猪伪狂犬病毒Bartha-K61疫苗株和变异株主要免疫原性基因分析
利用高效价Bartha-K61株疫苗防控净化猪伪狂犬病的研究与实践
收稿日期：2020-03-30基金项目：佛山市科技创新项目（FS0AA-KJ419-4401-0087）；广东省重点领域研发技术项目（2019B020217002）作者简介：陈耀（1991-），男，福建三明人，博士，主要从事家畜传染病的科研工作，E-mail：*****************通讯作者：马春全（1962-），男，教授，主要从事家畜传染病的教学、科研和临床工作，E-mail：*****************利用高效价Bartha-K61株疫苗防控净化猪伪狂犬病的研究与实践陈耀1杨傲冰2白挨泉1林德锐1马春全1(1佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东佛山528200;2广东永顺生物制药股份有限公司,广东广州510700)摘要:自2011年以来,我国猪场陆续发现PRV 变异毒株感染导致的疫情,对我国养猪业造成了巨大的威胁,引起了行业的高度关注。
目前,疫苗仍然是防控PRV 的最主要手段,本文总结了2个规模种猪场通过高效价Bartha-K61株疫苗免疫防控、净化PRV 的相关案例,为猪场防控PRV 提供参考。
关键词:猪伪狂犬病;Bartha-K61株;疫苗;净化中图分类号:S828;S852.65文献标识码:A文章编号:1673-4645(2020)03-0054-03开放科学(资源服务)标识码(OSID ),扫一扫,了解文章更多内容伪狂犬病（PR ）是由伪狂犬病毒（PRV ）引起的猪和其他多种动物共患的一种以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状的急性传染病[1]。
2011年底以来，猪伪狂犬病在我国猪场流行明显增多，发病猪群主要表现为母猪流产、产死胎、产木乃伊胎增多，同时引起大量初生仔猪、生长育肥猪死亡，给养猪场带来严重的经济损失[2]。
部分规模猪场虽然注重伪狂犬疫苗免疫，但仍然发生猪伪狂犬病，给养猪业造成巨大损失。
血清学检测调查显示许多猪场伪狂犬gE 抗体由阴性转为阳性，甚至较大一部分种猪场也成为野毒阳性猪场[3,4]。
ST传代细胞源猪伪狂犬病毒活疫苗(Bartha-K61株)超剂量免疫的安全性实验
ST 传代细胞源猪伪狂犬病毒活疫苗（Bartha⁃K61 株）超剂量免疫安全性实验⁃林德锐，等 试验研究 · 49 ·
有无肿大等病理变化的观察检查。
2 结果与分析 将试验用 3 批疫苗对 20~25 日龄、50~55 日龄
的健康猪和怀孕 82~94 日母猪进行超剂量免疫接 种。接种后观察 14 日，所有接种猪精神、食欲、体 温等均正常。详细结果见表 1~表 3。 各批次疫苗 超剂量肌肉注射不同日龄的试验猪免疫接种前 7 日及免疫接种后 14 日的体温监测结果（每天上、下 午各测温 1 次）详见图 1~图 12。
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广东畜牧兽医科技 2018 年（第 43 卷）第 2 期
ST 传代细胞源猪伪狂犬病毒活疫苗 （Bartha⁃K61 株）超剂量免疫的安全性实验
林德锐，吴文福*，黄秋雪，李宁，赖月辉，侯高伟 （广东永顺生物制药股份有限公司，广东 广州 511356）
摘 要：ST 传代细胞生产 3 批次伪狂犬病毒活疫苗（Bartha⁃K61 株）中试产品，检验合格后对 20~25 日龄、50~55 日龄健康猪以及妊娠后期的母猪，分别采用耳后颈部肌肉注射方式进行超 剂量免疫接种，同时设立相应对照组。超剂量免疫后各组猪只精神、食欲、体温、生产状况等 经持续观察记录，均表现为正常。结果表明，ST 传代细胞生产猪伪狂犬病活疫苗（Bartha⁃K61 株）对不同日龄猪和妊娠后期母猪进行超剂量免疫接种均是安全的。
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10 精神、食欲、体温正常，无不良Байду номын сангаас应
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10 精神、食欲、体温正常，无不良反应
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0 精神、食欲、体温正常，无不良反应
图 5 试 ST01 批疫苗超剂量肌肉注射 50~55 日龄猪免前 7 日以及 免后 14 日的体温监测结果
经典Bartha-K61株猪伪狂犬病疫苗临床应用效果研究
经典Bartha-K61株猪伪狂犬病疫苗临床应用效果研究作者：周先建何东旭等来源：《兽医导刊》 2018年第7期猪伪狂犬病是危害养猪业的一种重要传染病，它严重危害着国内养猪业的发展。
自2011 年以来，该病在我国多个地区大面积流行，伪狂犬病毒株变异，经典Bartha 株的使用效果让很多养殖户怀疑，本研究以连续使用经典伪狂犬疫苗一年以后的规模养猪场为研究对象，采集不同阶段猪群的血清样本，进行血清学检测，以评估经典毒株伪狂犬疫苗的临床应用效果。
一、材料与方法1. 研究对象。
福建某农牧有限公司，存栏母猪500头，连续使用该南京厂家猪伪狂犬疫苗（Bartha-K61 株）一年以上，猪场生产成绩稳定，猪群健康度良好。
2. 伪狂犬疫苗。
经典Bartha-K61 株猪伪狂犬活疫苗“威必宁”，gE 基因自然缺失，由南京某厂家生产，每头份疫苗含抗原高达106.3TCID50。
3. 检测试剂盒。
海博莱猪伪狂犬病毒gE 抗体检测试剂盒，海博莱猪伪狂犬gb 抗体检测试剂盒。
4. 采集血清。
分阶段随机采样，详情见表1，前腔静脉采血，静置析出血清，待检。
5. 免疫程序。
仔猪1 日龄滴鼻1 头份/ 头，二免45 日龄，2 头份/ 头，三免90 日龄，2 头份/ 头；种猪4 次普免/ 年，2 头份/ 次/ 头。
二、结果与分析1. 猪伪狂犬抗体.伪狂犬gE 抗体结果分析，从图4、图5 可以看出，各阶段猪群送检样品血清伪狂犬gE 抗体水平检出率极低，基本可确定野毒控制良好，只有1 头50 日龄仔猪血清伪狂犬gE 抗体检测为阳性，其它猪群均为阴性状态，建议加强生物安全管理，启动伪狂犬净化程序。
伪狂犬gB 抗体结果分析，从图1、图2、图3 可看出，各胎次母猪群、后备猪的阳性率均为100%，且伪狂犬gB 抗体均值处于较高水平，在伪狂犬gE 未检出情况下，说明疫苗免疫效果很好；29 日龄仔猪群、50 日龄仔猪、90 日龄仔猪、150 日龄肥猪群抗体阳性率为100%、100%、90%、100%，血清伪狂犬gB 抗体均值处于较高水平，说明疫苗免疫效果很好，继续维持。
伪狂犬Bartha-K61毒株的前世今生
Bartha-K61毒株的前世今生伪狂犬病毒又称猪疱疹病毒，该病毒能引起多种家畜和野生动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要特征的传染病。
