凋亡抑制基因survivin与卵巢癌的研究新进展

综　述R eview凋亡抑制基因survivin与卵巢癌的研究新进展沈媛媛 武 璁 陶 可北京大学深圳医院妇产科，广东　深圳　５１８０３６【摘要】卵巢癌是女性生殖器官最常见的恶性肿瘤之一，其发病率高而存活率低，对女性的健康造成极大的威胁。

尽管目前采用手术、化疗、放疗等治疗手段使卵巢癌的存活率有了很大提高，但晚期患者即使经过系统治疗达完全缓解，仍有很高的复发率。

而耐药又是治疗失败的主要原因。

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ是迄今发现的最强的凋亡抑制基因，其高表达使肿瘤细胞对多种化疗药物的耐受性增加，并介导肿瘤多药耐药的形成。

鉴于ｓｕｒｖｉｖｉｎ在卵巢癌细胞周期调控、凋亡与血管形成中的发挥着重要作用，探索各种新的分子生物学技术和基因治疗方法，阻断ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达而拮抗其抑制细胞凋亡的能力，降低细胞凋亡的阈值，恢复肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，进而使卵巢癌获得根治成为可能，从而避免卵巢癌细胞耐药和转移扩散给病人带来的痛苦，具有深刻的指导意义。

【关键词】卵巢癌；Ｓｕｒｖｉｖｉｎ；凋亡抑制蛋白；细胞周期；凋亡；ＲＮＡ干扰；反义寡核苷酸【中图分类号】Ｒ７３７．３１【文献标识码】Ａｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－３２５７．２０１２．０３．０１４The New Research Progress of Inhibitor of Apoptosis Genes and Ovarian CancerＳＨＥＮ　Ｙｕａｎ－ｙｕａｎ，　ＷＵ　Ｃｏｎｇ，　ＴＡＯ　Ｋｅ．　Ｄｅｏａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ　ａｎｄ　Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ，　Ｐｅｋｉｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５１８０３６，　Ｃｈｉｎａ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｓ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｃｏｍｍｏｎ　ｍａｌｉｇｎａｎｔ　ｔｕｍｏｒ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｍａｌｅ　ｇｅｎｉｔａｌ　ｏｒｇａｎｓ，　ａｎｄ　ｉｔｓｈｉｇｈ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｌｏｗ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ，　ｃａｕｓｉｎｇ　ｇｒｅａｔ　ｔｈｒｅａｔ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｈｅａｌｔｈ　ｏｆ　ｗｏｍｅｎ．　Ａｌｔｈｏｕｇｈ　ｓｕｒｇｅｒｙ，ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，　ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ　ｈａｖｅ　ｇｒｅａｔｌｙ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｔｈｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ，ｂｕｔ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ａｄｖａｎｃｅｄ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ａｃｈｉｅｖｅｄ　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ，　ｔｈｅｒｅ　ｉｓ　ｓｔｉｌｌ　ａ　ｈｉｇｈ　ｒｅｌａｐｓｅｒａｔｅ．　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｒｅａｓｏｎ　ｆｏｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｆａｉｌｕｒｅ．　Ｓｕｒｖｉｖｉｎ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｓｔｒｏｎｇｅｓｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｇｅｎｅｓｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄ　ｓｏ　ｆａｒ，　ｉｔｓ　ｈｉｇｈ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｌｓ　ｔｏ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｔｏｌｅｒａｎｃｅ　ｏｆ　ａ　ｖａｒｉｅｔｙ　ｏｆ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｄｒｕｇｓ，　ａｎｄ　ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｔｕｍｏｒ　ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ．　Ｖｉｅｗ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｕｒｖｉｖｉｎ　ｉｎ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌ　ｃｙｃｌｅ，　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｐｌａｙ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｒｏｌｅ，　ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ａ　ｖａｒｉｅｔｙ　ｏｆ　ｎｅｗ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｂｉｏｌｏｇｙｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ａｎｄ　ｇｅｎｅ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｍｅｔｈｏｄｓ，　ｂｌｏｃｋｉｎｇ　ｓｕｒｖｉｖｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎｔａｇｏｎｉｚｅ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ　ｔｏ　ｒｅｓｔｏｒｅ　ｔｈｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｌｓ　ｔｏ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｄｒｕｇｓ，　ｔｈｅｒｅｂｙ　ｅｎａｂｌｉｎｇｔｈｅ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｕｒｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ，　ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ａｖｏｉｄ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ａｎｄ　ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ　ｓｐｒｅａｄ　ｏｆ　ｔｈｅｐａｉｎ　ｃａｕｓｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐａｔｉｅｎｔ，　ｐｒｏｆｏｕｎｄｌｙ　ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅ．［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ；　Ｓｕｒｖｉｖｉｎ；　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｐｒｏｔｅｉｎ；　ｃｅｌｌ　ｃｙｃｌｅ；　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；　ＲＮＡ　ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ；ａｎｔｉｓｅｎｓｅ　ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ作者简介：沈媛媛，女，妇产科学，主治医师，主要研究妇科肿瘤及内分泌。

