食物传播等。
接触传播是指病原菌通过粪便、尿液、胎盘等分泌物污染猪舍、饲料、饮水等，从而使猪类感染病菌。
空气传播是指猪舍内空气中布鲁氏菌的浓度达到一定水平，当猪类吸入这些含有菌体的空气时，就会感染病菌。
食物传播是指猪类通过吃下感染了布鲁氏菌的饲料或饮水，从而引起感染。
为了减少猪布鲁氏菌病的发生，可以采取以下防治措施：1. 提高养殖环境的卫生水平。
定期清理猪舍内的粪便和尿液，保持猪舍的干燥和清洁，减少病原菌的滋生和传播。
2. 严格管理猪类的饲养规程。
合理安排猪类的喂食和饮水，保证饲料和饮水的卫生安全，防止食物传播病菌。
3. 加强人员的健康管理。
猪布鲁氏菌病是一种人畜共患病，人员应注意个人卫生，特别是在接触猪类和布鲁氏菌可能存在的环境时，应做好个人防护措施，避免被感染。
4. 注重猪类的免疫工作。
合理选择和应用布鲁氏菌灭活疫苗，为猪类进行疫苗接种，提高猪类的抗病能力，减少病菌的感染。
猪布鲁氏菌病的发生与防治是一个综合性的问题，需要从猪类的养殖管理、环境卫生、饲养规程以及人员的健康管理等多个方面进行综合防控。
只有全面加强预防措施，才能降低猪布鲁氏菌病的发生率，保障猪类养殖业的可持续发展。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Ｃｏ ｓ ｒ ｃ ｉ ｎ ａ ｄ ｃ ｒ ｃ ｅ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｍ ｐｌ 一 ｅ ｉｉ ｎ ｕ ｅ ｌ ｕ ｓ Ｓ ｔ ａ ｎ ｎ ｔ ｕ ｔｏ ｎ ｈａ ａ ｔ ｒ ｚ ｔｏ ｆ ａ ｏ ０ ｄ ｆ ｃ ｅ ｔＢｒ ｃ ｌ ａ ｓ ｉ ２ ｓ ｒ ｉ
ＹＡＮＧ ｎ ｂ ｉ Ｙａ － ｅ ，ＨＡＮ ｅ — ｕ，Ｓ Ｗ ｎｙ ＵＮ ｈ ｎ —ｉｎ Ｃ ａ ｇｊ ｇ ａ
在对 ５ ０家参试 实验 室 报 告 的有 效 数 据分 析后 表 明 ，４家 实 验 室 获 得 满 意 结 果 ， 意 率 达 ６ 。 ３ 满 ８
也 为实验 室 能力验 证 积 累了宝 贵 的经验 。 叁 者 文献 ．
其余 １ ６家 实验 室 结 果 不 满 意 。其 中部 分 实验 室 由 于选择 方 法和试 剂 不 当 ， 导致 不满 意结 果 ， 检测 中仅 注重对 人 的 季 节 性 流 感 病 毒 Ｈ１ Ｎ１亚 型 和 甲 型 Ｈ１ Ｎ１流 感 病 毒 （ ０ ９ ２ ０ ）区 分 ， 却 忽 视 了 甲 型 但 Ｈ１ Ｎ１流感 病 毒 （ ｏ ９ 与 经 典 Ｈ ２ｏ， Ｉ Ｎ１亚 型 ｓ Ｖ 的 －
Ａｂ ｔ ａ ｔ：Ｔｈｅ ｗｉ ｐｐｌｃ ｔｏｎ ｏｆｌｖｅａ ｔ ｎｕａ ｅ ａ ｃｎｅ ｓ ｒ ｉ ｓｌｍ ｉｅ ｅ ａ ｅｏ ａ ｂ ｃ ｅ ｓｒ ｃ ｄｅ ａ ｉａ ｉ ｉ ｔ ｅ ｔ ｄ ｖ ｃ ｉ ｔ ａ ｎｓｉ ｉ ｔ ｄ ｂ ｃ ｕｓ ｆｄｒ ｗ ａ ｋｓｏｆｒ —
中 国兽 医 杂 志 ２ １ ０ １年 （ ４ 第 ７卷 ） ８期 第
Ｃ ｉｅｅＪ ｕｎｌ ｆＶｅｅｉａｙＭｅｉｉｅ ｈｎ ｓ ｏ ｒａ ｏ ｔｒｎｒ ｄｃ ｎ
猪布鲁菌 ５ ｐ０ ；ｏ ｌ 基因缺失株的构建及特 陛 ２ｍ
杨 艳 北 ，韩 文瑜 ， 长 江 孙
（ 林 大学 畜牧 兽 医 学 院 ，吉林 长 春 １ ０ ６ ） 吉 ３ ０ ２
作 者 简 介 ： 艳 北 （ ９ ６ ） 男 ， 士 生 ， 要 从 事 兽 医 微 生 物 与 杨 １８一， 硕 主 收稿 日期 ： ０ １Ｏ 一 ５ ２ １ 一 ５Ｏ 基 金项 目： 林 省 科 技 发 展 项 目 （ ０ ６ ３ 吉 ２ ０ １）