猪伪狂犬病严重制约着世界养猪业的发展，各国专家学者不遗余力的研究疫苗防控该病，欧美和亚洲部分发达国家已经通过疫苗免疫、检测淘汰、扑杀等措施净化和根除了伪狂犬病，在伪狂犬净化过程中疫苗起到关键性作用。
我国猪伪狂犬疫苗毒株以Bartha-K61株为主，目前在售该毒株的疫苗企业有42家国内兽用生物制品企业和4家外企，其约占猪伪狂犬疫苗市场份额的60%。
Bartha毒株是1961年由匈牙利学者Bartha分离的猪强度株，经猪肾原代细胞继代50代，在37℃培养，然后又转入32℃培养20代，并挑选1-2mm的小噬斑连续选斑培育而成。
制苗时用40代种毒，先传猪肾原代细胞1-2代复壮，挑取小斑，再传鸡胚成纤维细胞制苗。
其冻干后对细胞的滴度最低为103·5-4.5TCID50/0.2ml。
该苗主要用的免疫接种。
肌肉注射，两次免疫注射才能获得较好的免疫效果，两次免疫间隔3-4周。
Bartha-K61疫苗株不仅缺失了主要毒力因子gE及能与其组成复合物的蛋白gI，还在US区存在其他一些缺失，这些基因的缺失解释了Banha-K61疫苗株的安全性。
gE基因缺失疫苗结合gE-_ELASA鉴别诊断方法是美国和欧盟成员国推行伪狂犬病净化和根除计划的理论基础。
为了防止不同的疫苗株间发生重组，使疫苗毒株毒力返强，所以gE基因缺失疫苗是欧盟成员国和北美地区各国唯一被允许使用的修饰活疫苗。
在美国和欧洲的应用实践表明，伪狂犬病gE基因缺失疫苗的应用对于伪狂犬病的控制和消除是一个突破。
1948年，我国首次检测出伪狂犬病毒，上世纪60年代伪狂犬病在地方流行，并未造成较大的经济损失，随后疫情出现蔓延，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所1979年引进了Bartha-K61弱毒株，试制成功了伪狂犬弱毒冻干疫苗，通过Bartha-K61疫苗应用有效遏制住了猪伪狂犬病疫情。
猪场伪狂犬病疫苗的最佳免疫时机应该是什么时间
猪场伪狂⽝病疫苗的最佳免疫时机应该是什么时间猪伪狂⽝病是由伪狂⽝病病毒(Pseudrabies virus, PRV)所引起的猪的⼀种病毒性传染病。
猪伪狂⽝病毒被确认为猪甲型疱疹病毒，为双链DNA病毒。
1902年匈⽛利奥杰斯基Aujeszky⾸次报道⽽命名，⼜称奥杰斯基病病毒。
迄今从世界各地分离的毒株虽然毒⼒有强弱之分，毒株的致病性有差异，但均呈现⼀致的⾎清学反应，即只有⼀个⾎清型。
我国有多个研究团队分离到⾄少4个不同的变异毒株，对出现的变异毒株进⾏了研究，并获得⼀些新毒株的全基因组序列。
这些变异株虽然基因有变化，但是并没有出现新的⾎清型。
不过多个变异毒株的毒⼒明显地增强。
近⼏年来，猪伪狂⽝病的流⾏⾮常普遍，导致包括母猪繁殖障碍、仔猪神经症状伴随⾼死亡率和育肥猪呼吸道症状等引起⽣产阻滞的严重问题。
分析发病的原因，从外因来说，当前较多的⼈认为是环境的感染压⼒⼤，出现了超强毒的变异株所导致。
从内因来说，猪场没有阻断病毒的循环，表现为整体猪场伪狂⽝野毒(gE)抗体的阳性率⽐较⾼。
还有引种把关不严，把阳性猪引⼊猪场。
使猪群⾯临考验；消毒﹑隔离等⽣物安全措施不到位；多数猪场只采取⼀般控制措施，未采取坚决的清除策略，猪场内野毒有循环传播的机会，使野毒（gE）抗体阳性率居⾼不下，从防疫来讲，主要是免疫不合理，造成免疫空⽩：免疫程序与疫苗特性不匹配，商品猪或者不免疫，或者免疫时机不能正确把握，免疫剂量不⾜（疫苗效价低）。
在临床实践中，虽然多数猪场是根据母猪流产、仔猪神经症状来确定伪狂⽝发病，但⾎清学检测显⽰往往是育肥猪gE转阳在先。
由于仔猪免疫的不完整或程序的偏差，或免疫量的不⾜，在⾼感染压⼒或强毒攻击下，育肥期猪群临床上出现咳嗽并⼤量排毒，同时⾎清gE抗体转阳。
⼤量野毒的扩散造成的病毒⾼压⼀旦突破母猪原有抗⼒，则引起母猪流产，继⽽仔猪发病死亡。
临床案例显⽰，有些猪场母猪即使在gB抗体⾼且⼀致的状况下，也有出现较多流产并伴随仔猪神经症状的现象。
山东省菏泽市某规模猪场不同猪群伪狂犬病野毒感染情况调查
山东省菏泽市某规模猪场不同猪群伪狂犬病野毒感染情况调查贾义平1，李翠玲1，樊祜卿1，王 曼2（1. 菏泽市动物疫病预防控制中心，山东菏泽 274000；2. 成武县畜牧服务中心，山东成武 274200）摘 要：为了解规模猪场不同猪群的伪狂犬病病毒（PRV）感染情况及场区病毒载量分布特点，在山东省菏泽市某规模猪场，利用实时荧光定量PCR方法，对该猪场不同孕龄母猪、不同阶段生长猪群，以及各生产阶段场区环境，采集猪鼻拭子和场区环境拭子进行PRV-gE核酸检测，并对检测结果进行统计分析。
结果显示：在294份猪鼻拭子中，检出42份PRV-gE核酸阳性，总阳性率为14.28%；母猪群PRV-gE阳性率为17.83%（23/129），且妊娠前后各阶段阳性率呈先上升后下降趋势，中期较高（24.00%），但差异不明显（P＞0.05）；不同阶段生长猪群的平均PRV-gE阳性率为11.52%（19/165），随日龄增加，阳性率也呈先上升后下降趋势，80~90日龄育肥猪最高（28.13%），与其他生长阶段猪群差异明显（P＜0.05）；除饲料、水源、上猪台和出猪台外，其他大部分场区环境均检测到PRV-gE核酸阳性；育肥猪群病毒载量最高，为3.6×105拷贝数/mL，其猪舍环境的病毒载量也较高，与其他环境及生长阶段猪群差异均明显（P＜0.05）。
结果表明，不同猪群包括免疫猪群均可遭受PRV野毒感染，尤其是母猪妊娠中期和猪育肥阶段早期，且大部分场区环境均可被污染。
结果提示，规模猪场要加强各种猪群尤其是育肥猪群的伪狂犬病免疫，通过监测来调整和优化免疫程序，同时要加强生物安全，防止病毒传入和扩散。
关键词：伪狂犬病；猪；野毒感染；病毒载量；核酸检测中图分类号：S851.3 文献标识码：A 文章编号：1005-944X（2021）04-0034-05DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2021.04.007 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Investigation on the Infection with Wild Type Pseudorabies Virus inDifferent Pig Herds in a Farm in Heze City of Shandong ProvinceJia Yiping1，Li Cuiling1，Fan Huqing1，Wang Man2（1. Heze Animal Disease Prevention and Control Center，Heze，Shandong 274000，China；2. Chengwu Husbandry Service Center，Chengwu，Shandong 274200，China）Abstract：In order to