通讯作者：沈媛媛47 卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，近年来其发病率一直呈不断上升趋势，且也是妇科死亡率最高的恶性肿瘤。

据１９９５年的美国癌症统计资料显示，卵巢癌已成为妇女第５位常见的恶性肿瘤和第４位癌症死亡原因［１］。

而美国癌症研究所（ＮＣＩ）预测，２００８年美国卵巢新发病例将达２１６５０例，死亡１５５２０例［２］。

虽然卵巢癌早期确诊患者的５年生存率可达８０％－９０％，但近７０％的患者确诊时已至晚期，且ＦＩＧＯ　Ⅳ期侵袭性卵巢上皮癌患者５年生存率不足２０％［３］。

即使晚期患者经过系统治疗达完全缓解，仍有６０％－７０％会出现复发，而耐药又是治疗失败的主要原因［４］。

研究证实多种化疗药物通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗癌作用，因而寻求一种能促使卵巢癌细胞凋亡或增加其对化疗药物敏感性的辅助治疗手段，对提高患者的生存率直至彻底治愈有着重要意义。

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ是近年发现的一种细胞凋亡抑制基因，具有抑制细胞凋亡和调节细胞增殖的双重功能，它与卵巢癌细胞的生长、侵袭转移及耐药密切相关［５］。

如何靶向ｓｕｒｖｉｖｉｎ治疗卵巢癌成为研究的热点。

现就近几年ｓｕｒｖｉｖｉｎ在卵巢癌中的研究新进展作一综述。

1 Survivin结构、分布与功能 Ｓｕｒｖｉｖｉｎ是凋亡抑制蛋白（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＩＡＰ）家族中的新成员，由Ａｍｂｒｏｓｉｎｉ等［６］于１９９７年应用效应细胞蛋白酶受体－１（ｅｆｆｅｃｔｏｒ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ－１，　ＥＰＲ－１）的ｃＤＮＡ　通过杂交方法在人类基因组文库中筛选并鉴定出来，是目前发现的最强的凋亡抑制因子。

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白能够调节所有细胞分裂和存活。

１．１ Ｓｕｒｖｉｖｉｎ结构与分子生物学功能特征在人类和小鼠，ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因定位于１７ｑ２５染色体，全长１４．７ｋｂ，包含４个相对分子质量１６．５ｋｄ。

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因启动子近端均含有细胞周期依赖元件（ＣＤＥ）和细胞周期同源区域（ＣＨＲ）。

人的ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因有三个ＣＤＥ，分别位于－６、－２、－１７１位点，一个ＣＨＲ位于－４２位点。