免 疫 学 研 究
通 讯 作 者 ： 文 瑜 ， ｉ： ａ ｗｙ ｌ・ ｄ ． ｎ 韩 Ｅ ｍａ ｈ ｎ ＠ｊ ｅ ｕ ｃ ｌ ｕ
小鼠， 比较 基 因缺 失 株 小 鼠体 内 的 存 活 能 力 。结 果 成 功 构 建 了布 鲁 菌 ｓ 株 ｏ ｌ ２ ｍｐ ０基 因缺 失 株 ， 物 试 验 结 果 表 明 ， 因 缺 失 动 基 株 仍 能 在 小 鼠体 内存 活 ， 备 作 为 减 毒 活 疫 苗 的 特 性 。与 原 始 ｓ 具 ２株 比较 ， 因 缺 失 株 的 感 染 力 进 一 步 减 弱 。表 明 ｏ ｌ 基 ｍｐ ０基
ｓｄｕ ｌｖ ｒ ｅ ｅ， ｉ ｉａ ｎｔｇｅ ｉ ｉｙ ｔ ｒ ｌ ｎｔ ｔ ａｎ ｎ ｔ ｄ ｆｉ ｕ ｔ ｔ ｄ ｆｅ ｅ ｔａ ｅ ａ ｃ ｎ ｔｏ ａ ｉ ａ ｉｕｌｎｃ ｓｍ ｌｒ ａ ｉ ｎ ｃ ｔ ｏ ｖｉｕ ｅ ｓ ｒ ｉ ａ ｄ ｈｅ ｉｆｃ ｌｙ ｏ ｉｆ ｒ ｎ ｉ ｔ ｖ ｃ ｉ ａ ｉ ｎ ｎｄ ｎａ ｕｒ ｌｉ ｅ ｔｏｎ ｉ ｅ ｏ ｏｇ ｔ ｃ ｉ ｎ． Ｉ ｈ ｓ ｓ ｕｄ ｔ ａ ｎｆ ｃ ｉ ｎ ｓ ｒ ｌ ｙ ｄｅ ｅ ｔｏ ｎ ｔ ｉ ｔ ｙ，ｗ ｅ ｍ ｏ ｆｅ ｈｅ ｖ ｃ ｉ ｅ ｓ ｉ ｔａ ｎ ｔ ｅ ｅ ｈｅ ｄｉｉ ｄ ｔ ａ ｃｎ ｕ ｓ Ｓ２ ｓ ｒ ｉ ｏ ｐｒ ｖ ｎｔｔ
摘要 ： 现有 的 布 鲁 菌 减 毒 活 疫 苗 存 在 一 定 毒 力 ， 野 强 毒 株 和 减 毒 活 疫 苗 株 问 缺 少 可 供 鉴 别 的 抗 原 ， 致 在 血 清 学 检 测 且 导
上 自然 感 染 与 疫 苗 接 种 很 难 区分 ， 制 了 现 有 的 减 毒 活 疫 苗 的 广 泛 应 用 。 本 文 拟 对 布 鲁 菌 的减 毒 活 疫 苗 株 ｓ 限 ２进 行 遗 传 改 造 ， 服 上 述 缺 陷 。本 研 究 利 用 同 源 重 组 的方 法 ， 到 了 布 鲁 菌 Ｓ 克 得 ２株 ｏ ］ ｍｐ ０基 因 缺 失 株 。分 别 用 基 因 缺 失 株 和 疫 苗 株 感 染
因在 布 鲁 菌 的 毒 力 及 体 内生 存 方 面 发 挥 了作 用 ， 基 因标 记疫 苗 的研 制 奠 定 了 基 础 。 为
关 键 词 ： 布 菌 ；ｏ ｌ ； 因缺 失株 猪 ｍｐ Ｏ 基
中 图 分 类 号 ： ８ ２ ６ ４ ￥５． １ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ５ ９６ ０ （ ０ １ ０ — ０ ２ ０ ０ ２ ０ ５２ １ ）８０ １ ４
鉴 别诊 断 。 由于这 两种病 毒 在多个 基 因上存 在 高度 的 同源 性 ， 如果 用 于检 测 甲型 Ｈ１ Ｎ１流 感病 毒 的试 剂特 异性 不强 ， 对 经典 ＨＩ Ｉ 检 测 中就会 呈 在 ＮＩＳ Ｖ
Ｅ ｗ ｌ Ｏｇ ｉｔ ｎ Ｄ ｒｏｏｏ ｒｌ 。 ＴＰ Ｒ １ 。ｄ ｔ ｒ ｉ ＿ Ｃｐ ｔ １ｆｅｔ Ｒ － ］ １Ｈ ｈ ａ Ｃ ０ 。 。 ａｉ Ｃ ｆ 。ｉ ｉｌ ｎ （ １ １ Ｅ ／ Ｌ．ｔ ： ｗ ｗ ｗ ｏ ｏ ｎｕ ｚ Ａ Ｈ Ｎ ）［ＢＯ ］ｈ ｐ／ ｗ ． ｈ． ｆｅ ａ ｔ ／ ｉ ／ ｒ 。—ｓｐｂｃ ｉ ｓｓｉｆ ／Ｄ ｒ ｌ ｅＴ ｃ — ｎ ｃ／ ｕ ／ｕ１ａｏ ／ ｎ １ ｃ ｃｅ ｔ Ｒ Ｐ Ｒ ｔ ｓ ｉｔｎ ｗ ｅｕ ａｉ ｍ Ｐ … ｏ。 ・ 。。 一 一 ｏ。 Ｐ ， 。一 ・ Ｅ ２ ］