identify the infection with pseudorabies virus（PRV）in different pig herds in large-scale farms and the distribution characteristics of viral load，for sows at different gestational ages，growing pigs at different ages and the environment within the production areas in each process in a large-scale farm in Heze City of Shandong Province，pig nose swabs and environment swabs were collected to detect PRV-gE nucleic acids by real-time fluorescence quantitative PCR，and the results were statistically analyzed as follows：for 294 nasal swabs，42 positive samples were detected with the total positive rate of 14.28%；the positive rate was 17.83%（23/129）in sows，increased firstly and then decreased prior to and after their pregnancy，and remained higher in the second trimester （24.00%），with slightly difference（P＞0.05）；the average positive rate of PRV-gE nucleic acids was 11.52%收稿日期：2020-12-26 修回日期：2021-01-10通信作者：李翠玲。
Bartha K61株活疫苗对猪伪狂犬变异毒株和传统毒株的免疫保护效力分析
Chinese Journae of Veterinaa Medicine中国兽医杂志2020年（第56卷）第7期15 Bartha K61株活疫苗对猪伪狂K变异毒株和传统毒株的免疫保护效力分析严伟东1>2,李畅,于学祥"，何启盖"，杨汉春1（1.中国农业大学动物医学院，北京海淀100193； 2.华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，湖北武汉430070； 3.华中农业大学动物医学院，湖北武汉430070）摘要:为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力%以经典PRV-TA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株，评价Baaha K61活对毒变异株的保护。
用Bartha K61株活4~5周断奶仔猪，28d后,分别用PRV-TA株和流行变异PRV-XT株攻毒，观察仔猪的临床症状和病理变化，检测鼻腔排毒情况％结果显示,Bartha K61活疫苗可对PRV-TA株攻毒提供良好的保护,但对变异毒株PRV-XT仅能提分保护％PRV-TA株攻毒组所有猪只未出现明显临床症状，而PRV-XT攻毒组出现较为明显的临床症状％表明Bartha K61株活疫苗对传统毒良好保护效果，而对行变异毒株不能提保护％关键词：猪伪狂犬病；Bartaa K61株活疫苗；PRV-TA株；变异强毒PRV-XT株；攻毒保护试验中图分类号：S852.65*1文献标志码：A文章编号：0529—6005(2020)07—0015—04 The Immunoprotection Efficacy of Bartha K61Strain Attenuated Vaccine againshPseudorabies Variani Strain and Traditional StrainsYAN Wei-dong1，2，LC Chang2,3，YU Xue-xiang2,3，HE Qi-gai2,3，YANG Han-chun1(1.Colleve of Veterinaa Medicine,China Agacueual University,Beijing100193,China；2.State Key Laboatoa of Agacueual Microbiolovy,Huazhong Agacueural University,Wuhan430070,China；3.Colleve of Veterinaa Medicine,Huazhong Agricueual University,Wuhan430070,China) Abstraci:To evaluate the actual eSect of the pseudoabies live vvccine(Bartaa K61strain)aaainst the highly virulent strains, the taditional PRV-TA strain and the popular vvriant PRV-XT strain wero used as the chdenge strains te assess the protective effect aaainst the pseudoabies virus mutant strain in the Bartha K61live vvccine immunized piglets.Bartha K61live vaccine was inoculated in4〜5weeks old weaned pigs.After28days of immuniza/on,the PRV-TA strain and the epidemic variant PRV-XT strain were used for chHengc.The clinicai symptoms and pathoOvical changes of the piglets after the chHengc were observed,and the nasae shedding was detected.The results showed that the Bartha K61vvccine provided good immuno-protection aaainst the classical PRV-EA strain,but only paaiaCy protected aaainst the popular variant strain PRV-XT.AH the pigs in the PRV-TA strain chdengc