由ｓｕｒｖｉｖｉｎ　基因编码的产物称为生存蛋白或存活素，是一个包含１４３个氨基酸残基相对分子质量为１６３８９的蛋白质［７］。

与ＩＡＰ　家族其他成员不同的是，ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白具有以下特点：①Ｎ端只有一个较为保守的杆状病毒属抗细胞凋亡重复序列（ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ　ＩＡＰ　ｒｅｐｅａｔ，ＢＩＲ）结构域，该结构域是对凋亡程序执行元件ｃａｓｐａｓｅ－９、ｃａｓｐａｓｅ－３或ｃａｓｐａｓｅ－６与ｃａｓｐａｓｅ－７发挥抑制作用的主要基团；②ＢＩＲ分子被Ｃｙｓ４６－Ｐｒｏ４７－Ｔｈｒ４８３个氨基酸构成的插入序列分成两半；③Ｃ端缺乏锌指结构，而含有１个由４２个氨基酸构成的α－螺旋结构，其晶体结构呈广泛二聚体化排列，体外实验显示这种结构特征可显著增强其凋亡抑制功能［８］。

目前，学者已发现７个不同抗凋亡特性的ｓｕｒｖｉｖｉｎ剪接异变体［９，　１０］：①ｓｕｒｖｉｖｉｎ－ΔＥｘ３缺乏外显子３，保留了抗凋亡活性；②ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２Ｂ是将内含子作为隐形外显子，几乎无抑制细胞凋亡的活性；③ｓｕｒｖｉｖｉｎ－３Ｂ与凋亡抑制有关；④ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２α能削弱ｓｕｒｖｉｖｉｎ的抗凋亡活性，增加肿瘤细胞对化疗的敏感性；⑤另３个异构体ｓｕｒｖｉｖｉｎ－１４０、ｓｕｒｖｉｖｉｎ－１２１、ｓｕｒｖｉｖｉｎ－４０在人和鼠组织内均有发现，且只表达于胚胎组织，前两者有抑制凋亡作用。

１．２　Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的组织分布 在胚胎及胎儿期ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达非常丰富。

而在成人正常细胞中，除了胎盘和胸腺微弱表达外，其它组织基本很难检测到ｓｕｒｖｉｖｉｎ的表达［６］。

但在人类大多数恶性肿瘤组织中，ｓｕｒｖｉｖｉｎ　ｍＲＮＡ和蛋白呈广泛高表达。

Ｔａｍｍ等［１１］采用ＮＣＩ　抗肿瘤药物筛选程序中的６０种人类肿瘤细胞株，研究了ｓｕｒｖｉｖｉｎ在体外培养细胞株的表达。

结果显示，６０种肿瘤细胞株均有ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达，包括乳腺癌、肺癌、结肠癌、卵巢癌、前列腺癌、淋巴瘤等。

Ｌｉｇｕａｎｇ等［１２］对１１４例卵巢组织标本进行研究后发现，７３％的卵巢癌、４７％的交界性卵巢癌和１９％的卵巢良性肿瘤ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达阳性，而所有正常卵巢标本中均未见ｓｕｒｖｉｖｉｎ的表达；且ｓｕｒｖｉｖｉｎ的表达率与卵巢癌的临床分期、分化分级和淋巴结转移呈正相关，但与腹水和组织学类型无相关性。

同样地，Ｋｌｅｉｎｂｅｒｇ等［１３］对卵巢癌肿瘤积液、相对应的原发肿瘤及实体转移瘤中的ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达情况进行免疫组化分析发现，实体转移肿瘤中的细胞质ｓｕｒｖｉｖｉｎ异常高表达（９９％），明显高于相对应的肿瘤积液（８８％）和原发肿瘤（９２％）；核ｓｕｒｖｉｖｉｎ高表达在肿瘤积液、原发肿瘤和实体转移瘤中分别为７２％、９０％和９３％。

随后，Ｗａｎｇ等［１４］用ＳＡＢＣ免疫组化法检测５５例罕少疾病杂志 ２０１２年０６月　第１９卷　第３期　总第９２期48原发性卵巢黏液性肿瘤中的ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达，结果发现ｓｕｒｖｉｖｉｎ在良性、交界性和恶性组的阳性表达率分别为２／２０、１２／１５和２０／２０，呈升高趋势，其中良性与交界性、良性与恶性组间比较差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。

良性、交界性和恶性组ｓｕｒｖｉｖｉｎ的胞核阳性表达率分别为１／２０、６／１５和５／２０，其中良性与交界性组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。