group showed no obvious clinicai symptoms；while the PRV-XT chaCenge group showed obvious clinicai symptoms.The above results indicate that the attenuated raccinc Bartha K61strain has a good protective effect on taditional strains,but not on the endangered strains.Key words:pseudorabics；Bartha K61live vaccine；PRV-TA strain；virulent strain PRV-XT；chdengc protection expeanient Corressonding authors:YANG Han-chun,E-mai:yanghanchunl@；HE Qi-gai,E-mai:he628@maiL hzau. 伪狂犬病（Pseudorabics,PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabics vias,PRV"引起和羊等多种家畜收稿日期：2019-06—18基金项目:国家生猪产业技术体系资助项目（CARS-35）作者简介:严伟东（1979-）,,研究员,生，动物病毒分离鉴定、新型生物制品研制与应用工作,E-maC：yanwd2007 @163-com通讯作者:杨汉春,E-mait: yanghanchun1@；何启盖，E-mail:he628@maiC 的一种急性[1]o其征为发热，奇痒脊髓起母障碍、流产、和吸症状％新生出症状外还%PRV的天然宿主、贮存者和源％2070年代，我国利引进了活Bartha K61株，到了t控制[2]o自2011年以来，的行在全国范内势，目前为业较为严重的疾病之一'35（%多使用基因缺失活疫苗免疫的16中国兽医杂志2020年（第56卷）第7期Chinese Journai of Veterinara Medicine规模化猪场依然出现了猪伪狂犬病暴发。
伪狂犬Bartha-K61株弱毒疫苗临床应用效果研究
伪狂犬Bartha-K61株弱毒疫苗临床应用效果研究文I石淼王云周先建(南京天邦技术服务部)猪伪狂犬病毒属于双链DNA病毒，相对稳定，只有一个血清型，目前为止还未发现抗原性不同的伪狂犬病毒毒株。
2011年以来猪伪狂犬病有所抬头，多个地区猪场、实验室检测分离出变异的PRV毒株，它们对易感猪的致病力增强，免疫猪的保护力也相应减弱。
尽管人们对新毒株的危害存在各种担忧，但在生产中许多规模猪场利用经典Bartha-K61株活疫苗仍能有效地控制了猪伪狂犬病。
Bartha-K61株是一个临床应用历史较长、范围较广、数H：较多的经典猪伪狂犬病疫苗毒株，并在多个国家实现了猪伪狂犬病的净化。
当前形势下，通过Bartha-K61株临床免疫密度的增大、仔猪早期接种和强化免疫，猪伪狂犬病的感染率明显下降。
本研究面对连续使用经典伪狂犬疫苗一年以后的规模养猪场，针对猪场需要，以加强免疫后后备母猪和商品猪为主要研究对象，采集各个阶段猪群的血清样本，进行血清学伪狂犬gE抗体的检测，以评估经典毒株在新型PRV毒株压力下的临床应用效果。
1材料与方法1.1研究对象浙江某规模化猪场，存栏母猪800头,连续使用猪伪狂犬病Bartha-K61株弱毒活疫苗•年以上，猪场生产成绩稳定，猪群健康度良好。
1.2伪狂犬疫苗猪伪狂犬病弱毒活疫苗(Bartha-K61株)，由南京天邦生物科技有限公司生产。
1.3检测试剂盒海博莱猪伪狂犬病毒gE抗体检测试剂盒；西班牙CIVTEST猪伪狂犬病毒gE抗体检测试剂盒ELSIAo1.4采集血清分阶段随机采样，详情见表1,前腔静脉采血，静置析出血清，待检。
广告表1样品采集信息表3浙江某规模化猪场PR-gE 抗体检测结果(2018/06/08)3胎采样时间2017/12/14采样时间2018/06/08检测试剂盒海博莱gE 抗体检测试刑盒检测试剂盒西班牙CIVTESTgE 抗体检测试剂愈总头数208总头数66后备母猪167后备母猪14公豬11公猪117周龄7讶山2胎620周龄23荣昌•批5荣昌二批54胎55胎56胎5注：猪伪狂犬gE( SS )(SffiK) IN%值>0.45为PRV-gE (野畫)抗体阳性)检出阳性比例阳性率軸1N%均值厉备母猪0/1400.0710.070公猪0/110-0.0340.029青山2胎0/60-0.0170.019荣昌一批0/50-0.()060.036荣昌二批0/50-0.0120.0303胎0/500.0060.0174胎0/500.0680.0905胎0/500.0380.0796胎0/500.0460.0427胎0/50.0140.0187胎51.5免疫程序a:仔猪1日龄滴鼻1头份/头，8周龄和15周龄，肌注各2头份/头；b:后备母猪5月龄和6.5月龄加强免疫，2头份/次; c:种猪4次普免/年，2头份/次/头。
2020年猪伪狂犬病检测分析与防控建议
362020年齐鲁动保第三方检测数据显示：猪伪狂犬病病毒抗原检出率为4.1%，且呈逐年下降趋势；而猪伪狂犬病gB抗体平均合格率为92.2%，gE野毒带毒率为26.2%，猪伪狂犬病问题依然严重。
高强度免疫是降低猪伪狂犬病感染率的有效方案，但猪伪狂犬病野毒净化是彻底解决问题的出路。
1 材料与方法1.1 样品来源及分布血清来源：样品来源于全国18个省市，360个猪场，3673份血清（表1）。
组织样品来源：样品来源于全国14个省市，165个猪场，497份组织样品（表2）。
1.2 方法抗原检测采用齐鲁动保全国合作的第三方实验室自建方法，荧光定量PCR/PCR/RT-PCR 方法检测。
伪狂犬病gB-ELISA与伪狂犬病gE-ELISA抗体检测采用美国IDEXX ELISA抗体检测试剂盒，均按照说明书操作及标准判定。
2 结果与分析2.1 送检样品猪场规模分析从送检样品的猪场规模看，1000～2000头基文 ⊙ 李相钊1，张广1，周忠涛1，李秀娟1， 陈方园1，2 1.齐鲁动物保健品有限公司 2.碧迪医疗器械（上海）有限公司2020年猪伪狂犬病的控制比2019年有了明显的进步，但问题依然严重，更困难的是种猪野毒污染的问题，也就意味着伪狂犬病的净化还有很长的路要走。
在复产保供作为第一要务的前提下，需要通过高强度免疫，把伪狂犬病的群体野毒带毒率控制在最低范围。
2020年猪伪狂犬病检测分析与防控建议表1 PRV（猪伪狂犬病病毒）抗体样本送检情况37础母猪的猪场占比26.5%，这类猪场数量最多；1～100头基础母猪的猪场占比23.3%；100～500头基础母猪的猪场占比19.6%；500～1000头基础母猪的猪场占比19.1%；≥2000头基础母猪的猪场占比11.5%（表3、图1）。
基本涵盖了各种类型的猪场，样本的代表性比较强。
2.2 猪伪狂犬病疫苗免疫调查分析假定每头猪免疫伪狂犬病疫苗2次/年，每次免疫1头份为完全免疫，按照此标准采用农业部数据分析看，猪伪狂犬病的免疫率并不高：2018年免疫率为57%，2019年免疫率仅为35%，2020年免疫率为88%（表4）。
猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源)最小免疫剂量的研究
猪伪狂犬病活疫苗（Bartha⁃K61株，传代细胞源）最小免疫剂量的研究吴文福，林德锐，黄秋雪，赖月辉，牛晓芸，牛贝贝，李宁，侯高伟，吉艺宽（广东永顺生物制药股份有限公司，广东广州511356）摘要：为了确定猪伪狂犬病活疫苗（Bartha⁃K61株，传代细胞源）的最小免疫剂量，本研究将3批猪伪狂犬病活疫苗（Bartha⁃K61株，传代细胞源）分别稀释成10TCID50/mL、102.0TCID50/ mL、103.0TCID50/mL，每批疫苗各个稀释度分别免疫仔猪1.0mL/头，并设攻毒对照组和阴性对照组。
免后10d连同攻毒对照组用伪狂犬病病毒GD1株进行攻毒保护试验，阴性对照组不攻毒。
结果表明，10TCID50/头和102.0TCID50/头的免疫剂量在免疫后10d依然无法提供完全的免疫保护，保护率为20%~80%（1/5~4/5）；103.0TCID50/头的免疫剂量能够保护仔猪抵抗PRV强毒的攻击，保护率为100%（5/5）；攻毒对照组发病率为100%（5/5），死亡率为80%（4/5）；阴性对照组全部健活。
由此确定猪伪狂犬病活疫苗（Bartha⁃K61株，传代细胞源）最小免疫剂量为103.0TCID50/头。
关键词：伪狂犬病病毒；活疫苗；最小免疫剂量中图分类号：S852.65+1文献标识码：A文章编码：1005⁃8567（2018）05⁃0049⁃04Determination of the Minimum Immunical Dose of LiveVaccine aginst Swine Pseudorabies（Strain Bartha⁃K61，Cell Line Origin）WU Wen⁃fu，LIN Derui，HUANG Qiu⁃xue，LAI Yue⁃hui，NIU Xiao⁃yun，NIU Bei⁃bei，LI Ning，HOU Gao⁃wei，JI Yi⁃kuan（Guangdong Win⁃sun Pharmaceytical Stock Limited Company，Guangdong511356）Abstract：In order to determine the minimum immunical dose of Swine Pseudorabies Live Vaccine（Strain Bartha⁃K61，Cell Line Origin），three batches of swine Pseudorabies live vaccines were diluted to10TCID50，102.0TCID50，and103.0TCID50per dose，respectively.Each batch of vaccine was immunized with piglets at each dilution，and a challenged group and a unchallenged group were set up.After10days of immunization，the Pseudorabies virus GD1 strain was used for the challenge protection test，and the unchallenged group was not challenged.The results showed that10TCID50and102.0TCID50groups failed to provide complete protection，the protection rate was20%～80%.The 103.0TCID50groups could provide complete protection，the protection rate was100%.All challenged piglets were diseased and80%died.The unchallenged piglets were healthy.According to the above results，the minimal effective dose of vaccines against Pseudorabies virus was103.0TCID50per piglet.Keywords：Pseudorabies Virus；Live Vaccine；Minimum Immune Dose广东畜牧兽医科技2018年（第43卷）第5期试验研究收稿日期：2018⁃07⁃04项目来源：广州市科创委产学研合作专项“畜禽重要疫病新型疫苗和诊断技术研究及产业化”（2014Y2⁃00003）作者简介：吴文福（1960⁃），男，高级兽医师，从事兽用生物制品生产与研发工作。
猪伪狂犬病活疫苗
猪伪狂犬病活疫苗（Bartha K-61株）说明书和标签（一）猪伪狂犬病活疫苗（Bartha K-61株）说明书【兽药名称】通用名猪伪狂犬病活疫苗（Bartha K-61株）商品名喜可净英文名Swine Pseudorabies Vaccine, Live（Strain Bartha K-61）汉语拼音Zhu Weikuangquanbing Huoyimiao（Bartha K-61 Zhu）【主要成分与含量】每头份疫苗中含猪伪狂犬病病毒Bartha K-61株至少105.5TCID50。
【性状】黄白色海绵状疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。
【作用与用途】用于预防猪伪狂犬病。
【用法与用量】可采用颈部肌肉注射或滴鼻途径进行接种。
所有年龄、体重和性别的猪均接种2ml（含1头份）。
采用肌肉注射途径进行接种时，可以用红色稀释液（W）或白色稀释液（A3）稀释后进行接种；采用滴鼻途径进行接种时，用红色稀释液稀释后，每个鼻孔接种1ml。
推荐的接种程序：育肥猪：在一般地区使用时，每头猪于12～13周龄时接种1头份（2ml）；在流行地区使用时，每头猪于10～11周龄时接种1头份，13～14周龄时再接种1头份。
种猪：以3～4周的时间间隔接种2次，此后，每隔4个月再接种1次，或在每次分娩前4～6周再接种1次。
在进行紧急接种时，对所有猪（包括母猪、公猪和仔猪）均接种1头份。
【不良反应】一般无可见的不良反应。
【注意事项】（1）仅用于接种健康猪。
（2）疫苗应避光保存，不要冷冻。
（3）使用前应使疫苗充分溶解。
（4）疫苗稀释后，应在1小时内用完。
（5）注射时，应使用灭菌注射器和针头，并采用常规无菌操作方法。
（6）用过的疫苗瓶器具和或未用完的疫苗等应进行无害化处理。
【规格】（1）10头份/瓶（2）25头份/瓶（3）50头份/瓶（4）100头份/瓶【包装】10瓶/盒【贮藏与有效期】2～8℃保存，有效期为30个月。
【《进口兽药注册证书》证号】【生产企业】西班牙海博莱生物大药厂（LABORATORIOS HIPRA, S.A.）地址：Avda. La Selva, 135. 17170—Amer (Girona) Spain电话：0034972430660 传真：0034972430061仅在兽医指导下使用（二）猪伪狂犬病活疫苗（Bartha K-61株）内包装标签喜可净猪伪狂犬病活疫苗（Bartha K-61株）10（25、50、100）头份/瓶《进口兽药注册证书》证号：批号：有效期至：【作用与用途】用于预防猪伪狂犬病。
江苏省猪伪狂犬病流行病学调查及两种疫苗免疫效果评估
72 猪业科学 SWINE INDUSTRYSCIENCE 2019 年 36 卷第 6 期
猪场兽医
VETERINARY
细 胞 培 养 液 ；将 收 获 病 毒 样 品 用 染较严重，种猪群感染率高于商品 体阳性率 95%，商品猪伪狂犬病 gE
及育肥猪严重的呼吸道问题，给我 样品、育肥猪群 896 份样品，后备
国养猪业造成了巨大的经济损 。 [1-3] 猪群 290 份样品分别检测猪伪狂犬
本实验通过间接 ELISA 方法检 病 gE、gB 抗体。
测猪群中的 gE 抗体来鉴定猪群是 1.2 试剂及仪器
否被伪狂犬病野毒感染，对猪伪狂
猪 伪 狂 犬 病 gE 抗 体 ELISA
犬病 gE 阴性场检测 gB 抗体来判定 试 剂 盒（ 西 班 牙 Hipra） 和 猪 伪
猪群的猪伪狂犬病抗体保护水平， 狂 犬 病 gB 抗 体 检 测 试 剂 盒（ 荷
由此系统调查分析江苏地区猪伪狂 兰 BioChek）均购自北京天之泰生
犬病的流行情况，并在一存栏 1 000 物 科 技 有 限 公 司 ；Eppenቤተ መጻሕፍቲ ባይዱorf 移 液
伪 狂 犬 病 是 一 种 由 伪 狂 犬 病 头左右经产母猪的猪伪狂犬病阳性
毒感染引起的多种家畜和野生动物 猪场尝试使用最新上市的变异株活
共患的急性、热性传染病，除猪以 疫苗与抗原含量最高的进口产品相
外的其他动物均呈致死性感染，猪 比控制猪伪狂犬病效果，通过检测
是伪狂犬病毒的唯一自然宿主。我 猪伪狂犬病 gE，gB 抗体及中和抗
猪伪狂犬病疫苗遭遇新毒株
猪伪狂犬病经典疫苗遭遇新毒株一种猪病，既非重大动物疫病，也非一类疫病，但它却时时牵扯着业内人士的神经。
因为，一旦感染此病，猪将终生带毒，且尚无有效治疗药物。
近年来，围绕着猪伪狂犬病防控与净化相关问题，业内一直争论不休。
2016年7月14日，广东省畜牧兽医局发布通知，就原种猪场动物疫病净化征求意见。
意见稿明确提出，自2019年1月1日起，未通过伪狂犬病净化评估的原种猪场，将被取消种畜经营资格。
由此，将近年来一直持续的猪伪狂犬病防控话题推向了高潮。
紧接着，10月中旬，在江苏南京举行的第五届李曼养猪大会上，猪伪狂犬病的相关话题也是关注的焦点。
而这一切，都缘于2011年以来的一场病变。
疾病流行印象2011年以前，我国普遍应用Bartha-K61疫苗预防猪伪狂犬病，发病率下降，总体控制较好，已有不少种猪场成为阴性场。
但2011年以来，猪伪狂犬病再度流行，波及我国生猪主产区，包括华北、华中、华东、华南和西南地区。
谈及猪伪狂犬病流行的状况，中国农业大学教授杨汉春表示。
华中农业大学动物疫病诊断中心监测显示，2011年10月份，猪伪狂犬病疫情首先从黄河以北养殖密集区域开始，从北向南蔓延开来;2012年3月～11月在华北、华中、华东形成长时间的疫情暴发流行;2013年4月开始，疫情扩散至广东、广西;2014年6月份以来，西南地区部分规模猪场伪狂犬病野毒感染率明显上升。
当时全国暴发得很严重。
河北美神种猪育种有限公司总经理陈锋剑告诉记者，他是与周边客户沟通了解到的，而且目前试剂盒依然检出猪血清呈阳性，并有临床症状。
山东信得科技公司猪药事业部总经理张征告诉记者：伪狂犬病已经严重影响生产。
前几年陆续发现，猪打疫苗后有10～20的死亡率，普通疫苗已经防不住。
浙江省千人计划特聘专家、杭州贝尔塔兽医诊断实验室李龙博士也向记者表示，当时的发病率和死亡率各有50，且发生在已免疫过的猪场。
2014年6月，就在第37届养猪产业博览会(广州)召开之际，因发现参与拍卖的种猪感染伪狂犬病野毒，主办方果断取消了拍卖活动。
猪伪狂犬病病毒的分离鉴定和比较基因组学分析
摘要伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（pseudorabies virus, PRV）引起的一种传染病，又称奥耶斯基氏病（Aujeszky’s Disease, AD），引起猪出现高热、腹泻、沉郁厌食、精神、神经紊乱等临床症状，传染性强，给畜牧业带来巨大的经济损失。
借鉴部分欧美国家成功净化伪狂犬病的经验，我国引入了Bartha-K61疫苗并广泛运用于临床，有效地控制了猪伪狂犬病。
但自2011年底始，许多免疫过疫苗的规模化猪场爆发伪狂犬病，gE抗体由阴转阳，出现由伪狂犬病毒引起所谓的“流产风暴”，对我国养猪业造成严重影响。
多数学者认为该次伪狂犬病的全国性暴发可能与病毒毒力变强、基因变异等因素有关，究其原因尚没有确定。
本实验从四川和福建疑似PRV感染的病料中成功分离4株伪狂犬病毒，分别命名为FJ01、FJ03、MS2018和YK株，滴度分别为10-6.63、10-7.08、10-8.1和10-7.18 TCID50s/0.1mL。
Balb/c小鼠毒力实验结果显示，LD50分别为102.17、102.72、103.51和103.44TCID50s，FJ01毒力最强；除YK株外，其他三株病毒均使小鼠产生严重瘙痒症状。
疫苗血清中和实验结果显示，YK毒株中和效价为1：512，显著高于FJ01、FJ03和MS2018毒株，中和效价分别为1：64，1：16，1：32。
对4个PRV毒株的主要免疫原性基因和毒力相关基因gB、gC、gE和TK进行扩增和测序，分析其核苷酸与氨基酸同源性并建立进化树，结果显示，无论在核苷酸还是氨基酸水平，FJ01、FJ03和MS2018三个毒株的gB、gC、gE和TK基因与2011年后分离的变异株（TJ、HNX 株等）同源性更高，与Fa株比对核苷酸同源性达到96.9%-100%，氨基酸同源性达到98.9%-100%，在进化关系上虽然同属于中国毒株在内的大分支，但与Fa属于不同的进化亚枝，这也在基因水平上说明变异毒株的抗原可能发生了变化；YK毒株gB、gC、gE和TK基因与Bartha株比对核苷酸同源性在98.6%-99.7%，氨基酸同源性在97.8%-99.7%，YK在进化关系上与国外毒株在同一大分支上，与Kaplan亲缘性最近。
猪伪狂犬病病毒单克隆抗体制备及特征分析
猪伪狂犬病病毒单克隆抗体制备及特征分析叶华虎1，陈建宇1,2，周小军1，王进1，代艳艳1，韩宇1，刘珩1，袁菊芳1*1军事医学科学院实验动物中心北京1000712内蒙古大学生命科学学院呼和浩特010021摘要：目的制备伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）单克隆抗体，为PVR防控奠定基础。
方法以PRV疫苗毒株Bartha-k61免疫小鼠，取免疫小鼠脾脏B淋巴细胞与SP2/0进行融合，利用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）筛选阳性杂交瘤细胞并制备腹水；再利用病毒中和实验检测单克隆抗体（腹水）对PRV的中和作用。
结果通过细胞融合，共得到11株针对PRV的杂交瘤细胞。
中和实验结果显示，无论是对于PRV弱毒株Bartha-k61还是强毒株A V25，2株杂交瘤细胞产生的腹水都表现为明显的中和效应；但两株单抗的中和能力不同，其中1株杂交瘤细胞腹水的中和效价为1:16~32，另1株的效价为1:4。
交叉反应显示，11株单克隆抗体中，2株与单纯性疱疹病毒（herpes simplex virus，HSV）存在明显的免疫反应，1株与猴B病毒的gD蛋白存在明显交叉反应。
结论成功制备了PRV的单克隆抗体，并获得了对PRV具有中和作用的单克隆抗体，以及能与其他疱疹病毒交叉反应的单克隆抗体。
1关键词：伪狂犬病病毒；单克隆抗体；中和抗体；交叉反应Preparation and characterization of monoclonal antibody against porcine pseudorabiesvirusYe Hua-hu1, Chen Jian-yu1,2, Zhou Xiao-jun1, Wang Jing1, Dai Yan-yan1,Liu Heng1, Y uan Ju-fang11 Laboratory Animal Center, Academy of Military Medical Sciences Beijing 1000712College of Life Sciences, Inner Mongolia University Hohhot 010021 Abstract:Objective In order to control the harm of pseudorabies virus (PRV), monoclonal antibodies against PRV were produced and analysis. Methods Mice were immunized with PRV Bartha-k61 strain and then its spleen B lymphocytes were separated and fused with SP2/0. The positive hybridoma cells were screened by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and used to produce ascites. The neutralizing effect of monoclonal antibodies on PRV were detected by virus neutralization experiment. Results A total of 11 hybridoma cells lines were obtained, after the treatment of cell fusion and screening. The results of virus neutralization test showed that the ascites produced by two hybridoma作者介绍：叶华虎，男（1970~），博士。
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中图分类号 ：￥ ８ ５ ２ ． ６ ５ ９ ． １
文献标志码 ：Ｂ
文章编号 ：１ ６ ７ ４ — ６ ４ ２ ２（ ２ ０ １ ７）０ ４ — ０ ０ ５ ０ — ０ ６
ＡＮＡＬＹＳ Ｉ Ｓ ０ Ｆ Ｍ ＡＪ ｏ Ｒ Ｉ Ｍ Ｍ ＵＮｏ Ｇ ＥＮＩ Ｃ ＧＥＮ ＥＳ ｏＦ ＰＳ ＥＵＤ ｏＲＡ ＢＩ ＥＳ ＶＩ ＲＵ Ｓ ＢＡＲＴＨ Ａ． Ｋ６ １ ＶＡＣＣＩ ＮＥ ＡＮＤ ＶＡＲＩ ＡＮＴ ＳＴＲＡＩ ＮＳ
ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ｖ ａ ｒ ｉ ａ ｎ ｔ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ ｉ ｎ ｏ ｒ ｄ ｅ ｒ ｔ ｏ ｃ ｏ ｍ ｐ ａ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｃ ｏ ｄ ｉ ｎ ｇ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｊ ｏ ｒ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ｇ ｅ ｎ ｉ ｃ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｓ ． Ａｓ
猪 伪狂 犬病病毒 变异株 ，在 主要 免疫原性 蛋 白之 间的差异 ，选取 了４ 个厂 家的活疫苗Ｂ ａ ｒ ｔ ｈ ａ — Ｋ６ １ 株 ，通过 二代测序 方法进行测 序 ，对Ｂ ａ ￣ ｈ ａ ． Ｋ６ １ 株ｇ Ｂ、ｇ ｃ 和ｇ Ｄ这３ 种主要免疫原性基 因以及推导 出的氨 基酸序列与 变异株之 间进行 同源性分析。结果显示 ， Ｂ ａ ￣ ｈ ａ — Ｋ６ １ 疫苗株与 变异株ｇ Ｂ 蛋 白序列 中有２ ３ 处特征 性的差异 ，同源性为９ ６ － ３ ％ ～９ ６ ． ９ ％；ｇ Ｃ 蛋 白序 列中有２ ５ 处特征性 的差异 ，
ａ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ． ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｂａ ｒ ｔ ｈ ａ — Ｋ６ １ ｖ ａ ｃ ｃ ｉ ｎ ｅ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ａ ｎ ｄ ｖ ａ ｒ ｉ ａ ｎ ｔ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ｗａ ｓ ９ ６ ＿ ３ ％ ～９ ６ ． ９ ％ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｂ ｕ ｔ ２ ３ ｄ ｉ ｆｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｉ ｎ ｇ Ｂ， ９ ２ ． ７ ％ ～９ ３ ． １ ％ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｂ ｕ ｔ ２ ５ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｉ ｎ ｇ Ｃ ａ ｎ ｄ ９ ６ ． ８ ％ ～９ ７ － ３ ％ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｂ ｕ ｔ １ ０ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｉ ｎ ｇ Ｄ， ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ ． Ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｄ ｅ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ａ ｍｉ ｎ ｏ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｏ ｆ ｇ Ｂ， ｇ Ｃ ａ ｎ ｄ ｂ ｅ ｌ ｏ ｎ ｇ ｅ ｄ ｔ ｏ ｔ ｗｏ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｅ ｖ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｒ ｙ ｂ ｒ ａ ｎ ｃ ｈ ｅ ｓ ．
杨 涛 ，张丹英 ，赵 冉 ，陈 琼
（ 厦 门市动物 疫病预 防控制 中心 ，厦 门 ３ ６ １ ０ ０ ９ ）
摘 要 ： 自２ ０ １ １ 年底 以来 ，我 国 多个省份暴发 了猪伪狂 犬病 ，一些研究 院所证 实 当前猪伪狂 犬病毒 流行株 发的保护 。为 了在 分子 生物 学水平 上比较 不 同厂 家猪 伪狂 犬病 毒Ｂ ａ ｒ ｔ ｈ ａ — Ｋ６ １ 疫 苗株 ，以及 与 ＇ ３前流行 的 －
Ｙ ＡＮ Ｇ Ｔ ａ ｏ ， Ｚ Ｈ ＡＮ Ｇ Ｄａ ｎ — ｙ ｉ ｎ ｇ ， Ｚ Ｈ ＡＯ Ｒ ａ ｎ ， Ｃ ＨＥ Ｎ Ｑｉ ｏ ｎ ｇ
（ Ｘ ｉ ａ ｍ ｅ ｎ Ｃ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ Ａ ｎ ｉ ｍ ａ ｌ Ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ Ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ａ ｎ ｄ Ｐ ｒ ｅ ｖ ｅ ｎ ｔ ｉ ｏ ｎ ， Ｘ ｉ ａ ｍ ｅ ｎ ３ ６ １ ０ ０ ９ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
中国动物 传染病学报
２ ０ １ ７ ， ２ ５ （ ４ ） ： ５ ０ — ５ ５
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ａｎ ｉ ｍａ ｌ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ Ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ
・
简报 ・
猪伪 狂犬病 毒 Ｂ ａ ｒ ｔ ｈ ａ ． Ｋ６ １ 疫 苗株和 变异株 主要 免疫原性基 因分析
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｓ ｗｉ ｎ ｅ ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｒ ａ ｂ ｉ ｅ ｓ ｈ ａ ｓ ｏ ｃ ｃ ｕ ｒ ｒ ｅ ｄ ｉ ｎ ｍａ ｎ ｙ ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ｓ ｉ ｎ Ｃｈ ｉ ｎ ａ ｓ ｉ ｎ ｃ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｎ ｄ ｏ ｆ ２ ０ １ １ ａ ｎ ｄ Ｐ ＲＶ ｖ ａ ｒ ｉ ａ ｎ ｔ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ｈ ａ ｖ ｅ ｂ ｅ ｅ ｎ ｃ ｏ ｎ ｉ ｆ ｒ ｍｅ ｄ ａ ｓ ｔ ｈ ｅ ｃ ａ ｕ ｓ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ａ ｇ ｅ ｎ ｔ ｓ ． Ｉ ｎ ａ ｄ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ｓ ｏ ｍｅ ｒ ｅ ｐ ｏ ｒ ｔ ｓ ｓ ｈ ｏ ｗｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ ｃ ｕ ｒ ｒ ｅ ｎ ｔ ｌ ｙ ｕ ｓ ｅ ｄ ｖ ａ ｃ ｃ ｉ ｎ ｅ ｓ ｄ ｉ ｄ ｎ ｏ ｔ ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｄ ｅ ｃ ｏ ｍｐ ｌ ｅ ｔ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｎ ｔ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ， ｔ ｈ ｅ ｈ ｏ ｍｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｏ ｆ ｇ Ｂ ， ｇ Ｃ ａ ｎ ｄ ｇ Ｄ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｉ ｒ ｄ ｅ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ａ ｍｉ ｎ ｏ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｏ ｆ ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｒ ａ ｂ ｉ ｅ ｓ Ｂａ ｒ ｔ ｈ ａ － Ｋ６ １ ｖ ａ ｃ ｃ ｉ ｎ ｅ
同源性 为９ ２ ． ７ ％ ～９ ３ ． １ ％；ｇ Ｄ蛋 白序列 中有 １ Ｏ 处特征性 的差异 ，同源性为９ ６ ． ８ ％～９ ７ － ３ ％；以ｇ Ｂ、ｇ Ｃ ￣ ＇ ｇ Ｄ氨基酸序 列建 立的进化
分 析 结 果 显 示 ，Ｂ ａ ￣ ｈ ａ — Ｋ６ １ 疫 苗株 与 变异 株 分 属 两 个 不 同进 化 分 支 。 关 键 词 ：猪 伪 狂 犬 病 ；Ｂ ａ ￣ ｈ ａ ． Ｋ ６ １ 株 ；免 疫 原 性 基 因